Добірка наукової літератури з теми "Superoxyde dismutase – Propriétés biochimiques"

Phytogenic feed additives have been suggested to augment nutrient utilization in the gastrointestinal tract by enhancing production of digestive secretions and enzymatic activity. Such effects on gastrointestinal morphology have been postulated to increase the nutrient digestibility in poultry. However, research on avocado—bamboo composite mix on broiler chickens are limited, this thus forms the focus of this study.A six week feeding trial was conducted to evaluate the growth, haemato-biochemical indices and antioxidants status of broiler chickens fed varying levels of composite leaf mix (CLM). The avocado and bamboo leaves used were manually harvested, air-dried and milled to produce leaf meal. The two leaf meals were then mixed in ratio 1:1 to form the CLM. The CLM was included in broiler basal diets at 0, 4, 8 and 12g/kg levels designated diets I – IV, respectively. Ninety six day-old Cobb broiler chicks were randomly allotted to four treatments of three replicates with eight chicks each. At the end of the feeding trial, the result revealed that average final weight of chicken fed diets II (2533.33±66.67g) and III (2406.55±30.59g) were similar but higher than those fed the control (2216.67±29.83g). The same pattern was observed for total weight gain. The feed conversion ratio (FCR) was not affected although birds fed diet II had the best FCR (2.08±0.06).No significant (P>0.05) difference was observed in all the haematological indices save mean cell volume and mean cell haemoglobin which was highest in birds fed 4g/kg CLM supplemented diet (149.87±24.73fL and 49.95±8.25 pg/cell, respectively) as compared to 111.32±16.56fL and 37.12±5.55pg/cell in those supplemented 12g/kg CLM. The same pattern was repeated in percentage lymph .Among the serum biochemistry parameters measured, only Aspartate transaminase was affected and highest in birds fed diet supplemented with 4g/kg CLM (102.52±5.88µ/L) and lowest in those fed 12g/kg CLM (99.33±5.13µ/L). The superoxide dismutase, catalase and Glutathione peroxidase increased with increased CLM supplementation. The growth, haematological, serum biochemical and antioxidant parameters obtained from this study suggested that the CLM has no adverse effect on the health status of broiler chickens but on the other hand improved the growth, blood serum and serum antioxidant profiles. Des additifs alimentaires phytogéniques ont été suggérés pour augmenter l'utilisation des nutriments dans le tractus gastro-intestinal en améliorant la production de sécrétions digestives et l'activité enzymatique. De tels effets sur la morphologie gastro-intestinale ontété postulés pour augmenter la digestibilité des nutriments chez la volaille. Cependant, les recherches sur le mélange composite avocat-bambou sur les poulets de chair sont limitées, c'est donc l'objet de cette étude. Un essai d'alimentation de six semaines a été mené pour évaluer la croissance, les indices hémato-biochimiques et le statut en antioxydants de poulets à griller nourris à des niveaux variables de mélange de feuilles composites (MFC). Les feuilles d'avocat et de bambou utilisées ont été récoltées manuellement, séchées à l'air et broyées pour produire de la farine de feuilles. Les deux farines de feuilles ont ensuite été mélangées dans un rapport 1:1 pour former le MFC. Le MFC a été inclus dans les régimes de base des poulets de chair à des niveaux de 0, 4, 8 et 12 g/kg désignés régimes I à IV, respectivement. Quatre-vingt-seize poussins de chair Cobb âgés d'un jour ont été répartis au hasard dans quatre traitements de trois répétitions avec huit poussins chacun. À la fin de l'essai d'alimentation, le résultat a révélé que le poids final moyen des poulets nourris avec les régimes II (2533,33 ± 66,67 g) et III (2406,55 ± 30,59 g) était similaire mais supérieur à celui des poulets nourris avec le témoin (2216,67 ± 29,83 g). La même tendance a été observée pour le gain de poids total. Le taux de conversion alimentaire (TCA) n'a pas été affecté bien que les oiseaux nourris avec le régime II aient eu le meilleur TCA (2,08 ± 0,06). Aucune différence significative (P>0,05) n'a été observée dans tous les indices hématologiques, sauf le volume cellulaire moyen et l'hémoglobine cellulaire moyenne qui le plus élevé chez les oiseaux nourris avec 4 g/kg de régime supplémenté en MFC (149,87 ± 24,73 fLet 49,95 ± 8,25 pg/cellule, respectivement) par rapport à 111,32 ± 16,56 fLet 37,12 ± 5,55 pg/cellule chez ceux supplémentés en 12 g/kg de MFC. Le même schéma a été répété en pourcentage de lymphe. Parmi les paramètres biochimiques sériques mesurés, seule l'aspartate transaminase était affectée et la plus élevée chez les oiseaux nourris avec un régime supplémenté de 4 g/kg de MFC (102,52 ± 5,88 µ/L) et la plus faible chez ceux nourris avec 12 g/kg de MFC (99,33 ± 5,13 µ/L). La superoxyde dismutase, la catalase et la glutathion peroxydase ont augmenté avec l'augmentation de la supplémentation en MFC. Les paramètres de croissance, hématologiques, biochimiques sériques et antioxydants obtenus à partir de cette étude suggèrent que le MFC n'a pas d'effet néfaste sur l'état de santé des poulets de chair mais améliore en revanche les profils de croissance, de sérum sanguin et d'antioxydants sériques.

Le déséquilibre intracellulaire entre antioxydants et pro-oxydants est impliqué dans le développement de nombreuses pathologies, comme les maladies inflammatoires chroniques intestinales-MICI. Le fait que la superoxyde dismutase à manganèse (MnSOD) soit la première ligne de défense antioxydante nous a conduit à tester le rôle des mimes de SOD comme agents anti-inflammatoire dans le contexte des MICI. Mn1 est facilement synthétisé, stable, avec une bonne activité anti-superoxyde intrinsèque et anti-inflammatoire sur des cellules épithéliales intestinales (HT29-MD2) en situation de stress oxydant. La présence de Mn1 intact (ligand+Mn2+) à l'intérieur des HT29-MD2, créées pour étudier l'inflammation intestinale est démontrée avec une stratégie en spectrométrie de masse (IMS-MS). Après 6 h d'incubation avec 100 µM Mn1 et LPS 0.1 µg/mL, Mn1 a été détecté en forme intacte avec une concentration intracellulaire estimée à 10 µM. En utilisant la stratégie OcSILAC, qui permet de quantifier simultanément l’expression des protéines et le niveau d’oxydation de cystéines de l’ensemble du protéome, nous avons démontré qu’une oxydation est induite par le LPS dès 15min (dans la fraction organelles dont la mitochondrie) et qu’elle se résout après 6h-LPS, avec une surexpression de la MnSOD (dès 3h). Quand il est coincubé avec LPS, Mn1 est capable de limiter l’oxydation totale des protéines à 15 min (70% dans les membranes/organelles) et de remplacer l’action de la MnSOD à 6h. Mn1 également rétablit en leur niveau basal la majorité des protéines sous et surexprimées par l’activation au LPS. Nos résultats démontrent ainsi le potentiel du Mn1 comme nouvel agent thérapeutique contre les MICI
The intracellular imbalance between antioxidants and pro-oxidants is involved in the development of many pathologies (like chronic inflammatory bowel diseases-IBD). The fact that manganese superoxide dismutase (MnSOD) is the first line of antioxidant defense led us to study the role of MnSOD mimics as anti-inflammatory agents in the context of IBD. Mn1 is easily synthesized, stable, with good intrinsic anti-superoxide activity and anti-inflammatory activity on intestinal epithelial cells (HT29-MD2). The presence of intact Mn1 (ligand+Mn2+) inside HT29-MD2, created to study intestinal inflammation, was demonstrated using mass spectrometry (IMSMS). After 6h of incubation with 100 µM Mn1 and with LPS 0.1 µg/mL, Mn1 was detected intact with an estimated intracellular concentration of 10 µM. Using the OcSILAC strategy, making possible to simultaneously quantify protein expression and oxidation at the proteome-wide cysteine level, it has been demonstrated that an oxidation was induced by LPS from 15min (in the organelles fraction, including mitochondria) and was resolved after 6h-LPS, with an overexpression of MnSOD (after 3h). When coincubated with LPS, Mn1 limited the total protein oxidation at 15min (70% in the membranes/organelles) and compensate for MnSOD at 6h. Mn1 also restored to their basal levels most of the proteins that were under and overexpressed upon LPS activation. Our results thus demonstrate the potential of Mn1 as a new therapeutic agent against IBD

La complexation du cu(ii) et du cu(i) par differentes series de ligands de type macrocycliques, macrobicycliques ou chaine ouverte avec 4,6 ou 8 sites de coordination azotes ou soufres a ete etudiee. Les proprietes physicochimiques des complexes ont ete examinees par differentes methodes spectroscopiques: uv-visible, rpe, rmn. Les caracteristiques electrochimiques de ces complexes ont egalement ete determinees. On met en evidence l'influence de la nature des atomes donneurs et de la taille du ligand. Ainsi, le remplacement d'un atome d'azote par un atome de soufre entraine une augmentation du potentiel redox. Des complexes binucleaires ont ete obtenus avec les deux series de ligands macrocycliques et macrobicycliques cu#2l(cu-im-cu) l et (cu-im-zn) l ou im est l'anion imidazolate. La rpe permet de bien caracteriser la geometrie de ces complexes. On met en evidence la reversibilite de l'obtention des complexes de l'entite (cu-im-cu) en fonction du ph

La première partie des travaux présentés dans ce mémoire est relative à l'analyse structure/fonction des chaperonnes à cuivre pour la Cu/Zn superoxyde dismutase (Sod1p), enzyme permettant l'élimination des radicaux superoxydes. Ces travaux ont été réalisés sur deux protéines, Lys7p de la levure Saccharomyces cerevisiae et son homologue humain Ccsp, fonctionnellement exprimé dans la levure. Les études fonctionnelles in vivo de mutants de ces chaperonnes ont montré que le motif consensuel de liaison du cuivre MxCxxC n'était pas impliqué dans le mécanisme de transfert du cuivre vers Sod1p. Nous avons mis en évidence que des résidus histidines de Ccsp, situés dans des régions peptidiques conservées entre Ccsp et Sod1p, étaient nécessaires au bon fonctionnement de la chaperonne humaine. Nous avons montré in vitro que des mutants sans histidines pouvaient lier le cuivre de façon normale, mais présentaient des défauts dans leur capacité à s'homodimériser. Dans la deuxième partie des travaux, nous avons étudié le protéome de cellules déficientes en activité Sod1p. Nous avons identifié une nouvelle forme de l'alkyl hydroperoxyde réductase 1 (Ahp1p) qui présente un point isoélectrique (pI) plus bas que la forme normale. Ce variant apparaît également lors du traitement des cellules au test-butyl hydroperoxyde. Des essais enzymatiques in vitro ont montré que Ahp1p possédait une activité spécifique diminuée dans les cellules déficientes en activité Sod1p. L'étude de mutants de Ahp1p a révélé que la protéine doit être fonctionnelle et inactivable par le substrat pour subir une modification de son pI en conditions de stress oxydant. L'inactivation de la protéine in vitro a été corrélée à sa conversion en une forme de plus bas pI. Ces résultats suggèrent que lors de stress oxydants, la cystéine catalytique de Ahp1p subit une oxydation poussée conduisant à l'apparition d'un dérivé cystéine-acide sulfinique ou sulfonique stable qui serait responsable de l'inactivation de l'enzyme.

Nous avons abordé deux aspects de l'utilisation de cycles enzymatiques: 1) en milieu structuré, un transport actif peut être généré quand les réactions constituant le cycle s'alternent dans l'espace, au sein de la structure active placée dans des conditions asymétriques. Nos modèles de transport de substrats de déshydrogénases nécessitent: le maintien d'un gradient de proton et le confinement dans la structure du cofacteur des déshydrogénases (NAD). Des études de pH-dépendance, puis de diffusion des cofacteurs et substrats des enzymes sélectionnées (alcool et sorbitol déshydrogénases) a travers des membranes commerciales, nous ont permis de tenter un transport actif d'acetyldehyde. Nous avons ensuite conçu un modèle de transport actif de sorbitol, dans lequel les cofacteurs de masse moléculaire élevée (polyacrylate de NAD) sont confinés par des films micro-poreux. Dès que certains problèmes seront résolus, ce système permettra d'extraire de nombreux substrats des déshydrogénases; 2) en milieu homogène, nous avons appliqué le cycle enzymatique faisant intervenir NADH, la péroxydase de raifort et le péroxyde d'hydrogène au dosage de cette dernière espèce, avec un seuil de sensibilité de 10 puissance -7 mol. Dm puissance -3. Nous avons montré par simulation numérique que la superoxyde dismutase, présente dans nos lots de peroxydase, permet la régénération de peroxyde d'hydrogène dans nos conditions de ph (7,5), expliquant ainsi la sensibilité obtenue. Ce procédé a été étendu par couplage enzymatique au dosage de sarcosine et de glucose