Gotowa bibliografia na temat „Testicule – Foetus”

Abstract. The oestrogen mestranol (0, 0.01, 0.1 mg/kg body weight per day) and the progestins medroxyprogesterone-acetate and norethisterone (0, 2, 20 mg/kg body weight per day each) in sesame oil were intubated intragastrically daily during gestational days 14.5 through 19.5 to pregnant rats. Males were studied as 20.5-day-old foetuses and 4-month-old adults for serum testosterone and LH concentrations, in vitro testosterone synthesis, anogenital distance (foetuses only) and testes, seminal vesicle and ventral prostate weights. Administration of 0.1 mg mestranol decreased by 35 to 70% basal and LH-stimulated testosterone synthesis by both foetal and adult testes in vitro (P < 0.01). Foetal body weights (P < 0.05), but not anogenital distances, were significantly decreased. Testosterone content in adult sera was reduced significantly (P < 0.05) to less than 50% of control. Testes, ventral prostate, seminal vesicle and epididymal weights were unaffected by treatment. Medroxyprogesterone acetate or norethisterone administration did not alter testes endocrine function in foetal or adult offspring. In a small number of rats, pregnant for 10.5, 14.5 or 18.5 days, [3H]ethinyloestradiol was intubated and foetal and placental tissue examined for appearance and content of radioactivity. Radioactivity was detected in 10.5, 14.5 and 18.5 days old placentas, and 14.5 and 18.5 days old foetal liver, gonads and external genitalia. With [3H]medroxyprogesterone acetate, radioactivity was localized in 14.5 day placenta and foetal tissues. Thin-layer chromatographic analysis showed most of the activity to migrate as authentic ethinyloestradiol or medroxyprogesterone acetate. The results demonstrate inhibition of testicular testosterone synthesis by mestranol, presumably by being transferred across the placenta and acting in the foetus. The diminished activity of adult testes indicates a permanent effect of in utero mestranol exposure on testes function.

Androgens and anti-Müllerian hormone (AMH), secreted by the foetal testis, are responsible for the development of male reproductive organs and the regression of female anlagen. Virilization of the reproductive tract in association with the absence of Müllerian derivatives in the XX foetus implies the existence of testicular tissue, which can occur in the presence or absence of SRY. Recent advancement in the knowledge of the opposing gene cascades driving to the differentiation of the gonadal ridge into testes or ovaries during early foetal development has provided insight into the molecular explanation of XX maleness.

Gubernacular cones develop during foetal life in males of various species, including many of the common small laboratory animals. Postnatally these papilla-like organs invert and develop into the muscular cremaster sacs, providing space for testis descent. The mechanism governing male-specific development of these structures during foetal and postnatal life is unknown but foetal testicular androgens or anti-Mullerian hormone are unlikely to be involved. The present study of gubernacular cone development in 28-day-old rabbit foetuses castrated 5–9 days before questions whether foetal testis hormones play any role in these developmental processes. The study comprised an analysis of the microscopic slides in the legacy of the late Professor Alfred Jost in Paris. Castration at an earlier (19 days) or later (23/24 days) day of foetal life interfered with gubernacular cone growth and differentiation. Unilateral castration partially inhibited ipsilateral gubernacular cone growth. Implantation of a foetal testis close to the ovary could induce male-type gubernacular cone growth in females. Together the data unequivocally support the concept of foetal testicular hormonal control of male-specific gubernacular cone development. Further study is required to unravel the nature of the active foetal testicular agent.

Masculinisation of internal and external genitalia during foetal development depends on the existence of two discrete testicular hormones: Leydig cell-secreted testosterone drives the differentiation of the Wolffian ducts, the urogenital sinus and the external genitalia, whereas Sertoli cell-produced anti-Müllerian hormone (AMH) provokes the regression of Müllerian ducts. The absence of AMH action in early foetal life results in the formation of the Fallopian tubes, the uterus and the upper third of the vagina. In 46,XY foetuses, lack of AMH may result from testicular dysgenesis affecting both Leydig and Sertoli cell populations: in this case persistence of Müllerian remnants is associated with ambiguous or female external genitalia. Alternatively, defective AMH action may result from mutations of the genes encoding for AMH or its receptor: in this condition known as Persistent Müllerian Duct Syndrome, testosterone production is normal and external genitalia are normally virilised. Finally, AMH may be normally secreted in intersex patients with defects restricted to androgen synthesis or action, resulting in patients with female or ambiguous external genitalia with no Müllerian derivatives.

Foetal exposure to phthalates is known to adversely impact male reproductive development and function. Developmental anomalies of reproductive tract have been attributed to impaired testosterone synthesis. However, species differences in the ability to produce testosterone have been noted; e.g., following foetal exposure, abnormal clustering of Leydig cells or decreased production of testosterone that is manifested in rats does not occur in mice or humans. Nonetheless, other facets of testicular dysgenesis occur in both rats and mice as well as in some other species tested. We recently published a comprehensive evaluation of the foetal rat testis proteome, following in utero exposure to diethylhexyl phthalate (DEHP), which revealed changes in individual proteins that are known to be factors in cellular differentiation and migration or related to the capacity of the foetal Leydig cell to produce testosterone and fit a pathway network in which each is regulated directly or indirectly by oestradiol. Plasma oestradiol indeed was found to be elevated approximately twofold in 19-day-old DEHP-exposed foetal male rats. In this brief review, we discuss our new findings vis-à-vis ‘oestrogen hypothesis’ as a cause for testicular dysgenesis syndrome.

Genital development disorders or anomalies have been described in several species of domestic animals. Sexual differentiation in mammals occurs sequentially and chronologically with the following distinct events in embryonic and faetal development: the determination of chromosomal sex at fertilisation, the development of gonadal sex and, finally, the development of the phenotypic sex in the foetus. Any errors in these processes lead to some form of intersexuality. In the literature, three types of intersexuality in companion animals are described: true hermaphroditism and male and female pseudohermaphroditism. The diagnosis is based on physical and imaging examinations, with confirmation by histopathological analysis and karyotyping. As there are few reports of this sexual anomaly, this case report addresses a case of male pseudohermaphroditism in a Shiba Inu canine. Clinical examination revealed the presence of a hypertrophied clitoris in the vaginal canal, without obstruction of the urethral canal. An abdominal ultrasound examination revealed splenomegaly, signs suggestive of chronic cystitis associated with bladder and urethral microuroliths, as well as a small tubular structure without cranial continuity. A blood count, serum biochemistry and the determination of the hormonal levels were performed pre- and post-surgery. Surgical treatment was instituted through exploratory laparotomy, revealing the presence of testicles in the abdominal cavity, a uterus, a cervix and uterine horns. The findings were sent for histopathological analysis, where diffuse testicular hypoplasia and endometrial hyperplasia, associated with neutrophilic and lymphoplasmacytic metritis, were evaluated. As these findings are associated with anamnesis, it is concluded that this case is a male pseudohermaphrodite.

L’étude a eu pour but de préciser les caractéristiques zootechniques et de reproduction des chèvres (n = 1 311) et des boucs (n = 346) abattus à Lubum­bashi. La taille au garrot, la longueur corporelle et le poids vif ont été respec­tivement de 53 cm, 77 cm et 20,5 kg chez les femelles, et de 53 cm, 71 cm et 19 kg chez les mâles. Le poids des testicules gauche et droit, le diamètre moyen des testicules et le périmètre scrotal ont été respectivement de 67,3 g, 66,9 g, 12 cm et 21,1 cm. La longueur moyenne du tractus génital de la vulve à l’extrémité de la corne a été de 30,3 cm. Le poids moyen des ovaires, la lon­gueur et la largeur des ovaires gauche et droit ont été respectivement de 1,1 g, 1,8 x 1,3 cm et 1,7 x 1,3 cm. Aucune structure kystique n’a été observée sur les ovaires. Quarante-quatre pourcent des femelles abattues se sont révélées gravides. A partir de la comparaison du nombre de corps jaunes et du nombre d’embryons ou de foetus présents dans l’utérus, les mortalités embryonnaires ont été estimées à 19,2 p. 100.

Testicular adrenal rest tumours (TARTs) are benign adrenal-like testicular tumours that frequently occur in male patients with congenital adrenal hyperplasia. Recently, GATA transcription factors have been linked to the development of TARTs in mice. The aim of our study was to determine GATA expression in human TARTs and other steroidogenic tissues. We determined GATA expression in TARTs (n = 16), Leydig cell tumours (LCTs; n = 7), adrenal (foetal (n = 6) + adult (n = 10)) and testis (foetal (n = 13) + adult (n = 8)). We found testis-like GATA4, and adrenal-like GATA3 and GATA6 gene expressions by qPCR in human TARTs, indicating mixed testicular and adrenal characteristics of TARTs. Currently, no marker is available to discriminate TARTs from LCTs, leading to misdiagnosis and incorrect treatment. GATA3 and GATA6 mRNAs exhibited excellent discriminative power (area under the curve of 0.908 and 0.816, respectively), while immunohistochemistry did not. GATA genes contain several CREB-binding sites and incubation with 0.1 mM dibutyryl cAMP for 4 h stimulated GATA3, GATA4 and GATA6 expressions in a human foetal testis cell line (hs181.tes). Incubation of adrenocortical cells (H295RA) with ACTH, however, did not induce GATA expression in vitro. Although ACTH did not dysregulate GATA expression in the only human ACTH-sensitive in vitro model available, our results do suggest that aberrant expression of GATA transcription factors in human TARTs might be involved in TART formation.

Testicular cancer, the second most common malignancy in young men, has a 95% cure rate but can result in infertility or subfertility. Its incidence has increased significantly in recent decades (1). This cancer is thought to arise during embryogenesis, based on the persistence of embryonic germ cell markers such as Blimp1 (2), Oct3/4 (3) and Nanog (3) in adult seminoma cells. TCam2 cells are a recently characterised in vitro seminoma model (4). We show by Q-PCR and immunofluorescence that they also express these early germ cell markers. TGFβ signaling plays a key role during germ cell development, and is implicated in the development of testicular cancers (5, 6). To investigate this further, we first determined whether the pathway is active in TCam2 cells. By Q-PCR we demonstrate expression of the TGFβ downstream transcription factors Smad 2, 3 and 4, and Activin type I and II receptors. Importantly, ActRIIA, which is undetectable in adult testicular germ cells, but readily detected in human foetal germ cells (7) and clinical seminoma samples (6), is readily detectable at both the mRNA and protein level in TCam2 cells. Furthermore, 24 hour treatment with Activin (5 and 50ng/ml) or BMP4 (5 and 50ng/ml) induces a 3-4 fold increase in ActRIIA mRNA levels, but not ActRIA, ActRIB or ActRIIB. Strikingly, in TCam2 cells BMP4 and to a lesser extent retinoic acid, but not activin, support survival and proliferation of TCam2 cells in the absence of serum. This is consistent with known roles of BMP4 and retinoic acid in enhancing murine foetal germ cell proliferation/self-renewal and survival (8, 9), and activin inhibition of foetal murine germ cell proliferation (10). This study is the first to demonstrate a functional response in seminoma cells consistent with their foetal germ cell-like identity and forms the basis for future mechanistic analyses of the role of TGFβ signaling in human testicular cancer.

Depuis plusieurs décennies, il est décrit une augmentation constante de l'incidence de pathologies de la fonction de reproduction masculine. Plusieurs de ces altérations seraient les manifestations d'un même syndrome, le syndrome de dysgénésie testiculaire. Ces pathologies résulteraient d'anomalies affectant le testicule au cours de la vie foetale et l'augmentation de leur incidence pourrait être causée par une exposition croissante à des perturbateurs endocriniens et parmi eux le bisphénol A (BPA) est l'un des plus étudiés. La restriction de l'utilisation du BPA mène les industriels à utiliser d'autres molécules telles que les bisphénols S et F (BPS et BPF). En utilisant le modèle de culture organotypique appelé Fetal Testis Assay, nous avons montré que 10-8 M de BPS et de BPF, à l'instar du BPA, inhibe la sécrétion basale de testostérone par le testicule foetal humain qui paraît plus sensible que le testicule foetal murin. De plus, les trois bisphénols à 10-5 M diminuent l'expression de l'Ins13 dans le testicule foetal murin. Nous avons mis en place un modèle de xénogreffe de testicules foetaux humains chez la souris. Les greffons présentent une architecture bien conservée et une sécrétion de testostérone fonctionnelle. L'ajout de 10-5 M de BPA dans l'eau de boisson des souris greffées diminue la densité des cellules germinales (CG) dans les greffons et modifie l'expression de marqueurs associés à leur différenciation. Nos résultats suggèrent que le BPA diminue la quantité de CG dans le testicule foetal humain et stimule leur différençiation. Enfin, nous avons montré que les récepteurs ERRβ/γ seraient impliqués dans l'effet antiandrogénique du BPA sur le testicule foetal<br>Since several decades, incidence of abnormalities in male reproductive function has been steadily increasing. Some of these alterations are thought to be the expression of a common syndrome, the testicular dysgenesis syndrome. It has been suggested that these pathologies could result from alterations affecting the testis during fetal life and their increasing incidence could be a consequence of an increasing exposure to endocrine disruptors (ED). Bisphenol A (BPA) is one of the most used and studied ED. The restriction on the use of BPA in some countries has led industrialists to use other molecules such as bisphenols S and F (BPS and BPF). Using the organotypic culture system named Fetal Testis Assay, we have shown that like BPA, 10-8 M of BPS and BPF decreases basal testosterone secretion by human fetal testis. Furthermore, human fetal testis seems more sensitive to BPS and BPF than mouse fetal testis. At 10-5 M, the three bisphenols also decrease Insl3 expression in mouse fetal testis. Moreover, we have developed a xenograft model of human fetal testis in the Nude mouse. The grafted testes present a well maintained architecture and a functional testosterone secretion. Addition of 10-5 M of BPA in the drinking water of the mice induces a decrease in density of germ cells in the grafted testes and modifies the expression of markers associated with the differentiation of these cells. Our results suggest that BPA decreases the number and accelerates the differentiation of germ cells in the human fetal testis. Finally, we have shown that ERRβ/γ receptors could be involved in the inhibition of testosterone production induced by BPA in human and mouse fetal testis

Le développement fœtal est une période particulièrement vulnérable aux déséquilibres du milieu dans lequel il se déroule. Le testicule fœtal joue un rôle capital dans la masculinisation des organes reproducteurs via sa fonction endocrine, et toute altération peut engendrer un spectre de malformations pouvant impacter la fertilité future de l’homme. Au cours du développement, l’embryon puis le fœtus va être exposé à un l’environnement chimique complexe qu’est l’exposome maternel. Parmi les familles de substances constituant l’exposome se trouvent les médicaments que la femme enceinte consomme pour soigner une pathologie chronique ou de façon aigue pour traiter un symptôme lié à la grossesse. Nous nous sommes intéressés à deux classes de médicament : les antiépileptiques (AEs) d’une part, et les antalgiques d’autre part car des études épidémiologiques ont rapporté un risque accru d’hypospadias chez les nouveau-nés exposés in utero à l’acide valproïque, un AE, et de malformations de l’appareil reproducteur chez ceux exposés au paracétamol et à l’ibuprofène notamment. Or la survenue de ces altérations pourrait être liée à des perturbations de l’équilibre hormonal. Nous avons utilisé un modèle de culture organotypique d’explants testiculaires fœtaux humains afin de comparer les profils de perturbation générés par une exposition courte, de 3 jours, aux antalgiques et une exposition courte et longue - 28 jours - pour les AEs. Pour cela, nous avons adapté et optimisé notre modèle pour nous rapprocher de la chronicité du traitement in vivo. Ces études utilisant des cultures organotypiques de testicules fœtaux humains ont permis de démontrer que trois AEs pouvaient à plus ou moins longue échéance induire une altération de la fonction endocrine de cet organe, ce qui laisse ouverte la possibilité qu’avec un traitement chronique, l’imprégnation androgénique du fœtus puisse être affectée, et que cela puisse avoir des conséquences sur les organes cibles. Pour les antalgiques de la famille des AINS étudiés, s’ils semblent avoir des effets moins spectaculaires sur la fonction endocrine du testicule fœtal humain en développement, leur utilisation pendant la grossesse continue de présenter un risque sur d’autres organes dont le développement est sensible ou dépend des prostaglandines<br>Fetal development is a period that is particularly vulnerable to imbalances in the environment in which it takes place. The fetal testis plays a crucial role in the masculinization of the reproductive organs via its endocrine function, and any alteration can give rise to a range of malformations that can have an impact on a man's future fertility. During development, the embryo and then the fetus are exposed to a complex chemical environment known as the maternal exposome. Among the families of substances that make up the exposome are the medicines that pregnant women take to treat a chronic pathology or acutely to treat a pregnancy-related symptom. We are interested in two classes of drugs: anti-epileptics (AEs) on the one hand, and analgesics on the other, because epidemiological studies have reported an increased risk of hypospadias in newborns exposed in utero to valproic acid, an AE, and of malformations of the reproductive system in those exposed to paracetamol and ibuprofen in particular. The occurrence of these alterations could be linked to disturbances in hormonal balance. We used an organotypic culture model of human fetal testicular explants to compare the disruption profiles generated by a short exposure - 3 days - to analgesics and a short and long exposure - 28 days - to AEs. To do this, we adapted and optimized our model to approximate the chronicity of treatment in vivo. These studies, using organotypic cultures of human fetal testes, showed that three AEs could, over a more or less long period, induce an alteration in the endocrine function of this organ, leaving open the possibility that with chronic treatment, the androgenic impregnation of the fetus could be affected, and that this could have consequences for the target organs. Although the NSAID analgesics studied appear to have less spectacular effects on the endocrine function of the developing human fetal testis, their use during pregnancy continues to present a risk for other organs whose development is sensitive to or dependent on prostaglandins

Au cours des dernières décennies, nous avons progressivement vu augmenter un certain nombre d'anomalies de la fonction de reproduction masculine dans les pays industrialisés. Ces constatations ont fait émerger l'hypothèse selon laquelle certains polluants de notre environnement pourraient altérer le développement du testicule fœtal et ainsi être responsables de ces anomalies. Parmi les composants incriminés se trouvent les phtalates, largement répandus dans l'environnement. Ces composés ont été décrits comme reprotoxiques, ils altèrent le développement de la lignée germinale dans différentes espèces et entraînent une diminution de la production de testostérone chez le rat. Toutefois, très peu de données sont disponibles quant à leurs effets chez l'Homme. Dans cette étude, nous avons analysé les effets d'un phtalate, le MEHP, sur le développement du testicule fœtal humain au premier trimestre de la grossesse, dans un modèle de culture organotypique qui permet le maintien des différentes structures de l'organe. Nous avons tout d'abord démontré que le MEHP (10-4M) n'altère pas la production de testostérone du testicule fœtal humain, contrairement aux résultats décrits chez le rat. En revanche, nous avons montré que l'exposition au MEHP entraîne une rapide diminution du nombre de cellules germinales par apoptose. A la suite de ces résultats, nous avons testé l'effet de doses plus faibles de MEHP afin de se placer à des concentrations de phtalates ayant été mesurées dans les liquides biologiques. Nous avons ainsi démontré que les cellules germinales du testicule fœtal humain sont altérées suite à l'exposition à des doses de MEHP de 10-5M. Enfin, dans la 3ème partie de ce travail, nous nous sommes intéressés aux mécanismes d'action des phtalates. Différentes études, notamment dans le foie, démontrent l'implication des récepteurs nucléaires dans les effets de ces composés. Il nous a donc semblé important de rechercher leur implication dans les effets des phtalates sur le testicule fœtal. Nous avons démontré que LXRα est très certainement impliqué ces effets puisque l'expression des ARNm de ce récepteur est augmentée. Par ailleurs, ce récepteur nucléaire contrôle deux voies métaboliques, la synthèse de cholestérol et la synthèse des acides gras qui semblent toutes deux modulées par les phtalates dans le testicule fœtal humain. Enfin, nous avons montré que l'implication de ces voies métaboliques est commune entre la gonade mâle et la gonade femelle, sans pour autant que l'effet sur les cellules germinales mâles ai pu être mis en évidence dans l'ovaire fœtal. En conclusion, cette étude a contribué à caractériser les effets des phtalates sur la mise en place des fonctions de reproduction chez le fœtus humain. Nous avons également pu mettre en évidence un nouveau mécanisme de ces composés, impliquant la superfamille des récepteurs nucléaires ainsi que la synthèse du cholestérol et des acides gras.

Depuis plusieurs années, un nombre conséquent d’études décrivent une augmentation de l’incidence de pathologies liées à la fonction de reproduction masculine. Ces anomalies ont été regroupées sous le terme de « syndrome de dysgénésie testiculaire ». Ce syndrome aurait pour origine les effets délétères de polluants environnementaux sur le développement du testicule en période fœtale. Parmi ces polluants environnementaux, les phtalates et le bisphénol A (BPA) sont les plastifiants les plus produits et les plus répandus dans les objets de consommation courante. De nombreuses études leur sont consacrées et ont permis de les classer au rang de perturbateurs endocriniens en mettant notamment en cause leurs effets reprotoxiques. Mon travail de thèse est une étude des effets de ces deux perturbateurs endocriniens sur le développement du testicule fœtal.Nous avons réalisé une première étude concernant les effets du BPA sur le développement du testicule fœtal. Grâce au modèle de culture organotypique, nous avons développé notre étude dans trois espèces : le rat, la souris et l’Homme. Nous démontrons que le BPA diminue la sécrétion de testostérone dans le testicule fœtal humain à partir d’une concentration de 10-8M, alors que chez le rat et la souris, la sécrétion de testostérone n’est affectée qu’à partir de 10-5M de BPA. Nous avons également démontré une diminution de l’expression du gène de l’Insl-3, dans ces mêmes conditions. Ceci nous a permis de mettre en évidence une différence de sensibilité entre les espèces. Pour tenter de comprendre les mécanismes par lesquels le BPA exerce son effet toxique, nous avons comparé ses effets à ceux du DES, autre perturbateur endocrinien œstrogénomimétique. Contrairement au BPA, le DES diminue la sécrétion de testostérone fœtale chez les rongeurs, et non chez l’Homme. Ce résultat suggère l’implication de deux voies de signalisation différentes pour ces deux xéno-œstrogènes. Cette hypothèse est d’ailleurs renforcée par l’étude que nous avons SourceMécanismes d’action des perturbateurs endocriniens bisphénol A et phtalates sur le développement du testicule fœtal / par Thierry N’Tumba-Byn ; sous la direction de Virginie Rouiller-Fabre, Université Paris Sud, 2013 [Thèse de Biologie de la Reproduction et du Développement]réalisée sur des souris invalidées pour le récepteur des œstrogènes ERα, dans lesquelles l’effet anti-androgénique du BPA persiste, contrairement à celui du DES.Parallèlement, nous avons recherché les mécanismes d’action des phtalates et de leur métabolite actif le plus répandu, le MEHP (mono-2-éthyl-hexyl phtalate). Dans la continuité de plusieurs travaux réalisés dans notre laboratoire sur les effets du MEHP, nous avons tenté de comprendre les mécanismes par lesquels le MEHP induit un effet pro-apoptotique dans les cellules germinales mâles. Nous avons mis en évidence une augmentation de l’expression du gène Stra8 dans les cellules germinales traitées au MEHP. Ce résultat nous suggère que le MEHP pourrait induire une différenciation erronée des cellules germinales mâles. De plus, nous avons recherché les récepteurs et la voie de signalisation activée par le MEHP. Nous observons que les agonistes des récepteurs PPARα et de PPARγ entrainent dans les cellules germinales les mêmes phénotypes que le MEHP, à savoir une augmentation du taux d’apoptose et de l’expression du gène Stra8<br>For several years, an increase in the incidence of pathologies connected to the male reproductive functions has been described in numerous studies. These anomalies are classified under the term “testicular dysgenesis syndrome”. This syndrome might find its origins in the deleterious effects of environmental pollutants on the testis development in fetal period. Among theses environmental pollutants, phthalates and bisphenol A (BPA) are the most produced plasticizers found in products of common use. Many studies were performed in order to determine their effects, and allowed to classify them as endocrine disruptors because of their reprotoxic effects. My thesis work is a study of the effects of these two endocrine disruptors on the fetal testis development.Our first study focuses on the effects of BPA on the fetal testis development. Using the organotypic culture model, we developed our study in three species: rat, mouse and human. We demonstrated that BPA decreases the testosterone secretion in the human fetal testis from a 10-8M concentration, while in rat and mouse the testosterone secretion is only affected by 10-5M BPA. We also demonstrated a decreased Insl-3 gene expression, in the same conditions. These results allowed us to evidence a difference of sensibility between species. To understand the mechanisms involved in the BPA toxic effect, we compared it with the effect of DES, another endocrine disruptor with estrogenic activity. Unlike BPA, DES decreases the fetal testosterone secretion in rodents and not in human. This result suggests the involvement of two different signalisation pathways for these two xenoestrogens. This hypothesis is reinforced by the study that we performed in mice invalidated for the estrogen receptor ERα. In those mice, the anti-androgenic effect of BPA is maintained, unlike DES effect.In parallel, we investigated the mechanisms of action of phtalates and particularly of their most prevalent active metabolite, the MEHP (mono-2-ethyl-hexyl phthalate). Following previous studies performed in our laboratory concerning the effects of MEHP, we intended to understand the mechanisms by which MEHP induces the apoptosis in male germ cells. We evidenced an increase in Stra8 gene expression in MEHP treated germ cells. This result suggests that MEHP might induce a wrong differentiation in male germ cells. Furthermore, we investigated the receptors and the signalisation pathway activated by MEHP. We observe that PPARα and PPARγ receptors agonists induce the same phenotypes as MEHP, namely an increase in the apoptosis and in Stra8 gene expression in germ cells

Recherche chez le fœtus de rat de l'existence et de l'origine des hormones gonadotropes circulantes et détermination du rôle de ces hormones dans le contrôle de la production testiculaire de testostérone. Mise au point d'un dosage biologique pour l'évaluation de l'activité gonadotrope totale circulante. Étude du rôle de l'hypophyse: évaluation des effets de la décapitation fœtale sur les différents niveaux de l'axe hypophyse. Testicule-tractus génital puis mesure de la réponse du testicule a la stimulation par des gonadotrophines exogenes. Etude de l'action en retour du testicule sur l'axe hypothalamo-hypophysaire. Étude de l'influence des facteurs extrahypophysaires (gonadotrophine placentaire-progestérone)

Dans ce travail, nous nous sommes intéressés aux rôles de l’œstrogène (E) et de la testostérone (T) dans le testicule humain. Nous démontrons que le testicule fœtal est une source et une cible des E surtout entre 13 et 22 semaines de gestation. Nos résultats suggèrent que les E sont importants dans le développement testiculaire et agissent via le récepteur des œstrogènes par des mécanismes autocrine et paracrine. En parallèle, nous avons étudié certains effets de la T dans le testicule relayés par la cellule de Sertoli (CS). Chez le fœtus et le nouveau-né, nous démontrons que, l’absence de l’expression du récepteur aux androgènes (AR) dans la CS coïncide avec l’absence de la spermatogenèse et une forte expression de l’hormone anti-Müllérienne (AMH). Chez l’adulte, la spermatogenèse s’accompagne d’une expression sertolienne d’AR et d’une baisse de l’expression d’AMH. Les études, in vitro (CS) et in vivo (homme), démontre que l’expression d’un AR fonctionnel sertolien est indispensable pour la répression de l’AMH par la T. Enfin, l’établissement d’un nouveau modèle de CS « ST38C » exprimant l’ AR a permis de déterminer les mécanismes de la signalisation androgénique.

A partir du stade de 15,5 jours p. C. , le testicule foetal de rat a la capacité de sécréter spontanément de la testostérone, in vitro Avant ce stade, des gonades mâles, en présence de précurseurs de la stéroïdogénèse comme le DHA, produisent dès 13 jours 10 heures de la testostérone. Le complexe 3 β-HSD, Δ5-Δ4 isomérase n'est pas le facteur limitant de la biosynthèse de testostérone avant 15,5 jours p. C. Des récepteurs à LH ont été caractérisés en mesurant la fixation d125I-hCG dans des homogénats testiculaires. A 18,5 jours p. C. , la constante d'association apparente KA est de 0,82. 1010M-1 et le nombre de sites Ns de 0,57. 10-12 moles par testicule. Une fixation spécifique d'1251hCG est décelable à partir de 15,5 jours p. C. A ce stade, les récepteurs à LH sont fonctionnels : la production de testostérone est spécifiquement stimulée par LH une augmentation de l'adénylate cyclase est aussi obtenue avec des concentrations d'hormone comparables à celles qui stimulent la stéroïdogénèse. En présence de LH, l'augmentation de l'adénylate cyclase précède d'environ 20 minutes celle de la production de testostérone ; l'AMPc apparait bien comme un intermédiaire de l'action de LH sur la stéroïdogénèse testiculaire fœtale. D'autre part, une différenciation fonctionnelle des gonades fœtales mâles est obtenue in vitro. En effet des gonades mâles explantées à 12,5 jours, 13,5 jours ou 14,5 jours p. C. Acquièrent, en milieu anhormonal, la capacité de synthétiser la testostérone à partir du stade de 15,5 jours p. C. , comme in vivo. -des récepteurs fonctionnels à LH/hCG apparaissent également entre 14,5 et 15,5 jours p. C. Sans l'apport de facteurs extragonadiques. La différenciation et le maintien des récepteurs à LH/hCG a été évaluée : -soit directement par mesure de la fixation spécifique d'125IhCG -soit indirectement par mesure de la réponse stéroïdogène. Bien qu'il n'apparaisse in vitro qu'un nombre limité de récepteurs, cette différenciation est suffisante pour que LH stimule la production de testostérone de façon aussi importante que le dbAMPc. Enfin, une différenciation précoce de récepteurs fonctionnels à LH est obtenue, in vitro, en présence d'androgènes. En effet, des gonades mâles précultivées 24 heures, en présence de DHA, répondent à LH par une production accrue de testostérone dès le stade de 14 jours 18 heures.