Добірка наукової літератури з теми "Reprogrammation fonctionnelle"

Les macrophages associés aux tumeurs (TAMs) sont d'importants composants cellulaires du microenvironnement tumoral, qui présentent des fonctions immunosuppressives et sont associés à un mauvais pronostic dans la plupart des cancers. La reprogrammation fonctionnelle de ces macrophages aux propriétés pro-tumorales vers un phénotype pro-inflammatoire aux propriétés anti-tumorales favorise le développement d'une réponse anti-tumorale. Notre équipe a récemment étudié la capacité des radiations ionisantes à reprogrammer les TAMs vers un phénotype pro-inflammatoire. L'augmentation de la capacité des rayonnements ionisants à reprogrammer les TAMs en macrophages pro-inflammatoires est un objectif à atteindre pour améliorer l'efficacité des traitements du cancer.C'est dans ce contexte que mes travaux de thèse ont permis (i) de poursuivre la caractérisation des mécanismes moléculaires impliqués dans la reprogrammation radio-induite des macrophages, (ii) d'identifier le rôle du récepteur purinergique P2Y2 comme un modulateur négatif de la reprogrammation pro-inflammatoire des macrophages ; (ii) de caractériser les bases moléculaires de ce processus biologique et (iii) de proposer d'inhiber l'activité biologique du récepteur purinergique P2Y2, afin d'augmenter la capacité des rayonnements ionisants à déclencher l'activation pro-inflammatoire des macrophages
Tumor-associated macrophages (TAMs) are key components of the tumor microenvironment that display immunosuppressive functions and are associated with poor prognosis in most cancers. The functional reprogramming of these macrophages with pro-tumor properties towards a proinflammatory phenotype with anti-tumor properties promotes the development of an anti-tumor response. Our team recently studied how ionizing radiation modulates macrophage reprogramming towards a proinflammatory phenotype. Increasing the ability of ionizing radiation to reprogram TAMs into proinflammatory macrophages is a key objective to improve the effectiveness of cancer treatments.In this context, my thesis work enabled (i) to further characterize the molecular mechanisms involved in the radiation-induced macrophage reprogramming, (ii) to identify the role of the purinergic receptor P2Y2 as a negative modulator of the proinflammatory reprogramming of macrophages; (ii) to characterize the molecular bases of this biological process, and (iii) to propose the inhibition of the biological activity of P2Y2 receptor, to increase the ability of ionizing radiation, triggering the pro-inflammatory activation of macrophages

Les racines de la plupart des arbres forment des symbioses ectomycorhiziennes avec les champignons mutualistes du sol. Le basidiomycète L. bicolor (Maire) P.D. Orton secrète de petites protéines effectrices (MiSSP) afin d'établir les structures symbiotiques. Toutefois, les protéines de l'hôte ciblées par les MiSSPs ne sont pas connues. Dans notre étude, nous démontrons, à l'aide du système double hybride chez la levure (Y2H), que la protéine MiSSP7 interagit avec les co-récepteurs de l'acide jasmonique (AJ) JAZ5 et JAZ6 de P. trichocarpa. Cette interaction entraine un blocage de la voie de signalisation de l'AJ et favorise le développement symbiotique. Des transformants de L. bicolor, dont l'expression de MiSSP7 est fortement réduite, ne sont plus capables de mycorhizer les racines du peuplier. Une variation transgénique de la transcription de PtJAZ6 ou l'inhibition de la voie de signalisation de l'AJ complémente ce phénotype. Nous avons également montré que la protéine PtJAZ6 interagit avec une protéine de type 14-3-3 et un facteur de transcription de type MYC, formant un complexe de régulation. Deux autres protéines effectrices, MiSSP8 et MiSSP17, sont sécrétées et essentielles au développement symbiotique. Les résultats des analyses Y2H suggèrent que MiSSP8 et MiSSP17 pourraient aider au contournement des réactions de défense de la plante-hôte. Au cours du développement symbiotique, le champignon est le siège d'une reprogrammation génétique importante. Les facteurs de transcription (TFs) sont les principaux acteurs de ces changements génétiques. Nous avons donc étudié les TFs de L. bicolor afin d'obtenir un inventaire complet des TFs régulés par la mycorhization
Roots of most trees form symbiosis with mutualistic soil-borne fungi. The ectomycorrhizal basidiomycete L. bicolor (Maire) P.D. Orton relies on mycorrhizal-induced small secreted proteins (MiSSP) to establish symbiotic tissues in the host-plant. The host proteins targeted by these fungal effectors are yet unknown. In the present study, we used the binary yeast two-hybrid (Y2H) system to determine direct interactions between MiSSP7 and the plant proteins in the L. bicolor-P. trichocarpa ectomycorrhizae. We showed that MiSSP7 interact with the jasmonic acid (JA) co-receptors JAZ5 and JAZ6 of P. trichocarpa, blocking JA signaling and promoting mutualism. L. bicolor transformants with severely reduced expression of MiSSP7 did not enter into symbiosis with poplar roots, a phenotype that could be complemented by transgenically varying the transcription of PtJAZ6 or through inhibiting JA signalling. Additional Y2H assays showed that PtJAZ6 protein form a regulatory complex involving 14-3-3 protein(s) and MYC transcriptional factors. Two others L. bicolor effector-like proteins, MiSSP8 and MiSSP17, are secreted and are essential for the symbiosis development. Y2H assays suggested that these MiSSPs interact with plant proteins involved in plant defence signalling pathways. During symbiosis development, L. bicolor experiences important genetic reprogramming required for root colonization. Transcription factors (TFs) are key players of these genetic changes. Here, we developed high throughput analysis of TFs in L. bicolor to obtain a comprehensive inventory of significantly regulated transcription factors in ECM

La trans-différenciation des cellules musculaires lisses vasculaires (CMLV) vers un phénotype migratoire, prolifératif et sécrétoire joue un rôle clé dans la progression des lésions athéromateuses et l’hyperplasie intimale qui sous-tend la resténose post-angioplastie. Nos travaux suggèrent que la transition phénotypique des CMLV implique, chez le rat, la souris et l’Homme, l’expression de novo de l’Adénylyl Cyclase 8 (AC8), une enzyme catalysant la synthèse de l’AMP cyclique (AMPc) (Clément et al., 2006; Gueguen et al., 2010; Keuylian et al., 2012; résultats non publiés). Ce travail de thèse avait pour objectif d’appréhender le rôle de l’AC8 dans la trans-différenciation des CMLV en évaluant son impact sur la signalisation AMPc. L’étude des dynamiques de production du second messager avec le biosenseur T-Epac-VV montre que l’AC8 inhibe les hausses d’AMPc dans les CMLV trans-différenciées à l’Interleukine-1β. Cette fonction non canonique est assurée par de nouvelles isoformes d’AC8 que nous avons identifiées et clonées, les AC8E1 à 4, qui partagent une délétion des cinq premiers domaines transmembranaires. Des dosages de l’accumulation d’AMPc couplés à des expériences de co-immunoprécipitation et d’immunocytochimie révèlent que les AC8E exprimées de façon hétérologue dans des cellules HEK s’hétéro-dimérisent avec les AC en transit dans le réticulum, suppriment leur activité enzymatique et préviennent leur adressage à la membrane plasmique. L’induction des AC8E dans les CMLV trans-différenciées pourrait prévenir les effets vasculoprotecteurs de l’AMPc (Douglas et al., 2005; Katakami et al., 2010), favorisant ainsi l’acquisition et/ou le maintien du phénotype synthétique
The phenotypic switch of vascular smooth muscle cells (VSMC) towards a migratory, proliferative and secretory state plays a key role in atherosclerotic plaque expansion and intimal hyperplasia leading to post-angioplasty restenosis. Our previous results suggest that the trans-differentiation of rat, mouse and human VSMC involves the de novo expression of the Adenylyl Cyclase 8 (AC8), an enzyme that catalyzes the synthesis of cyclic AMP (cAMP) (Clement et al., 2006; Gueguen et al., 2010; Keuylian et al., 2012; unpublished results). The main goal of my PhD was to decipher the impact of AC8 expression on cAMP signaling in trans-differentiated VSMC. Using the FRET-based biosensor T-Epac-VV, we showed that the de novo expression of AC8 limits increases in cellular cAMP. This non-canonical function relies on a new family of AC8 isoforms that we have identified and cloned: the AC8E1 to 4. They share a common deletion of the first five transmembrane domains. The biochemical characterization of AC8E over-expressed in HEK cells allowed us to elucidate their functioning. cAMP accumulation assays, co-immunoprecipitation experiments and immunocytochemistry revealed that AC8E hetero-dimerize with functional AC during their maturation in the reticulum, suppress their enzymatic activity and prevent their traffic to the plasma membrane. Numerous studies have shown that increases in cAMP concentration within trans-differentiated VSMC antagonize pathological vascular remodeling (Douglas et al., 2005; Katakami et al., 2010). Thus, the induction of AC8E in trans-differentiated VSMC could prevent the vasculoprotective effects of cAMP and promote the acquisition of a synthetic phenotype

L’objectif de cette thèse a été de comprendre les mécanismes cérébraux associés aux symptômes du trouble de stress post-traumatique (TSPT), ainsi que les mécanismes cérébraux modulés par la disparition des symptômes, en utilisant la thérapie de désensibilisation et de retraitement de l’information par les mouvements oculaires (Thérapie EMDR). Cette thérapie associe rappel du traumatisme et stimulations bilatérales alternées (SBA). Premièrement, en utilisant l’IRM fonctionnelle (IRMf), nous avons mis en évidence une altération de l’activité fonctionnelle du système de récompense dans le TSPT, correspondant à une mobilisation déséquilibrée des processus motivationnels cognitifs et hédoniques (étude 1). Deuxièmement, par l’intermédiaire d’une étude en IRMf au repos, nous avons montré que les patients présentent des altérations de connectivité fonctionnelle entre un réseau neuronal impliqué dans les processus mnésiques et émotionnels, et un réseau neuronal impliqué dans les processus attentionnels (étude 2). Troisièmement, nous avons montré que les structures initialement altérées par la pathologie évoluent après rémission symptomatique, suggérant un rétablissement des altérations neuronales induites par le stress chronique (étude 3). Enfin, nous avons montré que les SBA employées dans la thérapie EMDR facilitent l’extinction de la peur ainsi que la récupération de cette extinction au sein d’un groupe de volontaires sains (étude 4). Ainsi, ces travaux offrent de nouvelles perspectives en termes de modélisation de la pathologie, et offre de nouvelles pistes de réflexion quant à la prise en charge thérapeutique de ce trouble
Posttraumatic Stress Disorder (PTSD) is a debilitating psychiatric disorder that arises in the aftermath of a traumatic event. To date, the Eye Movement Desensitization and Reprocessing therapy (EMDR) therapy has shown to be the most efficient therapy for the treatment of PTSD. The aim of this thesis was therefore to understand neural mechanisms underlying PTSD and its recovery. To do so, we conducted four studies. In a first study, we showed alterations in the reward circuit activity in PTSD patients, which may underlie an imbalance mobilization of cognitive and hedonic motivational processes, possibly contributing to emotional numbing in PTSD (study 1). Following this, an altered resting state functional connectivity between a network associated with attentional processes and another associated with emotional and memory processes was also found, suggesting an atypical emotional regulation and attention processing (study 2). A third study showed changes of grey matter density in regions involved in emotional regulation after symptoms remission by EMDR therapy. Finally, we were also able to replicate, in PTSD patients, the fear extinction and fear extinction recall facilitation by bilateral alternating stimulations (BAS) a major component of EMDR therapy, previously demonstrated in animal studies. Taken together, the present findings of these studies contribute to enlarge our knowledge, opening new ways of thinking the actual model of explaining the PTSD. More importantly, we believe that our findings may contribute to improve therapeutic strategies to significantly ameliorate the life of these patients