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Дисертації з теми "Membranes plasmiques"
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Gilson, Virginie. "Interaction du peptide beta amyloïde avec les membranes plasmiques cellulaires." Thesis, Strasbourg, 2013. http://www.theses.fr/2013STRAJ020/document.
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La maladie d’Alzheimer (MA) est une maladie neurodégénérative du système nerveux central qui se caractérise notamment par l’accumulation de peptide beta-amyloïde (Aβ) dans le tissus nerveux. Dans la première partie de cette thèse nous avons montré que l’interaction des oligomères Aβ1-42 de haut poids moléculaire avec la membrane plasmique des cellules PC12 différenciées ou des cellules nerveuses (neurones et astrocytes primaires) provoque des variations de la [Ca2+]i dépendant de l’activation des récepteurs NMDA. Dans la seconde partie nous avons montré qu’une pré-exposition des cellules PC12 et des cellules nerveuses à de faibles concentrations de peptide Aβ module l’interaction ultérieure des oligomères avec la membrane plasmique. Enfin dans le cadre d’une collaboration avec l’entreprise Innovative Health Diagnostics (IHD) nous avons participé à la caractérisation d’une sonde amyloïde fluorescente développée pour réaliser des tests de détection de la MA à partir d’échantillons sanguins<br>Alzheimer’s disease (AD) is a neurodegenerative disease of the central nervous system which is characterized in particular by the accumulation of beta amyloïde peptide (Aβ) in nerve tissues. In the first part of this thesis we showed that the interaction of high molecular weight Aβ1-42 oligomers with the plasma membrane of differenciated PC12 or nerve cells (neurons and astrocytes) triggers variations of their depending on the activation of the NMDA receptors. In the second part we showed that a pre-exposure of PC12 and nerve cells with low concentrations Aβ1-42 of modulates the later interaction of oligomers with the plasma membrane. Finally in collaboration with the company Innovative Health Diagnostics (IHD) we participated in the characterization of a fluorescent amyloid probe developed to realize detection test of AD from blood samples
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Morand, Olivier. "Mécanismes de transport des acides gras au travers des membranes plasmiques." Paris 7, 1985. http://www.theses.fr/1985PA077070.
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Les différents outils décrits dans cette thèse ont été développés et exploités pour approcher par des voies nouvelles la question du mécanisme de translocation des acides gras au travers des membranes plasmiques. Les dérivés polycycliques fluorescents d'acides gras ont été utilisés parce qu'ils sont des analogues potentiels et que leur comportement dans les systèmes biologiques peut renseigner sur telle ou telle étape métabolique mettant en jeu ces substrats. Leur nature fluorescente est un avantage supplémentaire qui permet de visualiser et localiser ces substrats en microscopie par fluorescence et de suivre leur trajet dans une cellule. Le modèle du "ghost" d'érythrocyte a été conçu pour examiner le processus de translocation sur une membrane seule sans les complications introduites par un métabolisme lipidique intracellulaire multiple. C'est un outil puissant qui doit être convenablement maîtrisé et qui doit pouvoir trouver de nouvelles applications. Par exemple, on pourrait envisager son utilisation à des fins d'investigations cliniques en relation avec des atteintes touchant au métabolisme des lipides membranaires et à la fonction de la membrane. Les résultats obtenus par ces approches différentes permettent de formuler certaines hypothèses quant au mécanisme de captation et de translocation membranaire des acides gras.
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Khalfoun, Bachir. "Etude biochimique et immunologique des membranes plasmiques syncytiotrophoblastiques isolées du placenta humain à terme." Tours, 1985. http://www.theses.fr/1985TOUR3807.
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NDUWIMANA, JEAN. "Etude d'une serine protease de membranes plasmiques de foie de rat : approche biochimique et moleculaire." Rennes 1, 1993. http://www.theses.fr/1993REN10170.
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Une serine protease de membranes plasmiques de foie de rat a ete obtenue par solubilisation de ces dernieres grace au sarkosyl. Elle a ete purifiee 520 fois par rapport aux membranes brutes a l'issue des differentes chromatographies realisees. Les analyses electrophoretiques ont montre l'enrichissement d'une proteine d'environ 30 kda a l'issue des differentes etapes de purification. Son marquage par le #3h-difp montre qu'il s'agit bien d'une serie protease. Le criblage d'une banque de cdna de foie de rat a ete realise par une sonde obtenue grace a des amorces degenerees correspondant aux sequences conservees autour des residus his et ser du site catalytique. Seize clones ont ete ainsi isoles et analyses. L'analyse des sequences des inserts de trois d'entre-eux, qui representaient des groupes de tailles et de profils de restriction differents a revele leur forte homologie avec l'haptoglobine, une proteine homologue aux serines proteases. Une autre approche a ete adoptee pour rechercher une sonde plus specifique. Ainsi, un fragment d'environ 150 pb a ete amplifie par pcr a partir de cdna simple brin grace a 2 amorces synthetisees l'une a partir de la sequence de l'extremite nh#2-terminale de la serine protease purifiee, l'autre a partir de la sequence conservee autour du residu his du site catalytique des serines proteases. Apres clonage dans le vecteur bluescript ii ks(+), ce fragment a ete sequence et analyse. Il sera utilise comme sonde pour cribler une banque de cdna de foie de rat
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Sarrouilhe, Denis. "Etude de l'activite proteine phosphatase endogene de la phosphatase alcaline des membranes plasmiques de foie de rat." Poitiers, 1992. http://www.theses.fr/1992POIT2289.
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La phosphatase alcaline (pal) et un enzyme largement repandu dans tous les regnes et dont le role biologique precis n'a toujours pas ete etabli. Compte tenu de la localisation membranaire de la pal, il etait interessant d'etudier son activite proteine phosphatase au sein de son environnement naturel. Dans un premier temps, nous avons pu montrer en utilisant comme substrat de l'enzyme le para-nitrophenyl-phosphate que l'activite qui revient a la pal au sein des membranes plasmiques etait relativement faible au ph physiologique. Dans une seconde approche, les phosphorylations endogenes ont ete analysees par autoradiographie apres separation electrophoretique. Ainsi, 2 phenomenes cinetiques ont ete mis en evidence: la phosphorylation des proteines par les proteines kinases et la formation de 2 intermediaires de phosphorylation de la pal, de masse moleculaire 151 et 135 kda. Le bromolevamisole, un puissant inhibiteur de la pal stabilise ces 2 intermediaires de phosphorylation, et parallelement a cette inhibition l'accumulation d'une phosphoproteine de 18 kda est observee. Si la pal ne semble pas etre la principale proteine phosphatase des membranes plasmiques de foie de rat, l'identification de la 18 kda devrait toutefois permettre une meilleure comprehension du role de cet enzyme
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Thibault, Gilles. "Effet inhibiteur de membranes plasmiques syncytiotrophoblastiques du placenta humain à terme sur l'activation lymphocytaire : approche du mécanisme d'action." Tours, 1991. http://www.theses.fr/1991TOUR3804.
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GUEBLE-VAL, FLORENCE. "Etude des activites proteolytiques des membranes plasmiques dans le foie normal et dans l'hepatome experimental chez le rat." Rennes 1, 1988. http://www.theses.fr/1988REN10039.
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Heyno, Eiri. "Enzymes impliqués dans la production des formes réactives de l'oxygène dans les membranes plasmiques, les mitochrondries et les chloroplastes." Phd thesis, Université Paris Sud - Paris XI, 2009. http://tel.archives-ouvertes.fr/tel-00447102.
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Les formes réactives de l'oxygène (FRO) ont été analysées dans différents compartiments cellulaires en utilisant des méthodes spectroscopiques (UV/VIS, fluorescence, infrarouge, résonance paramagnétique électronique). L'identité et les mécanismes catalytiques des enzymes qui produisent les FRO dans les membranes plasmiques (MP) et les mitochondries ont été étudiés, ainsi que le rôle protectif de l'oxydase terminale plastidiale (PTOX) des chloroplastes. Cd2+ s'est révélé être un inhibiteur de la NADPH oxydase des MP. In vivo Cd2+ inhibait la production extracellulaire de O2•- mais stimulait l'accumulation de H2O2. Dans des mitochondries isolées, Cd2+ a augmenté la production de FRO. Antimycin A a entraîné une élévation du H2O2 extracellulaire, confirmant que la mitochondrie est le site principal de production de l'H2O2 extracellulaire induite par Cd2+ in vivo. Une quinone réductase (QR) génératrice de FRO a été isolée des MP. La déprotonation pH-dépendante du quinole a produit des formes intermédiaires instables qui génèrent des FRO par réaction avec O2. Des espèces quinoniques ont été détectées dans la MP et pourraient servir de substrat aux QR in vivo. La protection de la chaine photosynthétique de transfert d'électron par la plastoquinol:O2 oxydoréductase a été étudiée chez des plantes PTOX+ surexprimant PTOX. En raison de leur réponse altérée en conditions de faible et forte intensité lumineuse, il a été proposé que pour fonctionner comme enzyme protectrice, PTOX est couplée à une SOD. Chez les lignées PTOX+, le niveau de SOD chloroplastique n'était pas plus élevé, limitant probablement leur capacité à détoxifier les taux élevés de O2•- généré.
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Manenti, Stéphane. "Organisation moleculaire de la mp26 dans les membranes plasmiques des fibres du cristallin et dans un systeme reconstitue (proteoliposomes)." Paris 6, 1988. http://www.theses.fr/1988PA066387.
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La proteine majoritaire des membranes des fibres du cristallin, la mp26, est le candidat principal a la formation des structures membranaires de type "jonctions communicantes". Une methode d'isolement de la proteine est developpee pour permettre une reconstitution membranaire et caracteriser physicochimiquement ce polypeptide
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Manenti, Stéphane. "Organisation moléculaire de la MP26 dans les membranes plasmiques des fibres du cristallin et dans un système reconstitué (protéoliposomes)." Grenoble 2 : ANRT, 1988. http://catalogue.bnf.fr/ark:/12148/cb37615673n.
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Latoud, Chantal. "Etude des interactions d'antifongiques peptidolipidiques, iturine A et bacillomycine L, avec les membranes plasmiques d'érythrocytes et de cellules de levure." Lyon 1, 1988. http://www.theses.fr/1988LYO10082.
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Payrastre, Bernard. "Etude du métabolisme des phosphoinositides dans les membranes plasmiques des cellules A431 : effet du facteur de croissance de l'épiderme (EGF)." Toulouse 3, 1989. http://www.theses.fr/1989TOU30168.
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La premiere partie de ce travail consiste en la mise au point d'une technique rapide d'isolement de membranes plasmiques de cellules a431 sur un gradient autogenere de percoll. Le dosage des enzymes marqueurs des differentes fractions subcellulaires indique que notre preparation est relativement pure. Le recepteur egf ainsi que sa proteine kinase intrinseque sont preserves durant l'isolement. Des membranes plasmiques isolees selon cette technique, a partir de cellules premarquees au #3h inositol sont ensuite utilisees pour etudier le metabolisme des phosphoinositides. Ces membranes possedent une activite phospholipasique c induite par le serum de veau ftal (80%) et l'egf (16%). Cependant, lorsque l'on rajoute du cytosol de cellules a431, l'egf provoque une stimulation de la generation d'inositol 1,4,5 trisphosphate et de l'inositol bisphosphate d'environ 10%, cette stimulation necessite la presence de guanine 5-o(3-thiotriphosphate). Un effet identique est obtenu en rajoutant de faibles concentrations de proteines phosphorylees sur des tyrosines, immunoprecipitees a partir d'un cytosol de cellules a431 stimulees a l'egf. Parallelement, l'egf s'est revele capable de stimuler l'incorporation de #3#2p a partir de #3#2p atp dans les phosphoinositides des membranes plasmiques de cellules a431. Cette activite phosphoinositide kinase peut etre immunoprecipitee grace a un anticorps antiphosphotyrosine a partir de cellules a431 traitees par de l'egf en presence de vanadate. L'activite phosphoinositide kinase presente dans les cellules a431 semble regulee par phosphorylation de proteines sur des residus tyrosines
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Dupou, Laurence. "Contribution a l'etude de la dynamique et de la distribution laterale des lipides dans les membranes plasmiques de cellules eucaryotes." Toulouse 3, 1987. http://www.theses.fr/1987TOU30043.
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Dupou, Laurence. "Contribution à l'étude de la dynamique et de la distribution latérale des lipides dans les membranes plasmiques de cellules eucaryotes." Grenoble 2 : ANRT, 1987. http://catalogue.bnf.fr/ark:/12148/cb37604764h.
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Latoud, Chantal. "Etude des interactions d'antifongiques peptidolipidiques, iturine A et bacillomycine L, avec les membranes plasmiques d'érythrocytes et de cellules de levure." Grenoble 2 : ANRT, 1988. http://catalogue.bnf.fr/ark:/12148/cb376150401.
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Cazeils, Jean-Luc. "Caractérisation de la composition lipidique des membranes plasmiques des hépatocytes de foies d'oies : relation avec le rendement technologique des foies gras." Toulouse, INPT, 2000. http://www.theses.fr/2000INPT001A.
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Ce travail etudie l'evolution de la composition lipidique de la membrane plasmique des hepatocytes de foie gras d'oies en relation avec leur qualite technologique. Apres l'isolement des membranes plasmiques d'hepatocytes gras, nous avons observe une augmentation du rapport du cholesterol aux phospholipides alors qu'il y a une diminution du rapport des phospholipides aux proteines engendres par le gavage. La suralimentation induit aussi dans la composition en acides gras des phospholipides de la membrane plasmique l'augmentation du rapport des acides gras insatures aux acides gras satures, avec une diminution des acides gras polyinsatures. La suralimentation en mais semble provoquer dans les membranes plasmiques d'hepatocytes une competition entre l'incorporation des acides gras alimentaires et ceux issus de la synthese de novo. Il en resulte une accumulation des acides gras monoinsatures provenant de cette synthese, particulierement celle de l'acide oleique. Durant cette etude, nous avons mis en relation la composition biochimique des membranes plasmiques des hepatocytes et le rendement technologique des foies gras d'oies apres sterilisation. Les resultats montrent une importante correlation entre le rendement a la cuisson et le rapport du cholesterol aux phospholipides des membranes plasmiques des hepatocytes. L'augmentation de ce rapport entraine une deterioration du rendement technologique, correspondant a un niveau de cholesterol plus eleve, par rapport aux phospholipides qui pourrait entrainer une moindre fluidite de la membrane, fragilisant alors celle-ci lors de la cuisson. De plus, un niveau de cholesterol membranaire eleve correspond a un aspect plus rouge et une texture plus dure des foies gras. Ces deux criteres, que sont la couleur et la texture, sont des parametres deja utilises en conserverie pour trier les foies.
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Cluchague, Nicolas. "Vers la caractérisation de l'organisation des membranes plasmiques de muscles déficients en dystrophine : étude sur la souris mdx et le chien grmd." Rennes 1, 2004. http://www.theses.fr/2004REN1B082.
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Le complexe des protéines associées à la dytrophine (DAPC) permet la liaison cytosquelette/matrice extracellulaire via le dystrophine, protéine absente ds la dystrophie musculaire de Duchenne (DMD) ainsi que chez la souris mdx et le chien grmd. Les éléments du DAPC très réduits dans le phénotype dystrophique. Nous avons isolé des vésicules de membranes plasmiques à partir de muscles de souris normales et mdx, et de chiens normaux et grmd. Etude de la composition phospholipidique des membranes plasmiques musculaires réalisée par RMN du 31P en HR-MAS. L'analyse de la répartition des phospholipides en utilisant le PrCI3 s'est révélée infructueuse par rapport aux études antérieures sur le lapin, révélant des problèmes de différences interspécifiques. Mise en évidence de la présence de certaines protéines du DPAC en quantité équivalente dans le muscle déficient en dystrophine par rapport au muscle normal. Constat que les protéines du DPAC faisaient l'objet de modification de visibilité avant et après purification des vésicules par gradient de densité de sucrose. La bêta-dystroglycane est indétectable ds le muscle déficient en dystrophine ds la fraction non purifiée, mais est détectée en quantité normale sous 2 formes(43 et 30 kDa)après purification. Cependant un traitement avec un détergent,le cholate de sodium, permet de visualiser la bêta-dystroglycane dans les vésicules non purifiées. La protéine est bien présente au niveau de la membrane mais son accessibilité aux anticorps nécessite un traitement avec un détergent. L'absence de dystrophine ne provoque pas la perte de la totalité des éléments du DAPC, mais modifie leur accessibilité au niveau de la membrane plasmique musculaire. Ces observations apportent des éléments de réflexion nouveaux sur la compréhension de la DMD.
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Molee, Wittawat. "Facteurs de variation de la composition lipidique des membranes plasmiques des hepatocytes chez les palmipedes : relation avec le rendement technologique des foies gras." Toulouse, INPT, 2006. http://ethesis.inp-toulouse.fr/archive/00000252/.
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Différents facteurs zootechniques influencent la fonte lipidique des foies gras issus du gavage des palmipèdes lors des processus de transformation. L'objet de ce travail est de déterminer si des variations de la composition lipidique de la membrane plasmique des hépatocytes participent à expliquer la relation causale entre les facteurs zootechniques et le rendement technologique comme le suggèrent divers auteurs. A partir d'une méthode d'extraction et de purification permettant d'isoler plus spécifiquement la fraction sinusoïdale de la menbrane plasmique, nous étudions successivement l'incidence du gavage du canard mulard (cairina moschata x Anas platyrhynchos) sur l'évolution de la composition lipidique de la membrane plasmique des hépatocytes, la variabilité du rendement technologique des foies gras d'oie (Anser anser). Les principauxconstituants chimiques hépatiques sont parallèlement pris en considération. Nous montrons ainsi que si le gavage induit chez le canard mulard une forte accumulation de triglycérides intra hépatiques, il modifie aussi la composition lipidique de la membrane plasmique des hépatocytes avec une augmentation de la teneur en phospholipides et en cholestérol, sans modifier toutefois le rapport du cholestérol aux phospholipides. Les profils des phospholipides et de leurs acides gras constitutifs sont aussi modifiés. Par ailleurs, si l'état d'engraissement des foies est fortement corrélé à leur rendement technologique, seul le profil des acides gras des lipides membranaires fait apparaître des liaisons faibles mais significatives avec ce dernier. Enfin , au cour de la période post-prandiale l'accrétion lipidique hépatique est en relation avec une modification du rapport du cholestérol aux phospholipides membranaires et une diminution du rendement technologique. Ces évolutions sont discutées en prenant en compte les données du métabolisme lipidique chez les oiseaux et l'incidence possible des modifications de composition des membranes plasmiques des hépatocytes sur la fluidité membranaire et au-delà le rendement technologique.
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Molee, Wittawat Babilé René. "Facteurs de variation de la composition lipidique des membranes plasmiques des hepatocytes chez les palmipedes relation avec le rendement technologique des foies gras /." Toulouse : INP Toulouse, 2006. http://ethesis.inp-toulouse.fr/archive/00000252.
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Malgat, Monique. "Biosynthèse de sphingomyélines à cholines et à éthanolamine dans les microsomes et les membranes plasmiques de foie et de cerveau de rat : localisation de l'enzyme microsomal." Bordeaux 2, 1986. http://www.theses.fr/1986BOR22025.
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Moreau, Céline. "Organisation des phospholipides des membranes plasmiques de muscle squelettique : etude par spectroscopie de rmn du phosphore*31 et microscopie electronique (doctorat : genie biologique et medical)." Rennes 1, 2000. http://www.theses.fr/2000REN1B049.
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Malgat, Monique. "Biosynthèse de sphingomyélines à choline et à éthanolamine dans les microcosmes et les membranes plasmiques de foie et de cerveau de rat localisation de l'enzyme microsomal." Grenoble 2 : ANRT, 1986. http://catalogue.bnf.fr/ark:/12148/cb37599399z.
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ANGULO, GUERRERO JESUS OFELIA. "Effets de differentes deficiences nutritionnelles en agpi sur la composition lipidique et la physiologie des membranes mitochondriales et plasmiques des cellules hepatiques et cerebrales chez le rat." Paris 11, 1991. http://www.theses.fr/1991PA112225.
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Les connaissances fondamentales concernant le role des acides gras polyinsatures (agpi) dans le developpement et la sante ont ete approfondies. Neanmoins, les mecanismes touchant la physiologie membranaire, dans lesquelles les acides gras (ag) sont impliques, sont mal connus. Les resultats montrent que les taux de cholesterol et de phospholipides (pl), les proportions de classes de pl et leur composition en ag sont alteres differemment selon le type de deficience lipidique (agp totaux, agpi n-6, agpi n-3). Les modifications sont plus prononcees dans le foie que dans le cerveau. Dans les membranes mitochondriales, les activites de la succinate deshydrogenase et de la f#1f#1atpase, ainsi que la phosphorylation oxydative, ne sont pas alterees par la deficience en agpi n-3, mais varient selon l'age des animaux; bien que le rapport n-6/n-3 dans les pl soit augmente considerablement, la somme des agpi n'est pas modifiee par le regime. Dans les membranes plasmiques hepatiques et cereales, les activites de la 5-nucleotidase et de la na#+k#+atpase sont peu sensibles aux changements de la composition lipidique, mais le complexe adenylate cyclase peut etre sensible aux remaniements de la composition membranaire en agpi. Finalement, chaque type de deficience en agpi modifie de facon differente et importante la proportion des classes de pl et leur composition en ag; mais les modifications physiologiques qui en resultent, du moins quant aux parametres mesures, sont peu marquees; ceci laisse a penser que les modifications de la composition lipidique des membranes sont destinees a maintenir leur homeostasie
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André, Aurore. "Etude de l'influence de l'environnement lipidique sur la fonctionnalité et l'organisation membranaire des récepteurs mu et delta aux opioïdes." Toulouse 3, 2009. http://thesesups.ups-tlse.fr/542/.
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Il est aujourd'hui bien connu qu'il existe des compartimentations latérales au sein même de la membrane, définissant des domaines. Une grande attention a été portée ces dernières années à des domaines membranaires particuliers, les " rafts ". Ces domaines enrichis en cholestérol et sphingolipides seraient impliqués dans certains processus de signalisation cellulaires qui nécessitent un transfert de l'information à la fois spécifique et efficace, comme c'est le cas notamment des RCPG. Dans cette étude, le rôle de l'environnement lipidique sur l'activité de deux RCPG, les récepteurs humains µ et d aux opioïdes (hMOR et hDOR) a été recherché. Des fractions enrichies en cholestérol (DRM) ont été analysées après extraction à froid en TX-100 de membranes cellulaires et la présence des récepteurs hMOR ou hDOR a été recherchée. Les données indiquent que peu de hDOR et hMOR sont retrouvés dans ces fractions à l'état basal, mais la redistribution d'une partie de ces récepteurs dans les DRM, dépendante de l'association des récepteurs aux protéines G, est observée après activation par leur ligand agoniste. Les données de pharmacologie obtenues après modulation de la teneur en cholestérol des membranes contenant ces récepteurs ont montré clairement un effet de la déplétion en cholestérol sur la fonctionnalité de hMOR et hDOR. Enfin, pour mieux cerner le rôle du cholestérol dans la distribution et l'activité des récepteurs, l'influence d'un autre stérol, l'ergostérol, a été étudié. Une modulation éventuelle de l'activité du récepteur hDOR par l'épaisseur de la membrane a été analysée en reconstituant le récepteur dans des liposomes ayant des lipides de longueur de chaînes variables<br>Numerous evidences show the existence of lateral heterogeneities within the plasma membranes defined as lipid domains. Among these, lipid rafts, have been extensively studied. They are characterised by an enrichment in cholesterol and sphingolipids, and are depicted as fluid plaforms that segregate membrane components involved in a particular signaling process, like signal transduction of GPCR, promoting the specificity and the efficiency of the response. Here we study the role of the lipidic environment on the activity of two GPCRs, namely human mu and delta opioid receptors (hMOR and hDOR). Cholesterol, which is a main component implicated in the formation of rafts, was here the subject of a particular interest. Membranes fractions that were enriched in cholesterol (DRM) were analysed after cold extraction by TX-100 of cellular membranes. The data we obtained show that hMOR and hDOR are found in DRM at a basal state. In contrast, when activated by an agonist, a relocalisation of a fraction of these receptors is observed in DRM and we show that this phenomenon is dependant of the association of these receptors with G-proteins. The analysis of pharmacological properties of hDOR and hMOR upon cholesterol depletion show clearly that some pool of receptors need cholesterol for function. To complete these data, we next examined whether this effect was due to direct interactions of the receptors with cholesterol or membrane thickness. To test this assumption, we have investigate the effect of ergosterol on hMOR and hDOR pharmacology and the acyl-chain length of the phospholipids on the function of the reconstituted hDOR
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Conchonaud, Fabien. "Dynamique de l'organisation de la membrane plasmique et incidence fonctionnelle." Aix-Marseille 2, 2008. http://www.theses.fr/2008AIX22026.
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L’extraordinaire cohérence de la membrane plasmique est la résultante des interactions moléculaires de faible énergie existant entre les différents constituants qui la composent. De fait, les molécules s'organisent et ségrégent en fonction de leurs affinités respectives, formant des hétérogénéités locales au sein de la membrane. En regard de cette organisation, les questions fondamentales sont de comprendre sur quelles échelles spatio-temporelles ses hétérogénéités prennent place et d’identifier en quoi une telle organisation contribue-t-elle à réguler les grandes fonctions d’une cellule. Afin d’apporter une réponse à ces questions, il nous fallait dans une premier temps établir et valider une approche expérimentale robuste permettant d’identifier et de décrire les hétérogénéités locales de la membrane plasmique. Une utilisation systématique de la FCS à rayons variables a permis d’établir notamment le rôle fondamental de certains lipides dans la génération de ces hétérogénéités. Le second volet de cette étude a été essentiellement consacré à explorer l’impact d’une telle organisation membranaire sur différentes fonctions fondamentales de la physiologie d’une cellule. Ainsi, les partitionnements observés ont un effet important dans la signalisation en modulant l'intensité du signal provenant d'un stimulus externe. En d'autres termes, si les molécules conservent leur capacité de signaler, il apparaît clairement que cette microorganisation dynamique de la membrane en contrôle l’amplitude. En conclusion, nos résultats ont permis d'éclaircir certains points fortement débattus et de soulever plusieurs questions qui feront l'objet d'analyses ultérieures comme : le couplage entre les deux feuillets membranaires, l'impact des échanges membrane/cytoplasme de constituants ou le recyclage membranaire sur la régulation des fonctions cellulaires<br>The extraordinary coherence of the plasma membrane results from molecular interactions of weak energy between the membrane components. In fact, the molecules organize and segregate according to their respective affinities, creating local heterogeneities within the plasma membrane. Regarding this organisation, fundamental questions are to understand on which spatio-temporal scales these heterogeneities take place and to identify to what extent such dynamic organization contributes to control basic cellular functions. In order to answer these questions, it was necessary in the first time to establish and validate a robust experimental approach making possible the identification and description of the plasma membrane heterogeneities. A systematic use of the FCS performed at variable wait of observation has made possible to establish the fundamental implication of certain classes of lipids in the generation of these heterogeneities. The second focus of this study was primarily devoted to explore the impact of such membrane organization on various fundamental cellular functions. Thus, molecular partitioning has an important effect signal delivery by modulating the intensity of the outcome signal. In other terms, if the molecules preserve their capacity to signal, it clearly appears that this dynamic micro-organization of the membrane controls the amplitude of the signal. In conclusion, our results have allowed us to clarify debated points but also to raise several news questions which will the subject of future studies like the coupling between the two membrane leaflets, the impact of the membrane component exchanges/cytoplasm or membrane recycling on the regulation of cellular functions
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Botcazon, Camille. "Etude du mode d'action de composés antifongiques membranotropes naturels sur deux Sclerotiniacées : cas des rhamnolipides et des fengycines." Electronic Thesis or Diss., Compiègne, 2023. https://bibliotheque.utc.fr/Default/doc/SYRACUSE/2023COMP2755.
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Les rhamnolipides (RLs) et les fengycines (FGs), des composés sécrétés par des bactéries, ont des propriétés antifongiques contre les champignons phytopathogènes Sclerotinia sclerotiorum et Botrytis cinerea. Cependant, les effets biocides induits et les mécanismes impliqués sont peu étudiés chez les champignons. De par leur caractère amphiphile, un mode d’action membranotrope est proposé pour ces composés intéréssants pour le biocontrôle. Les travaux présentés ici démontrent que les deux Sclérotiniacées ont des sensibilités opposées aux RLs et aux FGs. Une étude en microscopie montre que les RLs peuvent induire une mort cellulaire programmée (PCD) ou nécrotique chez les deux champignons selon la concentration alors que les FGs induisent systématiquement une PCD, probablement par un mécanisme d’autophagie. Des analyses lipidomiques (contenus en acides gras, phospholipides et ergostérol) de souches de S. sclerotiorum et B. cinerea plus ou moins sensibles aux RLs et aux FGs permettent de rapprocher les contenus lipidiques des champignons à leurs sensibilités. Ces données ont été utilisées pour étudier les interactions entre les RLs ou les FGs et des modèles de membranes plasmiques biomimétiques des deux champignons. Les études de dynamique moléculaire montrent que les RLs s’insèrent, sous forme de monomères, dans les différents modèles étudiés sans les fluidifier et que les FGs s’agrègent puis s’insèrent dans certains modèles en induisant une fluidification. L’ergostérol et les acides phosphatidiques défavoriseraient cette insertion tandis que les phosphatidylcholines et les phosphatidyléthanolamines les favoriseraient. Ces travaux permettent de mieux appréhender le mode d’action antifongique des RLs et des FGs, et contribueront, à terme, au développement de produits de biocontrôle plus efficaces pour la protection des cultures vis-à-vis de pathogènes spécifiques<br>Rhamnolipids (RLs) and fengycins (FGs), are compounds produced by bacteria displaying antifungal properties against the phytopathogenic fungi Sclerotinia sclerotiorum and Botrytis cinerea. However, the induced biocidal effects, and the involved mechanisms are poorly understood in fungi. Due to their amphiphilic properties, a membranotropic mode of action is proposed for these interesting compounds for biocontrol. The present work demonstrates that the two Sclerotiniaceae have opposite sensitivities to RLs and FGs. A microscopy study shows that RLs can induce programmed cell death (PCD) or necrotic cell death in both fungi depending on the concentration whereas FGs systematically induce PCD, probably by triggering autophagy. Lipidomic analyses (fatty acid, phospholipid and ergosterol contents) of S. sclerotiorum and B. cinerea strains differently sensitive to RLs and FGs allow to correlate the lipid contents of the fungi to their sensitivities. These data are used to study the interactions of RLs or FGs on biomimetic plasma membrane models of the two fungi. The dynamics show that the RLs monomers insert into the models without fluidizing them and that the FGs auto-aggregate themselves and insert into some models, inducing fluidization. Ergosterol and phosphatidic acids seems to disfavour this insertion while phosphatidylcholine and phosphatidylethanolamine seem to favour it.This work allows to better understand the antifungal mode of action of RLs and FGs, with a view to develop more effective biocontrol products for crop protection targeting specific pathogens
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BERGER, GAETAN. "La membrane des granules alpha : miroir de la membrane plasmique plaquettaire." Paris 7, 1995. http://www.theses.fr/1995PA077163.
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Les granules alpha constituent le principal site de stockage des proteines plaquettaires et assurent la redistribution des proteines d'activation qu'il contiennent au cours de la secretion. Ils sont formes au stade megacaryocytaire par synthese endogene et par endocytose de proteines plasmatiques. Leur membrane limitante comprend des recepteurs tels que la gpiib-iiia, proteine majoritaire des plaquettes egalement presente dans la membrane plasmique, et la p-selectine dont l'expression est restreinte a ce compartiment. La technique d'immunomicroscopie electronique sur coupe utilisee ici presente l'interet de donner acces a la composition proteique d'un compartiment donne en preservant l'ultrastructure cellulaire. Dans un premier temps, l'etude de la localisation subcellulaire d'une glycoproteine de la membrane plasmique, le cd36, a abouti a la description d'un pool de la proteine associe a la membrane des granules alpha. Au cours de l'activation plaquettaire, le cd36 granulaire est redistribue en membrane plasmique avec une concentration au niveau des pseudopodes. Par la suite, plusieurs autres glycoproteines de la membrane plaquettaire (cd9, pecam1, gpib, gpix, gpv) ont ete retrouvees dans la membrane des granules alpha, y compris la proteine rap1b associee a la sous-membrane plasmique. Des evaluations semi-quantitatives ont cependant montre un taux de repartition des differents pool propre a chaque proteine. Ainsi, la gpiib-iiia granulaire represente environ 50% du marquage total observe. Ce chiffre diminue a environ 30% pour le cd36, et n'est plus que de l'ordre de 10% pour la gpib. Cette repartition non homogene suggere l'existence d'un mecanisme regule responsable de la repartition de ces proteines. L'hypothese d'un ciblage constitutif vers la membrane plasmique suivi d'une endocytose differentielle est en cours d'investigation. En conclusion, ce travail decrit la composition originale de la membrane des granules alpha qui semble bien mimer qualitativement la membrane plasmique et souleve l'interrogation sur le role de ces recepteurs dans ce compartiment de secretion. Des resultats preliminaires suggerent un role dans le transport de ligand(s) soluble(s) au cours de l'activation plaquettaire
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Ménorval, Marie-Amélie de. "Etude de la perméabilisation de la membrane plasmique et des membranes des organites cellulaires par des agents chimiques et physiques." Thesis, Paris 11, 2013. http://www.theses.fr/2013PA114840/document.
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Il est possible de perméabiliser la membrane plasmique des cellules par des agents chimiques (tels que les polyéthylènes glycols ou le diméthylsulfoxyde) ou par des agents physiques (tels que les ultrasons ou les impulsions électriques). Cette perméabilisation peut être réversible ou non, ce qui signifie qu’après la perméabilisation, la membrane retrouve son intégrité et ses propriétés d’hémi-perméabilité ou pas. Ces techniques peuvent être utilisées pour faire rentrer des médicaments ou des acides nucléiques dans les cellules ou pour générer des fusions cellulaires. Une approche récente, la dynamique moléculaire, utilise des simulations numériques pour prédire les effets des agents perméabilisants sur les membranes à l’échelle moléculaire, et permet d’apporter de nouvelles données pour comprendre les mécanismes moléculaires, encore peu connus à ce jour.Les impulsions dites « classiques » en électroperméabilisation, de l’ordre de la dizaine de millisecondes à la centaine de microsecondes et d’amplitude de champ de l’ordre de 100 kV/m, perméabilisent la membrane plasmique uniquement. Cependant, récemment, des impulsions plus courtes, dites impulsions nanoseconde (quelques nanosecondes) et de plus grande amplitude de champ (de l’ordre de 10 MV/m) ont été utilisées et permettent d’affecter également les membranes des organites cellulaires. Les travaux de cette thèse portent dans un premier temps sur les effets perméabilisants d’un agent chimique (le diméthylsulfoxyde, DMSO) en comparant les modèles prédictifs de la dynamique moléculaire avec des expériences in vitro sur des cellules. Le modèle numérique prédit trois régimes d’action en fonction de la concentration du DMSO. Utilisé à faible concentration, il y a déformation de la membrane plasmique. L’utilisation d’une concentration intermédiaire entraîne la formation de pores membranaires et les fortes concentrations de DMSO ont pour conséquence la destruction de la membrane. Les expériences in vitro faites sur des cellules ont confirmé ces résultats en suivant l’entrée de marqueurs de perméabilisation. Cette étude a été comparée avec la perméabilisation par un agent physique (les impulsions électriques). Dans un deuxième temps, ces travaux traitent du développement et de l’utilisation d’un nouveau dispositif d’exposition des cellules aux impulsions nanoseconde qui permet d’appliquer des champs électriques très élevés et d’observer par microscopie leurs au niveau cellulaire. Pour finir, ce dispositif a été utilisé avec des impulsions nanoseconde pour générer des pics calciques dans de cellules souches mésenchymateuses qui présentent des oscillations calciques spontanées liées à leur état de différenciation. Ces pics induits sont dus à la libération de calcium stocké dans les organites et/ou à la perméabilisation de la membrane plasmique permettant l’établissement d’un flux de calcium intramembranaire. Il est aussi possible d’utiliser des impulsions microseconde pour générer des pics calciques dans ces cellules. Dans ce cas, les pics calciques ne sont dus qu’à la perméabilisation de la membrane plasmique. En jouant sur l’amplitude des champs électriques appliqués et sur la présence ou l’absence de calcium externe, il est possible de manipuler les concentrations calciques cytosoliques en mobilisant le calcium interne ou externe. Une des particularités de ces nouveaux outils est de pouvoir être déclenchés et arrêtés instantanément, sans réminiscence, contrairement aux molécules chimiques permettant de produire des pics calciques. Ces outils pourraient donc permettre de mieux comprendre l’implication du calcium dans des mécanismes comme la différenciation, la migration ou la fécondation<br>It is possible to permeabilize the cellular plasma membrane by using chemical agents (as polyethylen glycols or diméthylsulfoxyde) or physical agents (as ulstrasounds or electric pulses). This permeabilization can be reversible or not, meaning that after the permeabilization, the membrane recovers its integrity and its hemi-permeable properties. These techniques can be used for the uptake of medicines or nucleic acids or to generate cellular fusions. A recent approach, the molecular dynamics, uses numerical simulations to predict the effects of permeabilizing agents at the molecular scale, allowed generating of new data to understand the molecular mechanisms that are not completely known yet.The pulses so called “classical” in electropermeabilization, from the range of the ten of milliseconds to the hundred of microseconds and with a field amplitude in the range of 100 kV/m, can only permeabilize the plasma membrane. However, more recently, shorter pulses, so called nanopulses (few nanosecondes) and with an higher field amplitude (in the range of 10 MV/m) have been used and allow to affect also cellular organelles membranes.This thesis is, in a first time, about the permeabilizing effects of a chemical gent (the diméthylsulfoxyde, DMSO) by comparing predictive models from molecular dynamics with experiments in vitro on cells. The numerical model predicts three regimes of action depending on the DMSO concentration. Used at low concentration, there is a plasma membrane deformation. The use of an intermediate concentration lead to membrane pores formation and higher DMSO concentrations resulted in membrane destruction. The experiments done in vitro on cells confirmed these results using the following of permeabilization markers. This study has been compared to permeabilization due to a physical agent (electric pulses).Secondly, it is about the development and the use of a new cell exposure device for nanopulses that permit to apply very high electric fields and to observe induced cellular effects simultaneously by microscopy.To finish, this device has been used with nanopulses to generate calcium peaks in mesenchymal stem cells that are presenting spontaneous calcium oscillations in correlation to their differentiation state.. These induced peaks are due to the release of the calcium stored in organelles and/or to plasma membrane permeabilization leading to a intramembrane calcium flux establishment. It is also possible to use microsecond pulses to generate calcium peaks in these cells. In this case, the calcium peaks are due to the plasma membrane permeabilization . By changing the amplitude of the applied electric fields and the presence or the absence of external calcium, it is possible to manipulate cytosolic calcium concentrations by mobilizing internal or external calcium. One feature of these new tools is to be triggered and stopped instantly without reminiscence, unlike chemical molecules permitting the production of calcium peaks. These tools could therefore lead to a better understanding of the involvement of calcium in mechanisms such as differentiation, migration or fertilization
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Carvalho, Kévin. "Interaction entre membrane plasmique et cytosquelette : approche biomimétique pour l’étude des interactions entre ezrine, PIP2 et actine." Montpellier 2, 2009. http://www.theses.fr/2009MON20175.
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La membrane plasmique de la cellule est composée de lipides et interagit notamment avec le squelette de la cellule (le cytosquelette), par l'intermédiaire de protéines d'ancrages et de lipides clefs qui jouent un rôle spécifique dans certains types d'interactions. Parmi les protéines intervenant dans l'ancrage direct de la membrane plasmique au cytosquelette, des protéines de la famille des ERM (Ezrine, Radixine, Moésine) peuvent interagir spécifiquement avec un lipide, le phosphatidylinositol (4,5) biphosphate (PiP2), d'une part et avec l'actine du cytosquelette d'autre part. Dans le but de comprendre les interactions entre membrane plasmique et cytosquelette, nous avons réalisé des expériences in vitro sur des systèmes comportant un nombre minimal de constituants : des vésicules géantes (GUV) contenant du PiP2, de l'ezrine recombinante et de l'actine purifiée. Nous avons mis en évidence que la liaison au PiP2 induit des changements conformationnels de l'ezrine. L'ezrine est alors capable d'interagir avec les filaments d'actine. Nous avons caractérisé quantitativement l'incorporation de PiP2 dans la membrane de vésicule géantes, et montré que l'interaction de l'ezrine avec les vésicule géante contenant du PiP2, induit un partitionnement du lipide dans la bicouche lipidique et conduit à la formation d'agrégats de PiP2 et d'ezrine sur la membrane. La connaissance des effets de l'ezrine sur les membranes contenant du PiP2 et la connaissance des différents mécanismes se produisant lors des interactions permettra de définir plus précisément le rôle de l'ezrine in cellulo<br>The plasma membrane is composed of several different lipids and can interact directly with the actin cytoskeleton via specific lipids and linker proteins. Among these is the ERM (Ezrin, Radixin, Moesin) family of proteins, which is involved in the direct linkage of the membrane to the actin cytoskeleton via a phosphatidylinositol (4,5) biphosphate (PiP2) lipid binding site. Our aim is to understand the interactions between these proteins and PiP2 using in vitro simplifed biomimetic systems like giant unilamellar vesicles (GUV) containing PiP2. We showed that a conformational change of ezrin occur when the protein binds to PiP2, this conformational change allowing ezrin to bind to actin filaments. We have characterized quantitatively the incorporation of PIP2 in the membrane of giant vesicles, and showed that the interaction of ezrin with GUV induce a partitioning of the lipid within the membrane as well as ezrin aggregates on the membrane. Likewise, ezrin oligomers were observed only in the presence of PiP2. A better understanding of the interplay between ezrin, PIP2-containing membranes and actin will help to get a better view of the role of ezrin in cellulo
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Pavoine, Catherine. "La pompe à calcium de la membrane plasmique de l'hépatocyte." Paris 6, 1986. http://www.theses.fr/1986PA066424.
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Pavoine, Catherine. "La Pompe à calcium de la membrane plasmique de l'hépatocyte." Grenoble 2 : ANRT, 1986. http://catalogue.bnf.fr/ark:/12148/cb376002974.
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Aubry, Jacques. "Etude fonctionnelle et enzymatique de la membrane plasmique de plasmocytome murin." Nantes, 1989. http://www.theses.fr/1989NANT01VS.
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Pari, François Michel. "Etude d'une proteine de la membrane plasmique de l'oligodendrocyte en culture." Université Louis Pasteur (Strasbourg) (1971-2008), 1988. http://www.theses.fr/1988STR13098.
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Des anticorps diriges contre des antigenes partiellemnt accessibles a la surface de la membrane oligodendrogliale constituent des outils biologiques utiles pour l'etude des mecanismes biochimiques de la myelinisation. Deux glycoproteines (g2 et g3) derivant de la membrane oligodendrogliale, sont utilisees comme marqueurs d'oligodendrocytes. Une glycoproteine de 53 kda a ete identifiee a la surface de l'oligodendrocyte isolee, un serum polyclonal a ete obtenu. Une etude immunocytochimique a confirme sa presence a la surface de la membrane plasmique, elle est egalement trouvee en surface sur les fibroblastes et les cellules de la lignee c 6. Cet antiserum ne marque pas les oligodendrocytes differencies in vivo. Les anticorps anti 53 kda apparaissent comme un outil biologique exceptionnel pour l'etude des precurseurs d'oligodendrocyte in vivo
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Pari, François Michel. "Etude d'une protéine de la membrane plasmique de l'oligodendrocyte en culture." Grenoble 2 : ANRT, 1988. http://catalogue.bnf.fr/ark:/12148/cb376172793.
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Biniek, Catherine. "Importance des ROS et des radicaux : de la graine à la membrane plasmique." Thesis, Université Paris-Saclay (ComUE), 2016. http://www.theses.fr/2016SACLS483/document.
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L’objectif de cette thèse est de définir l’effet de l’environnement maternel sur la qualité des graines de A.thaliana, H.annuus, B.oleracea et H.vulgare, caractériser deux mutants d’A.thaliana affectés au niveau d’enzymes de la membrane plasmique et caractériser l’activité de ces deux protéines. Des dosages de O₂•⁻ et de radicaux ont été faits sur des graines issues de plantes ayant subi des stress thermique et/ou hydrique et n’ont pas montré d’effet des stress. Des traitements de vieillissement accéléré ont eu des effets négatifs sur la vigueur et la viabilité des graines. Des radicaux ont été identifiés par RPE haut champ au niveau de l’enveloppe et du péricarpe. Etant donné la localisation de ces radicaux, ils ne sont pas de bons marqueurs de la qualité des graines. Des mutants KO d’A.thaliana de quinones réductases (QR) et de AIR12 ont été caractérisés. Les QR sont des enzymes cytosoliques ayant une affinité pour la membrane. Elles catalysent la réduction de quinones en dihydroquinones et jouent un rôle protecteur contre le stress oxydatif. A pH alcalin par contre, les dihydroquinones se déprotonent et s’autooxydent entrainant la formation de semiquinones et de O₂•⁻. AIR12 est un cytochrome b 561 ancré à la membrane du côté de l’apoplaste réductible par l’ascorbate et le O₂•⁻. Ces protéines pourraient être impliquées dans un transfert d’électrons à travers la membrane via la vitamine K1. Les protéines recombinantes NQR et AIR12 ont été produites. A pH alcalin, AIR12 est réduit par les semiquinones et pourrait donc récupérer les électrons du produit de NQR. En présence de membrane plasmique, la production de O₂•⁻ est augmentée avec NQR et diminuée avec NQR et AIR12. Les QR semblent avoir un rôle anti- et pro-oxydant selon les cas et AIR12 un rôle anti-oxydant. Le transfert d’électrons entre les deux protéines pourrait se faire via les semiquinones à pH alcalin et via O₂•⁻<br>The aim of this work is to define the effects of adverse environmental conditions on seed quality of A.thaliana, H.annuus, B.oleracea et H.vulgare), characterize two A.thaliana mutants affected in plasma membrane proteins and characterize the activity of the two proteins. Seeds were harvested from plants subjected to drought and/or thermal stress. Then O₂•⁻ and organic radicals in seeds were measured showing no impact of the stress. Accelerated ageing had a negative effect on seed vigor and viability. Radicals have been identified by high field EPR: epi-catechin and Mn(II) in the testa and melanin in the pericarp. There was no correlation between these radicals and the seed quality, therefore these radicals were not found to be good markers of seed quality. A.thaliana KO mutants of quinone reductase (QR) and AIR12 have been characterized. QR are cytosolic enzymes that have an affinity for the membrane. QR catalyze the reduction of quinone to dihydroquinone. Thus they are known to be protective enzymes against oxidative stress. However, at alkaline pH, dihydroquinone deprotonize and form semiquinones and O₂•⁻. AIR12 is a b561 cytochrome anchored to the apoplastic side of the membrane. These proteins could be implied in a transmembrane electron transport via vitamin K1. Recombinant proteins and NQR and AIR12 were produced. At alkaline pH, AIR 12 was reduced by the semiquinone, AIR12 could form a redox couple with vitamin K1 as electron shuttle across the membrane. In the presence of plasma membrane, the production O₂•⁻ was increased with NQR and reduced with NQR and AIR12. QR appear to have an anti- and pro-oxidant according to the conditions and AIR12 an anti-oxidant role. Electron transfer between the two proteins could be done via the semiquinone at alkaline pH and via O₂•⁻
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Kreder, Rémy. "Sondes moléculaires multifonctionnelles pour l'imagerie de fluorecence de membranes cellulaires." Thesis, Strasbourg, 2015. http://www.theses.fr/2015STRAJ006/document.
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Conçues à partir d’une approche rationnelle, nous avons créé de nouvelles sondes membranaires permettant l’imagerie de l’organisation de la membrane plasmique cellulaire. Dans ce travail, nous avons d’abord développé un groupe d’outils, à partir du fluorophore solvatochrome Nile Red et de Black Hole Quencher-2, capable de marquer spécifiquement les domaines ordonnés et désordonnés (radeaux) en les identifiant par leur couleur d’émission. Les études cellulaires, à l’aide de ces sondes, suggèrent que la membrane plasmique est composée de deux phases distinctes. Puis dans le but de créer de nouvelles sondes basées sur Nile Red compatibles avec le sérum et fixables par formaldéhyde/glutaraldéhyde, nous avons modifié la sonde, préalablement développée, NR12S avec un groupement PEG ou amino, respectivement. Etonnamment, la sonde PEGylée est rapidement internalisée dans la cellule et le dérivé animo agrège avec l’agent fixant. D’un autre côté,basée sur Nile Red, nous avons conçu une sonde capable de détecter un récepteur donné et de visualiser son environnement lipidique. Initialement, nous avons obtenu des sondes capables d’allumer leur fluorescence en se liant sur le RCPG à l’ocytocine. Puis, nous avons conjugué NR12Spar l’intermédiaire d’un espaceur PEG(12) au ligand de l’intégrine, RGD. Les résultats préliminaires montrent que la molécule peut se lier à la membrane et détecter l’ordre lipidique, cependant les études cellulaires nécessitent un achèvement. Nous avons aussi travaillé sur des sondes membranaires fluorogéniques (turn-on) pour de l’imagerie multi-couleurs. Basées sur le fluorophore3-méthoxychromone, nous avons obtenu des sondes plus brillantes et plus photostables que la sonde développée originellement à partir de 3-hydroxychromone (F2N12S). Grâce à l’important déplacement de Stokes, elles permettent une imagerie de la membrane cellulaire avec une autofluorescence minimale dans la région spectrale bleue, compatible avec les marqueurs communs verts et rouges. Pour finir, basées sur le fluorophore squaraine, nous avons développé trois nouvelles sondes opérant dans la région rouge lointain, qui est particulièrement intéressante pour l’imagerie in vitro et in vivo. Ces sondes montrent une orientation parallèle avec la membrane lipidique, alors que les expériences cellulaires indiquent que seule la sonde avec deux ancres lipidiques est capable de marquer de façon stable la membrane plasmique. Ces sondes développées ici sont prévues pour être utilisées dans la recherche des radeaux lipidiques aussi bien que pour l’imagerie super-résolution et multi-couleurs de cellules vivantes<br>Based on rational molecular design, we design new membrane probes that enable fluorescence imaging of cell plasma membrane organization. In this work, we first synthesized a toolkit, based on solvatochromic Nile Red dye and Black Hole Quencher-2, that can stain specifically ordered and disordered lipid domains (rafts) and identify them by the emission color. Cellular studies with these probes suggested that the plasma membrane is composed of two distinct phases. Then,with the idea to make Nile Red-based probes compatible with serum medium and fixable by formaldehyde/glutaraldehyde, we modified previously developed probe NR12S with PEG and aminogroups, respectively. Surprisingly, the PEGylated probe is quickly internalized inside the cell and the amino-derivative aggregates with the fixing agent. On the other hand, based on Nile Red we designed probes capable to detect a given receptor and visualize its lipid environment. Initially, we obtained probes that can turn-on fluorescence on binding to the oxytocin GPCR receptor. Then, we conjugated NR12S through a PEG(12) spacer to the ligand of intergrin, RGD. The first data show that the molecule can bind to the membrane and detect the lipid order, though cellular studies have to be completed. We also worked on fluorogenic (turn-on) membrane probes for multi-color imaging. Based on blue 3-methoxychromone dyes, we obtained probes that are brighter and more photostable than the originally developed probe based on 3-hydroxychromone (F2N12S). Due to large Stocks shift, they enabled cell membrane imaging with minimal auto-fluorescence in the blue spectral region, compatible with common green and red probes. At the end, based on squaraine fluorophore, we developed three new probes operating in the far red region, which is also very interesting for in vitro and in vivo imaging. These dyes show a parallel orientation with the lipid membrane, while the cellular experiments point out that only the probe with two anchor groups is able to stain stably the plasma membrane. The probes developed here are expected to be used for lipid rafts research as well as for super-resolution and multi-color imaging of living cells
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Zarubica, Ana. "Influence du transporteur ABCA1 sur le microenvironnement lipidique de la membrane plasmique." Aix-Marseille 2, 2009. http://theses.univ-amu.fr.lama.univ-amu.fr/2009AIX22025.pdf.
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Le transporteur ABCA1 est impliqué dans le transfert des phospholipides et du cholestérol vers Apo A-I sur la membrane plasmique cellulaire. Comme ABCA1 est un transporteur des lipides, nous avons examiné son effet sur le microenvironnement lipidique de la membrane. Nous avons démontré que l'activité ATP-ase d'ABCA1 modifie sa répartition dans les radeaux lipidiques, ainsi que la répartition d’autres protéines de la membrane comme le récepteur de transferrine (TfR), la dynamique cinétique de TfR et réduit l’endocytose de TfR. Nous avons montré par des méthodes biophysiques, cationic sensors et FLIM des modifications significatives dans le feuillet membranaire, interne et externe, par l'expression d'ABCA1. Nous avons démontré aussi par FRAP un changement général de la dynamique de la membrane en présence d'ABCA1. Nous avons corrélé la modification des propriétés de la membrane via ABCA1, avec son influence sur l'activation des macrophages en interférant avec la signalisation de l’IFNγR<br>The ABCA1 transporter is involved in the Apo A-I/mediated removal of cellular phospholipids and cholesterol at the cell membrane. Considering that ABCA1 acts as lipid translocator we investigated the effect of the transporter on membrane lipid microenvironment. By biochemical assays, we demonstrated that the ATP-ase activity of ABCA1 modifies the partitioning in lipid rafts of the transporter itself and other membrane proteins such as the transferrin receptor (TfR), TfR dynamic kinetics and down regulates TfR-mediated endocytosis. We then assessed by biophysical methods, cationic sensors and FLIM, significant modifications of membrane attributes at the inner and outer leaflet in the presence of ABCA1. Furthermore, we evidenced overall changes in membrane dynamics in the presence of ABCA1 by FRAP. Finally, we correlate the mechanistic basis of ABCA1-dependent modulation of macrophage phenotype with the influence of ABCA1 on lipid raft dependent signaling downstream of IFNγR
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Bruneau-Wack, Claudine. "Modulation de fonctions cellulaires par des modifications experimentales de la membrane plasmique." Université Louis Pasteur (Strasbourg) (1971-2008), 1989. http://www.theses.fr/1989STR13059.
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MALLAT, ARIANE. "Regulation hormonale de la pompe a calcium de la membrane plasmique de l'hepatocyte." Paris 6, 1989. http://www.theses.fr/1989PA066330.
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La pompe a calcium de la membrane plasmique de l'hepatocyte assure l'extrusion du calcium de la cellule contre un gradient de concentration transmembranaire. Dans la premiere partie de ce travail, nous avons mis en evidence une inhibition specifique de l'enzyme par des concentrations pharmacologiques de glucagon. Nous avons ensuite montre que le veritable effecteur de l'inhibition hormonale est un fragment du glucagon, le glucagon-(19-29) obtenu par clivage proteolytique du glucagon au niveau d'un doublet d'acides amines dibasiques. Dans la deuxieme partie de ce travail, nous avons caracterise et purifie un inhibiteur proteique de la pompe a calcium et montre qu'il joue un role de mediateur dans le processus de l'inhibition hormonale de la pompe a calcium. Nous avons egalement montre que la regulation hormonale de l'enzyme fait intervenir deux proteines de liaison des nucleotides guanyliques
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GRANDMOUGIN, ANNE. "Atpase-h#+ de la membrane plasmique de racines de mais : role des sterols." Université Louis Pasteur (Strasbourg) (1971-2008), 1989. http://www.theses.fr/1989STR13008.
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Role des sterols dans la structure et la fonction de la membrane plasmique (hp) de racines de mais. Effet des sterols sur le fonctionnement de l'atpase associee a la mp: modifier le profil sterolique de la mp en traitant les racines de mais par la fenpropimorphe, un fongicide synthetique, inhibiteur de la biosynthese des sterols. Effets des sterols sur le fonctionnement de l'atpase apres reconstitution dans les proteoliposomes (hydrolyse de l'atp et le transport des protons)
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Jullié, Damien. "Les endosomes de recyclage fusionnent transitoirement avec la membrane plasmique des dendrites neuronales." Thesis, Bordeaux 2, 2012. http://www.theses.fr/2012BOR21942/document.
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Le trafic membranaire est essentiel dans les neurones pour la morphogénèse, le recyclage des vésicules synaptiques et des récepteurs. L’exocytose des récepteurs AMPA contenus dans les endosomes de recyclage (ER) est nécessaire pour l’expression de la plasticité synaptique à long terme (PLT). Pour étudier ce mécanisme, nous avons visualisé l’exocytose par microscopie de fluorescence sur des neurones en culture transfectés avec le récepteur de la transferrine (TfR), un marqueur des ER, fusionné à la phluorine. Un examen systématique des événements d'exocytose a révélé des différences de comportement. Dans la plupart des cas, les récepteurs diffusent rapidement dans la membrane plasmique après exocytose (discharge), mais dans environ 25% des cas, les récepteurs restent concentrés (display). L’utilisation de changements rapides de pH extracellulaire autour de la cellule montre que l’exocytose est transitoire : après quelques secondes (médiane 2.6s) les récepteurs sont réinternalisés. Ce mécanisme a pu être étendu aux récepteurs AMPA et β2-adrenergique, pour lesquels l’exocytose de type display avait déjà été décrite. L’imagerie deux couleurs montre que Rab11, un marqueur des ER, est enrichie au site d’exocytose. L’expression d’un dominant négatif de Rab11 connu pour inhiber la PLT provoque une diminution spécifique de la fréquence des évènements discharge. Dans nos recherches sur le mécanisme de l’exocytose, nous avons testé l’implication des protéines SNARE dans la fusion membranaire. Ainsi VAMP4 est enrichie avec le TfR dans les ER qui sont exocytés à une fréquence équivalente. De plus, elle est requise pour le recyclage du TfR<br>Membrane trafficking is essential for neuronal function: from growth of neurons and synapse formation to recycling of synaptic vesicles and receptors, questions concerning exocytosis and endocytosis are stimulating neurobiology research. In particular, trafficking of glutamate receptors present in recycling endosomes (REs) is necessary for the expression of long term potentiation (LTP). To investigate the mechanism of exocytosis in dendrites, we have imaged cultured rat hippocampal neurons transfected with transferrin receptor, a classical marker of REs, tagged with phluorin. As for AMPA receptors or β2-adrenegric receptors, single exocytic events has revealed two main behaviors: in most cases, receptors diffuse quickly in the plasma membrane after exocytosis (discharge events), but receptors can also remain clustered (display events). Using fast extracellular pH changes around the recorded cell, we show that for display events exocytosis is transient: after a few seconds (median 2.6 s) receptors are internalized. Moreover, using two color imaging of single exocytosis events with markers of neuronal compartments, we found that Rab11 is enriched at the exocytosis site, confirming the endosomal origin of the vesicles. Overexpression of a dominant negative form of Rab11 known to impair LTP decreases selectively the frequency of discharge events. As SNARE proteins are involved in virtually all membrane fusion processes, we investigated the role of Vamp proteins in somatodendritic exocytosis events. We found that Vamp4, unlike Vamp2 or Vamp7, is enriched in TfR containing compartments and can undergo exocytosis at high frequency and is required for TfR exocytosis
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Yezid, Hocine. "Mécanismes d'interaction de la protéine Tat du VIH-1 avec les membranes plasmique et endosomale." Montpellier 2, 2009. http://www.theses.fr/2009MON20081.
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La protéine transactivatrice Tat joue un rôle crucial dans la multiplication du VIH-1. Elle a un rôle établi dans la transcription virale. Elle possède de plus la propriété d'être sécrétée par les cellules infectées. Elle peut ensuite pénétrer par endocytose dans les cellules non-infectées, où elle va provoquer divers dysfonctionnements. Dans ce travail, nous avons mis en évidence que Tat est sécrétée directement à travers la membrane plasmique en utilisant un mécanisme de sécrétion non conventionnel. Nous avons montré que le phosphatidylinositol-4,5-bisphosphate, PI(4,5)P2, est responsable du recrutement de Tat sur le feuillet interne de la membrane plasmique. En effet, Tat se fixe au PI(4,5)P2 avec une grande spécificité et une forte affinité. Cette interaction de stochiométrie 1:1 implique un triplet de résidus basiques de Tat (résidus 49-51). Elle est stabilisée par l'insertion membranaire de la chaîne latérale du Trp11. Ce mécanisme de fixation original restreint la fixation de Tat au PI(4,5)P2 membranaire mais permet aussi une très haute affinité. Celle-ci va permettre à Tat d'être sécrétée mais aussi de déplacer des protéines cellulaires du PI(4,5)P2. D'autre part, nous avons élucidé le mécanisme moléculaire permettant l'insertion de Tat dans la membrane endosomale. Elle est induite par le pH acide (pH~5. 3) de ces compartiments. Ce pH acide est détecté par un système "sensor" impliquant Tat-Glu2, résidu acide qui est relié par un pont salin avec un triplet d'Arg (55-57). La protonation de Glu2 rompt les ponts salins, permettant l'exposition du Trp11 et l'insertion membranaire de Tat, préalable à sa translocation vers le cytosol<br>The HIV-1 transactivating factor Tat, plays a critical role in HIV-1 pathogenesis. It is strictly required for viral transcription. It can also be secreted by infected cells. Once in the bloodstream, it can enter the cytosol of uninfected cells by endocytosis and dramatically affect their biological activity. Here, we provide evidence that Tat is directly secreted through the plasma membrane using an unconventional secretion pathway. We found that phosphatidylinositol-4,5-bisphosphate, PI(4,5)P2, is responsible for Tat recruitment to the inner leaflet of the plasma membrane, thereby allowing its membrane insertion and translocation. We observed, using a variety of biophysical techniques, that Tat binds specifically and with a very high affinity to a single molecule of PI(4,5)P2. This interaction is mediated by a triplet of basic residues (residues 49-51), and is stabilized by the concomitant membrane insertion of the side chain of Tat-Trp11. This original mechanism restricts Tat binding to membrane embedded PI(4,5)P2, but also enables very tight binding. This high affinity allows Tat to be secreted and to displace cell proteinsƒnƒnfrom the plasma membrane. We also elucidate the molecular mechanism responsible for Tat insertion into the endosome membrane. This insertion is triggered by the low pH (pH ~5. 3) present within the endosome lumen. Acidic pH is detected by a sensor made of Glu2 and an Arg triplet (55-57) that are connected by a salt bridge. Glu2 protonation at low pH will destabilize the salt bridge, thereby allowing Trp11 exposure and enabling membrane penetration. This is the first step of the membrane translocation process that will allow Tat delivery to cytosol
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Ludes, Bertrand. ""Approche therapeutique de l'adenocarcinome renal par modification de la structure de la membrane plasmique"." Université Strasbourg I, 1990. http://www.theses.fr/1990STR13185.
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Grondin, Alexandre. "Fonction des aquaporines de la membrane plasmique dans les mouvements stomatiques chez Arabidopsis thaliana." Thesis, Montpellier, SupAgro, 2011. http://www.theses.fr/2011NSAM0007.
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Les mouvements stomatiques sont dus à des changements importants du volume des cellules de garde. Un rôle des canaux hydriques membranaires (aquaporines) dans ces processus a été proposé mais n'a jamais été démontré. Des analyses transcriptomiques indiquent que plusieurs aquaporines de la membrane plasmique (PIPs), dont AtPIP1;2 et AtPIP2;1, sont exprimées dans la cellule de garde. Dans ce travail, nous avons étudié la fonction de ces deux aquaporines dans les mouvements stomatiques. Les stomates des mutants d'insertion pip1;2 et pip2;1 montrent une ouverture normale à la lumière et aux faibles concentrations en CO2, une fermeture normale en réponse à l'obscurité et aux fortes concentrations en CO2, mais sont quasiment insensibles à la fermeture induite par l'ABA. Le rôle d'AtPIP1;2 et d'AtPIP2;1 dans le transport d'eau a été testé en mesurant la perméabilité hydrique de protoplastes (Pf) à l'obscurité, à la lumière ou à la lumière et en présence d'ABA. Le Pf des protoplastes de cellules de garde de pip2;1 est réduit de façon significative, spécifiquement en présence d'ABA. Comme la production extracellulaire de peroxyde d'hydrogène (H2O2) est essentielle pour la signalisation intracellulaire de l'ABA, nous avons également étudié la possibilité qu'AtPIP1;2 et AtPIP2;1 facilitent la diffusion de l'H2O2 à l'intérieur des cellules de garde en réponse à l'ABA. La cinétique d'accumulation d'espèces réactives de l'oxygène est abolie dans les cellules de garde chez pip2;1, mais pas chez pip1;2. Par ailleurs, dans d'autres types d'approches, nous avons étudié la régulation de ces deux aquaporines après production en levure Pichia pastoris et reconstitution fonctionnelle en protéoliposomes. Une analyse structure fonction a été réalisée avec succès pour AtPIP2;1. Elle montre que le résidu His199 est impliqué dans l'inhibition de l'activité de cette isoforme par les protons et les cations divalents. A l'inverse, le résidu Arg124 rend AtPIP2;1 complètement insensible au calcium, mais n'altère pas sa sensibilité aux protons. La surexpression de formes dérégulées d'AtPIP1;2 et d'AtPIP2;1 dans, respectivement, les mutants pip1;2 et pip2;1, indique que les régulations de l'activité intrinsèque de ces isoformes sont importantes pour leurs fonctions stomatiques. L'ensemble des résultats suggère qu'AtPIP1;2 et AtPIP2;1 ont des fonctions majeures et distinctes dans le transport d'eau et d'H2O2 lors de la fermeture stomatique induite par l'ABA chez Arabidopsis thaliana<br>Stomatal movements are mediated by drastic changes in guard cell volume. A role in these processes for water channel proteins named aquaporins has been proposed but not demonstrated. Transcriptome analyses have indicated that several plasma membrane aquaporins (PIPs) including AtPIP1;2 and AtPIP2;1 are expressed in Arabidopsis thaliana guard cells. In the present work, we investigated the function of these two aquaporins in stomatal movements. The stomata of pip1;2 and pip2;1 knock-out mutants showed a normal opening response to light and low CO2, a normal closing response to darkness and high CO2, but were almost insensitive to abscisic acid (ABA)-induced stomatal closure. A direct role of AtPIP1;2 and AtPIP2;1 in water transport was investigated by measurement of guard cell protoplast water permeability (Pf) under darkness, light and light with ABA. The Pf of pip2;1 guard cell protoplasts was significantly reduced, specifically in the presence of ABA. As extracellular hydrogen peroxyde (H2O2) production is essential for intracellular ABA signalling, we also investigated the possibility that AtPIP1;2 and AtPIP2;1 facilitate the diffusion of H2O2 through the guard cell plasma membrane. Time-dependent accumulation of reactive oxygen species in response to ABA was abolished in pip2;1 but not pip1;2 guard cells. In another type of approach, the regulation of the two aquaporins was investigated after production in the yeast Pichia pastoris and functional reconstitution in proteoliposomes. Structure-function analysis was achieved in the case of AtPIP2;1, showing that cytoplasmic residue His199 is involved in both divalent-cation- and proton-mediated gating. In contrast, mutation of Arg124 rendered AtPIP2;1 largely insensitive to calcium while remaining fully sensitive to protons. Over-expression of deregulated forms of AtPIP1;2 and AtPIP2;1 in pip1;2 and pip2;1, respectively, indicated that the gating regulation of these proteins may play an important role in their guard cells functions. Altogether, our results suggest that AtPIP2;1, and to a lesser extent AtPIP1;2, play important and distinct roles in water and H2O2 fluxes during ABA-induced stomatal closure in Arabidopsis thaliana
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Fierro-Pastrana, Reyna-Carmen. "Etude de l'architecture moléculaire de la membrane plasmique et des membranes acrosomiques du spermatozoïde humain : leurs modifications au cours des phénomènes de capacitation et de la réaction acrosomique." Nancy 1, 1997. https://hal.univ-lorraine.fr/tel-01747360.
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Ce travail a été mené en utilisant la technique de cytofluorométrie et la technique de microscopie électronique. La première partie met en évidence la localisation des résidus N-Acétylglucosamine au niveau de la membrane plasmique, galactose au niveau de la membrane externe de l'acrosome, et mannose et fucose au niveau de la membrane interne de l'acrosome. On a mis au point une technique de triple marquage en utilisant simultanément trois fluorochromes différents (iodure de propidium, GB24 et lectine). Ces résultats ouvrent une orientation vers des applications pratiques pour l'exploration des qualités fonctionnelles du sperme dans le cadre des études des hypofertilités et des indications cliniques des techniques d'assistance médicale à la procréation. La deuxième partie du travail aborde l'étude de l'influence des cytokines sur la fécondance du sperme. Les résultats montrent qu'il existe chez l'homme des corrélations entre la fixation de certaines cytokines sur les spermatozoïdes et des altérations du spermogramme (nombre, mobilité et formes immatures des spermatozoïdes). Les données obtenues permettent une meilleure connaissance des relations cytokine-spermatozoïde et d'envisager des applications à l'exploration de la fécondance du sperme et de ses mécanismes.
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Lemaire, Laurine. "Étude des propriétés physico-chimiques de la membrane plasmique comme facteurs modulant l'interaction de molécules et des structures protéiques exogènes." Electronic Thesis or Diss., Compiègne, 2022. http://www.theses.fr/2022COMP2713.
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La membrane plasmique est souvent décrite comme une structure délimitant et protégeant la cellule de son environnement. Son rôle est bien plus complexe et multifonctionnel, c’est une plateforme d’échange et de contact incontournable entre les milieux externes et internes des cellules. De nombreuses fonctions cellulaires lui sont étroitement liées comme la migration, le transport de molécules, certaine voie de signalisation ou le contact avec des micro-organismes. Les travaux de cette thèse se focalisent sur l’étude de processus cellulaires s’orchestrant au niveau membranaire par un système mimant les propriétés des bicouches lipidiques : les liposomes. Ce modèle in vitro, permettant un contrôle fin des conditions expérimentales, représente une alternative aux analyses sur cellules entières souvent peu concluantes, faute de pouvoir cibler suffisamment précisément un processus membranaire en particulier. Les liposomes permettent la focalisation sur une fonction ou un constituant en particulier. Dans cette thèse, l’utilisation du modèle biomimétique a été déclinée pour l’étude de plusieurs processus. Les mécanismes d’adhésion de bactéries flagellées sur les bicouches lipidiques ont été étudiés. Ces informations obtenues sont de haute importance dans le contexte de résistance aux traitements, nous permettant d’avoir plus de données pour le développement de thérapies alternatives aux traitements antibactériens actuels. Le modèle de liposomes a également été utilisé comme base pour la formation de protéoliposomes dans l’étude d’une protéine transmembranaire, MRP4 (multidrug resistance associated protein 4). L’étude de cette protéine constitue un enjeu dans le cadre des traitements multi-médicamenteux car elle est au centre des interactions médicamenteuses. Et enfin, le modèle a été utilisé pour la caractérisation de l’interaction des bicouches de lipides avec des molécules à fort potentiel thérapeutique : les polyphénols. L’ensemble de ces travaux a été réalisé dans le cadre d’une collaboration avec l’équipe du Pr. Patrick Trouillas (Equipe INSERM U1248, CHU de Limoges) qui s’intéresse au développement de modèles cellulaires biomimétiques in silico<br>The plasma membrane was often described as a structure delimiting and protecting the cell from its external environment. However, his role is much more complex and multifunctional. The membrane is an exchange platform at the cellular external and internal environments. Many cellular functions are closely related to it, such as migration, transport of molecules, some pathways of metabolic signaling, or the contact with micro-organisms. This thesis focuses on the study of some cellular processes occurring at the membrane interface using a system that can mimic the lipid bilayer properties. This membrane models that allow a precise control of the in vitro conditions, represent a good alternative to the often inconclusive studies on whole cells. Liposomes allow focusing on a particular function or constituent. In this thesis, the use of the biomimetic model was declined for the study of several processes. The mechanisms of adhesion of flagellated bacteria to lipid bilayers were studied as a function of the physical properties of the lipid bilayers. This information is of paramount importance in the context of antibiotic resistance, giving more information for the potential development of alternative therapies. The liposome model was also used for forming proteoliposomes to study of a transmembrane protein, MRP4 (multidrug resistance associated protein). The study of this protein is an issue in multi-drug treatments. Indeed, this protein is widely involved in drug interactions. Finally, the liposome model was used to characterize the interaction with lipid bilayers of molecules with high therapeutic potential: polyphenols. All of this work was done in collaboration with the team of the Prof Patrick Trouillas (INSERM U1248 team, Limoges University Hospital) working on the development of biomimetic cell models in silico
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Ageorges, Agnès. "Analyse comparative des électrophorégrammes bidimensionnels pour la recherche des polypeptides de la membrane plasmique de racines de mai͏̈s impliqués dans le transport de nitrate." Montpellier 2, 1992. http://www.theses.fr/1992MON20091.
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L'identification des transporteurs secondaires de la membrane plasmique vegetale presente plusieurs difficultes: faible abondance et absence d'activite enzymatique. Une des caracteristiques du transport de nitrate est d'etre inductible. Partant de l'hypothese que le traitement d'induction du systeme de transport de nitrate modifie l'abondance du transporteur dans la membrane, nous avons compare, par electrophorese bidimensionnelle, les profils polypeptidiques de la membrane plasmique de racines de mais avant et apres induction du transporteur. A l'aide d'un systeme d'analyse d'image, une analyse comparative et critique des electrophoregrammes a ete developpee. Sur les gels colores au nitrate d'argent, aucun polypeptide n'est specifique du traitement nitrate. L'analyse quantitative (basee sur une etude statistique) selectionne six polypeptides enrichis apres induction du transporteur, qui peuvent etre des candidats potentiels impliques dans le transport de nitrate. Les profils polypeptidiques de la membrane plasmique, apres marquage in vivo avec de la (#3#5s)methionine, avant et apres induction du transporteur, ont aussi ete compares. Deux polypeptides membranaires (39 kd et 61 kd) ont ete mis en evidence apres induction du transporteur. La discussion porte sur les difficultes et les precautions a prendre dans ce type d'approche
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SENECHAL, HELENE. "Role des glycoproteines de la membrane plasmique au cours de la differenciation terminale des myoblastes." Paris 7, 1989. http://www.theses.fr/1989PA077114.
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Les modifications de la membrane plasmique ayant lieu au cours du processus de differenciation terminale du myoblaste ont ete etudiees in vitro sur deux lignees cellulaires (lignee l6 et lignee ama 102). La signification biologique des modifications observees durant les phases proliferatives, de confluence et de formation des myotubes ont ete discutees
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ANTOINE, SYLVESTRE. "Etude electrophysiologique des canaux calciques de type-b dans la membrane plasmique des myocytes cardiaques." Paris 11, 2001. http://www.theses.fr/2001PA112068.
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Le ca 2 + intervient dans de nombreux processus cellulaires comme la contraction des cardiomyocytes, et la regulation fine de sa concentration est un enjeu capital pour le fonctionnement normal de la cellule. Pour reguler cette concentration, les cellules disposent de proteines membranaires : canaux ioniques, echangeurs et atpases, charges de reguler les echanges de ca 2 + entre le cytosol et le milieu extracellulaire. Or il a ete montre l'existence d'un influx calcique dans les cardiomyocytes en diastole, cela alors qu'aucune des proteines membranaires connues ne permet de l'expliquer. Les canaux calciques de type-b pourraient expliquer cet influx. Nous avons donc cherche a etudier ces canaux, afin de mieux comprendre leur fonctionnement ainsi que leurs implications dans les processus cellulaires. Nous avons montre leur existence dans la membrane des myocytes atriaux humains. Par ailleurs, ayant formule l'hypothese que ces canaux correspondent a un mode de fonctionnement canal de la pmca -l'atpase calcique membranaire chargee d'expulser du calcium du cytosol vers le milieu extracellulaire- nous avons montre l'existence d'un lien possible entre les canaux de type-b et la pmca : nous avons observe qu'un certain nombre de substances affectant l'activite de la pmca agissent egalement sur l'activite de ces canaux (eosine, la 3 +, alf 3 (inhibiteurs de la pmca), calmoduline (proteine activatrice de la pmca), atp, 5f10 (anticorps monoclonal specifique de la pmca)), et des experiences de reincorporation de proteine pmca purifiee dans des liposomes geants nous ont permis d'observer une activite canal calcique presentant certaines similitudes avec celle des canaux de type-b. Enfin, dans une derniere serie d'experiences nous avons mis en evidence leur implication dans le processus d'apoptose induite par le c 2-ceramide : activation directe des canaux de type-b par le c 2-ceramide, et modulation par la cpz et l'eosine de l'apoptose induite par le c 2-ceramide.
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Blouin, Cédric. "Rôle des cavéolines dans le stockage adipocytaire : de la membrane plasmique à la gouttelette lipidique." Paris 6, 2009. http://www.theses.fr/2009PA066011.
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J’ai étudié la fonction des cavéolines (cav) sur la gouttelette lipidique (GL) et leur rôle dans le stockage adipocytaire. Les cav associées aux GL montrent une organisation oligomérique et une faible mobilité membranaire. Nous avons aussi observé une relocalisation tardive des cav sur les GL pendant la différenciation adipocytaire. Nous émettons donc l��hypothèse que la cav-1 participe à la structure des GL et peut favoriser leur accroissement. Nous nous sommes aussi intéressé au rôle des cav de la membrane plasmique (MP) dans les mécanismes de résistance à l’insuline via les céramides. Nous avons montré que les cav cloisonnent la MP en définissant des domaines où les céramides agissent. Enfin, nous avons étudié le rôle des cav dans le stockage adipocytaire en étudiant des adipocytes de souris cav-1 (-/-). Chez ces souris lipodystrophiques, la cav-1 est nécessaire pour l’expression de nombreuses protéines. Ces données aideront pour préciser le phénotype lipodystrophique de ces souris.