Literatura científica selecionada sobre o tema "Intégrine αVβ6"

La résection chirurgicale constitue le traitement de première intention des cancers de la tête et du cou (HNSCC). La berge peropératoire est un facteur de pronostic majeur pour la survie globale des patients. Actuellement, il existe peu d’outils pour discriminer de manière fiable et en temps réel le tissu tumoral du tissu sain. La chirurgie guidée par la fluorescence (FGS) proche infrarouge (NIR) est une méthode d’imagerie utilisant le marquage fluorescent des tissus tumoraux afin de fournir une image de contraste augmentée. Le but de ces travaux est l’étude de la distribution de Quantum Dots (QDs) et d’IRDye-680, deux agents de contrastes fluorescents, couplés au peptide A20FMDV2 afin de cibler les cellules tumorales ORL au travers de l’intégrine αVβ6, surexprimée dans ces cancers. L’étude de l’accumulation et de la localisation de ces agents est réalisée sur modèle sphéroïde en monoculture et coculture (cellules cancéreuses de la langue/fibroblastes) afin de mieux représenter l’impact du microenvironnement tumoral sur la délivrance des agents de contraste. L’étude se poursuivra par le développement de nouveaux modèles sphéroïdes, mimant davantage le microenvironnement tumoral de la sphère ORL
Surgical resection is the first-line treatment for head and neck cancer (HNSCC). Theintraoperative margin is a major prognostic factor for the overall survival of patients. Currently, there are few tools to reliably discriminate tumor tissue from healthy tissue in real time. Near Infrared (NIR) Fluorescence Guided Surgery (FGS) is an imaging method using fluorescent labeling of tumor tissue to provide an enhanced contrast image. The aim of this work is to study the distribution of Quantum Dots (QDs) and IRDye-680, two fluorescent contrast agents, coupled to the A20FMDV2 peptide to target ENT tumor cells through the αVβ6 integrin, which is overexpressed in these cancers. The accumulation and localization of these agents was studied using spheroid models in monoculture and coculture (tongue cancer cells/fibroblasts) to better represent the impact of the tumor microenvironment on the delivery of these contrast agents. The study is continuing with the development of new spheroid models that better represent the tumor microenvironment found in the ENT sphere

Le ciblage de la néoangiogenèse tumorale est une voie actuelle de recherche pour le diagnostic et pour le traitement des tumeurs solides. Les cellules endothéliales des néovaisseaux tumoraux surexpriment certains marqueurs spécifiques tels que l'intégrine αvβ3, qui reconnaît spécifiquement les peptides possédant le motif " RGD " (-Arg-Gly-Asp-). Nous avons étudié le potentiel d'un nouveau radiotraceur - le RAFT-RGD - en vue d'imagerie moléculaire nucléaire des néovaisseaux. In vitro, le couplage de 4 c(RGDfK) au RAFT augmente la captation du traceur par les cellules αvβ3 positives, par rapport au c(RGDfK). De plus, le RAFT-RGD possède une meilleure affinité que le c(RGDfK) et des propriétés d'inhibition de l'angiogenèse similaires. In vivo, l'ensemble des tumeurs, αvβ3 positives et négatives, est visible par imagerie planaire non invasive corps entier, comme en SPECT, dès 30 min post-injection et au-delà de 24 h, grâce à une gamma caméra dédiée au petit animal. Le RAFT-RGD, malgré l'absence d'amélioration du contraste par rapport au cRGD, semble être un traceur prometteur de l'angiogenèse tumorale : il pourrait renseigner sur l'évolution de la pathologie et le suivi de l'efficacité des traitements des tumeurs dans les services de Médecine Nucléaire. De plus, par sa structure chimique, le RAFT-RGD apporte de multiples possibilités de marquage (émetteurs γ et β-), ce qui permet d'envisager des applications intéressantes notamment dans le domaine thérapeutique (radiothérapie interne vectorisée)
Tumoral neoangiogenesis targeting is currently a major field of research for the diagnostic and treatment of solid tumors. Endothelial cells from neovessels overexpress several specific markers such as the αvβ3 integrin, which binds RGD (-Arg-Gly-Asp-)-containing peptides. We evaluated the potential of a novel radiotracer – RAFT-RGD – for the molecular nuclear imaging of neovessels. In vitro, the coupling of 4 c(RGDfK) to the RAFT platform resulted in an increased cellular uptake of the tracer by αvβ3 positive cells when compared to c(RGDfK). Furthermore, RAFT-RGD has a higher affinity than c(RGDfK) and similar properties for angiogenesis inhibition. In vivo, both αvβ3 positive and negative tumors were visible by non invasive whole body planar and tomographic imaging from 30 min to 24 h post-injection, using a gamma camera dedicated to small animal imaging. Despite a lack of significant contrast improvement compare with c(RGDfK), RAFT-RGD could represent a promising tracer for tumoral angiogenesis since it could provide invaluable information about tumor development and treatment efficacy in Nuclear Medicine departments. Furthermore, thanks to its chemical structure, RAFT-RGD can be labelled with a variety of radioisotopes including γ and β- emitters, allowing interesting therapeutical applications such as internal targeted radiotherapy

L’imagerie de l’angiogénèse tumorale représente actuellement un domaine majeur de la recherche pour la détection précoce des cancers et le développement de nouveaux traitements des tumeurs. Les cellules endothéliales des néovaisseaux formés surexpriment l’intégrine αvβ₃, qui se lie sélectivement aux peptides contenant la séquence Arg-Gly-Asp (RGD). Le processus angiogénique joue également un rôle dans le développement d’autres pathologies telles les maladies cardiovasculaires. Le but de ce projet est ainsi de concevoir un agent de contraste bimodal (IRM et fluorescence) ciblant les intégrines αvβ₃ pour une détection précoce de l’angiogénèse. Des nanoparticules superparamagnétiques d’oxyde de fer ont été fonctionnalisées en surface par des agents complexants de type cathécol ou bisphosphonate présentant des fonctions réactives terminales, acide carboxylique ou alcyne. L’efficacité du couplage de diverses molécules (fluorophores, PEG, RGD) par chimie des carbodiimides ou par chimie click (réactions de Huisgen ou thiol-yne) a été comparée. La stabilité des différentes sondes dans le sérum et leur potentiel en tant qu’agent de contraste IRM a été évalué. L’affinité vis-à-vis des intégrines a été étudiée par résonance plasmonique de surface et par dosage de liaisons sur support solide en présence d’un compétiteur radioactif. Dans le but d’optimiser les propriétés d’agents de contraste IRM, une étude de l’influence de la taille et de la forme des nanoparticules a été réalisée. Les premières évaluations in vitro et in vivo des nanoplateformes ont été entreprises. Parallèlement, une nanoplateforme théranostique, alliant diagnostic et thérapie, a été envisagée
The molecular imaging of tumor angiogenesis currently represents a major field of research for the diagnostic and the development of new treatment strategy of solid tumors. Endothelial cells from tumor neovessels overexpress the αvβ₃ integrins, which selectively bind to Arg- Gly-Asp (RGD)-containing peptides. The angiogenic process plays a key role during the development of other pathologies like cardiovascular diseases. So, the aim of this project is to design a bimodal contrast agent (MRI and fluorescence) targeting αvβ₃ integrins for early angiogenesis detection. Superpamagnetic iron oxide nanoparticles were surface functionalized with cathecol and bisphosphonate as anchoring agents and bearing carboxylic acid or alkyne functions as terminal end groups. We compared the efficiency of conjugation of three different types of molecules (fluorophores, PEG and RGD peptides) using carbodiimide coupling and click chemistry (Huisgen and thio-yne reactions). The stability of the various nanoplatforms and their uses as MRI contrast agents were evaluated. The affinity towards integrins was evidenced by surface plasmon resonance and solid-phase receptor-binding assay with a radioactive competitor ligand. With the aim to improve MRI properties, nanoparticles differing by their size and shape were synthesized and the magnetic properties were studied. The first in vitro and in vivo experiments were performed. In parallel, a theranostic nanoplatform, with both properties of diagnostic and therapy, has been considered

Les intégrines participent aux interactions cellule-matrice extracellulaire. Elles sont formées d'une sous-unité alpha et d'une sous-unité beta. Certaines sous-unités alpha sont clivées par des convertases, ce qui libère deux chaînes restant liées entre elles par un pont disulfure. Afin de mettre en évidence le rôle de ce clivage dans la fonction des intégrines, nous avons un modèle (cellules PDX39P) dans lequel les convertases sont inhibées et les intégrines ne sont pas clivées. Nous avons constaté que les cellules PDX39P adhèrent moins sur vitronectine (VN) que les cellules témoins et cette baisse de l'adhésion n'est pas due à des changements d'affinité de alphav beta5 pour la VN. L'adhésion est un phénomène complexe qui fait intervenir des voies de signalisation, comme la phosphorylation de la FAK, qui stabilisent l'adhésion. La phosphorylation de la FAK, normalement induite par l'adhésion, est diminuée dans les cellules PDX39P. L'absence de clivage de l'intégrine alphav conduit t à des perturbations des voies de signalisation qui stabilisent l'adhésion. D'autre part, la MAPK, protéine qui participe à la migration, est sur-activée dans les cellules PDX39P. Nous avons donc étudié le rôle dans la migration. Les cellules PDX39P migrent plus sur VN que les cellules témoins. La migration est impliquée dans l'invasion et la formation des métastases. Nous avons donc estimé le pouvoir métastatique des cellules par injection sous-cutanée de cellules à des ratons immunodéprimés. Les tumeurs induites par les cellules PDX39P sont plus agressives et font plus de métastases que celles induites par les cellules témoins. Les cellules PDX39P sont plus invasives que les cellules témoins. En conclusion, l'absence de clivage de la sous-unité alphav joue un rôle important dans les différentes fonctions dans lesquels interviennent les intégrines, alphav, notamment dans les fonctions participant à la formation des métastases comme la signalisation, l'adhésion et la migration.

A la suite d’une infection, la capacité de l’hôte à produire une réponse immunitaire efficace et adaptée est cruciale pour se défendre et générer une réponse mémoire permettant de se protéger contre une future réinfection. En revanche, il est absolument nécessaire que cette réponse soit correctement régulée afin d’éviter sa persistante ou son activation incontrôlée pouvant mener au développement de maladies immunitaires. Le système immunitaire comprend un ensemble complexe de cellules et de molécules immunitaires. En particulier, la capacité des cellules immunitaires à produire et à répondre aux cytokines est absolument critique pour l’orchestration des réponses immunitaires. Mon travail de thèse s’est intéressé à une molécule particulière, la cytokine Transforming Growth Factor β ou TGFβ. Contrairement à la plupart des autres cytokines, le TGFβ est produit sous une forme latente et doit être activé afin de pouvoir se lier à son récepteur et induire une réponse sur la cellule cible. Nous avons montré par le passé que l’intégrine αvβ8 joue un rôle clé dans le processus d’activation du TGFβ et ainsi dans la régulation des réponses immunitaires dépendantes du TGFβ.Plus précisément, j’ai cherché au cours de ma thèse à comprendre le rôle de l’intégrine αvβ8 dans la régulation des réponses immunitaires intestinales et la régulation des réponses humorales.Mon travail s’est plus particulièrement concentré sur la compréhension de trois processus : 1/ l’induction de lymphocytes TREG et TH17 dans l’intestin nécessaires au maintien de l’homéostasie immunitaire intestinale, 2/ la régulation des réponses humorales de classe A (IgA) intestinales et 3/ la régulation des réponses humorales T-dépendantes au cours de la réaction du Centre Germinatif
The ability of a host to generate an appropriate immune response is critical to provide protection against a particular pathogen and to provide long-lasting memory against future reinfection. However, this immune response must be tightly regulated to prevent its persistence or inadequate activation which can lead to the development of immune pathologies. Mammalian immune system comprises a wide array of immune cells and molecules. In particular, the ability ofimmune cells to secrete and respond to cytokines is central to the orchestration of immune responses. My PhD project has focused on the role of a particular cytokine named Transforming Growth Factor β (TGFβ). Unlike most other cytokines, TGFβ is secreted in a latent form and must be activated to bind its receptor and induce response on target cell. Our team and others have shown that αvβ8 integrin plays a critical role in TGFβ activation and thus the regulation of TGFβ-dependent immune responses. More precisely, I investigated the role of αvβ8 integrin in the regulation of intestinal immunityand humoral B cell responses. In particular, my work focused on three immune processes: 1/ the induction of TREG and TH17 in Mucosal Associated Lymphoid Tissues and 2/ the regulation ofintestinal IgA humoral responses and 3/ the regulation of T-dependent B cell responses during the germinal center reaction

Les tumeurs solides emploient diverses stratégies afin de se maintenir dans l’organisme et d’échapper à l’inhibition du système immunitaire. Un des mécanismes les plus puissants est la production de la cytokine Transforming Growth Factor Beta (TGF-bêta). Cependant, cette cytokine est sécrétée dans le micro-environnement tumoral sous une forme inactive, incapable de se lier à son récepteur et donc d’exercer ses fonctions hautement immunosuppressives. Ces travaux de thèse démontrent qu’une population de lymphocytes T (LT) CD4+ dite T régulateurs (Tregs), qui exprime le facteur de transcription Forkhead box P3 (Foxp3), est responsable de l’activation du TGF-bêta au sein de la tumeur. Nous avons montré que parmi les cellules du système immunitaire, les Tregs constituent la principale population exprimant l’intégrine avb8 (Itgb8), protéine responsable de l’activation du TGF-bêta. L’absence de l’Itgb8 spécifiquement à la surface des Tregs entraîne une forte diminution de la croissance tumorale. Par conséquent, l’activation de la signalisation du TGF-bêta est réduite dans les LT CD8+ qui infiltrent la tumeur, conduisant à une exacerbation de leurs fonctions cytotoxiques et donc à une élimination accrue des cellules tumorales. La relevance de ces données obtenues chez la souris a été confirmée chez l’Homme à la fois par des approches ex vivo sur des tumeurs fraîches ainsi que par des approches bio-informatiques et biostatistiques à partir d’étude de cohortes de patients. Nous proposons donc que les Tregs et les cellules tumorales travaillent de concert pour fournir une source bio-active de TGF-bêta capable de réprimer efficacement la réponse immunitaire anti-tumorale et donc de permettre à la tumeur d’échapper au système immunitaire
Solid tumors employ diverse strategies to be maintained in the organism and escape the suppression mediated by the immune system. One of the most powerful mechanisms they use is through the production of Transforming Growth Factor Beta (TGF-beta). However, this cytokine is secreted within the tumor microenvironment in its inactive form, unable to bind to its receptor and exert its highly immunosuppressive functions. The present thesis project demonstrates that a population of CD4+ T lymphocytes called regulatory T cells (Tregs), which express the transcription factor Forkhead box P3 (Foxp3), is responsible for TGF-beta activation in tumors. We show that among the cells of the immune system, Tregs constitute the main population expressing the integrin avb8 (Itgb8) which is responsible for TGF-beta activation. The absence of Itgb8 specifically on Tregs surface leads to strong decrease of tumor growth. As a result, TGF-beta signaling pathway is impaired in tumor infiltrating CD8+ T lymphocytes leading to exacerbation of their cytotoxic and efficient elimination of tumor cells. The relevance of these data obtained in mice was confirmed in the human pathology by ex vivo approaches using fresh tumors as well as by bioinformatics and biostatistics approaches from studies on patient cohorts. We propose that Tregs and tumor cells cooperate to provide a bioactive source of TGF-beta which is able to efficiently repress the anti-tumor response and thus allowing tumors to escape the immune system

Le ciblage de la néoangiogenèse tumorale est une voie actuelle de recherche pour le diagnostic et pour le traitement des tumeurs solides. Les cellules endothéliales des néovaisseaux tumoraux surexpriment certains marqueurs spécifiques tels que l'intégrine avb3, qui reconnaît spécifiquement les peptides possédant le motif « RGD » (-Arg-Gly Asp-). Nous avons étudié le potentiel d'un nouveau radiotraceur - le RAFT-RGD - en vue d'imagerie moléculaire nucléaire des néovaisseaux. In vitro, le couplage de 4 c(RGDfK) au RAFT augmente la captation du traceur par les cellules avb3 positives, par rapport au c(RGDfK). De plus, le RAFT-RGD possède une meilleure affinité que le c(RGDfK) et des propriétés d'inhibition de l'angiogenèse similaires. In vivo, l'ensemble des tumeurs, avb3 positives et négatives, est visible par imagerie planaire non invasive corps entier, comme en SPECT, dès 30 min post-injection et au-delà de 24 h, grâce à une gamma caméra dédiée au petit animal. Le RAFT-RGD, malgré l'absence d'amélioration du contraste par rapport au cRGD, semble être un traceur prometteur de l'angiogenèse tumorale : il pourrait renseigner sur l'évolution de la pathologie et le suivi de l'efficacité des traitements des tumeurs dans les services de
Médecine Nucléaire. De plus, par sa structure chimique, le RAFT-RGD apporte de multiples possibilités de marquage (émetteurs γ et β-), ce qui permet d'envisager des applications intéressantes notamment dans le domaine thérapeutique (radiothérapie interne vectorisée).