Добірка наукової літератури з теми "Dysfonction chronique de l'allogreffe"

Les tachycardies sont classées en tachycardies d'origine ventriculaire ou supraventriculaire. Les tachycardies supraventriculaires sont un problème clinique fréquent en pratique quotidienne. Elles peuvent provoquer des symptômes telles que des palpitations, des douleurs thoraciques et une dyspnée. Elle peuvent induire au long terme une dysfonction myocardique chronique avec insuffisance cardiaque (tachycardiomyopathie). Contrairement à la plupart des tachycardies supraventriculaires, la majorité des tachycardies ventriculaires représentent un danger potentiel sévère. Ce travail décrit la présentation clinique, les mécanismes physiopathologiques et les étapes initiales des tachycardies supraventriculaires et ventriculaires.

La modulation du système endocannabinoïde, en particulier le blocage de son récepteur de type 1 (CB1R), pourrait être un outil thérapeutique dans la prise en charge de la maladie rénale chronique (MRC). Notre hypothèse principale était que CB1R favorise la fibrogenèse rénale, indépendamment de sa cause. Son blocage, génétique ou pharmacologique, pourrait protéger le rein contre la progression de la MRC. Nous avons étayé notre hypothèse par une triple approche : translationnelle, expérimentale chez la souris et in vitro avec des lignées de cellules épithéliales tubulaires proximales et de myofibroblastes. Dans une étude translationnelle chez l’homme, nous avons montré que l’expression de CB1R augmentait fortement au cours de la dysfonction chronique de l’allogreffe et était corrélée avec la fibrose interstitielle 3 mois après la greffe. In vitro, le blocage pharmacologique de CB1R réduisait la synthèse de collagène par les cellules épithéliales tubulaires. Dans un modèle expérimental murin de MRC après ischémie-reperfusion (I/R-CKD), le blocage génétique global ou pharmacologique de CB1R prévenait la MRC et réduisait significativement la fibrose interstitielle. In vitro, l’inhibition pharmacologique de CB1R réduisait la synthèse de collagène par les myofibroblastes. De façon inattendue, la délétion de CB1R restreinte aux cellules tubulaires rénales aggravait la MRC dans l’I/R-CKD. L’effet protecteur du blocage global de CB1R est donc probablement lié à un effet prépondérant sur les myofibroblastes. Ainsi, le blocage pharmacologique de CB1R pourrait constituer un nouvel outil dans la prise en charge thérapeutique de la MRC, indépendamment de son origine
Some studies suggest that the cannabinoid receptor type 1 (CB1R) inhibition could be a new therapeutic toolbox in chronic kidney disease (CKD), especially in metabolic nephropathies. We aimed that CB1R promotes renal fibrogenesis, regardless of its cause. Its inhibition, genetic or pharmacological, could protect the kidney against the progression of CKD. We supported our hypothesis by a threefold approach: translational, experimental in mice and in vitro with culture cells of proximal tubular epithelial cells and myofibroblasts. Whereas CB1R expression was low in normal kidney grafts, it was highly expressed during chronic allograft dysfunction, especially in tubular cells. CB1R expression significantly increased early on after transplantation and correlated with renal fibrosis at M3. In vitro, we found that rimonabant, a CB1R antagonist, blunted collagen synthesis by tubular cells. We performed an experimental mouse model of CKD induced by ischemia-reperfusion (I/R-CKD). In this model, the global genetic or pharmacological inhibition of CB1R prevented CKD and significantly reduced interstitial fibrosis. In vitro, pharmacological inhibition of CB1R reduced collagen synthesis by myofibroblasts. Unexpectedly, the deletion of CB1R restricted to renal tubular cells worsened CKD in I/R-CKD. The protective effect of the global inhibition of CB1R is therefore probably mediated by a predominant effect on myofibroblasts.Thus, we demonstrated that the pharmacological blockade of CB1R could be a new therapeutic toolbox in CKD, regardless of its origin

La LLC est une hémopathie très hétérogène et reste incurable. Les recherches biologiques ont identifié la taille moyenne des télomères (extrémités protectrices des chromosomes) comme un nouveau facteur pronostique (les cellules malignes de la forme grave de la maladie ont des télomères plus courts que celles de la forme indolente). En parallèle, il a été démontré au laboratoire que les cellules malignes de patients LLC peuvent être résistantes (LLC-R) ou sensibles (LLC-S), in vitro, à l’apoptose induite par les dommages de l’ADN (CDB). Cette différence semble être corrélée à leur sensibilité aux traitements de première ligne et elle est associée à une dérégulation du système de réparation non homologue de l’ADN (NHEJ). L’objectif de ce travail était de déterminer si la dysfonction télomérique est associée la résistance aux CDBs et de mieux caractériser cette dysfonction dans les cellules de LLC. Les résultats obtenus démontrent que la taille moyenne des télomères est plus courte dans les cellules LLC-R comparés aux LLC-S et que ce raccourcissement est associé à une structure télomérique altérée pouvant limiter l’action des systèmes d’élongation. Nous avons aussi mis en évidence que la présence de télomères courts dans les cellules LLC-R s’accompagne de i) un raccourcissement de la partie télomérique simple brin, ii) la reconnaissance des télomères courts par le système NHEJ et iii) d’une perte de signaux télomériques associée à des marqueurs de mauvais pronostic. Ces résultats suggèrent que la dysfonction télomérique est non seulement une caractéristique biologique de la forme grave de la LLC mais pourrait aussi être à l’origine de son évolution et/ou de son apparition
CLL is a highly heterogeneous disease and remains incurable. The biological researches have identified the mean telomere length (protective ends of chromosome) as a new prognostic factor because the malignant cells of the progressive form of the disease have shorter telomeres than the indolent form. In parallel it has been demonstrated in our lab that leukemic cells from CLL patients may be resistant (CLL-R) or sensitive (CLL-S) in vitro to DNA damage (DSB) induced apoptosis. This difference seems to be correlated with their sensitivity to first-line treatment and is associated with deregulation of the non homologous end-joining system (NHEJ). The objective of this study was to know if the telomeric dysfunction is associated to a resistance to DSB and to better caracterise this dysfunction in CLL cells. The results show that the mean telomere length is twofold shorter in the CLL-R as compared to CLL-S and that this shortening is associated with an altered telomere structure which may limit the action of elongation systems. We also demonstrated that the presence of short telomeres in CLL-R cells is accompanied by i) a shortening of the telomeric single-stranded portion, ii) telomeres recognition by factors implicated in DSB signalling and repair by the NHEJ system, and iii) a loss of telomeric sequences associated with chromosomal abnormalities which are hallmarks of poor prognosis. Altogether, these results suggest that telomere dysfunction is not only a biological characteristic of the progressive form of CLL but may also be responsible for its development and /or its appearance

Ce travail de thèse étudie les relations existant entre les taux plasmatiques de microparticules endothéliales circulantes (MPEs) et la fonction endothéliale chez l'humain. Dans la première partie de ce travail, nous avons montré chez l'insuffisant rénal chronique hémodialysé (IRC), une relation forte entre les taux de MPEs circulantes, la rigidité artérielle et la fonction endothéliale in vivo. Les MPEs isolées ex vivo chez ces patients pouvaient induire une dysfonction endothéliale expérimentale par inhibition de la synthèse de NO. Par ailleurs, nous avons montré une corrélation inverse entre le taux de MPEs circulantes et la valeur du shear stress exercé sur l'endothélium de ces patients. Par ailleurs, nous avons mis en évidence une élévation des taux plasmatiques de MPEs chez les sujets atteints d'hypertension pulmonaire (HTP) et une forte corrélation entre les taux de MPs CD31+/41-, CD 144+ et différents marqueurs de sévérité hémodynamique de la maladie. Nous avons également étudié les conséquences d'une agression aiguë (exposition in vivo au tabagisme passif) de l'endothélium. Nous avons constaté une augmentation précoce et soutenue des taux de MPEs, associée à une diminution transitoire de la valeur de la dilatation induite par le flux et à une augmentation secondaire des concentrations de progéniteurs endothéliaux circulants. Enfin, nous nous sommes enfin intéressés à la valeur pronostique des taux de MPEs : le taux de MPs CD62e+ était un facteur prédictif indépendant de complications cliniques chez les patients HTP, alors que la valeur basale des MPs CD31+/41- était un puissant prédicteur d'événements cardio-vasculaires défavorables chez les patients IRC
Microparticles (MPs) are shed membrane vesicles released by different cells after activation or apoptosis. This work investigates the relationships between circulating endothelial microparticles (EMPs) levels and endothelial fonction in different clinical situations in human beings. We first showed a strong relationship between EMPs levels, arterial stiffness and flow-mediated dilation (FMD) in end-stage renal failure disease (ESRF) patients. Moreover, the EMPs that were isolated ex vivo from these patients' plasma experimentally induced an endothelial dysfunction by reducing nitric oxide synthesis. Furthermore, we showed an inverse relationship between EMPs levels and value of shear stress applied to these ESRF patients' endothelium. Then, we studied subjects with pulmonary hypertension (PH): we found an increase in EMPs levels compared to normal controls and a strong correlation between CD31+/41-, CD 144+ EMPs levels and several hemodynamic parameters of disease severity. We also investigated the impact of an acute tobacco second hand smoke exposure on healthy volunteers endothelium: this acute endothelial injury induced a quick and sustained increased in EMPs levels, associated with a transient decrease in FMD values, that were subsequently followed by an increase in the number of circulating endothelial progenitor cells. Finally, we focused on the prognostic value of EMPs levels on clinical outcome: we found that elevated values of CD62e+ EMPs predicted poor outcome in PH patients, whereas increased levels of CD31+/41- EMPs were associated with increased incidence major cardiovascular events in ESRF subjects

En hémodialyse chronique, la dysfonction musculaire est une pathologie fréquente qui au même titre que la sarcopénie chez les sujets âgés grève le pronostic de ces patients. Malgré les similitudes entre ces deux entités, la dysfonction musculaire des patients insuffisants rénaux doit être distinguée de la sarcopénie. Certaines anomalies moléculaires observées semblent être différentes de celles constatées au cours du vieillissement. Ce travail de thèse, regroupant quatre études, a eu pour objectif d’ identifier puis de caractériser la dysfonction musculaire des patients hémodialysés chroniques. Dans la première étude, nous avons développé une méthode de mesure de la force musculaire du quadriceps fiable, reproductible et réalisable au lit des patients. Dans la seconde, nous avons montré que les facteurs cliniques et biologiques associés à une diminution de la force musculaire étaient des facteurs différents de ceux associés à une diminution de la masse musculaire. Dans cette étude nous avons pu également identifier des patients avec une diminution de la force sans diminution de la masse musculaire. Ce dernier point caractérise les patients dynapéniques. Le pronostic de ces patients a été étudié dans la troisième étude. Le risque de décès est identique chez ces patients par rapport aux patients sarcopéniques, alors même que les patient dynapéniques sont plus jeune avec moins de comorbidités. Ce travail montre par ailleurs, que la force musculaire est un meilleur marqueur pronostic que la masse musculaire. Enfin dans la quatrième étude, nous avons montré chez des patients hémodialysés en attente de transplantation, qu’il pouvait exister une véritable myopathie induite par l’insuffisance rénale avec des caractéristiques histologiques spécifiques. Ces dernières sont compatibles avec la diminution de l’endurance observée dans cette population. Ainsi, en partant du critère clinique, universellement reconnu de la masse musculaire, nous avons évolué vers l’exploration de la force puis de l’endurance. Finalement, ce travail apporte certains éléments qui permettent de confirmer l’existence d’anomalies musculaires spécifiques à l’insuffisance rénale chronique
Muscle dysfunction, a common feature in chronic haemodialysis patients, is associated with an increased risk of mortality independently of the disease severity, like sarcopenia in elderly patients. Despite similarities between the two situations, muscle dysfunction in chronic haemodialysis patients must be distinguished from sarcopenia. Some molecular abnomalities observed, such as the transition from slow to fast-fibre in muscle, appear to be different from those described during aging. This thesis comprises four studies which aim to identify and characterize the muscle dysfunction in chronic haemodialysis patients. In the first study, we developed a reliable and reproducible tool allowing the measurement of quadriceps muscle strength at the bedside. The second one showed that clinical and biological factors associated with a decrease in muscle strength were different from those associated with a decrease in muscle mass. In this study we were also able to identify patients with a decrease in muscle strength without a decrease in muscle mass, which characterizes dynapenic patients. The prognosis of these patients was studied in the third study. The risk of death was similar in these patients compared to sarcopenic patients, even though dynapenic patients were younger with fewer comorbidities.. This work also showed that muscle strength is a better prognosis marker than muscle mass. Finally, in the fourth study, we showed in hemodialysis patients on the waiting list for a kidney transplant, that a true renal insufficiency-induced myopathy with specific histological characteristics could exist. These characteristics are compatible with the decrease in endurance observed in this population. Thus, starting from the universally recognized clinical criterion of muscle mass, we have evolved towards the exploration of strength and endurance. Finally, this work provides some elements that confirm the existence of muscle abnormalities specific to chronic renal failure

La dysfonction chronique du greffon (DCG) résulte d'un processus inflammatoire chronique induit par des facteurs lésionnels immunologiques et non immunologiques. Malgré les progrès sensibles des protocoles d'immunosuppression qui ont permis d'améliorer les résultats à court terme, la DCG reste l'une des premières causes de perte tardive du greffon. Notre travail clinique a consisté à évaluer l'apport du mycophénolate mofétil (MMF) dans le cadre d'une stratégie d'élimination de la ciclosporine (CsA), en terme de prévention du rejet aigu et de la néphrotoxicité des inhibiteurs de la calcineurine, qui sont 2 facteurs de risque majeurs de DCG. Rétrospectivement, nous avons comparé l'azathioprine au mycophénolate mofétil en association à la CsA. L'association MMF et CsA a permis non seulement de réduire l'incidence mais également d'atténuer les conséquences délétère du rejet aigu, ce qui s'est traduit par une amélioration significative de la survie du greffon à 3 ans chez les patients ayant présenté un ou plusieurs épisodes de rejet aigu durant les 6 premiers mois de greffe. Dans une étude randomisée ouverte évaluant l'arrêt précoce (3 mois) de la CsA sous MMF et prednisone chez des patients à faible risque immunologique, nous avons observé une amélioration significative de la fonction rénale à 1 et 2 ans au décours du sevrage de la CsA. La pharmacocinétique du MMF et les modifications " borderline " sur la biopsie à 3 mois étaient les 2 facteurs indépendants prédictifs de rejet aigu à l'arrêt de la CsA, identifiés dans cette étude. La biopsie systématique à 1 an a mis en évidence l'apparition de dépôts de C4d pour une proportion importante de patients sevrés de la CsA, indépendamment de la survenue d'un rejet aigu précoce. Cependant, ni le bilan histologique à 1 an (Chronic Allograft Damage Index), ni la fonction rénale à 2 ans ne suggéraient l'installation d'un rejet chronique chez ces patients. Un suivi prolongé et des examens spécifiques (par exemple la recherche d'anticorps anti-HLA) seront nécessaires pour interpréter cette donnée, qui pose la question de la valeur pronostique des dépôts de C4d découverts sur des biopsies protocolaires effectués chez des patients stables. Dans la mesure où les agressions immunologiques et non immunologiques entretiennent un processus inflammatoire chronique, nous avons voulu évaluer l'impact de différentes molécules anti-inflammatoire et/ou immunomodulatrices sur la progression de la DCG. La pentoxifylline, les statines et les agonistes PPAR (Peroxisome Proliferator-Activated Receptors), dont on connaît les effets pléiotropes et la sécurité d'utilisation en pratique clinique, ont été testés dans un modèle murin d'allogreffe cutanée. Ni la pentoxifylline ni les statines n'ont influencé l'évolutivité du rejet chronique dans ce modèle. Paradoxalement, l'administration précoce de fénofibrate, agoniste PPAR, a provoqué une aggravation de la fibrose, tant au sein des greffons cutanés allogéniques que syngéniques. Ces données suggèrent que l'activation de PPAR, qui est exprimé transtoirement après une lésion cutanée, peut moduler la cicatrisation dans ce modèle. La prévention de la DCG repose en partie sur des modifications précoces de l'immunosuppression destinées à éviter à long terme la néphrotoxicité des inhibiteurs de la calcineurine. Cependant cette stratégie comporte un risque élevé de rejet aigu et ne peut être proposée à tous les patients. Ce risque peut être minimisé par une sélection rigoureuse des receveurs tenant compte à la fois des événements survenus pendant les 3 premiers mois de greffe, de la pharmacocinétique des immunosuppresseurs et des données histologiques à 3 mois. Néanmoins, la nephrotoxicité des inhibiteurs de la calcineurine n'est qu'un seul des multiples facteurs responsables du processus inflammatoire chronique conduisant à la DCG. Des médications anti-inflammatoires non spécifiques, en association au traitement immunosuppresseur, pourraient contribuer à contrôler la progression de la DCG. Une approche expérimentale peut être utile à la sélection de molécules potentiellement actives, avant la mise en place d'essais cliniques qui nécessiteront le suivi prolongé d'importantes cohortes de patients
Chronic allograft dysfunction (CAD) is a chronic inflammatory state inside the graft, causally related to immunological and non immunological injuries. Despite significant improvements in immunosuppressive regimens that led to better results in the short term, CAD remains a major cause of late graft lost in renal transplantation. The clinical part of this work was to evaluate the efficiency and safety of mycophenolate mofetil (MMF) in a strategy of cyclosporine (CsA) withdrawal, for the prevention of acute rejection and nephrotoxicity of calcineurin inhibitors, two of the strongest risk factors for CAD. In a retrospective study we compared azathioprine to mycophenolate mofetil associated with CsA: MMF+CsA reduced the incidence of acute rejection and weakened the deleterious consequences of acute rejection, resulting in significantly increased 3-year graft survival rates in patients who had experienced one or more acute rejection episodes during the first 6 months post graft. In a randomized, open-labelled study to evaluate early (3 months) withdrawal of CsA under MMF and prednisone in low immunological risk recipients, we demonstrated a significant improvement of the renal function at 1 and 2 years after CsA discontinuation. However, a higher proportion of the recipients withdrawn from CsA experienced acute rejection, as compared with patients withdrawn from MMF and maintained under CsA and prednisone. Pharmacokinetics of MMF and borderline histological changes in the 3-month graft biopsy were identified as 2 independent predictors of acute rejection after CsA withdrawal. The 1-year systematic graft biopsy revealed that a significant number of patients withdrawn from CsA developed peritubular C4d deposits, independently of the occurrence of early acute rejection episodes. However, neither 1-year Chronic Allograft Damage Index nor 2-year graft function were suggestive of a progression towards chronic rejection in these patients. Further follow-up as well as specific investigations (e. G. HLA antibodies) are needed to clarify this result, which questions the prognostic value of C4d deposits on protocol biopsies in stable patients. Because both immunological and non immunological injuries contribute to a chronic inflammatory process, we evaluated the impact of different anti-inflammatory and/or immunomudulatory drugs on the progression of CAD. Pentoxifylline, statins, and PPAR (Peroxisome Proliferator-Activated Receptors) agonists were tested because of their known pleiotropic effects and their safety in clinical practice. In a murine model of skin allograft, neither pentoxifylline nor statins modified the course of chronic rejection in this model. The PPAR ligand fenofibrate paradoxically exacerbated fibrosis in allogeneic and syngeneic skin grafts when administrated immediately after the graft. These data suggest that activation of PPAR, which is transiently expressed after a cutaneous lesion, may interfere with wound healing in this model. Prevention of CAD can partly rely on early modifications of the immunosuppressive regimen to avoid long term nephrotoxicity of calcineurin inhibitors, but this strategy carries a significant risk of acute rejection, and CsA elimination cannot be recommended for all patients. This risk can be minimized in carefully selected recipients according to the early events post graft, pharmacokinetics of the immunosuppressive drugs, and histological results at 3 months. However, the nephrotoxicity of calcineurin inhibitors is only one among multiple factors involved in the chronic inflammatory process leading to CAD. Non-specific anti-inflammatory treatment in association with immunosuppressive drugs could slow down progression of graft failure. An experimental approach can help to select active molecules before initiating clinical trials that will require high numbers of patients and a prolonged follow-up

La transplantation s’accompagne aujourd’hui systematiquement de traitements immunosuppresseurs qui inhibent la reponse alloimmune dirigee contre le greffon afin d’eviter son rejet. Cependant, ces traitements lourds ont de nombreux effets deleteres et ne permettent pas de controler efficacement la survenue du rejet chronique a long terme. L’objectif de ce travail de these, base sur deux situations cliniques distinctes, s’inscrit dans deux axes prioritaires de la recherche en transplantation : (1) identifier des marqueurs predictifs de la perte de fonction des greffons pulmonaires et (2) decrypter les mecanismes de l’acceptation des greffons renaux dans une situation de tolerance operationnelle. Tout d’abord, nous avons etudie les mecanismes de l’acceptation du greffon, chez des patients transplantes renaux presentant un greffon fonctionnel en l’absence de traitement immunosuppresseur. Nous avons identifie chez ces patients une proportion plus importante de lymphocytes T regulateurs memoires circulants, ayant la capacite de degrader l’ATP extracellulaire et favoriser un etat protolerogenique. Ce mecanisme, defaillant chez les patients stables sous traitement, pourrait participer au maintien d’un greffon renal fonctionnel chez les patients tolerants non traites. Dans un second temps, nous nous sommes interesses, chez des patients transplantes pulmonaire, a la prediction de la survenue du rejet chronique. Nous avons mis en evidence un profil lymphocytaire T regulateur modifie chez les patients qui developperont un rejet chronique a long-terme. Le suivi de ce biomarqueur pourrait permettre une meilleure identification des patients a risque de rejet
Transplantation is nowadays systematically associated with the administration of immunosuppressive treatments inhibiting the allo-immune response toward the graft to prevent the rejection by the recipient's immune system. However, these heavy treatments have several deleterious effects and are not able to control longterm chronic rejection development. Thus, the objective of this PhD work, based on two distinct clinical situations, is part of two priority axes of transplant research: (1) identify early predictive markers of long-term lung allograft dysfunction and (2) decipher the mechanisms involved in the acceptance of kidney allograft in operational tolerance. We first investigated the mechanisms of graft acceptance in kidney transplanted patients with a functional graft in the absence of immunosuppressive therapy. We identified in these patients a greater proportion of circulating memory regulatory T lymphocytes, with an increased ability to degrade extracellular ATP, a pro-inflammatory mediator, and favour a protolerogenic environment. Thus, this mechanism, not efficient in stable patients under treatments, could participate in the inhibition of the allo-immune response leading to maintaining a functional kidney graft in the absence of immunosuppression. In a second time, we interested in the prediction of chronic rejection occurrence in lung transplanted patients. We report that the early posttransplant regulatory T lymphocyte profile is modified in patients who will develop chronic rejection in the 3 years. Thus, monitoring this predictive biomarker could allow a better identification of patients at risk of rejection

L'existence d'une dysfonction musculaire périphérique (DMP) est bien décrite chez les patients BPCO. Plusieurs facteurs contribuent à cette dysfonction mais les mécanismes ne sont pas tous clairement élucidés. La démarche scientifique de ce travail de thèse s'est donc inscrite dans l'identification des mécanismes biologiques et cellulaires qui contribuent à la DMP des sujets BPCO. Nos premiers résultats ont montré que la voie de la xanthine oxydase était une source de stress oxydant musculaire, et que l'inhibition de cette voie, et donc la diminution du stress oxydant musculaire, permettait de conserver certaines propriétés contractiles. Le stress oxydant serait donc impliqué dans l'altération de la fonction musculaire des patients BPCO. Dans un second temps, nous avons montré qu'il existait des anomalies de la fonction mitochondriale chez des patients BPCO comparativement à des sujets sains. De plus, ces anomalies sont en relation avec l'intolérance à l'effort observée chez ces patients. Les anomalies de la fonction mitochondriale contribue à l'apparition du stress oxydant musculaire qui, en provoquant des dommages oxydatifs, contribue à la DMP de ces patients. Enfin, nous avons évalué les effets d'un programme d'entraînement en endurance (PEE) comme thérapeutique pour améliorer la tolérance à l'effort des patients. Nos résultats montrent que l'amélioration de la fonction musculaire chez les patients BPCO et les sujets contrôlés après PEE passent par l'amélioration de la fonction mitochondriale. PEE induit une augmentation du stress oxydant musculaire chez les patients BPCO comparativement aux sujets sains, ce qui suggère que le stress oxydant musculaire est un facteur limitant de l'amélioration de la fonction musculaire chez les patients BPCO. Ce travail de thèse a donc permis d'élucider certains mécanismes biologiques et cellualires qui contribuent à la DMP des patients BPCO, ce qui ouvre le champs à de nombreuses perspectives de travaux de recherche.

La principale complication à long terme de la transplantation pulmonaire est l'apparition d'une dysfonction chronique du greffon (CLAD), dont l'un des phénotypes est la bronchiolite oblitérante (BO), caractérisée par un remodelage bronchique excessif et une obstruction bronchique irréversible. Plusieurs études démontrent que les cellules épithéliales bronchiques (CEB) jouent un rôle dans ce processus, selon un mécanisme de transition épithélio-mésenchymateuse (TEM). Le but de notre étude est de 1) mettre en place un nouveau modèle in vitro entre les CEB et des LT activés et monocytes allogéniques 2) déterminer l'influence de ces cellules dans la TEM et 3) identifier de potentiels biomarqueursde la BO. Lors de ces travaux, j'ai développé un modèle proche de la situation retrouvée chez les patients avec la sécrétion de CCL2, CCL3, CCL4 et CXCL-10 dans les surnageants de culture. J'ai démontré que les cellules immunitaires,en synergie avec le TGF-ß1accentuent la sécrétion de MMP-9 par l'épithélium. De plus, j'ai mis en évidence l'importance de l'axe CCL2/CCR2 dans cette sécrétion, proposant ainsi CCR2 comme cible thérapeutique potentielle. Enfin, j'ai montré la pertinence de la MMP-9 comme biomarqueur prédictif de la BO dans les plasmas de patients de la cohorte COLT. Ces travaux démontrent l'implication du contexte allogénique dans la TEM au cours du remodelage de l'épithélium, par la production de MMP-9 et suggèrent un lien entre CCL2 et MMP-9. La validation de ce biomarqueur prédictif permettra de mettre en place de nouvelles thérapeutiques afin d'anticiper l'apparition de la BO et de limiter son développement avant la dégradation des fonctions respiratoires
Chronic lung allograft dysfunction (CLAD) is the major limitation to lung transplantation, with the most common phenotype being bronchiolitis obliterans (BO). BO is characterized by an irreversible airflow obstruction after an aberrant airway remodeling process. Bronchial epithelial cells (BEC) seem to play a key role in this process through epithelial to mesenchymal transition (EMT). The aim of this study was to 1) set up an in vitro model of allogeneic co-culture 2) test the impact of allogeneic context on EMT 3) identify new predictive biomarkers of BO. I have developed a new in vitro co-culture model between BEC and allogeneic activated T cells and/or monocytes. Detection of CCL2, CCL3, CCL4 and CXCL-10 in culture supernatants shows the relevance of the model. I have demonstrated that immune cells in synergywith TGF-ß favors MMP-9 secretion. Furthermore, I have demonstrated the role of CCL2/CCR2 in this secretion, suggesting CCR2 as a potentiel therapeutic target. Finally, thanks to COLT cohort, I have validated plasma MMP-9 as a predictive biomarker of BO. This new in vitro model suggests the implication of allogenicity in EMT during epithelium remodeling by the induction of MMP and propose a link between CCL2 and MMP-9. It appears as a relevant tool for biomarker discovery as presented here with MMP9. Plasmatic MMP-9 maybe a valuable biomarker for BO