Добірка наукової літератури з теми "Rétinite pigmentaire – Thérapie génique"

Les rétinites pigmentaires, ou dystrophies rétiniennes héréditaires, sont des maladies dégénératives cécitantes d’origine génétique. La thérapie génique est une approche révolutionnaire en plein essor qui ouvre la voie au traitement de maladies jusqu’ici incurables. Une thérapie génique, le Luxturna®, a obtenu une autorisation de mise sur le marché par la FDA (Food and Drug Administration) fin 2017 et l’EMA (European Medicines Agency) fin 2018. Ce traitement, à l’efficacité démontrée, destiné aux patients porteurs d’une amaurose congénitale de Leber ou d’une rétinopathie pigmentaire en lien avec une mutation bi-allélique du gène RPE65, apporte beaucoup plus de questions que de réponses. Nous présentons, dans cette revue, les avancées actuelles, puis les défis technologiques, économiques et éthiques à surmonter pour que la thérapie génique améliore nos pratiques médicales.

La rétinite pigmentaire est une maladie héréditaire rétinienne menant à la cécité, et pour laquelle il n’existe aucun traitement. La cause la plus fréquente des formes autosomiques dominantes de la maladie est une mutation ponctuelle dans le gène de la rhodopsine (RHO) induisant la mort des photorécepteurs (PR). Pour éviter la dégénérescence des PR, la stratégie thérapeutique doit supprimer l’expression de la protéine mutante tout en restaurant celle de la protéine normale et ce à un niveau physiologique. Mon projet était de réparer le pré-ARNm RHO par la technologie SMaRT (trans-épissage (TE) médié par le splicéosome). Ceci nécessite d’introduire par transfert de gène, dans la cellule cible, un ARN exogène, appelé PTM pour molécule pre-ARNm de TE, pouvant induire un épissage en trans.Nous avons créé 20 PTM différents et obtenu un taux maximal de TE in vitro de 40% après co-transfection transitoire des constructions RHO et PTM dans les cellules HEK293T. Nous avons générés des lignées cellulaires d’expression stable de RHO normale ou mutée par transduction lentivirale. Alors que la RHO normale se localise à la membrane plasmique, la mutation induit la rétention cytoplasmique de la protéine. La transfection du PTM dans la lignée cellulaire de RHO mutée a induit du TE, capable de restaurer partiellement la localisation de la RHO réparée à la membrane.Nous avons alors testé le TE in vivo dans un modèle murin humanisé de rétinite pigmentaire. L’injection sous-rétinienne d’un AAV2/8-bRho-PTM a permis le TE in vivo, mais n’a pas suffi à prévenir la dégénérescence des PR observée par SD-OCT (technologie que nous avons améliorée au cours de ce projet)
Retinitis pigmentosa is an hereditary retinal dystrophy involving degeneration of photoreceptors leading to blindness and for which there is currently no treatment. The most frequent cause of autosomal dominant forms of the disease is a point mutation in the rhodopsin gene (RHO). Therapeutic strategy should both suppress mutant protein expression and restore that of the normal one to physiologic level to prevent photoreceptor degeneration. My PhD project was to repair RHO pre-mRNA by SMaRT (Spliceosome Mediated RNA Trans-splicing) technology. This implies to introduce by gene transfer into the target cell an exogenous RNA, called PTM for Pre-mRNA Trans-splicing Molecule. This one was able to promote a splice reaction in trans, leading to the replacement of the mutated exons. We designed 20 different PTM and obtained in vitro a maximum trans-splicing rate of 40% after transient co-transfection of PTM and RHO constructs in HEK293T cells. We then created WT or mutated RHO stable expression cell lines by lentiviral transduction. Mutation induced retention of the protein into the cytoplasm, while the WT RHO was localized to the plasma membrane. We observed that the PTM transfection in the mutated RHO cell line induced trans-splicing, which was able to partially restore localization to the plasma membrane of repaired RHO. We then tested trans-splicing in vivo in mRho+/- RHO P347S+ mice, a humanized heterozygous mouse model of retinitis pigmentosa. After subretinal injection of AAV2/8-bRho-PTM we observed that trans-splicing occurred in vivo. Unfortunately we did not observe by SD-OCT (a technology that we improve in this project) any rescue of the degenerative phenotype

Notre projet consiste à modéliser une forme spécifique de rétinite pigmentaire (RP) en utilisant des cellules iPS de patients. Nous avons d'abord optimisé un protocole de différenciation pour obtenir à partir de cellules iPS des organoïdes rétiniens avec une organisation structurelle plus proche de la rétine in vivo, permettant une maturation avancée des photorécepteurs. Cet outil nous a permis de récapituler entièrement le phénotype RP (dégénérescence des bâtonnets et des cônes), observé chez les patients présentant une mutation du gène RHODOPSINE, codant pour le pigment visuel. Nous avons ensuite utilisé la même approche pour comprendre la pathogénicité des RP liées à des mutations du gène PRPF31, codant pour un facteur d'épissage. Les organoïdes rétiniens ont résumé la dégénérescence des bâtonnets et la perte secondaire des cônes, observées chez les patients. Les cellules de l'épithélium pigmenté de la rétine présentaient également des défauts organisationnels et fonctionnels. Ces phénotypes dégénératifs rétiniens sont corrélés à un niveau d'expression plus faible de la protéine PRPF31, liant la pathogénicité à un mécanisme d'haploinsuffisance. Nous avons donc développé une stratégie d'augmentation du gène, en apportant une copie fonctionnelle de PRPF31 par CRISPR/Cas9 ou en utilisant un vecteur AAV, qui ont permis le sauvetage de la dégénérescence des cellules rétiniennes
Generation of retinal cells from human iPS cells offers the opportunity to study the effects of specific disease-causing mutations in an in vitro human system. Our project consisted of modeling specific form of Retinits Pigmentosa (RP) using patient iPS cells. We first optimized a differentiation protocol to obtain retinal organoids with a structural organization closer to the retina in vivo, allowing advanced photoreceptor maturation. Using this tool, we were able to fully recapitulate the RP phenotype (degeneration of rods and cones), observed in patients with mutation in RHODOPSINE gene, coding for the visual pigment. Then, we used the same approach to understand the pathogenicity of RP related to mutations in PRPF31 gene, coding for a splicing factor. Retinal organoids summarized the degeneration of mature rods and secondary loss of cones, as observed in patients. Furthermore, PRPF31-mutated retinal pigmented epithelial cells exhibited also structural and functional defective phenotype. These retinal degenerative phenotypes are correlated with a lower level expression of PRPF31 protein, linking causal mutations to an haploinsufficiency mechanism. We thus have developed a gene augmentation strategy, bringing an additional wild type copy of PRPF31 through CRISPR/Cas9 or using an AAV vector, that both allowed the rescue of retinal cell degeneration

La dystrophie de type bâtonnets-cônes (RCD) est un groupe hétérogène de maladies représentant le type principal de dégénérescence rétinienne héréditaire. La majorité des gènes mutés dans RCD sont exprimés dans les photorécepteurs de bâtonnets et dans l'épithélium pigmentaire rétinien. Le phénotype courant du RCD est caractérisé par la dégénérescence des bâtonnets suivie de celle des cônes périphériques, ce qui laisse les patients avec une vision en tunnel aux stades intermédiaires et une cécité aux derniers stades de la maladie. Une étude antérieure avait montré que l’Halorhodopsin, une pompe à chlorure d’origine microbienne, exprimée dans des cônes de souris, rétablissait l’activité de ces cellules avec une intensité lumineuse élevée pour l’activation en raison du manque d’amplification du signal intracellulaire. Afin de développer une stratégie de réactivation des cônes photosensible, nous avons d'abord examiné l'expression des éléments de la cascade de phototransduction dans les cônes lors de la dégénérescence dans deux modèles de souris RCD. Dans les deux modèles murins, nous avons constaté que l'opsine et l'arrestine migraient dans les corps cellulaires du cône après la dégénérescence du segment externe. Nous avons donc émis l’hypothèse que la réactivation du cône basée sur la signalisation d’opsine de cône pourrait être réalisable, ce qui nous permettra de retrouver une vision de haute sensibilité. Nous avons exprimé un canal cible activé par les protéines G recrutées par l'opsine des cônes dans des cônes en dégénérescence et nous avons obtenu des améliorations significatives de la fonction visuelle comme démontré par l'électrorétinographie et les réponses de comportement. Cette nouvelle approche a le potentiel de maintenir ou de restaurer une vision haute en couleur et en acuité ne nécessitant que de faibles intensités lumineuses. De plus, nous avons également montré que cette approche innovante est universelle et applicable chez les patients atteints de RDC
Rod-cone dystrophy (RCD) is a heterogeneous group of diseases accounting for the major type of inherited retinal degenerations. The majority of RCD mutated genes are expressed in the rod photoreceptors and in the retinal pigment epithelium. The common RCD phenotype is characterized by the degeneration of rods followed by degeneration of peripheral cones, which leave the patients with tunnel vision in mid stages and blindness in the latest stages of disease. A previous study showed that Halorhodopsin, a microbial chloride pump, expressed in mouse cones, restored these cells’ activity albeit with high light intensities for activation due to the lack of intracellular signal amplification. In order to develop a light-sensitive cone reactivation strategy, we first examined the expression of the phototransduction cascade elements in cones during degeneration in two RCD mouse models. In both mouse models, we found that opsin and arrestin migrate to the cone cell bodies after outer segment degeneration. We thus hypothesized that cone reactivation based on cone opsin signalling may be feasible, which in turn will allow us to recover high sensitivity vision. We expressed a target channel activated by G proteins recruited by cone opsin in degenerating cones and obtained significant improvements in visual function as demonstrated by electroretinography and behaviour. This new approach has the potential to maintain or restore, high acuity and color vision requiring only low light intensities. Moreover, we also showed that this innovative approach is universal and applicable in patients suffering from RDC

Les dystrophies rétiniennes héréditaires (DRH) sont des maladies qui conduisent à une perte de la vision au cours de leur évolution. Les premiers essais cliniques utilisant la thérapie génique pour traiter ces maladies ont été réalisés et apportent des résultats encourageants. En amont de telles études, les essais précliniques s'effectuent le plus souvent sur modèle animal. Cependant, pour un certain nombre de DRH, il n'existe pas de modèle animal approprié ce qui compromet l'arrivée d'un traitement à un stade clinique. C'est le cas de la Choroïdérémie, qui représente 2% des DRH. La choroïdérémie est caractérisée par une perte de la vision nocturne dès la petite enfance et conduit à la cécité autour des 40-50 ans. Son diagnostic précoce et son évolution lente résultent en une grande fenêtre thérapeutique qui fait de la choroïdérémie une bonne candidate pour la thérapie génique. Sur le plan génétique, la maladie est causée par une mutation dans le gène CHM qui est localisé sur le chromosome X et code pour la Rab Escort Protein 1 (REP1). Cette protéine est impliquée dans le processus de prénylation de petites protéines GTPases, les protéines Rab. Afin de pallier au manque de modèle animal, nous avons généré au cours de ce travail de thèse, un modèle cellulaire humain de la choroïdérémie pour évaluer l'efficacité d'un protocole de thérapie génique sur le tissu réellement atteint in vivo. Pour cela, nous avons reprogrammé des fibroblastes de patient CHM-/y en cellules souches pluripotentes induites (iPS), que nous avons ensuite différenciées en Epithélium Pigmentaire Rétinien (EPR). Nous avons caractérisé cet EPR, montrant que c'est une couche monocellulaire polarisée possédant une morphologie et une expression de marqueurs caractéristiques. De plus, ce tissu est fonctionnel, sur le plan du transport de fluide et de la phagocytose, et possède le même phénotype biochimique que celui observé chez les patients. Dans un but de thérapie génique et afin d'évaluer le vecteur viral le plus efficace sur nos cellules, j'ai testé un panel de 5 sérotypes d'AAV et démontré que l'AAV2/5 est le plus efficient pour transduire un EPR dérivé de cellules iPS humaines. J'ai ensuite utilisé un AAV2/5-CAG-CHM afin d'évaluer l'efficacité fonctionnelle du vecteur et j'ai pu montrer qu'outre une expression correcte du transgène, le traitement de cellules de patients déficientes pour REP1 avec ce vecteur permet de restaurer une activité normale de prénylation. Nous avons donc démontré la supériorité d'efficacité de transduction de l'AAV2/5 dans des cellules d'EPR humain et soulignons le potentiel d'un modèle d'EPR pathologique dérivé de cellules iPS pour apporter une preuve de concept de thérapie génique en absence d'un modèle animal approprié
Inherited retinal dystrophies (IRDs) lead to a progressive vision loss. The first clinical trials using gene transfer to treat such diseases have been performed with positive results. Prior to clinical trials, preclinical studies are usually performed on animal models. However, for many IRDs, appropriate animal models do not exist, which compromises their progress towards a clinical trial. An example of an IRD that lacks an appropriate model is choroideremia, which represents 2% of IRD patients. It is characterized by night blindness in childhood, followed by progressive loss of the visual field resulting in blindness by 40–50 years of age. Its early diagnosis and slow evolution result in a large therapeutic window making choroideremia a good candidate for gene therapy. Genetically, the disease is caused by a mutation in the CHM gene located on the X chromosome and encoding the Rab Escort Protein 1 (REP1). This protein is involved in the prenylation of small GTPases, the Rab proteins. To palliate the lack of an animal model, we generated a human cellular model of choroideremia in order to evaluate the efficacy of a gene therapy approach in the tissue that is affected in vivo.Towards this aim, we reprogrammed REP1-deficient fibroblasts from a CHM-/y patient into induced pluripotent stem cells (iPScs), which we differentiated into retinal pigment epithelium (RPE). We characterized the iPSc-derived RPE that is a polarized monolayer with a classic morphology, expresses characteristic markers, is functional for fluid transport and phagocytosis, and mimics the biochemical phenotype of patients. In terms of gene therapy and to evaluate the most efficient viral vector, I assayed a panel of 5 adeno-associated virus (AAV) vector serotypes and showed that AAV2/5 is the most efficient at transduce the iPSc-derived RPE. I then transduced the iPSc-derived RPE of a choroideremia patient with an AAV2/5-CAG-CHM and demonstrated that this vector is able to restore a normal prenylation function to the cells.To conclude, I demonstrated the superiority of the transduction efficiency of AAV2/5 in the iPSc-derived RPE and highlight the potential of a diseased RPE model derived from iPS cells to provide a proof of concept of gene therapy in the absence of a suitable animal model

Le dysfonctionnement progressif et la dégénérescence des photorécepteurs de la rétine sont à l’origine de la majorité des cécités de l’adulte dans les pays industrialisés. De nombreuses altérations génétiques à l’origine des formes monogéniques et complexes de dégénérescence ont été identifiées, mais n’expliquent que la moitié des cas. Certaines concernent des gènes contrôlant le développement, et dont l’expression perdure dans la rétine mature. Leurs fonctions tardives sont encore très mal connues. C’est le cas du gène Otx2. Ce gène code un facteur de transcription à homéodomaine qui apparaît essentiel depuis la formation de la vésicule optique jusqu’à la maturation des cellules bipolaires et des photorécepteurs. Plusieurs mutations associées à des anomalies oculaires graves, dont la rétinite pigmentaire, ont été décrites chez l’homme. Pourtant, on ignore tout du réseau génétique qu’il contrôle. Les travaux que nous avons menés dans le cadre de cette thèse visent à comprendre les fonctions du gène Otx2 dans la rétine mature de souris. Ce gène est exprimé dans trois types cellulaires : l’épithélium pigmentaire rétinien (RPE), les photorécepteurs et les cellules bipolaires. Son ablation, exclusivement restreinte à ses domaines d’expression (self-KO), a été induite chez l’adulte grâce à des lignées de souris créées au laboratoire. Le système est extrêmement efficace : Otx2 est détruit dans plus de 95% des cellules qui l’expriment. Ceci entraîne une dégénérescence progressive et exclusive des photorécepteurs par apoptose, qui commence 20 jours après le KO, et culmine à 30 jours. Au bout de quatre mois, la totalité des photorécepteurs a disparu. Ce modèle génétique est unique, car il offre un contrôle temporel précis. Surtout, i donne la possibilité d’observer la phase précédant la mort des photorécepteurs. C’est pendant cette phase infra-clinique que se manifestent les conséquences primaires de la perte de fonction d’Otx2. Nous avons utilisé cet avantage pour réaliser une étude cinétique du transcriptome rétinien au décours d’invalidation. Cette analyse a permis d’identifier 71 gènes dont l’expression est modifiée par l’invalidation d’Otx2. La variation de 37 de ces gènes a été validée par RT-qPCR. Parmi eux, une majorité montre une cinétique très fortement corrélée à la disparition d’Otrx2, et représente des cibles directes potentielles. Des gènes associés au stresse cellulaire sont induits après un délai de quelques jours, révélant un dépassement des cellules à faire à ce changement. Sur le plan fonctionnel l’enregistrement de l’activité rétinienne indique que les cellules du RPE présentent rapidement des anomalies de polarisation suivant le self-KO. Cette observation, ajoutée à des données d’histologie et d’expression, suggère fortement une origine non autonome de la dégénérescence des photorécepteurs, et qui serait liée principalement au dysfonctionnement du RPE. Afin de vérifier cette hypothèse, nous avons déclenché une invalidation du gène Otx2 exclusivement dans les cellules du RE de la rétine adulte à l’aide d’infections lentivirales topiques. Cette expérience reproduit le syndrome neurodégénératif du modèle de self-KO. Réciproquement, l’expression spécifique d’Otx2 dans le RPE de rétine self-KO prévient de manière efficace la dégénérescence des photorécepteurs. Ainsi, parmi les fonctions dirigées par Orx2 dans la rétine adulte, celles du RPE sont nécessaires et suffisantes au maintien des photorécepteurs. Le séquençage massif de la chromatine de RPE immunoprécipitée par Otx2 nous a permis d’identifier 24 gènes directement régulés. Ces gènes remplissent des fonctions nécessaires à l’homéostasie du RPE telles que la mélanogenèse, le métabolisme des rétinoïdes, la régulation du PH ou la concentration de métaux. Ils constituent d’excellents candidats pour les formes monogéniques et complexes de dégénérescence des photorécepteurs de type non autonome
The major cause of adult blindness in industrialized countries is the progressive dysfunction and death of retinal photoreceptors. Mutations involved in both hereditary and complex forms of degeneration have been identified. Yet, a significant part of hereditary forms still misses genetic explanation and the number of loci that influence susceptibility to age-related macular degeneration (AMD) is expanding. Several genes involved in photoreceptor degeneration play key functions during development. Although their expression is maintained in the mature retina, their function is poorly known. Among these, Otx2 gene encodes a homeobox transcription factor essential for eye development, from eye territory patterning to photoreceptor and bipolar cell maturation. In human, several mutations in Otx2 locus have been associated to ocular malformation and occasionally to retinitis pigmentosa. In spite of its importance, Otx2 downstream molecular network is poorly defined. This work aimed to elucidate Otx2 functions in the mouse mature retina. In this tissue, Otx2 is found in the nucleus of RPE, photoreceptors, and bipolar cells. To explore its functions at a late stage, we took advantage of a model coined Otx2 self-KO, which allows time-controlled and efficient knockout of Otx2 only in cells that express it. Otx2 deletion leads to a relatively slow, still complete, photoreceptor degeneration by apoptosis starting 20 days after Otx2 ablation, and reaching a peak after 30 days. After 4 months, all photoreceptors have disappeared. Time-monitored gene ablation allows access to the period preceding photoreceptor degeneration, in which primary consequences of Otx2 self-KO occur. To shed light on the early molecular events leading to photoreceptor denegation, we analyzed the retina and RPE transcriptome using DNA microarrays at 0, 2, 4 an d8 days following Otx2 ablation? We identified 71 deregulated genes after Otx2 self-KO among which 37 were confirmed by RT-qPCR. Most of deregulated genes demonstrated a kinetic strongly correlated to Otx2 clearance, likely representing direct targets. After a 4 day delay, genes associated with cell stress signalling were induced, uncloaking cellular response to primary perturbation

Les dystrophies rétiniennes héréditaires (DRH) sont un groupe de maladies génétiquement et cliniquement hétérogènes, lesquelles se caractérisent par une perte progressive de la vision. La choroïdérémie (CHM) est une choriorétinopathie qui représente environ 3% des DRH. Elle se caractérise par une cécité nocturne durant l’enfance suivie par une perte du champ visuel périphérique lente et progressive. Cela aboutit à une cécité vers l’âge de 40 à 50 ans. Généralement, la vision centrale demeure préservée plus longtemps. Génétiquement, la maladie est causée par des mutations dans le gène CHM localisé dans le chromosome X qui code pour la Rab Escort Protein 1 (REP1).Cette protéine est impliquée dans la prénylation des Rab GTPasas qui régulent le trafic vésiculaire au sein de la cellule. La plupart des mutations responsables de la maladie sont des mutations pertes de fonction. La conséquence de ces mutations est l’absence de REP1 entrainant un défaut de prénylation des Rabs. Ce qui cause la dégénérescence des photorécepteurs, de l’épithélium pigmentaire rétinien (EPR) et de la choroïde. À ce jour, il n’existe pas de thérapie pour la CHM. Cependant, le diagnostic précoce de la maladie et son évolution lente donnent une fenêtre thérapeutique large et en font un candidat idéal pour la réussite d’un traitement.En raison de l’absence d’un modèle animal pertinent pour tester de nouvelles thérapies pour cette maladie, nous avons développé un modèle cellulaire humain d’EPR in vitro dérivé des cellules pluripotentes induites propres au patient. Ce tissu est morphologiquement et fonctionnellement représentatif de l’EPR in vivo et reproduit les défauts biochimiques de prénylation présents dans la CHM. De ce fait, il s’agit d’un modèle puissant pour évaluer l’efficacité de différentes approches thérapeutiques. Dans cette perspective, nous avons étudié une approche de thérapie génique par AAV2/5 afin de fournir le gène CHM dans le cas particulier de mutation faux sens et l’utilisation d’une translational read-through inducing drug (TRID) PTC124 pour le traitement des mutations non-sens.J’ai démontré pour la première fois la faisabilité de la thérapie génique pour la CHM dans le cas d’une expression résiduelle de REP1 muté, permettant de considérer les patients porteurs de mutations faux sens comme éligible à des essais cliniques de thérapie génique. De plus, j’ai démontré que l’efficacité de PTC124 peut être dépendante du type cellulaire. Dans l’ensemble, mes résultats suggèrent que l’efficacité de la molécule semblerait dépendre de la conservation de l’acide aminé muté et de sa localisation dans le domaine fonctionnel de REP1. Nous avons ainsi mis en valeur que le contexte génétique devrait être pris en compte dans la perspective d’une thérapie avec TRID pour cette maladie ainsi que d’autres pathologies.Pour conclure, j’ai souligné le potentiel prédictif du modèle d’EPR dérivé d’iPSc propre au patient pour évaluer de nouvelles approches thérapeutiques en l’absence d’un modèle animal approprié avant les essais cliniques
Inherited retinal dystrophies (IRDs) are a class of genetically and clinically heterogeneous diseases, which are characterized by a progressive loss of vision. Choroideremia (CHM) is a chorioretinopathy, which accounts for ~3% of all IRDs. It is characterized by night blindness in childhood, followed by slow and progressive loss of the peripheral visual field. This results in legal blindness by the fourth to fifth decade of life. Generally, central vision is preserved till late in life. Genetically, the disease is caused by mutations in the CHM gene located on the X chromosome and encoding the Rab Escort Protein 1 (REP1). This protein is involved in the prenylation of Rab GTPasas, which regulate vesicular cell trafficking. Most of the disease-causing mutations are loss-of-function and the absence of REP1 leads to a Rab prenylation defect and subsequent degeneration of photoreceptors, retinal pigment epithelium (RPE) and underlying choroid. To date, an established therapy is not available for CHM, but the early diagnosis and its slow evolution provide a large therapeutic window, that renders this disease a good candidate for successful treatment.In order to palliate the lack of a pertinent animal model for testing novel disease therapies, we developed a human cellular model using patient-specific induced pluripotent stem cells (iPSc)-derived RPE. This tissue is morphologically and functionally representative of the RPE in vivo, and reproduces the biochemical prenylation defect present in CHM. Therefore, it is a powerful model to evaluate the efficacy of different therapeutic approaches. Along this line, we investigated a gene augmentation approach, via AAV2/5 delivery of the CHM gene in the particular case of a CHM missense mutation, and the use of the translational read-through inducing drug (TRID) PTC124 for treating CHM nonsense mutations.I demonstrated for the first time the feasibility of gene augmentation therapy for CHM in the case of residual mutated REP1 expression, suggesting that missense-carrying patients can be considered for inclusion in clinical gene therapy trials. Moreover, I showed that the efficiency of PTC124 may be dependent on the cell type. In addition, my results suggest that drug efficiency likely depends on the conservation of the mutated amino acid residue and its localization with regards to REP1 functional domains. We thus highlight that genetic considerations should be taken into account when considering TRID therapy for this and other disorders.Taken together, I highlighted the predictive potential of the patient-specific iPSc-derived RPE model for screening of novel and varied therapeutic approaches in the absence of a suitable animal model prior to clinical translation

La rétinite pigmentaire est une maladie neurodégénérative héréditaire de la rétine entraînant la cécité. Des technologies restaurant la vision ont vu le jour comme les neuroprothèses visuelles et la thérapie optogénétique. Leur limitation est la résolution spatiale. La neuroprothèse visuelle IRIS I de Pixium Vision et la thérapie optogénétique de Gensigth Biologics permettent une stimulation à haute fréquence temporelle. Or, augmenter la résolution temporelle mène à une stimulation plus naturelle pouvant compenser la résolution spatiale limitée. Notre étude évalue l’apport de la vision restaurée de ces dispositifs et de la résolution temporelle. Des sujets sains portant des lunettes de stimulation simulant la vision restaurée ont réalisé des tâches quotidiennes à 60 Hz et 1440 Hz et différentes qualité de restauration. Les dispositifs permettent la réalisation des tâches proposées, avec plus de facilité pour les patients traités par thérapie optogénétique. Les patients pourraient donc recouvrir une autonomie dans la réalisation de tâches quotidiennes. Nous montrons que la qualité de la stimulation influence les performances des tâches nécessitant une acuité relativement bonne. La réalisation des tâches n’a pas été facilitée par l’augmentation de la résolution temporelle. Selon la littérature, cette dernière améliore la qualité de la perception. Nous avons élaboré une tâche de discrimination de direction de mouvement à trois vitesses. Dès 120 Hz, la résolution temporelle facilite la tâche à vitesse moyenne et élevée. Par conséquent, les vitesses des scènes visuelles de notre précédente étude étaient trop faibles pour que la résolution temporelle améliore la perception
Retinitis Pigmentosa is an inherited retinal degenerative disease leading to blindness. Vision restoration techniques have been developed as visual neuroprostheses and optogenetic therapy. The limitation of these devices is their spatial resolution. The visual neuroprosthesis IRIS I developed by Pixium vision and Gensight Biologics’ optogenetic therapy allow the visual information to be captured and stimuled with a high temporal resolution. Increasing the temporal resolution leads to a more natural vision, and should overcome the low spatial resolution. Our study evaluate the contribution to these techniques and the temporal resolution, towards usefull vision. Healthy subjects wearing goggles simulating vision arising from the devices were asked to perform everyday tasks at 60Hz and 1440Hz. The devices allow the tasks to be carried out, with greater ease for patients who would be treated with optogenetic therapy. Patients could then regain autonomy in performing daily tasks. We also show that the quality of stimulation influences tasks requiring relatively sharpness. We have not identified any facilitation in the accomplishment of these tasks through increased temporal resolution. According to the literature, an improvement in visual perception should accompany the increase in temporal resolution. As such, we set up a parametric study of the temporal frequency through a task of directional discrimination at three different speeds. From 120 Hz, the temporal resolution facilitates the task at medium and high speed. Based on these results, speeds of the visual scenes from our previous experiment were too low for temporal resolution to improve the perception

Les ciliopathies rétiniennes sont un groupe de maladies rares causés par des mutations de gènes ciliaires. Les défauts des gènes ciliaires peuvent causer des défauts de trafic de protéines et induit l'apoptose des cellules photoréceptrices causés par le stress du réticulum endoplasmique (RE). On a étudié ciliopathies rétiniennes par modèle mourin, amaurose congénitale de Leber, rétinopathie pigmentaire liée à l’X, syndrome de Bardet-Biedl, syndrome d’Alström. Les souris Bbs1-/- , Bbs10-/- et CEP290-/- ont monté une diminution de la fonction rétinienne et sont causée par ER stress. Les souris Rd9/y et Alms1foz/foz présentent une apparition tardive et avec un faible taux de dégénérescence rétinienne et ils pourrait être causée par d'autres mécanismes. Le traitement GV-Ret basé sur le stress du RE pourrait sauver à la fois la fonction de et la morphologie de la rétine dans souris BBS
Retinal ciliopathies are a group of rare diseases caused by mutations of ciliary genes. Defects in ciliary genes can cause defects in proteins traffics and induces apoptosis of photoreceptor cells caused by stress of the endoplasmic reticulum (ER) .We studied retinal ciliopathies by mice models, Leber congenital amaurosis, Xlinked retinitis pigmentosa, Bardet-Biedl syndrome and Alström Syndrome. The Bbs1-/-, Bbs10-/- and CEP290-/- mice exhibited a decrease in retinal function caused by ER stress. Rd9/y and Alms1foz/foz mice showed a late onset and a low rate of retinal degeneration and they could be caused by other mechanisms. The GV-Ret treatment based on ER stress could save both the function and morphology of the retina in BBS mice

Malgré des recherches intensives portant sur l’hérédité et les aspects biologiques de la rétinite pigmentaire (RP), peu de recherches fondées ont porté sur les aspects psychologiques. Ces quelques études suggèrent que les personnes atteintes de rétinite pigmentaire s’adaptent différemment à la déficience visuelle. Le but de la présente étude était donc de vérifier si les personnes atteintes de rétinite pigmentaire s’adaptaient différemment d’un point de vue psychologique par rapport à des personnes ayant une déficience visuelle causée par une autre pathologie. Des entrevues téléphoniques incluant des personnes ayant la rétinite pigmentaire, la rétinopathie diabétique (RD) et l’albinisme ont été menées. Cinq questionnaires ont été utilisés afin d’évaluer le bien-être psychologique et de recueillir les données démographique. Les résultats de la première étude démontrent qu’il n’existe aucune différence entre les individus atteints de rétinite pigmentaire et ceux ayant d’autres pathologies visuelles d’un point de vue « bien-être psychologique ». En fait, les facteurs démographiques, la baisse de vision, les fluctuations et le type de perte de vision semblent être les seuls facteurs directement corrélés à l’adaptation et au bien-être psychologique. Dans la deuxième étude, aucune différence n’a pu être établie entre les trois types de pathologies. Ce sont plutôt, des facteurs comme la perception des capacités fonctionnelles, l’identité personnelle, l’appréhension de la perception sociale et le niveau d’indépendance qui étaient davantage reliés au bien-être psychologique associé à la déficience visuelle. Les résultats de cette étude suggèrent que les personnes atteintes de Rétinite pigmentaire ne présentent pas de différences au niveau du bien-être psychologique et de l’adaptation. Les facteurs démographiques et psychologiques sont plus importants que la pathologie elle-même.
While there is extensive research on retinitis pigmentosa (RP) focusing on biological and hereditary aspects of the disease, little research regarding psychological adjustment has been conducted. These few studies suggest that people with RP adapt differently to vision impairment. This study investigated whether those with RP adapt differently to vision loss/impairment than those with other vision disorders. Telephone interviews of those with RP, diabetic retinopathy (DR), and albinism were conducted. Demographic information was gathered and psychological wellbeing was assessed using the Visual Function-14, Centre of Epidemiology Studies Depression-10 symptoms index, Impact of Vision Impairment Profile, Brief COPE, and Adaptation to Vision Loss Scale. In Experiment I it was found that individuals with RP did not differ from those with other diagnoses on any of the measures of psychological wellbeing and adaptation. Rather, demographic factors, visual factors such as declining and fluctuating vision, and pattern of vision loss, were better correlates of adaptation to and psychological wellbeing associated with vision loss/impairment. In Experiment II there was no difference found between those with RP and other diagnoses on any of the measures. Rather, factors such as perceived visual ability, self-identity, fear of social stigma and level of dependence were more closely related to adaptation to and psychological wellbeing associated with vision loss/impairment. The results of this study suggest that individuals with RP do not differ from those with other vision disorders in their adaptation to and psychological wellbeing associated with vision loss/impairment, but that other demographic, visual and psychological factors are more important.