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Дисертації з теми "SAPF"
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Zhang, Yingjie. "Use of Signature-Tagged Mutagenesis to Identify the SapF Gene of Nontypeable Haemophilus Influenzae, A Gene that is Required for Survival in a Chinchilla Model of Otitis Media." The Ohio State University, 2002. http://rave.ohiolink.edu/etdc/view?acc_num=osu1407950104.
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Barbosa, Amir Horiquini. "Avaliação de fatores de virulência e sensibilidade a antissépticos bucais de espécies de Candida isoladas da saliva de pacientes com próteses bucais." Universidade de São Paulo, 2015. http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/60/60135/tde-02102015-161413/.
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As espécies de Candida são patógenos oportunistas e as infecções nas cavidades bucais causadas por este gênero são comuns em pacientes com fatores predisponentes, entre eles imussuprimidos, diabéticos e usuários de próteses dentais. No Brasil o índice de endentados é elevado sendo necessária a utilização de próteses bucais, que são locais favoráveis à colonização de microrganismos e o desenvolvimento de biofilme. A utilização de antissépticos como medida complementar na higiene oral é cada vez mais difundida. O objetivo deste trabalho foi detectar em amostras de C. albicans e C. não-albicans, isoladas da saliva de portadores de próteses bucais, os fatores de virulência, proteinase e biofilme e genes relacionados à proteinase (SAP1, SAP3) e à adesão (ALS1 e ALS3) e avaliar a atividade antifúngica in vitro de três formulações comerciais à base de clorexidina 0,12%, cetilpiridínio 0,07% e 0,075% frente aos isolados de Candida e biofilmes. Foram coletadas amostras de saliva de 70 pacientes usuários de próteses bucais. As leveduras foram isoladas em meio de CHROMagar® Candida e identificadas pela metodologia clássica e a confirmação de C. albicans por biologia molecular (PCR). Leveduras do gênero Candida foram isoladas de 32 (45,7%) amostras. Destas foram identificadas: C. albicans (29), C. krusei (5), C. glabrata (4), C. tropicalis (3) e C. parapsilosis (2), totalizando 43 leveduras entre monoculturas e culturas mistas. Os genes pesquisados foram detectados somente em amostras de C. albicans, os genes ALS2, ALS3 e SAP3 foram identificados em 86% dos isolados e o SAP1 em 93%. A atividade de proteinase entre os dos isolados de C. albicans foi de 72,4% e entre das espécies de C. não-albicans 35,7%. A de formação de biofilme sobre placas de 96 poços, e após coloração com XTT, demonstrou que a maioria dos isolados de Candida e todas as culturas mistas desenvolveram biofilmes em 24 horas. A atividade de três antissépticos frente as leveduras foi de <=1,25%, equivalente a uma diluição de 1:80 do antisséptico. Concluímos os três antissépticos também foram eficazes frente aos biofilmes de monoculturas e culturas mistas, as cepas de C. albicans continua sendo a espécie prevalente na cavidade bucal, os genes SAP1, SAP3, ALS2 e ALS3 estão presentes na maioria dos isolados de C. albicans, nestas amostras a maioria foram proteinase e biofilme positivos. A atividade de proteinase foi superior nas espécies de C. albicans em comparação com C. não-albicans. Os biofilmes das espécies de Candida quando formados em culturas mistas se desenvolvem mais em comparação com a formação de biofilme em monocultura. As três formulações de antissépticos foram eficazes contra todos isolados de leveduras em forma planctônica e na maioria dos biofilmes.Candida species are opportunistic pathogens and infections in the oral cavity caused by these yeasts are common in patients with predisposing factors, such as diabetic or immunocompromised individuals with dental prosthesis. In Brazil, the number of toothless patients is high and the use of dental prosthesis is common, which represents a niche for colonization and formation of microbial biofilms in the oral cavity. The use of mouthwashes to aid in the oral hygiene has increased. The objective of this research was to isolate C. albicans and C. non-albicans from saliva of dental prosthesis users and to evaluate the isolates for the presence of virulence factors, proteinase production, biofilm formation and to search for genes encoding for proteinases (SAP1, SAP3) and adhesion factors (ALS1 and ALS3). Another objective was to evaluate in vitro the antifungal activity of three commercial mouthwashes containing 0.12% chlorhexidine and 0.07% or 0.075% cetylpyridinium, against planktonic Candida sp. cultures and in biofilms. Saliva samples of 70 patients with dental prosthesis were collected, the yeasts were isolated on CHOMagar® Candida and identified by classical biochemical tests combined with molecular test (PCR) for confirmation of C. albicans. Yeasts of Candida genus were isolated from 32 samples (45.7%) and were identified as C. albicans (29), C. krusei (5), C. glabrata (4), C. tropicalis (3) and C. parapsilosis (2), with a total of 43 yeasts, including mono and mixed cultures. The genes studied were detected only in C. albicans: ALS2, ALS3 and SAP3 genes were detected in 86% of the isolates and SAP1 in 93%. The proteinase activity among the isolates of C. albicans was 72.4% and among the species of C. non-albicans it was 35.7%. Assay done with cultivation in 96-wells microplates and staining with XTT, showed the majority of Candida isolates and all the mixed cultures were able to form biofilms within 24h. The activity of the three mouthwashes towards the yeasts was < 1.25%, equivalent to a dilution of 1:80 of the formulation. The three mouthwashes tested were also active against mono or multispecies biofilms. In conclusion, it was shown C. albicans is the most prevalent species. The genes SAP1, SAP3, ALS2 and ALS3 are present in the majority of C. albicans isolates, which were also positive for proteinase and biofilm formation. There was more proteinase activity in C. albicans in comparison with C. non-albicans. The biofilms of Candida species grew better in mixed cultures than in monoculture. The three commercial mouthwashes formulations were effective against all the yeast isolates in planktonic growth and they also inhibited the majority of yeasts in biofilm. Future work is needed to completely elucidate the role of Candida species in biofilms of oral cavity. It is also interesting to propose studies to standardize sensitivity tests for mono and multi-species biofilms.
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Branco, Sílvia de Jesus Pereira Alegre. "SAPE." Master's thesis, [s.n.], 2011. http://hdl.handle.net/10400.26/16159.
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OLIVER, Josidel Conceição. "Análise da expressão gênica diferencial de aspartato proteases secretadas (SAP2 e SAP4) por Candida albicans exposta a concentrações subinibitórias de antifúngicos e contato com macrófagos." Universidade Federal de Alfenas, 2016. https://bdtd.unifal-mg.edu.br:8443/handle/tede/960.
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As infecções fúngicas se tornaram um grande problema de saúde pública, especialmente em ambientes hospitalares. Candida spp. são os principais patógenos em infecções fúngicas invasivas. A produção de aspartato proteases secretadas (Sapp) por Candida spp. pode estar relacionado com o aumento do número de infecções e resistência aos medicamentos. A produção de proteases é codificada por uma família de 10 genes SAP1-10, sendo SAP2 o gene mais comumente expresso em Candida albicans. A expressão de SAP4 está associada à produção de enzimas Sap4p e formação de hifas que podem contribuir para a invasão dos tecidos hospedeiros e destruição de macrófagos em processos infecciosos. Este trabalho avaliou a expressão dos genes SAP2 e SAP4 em C. albicans ATCC 10231 cultivadas na presença ou ausência de macrófagos e expostas a concentrações subinibitórias de fluconazol e anfotericina B. Candida albicans foi cultivada em ágar Sabouraud Dextrose a 37ºC por 24 h, e posteriormente em caldo carbono levedura base enriquecido com soro-albumina bovina (YCB-BSA), e na ausência ou presença de concentrações subinibitórias de fluconazol e anfotericina B. A linhagem celular monocítica humana de origem leucemia (THP-1) foi cultivada em meio RPMI-1640 suplementado com 10% de soro fetal bovino, penicilina (100 U/ml) e estreptomicina (100 μg/ml) a 37ºC, sob atmosfera de 5% de CO2 durante 10 dias. Para a indução da diferenciação das células, 106 monócitos foram cultivados em meio RPMI-1640 suplementado e forbol-12-miristato-13-acetato (PMA) 100 nM durante 48 h. Foram utilizadas amostras de 5x106 C. albicans cultivadas na presença ou ausência de 106 macrófagos e expostas ou não a concentrações subinibitórias de antifúngicos. A amostras foram cultivadas em placas de cultura celular com 6 poços por 1 h a 37 °C, sob atmosfera de 5% de CO2. O RNA total foi extraído das amostras utilizando o reagente TRIzol®, após a purificação do RNA com DNase I, este foi convertido em cDNA, e, em seguida, a quantificação do gene SAP4 foi realizada por Reação em Cadeia de Polimerase quantitativa (qPCR) utilizando ACT1 como gene normalizador. Candida albicans cultivada na presença de macrófagos apresentou regulação positiva na expressão de SAP2 e SAP4 (p < 0,01), respectivamente, na ordem de 4,83 e 10,34 vezes maior se comparada com amostras da levedura cultivada sem contato com macrófagos. E ainda, a exposição de C. albicans a concentrações subinibitórias de fluconazol aumentou a expressão de SAP2 e diminuiu a expressão de SAP4, já a exposição da levedura a concentrações subinibitórias de anfotericina B diminuiu a expressão de SAP2 e SAP4. Os genes SAP2 e SAP4 são relacionados como fatores de virulência de C. albicans e sua expressão pode ser regulada pelo contato com fagócitos ou exposição a antifúngicos. Portanto, compreender a expressão desses genes na patogênese fúngica pode ajudar na pesquisa e desenvolvimento de novos medicamentos para o tratamento da candidíase, contribuindo assim para a redução da incidência de morbidade e mortalidade associada a infecções fúngicas.Fungal infections have become a major public health problem especially in hospital settings. Candida spp. are considered the main pathogen in invasive fungal infections. The production of secreted aspartic proteinases (Sapp) by Candida spp. can be related to the increase in the number of infections and drug resistance. The production of proteinases is encoded by a family of 10 genes known as SAP1-10, of which, SAP2 is the most commonly expressed gene in Candida albicans. The expression of SAP4-6 is associated to the production of Sap4-6p enzymes and hyphae formation which can contribute to the invasion of host tissues and destruction of macrophages during infectious processes. This study evaluates SAP2 and SAP4 gene expression in C. albicans ATCC 10231 grown in the presence or absence of macrophages and exposed to subinibitory concentrations of fluconazole and amphotericin B. C. albicans was grown in Sabouraud Dextrose Agar for 24 h at 37ºC and after in yeast carbon base more 0.2% bovine serum albumin (YCB-BSA) in the absence or presence of subinibitory concentrations of Fluconazole and Amphotericin B. The human monocytic leukemia cell line (THP-1) was grown in RPMI-1640 Medium supplemented with 10% fetal bovine serum, penicillin (100U/ml) and streptomycin (100μg/ml) at 37 °C and atmosphere of 5% CO2 during 10 days. For the induction of cell differentiation, 106 cells were seeded in RPMI-1640 medium supplemented and phorbol 12-myristate 13-acetate (PMA) 100 nM for 48 h. The samples of 5x106 C. albicans were cultured in the presence or absence of 106 macrophages and these was exposed or not to subinibitory concentrations of antifungals. All samples were incubated in culture test plates with 6 flat-botton wells for 1 h at 37 °C and atmosphere of 5% CO2. Total RNA was extracted from the samples using TRIzol® reagent, after RNA purification with DNaseI it was converted to cDNA, and then, the relative quantification of the SAP4 gene was performed by Real-Time Polymerase Chain Reaction (qPCR) using ACT1 gene as normalizing endogenous gene. Candida albicans grown in the presence of macrophages showed upregulation in the expression of SAP2 and SAP4 (p < 0.01), respectively, in the order of 4.83 and 10.34 fold higher as compared to yeast samples grown without contact with macrophages. Concerning exposure to antifungal agents, C. albicans exposed to subinhibitory concentrations of amphotericin B showed downregulation in expression of SAP2 and SAP4. However, the yeast's exposure to subinhibitory concentrations of fluconazole caused upregulation in SAP2 expression and downregulation in SAP4 expression. SAP2 and SAP4 genes are related to virulence factors of C. albicans and its expression can be regulated by contact with phagocytes or exposure to antifungals. Therefore, understanding the expression of these genes in fungal pathogenesis may aid in research and development of new drugs for treating candidiasis, thus contributing to reducing the incidence of morbidity and mortality associated with fungal infections.
Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES
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Everton, Wilma. "SAPS members' experience of diversity and diversity training within the SAPS." Thesis, Rhodes University, 1999. http://hdl.handle.net/10962/d1002482.
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During this study, an attempt was made to explore the opinions and attitudes of members of the South African Police Service (SAPS) towards issues of diversity before, immediately after and three months after participating in diversity training workshops presented by the SAPS Training Division during 1997 in Port Elizabeth. The aim of this thesis was not to assess the diversity training itself, but to discover if the training, as currently presented, in any way influenced the attitudes of participants. In order to meet this goal, literature and empirical studies were conducted. The literature study sets the theoretical foundation pertaining to the history of the SAPS and the attitudes and prejudices of and diversity among SAPS members. During the empirical research phase, a non-probability purposive sampling procedure was adopted. Four of a range of diversity workshops presented by the Training Division of the SAPS during 1997 were selected for the purpose of this study. An internal SAPS process was used to nominate members to attend the workshops. The researcher requested the participants in each of the four workshops to complete a self-administered questionnaire before as well as after the workshop concerned. Immediately after each of the four workshops, a short interview was held with each attendee. To explore the stability of any change evident from responses on the questionnaires completed after the workshops, the attendees were again requested to complete the same questionnaire three months later. To increase the validity of any conclusion that attitudinal change was related to the workshop, a control group was used. This study has revealed that a cross-spectrum of SAPS members of both sexes and diverse racial backgrounds believe that various forms of discrimination exist within the SAPS. It confirmed that the diversity training presented by the SAPS Training Division is a useful instrument to heighten members' awareness of the different norms and customs of other cultural/ethnic groups and of the necessity that the SAPS should be constituted of a cross-spectrum of racial groups reflecting the South African society. Finally, based on the research findings, recommendations were made involving management and its supportive services and diversity training.
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Chovanec, Marek. "Integrace SAP Business Warehouse do ERP systému SAP." Master's thesis, Vysoké učení technické v Brně. Fakulta podnikatelská, 2020. http://www.nusl.cz/ntk/nusl-417680.
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Diploma thesis aims on integration of business intelligence solution into existing SAP environment. It contains solution proposal, detailed description of implementation steps and analysis of time sources and costs. I described the best practises in order to ensure smooth running of the system through its life cycle.
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Tavares, Carlos. "Data Warehouse & Business Intelligence SAPA: sistema de atribuição de produtos de apoio - SAPA." Master's thesis, Instituto Politécnico de Setúbal. Escola Superior de Tecnologia de Setúbal, 2017. http://hdl.handle.net/10400.26/19734.
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Trabalho de Projeto, submetido como requisito
parcial para obtenção do grau de Mestre em
Informática de Gestão.A entidade gestora do sistema de atribuição de produtos de apoio, o Instituto Nacional para Reabilitação, identificou a necessidade de possuir uma ferramenta que permita efetuar análises e extrair diversa informação estatística sobre os processos de atribuição de qualquer produto, instrumento, equipamento, tecnologia e software usado por uma pessoa com deficiência, vulgo, produtos de apoio. O presente projeto é a concretização do acima referenciado, desenvolvimento de um Data Warehouse e de relatórios, como uma ferramenta de Business Intelligence. Inicialmente foi efetuado um estudo aprofundado das regras do processo de negócio e do modelo relacional, que suporta o sistema de gestão de base de dados operacionais. Foram efetuadas várias reuniões com os representantes da entidade gestora e um estudo dos requisitos do projeto, através da criação de queries ao sistema fonte de dados. Após refinamento dos requisitos da informação estatística e conclusão da fase de análise, que inclui-o atividades como identificação de fontes, destino de dados e modelização, foi desenvolvido o Data Warehouse. Trabalho envolvendo os inerentes processos de extração, transformação e carregamento, seguido dos testes, automatização de processos e colocação em produção. O Data Warehouse, desenvolvido permitiu concretizar a implementação da infraestrutura de análise, efetuado com a ferramenta de Business Intelligence e assim atingir o objetivo final, possuir informação estatística, atualizada e precisa.
The managing body responsible for allocating disability equipment, the National Institute for Rehabilitation (Instituto Nacional para Reabilitação), has identified the need for a tool that allows the analysis and extraction of all the statistical information related to the process of granting disability equipment. In order to achieve this objective, the current project developed a Data Warehouse and reporting system using a Business Intelligence tool. The first step was to conduct an in-depth study focusing on the business process rules, and the relational model that supports the database management system. In order to determine the project’s requirements, various meetings were held with the representatives of the managing body, as well as data source queries. The Data Warehouse was created after refining the requirements of the statistical information and the completion of the analysis step, which included tasks such as source identification, data destination, and model-building. This involved the extraction, transformation and loading of the data, which was followed by testing, process automation, and the production stage. After loading the Data Warehouse, the data is organised in a way that allows the deployment of the analysis infrastructure, via the Business Intelligence tool, in order to achieve the final goal – to have updated and accurate statistical information.
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Martins, Gesley Alex Veloso 1980. "Transformações na interface : SAPO-44." [s.n.], 2005. http://repositorio.unicamp.br/jspui/handle/REPOSIP/250397.
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Orientador: Heloise de Oliveira PastoreDissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Quimica
Made available in DSpace on 2018-08-04T07:57:52Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Martins_GesleyAlexVeloso_M.pdf: 1455290 bytes, checksum: 08f03d8c3470e472f93117bab22182ac (MD5) Previous issue date: 2005
Mestrado
Quimica Inorganica
Mestre em Química
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Koziczynski, Jakob, and Márcia Hammarström. "SEGMENTATION AND CUSTOMER RELATIONSHIPS AT SAPA." Thesis, Mälardalens högskola, Industriell ekonomi och organisation, 2015. http://urn.kb.se/resolve?urn=urn:nbn:se:mdh:diva-28372.
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Splith, Tobias, Christian Chmelik, Frank Stallmach, Stefan K. Henninger, Gerrit Füldner, Panagiotis D. Kolokathis, Evangelia Pantatosaki, and George K. Papadopoulos. "Adsorptive heat transformation with SAPO-34." Universitätsbibliothek Leipzig, 2016. http://nbn-resolving.de/urn:nbn:de:bsz:15-qucosa-198701.
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Skolek, Ivo. "Integrace vybraných business procesů systému SAP CRM do systému SAP IS-U." Master's thesis, Vysoké učení technické v Brně. Fakulta informačních technologií, 2013. http://www.nusl.cz/ntk/nusl-412881.
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The gas and electricity supplier company has decided to improve their business processes by implementing the SAP CRM system. This master's thesis covers design and implementation of a communication layer in the IDE module of the SAP IS-U backend system for the purpose of integrating existing solution of particular business processes into the new SAP CRM frontend system.
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Alves, Firmino André dos Santo. "Sistema de recomendações no SAPO Campus: desenvolvimento e avaliação: estudo de caso do mecanismo implementado no SAPO Campus." Master's thesis, Universidade de Aveiro, 2013. http://hdl.handle.net/10773/12312.
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Mestrado em Comunicação MultimédiaCom o lançamento e utilização de novas ferramentas para contextos educativos que pretendem realçar a importância da comunicação e colaboração em ambientes de aprendizagem, surgem novos desafios que é necessário investigar para encontrar soluções adequadas. No caso deste estudo, procura-se compreender e encontrar soluções adequadas para a problemática da sobrecarga de informação que pode ocorrer num espaço em que todos os elementos de uma comunidade têm a possibilidade de partilhar conteúdo e comunicar entre si. Nestes contextos, é possível que a informação disponível possa atingir uma quantidade que o utilizador não tem a capacidade de assimilar na sua totalidade e, muitas vezes, originando que perca informação relevante para si. Uma possível solução para este desafio passa pela integração de sistemas de recomendação transversais a essas novas ferramentas, potenciando o seu desenvolvimento baseado no próprio utilizador e também na sua interação com a comunidade, promovendo o desenvolvimento de novas formas de partilha e de interação entre os utilizadores. Neste trabalho apresentam-se as principais etapas da conceção, desenvolvimento e avaliação da integração de um sistema de recomendações numa plataforma social para contexto educativo, o SAPO Campus.
With the advent of new educational tools for learning contexts with the purpose of highlighting the importance of communication and collaboration in learning environments, new challenges should be taken into account in order to discover proper solutions. With this investigation, we seek to understand and find a suitable approach to the information overload problem that can occur in places where all community members have the ability to communicate and share content. It is possible, in these contexts, for the available information to reach such an amount that the user will not have the ability to fully assimilate it, which often causes the loss of the track of data, which is importante to the user. A possible solution for this challenge implies the integration of transverse recommendation systems in these tools, enhancing their growth based on the user and his interaction with the community and promoting the emergence of new methods for him to share and interact with others. This study presents the main steps of the design, development and assessment of the process for integrating a recommendation system in SAPO Campus, a social platform for the educational context.
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Třeštíková, Lenka. "Bezpečnostní metriky platformy SAP." Master's thesis, Vysoké učení technické v Brně. Fakulta informačních technologií, 2017. http://www.nusl.cz/ntk/nusl-363799.
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Main goal of this thesis is analyzing potential security risks of the SAP NetWeaver platform and identifying various vulnerabilities, that are results of poor system configuration, incorrect segregation of duties or insufficient patch management. Methodology for platform evaluation is defined by vulnerabilities, security requirements and controls will be created.
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Vaculíková, Michaela. "Marketingová strategie společnosti SAP." Master's thesis, Vysoká škola ekonomická v Praze, 2010. http://www.nusl.cz/ntk/nusl-71886.
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The thesis deals with marketing strategy of SAP, important software company in B2B market. Goal of this thesis is to use theoretical knowledge to describe and analyse marketing strategy of SAP and at the same time to analyse efectivity of database marketing team. Database marketing team is one of the most important things that lead to successful marketing strategy and this thesis will propose possible solutions to discovered shortcomings of this team. The thesis contains not only theoretical information about international marketing strategy but it shows real marketing strategy of SAP and its evaluation. It also describes and analyses meaning of the database marketing team and makes suggestions to improve its functioning.
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Vaníková, Zuzana. "Společenská odpovědnost firmy SAP." Master's thesis, Vysoká škola ekonomická v Praze, 2015. http://www.nusl.cz/ntk/nusl-261760.
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The thesis deals with corporate social responsibility. The subject of investigation is the CSR strategy of the chosen company. The theoretical part describes the corporate social responsibility from a historical and a current perspective. Above all, the thesis puts emphasis on the social pillar, namely the activities of the company in relation to its stakeholders, particularly employees and volunteering. Volunteering is an important part of corporate social responsibility. The questionnaire and subsequently its statistical evaluation answers the question whether the students currently studying in two economic universities consider SAP as a responsible company and how they relate to volunteerism.
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McCarthy, Charlton Shamus. "Strategies for promoting ethics within the SAPS." Thesis, Nelson Mandela Metropolitan University, 2014. http://hdl.handle.net/10948/8553.
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Corruption and unethical management is a legitimate global concern as it can have a direct and substantial impact on the longevity and the success of an organisation, and a country. As a result much attention has been given to unethical behavior and organisational ethical violations over the last decade. Recent events have indicated that ethics management is an organisational concern with mammoth implications for organisations. The aim of this study was to investigate the development of strategies for the promotion of ethics and the impact of unethical conduct on an organisation. A direct link exists between employee behaviour and the organisational environment. The desired ethical environment is negatively affected if the employees cannot distinguish between right and wrong and do not act ethically when confronted with ethical dilemmas. Proposed ethics strategies may also be impacted on by the unethical behaviour of the leadership of organisations, compliance with legislation and poorly managed ethics strategies. The main research problem in this study was to identify what strategies could be adopted to create an ethical culture within an organisation. To achieve this objective a model was developed, proposed and supported with literature and the research study. A research questionnaire was designed to obtain the relevant data that was distributed to previously identified respondents. The results indicated that the majority employees were of the view that the organisational environment and leadership was not ethical and that the majority of employees were not actively pursuing an ethical environment. Findings indicated that the majority of employees felt that contributing factors to achieve an ethical environment was present, but ethic strategies were ineffective and poorly managed. The proposed study model, when implemented successfully, would allow the organisation the effective application of ethic interventions.
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Duxbury, Neil. "Object-oriented inter-schema translations using SAIF." Thesis, National Library of Canada = Bibliothèque nationale du Canada, 1998. http://www.collectionscanada.ca/obj/s4/f2/dsk2/ftp03/MQ38371.pdf.
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Koch-Grünberg, Tim Theodor. "Gameful connectivism: social bookmarking no SAPO Campus." Master's thesis, Universidade de Aveiro, 2011. http://hdl.handle.net/10773/7506.
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Mestrado em Comunicação MultimédiaA web moderna, ou web 2.0, assenta nos princípios de abertura e participação dos seus utilizadores. A natureza voluntária do uso de serviços da web 2.0, aliada à dependência da participação por parte dos seus utilizadores, leva a uma forte concorrência entre serviços semelhantes na web. Esta concorrência leva à procura de novas formas de diferenciação entre serviços. Neste contexto surge a indústria de gamification, que procura transferir elementos de videojogos a outros contextos para aumentar o envolvimento dos utilizadores. Contudo, o discurso desta indústria recente é alvo de fortes críticas de profissionais de game design. Neste trabalho de investigação apresenta-se tanto o discurso da indústria de gamification como as suas críticas. Assumindo que a abordagem atual da gamification assenta numa compreensão limitada dos videojogos, parte-se para a elaboração de um novo quadro concetual que possa guiar o desenho da interação em ambientes web. Esta abordagem fundamenta-se num levantamento bibliográfico da teoria do game design. O quadro concetual resultante é usado no desenho e desenvolvimento de um serviço de social bookmarking no Sapo Campus UA, uma plataforma de serviços web 2.0 para contextos educativos, com o objetivo explícito de aumentar a participação dos seus utilizadores na aplicação. A utilidade do quadro concetual é avaliada com sessões de teste com utilizadores do público-alvo do serviço. Os resultados obtidos indicam que o game design pode enriquecer o desenho da interação na web através da criação de ciclos de ação com resultado claro e feedback positivo.
The modern web, or web 2.0, is centred on the principles of openness and user participation. The voluntary use of web 2.0 services, together with the dependency on user participation, results in a strong competition. This situation gave rise to the gamification industry, which aims to bring elements of video games to other contexts in order to increase user engagement. However, professional game designers strongly criticize the discourse of this young industry. This dissertation presents the gamification industry's discourse and its major critics. Assuming that the current approach to gamification only holds a limited understanding of videogames, we seek to build a new conceptual model to be used in web interaction design. This approach is based in a review of game design literature. The resulting conceptual model is used in the design and development of a social bookmarking service for the Sapo Campus UA project, a web 2.0 platform for higher education, with the specific goal of increasing user participation. The modelʼs usefulness is evaluated through user tests with potential future users. The results of this study indicate that game design can assist web interaction design in the creation of user activity cycles with clear results and positive feedback.
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Zegeer, A., and J. Coons. "Cytokinin Applications to Salf-stressed Chili Peppers." College of Agriculture, University of Arizona (Tucson, AZ), 1988. http://hdl.handle.net/10150/214159.
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Alves, Ceres Luciana. "Estudo comparativo da ação da saliva de triatomíneos (Heteroptera: Reduviidae) e do predador Belostoma anurum (Heteroptera: Belostomatidae) sobre as preparações de nervo isolado de Rattus novergicus e de vaso dorsal de Rhodnius prolixus." Universidade Federal de Minas Gerais, 2007. http://hdl.handle.net/1843/SAGF-765K4Z.
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Realizou-se um estudo comparativo da ação da saliva de triatomíneos (Triatoma infestans e Panstrongylus megistus) e do predador Belostoma anurum sobre o potencial de ação composto (PAC) de nervo ciático isolado Rattus novergicus e sobre a pulsação do vaso dorsal de Rhodnius prolixus. A saliva de P. megistus inibiu a amplitude do PAC do nervo isolado de rato de forma gradual e reversível. A saliva de T. infestans também inibiu de forma gradual a amplitude do PAC, porém de forma irreversível. Já a saliva de B. anurum, além de reduzir a amplitude do PAC, também interferiu nas fases de repolarização e duração. Quando a saliva das espécies T. infestans, P. megistus e B. anurum foi semipurificada houve uma ação inibitória de forma gradual e reversível sobre a amplitude do PAC, sem alterar as fases de repolarização e duração. Este fato sugere que as moléculas com atividade sobre o PAC, presentes na saliva destes heterópteros, são termo-resistentes e apresentam baixo peso molecular (< 5kDa). Caracterização complementar (extração de lipídeos) sugere que as moléculas bioativas de T. infestans e de B. anurum não são de natureza lipídica. A incubação da saliva semipurificada de B. anurum com protease inespecífica (proteinase K) não inibiu a atividade sobre o PAC, sugerindo uma natureza não protéica da molécula bioativa. Quando testadas sobre a preparação de vaso dorsal isolado de Rhodnius prolixus, a saliva bruta de P. megistus e a semipurificada de B. anurum produziram parada imediata dos batimentos, de forma reversível. Considerando estes parâmetros, é possível que a atividade paralisante presente na saliva dos heterópteros predadores e a atividade anestésica-like encontrada na saliva dos triatomíneos compartilhem as mesmas biomoléculas, que aparentemente vêm sendo mantidas na saliva desses insetos ao longo do processo de evolução. Entretanto, somente a caracterização molecular do componente responsável por estas atividades poderá confirmar definitivamente esta hipótese.
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Roque, Rosemary Aparecida. "Avaliação de atraentes de oviposição, identificados em infusões de capim colonião (Panicum maximum) para fêmeas de Aedes aegypti (L. 1762) (Diptera: Culicidae) em condições de semicampo e campo." Universidade Federal de Minas Gerais, 2007. http://hdl.handle.net/1843/SAGF-765L57.
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RESUMO
O mosquito Aedes aegypti é o transmissor da dengue e da febre amarela urbana no Brasil.
O monitoramento do vetor pode ser feito por meio de armadilhas associadas a atraentes específicos. A armadilha para captura de adultos, MosquiTRAP é uma nova ferramenta que está sendo utilizada no monitoramento do A. aegypti em área urbana, enquanto que o AtrAedes é um atraente sintético de oviposição, especifico para fêmeas grávidas. O nonanal, decanal, p-cresol, 3-metil indol, benzotiazol e indol foram identificados em infusões de capim colonião (Panicum maximum) e demonstraram atratividade para as fêmeas de A. aegypti em armadilhas de oviposição (ovitrampa) no campo. No entanto, a associação de dois ou mais compostos sintéticos ainda não foi avaliada, o que poderia aumentar a eficiência desta armadilha. Os objetivos deste trabalho foram (1) avaliar uma área experimental (semicampo) construída para a realização dos testes de comportamento de oviposição do A. aegypti. (2) comparar a eficiência do AtrAedes® com infusões de capim colonião de diferentes períodos de fermentação; (3) avaliar a atratitividade do nonanal, decanal, benzotiazol, indol, p-cresol e 3-metil indol para fêmeas grávidas de A. aegypti (5) desenvolver e avaliar formulações binárias e terciárias dos candidatos a atraentes em condições de semicampo e campo. Os experimentos foram realizados em uma área experimental (14 x 7 x 3,5m) contendo oito gaiolas de teste (2,5 x 2,5 x 2,0m). Vinte fêmeas por armadilha, com idade cronológica de 10 a 20 dias e 3 a 4 dias após repasto sanguíneo foram liberadas no interior de cada gaiola. Armadilhas MosquiTRAP foram utilizadas em todos os experimentos, enquanto que AtrAedes® foi usado como controle. Os testes de campo foram realizados em três áreas do Campus Pampulha da UFMG. Os resultados demonstraram que (1) A metodologia de semicampo pode ser utilizada para avaliação de protótipos de armadilhas, desenvolvimento de atraentes e na avaliação de liberadores de odor; (2) O AtrAedes pode ser utilizado como isca nas MosquiTRAPem substituição ao atraente natural (infusão de capim colonião) e (3) A mistura binária (AtrAedes + decanal) e terciária (AtrAedes + decanal + 3-metil indol ou P-cresol) aumentaram significativamente a captura de fêmeas grávidas de A. aegypti e conseqüentemente a eficiência da MosquiTRAP.
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Brandao, Geane Peroni. "Avaliação da reinfecção de camundongos BALB/c e C57BL/6 com cepas de Toxoplasma gondii isoladas no Brasil." Universidade Federal de Minas Gerais, 2008. http://hdl.handle.net/1843/SAGF-8HTN7B.
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No presente trabalho foi estudado a reinfecção de camundongos BALB/c e C57BL/6 pelo Toxoplasma gondii. Para determinar se o genótipo das cepas pode modificar o padrão de proteção, a primo infecção e o desafio foram realizados utilizando diferentes cepas recombinantes tipo I-III de T. gondii. Os camundongos foram primo infectados com a cepa D8, não virulenta, e desafiados após 45 ou 180 dias da primo infecção com as cepas EGS, CH3 e N, recombinantes tipo I-III. Após trinta dias do desafio, os cistos cerebrais obtidos dos camundongos sobreviventes foram inoculados em camundongos BALB/c ou C57BL/6 para a realização do bioensaio e em camundongos swiss para induzir uma infecção aguda e replicação dos taquizoítos que foram obtidos pela lavagem do peritônio. As amostras de DNA purificadas dos taquizoítos foram submetidas à PCR-RFLP utilizando os marcadores cS10-A6 e L363 para distinguir diferentes cepas de T. gondii em possíveis coinfecções. A resposta imune anti-T. gondii foi avaliada por meio da dosagem de IFN- e IL-10 em sobrenadantes de culturas de esplenócitos obtidos de camundongos BALB/c e C57BL/6, 45 e 180 dias após a primo infecção e estimulados in vitro com antígeno de T. gondii. No plasma destes animais foram dosados os níveis de IgG total, IgG1, IgG2a, IgM e IgA. A PCR-RFLP demonstrou que 45 dias após a primo infecção com a cepa D8 a reinfecção ocorreu em camundongos BALB/c desafiados com as cepas EGS e N ou EGS, CH3 e N aos 180 dias da primo infecção. Os camundongos C57BL/6 se reinfectaram com as cepas EGS, CH3 e N aos 45 e 180 dias após a primo infecção. Em camundongos BALB/c foram detectados altos níveis de IFN- após a infecção com D8, sem diferença significativa entre 45 e 180 dias. Entretanto, foram observados níveis significativamente maiores de IL-10 na cultura de esplenócitos e de IgG1 e IgA plasmáticos quando foram testadas as amostras obtidas aos 180 dias de infecção. Os níveis de IFN- após infecção com D8 foram mais baixos em camundongos C57BL/6 que em camundongos BALB/c. Em camundongos C57BL/6 foram observados níveis plasmáticos maiores de IgG1 e IgG2a quando testadas as amostras obtidas aos 180 dias da primo infecção em comparação às amostras obtidas aos 45 dias. Em conclusão, camundongos BALB/c e C57BL/6 são susceptíveis a reinfecção com diferentes cepas de T. gondii e a susceptibilidade de camundongos BALB/c se correlaciona com o aumento da produção de IL-10. Foi demonstrado que a reinfecção pelo T. gondii depende da linhagem de camundongo, do tempo de infecção e do genótipo da cepa utilizada no desafio.
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Silva, Camilo Adalton Mariano da. "Estado nutricional, consumo alimentar, anemia ferropriva, deficiência de zinco e doenças parasitárias em crianças de 6 a 71 meses em Berilo, Minas Gerais." Universidade Federal de Minas Gerais, 2007. http://hdl.handle.net/1843/SAGF-75LMA9.
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Resumo
Estudo de base populacional realizado em Berilo, Vale do Jequitinhonha, Minas Gerais, com o objetivo de identificar o hábito alimentar, o consumo de ferro e zinco dietéticos, a prevalência de desnutrição, de anemia ferropriva e o nível sério de zinco entre crianças de 6 a 71 meses(n=401). A investigação se deu através de um estudo transversal híbrido, com duração de quatro semanas, ocorrido em julho/agosto de 2004. Para a caracterização da população foi aplicado um questionário de freqüências, alimentar que incluiu um conjunto de variáveis socioeconômicas, demográficas, de saúde e cuidados infantis. A desnutrição foi avaliada por meio da antropometria, utilizando os indicadores peso/idade, peso/estrutura e estrutura/idade. O padrão antropométrico utilizado foi o do CDC e para avaliação do estado nutricional foi utilizada a distribuição dos índices em escores-z, sendo considerada desnutrida a criança classificada abaixo de -2desvios padrões. A anemia foi mensurada através do microhematócrito. Para a análise dos fatores determinantes dos desfechos, foi utilizada a regressão logística multivariada,.O consumo habitual se caracterizou como monótono e o consumo calórico baseou-se principalmente em alimentos de origem lipídica e de carboidratos. A inadequação do consumo dietético de ferro foi de 6,9% e de zinco de 17,2%. Os déficits encontrados, segundo os indicadores Peso/Idade, Peso/Estrutura e estrututa/Idade foram, respectivamente: 8,1%, 6,1% e 4,5%,tendo a desnutrição se associado significativamente somente com a idade materna. As crianças filhas de mães com menos de 20 anos tiveram um risco de desenvolver desnutrição crônica 6, 7 vezes maior do que aquelas filhas de mães com 20 anos ou mais.A anemia apresentou prevalência de 45,6%, considerada grave segundo a OMS. Os fatores de risco foram: grupo etário infantil, tipo de abastecimento de água e infecção parasitária.Nestes casos, as crianças do grupo etário de 6 a 23 meses tiveram um risco 1,8 vezes maior de anemia do que as pertencentes ao grupo etário de 24 a 71 meses; aquelas que residiam em casas não ligadas à rede geral de abastecimento de água obtiveram um risco de 1,7 de terem anemia.E as que tiveram resultados positivos para o exame de fezes apresentaram um risco de desenvolvimento de anemia 2,2 vezes maior do que as que não estavam infectadas. Em relação à deficiência de zinco sérico a prevalência foi de 64,2% e este desfecho se associou somente com a infecção parasitária, produzindo um risco 3,7 vezes maior entre crianças com infecção quando comparadas àquelas sem infecção. Diante dos resultados obtidos nesta população ficou evidente a existência de associações significativas com fatores ambientais e demográficos na determinação das morbidades estudadas. A disponibilização dessas informações poderá subsidir discussões tanto com a comunidade quanto com pessoal técnico da Prefeitura e das entidades civis filantrópicas, no sentido do desenvolvimento de ações que possam atuar sobre os fatores determinantes dessas morbidades. Do ponto de vista social e de desenvolvimento, esta fase e seus desdobramentos constituem uma contribuição da Universidade Pública, desempenhando o seu papel de agente promotor de conhecimento. Comprometida com a situação de vida, saúde nutrição e alimentação da população brasileira, especialmente em municípios e regiões mais carentes do país.
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Saraiva, Lara. "Estudos da fauna flebotomínica (Diptera: Psychodidae: Phlebotominae), sua infecção natural por Leishmania spp. e aspectos biogeográficos da leishmaniose visceral, na Regional Nordeste do Município de Belo Horizonte, Minas Gerais Brasil." Universidade Federal de Minas Gerais, 2008. http://hdl.handle.net/1843/SAGF-7FBHNF.
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Resumo
Nos últimos vinte anos, ocorreu um aumento no número de casos humanos de todas as formas de leishmaniose no mundo, sendo estas emergentes em algumas áreas, e reermegentes em outras. No Brasil, as ações de controle da leishmaniose visceral (LV) mostram-se ineficazes, mesmo em municípios com um ofensivo programa de eliminação de cães sorologicamente positivos e borrifação de inseticidas. Belo Horizonte é hoje o município brasileiro com alta densidade populacional, que mais sofre com a ocorrência de LV. De 1994 a 2007 foram registrados 891 casos humanos, com 22 óbitos, nos três últimos anos e altas taxas de prevalência canina. Neste município, a Regional Nordeste é prioritária para estudos de leishmanioses, por apresentar a maior média histórica de casos humanos de LV. Nosso trabalho teve os seguintes objetivos: estudar o padrão de flutuação sazonal das espécies de flebotomíneos; caracterizar as espécies de Leishmania presentes nos mesmos; descrever as situações ambientais de ocorrência de LV, utilizando análise por geoprocessamento e caracterização ambiental.
Coletas quinzenais sistematizadas foram realizadas com armadilhas luminosas HP, em 15 pontos da Regional, seguindo a localização de casos humanos de LV em 2005. O período de coletas compreendeu o intervalo entre julho de 2006 a junho de 2007. Coletas não sistematizadas foram feitas com armadilha luminosa de Shannon em locais onde foram encontrados flebotomíneos infectados. As fêmeas foram submetidas à extração de DNA e a reações de PCR para averiguar a infecção natural por Leishmania sp., e identificação das espécies do parasito. Foi efetuada a caracterização ambiental de todos os locais de estudo através de uma ficha e fotografias. Além disso, foi executada a análise por geoprocessamento quando os mapas temáticos da Regional Nordeste representativos das áreas de vegetação, de vilas e aglomerados urbanos, altitude e áreas de influência dos cursos de água a céu aberto foram analisados conjuntamente com os mapas de distribuição dos vetores de Leishmania, dos casos humanos de LV e casos caninos de leishmaniose.
Foram coletados 633 espécimes de flebotomíneos pertencentes a nove espécies todas do gênero Lutzomyia. As espécies mais prevalentes foram L.whitmani (75%) e L.longipalpis (11%), perfazendo juntas 85% do total de espécimes coletados. As taxas de infecção natural encontradas foram: L. longipalpis 19%, L. whitmani 3,8% e L. termitophila 33,3% todas para a espécie L. chagasi. Para fêmeas do complexo cortellezzi as taxas foram de 3,2% para L. braziliensis e 3,2% Leishmania sp.. L. intermedia apresentou 14,3% de positividade para Leishmania sp. A maioria dos lotes estudados apresentou cuidado inadequado, sendo que esses mantinham condições propícias ao desenvolvimento de flebotomíneos. Nenhum dos fatores biogeográficos analisados apresentou forte influência na ocorrência de casos humanos e caninos de leishmaniose na Regional Nordeste. Quanto aos flebotomíneos, apenas a vegetação mostrou influência na sua distribuição, especialmente, nos locais de maior média de ocorrências desses insetos. Tanto os casos humanos como os caninos de leishmaniose concentram-se em áreas de médias baixas de ocorrência de flebotomíneos. Nossos dados confirmam a urbanização de L. longipalpis e apontam para a urbanização de L. whitmani. Além disso, podemos afirmar que há importante circulação de L. chagasi na Regional, visto que mesmo espécies que nunca foram encontradas infectadas apresentaram infecção natural por L. chagasi. As análises biogeográficas mostram que os quintais podem ter grande importância na manutenção dos flebotomíneos em áreas urbanas e também apontam para um novo perfil de ocorrência da LV, uma vez que os fatores classicamente relacionados a ela, não apresentaram influência sobre a LV no período e locais de estudo.
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Valim, Michel Paiva. "Sistemática e análise cladística das espécies do gênero Gyropus Nitzsch (Phthiraptera, Amblycera, Gyropidae)." Universidade Federal de Minas Gerais, 2010. http://hdl.handle.net/1843/SAGF-8HCP2G.
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Este trabalho avalia as relações de parentesco entre as espécies e status taxonômico do gênero Gyropus Nitzsch, 1818 (Amblycera: Gyropidae). Todas as espécies desse gênero possuem distribuição neotropical, ocorrendo da Nicarágua ao extremo sul da Argentina. Historicamente a sua classificação é um tanto conturbada, visto que há propostas para separação em diferentes gêneros que foram sumariamente rejeitados baseados em opiniões subjetivas. A primeira parte deste trabalho é um catálogo taxonômico completo, preparado para embasar a revisão de literatura sobre o assunto. Através de revisão taxonômica, buscou-se reconhecer os táxons pertencentes a esse gênero e avaliar as possíveis variabilidades intraespecíficas. A revisão teve ênfase na localização do material tipo e espécimes adicionais para todas as espécies. A partir da obtenção de material adicional, alguns estágios de desenvolvimento (ovos e ninfas I, II e III) de algumas espécies puderam ser pela primeira vez conhecidos, como: NI-NIII de G. cruzi, G. distinctus, G. longus, G. martini iheringi, G. lenti lenti, G. ovalis e G. persetosus; NII-NIII de G. setifer, G. lineatus e G. limai; ovos de G. lenti lenti e G. limai. Dados morfométricos foram incluídos nas descrições dos imaturos e a partir deles, índices de crescimento (índice de Brooks-Dyar e Crosby) foram pela primeira vez calculados para espécies de Gyropidae. Com o estudo desses imaturos, as ninfas de espécies de Phthiraptera puderam ser pela primeira vez sexadas desde a sua primeira fase, através de caráter quetotáxico. Após revisão, todas as espécies estudadas foram redesenhadas e remensuradas para os padrões atuais de estudo do grupo e, com isso, uma nova sinonímia foi encontrada: Gyropus mesoamericanus sin. nov. de G. setifer. Duas novas espécies serão descritas: Gyropus sp. nov. sobre Proechimys trinitatis de Trinidad e Tobago; e Eogyropus sp. nov. sobre Clyomys laticeps do Paraguai, ambos hospedeiros da família Echimyidae. Assim, foram analisadas 34 espécies, sendo 28 espécies de Gyropus, das quais duas novas espécies como grupo interno e 6 táxons como grupos externos (1 Trimenoponidae, 1 Protogyropinae e 4 Gyropinae). A hipótese filogenética baseada em 98 caracteres morfológicos resultou em 4 cladogramas igualmente parcimoniosos (comprimento=271; IC=52; IR=79). A monofilia de Gyropus foi fracamente suportada pela análise. Os resultados também suportam grupos monofiléticos, o que implicou na utilização de alguns nomes genéricos já publicados, como: Eogyropus Eichler (tipo G. lenti), Monogyropus Ewing (tipo G. longus) e Tetragyropus Ewing (tipo G. lineatus). Outros grupos, também bem suportados e sem nomes propostos serão tratados, como gêneros não nomeados, como grupos de espécies de Gyropus s.l. Uma espécie foi combinada em um outro gênero, Monogyropus pearsoni comb. nov. As associações entre espécies de Gyropus s.l. e seus hospedeiros sugerem processos de larga co-acomodação para os grupos ovalis e parvus; estreita co-acomodação para Eogyropus e co-especiação para Monogyropus, Tetragyropus e grupos cruzi, martini, parasetosus e ribeiroi. O grupo thompsoni apresentou associações do tipo larga co-acomodação e co-especiação. Uma chave é apresentada para separação dos gêneros de Gyropidae, bem como para as espécies de Gyropus s.l. tratadas nesta tese.
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Coelho, Leonardo Hoffmann Leao. "Dinâmica de populações de Lymnaea columella e sua taxa de infecção natural por Fasciola hepática: influência na epidemiologia de fasciolose no município de Itajubá, MG." Universidade Federal de Minas Gerais, 2007. http://hdl.handle.net/1843/SAGF-7AXKRQ.
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No período de maio de 2003 a abril de 2006, foram pesquisadas a dinâmica de populações de Lymnaea columella e sua taxa de infecção natural por Fasciola hepatica em uma várzea no município de Itajubá, Minas Gerais. Uma criação do molusco foi estabelecida no laboratório a partir de posturas dos espécimes coletados, visando a manutenção do ciclo do parasito e a realização de infecções experimentais. Testes de suscetibilidade foram realizados para verificar a influência de diversos fatores: o efeito da variação do tamanho da concha, do número de miracídios utilizados para a infecção, a eficiência de associações simpátricas e alopátricas do helminto com o hospedeiro intermediário, a suscetibilidade de moluscos provenientes de cinco localidades diferentes (Itajubá, MG, Jaboticatubas, MG, Rio Doce, MG, Pelotas, Rio Grande do Sul, e Fortaleza, CE) e a suscetibilidade de moluscos expostos a miracídios obtidos a partir de ovos provenientes de hospedeiros bovinos e coelhos. Foi verificado se o molusco Physa marmorata proveniente de Itajubá se infecta experimentalmente com F. hepatica. Foi observado um padrão na variação de populações de L. columella. As populações mostraram um aumento entre os meses de junho e outubro, e uma diminuição nos meses seguintes. A taxa média de infecção natural de L. columella com F. hepatica foi de 1,7%, sendo que o mês de maior prevalência foi dezembro de 2004 (18,8%). Moluscos com menor tamanho de concha apresentaram maior suscetibilidade à infecção por F. hepatica. Não foi observada uma relação entre o número de miracídios e o sucesso da infecção, utilizando-se de 1 a 4 miracídios. Foram encontradas diferenças entre as suscetibilidades de moluscos provenientes de diversas localidades, sendo que os moluscos de Jaboticatubas, MG, apresentaram a maior suscetibilidade entre os moluscos testados, e os moluscos de Pelotas, RS, a menor. Associações alopátricas foram mais eficientes em moluscos de Pelotas, mas menos eficientes nos de Itajubá. Não foram encontradas formas larvárias de F. hepatica nos espécimes de P. marmorata expostos a miracídios do trematódeo. O ciclo da Fasciola hepatica foi fechado em laboratório em coelhos. Os moluscos infectados com miracídios provenientes de hospedeiros bovinos apresentaram maior número de positivos que os infectados com miracídios provenientes de coelhos, mas a média do número de cercarias e rédias obtida foi menor.
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Rocha, Fernanda Faria. "Cultivo primário da glândula salivar, canal salivar e intestino médio anterior de triatomíneos (Hemiptera, Reduviidae) para o estudo de moléculas bioativas relacionadas com a hematofagia." Universidade Federal de Minas Gerais, 2010. http://hdl.handle.net/1843/SAGF-8ACMSC.
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Triatomíneos são insetos hematófagos vetores do Trypanosoma rangeli e do T. cruzi. A capacidade vetorial dos triatomíneos em hospedeiro humano está diretamente relacionada à sua performance alimentar. O objetivo deste trabalho foi obter e padronizar cultivo primário de glândula salivar, canal salivar e intestino médio anterior de triatomíneos para o estudo de moléculas bioativas relacionadas com a hematofagia. As células de glândula salivar de Rhodnius prolixus permaneceram viáveis em cultura por 30 dias. Três tipos de células foram identificados nas culturas de glândula salivar ao MO: o tipo I com células alongadas e fusiformes, o tipo II globosas e com dois núcleos evidentes e o tipo III globosas e uninucleadas. As células do tipo II foram as mais abundantes independentemente da idade do cultivo. O material secretado (MS) das culturas de glândula salivar apresentou as atividades anticoagulante e apirásica e uma maior concentração de bandas na faixa de 15-25 kDa. No cultivo de canal salivar de R. prolixus foram observadas apenas células uninucleares que se apresentaram aderidas ao ducto salivar, formando uma camada única de células justapostas. A partir do terceiro dia de cultivo foram observados grânulos de secreção se formando ao redor das células do canal, indicando que as células estavam metabolicamente ativas e sugerem que o canal salivar possui outras funções além de simplesmente conduzir a saliva em direção as peças bucais do inseto. Entretanto, não foi evidenciada atividade anticoagulante e apirásica no MS do cultivo de canal salivar. Já os cultivos de intestino médio anterior de Triatoma brasiliensis e de T. infestans, ao MO, apresentaram células globosas, geralmente agrupadas. No interior destas células verificou-se a presença de vesículas, sugerindo produção de biomoléculas. No MS dos cultivos intestinais detectou-se as atividades anticoagulante e lisozímica. A adição de ecdisona nos cultivos intestinais de T. infestans alterou o perfil protéico e de atividade anticoagulante em relação ao controle (sem adição de hormônio), sugerindo uma ação inibidora sobre a produção de biomoléculas intestinais. Já a adição de serotonina aparentemente não alterou o perfil protéico e nem das atividades anticoagulante e lisozímica. Entretanto, o teste de viabilidade detectou que a maioria das células intestinais de T. brasiliensis e T. infestans encontraram-se mortas no oitavo dia de cultivo. A curta sobrevida do intestino médio anterior nas condições de cultivo utilizadas no presente trabalho provavelmente dificultou o estudo da influência hormonal sobre a atividade das células intestinais. Nossos resultados demonstraram que é possível obter cultura primária de glândula salivar, canal salivar e intestino médio anterior de triatomíneos para o estudo de biomoléculas in vitro.
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Vasconcelos, Viviane de Oliveira. "Identificação e purificação de proteínas de Angiostrongylus vasorum (Baillet, 1886) e avaliação da resposta humoral em cães com angiostrongilose." Universidade Federal de Minas Gerais, 2007. http://hdl.handle.net/1843/SAGF-769P79.
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Resumo
Angiostrongylus vasorum é um nematóide parasito cujas formas adultas podem ser encontradas no sistema circulatório de cães domésticos e canídeos silvestre s. Cães infectados por A. vasorum podem apresentar diversas manifestações clínicas podendo levar o animal ao óbito. Os testes padronizados para o diagnóstico sorológico utilizando antígeno bruto de parasito adulto de A. vasorum não são considerados ideais. A identificação e purificação de proteínas espécie-específica é de grande importância para obter maiores índices de sensibilidade e especificidade nos testes de diagnóstico. Neste estudo foram utilizadas amostras de soro de 20 cães infectados experimentalmente com larvas de terceiro estádio (L3) e amostras de soro de 60 cães infectados naturalmente por outros helmintos gastrointestinais para a separação e identificação das proteínas espécie-especificas . Immunoblotting revelou reatividade para. IgG, IgM, IgA e IgE contra proteínas de A. vasorum com peso molecular de 18 a 209 KDa. As proteínas de 51,63,92 e 209 KDa não foram reconhecidas por anticorpos IgG presentes no soro de cães naturalmente infectados por outros helmintos. Anticorpos específicos anti-A. vasorum foram adsorvidos por imunoafinidade e acoplados em resima Sepharose proteína A para a purificação de proteínas específicas. A proteína de 51 KDa foi obtida. O teste de Elisa demonstrou alta reatividade espécie-específicas com soro de cães experimentalmente infectados por A. vasorum obtendo um índice de 100% de sensibilidade e especificidade.
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Barbosa, Luciene. "Cultivo primário do órgão hematopoiético de de moluscos do gênero biomphalaria : caracterização morfológica e funcional das células." Universidade Federal de Minas Gerais, 2007. http://hdl.handle.net/1843/SAGF-76QKWU.
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Resumo
Pela primeira vez conseguiu-se o cultivo primário do órgão hematopoiético de caramujos do gênero Biomphalaria.
O objetivo geral desse trabalho foi obter cultura primária de células do órgão hematopóietico (APO) de caramujos B. glabrata e B. tenagophila ( linhagens Cabo Frio, suscetível e Taim resistente ao Schistosoma. Mansoni) e caracterizá-las funcional e morfologicamente. A cultura primária de tecido hematopoiético de Biomphalaria é original e através desta será possível obter as células hematopoiéticas em grandes quantidades e em meio definido. Esta nova metodologia permitirá estudar a morfogêneses destas células, sua ultraestrutura, composição e comportamento frente a vários estímulos, inclusive frente a esporocistos.
Três tipos celulares morfologicamente distintos, nomeados de tipo I, II, e,III, cresceram na cultura. As células tipo I que predominam na cultura celular,são arredondadas com núcleo grande para o tamanho do citoplasma. As células tipo II possuem relativamente mais citoplasma que o tipo I. A presença de pseudópodes, também foi observada. O último tipo celular, denominado tipo III são refringentes e com núcleo não definido e menos abumdante, que as outras. Divisão celular atípica foi observada, com núcleo duplicando sem citocinese.
Nas culturas realizadas com Apo de caramujos infectados (após 24 horas de infecção) encontramos os mesmos tipos celulares encontrados nas culturas de Apo sem infecção, ou seja, tipos I, II e III. Não observamos nada de diferente em relação às culturas de caramujos não infectados.
Em todos os experimentos em que as células da cultura foram colocadas em contato com Zimosan foi observado a dispersão das células em direção a essas partículas.
Em contato com LPS,foi observada com 72 horas nas culturas a presença de um envoltório celular que se assemelha a uma cápsula e células tipo III. As células de B. tenagophila de Cabo Frio apresentaram uma melhor resposta ao antígeno. Um fato interessante observado em todas as culturas realizadas com caramujos do gênero Biomphalaria foi a transformação das células tipo I em células tipo III, com 7 dias ou mais. Entretanto, quando as células da cultura foram colocadas em contato com SEA ou LPS, as células tipo III surgem em 48 ou 72 horas respectivamente.
Não houve alterações celulares frente a miracídios, com todas as linhagens testadas. Fato que permite a inferência que os miracídios, ao contrário dos esporocistos não estimulamas células hemocitárias.
As células de todas as espécies estudadas foram positivas para as lectinasWGA, LPL, PNA. B. glabrata não teve células positivas para Com A, entretanto as duas linhagens de B. tenagophila estudadas apresentaram positividade para esta lectina.
Nas células de todas as linhagens estudadas foi possível a marcação de lisossomos.
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Avila, Daniella Alchaar D. "Avaliação da dinâmica populacional do Trypanosoma cruzi durante a fase crônica da doença de Chagas humana." Universidade Federal de Minas Gerais, 2008. http://hdl.handle.net/1843/SAGF-8HTNU2.
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Neste trabalho analisamos o perfil genético de 102 amostras do T. cruzi previamente isoladas de 44 pacientes chagásicos crônicos procedentes de diferentes regiões endêmicas dos estados de Minas Gerais (MG) e Goiás (GO), Brasil. De cada paciente foi obtido mais de um isolado do parasito em diferentes períodos de tempo, para se compreender melhor a dinâmica populacional desse parasito durante a fase crônica da doença de Chagas. Todas as amostras de DNA do T. cruzi foram caracterizadas utilizando marcadores de DNA independentes: (i) amplificação do domínio D7 do gene 24S do DNA ribosomal (rDNA 24S); (ii) gene mitocondrial citocromo oxidade subunidade II (COII) e (iii) amplificação da região intergênica dos genes de mini-exon (SL-IR). Um total de 77 amostras do T. cruzi (procedentes de 32 pacientes) foram analisadas utilizando nove loci de microssatélites. Os dados relacionados aos marcadores rDNA 24S e COII mostraram que a maior parte dos isolados pertencem ao grupo rDNA 1 e haplogrupo mitocondrial C, associados à linhagem T. cruzi II. Por outro lado, os isolados de dois pacientes foram inicialmente caracterizados (rDNA 24S) como T. cruzi I e cepas híbridas. Entretanto, a análise dos genes COII e SL-IR confirmaram que esses isolados pertencem a linhagem T. cruzi III e ao grupo de cepas híbridas, respectivamente. Esses resultados sugerem que a caracterização genética utilizando somente um marcador molecular não é suficiente para classificar as amostras do T. cruzi dentro das linhagens principais T. cruzi I, II e III, bem como cepas híbridas. As análises dos perfis de microssatélites mostraram que diferentes amostras do T. cruzi isoladas de um mesmo paciente foram geneticamente idênticas e monoclonais, exceto, nas amostras do parasito procedentes de dois pacientes, onde observamos uma alternância de correspondência entre os alelos para o locus SCLE11, sugerindo que pelo menos duas populações do parasito estariam circulando no sangue desse paciente. Os isolados obtidos de outros dois pacientes amplificaram simultaneamente três fragmentos de tamanhos diferentes para o locus de microssatélite TcAAAT6, sugestivo de policlonalidade ou aneuploidia para esse locus. Sendo assim, nossos resultados enfatizam a necessidade e relevância do estudo de diferentes amostras do T. cruzi isoladas de um mesmo paciente em diferentes períodos de tempo, incluindo amostras antes e após tratamento específico, para investigar a estrutura e a dinâmica populacional do T. cruzi durante a fase crônica da doença de Chagas.
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Vale, Vladimir Fazito do. "Estudo sobre a anatomia, pH e digestão de proteínas no intestino de larvas de Lutzomyia longipalpis (Diptera: Psychodidae)." Universidade Federal de Minas Gerais, 2008. http://hdl.handle.net/1843/SAGF-8ACMCM.
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O flebotomíneo Lutzomyia longipalpis é o principal vetor de Leishmania infantum, o agente etiológico da Leishmaniose Visceral Americana. Apesar da importância desta espécie em saúde pública, não existem na literatura descrições sobre a anatomia interna do tubo digestivo e pouco se sabe sobre os processos digestivos em larvas de flebotomíneos. Sendo assim, este trabalho teve o objetivo de descrever a anatomia do tubo digestivo, determinar o pH na luz intestinal e ainda investigar a digestão de proteínas em larvas de Lutzomyia longipalpis. O intestino médio constitui a maior parte do tubo digestivo e os cecos gástricos estão ausentes. Com o uso de corantes vitais indicadores de pH, foi observado um gradiente de pH, variando de > 9 no interior do intestino médio anterior a 6,5-7 no interior do intestino médio posterior. As endoproteases são secretadas no intestino médio anterior e são capazes de digerir azocaseína em diversos valores de pH, especialmente no pH 11. O uso de vários inibidores mostrou que as endoproteases digestivas são enzimas semelhantes à tripsina e à quimotripsina. Esse resultado foi confirmado com o uso dos substratos L-BApNA e N-CBZ-L-PpNA, específicos para tripsinas e quimotripsinas, respectivamente. Foram observadas 11 bandas (102 a 33 kDa) de atividade de endoproteases no gel de poliacrilamida contendo gelatina como substrato. As tripsinas encontradas no trato digestivo de larvas de L. longipalpis estão solúveis na luz intestinal. Aminopeptidases também foram estudadas com o uso de substratos sintéticos. Essas enzimas estão localizadas na porção posterior do intestino médio, ligadas ao epitélio e com pH ótimo entre 6,5 e 8. Estes resultados estão de acordo com a proposta de que as proteínas são digeridas até pequenos peptídeos dentro do espaço endoperitrófico no intestino médio anterior e estes peptídeos são digeridos em aminoácidos no espaço ectoperitrófico no intestino médio posterior.
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Queiroz, Norinne Lacerda. "Avaliação da resposta inflamatória cerebral em camundongos BALB/c e C47Bl/6 infectados por Plasmodium berghei cepa NK65." Universidade Federal de Minas Gerais, 2007. http://hdl.handle.net/1843/SAGF-769FLG.
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Resumo
A malária é a doença parasitária mais grave da humanidade, sendo um problema de saúde pública em mais de 100 países. A malária cerebral (MC), causada pelo Plasmodium falciparum, é uma das formas de manifestação mais grave da malária humana e a principal causa de óbitos, apresentando mecanismos ainda desconhecidos. A patogênese da malária está associada a uma resposta imune inapropriada ou excessiva desenvolvida pelo hospedeiro para eliminar o parasito. Devido às dificuldades em acompanhar casos humanos e da limitada possibilidade de examinar os processos patológicos, modelos experimentais de MC foram desenvolvidos. Embora nenhum modelo reproduza totalmente a condição humana, o modelo experimental utilizando roedores é bem caracterizado e a grande diversidade de linhagens de camundongos, associada à infecção com diferentes espécies de Plasmodium, tem contribuído para elucidar aspectos envolvidos na patogênese da doença.
Assim, o objetivo do nosso trabalho foi avaliar a resposta inflamatória cerebral envolvida na patogênese da malária experimental induzida por Plasmodium berghei cepa NK65 em camundongos jovens (seis semanas de idade) das linhagens BALB/c e C57Bl/6.
Camundongos BALB/c e C57Bl/6 foram infectados com inóculo padronizado de 106 hemácias parasitadas por injeção intraperitoneal. A parasitemia foi monitorada diariamente, a partir do terceiro dia pós-infecção (dpi), e apresentou uma evolução gradual, com diferença significativa entre as duas linhagens ao longo da infecção (p<0.01). Sinais clínicos e sobrevida dos animais foram avaliados durante doze dias, com expressiva perda de massa corporal nos animais infectados em relação aos animais controles, em ambas as linhagens. A mortalidade também apresentou um perfil diferente entre as linhagens de camundongos, estando concentrada nos dias seis e sete pós-infecção para C57Bl/6 e oitavo dia para BALB/c. Camundongos das duas linhagens foram submetidos à análise histopatológica para determinação da progressão das alterações morfológicas no cérebro. Animais C57Bl/6 apresentaram alterações teciduais precoces, porém discretas, já no terceiro dia pós-infecção. As alterações cerebrais, semelhantes às descritas na MC, tornaram-se mais evidentes ao longo do tempo e foram mais intensas em camundongos da linhagem C57Bl/6 em relação à linhagem BALB/c, o que justifica a morte precoce daquela linhagem. A interação leucócito-endotélio na microcirculação cerebral foi avaliada através de microscopia intravital nos vasos da pia-máter de animais infectados (5 dpi) e animais controle (não-infectados). Os animais infectados apresentaram aumento do número de leucócitos em rolamento e aderidos na parede do endotélio em relação aos animais controle. A contagem total e diferencial de leucócitos (linfócitos, monócitos neutrófilos, eosinófilos e basófilos) presentes no sangue periférico dos animais exibiu um padrão alterado da população celular geral e/ou específica nos animais infectados em relação aos controles. A quantificação do extravasamento do corante azul de Evans para o parênquima cerebral sugeriu modificações na permeabilidade vascular da BHE, em decorrência da infecção. Utilizando o método de ELISA, verificamos que houve um aumento significativo das concentrações da citocinas TNF-á e IFN-ã, e das quimiocinas murinas MCP-1/CCL2, RANTES/CCL5 e MIG/CXCL9 em homogenato de cérebro e no soro dos animais infectados (5 dpi) quando comparado aos animais controle.
Este trabalho sugere que a infecção por P. berghei cepa NK65 em camundongos BALB/c e C57Bl/6 foi capaz de induzir manifestações clínicas e alterações morfológicas cerebrais, típicas da malária grave por P. falciparum, especialmente na linhagem C57Bl/6, o que pode representar um bom modelo para o estudo da MC.
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Paula, Renata Cristina de. "Influência aa proteína inflamatória de macrófagos CCL3 em camundongos C57Bl/6J infectados com Fasciola hepatica." Universidade Federal de Minas Gerais, 2007. http://hdl.handle.net/1843/SAGF-769H27.
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Fasciola hepatica é um helminto que parasita fígado e vias biliares de bovinos, ovinos e caprinos, entre outros, com marcantes prejuízos para a pecuária das regiões sul e sudeste do Brasil devido à sua patogenia. As lesões hepáticas estão intimamente relacionadas à migração das formas imaturas do parasito e à conseqüente resposta inflamatória produzida pelo hospedeiro nos locais de migração. Sabe-se que a quimiocina CCL3, produzida e secretada por macrófagos ativados, é crucial na atração de diversos tipos celulares para um foco inflamatório, bem como pelo recrutamento de mais macrófagos para o mesmo em inúmeras doenças. Para avaliar a importância de CCL3 na infecção por F. hepatica, camundongos C57Bl/6J divididos em dois grupos foram infectados por via oral com dez metacercárias de F. hepatica sendo um grupo formado por camundongos capazes de produzir CCL3 selvagens e o outro grupo formado por camundongos geneticamente deficientes para a produção desta quimiocina. Os animais vieram a óbito principalmente entre o 23º e o 25º DAI, sendo necropsiados, e a busca pelo parasito realizada em todos os órgãos. A taxa de mortalidade no grupo de camundongos não deficientes para CCL3 foi maior do que a dos animais deficientes. Os camundongos capazes de produzir CCL3 apresentaram baço aumentado de tamanho quando comparados aos animais deficientes. Em ambos os grupos experimentais, os animais necropsiados na maioria das vezes, apresentavam hemorragia na cavidade abdominal. Ensaios imunoenzimáticos demonstraram que, os camundongos não deficientes para CCL3 produzem maior nível de IL-4, IL-10 e IL-13 que os animais deficientes. A atividade celular de neutrófilos e eosinófilos também foi menor no fígado dos camundongos deficientes quando comparada aos animais normais. O fígado dos animais CCL3+/+, à necropsia, apresentava diversas alterações, sendo mais freqüente o encontro de áreas necro-hemorrágicas. Nos animais geneticamente modificados, as áreas lesionadas no fígado eram menos extensas e apresentavam lesões focais, subcapsulares e de consistência firme ao corte. Este trabalho demonstrou que CCL3 tem participação no processo de formação de lesão em camundongos infectados por F. hepatica, já que animais deficientes em CCL3 apresentam menor mortalidade e menores lesões hepáticas em conseqüência de um perfil de resposta imunológica diferente daquele dos camundongos não deficientes.
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Lima, Ana Cristina Vianna Mariano da Rocha. "Estudo da variabilidade genética deLeishmania (Viannia) braziliensis Vianna, 1911 de diferentes regiões do Brasil." Universidade Federal de Minas Gerais, 2010. http://hdl.handle.net/1843/SAGF-8HCK3K.
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Leishmania (Viannia) braziliensis é a espécie mais prevalente nos casos humanos da leishmaniose tegumentar nas Américas. Polimorfismo genético têm sido encontrado em populações naturais de diferentes espécies de Leishmania, o que explicaria a adaptação destes parasitos às mudanças observadas nas condições ambientais. Neste estudo utilizou-se um painel significativo de isolados L. braziliensis de focos de LTA de diferentes regiões geográficas e biomas do Brasil. Os polimorfismos do DNA genômico foram analisados utilizando-se diferentes marcadores genéticos, comparou-se a variabilidade genética intra-específica das amostras e determinou-se as relações fenéticas entre elas. Na eletroforese de isoenzimas (MLEE), a maioria das amostras (87,3%) apresentou o perfil de migração idêntico ao da cepa padrão de L. braziliensis (M2903); 8 amostras (10,2%) apresentaram apenas um eletromorfo diferente para a enzima IDHNADP. Duas amostras (2,6%) apresentaram o perfil mais heterogêneo, com padrões diferentes de L. braziliensis para 3 enzimas (G6PDH, IDHNADP e MDH). Estas amostras foram designadas como variantes. Para o RAPD-PCR com o iniciador M1340F pode-se observar que o conjunto dos isolados formaram claramente dois grandes clusters, pela análise com o programa NTSYS, refletindo a diversidade genética entre as amostras de L. braziliensis testadas. A análise dos perfis gerados pela SSR-PCR evidenciou que os iniciadores CARY e K7 foram capazes de mostrar variabilidade intra-específica. Observou-se que com o iniciador CARY, as amostras agruparam-se em um clustrer, incluindo a cepa de referência de L. braziliensis. Por outro lado, com o iniciador K7 observou-se a formação de dois clusters. Uma árvore consenso foi gerada por parcimônia com os dados concatenados dos três marcadores utilizados (M1340F, CARY e K7) e observou-se a formação de dois clusters onde a maioria das amostras do bioma Amazônia /região Norte (58%) e região Nordeste (62%) estão juntas em um grupo e o bioma Cerrado /região Centro-Oeste (100%), Cerrado e Mata Atlântica (67%) e a região Sul (80%) estão em outro grupo, o que concorda com a análise feita pelo método de distância genética. Foram encontrados dois perfis para ITS1- HAEIII e após a análise dos géis foram identificados três perfis para hsp70-BstUI. Observou-se que o índice de similaridade médio entre as amostras para os testes de isoenzimas, RAPD-PCR com o iniciador M1340, SSR-PCR com o iniciador CARYe K7 foi de aproximadamente 70%, demonstrando a existência de variabilidade de L. braziliensis confirmada através das diferentes técnicas utilizadas. Combinando os resultados da análise por biomas e por região, podemos dizer que a maioria das amostras do bioma Amazonas, região Norte e bioma Caatinga estão sempre agrupadas em um mesmo clustere o bioma Cerrado, região centro-oeste em outro cluster. Este estudo refletiu a diversidade genética existente em L. braziliensis sugerindo a possibilidade de uma associação entre variabilidade e origem geográfica.
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Pereira, Cintia Aparecida de Jesus. "Caracterização da atividade de moléculas solúveis da hemolinfa de Biomphalaria tenagophila Taim envolvidos na morte dos esporocistos de Schistosoma mansoni cultivados in vitro." Universidade Federal de Minas Gerais, 2009. http://hdl.handle.net/1843/SAGF-8TNN4J.
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As espécies Biomphalaria glabrata, B. tenagophila e B. straminea são Planorbideos de água doce com importância médica relevante no Brasil, pois são os hospedeiros intermediários naturais de Schistosoma mansoni. Biomphalaria tenagophila oriunda da reseva ecológica do
Taim (RS), é uma linhagem completamente resistente a infecção pelo parasito, sendo capaz de destruií-lo poucas horas após a penetração do miracídio no interior do molusco, embora o mecanismo de lesão não sejam conhecido. Apesar dos trabalhos mostrarem que, entre os
elementos do sistema interno de defesa dos moluscos, os hemócitos são os principais efetores no processo de eliminação do parasito, trabalhos preliminares demonstraram que a inoculação da fração acelular da hemolinfa de B. tenagophila Taim resistente resulta no aumento da resistência de B. tenagophila Cabo Frio suscetível a infecção pelo S. mansoni, indicado que fatores solúveis da hemolinfa também participam do mecanismo de proteção da resposta protetora desenvolvida pelo molusco. Neste trabalho foi possível confirmar a participação da fração acelular da hemolinfa de B. tenagophila Taim na destruição de esporocistos de S. mansoni em sistema de cultivo do parasito in vitro. Neste sistema, a adição de hemolinfa acelular, especialmente a de Taim, às culturas de esporocisto de S. mansoni resulta em aumento da mortalidade dos esporocistos quando comparado às culturas de esporocistos contendo apenas meio CBSS suplementado ou meio e hemolinfa acelular de B. glabrata. Alem da ação direta sobre esporocistos, a acombinação da fração acelular de Taim com os hemócitos de B.tenagophila de Cabo Frio aumenta significativamente a mortalidade dos esporocistos e o efeito é espécie-especifico. Assim, os dados aqui apresentados indicam que a
hemolinfa acelular de caramujos da linhagem Taim atua diretamente na destruição dos esporocistos provocando lesão de tegumento do parasito que permitiu a penetração do XIV marcador fluorescente, Hoechst 33258, e indiretamente auxiliando os granulócitos no
reconhecimento do parasito. O mecanismo pelo qual a fração acelular da hemolinfa de B .tenagophila Taim destroe o parasito, sem a aprticipação dos hemócitos, não está definido na literatura. Há evidências da presença de atividade de proteases na hemolinfa de Biomphalaria, embora nenhum estudo tenha sido conduzido para evidenciar a participação de aividade protease na interação entre B.
tenagophila infectado com S. mansoni. Neste trabalho também foi avaliado a participação de proteases presentes na hemolinfa de B.tenagophila Taim e sua associação no processo de destruição dos esporocistos de S. mansoni. Nososo dados mostram atividade proteólitca, especialmente serino- e cisteino-protease na hemolinfa de todas as linhagens de caramujos testadas neste trabalho experiemental, porém a atividade encontrada na hemolinfa de
B.tenagophila Taim é mais intensa. Além disto a inibição da atividade de serino-protease na hemolinfa de B.tenagophila Taim resultou em diminuição significativa da mortalidade dos esporocistos de S. mansoni quando comparado com tratamento no qual a atividade proteolítica da fração acelular B. tenagophila Taim não foi inibida. O fracionamento da
hemolinfa acelular de B. tenagophila Taim em coluna de exclusão molecular permitiu identificar que a atividade anti-esporocisto está associada a componentes protéicos da fração 7 e é coincidente com a atividade de serino-protease presente nesta amostra. Separações
subseqüentes da fração 7 em coluna de troca iônica, demonstram atividade anti-esporocisto presente na subfração 7.1 e 7.2, sendo que na subfração 7.1 a atividade anti-esporocisto é independente de serino-protease, e na subfração 7.2 a mortalidade e lesão tegumentar de esporocistos de S. mansoni coincide com a atividade proteolítica. Os resultados sugerem que a atividade anti-esporocisto presente na hemolinfa de B.tenagophila Taim esta associada com a capacidade de lesar diretamente esporocistos de S. mansoni na ausência de hemócitos
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Nascimento, Maria Fernanda Alves do. "Histopatologia da miíase cutânea e expressão de leucócitos sanguíneos em ratos reinfestados com larvas de Dermatobia hominis (Linnaeus jr., 1781) (diptera: oestridae)." Universidade Federal de Minas Gerais, 2010. http://hdl.handle.net/1843/SAGF-8H9QP3.
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Larvas de Dermatobia hominis são causadoras de zoonótica miíase cutânea de
mamíferos na região Neotropical, onde apresentam importância médica, além de acarretarem
maiores consequências à exploração pecuária por diminuição da produção de carne, leite e
depreciação do couro dos animais. Como modelo experimental desta miíase para o estudo de
aspectos histopatológicos e da expressão de leucócitos circulantes, Rattus norvegicus foram
infestados com quatro larvas de D. hominis cada e após seis dias subsequentes reinfestados
com mais quatro larvas. Nas lesões cutâneas da primoinfestação versus reinfestação foram
distintos: na primeira, o exsudato inflamatório ascendente até os 20 dias pós-infestação (dpi),
sendo neutrófilos e eosinófilos mais frequentes, enquanto que na reinfestação a inflamação já
era expressiva pelas mesmas células aos 4 dias pós-reinfestação (dpr) e decrescendo a partir
dos 14 dpr; a abundância de eosinófilos foi análoga tanto aos 10 dpi como aos 9 dpr; as
neoformações, vascular intensa aos 15 dpi e conjuntiva aos 20 e 28dpi já foram vistas aos 9
dpr; o diâmetro da área necrosada, contornando a larva, aumentou com o amadurecimento
desta forma parasitária (L3) na infestação, observação também retratada aos 14 e 22 dpr.
Especificamente, as células sanguíneas que expressaram significância foram: os neutrófilos,
com progressivo aumento nos 6 dpi = 0 dpr, controle (ou 0 dpi), 20 dpi = 14 dpr, 10 dpi = 4
dpr, 28 dpi = 22 dpr, e 15 dpi = 9 dpr; os eosinófilos, com ascendente número nos 28 dpi = 22
dpr, controle, 20 dpi = 14 dpr, 15 dpi = 9 dpr, 10 dpi = 4 dpr, 6 dpi = 0 dpr; os linfócitos
totais, na sequência de magnitude nos 15 dpi = 9 dpr, 28 dpi = 22 dpr, 10 dpi = 4 dpr, 20 dpi =
14 dpr, 6 dpi = 0 dpr e controle; e linfócitos grandes (ativados) na ordem crescente nos 15 dpi
= 9 dpr, 20 dpi = 14 dpr, 28 dpi = 22 dpr, 10 dpi = 4 dpr, 6 dpi = 0 dpr e controle. Linfócitos
pequenos (não ativados) e monócitos não foram significantes em números. Os resultados
preliminares agora apresentados, envolvendo a relação D. hominis-hospedeiro, abordam
novos aspectos durante a reinfestação desta importante miíase de interesse veterinário e
médico.
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Silva, Sydnei Magno da. "Avaliação clínica e laboratorial de cães naturalmente infectados por Leishmania (Leishmania) chagasi (Cunha & Chagas, 1937), submetidos a um protocolo terapêutico em clínica veterinária de Belo Horizonte." Universidade Federal de Minas Gerais, 2007. http://hdl.handle.net/1843/SAGF-765GJ2.
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A leishmaniose visceral no Brasil é uma zoonose que tem no cão doméstico o principal reservatório. O tratamento da leishmaniose visceral canina (LVC) é polêmico e no Brasil é praticado desde os meados da década de 90. Este trabalho é o primeiro a avaliar de forma sistematizada um protocolo de tratamento que utiliza Anfotericina B e Alopurinol em cães naturalmente infectados por Leishmania (Leishmania) chagasi, e que estão domiciliados no município de Belo Horizonte, Minas Gerais. Trinta e um cães submetidos a este protocolo em uma clínica veterinária deste município, entre janeiro de 2004 e dezembro de 2005, foram avaliados sob a ótica dos seguintes parâmetros: exame clínico; sorologia; imuno-histoquímica e PCR de fragmento de pele de orelha; hemograma e bioquímica sérica. Os resultados foram comparados com aqueles realizados imediatamente antes dos animais serem submetidos ao tratamento. Demonstrou-se melhora significativa em todos os parâmetros avaliados. Ao exame clínico foi observado em todos os cães o uso de medidas profiláticas contra a ação dos flebotomíneos, como coleiras impregnadas com Deltametrina a 4% ou repelentes tipo Top spot a base de Permetrina. O peso médio dos animais no intervalo de tempo entre o início do tratamento e o momento da avaliação foi aumentado em 12,68%. Antes do tratamento, 30 cães (96,78%)foram categorizados como sintomáticos. No momento da avaliação 25 animais (80,65%) estavam assintomáticos. A técnica da reação de imunofluorescência indireta (RIFI) foi o teste utilizado para a comparação dos níveis de anticorpos apresentados pelos cães antes e durante o acompanhamento da resposta ao tratamento. Antes do tratamento o valor máximo de diluição reativa final observado foi 1:20.480 e o mínimo 1:320, com média em 1:4.335. No momento da avaliação, estes valores eram no máximo 1:10.240 e o mínimo menor que 1:40 (considerado não reativo), com média em 1:1.190. A técnica de imuno-histoquímica mostrou ausência de parasitos na pele da face interna orelha em 93,55% dos animais no momento da avaliação enquanto antes do tratamento este percentual era de 45,16% estavam negativos. Antes do tratamento 29,03%dos animais eram PCR negativo no mesmo fragmento de pele, já no momento da avaliação em 80,65% dos animais a mesma técnica apresentou resultado negativo. Todos os cães apresentaram PCR de sangue periférico negativo. Houve aumento no percentual de animais com a relação Albumina/Globulina maior que 0,6 de 64,51% antes do tratamento para 90,32% no momento da avaliação. A significativa melhora clinico - laboratorial apresentada pelos animais na avaliação deste trabalho, aliada a participação consciente e colaboradora dos seus proprietários, e a adoção de medidas de controle da infecção centradas nos animais, minimizam o risco da permanência destes cães em seus domicílios, considerando um município endêmico para LVC como Belo Horizonte.
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Andrade, Andrey Jose de. "Ecologia química de flebotomíneos (Diptera: Psychodidae: Phlebotominae): desenvolvimento de uma armadilha e análise dos hidrocarbonetos cuticulares das espécies." Universidade Federal de Minas Gerais, 2011. http://hdl.handle.net/1843/SAGF-8HCN8Z.
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Os flebotomíneos apresentam um importante papel na transmissão de espécies de Leishmania, agentes das leishmanioses. Algumas espécies como, Lutzomyia longipalpis sensu lato (s.l.) estão incluídas em um complexo de espécies crípticas, porém para outras como Lutzomyia whitmani pouco se conhece sobre seu status toxonômico. A primeira está envolvida na transmissão de Leishmania infantum chagasi e a segunda de Leishmania braziliensis e Leishmania shawi, responsáveis pelas formas de leishmaniose visceral e cutânea, respectivamente. A biologia e ecologia dessas espécies vetoras, e consequentemente a epidemiologia das leishmanioses, variam de acordo com a região e com a interação destes flebotomíneos com o ambiente e os hospedeiros vertebrados em uma determinada área. Estudos de ecologia química procuram entender o comportamento de flebotomíneos para identificar feromônios sexuais através de análises químicas de hidrocarbonetos, os quais podem ser usados como iscas em armadilhas, sendo utilizadas para o monitoramento das espécies que apresentam importância médico-veterinária. O presente estudo está dividido em duas partes. A primeira objetivou oferecer uma revisão sobre L. whitmani, desde sua descrição original, a fim de elucidar a existência de um possível complexo de espécies crípticas. A Cromatografia Gasosa (CG) foi utilizada para analisar os perfis cromatográficos de populações de flebotomíneos de diferentes regiões do Brasil. A técnica foi padronizada usando L. longipalpis s.l. como modelo. Na segunda parte, a armadilha BG-Sentinela® (BGS) e o cairomônio BG-Lure® (BGL), utilizados no monitoramento de culicídeos, foram avaliados em diferentes condições (altura de instalação, posição do funil de sucção, fonte luminosa) para captura de L. longipalpis s.l. Baseado nesses dados, uma armadilha de baixo custo e de eficiência semelhante a da armadilha luminosa CDC (denominada Leishtrap) foi desenvolvida para captura de L. longipalpis s.l. e L. whitmani. A detecção dos picos cromatográficos e a extração dos Hidrocarbonetos Cuticulares (HCCs) foi padronizada usando um tempo de 50 minutos de corrida no cromatógrafo a gás, sendo utilizados 100 flebotomíneos no tempo de extração de 20 minutos em 1 ml de hexano. Uma menor diferença entre os possíveis HCCs foi identificada entre machos de L. whitmani. O hidrocarboneto C21 não foi encontrado na população do Pará e o C33 foi encontrado somente nas populações de Minas Gerais e do Paraná. Nenhuma grande diferença foi observada entre os HCCs de machos e fêmeas das mesmas populações de L. whitmani exceto para Minas Gerais, onde todos os compostos diferiram entre os sexos. A armadilha BGS não foi eficiente na captura de flebotomíneos quando testada sem fonte luminosa e a luz incandescente tornou a armadilha mais atrativa quando comparada a luz UV, sendo que a armadilha CDC captura mais que a BGS, com os dois recursos luminosos. O BGL não aumentou a captura de flebotomíneos na presença ou na ausência de luz. Maior captura de flebotomíneos, incluindo L. longipalpis s.l., foi observada quando a BGS estava invertida com sua abertura de sucção a 1,5 m acima do solo. O feromônio sexual sintético (9-metil-germacreno-B) foi adicionado ao protótipo 1 (P1) da Leishtrap e os resultados mostraram que as concentrações de 1,5 e 2 mg aumentaram a captura de fêmeas de L. longipalpis s.l. (ANOVA, p> 0.05). Em relação ao P2, a captura de machos (teste t, p> 0.05) e de fêmeas de L. longipalpis s.l. (Mann-Whitney, p> 0.05) não foi diferente quando comparadas aos resultados obtidos pela CDC e o mesmo resultado foi observado pelo P3. Similarmente, não foi observada diferença estatística na captura de L. whitmani quando comparados o P2 e a CDC. A técnica de CG padronizada permitiu detectar os possíveis HCCs que parecem variar entre essas populações e entre os machos e fêmeas da mesma população. A BGS como ferramenta para a captura de flebotomíneos, necessitaria de adaptações. Os protótipos P2 e P3 da Leishtrap foram eficientes para captura de L. longipalpis s.l. e L. whitmani os quais poderiam vir a substituir armadilhas luminosas, como a CDC, após contrapor os custos e benefícios das mesmas.
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Silva, Rizia Maria da. "Infecção natural por Eimeria spp., Cryptosporidium spp. e Giardia duodenalis em cordeiros da raça mestiça Santa Inês, na região semi-árida do Estado do Rio Grande do Norte. Belo Horizonte 2009." Universidade Federal de Minas Gerais, 2009. http://hdl.handle.net/1843/SAGF-8H9P3U.
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O presente trabalho teve como objetivo estudar as infecções naturais por Eimeria spp.,
Cryptosporidium spp. e Giardia duodenalis em cordeiros da raça mestiça Santa Inês,
criados extensivamente em fazenda no semi-árido do Estado do Rio Grande do Norte.
Para tanto, 27 cordeiros machos foram acompanhados para monitorar o curso da
infecção natural por Eimeria spp., Giardia duodenalis e as espécies de eimeriídeos
presentes do nascimento até a 12ª semana de idade. Foi também investigada a presença
de Cryptosporidium no primeiro mês de vida dos cordeiros. Observaram-se oocistos de
Eimeria nas fezes pela primeira vez na terceira semana após o nascimento. A cinética de
excreção de oocistos caracterizou-se por um aumento progressivo com pico de
eliminação na sexta semana de vida, seguida de uma queda drástica na sétima, com
nova elevação na oitava semana, e a partir da nona semana de vida observou-se queda
gradual e progressiva na contagem de oocistos, indicando o desenvolvimento de
imunidade pelos cordeiros. Foi observada considerável variação individual no valor de
OOPG. Oito espécies de Eimeria foram identificadas: E. ahsata, E. crandallis, E.
faurei, E. granulosa, E. intricata E. ovina, E. ovinoidalis, E .parva. E. crandallis foi
numericamente predominante da quarta a nona semana de vida, com 77,1% dos oocistos
excretados pertencentes a essa espécie no pico da infecção por Eimeria. Infecções
mistas foram comuns e aumentaram com o avançar da idade dos animais, demonstrando
a exposição e desafios a diversas espécies presentes no meio ambiente. Dois dos 27
animais (7,4%) excretaram oocistos de Cryptosporidium spp. nas fezes, sendo um
cordeiro na terceira semana de idade e outro na quarta semana. A excreção de cistos de
G. duodenalis foi detectada pela primeira vez em um cordeiro na 10ª semana após o
nascimento. A incidência acumulada de G. duodenalis na 10ª, 11ª e 12ª semanas foi de
4,5%, 13,0% e 33,3%, respectivamente. A maior ocorrência de infecção por G.
duodenalis foi verificada após os cordeiros serem levados para o confinamento. Não
ocorreu nenhum caso de diarréia durante o período experimental. Existiram boas
condições ambientais para a esporulação de oocistos de Eimeria spp.
Palavras-
40
Costa, Ana Flavia Dias Vieira da. "Identificação de transcritos gênicos sexo-específicos de Ancylostoma braziliense (de Faria, 1910)." Universidade Federal de Minas Gerais, 2007. http://hdl.handle.net/1843/SAGF-765FY6.
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Resumo
O Ancylostoma braziliense é um parasito nematódeo que representa risco para a saúde humana e animal. Em virtude das diferenças fisiológicas inerentes entre machos e fêmeas, é de se esperar que ocorram variações no perfil de transcritos gênicos entre os dois sexos. Neste trabalho, a técnica de apresentação diferencial de RNAs (DDRT-PCR) foi utilizada com o intuito de identificar transcritos gênicos diferencialmente expressos entre os sexos de A. braziliense. Para alcançar esse objetivo, RNAs dos dois sexos foram extraídos, o cDNA foi preparado e submetido a reações de PCR utilizando iniciadores aleatórios em condições de baixa estringência. Inicialmente, 18 fragmentos foram identificados como específicos ou mais expressos por um dos sexos, sendo que 13 foram clonados e seqüenciados. Estas seqüências foram submetidas à pesquisa de homologia em bancos de dados, totalizando 19 ESTs a serem testadas. O caráter de expressão diferencial foi avaliado pelas técnicas de RT-PCR semiquantitativa, para os fragmentos que se mostraram diferencialmente expressos no teste inicial de iniciadores, e por PCR em tempo real para todos os fragmentos selecionados. Houve a confirmação da expressão diferencial de nove ESTs, dentre as 19 testadas, sendo sete mais expressas por machos e duas por fêmeas. Dentre elas, duas não apresentaram homologias significativas com seqüências depositadas em banco de dados, representando possivelmente novos transcritos gênicos. As outras se mostraram semelhantes a seqüências de cDNAs de Ancylostoma ceylanicum (Ab1.3m), Nippostrongylus brasiliensis e gônada de fêmeas de Ascaris suum (Ab14.1f), proteína hipotética de Caenorhabditis elegans (Ab2.1m), mRNAs precursores da ASP-5 de Ancylostoma caninum (Ab15.1), de paracaspase de C. elegans (Ab.17.4) e do inibidor de protease tipo Kunitz de A. caninum (Ab1.2m e Ab16.1m). Além disso, foi avaliado, em A. caninum e A. ceylanicum, o perfil de expressão de genes do inibidor tipo Kunitz, duplamente confirmado como mais expresso em machos de A. braziliense. Para isso, foi feita a extração de RNA de ambos os sexos das duas espécies, síntese de cDNA e reações de PCR em tempo real, que verificou expressão amplamente superior desses genes em machos das duas espécies, demonstrando que isso deve ser verdadeiro para os outros membros da família Ancylostomatidae.
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Silva, Letícia de Azevedo. "Reinfecção experimental de camundongos BALB/c imunossuprimidos com ciclofosfamida utilizando cepas de Toxoplasma gondii pertencentes a diferentes tipos genéticos." Universidade Federal de Minas Gerais, 2010. http://hdl.handle.net/1843/SAGF-8ACN2M.
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A ocorrência de reinfecção pelo Toxoplasma gondii foi confirmada em modelos experimentais utilizando camundongos, contudo, ainda não está estabelecido se esse processo é genótipo-dependente e ainda não existem estudos que avaliem a reinfecção em camundongos imunossuprimidos. Para verificar interferência das diferenças genotípicas entre as cepas de T. gondii no processo de reinfecção e avaliar o efeito imunossupressor da ciclofosfamida (Cy) na suscetibilidade ao desafio, grupos de camundongos BALB/c foram primo infectados com a cepa D8 (recombinante I/III) ou ME49 (tipo II), ambas não virulentas, e após 45 dias foram desafiados com as cepas CH3 ou EGS (recombinantes I/III e virulentas). Outros camundongos foram inoculados seguindo o mesmo protocolo, porém foram imunossuprimidos semanalmente pela Cy, iniciando 5 dias antes do desafio. Trinta dias após o desafio, cistos cerebrais de cada camundongo sobrevivente foram inoculados em camundongos BALB/c para realizar o bioensaio. O restante foi inoculado em camundongos Swiss para obtenção de taquizoítos que foram recuperados e submetidos à análise por PCR-RFLP (marcadores L363 e cS10-A6) para confirmar a reinfecção. A cinética da produção de anticorpos IgG total, IgG1, IgG2a, IgM e IgA anti- T. gondii foi avaliada pelo método de ELISA. Além disso, foi avaliada a ação da Cy sobre os leucócitos circulantes de camundongos primo infectados. De forma geral, a infecção primária com a cepa D8 conferiu maior proteção ao desafio com as cepas CH3 e EGS do que a infecção primária com a cepa ME49. A PCR-RFLP foi mais sensível que o bioensaio para confirmar a reinfecção, e mostrou que camundongos primo infectados com a cepa ME49 se reinfectam com as cepas CH3 e EGS, enquanto camundongos primo infectados com a cepa D8 se reinfectam apenas com a cepa EGS, mais virulenta que a cepa CH3. A imunossupressão aumentou as taxas de reinfecção e de mortalidade dos animais. A reinfecção nos camundongos imunocompetentes foi relacionada ao aumento nos níveis de anticorpos IgM e IgA após o desafio. Por outro lado, 30 dias após o desafio, os camundongos imunossuprimidos e desafiados apresentavam níveis de IgM e IgA significativamente menores que os não imunossuprimidos desafiados, sugerindo que essas imunoglobulinas participam da proteção contra a reinfecção. A Cy causou leucopenia significativa em camundongos primo infectados, com redução no número de linfócitos e neutrófilos, o que provavelmente favoreceu a reinfecção. Conclui-se que a suscetibilidade de camundongos BALB/c à reinfecção pelo T. gondii está relacionada às diferenças genotípicas entre as cepas da infecção primária e do desafio, à virulência da cepa usada no desafio e à alteração da integridade imune do hospedeiro, o que provavelmente compromete a proteção previamente estabelecida pela infecção primária.
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Serafim, Luciana Ribeiro. "Dermatobia hominis (Linnaeus jr., 1781): susceptibilidade de camundongo e antigenicidade dos produtos de secreção e excreção de larvas." Universidade Federal de Minas Gerais, 2009. http://hdl.handle.net/1843/SAGF-8H9PNH.
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Larvas de Dermatobia hominis são parasitos obrigatórios de tecidos cutâneos de vários mamíferos, domésticos e silvestres, inclusive humanos, de ocorrência na região Neotropical. Nos hospedeiros, as larvas determinam a dermatobiose, miíase furuncular conhecida como berne. Embora afete humanos, a miíase acarreta grandes prejuízos econômicos à exploração pecuária, sobretudo no Brasil, em decorrência da diminuição de ganho de peso, produção de leite e depreciação do couro de animais, principalmente bovinos. A partir de infestação experimental de camundongos Swiss, com larvas recém-emergidas de D. hominis, foram obtidas, após biópsia, larvas aos 4, 10, 20 e 25 dias pós-infestação (dpi) e delas colhidas secreção e excreção (SE) para eletroforese e testes de Western blot. As SE expressaram moléculas entre 10-200 kDa, sendo as mais abundantes e antigênicas as de 25,4 e 30,8 kDa. Sob análise de espectrometria de massa, a molécula de 25,4 kDa não mostrou analogia com qualquer peptídeo já depositados em bancos de dados, enquanto que a de 30,8 kDa teve similaridade com peptídeo de albumina bovina. A discussão evoca a importância do uso de camundongos como modelo experimental da miíase por larva de D. hominis, associada a resposta humoral desses hospedeiros durante a infestação, além de focalizar o estudo preliminar sobre proteoma.
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Campos, Janaina Sousa. "Estudo da variabilidade genética inter e intra-específica de Leishmania (Leishmania) chagasi (Cunha & Chagas, 1937) e Leishmania (L.) infantum (Nicolle, 1908)." Universidade Federal de Minas Gerais, 2007. http://hdl.handle.net/1843/SAGF-7C2JNU.
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Resumo
A leishmaniose visceral ou calazar é uma doença potencialmente fatal para o homem, tendo como agentes etiológicos as espécies de Leishmania do complexo L. (Leishmania) donovani: L. donovani e L. infantum, ambas no Velho Mundo e L. chagasi no Novo Mundo. Apesar de inúmeros estudos realizados sobre as doenças causadas por esses parasitos, a epidemiologia dos vários focos humanos é ainda hoje pobremente conhecida para uma doença da importância e impacto médicos da leishmaniose visceral, não só quanto à sua ecologia, mas com opiniões discordantes quanto ao status taxonômico de alguns destes parasitos. A inclusão de L. chagasi no complexo L. donovani é amplamente aceita ainda que sua afinidade taxonômica e origem sejam matéria de controvérsia. A utilização de metodologias moleculares veio permitir o desenvolvimento de novas abordagens no estudo da variabilidade genética e a determinação de correlações filogenéticas existentes entre as duas espécies, e dentro de cada uma delas. Alguns trabalhos realizados com as espécies do complexo L. donovani, utilizando análises genética e fenética não mostraram distinção entre L. infantum e L. chagasi. Destaca-se que grande parte dos dados disponíveis na literatura sobre a variabilidade genética de L. chagasi em comparação com L. infantum foi gerada através da análise de isoenzimas. Contudo nenhum estudo até agora realizado utilizou um número significativo de amostras do Brasil (L. chagasi), com poucas passagens in vitro e com história clínica bem conhecida, em comparação com amostras de L. infantum. O objetivo central do presente trabalho foi avaliar a variabilidade genética inter e intra-específica de amostras L. chagasi e L. infantum isoladas de casos humanos e reservatórios caninos da Região Metropolitana de Belo Horizonte, Minas Gerais, Brasil e da Região do Mediterrâneo, Portugal. No presente estudo foram utilizadas técnicas empregadas na análise de polimorfismos do DNA nuclear (nDNA) e/ou do cinetoplasto (kDNA), utilizados como marcadores genéticos gerados por: amplificação aleatória do DNA polimórfico RAPD; polimorfismos de tamanho de fragmento de restrição do kDNA utilizando endonucleases de restrição RFLP; PCR com iniciadores de repetições de seqüências simples - SSR-PCR e amplificação pela técnica de LSSP-PCR Low-Stringency Single Specific Primer PCR. Essas metodologias já se encontram descritas na literatura e têm sido utilizadas no laboratório de Biologia de Leishmania, do Departamento de Parasitologia, ICB/UFMG em estudos de Leishmania sp. e de L. chagasi isoladas de reservatórios caninos e de casos humanos mostrando polimorfismo e variantes isoenzimáticas.
Utilizando a técnica de isoenzimas, todas as amostras apresentaram o mesmo perfil frente às diferentes enzimas, indicando pertencer a um mesmo zimodema, com exceção de duas amostras do Brasil (uma de humano e outra de cão) que apresentaram um perfil diferente das demais para duas das enzimas analisadas. Pela utilização das técnicas de RAPD e SSR-PCR observou-se uma separação das amostras em dois clusters relacionados ao hospedeiro de origem. Com as técnicas de RFLP e LSSP-PCR essa separação não foi observada, mas pequenos polimorfismos foram detectados. A técnica de sequenciamento evidenciou polimorfismos, algumas vezes associados a origem geográfica ou ao hospedeiro.
Esperamos que os resultados aqui apresentados possam trazer um maior conhecimento da epidemiologia molecular do parasito, levando à melhor compreensão da diversidade e estrutura das populações de Leishmania estudadas.
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Ituassu, Leonardo Trindade. "Avaliação das vacinas Leish-111f® + MPL-SE®, Leish-85 + MPL-SE® e vacina de extrato bruto contra infecção dessafio em câes (Canis familiaris) por Leishmania (Viannia) braziliensis." Universidade Federal de Minas Gerais, 2008. http://hdl.handle.net/1843/SAGF-8H9KNF.
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Neste estudo, foram avaliados a imunogenicidade e eficácia de vacinas compostas por antígenos recombinantes fusionados isolados de Leishmania (TSA, LeIF e LmSTI1) ou por antígeno bruto de promastigotas de Leishmania guyanensis (MHOM/BR/1973/M1176), contra leishmaniose tegumentar. Quarenta cães sem raça definida foram subdivididos em 5 grupos vacinais (8 animais por grupo), sendo um grupo imunizado com Leish-111f® e MPL-SE® como adjuvante, um grupo imunizado com Leish-85 (TSA e LmSTI1 fusionados) e MPL-SE® como adjuvante e um grupo imunizado com antígenos bruto de Leishmania guyanensis e MPL-SE®. Os outros dois grupos foram utilizados como controles do adjuvante e placebo. Todos os animais receberam 3 doses de vacinas em intervalos de 21 dias e foram desafiados por injeção com 106 promastigotas infectantes de L. braziliensis. A avaliação parasitológica foi realizada verificando o aparecimento da lesão cutânea no local de inoculação das formas promastigotas. A avaliação da resposta imune humoral foi realizada por ELISA utilizando antígeno bruto de L. braziliensis e antígeno recombinante Leish-111f® e foi realizada antes da vacinação (Dia 0), após as três doses da vacina (Dia 63) e após o desafio (Dia 84, Dia 120 e Dia 150). Foram pesquisados anticorpos da classe IgG e subclasses IgG1 e IgG2. A avaliação da resposta imune celular foi realizada pela imunofenotipagem de leucócitos do sangue periférico, pelo ensaio de proliferação linfocitária, dosagem de citocinas como IFN-, IL-4 e IL-10 e dosagem de óxido nítrico, em coletas de sangue realizadas antes da vacinação (Dia 0), após a imunização (Dia 63) e após o desafio (Dia 150). Foi realizado hemograma e avaliação bioquímica antes e após o estudo para verificar um possível efeito adverso da vacinação. Após o término do período de avaliação todos os animais foram sacrificados. Foi demonstrado uma produção específica de anticorpos frente aos antígenos vacinais com diferença significativa (p<0,05) entre os diversos grupos imunizados e os grupos controles. Entretanto, não foram observadas diferenças significativas na avaliação da resposta celular observada, seja na imunofenotipagem, dosagem de citocinas ou óxido nítrico. Após o desafio, 6 cães do grupo placebo desenvolveram lesão no local da inoculação, enquanto que no grupo vacinado com Leish-111f®+MPL-SE® somente 1 animal apresentou lesão. Dos animais imunizados com Leish-85+MPL-SE® ou com antígeno bruto+MPL-SE®, dois animais de cada grupo desenvolveram lesão.
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Barcante, Thales Augusto. "Aspectos do desenvolvimento de Angiostrongylus vasorum (Baillet, 1866) Kamensky, 1905 em Biomphalaria glabrata (Say, 1818)." Universidade Federal de Minas Gerais, 2006. http://hdl.handle.net/1843/SAGF-6XLM7Z.
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RESUMO
Angiostrongylus vasorum é um nematóide parasito de canídeos domésticos e silvestres, cuja forma adulta pode ser encontrada no ventrículo direito, artérias pulmonares e ramificações. O ciclo envolve uma fase no ambiente e a participação de caramujos aquáticos e terrestres como hospedeiros intermediários. No presente trabalho objetivou-se determinar os locais de penetração e a via migratória de A. vasorum em Biomphalaria glabrata e avaliar a reação perilarvar, em diferentes pontos da infecção, especificando a composição celular envolvida. Os aspectos inerentes à relação parasito-hospedeiro, tanto no que tange aos mecanismos envolvidos na penetração, como aqueles relacionados à emergência de larvas infectantes (L3) para o ambiente. Também foi elucidada a via migratória que pode ser descrita de duas maneiras distintas, dependendo da via de penetração das larvas de primeiro estádio (L1). À análise dos cortes histológicos, verificou-se que a infecção ocorre pela penetração de L1 pelas partes moles dos moluscos, atingindo a camada fibromuscular da região cefalopodal, onde completam o desenvolvimento até L3. Alternativamente, pode ocorrer a ingestão de L1, que necessariamente penetra na mucosa intestinal, podendo atingir as vísceras quer pela penetração direta ou carreadas pela hemolinfa. Verificou-se ainda que o desenvolvimento até L3 pode ocorrer em diversos órgãos e tecidos do molusco, e estes processos (infecção e desenvolvimento) são diretamente influenciados pela temperatura durante a infecção e manutenção dos moluscos. Pode-se verificar que a partir de 4h ocorrem alterações significativas na composição celular da hemolinfa, em resposta a formação de uma reação perilarvar e constituição do granuloma, com acentuada celularidade em uma das faces da larva, e se inicia às 5h, ficando bem caracterizado aos 20 dias após infecção. A partir dos 30 dias após a infecção tem início um processo de degeneração do granuloma perilarvar e o aparecimento de larvas livres nas cavidades do molusco 60 dias após a infecção.
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Busatti, Haendel Goncalves Nogueira Oliveira. "Investigação in vitro do potencial giardicida de quatro análogos do metronidazol." Universidade Federal de Minas Gerais, 2006. http://hdl.handle.net/1843/SAGF-6XSNEX.
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RESUMO
A Giardia lamblia é um protozoário intestinal humano de ampla distribuição mundial. A giardíase é responsável por diarréia, síndrome de má absorção e perda de peso, depauperando física e mentalmente crianças de países subdesenvolvidos. É ainda, principal causa de diarréia em países desenvolvidos. Em 1962, o metronidazol passou a ser utilizado no tratamento da giardíase, por apresentar excelente eficácia e baixa toxicidade. Contudo, tem sido observado que isolados de G. lamblia, provenientes de pacientes de diferentes regiões do mundo, apresentam diferenças na sensibilidade ao metronidazol in vitro. Há ainda, relatos de pacientes refratários ao tratamento.
Desta forma, a pesquisa de análogos do metronidazol mais efetivos contra o parasita torna-se uma opção importante para o controle desta parasitose.
O presente trabalho tem por objetivo investigar o potencial giardicida de quatro análogos nitroimidazóis, X-etil-2-metil-5-nitroimidazol (X = OMs, MTZMs, X = Br, MTZBr , X = N3, MTZN3 , X = I, MTZI), sintetizados a partir do metronidazol. A eficácia dos compostos foi avaliada in vitro, utilizando a amostra Portland de G. lamblia, através da DE50 (dose efetiva que inibe em 50% o crescimento dos trofozoítos) e da CIM (concentração inibitória mínima necessária para inibir ao máximo o crescimento dos trofozoítos). O metronidazol foi utilizado como controle de eficácia.
A eficácia do metronidazol, foi avaliada inicialmente por dois métodos quantitativos: contagem dos trofozoítos em câmara de Neubauer e por colorimetria.
Considerando a sensibilidade e precisão do método, a técnica colorimétrica apresentou resultados mais precisos quando comparado com a contagem de trofozoítos em câmara de Neubauer.
Trofozoítos de G. lamblia, em fase logarítmica de crescimento, foram distribuídos em placas de cultura de células de 24 poços para associação com os derivados nitroimidazóis, em condições anaeróbicas a 37oC. O metronidazol e seus derivados foram associados aos trofozoítos em concentrações crescentes buscando determinar a DE50 e CIM.
O metronidazol apresentou DE50 = 1,96 0,13 uM e CIM = 34,10 1,95 uM. Todos os análogos testados apresentaram elevado potencial giardicida quando comparados ao metronidazol.
47
Rodrigues, Jailza Lima. "Influência da produção do fator inibidor da migração de macrófagos (MIF) na evolução da infecção por Schistosoma mansoni em camundongos." Universidade Federal de Minas Gerais, 2009. http://hdl.handle.net/1843/SAGF-8H9Q6X.
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A esquistossomose é uma doença crônica e debilitante que afeta mais de 200 milhões de pessoas em todo o mundo. A morbidade resultante da infecção por Schistosoma mansoni é predominantemente causada por reação do hospedeiro contra os antígenos dos ovos do parasito que são liberados no sistema porta e que ficam parcialmente retidos no fígado e intestino, desencadeando uma inflamação granulomatosa que pode evoluir para casos graves de fibrose hepática e hipertensão portal. A evolução da forma grave da esquistossomose é multi-fatorial e ainda não esclarecida, porém, estudos experimentais indicam que a indução e modulação da resposta imunológica durante a formação do granuloma é determinante no processo. A citocina MIF, macrophage migration inhibitory factor, é produzida por uma grande variedade de células e tecidos e desempenha um papel importante na indução do processo inflamatório, atuando na atração e ativação de linfócitos, macrófagos e eosinófilos, células essenciais na formação do granuloma esquistossomótico. Apesar de ter sido constatado que células presentes no granuloma esquistossomótico produzem e secretam MIF na esquistossomose, seu papel na evolução da doença ainda não é conhecido. Desta forma, este trabalho teve como objetivo analisar a participação desta citocina na evolução da esquistossomose murina através da análise comparativa da infecção por S. mansoni em camundongos Balb/c geneticamente deficientes na produção de MIF (MIF-/-) e seus respectivos controles Balb/c não deficientes (WT). Camundongos de ambos os grupos experimentais foram infectados subcutaneamente, 25 cercárias/animal de S. mansoni da linhagem LE, e acompanhados durante 14 semanas sendo anotados os eventuais casos de óbito em cada grupo experimental. Animais de cada grupo experimental também foram necropsiados durante a fase aguda (8 semanas) e fase crônica (14 semanas) da infecção por S. mansoni para quantificação da carga parasitária e número de ovos do parasito retidos nos tecidos ou eliminados nas fezes. Paralelamente, foram analisados parâmetros imunológicos, como resposta humoral e produção local de citocinas, e histopatológicos, como infiltração celular e deposição de colágeno no fígado e intestino dos animais necropsiados. A taxa de mortalidade induzida pela infecção por S. mansoni foi estatisticamente superior em camundongos MIF-/-em comparação com os camundongos não deficientes. A avaliação parasitológica demonstrou que o número de vermes e a deposição de ovos no fígado e no intestino dos animais experimentalmente infectados de ambos os grupos experimentais foi estatisticamente semelhante, tanto na fase aguda como na fase crônica da infecção. A análise das alterações imunológicas induzidas pela infecção por S. mansoni revelou diferenças importantes na resposta de camundongos MIF-/-. Apesar de apresentar níveis semelhantes de citocinas pró-inflamatórias (TNF- e IL-17) e modulatórias (IL-10), estes animais apresentaram uma produção reduzida de citocinas do perfil Th2, especialmente IL-4, e aumento de IFN- no fígado em resposta à infecção pelo parasito. Paralelamente, camundongos MIF -/- infectados por S. mansoni apresentaram menor indução de IgE sérica e o granuloma formado ao redor do ovo do parasito foi menor e apresentava menor infiltração de eosinófilos e macrófagos. A avaliação da deposição de colágeno no granuloma esquistossomótico, tanto na análise histopatológica como na quantificação de hidroxiprolina no fígado, indica uma quantidade diminuída de colágeno nos camundongos MIF-/- em relação aos animais WT, especialmente na fase crônica da esquistossomose. Finalmente, foi possível quantificar um aumento significativo dos níveis séricos de ALT e AST em camundongos durante a fase crônica da infecção, sendo que o aumento de ALT foi significativamente maior em camundongos MIF-/-, sugerindo maior lesão hepática nestes animais. Em conjunto, os dados apresentados indicam que MIF participa do recrutamento de eosinófilos e macrófagos e da indução da resposta do tipo 2 durante a formação do granuloma esquistossomótico, e que a formação adequada do granuloma é importante na proteção do hospedeiro contra possíveis lesões hepáticas induzidas por antígenos do ovo do parasito.
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Valim, Michel Paiva. "Alguns Phthiraptera (Insecta) parasitos de Bucconidae e Galbulidae (Aves: Piciformes) da Fazenda Água Limpa, Brasília DF." Universidade Federal de Minas Gerais, 2006. http://hdl.handle.net/1843/SAGF-6Y8MTB.
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Resumo
No período de fevereiro/dezembro de 2002, 20 espécimes de aves Piciformes, incluídas nas espécies Nystalus chachuru (Bucconidae) e Galbula ruficauda (Galbulidae) foram capturadas na Fazenda Água Limpa, Brasília, DF (15º 57´S, 47º 56´W) e vistoriadas para ectoparasitos. Um total de 56 malófagos (Insecta: Phthiraptera: Ischnocera: Philopteridae) foram recolhidos (27 e 29), fixados e montados segundo metodologia convencional, e relacionados com seus hospedeiros. Entre as três espécies encontradas, duas eram novas para a ciência, incluídas no gênero Picicola. Os machos da terceira espécie, Mayriphilopterus nystalicus Mey, 2004, foram caracterizados e ilustrados pela primeira vez. As espécies de malófagos apresentaram as seguintes prevalências: Picicola sp. n. 1 (69,2%) e Mayriphilopterus nystalicus Mey, 2004 (23,1%) coletadas sobre o João-bobo (Nystalus chacuru); e Picicola sp. n. 2 (28,6%) coletada sobre o Bico-de-agulha-de-rabo-vermelho (Galbula ruficauda). Pela primeira vez a ocorrência de uma espécie do gênero Picicola é notificada para a família Galbulidae e a ocorrência de M. nystalicus em N. chacuru é confirmada.
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Barros, Veruska Cavalcanti. "O papel de inibidores salivares e intestinais do complemento humano na proteção do intestino médio de triatomíneos." Universidade Federal de Minas Gerais, 2009. http://hdl.handle.net/1843/SAGF-8HSHH8.
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A saliva de artrópodes hematófagos contém biomoléculas envolvidas diretamente ou indiretamente no processo de hematofagia, entre as quais estão moléculas inibidoras do sistema complemento. A função mais óbvia para estes inibidores seria a proteção do intestino médio contra danos causados pelo complemento. Para investigar esta hipótese, ninfas de Triatoma brasiliensis foram forçadas a ingerir soro humano em condições nas quais os inibidores salivares eram incapazes de proteger o intestino. Nestas condições, o epitélio do intestino médio anterior foi marcado e danificado pelo complemento, causando morte celular. Uma vez que a saliva de Aedes aegypti não contém inibidores do complemento, foi formulada a hipótese da possível existência destes inibidores no intestino médio. Assim, a atividade inibitória foi investigada no intestino de A. aegypti, na saliva e no intestino de três espécies de triatomíneos (T. brasiliensis, T. infestans e Rhodnius prolixus) por meio de um método imunológico capaz de determinar o nível de deposição de alguns fatores do complemento (C1q, C3b, ou C4b) na superfície de moléculas ativadoras em microplacas. Esta metodologia permitiu identificar em quais pontos da cascata do complemento as moléculas presentes na saliva ou no conteúdo intestinal de triatomíneos podem inibir o complemento. Foi verificado que tanto a saliva quanto o conteúdo intestinal solúvel das espécies de triatomíneos estudadas não inibiram a deposição de C1q pela via clássica. O conteúdo intestinal solúvel das três espécies de triatomíneos foi capaz de inibir a deposição de C4b pela via clássica. Somente a saliva de T. brasiliensis foi capaz de inibir a deposição de C4b. Ambos, saliva e conteúdo intestinal das três espécies de triatomíneos puderam inibir a deposição de C3b nas vias clássica e alternativa. Nenhum dos materiais extraídos das membranas de células intestinais dos triatomíneos inibiu a deposição de C3b na via clássica. Como esperado, o conteúdo intestinal solúvel de A. aegypti foi capaz de inibir a deposição de C3b pelas vias clássica e alternativa. A existência de inibidores de complemento pode apresentar consequências biológicas importantes tanto para o sucesso na hematofagia dos insetos quanto para o seu papel na interação com seus parasitos.
50
Costa, Maria do Socorro Veloso Leite Ferraz da. "Dinâmica das infecções por helmintos gastrintestinais de bovinos na região do Vale do Mucuri, MG." Universidade Federal de Minas Gerais, 2007. http://hdl.handle.net/1843/SAGF-76DEWY.
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RESUMO
1-INFECÇÕES HELMÍNTICAS EM NOVILHAS GIR DURANTE O PERI-PARTO
As vacas constituem uma fonte de contaminação de ovos de helmintos para as pastagens e conseqüentemente para os bezerros. A presente pesquisa foi realizada com o objetivo de verificar o comportamento das infecções helmínticas em novilhas Gir, antes e após o parto Foram acompanhadas, a partir da 23ª semana de gestação até a 10ª semana após o parto, 30 novilhas Gir inseminadas artificialmente com sêmen de bovino da raça Holandês. Semanalmente foram realizadas colheitas de fezes de cada animal para contagens de Ovos por Grama de Fezes - OPG e coprocultura. As maiores contagens de OPG foram observadas na última semana de gestação. Nas coproculturas foram identificadas larvas de Cooperia, Haemonchus, Oesophagostomum e Trichostrongylus. As larvas de Cooperia e Haemonchus predominaram sobre os demais gêneros durante o período experimental, sendo que as de larvas de Cooperia apresentaram pico na 23ª e 33ª semanas de gestação, enquanto as larvas de Haemonchus começaram a aumentar a partir da 25ª semana de gestação. A participação das larvas de Oesophagostomum começou a aumentar a partir da 1ª semana pós-parto. Quanto às larvas de Trichostrongylus, em menor percentual em relação aos demais gêneros, apresentaram um aumento entre a 6ª e 9ª semanas após o parto.
2- CONTROLE DAS INFECÇÕES HELMÍNTICAS EM BEZERRAS GIROLANDO (F1) EM PASTAGEM ROTACIONADA, NA REGIÃO DO VALE DO MUCURI, MG.
Foram utilizados dois grupos com 42 (A e B) bezerras Girolando (F1), com seis meses de idade e infectadas naturalmente por Cooperia, Haemonchus, Oesophagostomum e Trichostrongylus. As bezerras do Grupo A receberam quatro tratamentos/ano com anti-helmínticos, segundo o manejo empregado na propriedade e do Grupo B receberam dois tratamentos estratégicos anual com ivermectina de longa ação no final e início do período chuvoso. Foram realizadas mensalmente contagens de ovos por grama de fezes (opg) e coprocultura dos animais dos dois grupos. No início do experimento os animais do Grupo A apresentaram a contagem de 500 opg e do Grupo B a contagem de 570 opg. Após os tratamentos anti-helmínticos ocorreu diminuição significativa (p < 0,05) das contagens de opg em ambos os grupos em relação às contagens anteriores, mas, em nenhum grupo ficou negativo. Estas contagens de opg permaneceram baixas durante todo o período experimental em ambos os grupos e não apresentaram entre eles diferença significativa.
Nas coproculturas foram recuperadas em ordem decrescente larvas de Cooperia, Haemonchus, Oesophagostomum e Trichostrongylus.
Para avaliar a contaminação das pastagens, foram utilizados bezerros traçadores, os quais se infectaram durante todo período experimental. Das espécies de helmintos recuperados das necropsias dos bezerros traçadores, Cooperia punctata foi encontrado em maior número, seguida por Haemonchus placei, Oesophagostomum radiatum e Trichuris discolor.
2.1-Custo-benefício de diferentes doses de anti-helmínticas em relação ao ganho de peso em bezerras Girolando (F1)
Durante dois anos, os grupos A e B com 42 bezerras cada, da raça Girolando (F1) receberam diferentes tratamentos anti-helmínticos. As bezerras do grupo A foram tratadas com anti-helmínticos, segundo manejo empregado na propriedade e as do grupo B receberam tratamentos estratégicos no final e inicio de período chuvoso. No início do experimento o peso do grupo B era de 177,7kg, 3,88% acima do peso do grupo A 171,06kg. No final do período experimental o peso médio dos animais do grupo B foi de 398,7kg, 4,35% acima do grupo A que pesou 382,05kg. Proporcionando um percentual de ganho adicional de 0,45% nas bezerras do grupo de B.