Добірка наукової літератури з теми "Цитохром С"

Изучено разрушения цитохрома c во время катализа им липопероксидазной реакции, обуславливающей в живых клетках разрушение митохондриальных мембран и выход в цитозоль различных проапоптотических факторов. С помощью спектрофотометрического анализа показано гораздо более интенсивное разрушение цитохрома c при добавлении перекиси водорода в присутствии тетраолеилкардиолипина при соотношениях белок : кардиолипин, равных 1:30 и 1:60 и являющихся оптимальными для образования комплекса цитохрома c с кардиолипином, в сравнении с пробой, в которой присутствовали только перекись водорода и цитохром c. Во втором случае разрушение порфиритовой группировки гема принимало вид линейной функции, в то время как в присутствии кардиолипина зависимость носила явно экспоненциальный характер, причем при внесении дополнительного липидного субстрата, в роли которого выступала фосфатидная кислота, значение константы скорости первого порядка разрушения цитохрома c возрастало. Предположено, что быстрое разрушение цитохрома c при осуществлении им катализа липопероксидазной реакции является эволюционно развившимся механизмом, направленным на предотвращение самопроизвольного запуска апоптоза.

Досліджено протиапоптотичну дію нейропептиду кіоторфін на моделі холодового стресу фібробластів лінії L929. Вплив дипептиду на клітини аналізували за морфологічними показниками, за допомогою цитофлуориметрії з одночасним фарбуванням annexin V/7-AAD та дослідженням виходу цитохрому с до цитоплазми клітин. У вибраних умовах холодового стресу відмічено вірогідне збільшення кількості клітин з морфологічними ознаками апоптозу за даними світлової мікроскопії, порушення асиметрії мембрани та зареєстровано появу в цитоплазмі клітин цитохрому с. Доведено, що додавання кіоторфіну в концентрації 100 мкг/л до середовища культивування за 15 хв до моделювання холодового стресу сприяло вірогідному зменшенню кількості клітин з ознаками апоптозу. Кількість annexin V+/7-AAD–-клітин після попередньої інкубації фібробластів з дипептидом знижувалась до 19,1 ± 0,5 % порівняно зі зразками після холодового стресу (55,3 ± 2,1 %), а кількість клітин, в цитоплазмі яких зареєстровано цитохром с, зменшувалася в 3,65 раза. На підставі результатів досліджень висловлено припущення, що попередня інкубація з регуляторним нейропептидом кіоторфін у концентрації 100 мкг/л ефективно запобігає апоптозу у фібробластах L929 в умовах холодового стресу.

Цель исследования - выяснение влияния синего (450 нм) и красного (630 нм) светодиодного облучения различной энергетической экспозиции на активность митохондриальной цитохром с-оксидазы. Методики. Объектом исследования служили митохондрии, изолированные из печени японского перепела Coturnix japonica . Цитохром с-оксидазную активность измеряли по скорости окисления восстановленного тетраметил-р-фенилендиамина в присутствии ротенона. Результаты. Показано, что облучение митохондрий синим светом с энергетическими экспозициями, не превышающими 4 Дж/см вызывает примерно 5-15-процентную стимуляцию активности цитохром с-оксидазы, а дозы больше 5 Дж/см приводят к ингибированию активности фермента. Облучение митохондрий красным светом также оказывает стимулирующее действие (10-20%) на цитохром с-оксидазную активность по сравнению с необлученными образцами. Заключение. Предполагается, что низкодозовое облучение синим светом может иметь сходное с красным светом терапевтическое действие при фотобиомодуляции. The aim was to study the effect of blue (450 nm) and red (630 nm) LED irradiation with different energy exposures on activity of mitochondrial cytochrome c oxidase. Methods. The study was performed on mitochondria isolated from the liver of Japanese quail Coturnix japonica . Cytochrome c oxidase activity was measured by the rate of oxidation of reduced tetramethyl-p-phenylenediamine in the presence of rotenone. Results. Irradiation of mitochondria with blue light at doses not exceeding 4 J/cm caused approximately 5-15% stimulation of cytochrome c oxidase activity while doses higher than 5 J/cm led to inhibition of this enzyme. Irradiation of mitochondria with red light also exerted a slight stimulating effect (10-20%) on cytochrome c oxidase activity compared to unirradiated samples. Conclusion. The study suggested that low-dose irradiation with blue light may produce a therapeutic effect similar to red light in photobiomodulation.

Исследования, проведенные в течение нескольких десятилетий, в области патофизиологических механизмов митохондрий гепатоцитов, обычно были направлены на функциональные исследования изолированных митохондрий при отсутствии АДФ. Во многих случаях исследователи использовали данные для расчета параметров, включая коэффициент дыхательного контроля или количество потребляемой АДФ на каждое количество используемого кислорода. Однако до настоящего времени мало известно о том, как вирус может выжить в сильно окислительной среде, учитывая то, что окислительный стресс является важным клиническим признаком, связанным с инфицированием вирусом гепатита С. По нашему мнению, адаптация к окислительному стрессу - это патофизиологический механизм к выживанию вируса. Цель работы заключается в исследовании механизмов нарушения энергоснабжения, как механизма повреждения клеток, у пациентов с хроническим вирусным гепатитом С. В данное исследование было включено 62 пациента с наличием HCV-инфекции - основная группа, и 24 условно-здоровых пациента, не имевших в анамнезе заболеваний печени - группа контроля. Пациентов отбирали на основании их стабильного клинического состояния в течение последних 3 месяцев. У больных основной группы, HCV-инфекция была диагностирована положительно анти-HCV и HCV-РНК в течение не менее 6 месяцев. Митохондриальную целостность оценивали путем высвобождения цитохрома С с использованием коммерческого набора (цитохром C оксидазный Kit Sigma-Aldrich, USA), который указывает на наличие 96% интактных митохондрий. Внутренняя флуоресценция NADH была отслежена в изолированных митохондриях как маркер миохондриального окислительно-активного состояния NADH. Митохондриальное деление является ключевым патогенетическим механизмом контроля целостности митохондрий, при адаптации к клеточному патофизиологическому ответу вирус гепатита С модулирует ключевые процессы, связанные с инфицированием, для содействия сохранению вируса. Митохондриальное деление не всегда связано с разрушением клеток, также оно может защищать клетки от смерти, вызванной оксидативным стрессом и Ca2+ зависимыми апоптотическими стимуляторами. Механизм, с помощью которого ферменты энергетического обмена подавляют репликацию вируса гепатита С, не совсем понятен, но, вероятно, он включает кальций и диссоциацию комплекса репликации вируса из мембран. Детальное понимание механизма, с помощью которого ферменты энергетического обмена подавляют репликацию HCV-инфекции, требуют дополнительных исследований.

С помощью молекулярного докинга (программа Schrödinger, Glide) показано, что молекула м-Cl-БГМ (мета-хлорбензгидрилмочевина) комплементарна сайту связывания бензодиазепина ГАМКА рецепторов. Энергия связывания низкая (– 11,14 ккал/моль); м-Cl-БГМ взаимодействует с ключевыми аминокислотами на α1γ2 интерфейсе: Tyr159, Tyr209, H101 Phe77 с высокой степенью соответствия модели — dG вставки: 0,741. Связывание [3H]флунитразепама с сайтом бензодиазепина ГАМКА рецепторов головного мозга крыс при экспериментальном алкоголизме, получавших 14 дней м-Cl-БГМ в дозе 100 мг/кг в сутки, увеличивалось. Выявлены изменения фармакокинетических параметров (T1/2, Clt, MRT, МЕТ, AUC) модельного субстрата — антипирина в слюне здоровых добровольцев и больных алкоголизмом мужчин при применении галодифа (м-Cl-БГМ) в дозе 300 мг/сут в течение 21 дня. Элиминация антипирина у больных алкоголизмом была повышена вследствие активации микросомальной цитохром-P450 оксидазной системы печени.

Лечение пациентов с кожным лейшманиозом представляет определенные сложности, и, несмотря на проводимую стандартную терапию, санация от лейшманий и эпителизация образовавшихся язв значительно удлиняется. Такое положение во многом связано с генетически детерминированным полиморфизмом определенных генов, в частности генов детоксикации ксенобиотиков, которые способны ускорять или замедлять выведение ксенобиотиков из организма пациентов, что, естественно, сказывается на терапевтической эффективности используемых средств. Впервые проведены исследования генов детоксикации ксенобиотиков, относящихся к цитохрому Р-450, которые ответственны за функционирование данной системы печени. Следует указать, что цитохром Р-450 (CYP2D6) метаболизирует около 20 всех известных лекарственных средств.Принимая во внимание, что большинство азиатов относятся к медленным метаболизаторам по указанному ферменту, очевидна необходимость в генетическом тестировании CYP2D6 в Узбекистане с целью коррекции доз лекарственных препаратов. Вариант CYP2D6 100C>T является определяющей мутацией для гаплотипа CYP2D6*10, а также распространен в гаплотипе CYP2D6*4.Исследования проведены у 266 пациентов с кожным лейшманиозом, когда использовались праймеры NCB1 primer design tools, что позволило изучить полиморфизм C>T гена СYP2D6. Выделение ДНК проводилось методом амплификации «Рибо-Преп» (AmpliSens, Россия). Далее выделенная ДНК подвергалась изучению качественных и количественных характеристик на 1%-ном агаровом геле методом спектрофотометрии. Распределение генотипов по полиморфизму CYP2D6 100C>T показало частоту аллеля дикого типа (С) в 74% и частоту минорногоаллеля (Т) – 26%. Среди 266 пациентов с кожным лейшманиозом полиморфизм гена CYP2D6*10 C>T распределялся следующим образом: генотип СС зарегистрирован у 175 из 266 (65,7%) пациентов, генотип СТ – у 84 (31,5%) и генотип ТТ – у 7 (2,6%) пациентов. Необходимо указать, что С-аллели наблюдались у 259 (74%) и Т-аллели – у 91 (26%), т. е. отмечается преобладание С-аллелей над Т-аллелями примерно в 2,8 раза.Проведенные генетические исследования по цитохрому Р-450 показали, что у 34,1% пациентов с кожным лейшманиозом отмечается снижение активности ферментной системы гена CYP2D6, что приводит к замедлению выведения ксенобиотиков и, следовательно, повышает риск развития эндогенной интоксикации и торпидность в отношении проводимого лечения. Для устранения данных явлений в комплексной терапии пациентов с кожным лейшманиозом необходимо применять специальные индукторы цитохрома Р-450, каковыми являются большинство печеночных препаратов и системная энзимотерапия. AbstractTreatment of patients with cutaneous leishmaniasis presents certain difficulties and, despite the standard therapy, rehabilitation from leishmanial and epithelization of the ulcers formed is significantly lengthened. This situation is largely due to the genetically determined polymorphism of certain genes, in particular, xenobiotic detoxification genes, which are able to accelerate or slow the removal of xenobiotics from the body of patients, which naturally affects the therapeutic effectiveness of the agents used. For the first time, studies were carried out on the detoxification genes of xenobiotics belonging to the cytochrome P-450, which are responsible for the functioning of this liver system. It should be noted that cytochrome P-450 (CYP2D6) metabolizes about 20 all known drugs.Taking into account that most Asians belong to slow metabolizers on this enzyme, there is an obvious need for genetic testing of CYP2D6 in Uzbekistan in order to correct doses of drugs. Variant CYP2D6 100C>T is a defining mutation for the haplotype CYP2D6*10, and is also common in the haplotype CYP2D6*4.Studies were carried out in 266 patients with cutaneous leishmaniasis when primers NCB1 design tools were used, which made it possible to study the C>T polymorphism of the CYP2D6 gene. DNA isolation was carried out by the Ribo-Prep application method (AmpliSens, Russia). Further, the isolated DNA was undergone to the examination of qualitative and quantitative characteristics on 1% agar gel by spectrophotometry. The distribution of genotypes according to polymorphism CYP2D6 100C>T showed a wild-type allele © frequency of 74% and a minor allele (T) frequency of 26%. Among 266 patients with cutaneous leishmaniasis, the CYP2D6*10 C>T gene was distributed as follows: the SS genotype was registered in 175 of 266 (65.7%) patients, the CT genotype in 84 (31.5%) and the TT genotype in 7 (2.6%) patients. It should be pointed out that C-alleles were observed in 259 (74%) and T-alleles in 91 (26%), i.e., there is a predominance of C-alleles over T-alleles by about 2.8 times.Genetic studies on cytochrome P-450 have shown that 34.1% of patients with cutaneous leishmaniasis show a decrease in the activity of the enzyme system of the CYP2D6 gene, which leads to a slowdown in the excretion of xenobiotics and, therefore, increases the risk of endogenous intoxication and torpidity with respect to the treatment. To eliminate these special inducers of cytochrome P-450, which are most hepatic drugs and systemic enzymothrepy.

В последние несколько десятилетий во всём мире возрастает распространённость таких нозологических форм, как гастроэзофагеальная рефлюксная болезнь и ожирение. Сочетание данных видов патологии чаще отмечают у пациентов, имеющих проблемы в питании и образе жизни, а также генетическую предрасположенность по данным нозологиям. Отмечено, что у пациентов с ожирением повышена предрасположенность к возникновению диафрагмальных грыж и механическому повреждению гастроэзофагеального соединения, что возникает на фоне увеличенного интрагастрального давления и повышенного градиента давления между желудком и пищеводом, а также вследствие растяжения проксимального отдела желудка. Одним из основных патогенетических моментов гастроэзофагеальной рефлюксной болезни бывает спонтанная релаксация нижнего пищеводного сфинктера. Согласно последним исследованиям, при ожирении частота постпрандиальных спонтанных релаксаций нижнего пищеводного сфинктера увеличивается даже при отсутствии диафрагмальных грыж, неэрозивной гастроэзофагеальной рефлюксной болезни и рефлюкс-эзофагита. Многообразие метаболических нарушений, наблюдаемых у данных пациентов, предполагает комплексный подход к лечению, направленный как на эффективное снижение кислотно-пептического фактора, так и на коррекцию избытка массы тела. Среди основных направлений лечения обеих составляющих данной сочетанной патологии выделяют как немедикаментозные, так и медикаментозные методы лечения. Важную роль в терапии отводят мероприятиям, способствующим ведению здорового образа жизни: отказу от курения, снижению массы тела, диетическому питанию, оздоровительной физической культуре. Особое внимание среди лекарственной терапии у пациентов с гастроэзофагеальной рефлюксной болезнью и ожирением, позволяющей достичь оптимального кислотоснижающего эффекта, отводят группе ингибиторов протонной помпы (ингибиторов H+,K+-АТФазы), имеющих более низкую аффинность к печёночной цитохром Р450-ферментной системе, не оказывающей влияния на её активность и не дающей клинически значимых перекрёстных реакций с другими препаратами.