Tesi sul tema "Récepteurs nucléaires à l'Acide Rétinoïque"
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Mouchon, Arnaud. "Modulation de l'activité des récepteurs à l'acide rétinoïque par des interactions moléculaires". Lille 1, 1999. https://pepite-depot.univ-lille.fr/LIBRE/Th_Num/1999/50376-1999-191.pdf.
Abstract (sommario):
L'intérêt pour les rétinoïdes et leurs récepteurs n'a fait que croître ces dernières années, en particulier du fait de leur importance en cancérologie. La diversité des récepteurs de l'acide rétinoïque qui coexistent dans un même organisme, et l'importance des réponses qu'ils modulent, réclament à l'évidence une meilleure connaissance de l'interaction de chacun de ces récepteurs avec leur ligand rétinoïde. Cette recherche fondamentale conditionne les progrès dans la pharmacochimie des rétinoïdes, dont l'emploi en thérapeutique anticancéreuse devrait se développer. En utilisant la technique de mutagenèse par délétion, nous avons pu mettre en évidence pour le récepteur de type alpha deux régions (186-198 et 403-410) directement impliquées dans l'interaction avec le ligand (B. Lefebvre et al. , biochemistry 1995)L'ensemble des résultats obtenus par la suite identifie la région 403-410 comme essentielle pour l'activité biologique du récepteur, pour la liaison aux ligands, pour le recrutement des co-activateurs ou co-répresseur et de ce fait, essentielle dans l'interprétation de la pharmacologie des rétinoïdes (B. Lefebvre et al. , Mol. Cell. Endocrinol 1998a ; B. Lefebvre et al. , Biochemistry 1998b). Nous avons enfin montré que la capacité des ligands naturels et synthétiques à induire l'activité transcriptionnelle d'un gène chimérique est proportionnelle à leur capacité à recruter le co-activateur SRC1. Outre la structure du ligand, nous avons observé que l'ADN et le RXR exerçaient des régulations allostériques sur ces interactions protéines-protéines (A. Mouchon et al. , Mol. Cell. Biol. 1999). L'ensemble de ces résultats identifie la région 403-410 du hRAR[alpha] comme essentielle pour l'activité biologique du récepteur, par son implication dans la liaison et l'interprétation de la pharmacologie des ligands ; de plus, la structure du ligand a un effet considérable sur les transitions de structure que subit le RAR dans le contexte de l'hétérodimère lié à l'ADN, structure qui est également modulée par la structure du RARE et vraisemblablement par RXR
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Martin, Perrine. "Recherche de nouveaux partenaires protéiques du Récepteur de l'Acide Rétinoïque : étude des interactions RAR-PLZF et RAR-PCNA". Lille 2, 2005. http://www.theses.fr/2005LIL2S003.
Abstract (sommario):
Les Récepteurs de l'Acide Rétinoïque (RAR) interagissent, de manière dépendante du ligand, avec beaucoup de corégulateurs qui participent à un large spectre de réponses biologiques, allant du développement embryonnaire au contrôle de la croissance cellulaire. La fonction transactivatrice de ces facteurs de transcription inductibles par leur ligand réside principalement, mais pas exclusivement, dans leur domaine de liaison du ligand (AF2) qui recrute ou se dissocie de corégulateurs de manière dépendante du ligand. Néanmoins, les fonctions du RAR AF2-indépendantes sont peu élucidées. Au cours de cette étude, nous avons identifié, par un crible double hybride dans la levure, deux nouveaux partenaires du RARa, les protéines PLZF (Promyelocytic Leukemia Zinc Finger) et PCNA (Proliferating Cell Nuclear Antigen). Ces deux protéines interagissent physiquement et fonctionnellement avec le RARa et agissent en tant que répresseurs du RARa. Néanmoins, elles possèdent des fonctions bien distinctes et exercent leur effet répresseur par des domaines et des mécansimes différents. Dans ce travail, nous avons mis en évidence que PLZF interfère probablement avec la dimérisation RAR-RXR, alors que PCNA interagit avec l'hétérodimère RAR-RXR lié à son élément de réponse et réprime son activité transcriptionnelle de manière promoteur- et cellule-spécifique. Nos observations définissent donc de nouveaux mécanismes par lesquels l'activité du RARa est contrôlée, et nous permettent, par extrapolation, de faire le lien entre RARa, développement embryonnaire et hématopoïèse, dans le cas de PLZF d'une part, et entre RARa, cycle cellulaire et réparation de l'ADN, dans le cas de PCNA, d'autre partThe Retinoic Acid Receptors (RAR) interact, in a ligand-dependent manner, with many coregulators which are involved in a broad spectrum of biological responses, from embryonic development to cell growth control. The transactivation function of these ligand-inducible transcription factors resides mainly, but not exclusively, in their Ligand Binding Domain (AF2) which recruits or dissociates coregulators in a ligand-dependent manner. Nevertheless, the RAR AF2-independent functions are not much elucidated. In this study, we have identified, by yeast two-hybrid screen, new RARa two partners, the PLZF (Promyelocytic Leukemia Zinc Finger) and PCNA (Proliferating Cell Nuclear Antigen) proteins. These two proteins interact physically and functionally with the RARa and act as RARa repressors. In addition, they have very distinct functions and exert their repressor effect through different domains and via different mechanisms. We have demonstrated that PLZF interferes probably with RAR-RXR dimerization. In contrast, PCNA interacts with RAR-RXR heterodimer bound to its response element and represses its transcriptional activity in a promoter- and cell-specific manner. These observations demonstrate new mechanisms by which RARa activity is controlled, and suggest a link between RARa, embryonic development and hematopoiesis in the case of PLZF and between RARa, cell cycle and DNA repair in the case of PCNA
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Lalevée, Sébastien. "Les récepteurs nucléaires de l’acide rétinoïque : phosphorylation et contrôle dynamique de l’association-dissociation de complexes protéiques". Strasbourg, 2009. https://publication-theses.unistra.fr/public/theses_doctorat/2009/LALEVEE_Sebastien_2009.pdf.
Abstract (sommario):
Les rétinoïdes (dérivés actifs de la vitamine A) agissent via deux familles de récepteurs nucléaires : les RAR°(α, β et γ) et les RXR (α, β et γ). In vivo, le signal rétinoïque est transmis par des hétérodimères du type RAR/RXR qui se comportent comme des facteurs de transcription inductibles par leur ligand et se lient à des éléments de réponse (RARE) situés au niveau du promoteur des gènes cibles. L’équipe a démontré que des processus de phosphorylation ciblent deux domaines des RAR, le domaine N‐terminal (NTD) et le domaine de liaison du ligand (LBD), et jouent un rôle clé dans l’activité transcriptionnelle des récepteurs. Pour comprendre l’impact des phosphorylations sur le fonctionnement des RAR, je me suis particulièrement intéressé à étudier les dynamiques d’association/dissociation des RAR (α et γ) avec différents partenaires protéiques en fonction de leur état de phosphorylation. Dans le cas de RARα, j’ai participé à la mise en évidence des conséquences de la phosphorylation du LBD au niveau de la sérine 369, localisée à proximité du domaine de fixation de la cycline H. Via des changements conformationnels, cette phosphorylation améliore le recrutement de la cycline H associée à la kinase cdk7 du facteur général de transcription TFIIH. Cet effet est à la base d’une cascade aboutissant à la phosphorylation par cdk7 du NTD de RARα. J’ai aussi participé à l’étude d’un autre partenaire de RARα, SUG‐1, qui est une sous‐unité du protéasome. SUG‐1 joue un rôle double dans la transcription des gènes cibles de RARα en régulant la dynamique de la transcription en absence de protéolyse, et en signalisant sa fin via la dégradation du coactivateur SRC‐3. Dans le cas de RARγ, j’ai démontré que le motif riche en prolines (MRP) du NTD interagit directement avec un des domaines SH3 d’une protéine adaptatrice, la Vinexine β. Cette association a lieu uniquement lorsque le MRP n’est pas phosphorylé et maintient le récepteur en dehors de la chromatine. En réponse à l’AR, une des sérines du MRP devient phosphorylée, induisant la dissociation de la Vinexine β et finalement le recrutement de RARγ phosphorylé au niveau des promoteurs des gènes cibles de l’AR. Dans ce contexte, j’ai également effectué une recherche bioinformatique de nouveaux RARE fonctionnels à l’échelle du génomeThe effects of Retinoids (active derivatives of Vitamin A) are mediated by two families of nuclear receptors, RAR (α, β and γ) and RXR (α, β and γ). In vivo, the RA signal is transmitted by RAR/RXR heterodimers, which function as ligand‐dependent transcriptional regulators and bind to RARE (Retinoic Acid Response Element) at the promoters of target genes. Our team demonstrated that two domains of RARs, the NTD (N‐terminal Domain) and the LBD (Ligand Binding Domain), are targets for phosphorylation processes that control RAR transcription. In order to decipher how phosphorylation controls RARs functions, I analyzed the dynamics of RAR (α and γ) association/dissociation with different protein partners depending on RARs phosphorylation state. In the case of RARα, I highlighted the consequences of LBD phosphorylation at serine 369, localized in close vicinity to the cyclin H docking site. This phosphorylation, via conformational changes, influences the recruitment of cyclin H associated to the cdk7 kinase of the general transcription factor TFIIH. This effect is at the basis of a cascade leading to the phosphorylation of the NTD by cdk7. I also participated to the study of another RARα partner, SUG‐1, a subunit of the proteasome. SUG‐1 plays a dual role in RARα target gene transcription by regulating the dynamic of transcription without proteolysis and by signaling the end of the RA response via the degradation of its coactivator, SRC‐3. In the case of RARγ, I demonstrated that the PRM (Proline Rich Motif) of the NTD interacts directly with one SH3 domain of Vinexin β, an adaptor protein. This association occurs only when the PRM is not phosphorylated and maintains the receptor outside of the chromatin. After RA addition, one of the serine of the PRM becomes phosphorylated, inducing the dissociation of Vinexin β, and finally the recruitment of phosphorylated RARγ to RA target‐genes. In this context, I also realized a “genome wide” bioinformatic search for finding new functional RAREs
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Kammerer, Sabrina Myriam. "Etude structurale de l'interaction récepteurs nucléaires/corégulateurs et du domaine de liaison au ligand du récepteur à l'acide rétinoïque". Université Louis Pasteur (Strasbourg) (1971-2008), 2004. http://www.theses.fr/2004STR13206.
Abstract (sommario):
Les récepteurs nucléaires (RN) constituent une superfamille de facteurs de transcription ligand-dépendants jouant un rôle crucial dans la régulation de processus vitaux de la vie cellulaire (prolifération, différenciation, apoptose, homéostasie). De fait, ils constituent des cibles thérapeutiques de choix pour le traitement d'un grand nombre de pathologies (cancer, diabète, obésité. . . ). Ils se composent de 5/6 domaines fonctionnels dont trois principaux : le domaine A/B porte la fonction d'activation de la transcription AF1 dite autonome, le domaine C (DBD) est le domaine de liaison à l'ADN, et le domaine E (LBD), domaine de liaison au ligand, porte aussi la fonction AF2 ligand-dépendante. En 2000, les bases structurales de l'agonisme/antagonisme étaient clarifiées grâce aux nombreuses structures de LBD, mais aucune donnée structurale n'était disponible concernant la fonction AF1, et le recrutement du corépresseur. Ainsi, nous avons entrepris :- L'Etude biophysique et fonctionnelle préliminaire à l'étude structurale de l'interaction du récepteur des oestrogènes avec le coactivateur transcriptionnel TIF2 pour élucider les bases structurales de la fonction AF1. - L'Etude par cristallographie aux rayons X du complexe LBD du récepteur à l'acide rétinoïque (RAR)/antagoniste BMS493/motif ID-1 du corépresseur N-CoR pour clarifier les bases structurales du recrutement du corépresseur. - Etude de la sélectivité isotypique du RAR et ligand RAR sélectifs. Nous avons résolu pour la première fois, la structure du LBD du RAR en complexe avec le TTNPB (agoniste) et sur la base d'expériences de modélisation, nous proposons les principes structuraux pour la synthèse rationnelle de ligands RAR sélectifs. Nous avons, de plus, caractérisé fonctionnellement un ligand RAR sélectif. De tels ligands doivent permettre de clarifier la contribution de chacun des trois isotypes du RAR dans la signalisation par les rétinoïdes, et devraient réduire les effets secondaires liés aux traitements par rétinoïdesNuclear receptors (NR) are ligand dependant transcription factors which share a common modular organization. The A/B domain bears the autonomous activation fonction AF1. The C domain is the DNA binding domain (DBD). The D domain contitutes a hinge between the C- and E domain. The E domain is the ligand binding domain (LBD) which also bears the ligand-dependant activation fonction AF2. NR plays an important role in the regulation of cell proliferation, differentiation, apoptosis and in cell homeostasis maintenance. Thus they are targeted by numerous treatment notably by cancer therapy, and by diabet and obesity treatments. Numerous studies uncovered the canonical three dimensional fold of LBD as well as the structural basis of agonism/antagonism. But at the begining of my PhD, the structural basis of corepresseur recruitment as well as the structural mechanism of AF1 fonction were unknown. To adress these questions we decided to undergo the two first projects of my PhD
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Bruck, Nathalie. "Phosphorylation des récepteurs nucléaires de l'acide rétinoïque : Mécanisme et conséquences sur la transcription des gènes cibles". Université Louis Pasteur (Strasbourg) (1971-2008), 2008. http://www.theses.fr/2008STR13134.
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Vernet, Nadège. "Analyse du rôle de l'acide rétinoïque et de ses récepteurs au cours de la spermatogenèse". Université Louis Pasteur (Strasbourg) (1971-2008), 2006. https://publication-theses.unistra.fr/public/theses_doctorat/2006/VERNET_Nadege_2006.pdf.
Abstract (sommario):
Depuis plus d'une décennie, nous savons que l'acide rétinoïque (AR) est indispensable à la différenciation des spermatogonies, cellules souches de la lignée germinale. L’AR agit en liant à deux récepteurs nucléaires : RARs et RXRs. Ces deux récepteurs sont exprimés à des endroits bien précis dans les testicules de souris. Nous avons détecté RARg dans les spermatogonies et RARa dans les cellules de Sertoli (cellules somatiques de soutien les cellules germinales). L'excision de RARa dans les cellules de Sertoli (RaraSer -/-) entraine une dégénérescence des testicules due à une desquamation et une apoptose anormale des cellules de la lignée germinale. Tandis que les cellules de Sertoli des souris mutantes RaraSer-/- sont morphologiquement normale, elles n'expriment plus d’une façon normale les gènes impliqués dans l'adhésion cellulaire (Lgals1) ou d’autres gènes exprimés cycliquement comme les gènes codant pour des facteurs de transcription (Gata1, Récepteur des androgènes), ou des protéines membranaires ou sécrétées (Stra6). Ces résultats montrent que l'expression de Rara dans les cellules de Sertoli est essentielle au maintien de la structure de l'épithélium séminifère. D'autre part, nous avons montré que les souris mutantes RaraSer -/- ne récapitulent pas l'arrêt de la différenciation des spermatogonies que nous avons décrit lors d’une carence en vitamine A (CVA). Les raisons d’une telle différence entre la dégénérescence testiculaire induite par la CVA et celle provoquée par l’ablation de Rara sont toujours inconnues. De plus, nous avons montré que RARa agit dans les cellules de Sertoli en s’hétérodimérisation avec RXRb pour assurer le contrôle de la spermiation mais que RARa exerce aussi des fonctions (contrôle du cycle de la cellule de Sertoli, intégrité de l’épithélium séminifère) indépendamment de RXRsIt has been known for more than a decade that retinoic acid (RA) is indispensable for the differentiation of spermatogonia, the stem cells of the spermatogenic lineage. RA acts though binding to nuclear receptors, the RAR and the RXR, which in the mouse testis have very distinct expression patterns. In particular, we detected RARg only in spermatogonia while RARa is present only in Sertoli cells, the somatic cells supporting the gem cell lineage. Selective inactivation of RARa in Sertoli cells (RaraSer-/- mutation) results in a testicular degeneration through germ cell desquamation and apoptosis. Sertoli cells lacking RARa are morphologically normal. However, they fail to express genes involved in cell adhesion (Lgals1) and loose the property to cyclically express genes encoding transcription factors (Gata1, Androgen receptor gene), membrane and secreted proteins (e. G. , Stra6). These data indicate at the very least that Rara expression in Sertoli cells is instrumental to the maintenance of the seminiferous epithelium. On the other hand, we showed that RaraSer-/- mutant mice do not recapitulate the arrest of spermatogonia maturation which we described in a situation of vitamin A-deficiency (VAD). The reasons of the differences between the VAD-induced testicular degeneration and those caused by Rara ablation are still unknown. Moreover, we revealed that, in Sertoli cells, RARa will act in RXRb-heterodimer to control spermiation and that RARa also exerts functions (Sertoli cell cycle, seminiferous epithelium integrity) independently of RXRs
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Rachez, Christophe. "Détermiants structuraux du récepteurs humain alpha de l'acide rétinoïque (RAR) impliqués dans la dimérisation et la liaisin à l'ADN". Lille 1, 1996. https://pepite-depot.univ-lille.fr/LIBRE/Th_Num/1996/50376-1996-89.pdf.
Abstract (sommario):
L'acide rétinoïque, un dérive de la vitamine a, est un élément clef du contrôle de la prolifération et de la différenciation cellulaires. Son mécanisme d'action met en jeu l'activation de gènes cibles, notamment via deux récepteurs nucléaires. Dans cette étape, les récepteurs de l'acide rétinoïque tout-trans (rar) et de son dérive 9-cis (rxr) se lient sous forme d'heterodimeres à des éléments de réponse appelés rare. Le positionnement précis des deux récepteurs sur l’ADN cible est déterminé par plusieurs motifs structuraux qui forment des interfaces de mémorisation des récepteurs et d'interaction avec l’ADN. Nous avons mis au point une stratégie basée sur des modifications chimiques spécifiques d'amino-acides afin d'examiner le rôle des lysines, arginines, cystéines, histidines, tyrosines et tryptophane du rar dans ses fonctions de liaison a l’ADN, d'homodimerisation et d'heterodimerisation en présence et en absence d’ADN. Nous avons observé une implication différentielle de ces aminoacides dans les différentes fonctions testées. Dans un deuxième temps, le radio marquage des lysines accessibles du rar natif a permis de localiser ces résidus dans la 8#e heptad repeat au sein du domaine de liaison au ligand. Ces résultats fournissent une mise en évidence directe de l'implication différentielle de résidus a groupement basique, thiol ou aromatique dans les propriétés de liaison a l’ADN, homodimerisation et heterodimerisation du rar, et illustrent la mise en jeu de plusieurs interfaces de dimerisation.
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Coustaut, Maryse. "Expression des récepteurs nucléaires de l'acide rétinoïque et de la triiodothyronine au cours du vieillissement et d'une alcoolisation chronique". Bordeaux 1, 1996. http://www.theses.fr/1996BOR10588.
Abstract (sommario):
Les actions nucleaires de l'acide retinoique, metabolite actif de la vitamine a, et celles de la triiodothyronine s'exercent par l'intermediaire de recepteurs specifiques qui appartiennent a une meme superfamille de proteines transregulatrices. Sur divers modeles cellulaires il avait ete montre que ces recepteurs interagissent dans les processus de controle de l'expression des genes. L'objectif de ce travail etait d'analyser, sur des modeles animaux, les interactions acide retinoique-triiodothyronine au cours de leur action nucleaire. Dans ce but nous avons etudie l'expression des recepteurs nucleaires de l'acide retinoique tout trans (rars) et ceux de la triiodothyronine (trs) dans deux situations qui generent des dysfonctionnements dans les statuts vitaminiques et hormonaux: le vieillissement et l'alcoolisation chronique. Les principaux resultats obtenus montrent que: 1/ le vieillissement entraine une baisse de l'expression des rars et des trs dans le foie des animaux. L'administration d'acide retinoique a des animaux ages corrige cette baisse, observation traduisant la reversibilite de certains des phenomenes lies au vieillissement. Le vieillissement genere une situation d'hypothyroidie qui peut etre consideree comme responsable du peu d'efficacite de l'administration de retinol pour entrainer une correction de l'expression de ces recepteurs. 2/ l'alcoolisation chronique entraine une augmentation de l'expression des rars et des trs dans le foie des animaux. Cette augmentation, dans la genese de laquelle l'hyperthyroidie joue probablement un role important, est reversible car elle disparait lors du sevrage alcoolique. Ces resultats demontrent la realite des interactions entre recepteurs et leur importance dans la physiologie des organismes integres. Par ailleurs, ils montrent la necessite d'etudier maintenant, pour mieux comprendre la mecanistique des phenomenes, la disponibilite des ligands a l'interieur des noyaux cellulaires. Cette recherche s'inscrit dans la problematique plus generale nutrition-sante dont l'objectif est de mieux comprendre l'intervention des nutriments dans les voies de signalisation cellulaire et le controle de l'expression des genes
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Piskunov, Aleksandr. "Le récepteur nucléaire de l'acide rétinoïque alpha (RARa) : nouveaux effets non-génomiques et nouveaux partenaires". Phd thesis, Université de Strasbourg, 2012. http://tel.archives-ouvertes.fr/tel-00756292.
Abstract (sommario):
Les récepteurs nucléaires de l'acide rétinoïque (AR) appelés RAR, se comportent comme des facteurs de transcription inductibles par le ligand. La transcription des gènes cibles induite par l'AR, nécessite la fixation des RAR au niveau de séquences spécifiques des promoteurs et met en jeu des changements conformationnels des récepteurs qui contrôlent l'association/dissociation de toute une panoplie de corégulateurs. Cependant, en plus de ce modèle génomique et nucléaire bien établi, l'équipe du Dr Cécile Rochette-Egly a montré récemment que l'AR a aussi des effets non-génomiques et induit rapidement la voie de signalisation p38MAPK/MSK1 qui ensuite cible les RAR pour des cascades de phosphorylations et module la transcription des gènes cibles. Pendant mon travail de thèse, j'ai mis en exergue trois nouveaux concepts originaux du mécanisme d'action du sous-type RARα. J'ai montré qu'une sous-population de RARα est présente dans des microdomaines membranaires, les radeaux lipiques ou "lipid rafts"où elle interagit avec les protéines Gαq. Cette interaction est le signal des effets non génomiques de l'AR, l'activation de la voie de la p38MAPK. Ces effets ont été corrélés à l'activité des gènes cibles de l'AR, prouvant ainsi leur nécessité. J'ai identifié un nouveau partenaire de RARα, la profiline IIA. J'ai analysé le mécanisme moléculaire de l'interaction et démontré qu'elle a lieu dans le noyau. La profiline IIA s'est révélée être un régulateur des effects génomiques de RARα et est recrutée avec RARα au niveau des promoteurs des gènes cibles. Finalement j'ai mis en évidence une nouvelle fonction de RARα dans le contrôle de l'adhésion et de l'étalement des cellules. D'où l'hypothèse de nouveaux effets génomiques de RARα avec la profiline IIA dans le contrôle de l'expression des protéines d'adhésion. Cependant, de manière inattendue, j 'ai identifié une nouvelle population de RARα dans le cytoplasme de ces cellules. D'où l'hypothèse de nouveaux effets non génomiques dans le cytoplasme, via l'interaction de RARα avec des protéines d'adhésion.
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Ferry, Christine. "Activité protéolytique et non protéolytique du protéasome et de ses sous-complexes dans la réponse à l’acide rétinoïque". Strasbourg, 2010. http://www.theses.fr/2010STRA6220.
Abstract (sommario):
L’acide rétinoïque (AR) agit via deux familles de récepteurs nucléaires : les RAR (α, β, γ) et les RXR (α, β, γ) qui sont des facteurs de transcription inductibles par le ligand. L’équipe a montré que l'activité transcriptionnelle de RARα est régulée par des processus de phosphorylation et par le recrutement dynamique de corégulateurs comme SRC‐3 et de sous‐unités du protéasome comme SUG‐1. De plus, à la fin du signal AR, RARα et SRC‐3 sont dégradés par le protéasome. J'ai participé à la mise en évidence des effets non génomiques de l'AR qui conduisent à l'activation de cascades kinasiques aboutissant à la phosphorylation de RARα au niveau de deux serines (S369 et S77), puis au recrutement de RARα à l’ADN des gènes cibles. J'ai ensuite étudié comment les processus de phosphorylation et le protéasome régulent le fonctionnement de SRC‐3. J’ai montré qu’en réponse à l’AR, SRC‐3 est recruté en même temps que SUG‐1 au niveau des promoteurs des gènes cibles de RARα. Ces deux corégulateurs participent à la dynamique de la transcription. Puis j’ai montré que SRC‐3 est phosphorylé, ubiquitiné et dégradé par le protéasome. J’ai identifié le résidu phosphorylé (la sérine 860). Au cours d’un criblage basé sur l’utilisation d’une banque de siRNA, j’ai montré que l’ubiquitination/dégradation de SRC‐3 met en jeu une E3 ligase du type CLR3 composé de la culline 3 et de Rbx1. L’ubiquitination de SRC‐3 dépend de la phosphorylation de la serine 860 et a lieu en dehors de l’ADN suite à la dissociation de SRC‐3 de RARα. Enfin la dégradation de SRC‐3 met en jeu SUG‐1. Finalement j’ai analysé le processus de dégradation de RARα, en utilisant la même stratégie. Cependant la dégradation de RARα ne ferait pas intervenir les mécanismes classiques mais nécessiterait la phosphorylation préalable de la sérine 369 et la surface de recrutement des coactivateurs. En conclusion, mes travaux ont mis en exergue un rôle global du protéasome dans la réponse à l'AR puisqu'il participe aussi bien à l'initiation de la transcription, qu'à la dégradation finale de RARα et de SRC‐3The effects of Retinoids (active derivatives of Vitamin A) are mediated by two classes of nuclear receptors, RAR (α, β, γ) and RXR (α, β, γ), which function as ligand‐dependent transcription regulators. The team demonstrated that the transcriptional activity of RARα is regulated by phosphorylation processes and by the dynamic recruitment of coregulators like SRC‐3 and of proteasomal subunits such as SUG‐1. Moreover, RARα and its coactivator SRC‐3 are degraded by the proteasome at the end of the retinoid signal. I participated to the study of non‐genomic effects of RA, initiated by kinase cascades leading to RARα phosphorylation at two serine residues (S369 and S77) and to RARα recruitment to the promoters of target genes. Then I investigated how phosphorylation and the proteasome regulate SRC‐3 activity. I have shown that SRC‐3 is recruited concomitantly with SUG‐1 to RARα target promoters and that both of them participate to the dynamics of transcription. Then, I have shown that SRC3 is phosphorylated, ubiquitinated and degraded by the proteasome. The phosphorylated residue has been identified as Serine 860. By using a siRNA hightroughput screen I identified Cullin 3 and Rbx1 as components of the E3 ligase involved in the ubiquitination/degradation of SRC‐3. In addition SRC‐3 ubiquitination depends on S860 phosphorylation and occurs out of chromatin subsequently to SRC‐3 dissociation from RARα. Finally, the proteasomal degradation of SRC‐3 also involves SUG‐1. Concerning RARα, it appears that its degradation is more complex and does not involve the classical models. Nevertheless, S369 phosphorylation and the coactivators binding surface appears to be involved. In conclusion, I highlighted a global role of the proteasome in the RA response as it is implicated in the initiation of target genes transcription as well as in the degradation of RARα and SRC‐3
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Bastien, Julie. "Etude des voies de signalisation interférant avec la voie des rétinoïdes : Conséquences sur la phosphorylation et l'activité des récepteurs nucléaires de l'acide rétinoïque". Université Louis Pasteur (Strasbourg) (1971-2008), 2003. http://www.theses.fr/2003STR13133.
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Agadir, Anissa. "Récepteurs nucléaires de l'acide rétinoïque et concentrations cellulaires efficaces : implication dans la réponse au traitement différenciateur des leucémies aiguës promyélocytaires". Paris 5, 1995. http://www.theses.fr/1995PA05CD04.
Abstract (sommario):
Nous présentons dans cette étude les pharmacocinétiques plasmatiques et intracellulaires de l'acide rétinoïque tout-trans (ATRA) dans les leucémies aiguës promyélocytaires, et la caractérisation des récepteurs nucléaires de l'ATRA dans ces cellules. La mise au point de techniques spécifiques d'extraction et d'analyse par HPLC de l'ATRA et de ses dérivés (9-cis, 13-cis et 4-oxo métabolites), nous a permis de montrer que des concentrations importantes d'ATRA (2x10-6M) sont atteintes rapidement au niveau du plasma. A l'intérieur des cellules, l'ATRA pénètre très rapidement ( en quelques minutes) et les concentrations atteintes sont corrélées au degré de différenciation des cellules et à la réponse in vivo des patients. L'étude des métabolites plasmatiques et intracellulaires de l'ATRA, met en évidence des quantités faibles de l'AR 9-cis, d'AR 13-cis et pas d'oxo-métabolites. Une conversion rapide de ces derniers en dérivés polaires instables, dont les hydroxy ou d'autres molécules non identifiées, pourrait expliquer leur faible abondance. Les cellules blastiques des LAM³ possèdent une translocation chromosomique t(15 ;17), qui fusionnent un allèle du gène RARa au gène PML. Le rôle putatif des protéines de fusion résultantes et de la protéine RARa normale dans la différenciation, représente un point capital dans la compréhension de leurs implications dans les phénomènes de leucémogénèse et de réponse à l'ATRA. Nos résultats de purifications (HPLC, FPLC) et d'étude de l'affinité des récepteurs nucléaires de l'acide rétinoïque apportent un élément supplémentaire. En effet, nous avons montré que l'affinité des récepteurs nucléaires des cellules HL –60 est proche de celle retrouvée dans les cellules COS transfectées par RARa ou PML-RARa et que par contre, l'affinité des récepteurs nucléaires présents dans les cellules promyélocytaires NB4 est inférieure. Nous avons, par ailleurs, montré une modulation de la protéine RARa normale dans les cellules LAM 3. Ainsi, l'induction de l'allèle normal pourrait expliquer, au moins en partie, l'effet thérapeutique de l'ATRA dans les LAM3, par le biais d'une compétition fonctionnelle entre l'activité normale stimulée par le traitement et l'activité pathologique, résultat de la translocation. L'ATRA, permettrait la réversion du phénotype malin en restaurant une régulation " physiologique " des voies de contrôle de la différenciation cellulaires.
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Vallortigara, Julie. "Etude des effets de l'hypothyroïdie sur les voies d'action cellulaire de l'acide rétinoïque et de la triiodothyronineApproches expérimentale et biomédicale". Bordeaux 1, 2007. http://www.theses.fr/2007BOR13395.
Abstract (sommario):
Divers arguments expérimentaux permettent d’établir une relation entre le niveau d’activité de la voie de signalisation de l’acide rétinoïque (AR) et des performances mnésiques. Des données récentes obtenues chez l’animal carencé en vitamine A ou chez des rats âgés ont révélé des limites dans l’action promnésique de l’AR. Ces études ont mis en évidence que l’hypoactivité de la voie de signalisation de la triiodothyronine (T3), voie qui interfère avec celle de l’AR au niveau métabolique et cellulaire, devient un facteur limitant qui altère la capacité de réponse à l’AR chez ces animaux. Ce travail de thèse visait à étudier les effets d’une hypothyroïdie sur l’action cellulaire de la vitamine A et des hormones thyroïdiennes chez l’animal et chez l’homme. Nos travaux, menés chez la souris hypothyroïdienne adulte, confortent l’idée qu’un niveau optimum d’activité de la voie d’action de la T3 est indispensable au maintien de la fonctionnalité de l’AR. De plus, nos résultats montrent que l’hypothyroïdie entraine une diminution de l’expression des récepteurs nucléaires de la T3 et de leurs gènes cibles spécifiquement dans le striatum. Une étude menée chez des animaux transgéniques a révélée que la modulation de l’expression de ces marqueurs moléculaires par la T3 nécessite la présence du récepteur TRα. Ces résultats étayent les données qui concernent les bases moléculaires de l’action des hormones thyroïdiennes dans les processus de plasticité synaptique. Par une approche biomédicale, nous avons confirmé, chez l’homme, l’importance des relations entre les voies de signalisation de la vitamine A et des hormones thyroïdiennes lors d’un déséquilibre hormonalSeveral works permit to establish a relationship between activity of retinoic acid (RA) pathway and memory performance. Recent data obtained in vitamin A deficient (VAD) animals, comparable to those obtained in aged animals, have revealed that RA promnesic effect in brain tissues could depend on thyroid hormone status. Indeed, in these models, triiodothyronine (T3) becomes a limiting factor alone able to correct the age or VAD-related concomitant hypo-activation of retinoid and thyroid signalling and alterations of synaptic plasticity. The aim of the present study was to investigate the effects of hypothyroidism on RA and T3 cellular action in adult mice brain. Our results show that hypothyroidism led to a reduced expression of T3 nuclear receptors (TRβ) and their target genes (RC3, Rhes, CaMKII) preferentially in the striatum. RA administration has no incidence in our model, confirming an impaired function of RA with hypoactivity of T3 signalling. In addition, T3 administration permitted a restoration of molecular parameters studied, and modified phospho-Thr34 DARPP-32 protein level, a reliable indicator of synaptic plasticity involved in motor functions. A study using transgenic animals has revealed that normalization of synaptic target genes by the T3 necessitates the presence of the receptor TRα. These results provide new data regarding the molecular basis of thyroid hormone action in the synaptic plasticity process. A biomedical approach performed on peripheral blood mononuclear cells of hypothyroid patients allowed us to confirm in humans the relevance of the relationship between retinoid and thyroid signalling pathways during common thyroid disorders
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Raverdeau, Mathilde. "Etude fonctionnelle de la voie de signalisation de l'acide rétinoïque au cours de la spermatogenèse". Thesis, Strasbourg, 2012. http://www.theses.fr/2012STRAJ034.
Abstract (sommario):
L’acide rétinoïque (AR) est requis pour de nombreuses fonctions physiologiques parmi lesquelles la reproduction. Il est synthétisé par des rétinaldéhyde déshydrogénases (RALDH1 à 3) et il active la transcription de gènes cible en se liant à ses récepteurs nucléaires RAR (α,β,γ). L’objet de mon travail de thèse a été d’étudier les fonctions de l’AR, produit dans les cellules de Sertoli testiculaire, sur la spermatogenèse de la souris. Ainsi, par l’étude de l’inactivation des gènes des RALDH spécifiquement dans les cellules de Sertoli murines grâce à la mutagenèse somatique, j’ai montré que les cellules de Sertoli dirigent la première différenciation des cellules germinales grâce à leur production d’AR qui est ensuite dispensable au bon déroulement de la spermatogenèse. L’induction de cette première spermatogenèse est possible par l’activation sélective de RAR qui est à la base d’une pléiade de voies de signalisation. J’ai également confirmé le rôle crucial de la voie de signalisation de l’AR dans les cellules de Sertoli pour la spermiation, dernière étape du processus de spermatogenèse, et donc pour la fertilité. Enfin, j’ai démontré la nécessité in vivo de la signalisation par l’AR pour la méiose, qui contrôle l’expression de Stra8, un gène essentiel pour la progression méiotique. Cette régulation se fait de manière cellulaire autonome et requiert la fixation d’un RAR sur son élément de réponse localisé dans la région promotrice de Stra8Retinoic acid (RA) is required for many physiological functions including reproduction. It is synthesized by retinaldehyde dehydrogenases (RALDH1 to 3) and activates transcription of target genes by binding to its nuclear receptors (RAR α,β,γ ). The purpose of my thesis was to study the functions of RA produced in testicular Sertoli cells in spermatogenesis in the mouse. Thus, by studying the effects of RALDH selective inactivation in murine Sertoli cells by somatic mutagenesis, I showed that Sertoli cells direct the first differentiation of germ cells through their production of RA, which is then dispensable for the proper conduct of spermatogenesis. Induction of the first spermatogenesis is possible by selective activation of RAR, which is at the basis of several signaling pathways. I also confirmed the crucial role of the RA pathway in Sertoli cells for spermiation, the final stage of spermatogenesis, and therefore fertility. Finally, I demonstrated the need of an in vivo RA signaling for meiosis, which controls the expression of Stra8, a gene essential for meiotic progression. This regulation is done cell-autonomously and requires the binding of a RAR on its response element located in the promoter region of Stra8
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Koshy, Aysis. "Characterization of Neural Development : Linking Retinoic Acid Receptors to Cell Fate and Modelling Tumorigenesis in Brain Organoids". Electronic Thesis or Diss., université Paris-Saclay, 2023. http://www.theses.fr/2023UPASL119.
Abstract (sommario):
Le développement du système nerveux central dans l'embryon dépend d'une signalisation opportune et précise des molécules. L'acide rétinoïque est l'une de ces molécules bien caractérisées par son impact sur le développement du cerveau et des yeux. Sous sa forme métaboliquement active, l'ATRA (acide All Trans Retinoïque) se lie aux récepteurs de l'acide rétinoïque (RAR) et contrôle l'expression d'une panoplie de gènes participant à des évènements impliqués dans la maturation cellulaire ainsi qu'à l'apoptose. Le RAR existe sous trois isotypes - RARα, RARβ et RARγ. Au cours du développement embryonnaire, chaque isotype est présent à des endroits spatialement distincts, influençant la structuration et la maturation. L'état actuel de la recherche est limité à la corrélation entre un isotype RAR spécifique et un destin cellulaire particulier. Dans cette thèse, nous discutons des résultats qui indiquent la capacité de RARβ et RARγ à restaurer de manière synergique la spécialisation cellulaire en détournant les programmes génétiques contrôlés par RARα. Dans une approche RNAseq unicellulaire, nous sommes en mesure de visualiser plusieurs clusters uniques à l'activation de RARβ + RARγ au cours de la différenciation des cellules souches allant au délà de précurseurs neuronaux.Dans le même ordre d'idées, l'étude du développement du tissu nerveux dans le contexte de maladies est pertinente pour comprendre les caractéristiques de la maladie et identifier les options thérapeutiques ciblées. Dans cet esprit, nous avons souhaité développer un modèle organoïde cérébral de souris (BORG) à partir de cellules ES de souris mutantes H3.3K27M et H3.3G34R en tant que modèle de recherche in vitro rentable et reproductible. Ici, nous montrons la preuve d'un BORG de souris tumorigène comme celui-ci qui héberge une signature knock-out TP53The development of the Central Nervous system in the embryo depends on timely and precise signaling of molecules. Retinoic acid is one such molecule well characterized for its impact in brain and eye development. In its metabolically active form, ATRA (All Trans Retinoic acid) binds Retinoic acid receptors (RAR), and controls downstream gene expression attributed to cell maturation and apoptosis. The RAR exists as three isotypes - RARα, RARβ, & RARγ. During embryological development, each isotype is present in spatially distinct locations influencing patterning and maturation. The current state of research is limited to the correlation of a specific RAR isotype to a particular cell fate. In this thesis, we discuss findings that point to the ability of RARβ & RARγ to synergistically restore cell specialization by hijacking RARα-controlled gene programs. In a single-cell RNAseq approach, we are able to visualize several clusters unique to RARβ + RARγ activation during mouse stem cell differentiation beyond neuronal precursor stages. In a similar vein, studying nervous tissue development in the context of diseases is relevant to understanding disease characteristics and identifying targeted therapy options. With this in mind, we wanted to develop a mouse brain organoid (BORG) model from H3.3K27M and H3.3G34R mutant mouse ES cells as an invitro research model that is cost effective and reproducible. Here, we show proof of a tumorigenic like mouse BORG that harbors a TP53 knockout signature
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Amal, Ismail. "Étude in silico de la régulation allostérique du récepteur à l’acide rétinoïque par phosphorylation". Thesis, Strasbourg, 2013. http://www.theses.fr/2013STRAJ029.
Abstract (sommario):
L'acide rétinoïque (AR) joue un rôle important dans plusieurs processus cellulaires à travers la régulation de la différentiation cellulaire, de la prolifération et de l'apoptose. Ces propriétés sont à la base de l'utilisation de l'AR dans le traitement de plusieurs cancers dont la leucémie aiguë promyélocytaire. Décrypter comment l'AR contrôle l'expression de gènes spécifiques est un défi permanent pour l'étude des cancers. Les effets de l'AR sont médiés in vivo principalement par les récepteurs à l'acide rétinoïque (RARs). Il a été récemment démontré que la phosphorylation des RARs par différentes kinases est une étape nécessaire dans la régulation de leurs fonctions. Dans ce contexte, ma thèse a porté sur l’étude des mécanismes moléculaires de la régulation par phosphorylation des RARs. Nous nous sommes intéressés en particulier à deux aspects : l’effet de la phosphorylation sur le domaine de liaison au ligand (LBD) et sur le domaine N-terminal (NTD). Dans le cas du LBD, la phosphorylation induit la fixation de la Cycline H qui est une sous-unité du facteur de transcription TFIIH, alors que la phosphorylation du NTD induit une diminution d’affinité de liaison à la Vinexine beta qui est un co-répresseur. Nous avons étudié les effets de la phosphorylation par des simulations de dynamique moléculaire. Cette technique permet de caractériser la dynamique structurale et de quantifier les interactions qui stabilisent les états phosphorylés et non phosphorylés. Ce projet a permis de définir les bases moléculaires de la communication entre le RA et les cascades de phosphorylation et d’obtenir des informations originales sur des mécanismes régulateurs d’une grande importanceRetinoic Acid (RA) plays a critical role in many cellular processus through regulatory effects on cellular differentiation, proliferation and apoptosis. This proprety is at the basis of RA therapy in the treatment of several diseases and cancers such as Acute Promyelocytic Leukemia. Deciphering how RA controls the expression of specific subsets of genes is therefore a permanent challenge in oncology. The effects of RA are mediated in vivo by the retinoic acid receptor (RAR), which consistsof three subtypes. A new concept has recently emerged according to which phosphorylation of RARs by different kinases is a necessary step in the regulation of their function. In this context, the specific aim of this thesis was the elucidation of the molecular mechanisms of the regulation of RAR mediated by phosphorylation. In particular, we focused on two aspects, the effects of phosphorylation of the ligand binding domain (LBD) and the effects on the N-terminal domain (NTD). In the case of the LBD, phosphorylation enhanced binding to cyclin H, a component of the TFIIH transcription factor, while phosphorylation of the NTD decreased binding to vinexinB, a corepressor protein. We used molecular dynamics simulations to characterize the structural dynamics of these proteins in both phosphorylated and unphosphorylated states and to quantify theirinteractions. From this project, we were able to define the molecular basis of the communication between RA-induced phosphorylation cascades and regulatory mechanisms of high importance
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Samarut, Eric. "Etude fonctionnelle et évolutive de la voie de l'acide rétinoique et de la phosphorylation des récepteurs chez le poisson zèbre". Thesis, Strasbourg, 2013. http://www.theses.fr/2013STRAJ046/document.
Abstract (sommario):
L’acide rétinoïque (AR) est le dérivé actif majeur de la vitamine A et a de multiples rôles au niveau cellulaire ainsi que pendant le développement. L’AR agit via deux familles de récepteurs nucléaires : les Récepteurs de l’Acide Rétinoïque (RAR) et les Récepteurs X des Rétinoïdes (RXR). Ces récepteurs sont des facteurs de transcription dépendants du ligand et leur activité est régulée par des phosphorylations via des kinases activées par l’AR. Durant ma thèse, je me suis intéressé à l’étude fonctionnelle et évolutive de la voie de l’AR et de la phosphorylation des RAR chez le poisson-zèbre Danio rerio. En étudiant l’activité des différents sous-types de RAR chez le poisson-zèbre, nous avons mis en avant qu’il existe une activité transcriptionnelle propre à chaque sous-type dans un embryon précoce de poisson-zèbre. De plus, mes travaux ont montré qu’au cours de l’évolution, l’acquisition d’un site de phosphorylation chez RARα permet une régulation fine de son activité chez les mammifères. Enfin, en étudiant les mécanismes moléculaires à l’origine de la diversification de la denture chez les poissons, mes travaux mettent en avant un rôle de la voie de l’AR dans la genèse de nouveaux traits phénotypiquesRetinoic acid (RA) is the main active metabolite of vitamin A and plays multiple roles in cellular processes but also during embryonic development. RA acts through two families of nuclear receptors: Retinoic Acid Receptors (RAR) and Retinoid X Receptors (RXR). Those receptors act as ligand-dependent transcription factors and their transcriptional activity is also regulated by phosphorylation processes through kinases activated by RA. During my PhD, I focused on the functional and evolutionary study of RA pathway and of the phosphorylation of RARs using zebrafish (Danio rerio). By studying the activity of the different RAR subtypes in zebrafish, we provide evidences that they can regulate gene expression in a subtype-specific fashion in the early zebrafish embryo. Furthermore, my work showed that during evolution, the acquisition of a phosphorylated residue in RARα promotes the fine-tuned regulation of its activity in mammals. Finally, aiming at deciphering the molecular mechanisms behind dentition diversification in fish, we propose a role for RA signaling in generating morphological novel traits during evolution
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Douziech-Eyrolles, Laurence. "Synthèse d'agonistes et antagonistes des récepteurs de l'acide rétinoïque". Paris 5, 1994. http://www.theses.fr/1994PA05P625.
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Depoix, Christophe. "Régulation de l'activité des récepteurs de l'acide rétinoi͏̈que par la dimérisation". Lille 2, 2002. http://www.theses.fr/2002LIL2MT01.
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Seguin, Devaux Carole. "Implication des récepteurs à l' acide rétinoi͏̈que et aux rétinoi͏̈des X dans la modulation de certaines composantes de la réaction immunitaire chez le rat". Nancy 1, 2001. http://www.theses.fr/2001NAN11313.
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Toulouse, André. "Étude de l'implication des récepteurs de l'acide rétinoïque dans le contrôle de la tumorigénèse pulmonaire". Thesis, National Library of Canada = Bibliothèque nationale du Canada, 1998. http://www.collectionscanada.ca/obj/s4/f2/dsk2/ftp02/NQ35646.pdf.
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Picard, Evelyne. "Caractérisation de l'expression des récepteurs de l'acide rétinoïque et de rétinoïdes X dans le cancer bronchique". Nancy 1, 1999. http://www.theses.fr/1999NAN19916.
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Baniowska, Monika. "Rôle de la signalisation par l'acide rétinoïque dans le développement et les fonctions du system dopaminergique nigro-striée". Phd thesis, Université de Strasbourg, 2012. http://tel.archives-ouvertes.fr/tel-00923148.
Abstract (sommario):
L'acide rétinoïque (AR), la forme active de la vitamine A, est une molécule essentielle au cours du développement et dans le cerveau adulte. La signalisation par l'AR implique deux familles de récepteurs nucléaires: les récepteurs de l'AR (Rar α, β et γ) et les récepteurs des "rexinoïdes" (Rxr α, β et γ) et les enzymes de la famille rétinaldéhyde déshydrogénases, les Raldhs (Raldh1, 2, 3). Rarβ et/ou Raldh1 montrent des profils d'expression spatio-temporelle spécifiques dans le striatum et la substance noire pars compacta (SNc), les structures appartenant au système dopaminergique nigro-striée, ce qui suggère que l'AR pourrait jouer un rôle important dans le développement et les fonctions post-natales du ce système. Dans ce travail, je montre que l'ablation de Rarβ conduit à un déficit de la neurogenèse de neurones épineux moyens (MSN) GABAergiques dans le striatum. Le nombre de neurones exprimant les récepteurs dopaminergiques D1 et D2, qui définissent les populations distinctes des MSN, sont réduit chez les souris Rarβ-/-. Ces déficits cellulaires conduisent à la signalisation dopaminergique perturbée et une coordination motrice réduite chez les souris Rarβ-/-. L'ablation de Raldhl, l'enzyme de synthèse de l'AR présent dans le striatum postnatal, conduit à des déficits cellulaires et comportementaux similaires aux souris Rarβ-/-. Ces résultats montrent que l'AR produit en conditions physiologiques par Raldh1 est essentiel au maintien des MSN. Enfin, j'ai trouvé que l'ablation de Raldh1, qui est également connu comme le marqueur spécifique le plus précoce des neurones dopaminergiques dans le mésencéphale embryonnaire, conduit à des anomalies du développement dans le SNc.
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Haushalter, Carole. "Rôle de l'acide rétinoïque dans la neurogenèse corticale chez la souris". Thesis, Strasbourg, 2016. http://www.theses.fr/2016STRAJ063/document.
Abstract (sommario):
L’acide rétinoïque (AR), dérivé actif de la vitamine A (rétinol) circulante, est une petite molécule lipophile contrôlant divers aspects de la mise en place du système nerveux central des vertébrés. L'AR influence notamment le développement précoce du cerveau antérieur, où il contrôle la prolifération et la survie des cellules progénitrices dans l'épithélium neural prosencéphalique. Le développement neural est un processus qui s'articule en trois grandes étapes : la phase d'expansion latérale (E9,5-E10,5 chez la souris), la phase de neurogenèse (E11,5-stades périnataux) et la phase de gliogenèse (stades périnataux-adulte). Nous avons montré que l'AR produit par les méninges à partir de E13 influence la spécification et la migration neuronale au cours de la phase de neurogenèse. De plus, nos travaux suggèrent un rôle plus précoce de l'AR pour la formation et la prolifération des populations progénitrices et neuronales avant et au début de la phase de neurogenèse. Une combinaison de signaux intrinsèques et extrinsèques contrôle divers aspects du développement neural cortical. Nos travaux placent l'AR parmi ces facteurs modulateurs de la neurogenèse corticaleRetinoic acid (RA), an active vitamin A (retinol) metabolite, is a small lipophilic molecule controlling numerous events during central nervous system development in vertebrates. RA is involved in early forebrain development by controlling cell proliferation and survival in the prosencephalic neuroepithelium. Neural development is a process progressing through three key steps: a phase of lateral expansion (E9.5-E10.5 in the mouse), a phase of neurogenesis (E11.5-perinatal stages) and a gliogenic phase (perinatal stages-adult). My work has shown that RA produced by the developing meninges from E13 influences neuronal specification and migration during the phase of neurogenesis. Moreover, our data suggest an earlier role of RA during the production and proliferation of progenitor and neuronal populations, before and at the onset of the neurogenic phase. A combination of extrinsic and intrinsic signals is required to orchestrate the various aspects of cortical development. RA is likely to be one of such extrinsic factors modulating cortical neurogenesis
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Ricaud, Stéphanie. "Implication de la myostatine et des récepteurs de l'acide rétinoïque dans la dérégulation du programme myogénique des rhabdomyosarcomes humains". Montpellier 2, 2004. http://www.theses.fr/2004MON20014.
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Carrier, Marilyn. "Dérégulation du phosphoprotéome dans les cancers : conséquences sur l'activité transcriptionnelle et la dégradation des récepteurs de l'acide rétinoïque (RAR)". Thesis, Strasbourg, 2015. http://www.theses.fr/2015STRAJ012/document.
Abstract (sommario):
L’acide rétinoïque (AR) agit via des récepteurs nucléaires (RAR) qui sont des facteurs de transcription inductibles par le ligand. Il active aussi des cascades de kinases qui ciblent les RAR et modulent leur activité transcriptionnelle. Cependant, l’ensemble des protéines phosphorylées en réponse à l’AR de même que les conséquences des dérégulations du « kinome » sur les effets l’AR et le fonctionnement des RAR demeurent mal connus. J’ai comparé les effets de l’AR sur le phosphoprotéome de deux lignées de cellules de cancer du sein : MCF7, qui est sensible à l’AR, et BT474, qui surexprime le récepteur a activité tyrosine kinase erbB-2 et est résistante à l’AR. De nombreuses différences ont été observées avec des répercussions sur l’expression des gènes de même que sur la phosphorylation, le recrutement aux promoteurs des gènes cibles et la dégradation de RAR alpha par le protéasome. J’ai aussi montré que la dégradation de RAR alpha met en jeu TRIM24 qui contrôle sa déubiquitinationRetinoic acid (RA) acts by binding to specific nuclear receptors (RARs), which are ligand-dependant transcription factors. RA also has non-genomic effects and activates kinase cascades that target RARs and modulate their transcriptional activity. However, the proteins that are phosphorylated in response to RA remain to be identified. The consequences of dysregulations of the "kinome" on the non-genomic effects of RA and on RAR function also require further investigation. I compared the effect of RA on the phosphoproteome of two breast cancer cell lines: MCF7, which is RA-sensitive, and BT474, a RA-resistant cell line that overexpresses the receptor tyrosine kinase erbB-2. Multiple differences were observed with consequences on gene expression as well as on phosphorylation, recruitment on target genes promoters and RARalpha degradation by the proteasome. In the context or RARalpha degradation, I showed the involvement of TRIM24 which controls RARα deubiquitination
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Robert, Carine. "Etude de l'apoptose induite par l'acide rétinoique tout-trans, dans un modèle de leucémie à éosinophiles : implication dans le traitement des syndromes hypereosinophiliques". Paris 7, 2006. http://www.theses.fr/2006PA077161.
Abstract (sommario):
Les syndromes d'hyperéosinophilies essentielles/leucémies chroniques à éosinophiles (HES/CEL) sont des maladies mortelles dues à l'accumulation en nombre anormalement élevé d'éosinophiles dans les tissus de l'organisme. L'identification de la protéine tyrosine kinase FIPILl/PDGFRa (F/P) dans 50% des cas de CEL a permis d'offrir via l'utilisation du mésylate d'imatinib (IM), inhibiteur de F/P, un traitement efficace, aux patients atteints. Cependant, des cas de résistances à ce traitement ont déjà été rapportés. Afin d'améliorer le traitement des CEL exprimant F/P, nous avons étudié les effets d'un agent différenciant utilisé en thérapeutique, l'acide rétinoïque tout-trans (ATRA), sur la lignée EoL-1, unique modèle d'étude in vitro des CEL ainsi que sur des prélèvements de cellules de patients CEL exprimant F/P. Nous avons ainsi montré que l'ATRA (i) même à très faible concentration, induit l'apoptose des cellules EoL-1 par un mécanisme dépendant de l'activation du récepteur à l'acide rétinoïque de type a, (ii) inhibe spécifiquement la croissance des colonies éosinophiles obtenues à partir de cellules de patients CEL exprimant F/P, (iii) coopère avec les inhibiteurs de tyrosine kinase pour induire l'apoptose des cellules EoL-1 et (iv) induit l'apoptose des cellules résistantes à l'IM dérivées de la lignée EoL-1. Nos résultats suggèrent que l'ATRA associé aux inhibiteurs de tyrosine kinase dérivés de l'IM, pourrait améliorer l'efficacité thérapeutique du traitement conventionnel des HES/CEL tout en limitant l'acquisition de résistance. De plus, l'ATRA seul, pourrait offrir une nouvelle perspective de traitement aux patients résistants aux inhibiteurs de tyrosine kinaseHypereosinophilic syndrome/chronic eosinophilic leukaemia (HES/CEL) is a life threatening disease due to infiltration of vital organs by excessive amounts of eosinophils. The discovery of the imatinib mesylate (Evl)-inhibitable FIPILl/PDGFRa (F/P) oncogenic tyrosine kinase fusion protein, observed in 50% of cases of CEL, permitted to treat F/P-positive CEL with IM successfully. However, acquired, as well as de novo résistance to IM have been described in CEL. In order to further improve the treatment of HES/CEL, we investigated the effects of all-trans retinoic acid (ATRA) on the EoL-1 cell line, the only relevant in vitro tool currently available for the study of F/P-positive CEL, and on eosinopoiesis of CEL-derived bone marrow cells ex vivo. We have shown that ATRA (i) potently induces the apoptosis of the F/P-positive EoL-1 cell line by a mechanism dependent on retinoic acid receptor a activation, (ii) selectively inhibits eosinophil colony formation in semisolid cultures of bone marrow mononuclear cells obtained from patients with F/P-positive CEL, (iii) in combination with imatinib or other tyrosine kinase inhibitors, induces apoptosis in EoL-1 cells with greater potency than when any of the drugs is used alone, and (iv) induces the apoptosis of IM-resistant cells derived from the EoL-1 cell line. Our results indicate that the combination of ATRA, a drug already in use in the clinic for acute promyelocytic leukaemia, with IM-type tyrosine kinase inhibitors may significantly enhance the efficacy of the anti-leukaemic treatment of de novo HES/CEL, and that ATRA may prove useful even in tyrosine kinase-resistant HES/CEL
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Buaud, Benjamin. "Apports en acides gras et voie de signalisation des récepteurs nucléaires aux rétinoïdes dans le cerveau". Bordeaux 1, 2007. http://www.theses.fr/2007BOR13541.
Abstract (sommario):
Les acides gras de notre alimentation ont été identifiés comme facteurs modulateurs du fonctionnement cérébral. Parmi les rôles physiologiques qui leur sont attribués, les acides gras peuvent moduler l'expression des gènes via des récepteurs nucléaires tels que les PPARs, lesquels interagissent avec le récepteur nucléaire RXR de l'acide rétinoïque (AR), métabolite actif de la vitamine A. Dans le cerveau, l'AR régule via ses récepteurs nucléaires RXR et RAR l'expression d'un grand nombre de gènes dont certains interviennent dans les processus de plasticité synaptique (forme de plasticité cérébrale mise en jeu dans les processus de mémoire et d'apprentissage) qui se trouvent altérés au cours du vieillissement. L'objectif de notre recherche était de mieux comprendre l'impact du statut nutritionnel en acides gras tel qu'il est décrit dans nos sociétés occidentales sur l'activité de la voie de signalisation de la vitamine A dans le cerveau et les possibles conséquences neurobiologiques. L'approche expérimentale a consisté à étudier les effets d'une part d'un régime hyperlipidique riche en acides gras saturés et inducteur de surpoids et d'autre part d'une carence nutritionnelle en acides gras polyinsaturés (AGPI) n-3 respectivement chez le rat jeune adulte et le rat sevré. Nos résultats montrent que les situations nutritionnelles étudiées conduisent à la mise en place d'une déficience cérébrale en AGPI n-3. Les études moléculaires ont permis d'observer au sein de régions cérébrales impliquées dans le processus de mémoire et d'apprentissage, des modifications du profil d'expression des récepteurs nucléaires à l'AR associée à une baisse de l'expression de certains de ses gènes cibles étudiés comme marqueurs de plasticité synaptique. Ce travail suggère qu'un apport déséquilibré en acides gras peut induire des altérations neurobiologiques similaires à celles qui apparaissent au cours du vieillissement, accélérant probablement, de ce fait, la mise en place du déclin mnésique.
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Despouy, Gilles. "Identification de nouvelles voies de régulation de l'activation transcriptionnelle par les récepteurs nucléaires à l'acide rétinoi͏̈que". Paris 7, 2002. http://www.theses.fr/2002PA077205.
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Bourguet, William. "Synthèse de nouveaux ligands utilisables pour la purification des récepteurs de l'acide rétinoïque et l'étude du mode d'action des rétinoïdes". Lille 1, 1992. http://www.theses.fr/1992LIL10160.
Abstract (sommario):
Deux isomères de l'acide rétinoïque exercent leurs effets sur la croissance et la différenciation cellulaire via l'activation de deux familles de facteurs de transcription, chacune composée de trois membres : les récepteurs nucléaires de l'acide rétinoïque et du rétinoïde x. Bien que l'acide rétinoïque et quelques-uns de ses analogues de synthèse soient utilisés dans le traitement de certaines tumeurs ou d'affections dermatologiques telles que l'acné ou le psoriasis, leur utilisation est limitée par leur toxicité à forte concentration. Ce travail a conduit à l'élaboration d'un gel biospécifique permettant de purifier les trois récepteurs de l'acide rétinoïque (RARs) par la technique de chromatographie d'affinité. En outre, il paraît raisonnable de supposer que les multiples effets de l'acide rétinoïque durant le développement embryonnaire, la différenciation cellulaire et l'homéostase pourraient être dissociés en utilisant des ligands spécifiques de chacun des récepteurs. Nous avons synthétisé un rétinoïde sélectif des récepteurs alpha et bêta qui de plus, possède une meilleure activité transactivatrice que l'acide rétinoïque lui-même sur ces deux récepteurs. Enfin, les nouveaux rétinoïdes synthétisés ont également été testés sur la différenciation des cellules de leucémie promyélocytaire et de neuroblastome ainsi que pour leur capacité à induire la transcription de la transglutaminase de tissu. Ces expériences nous ont permis de mettre en évidence un nouveau mode d'action de l'acide rétinoïque
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Pendaries, Valérie. "Interaction ligand-dépendante entre les récepteurs de l'acide rétinoi͏̈que et le voie de signalisation du TGF-Beta par les Smads". Paris 7, 2003. http://www.theses.fr/2003PA077249.
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Mailfait, Sandrine. "Le récepteur alpha de l'acide rétinoique : résidus déterminants du site de liaison et rôle dans le mécanisme d'activation". Lille 1, 1998. https://pepite-depot.univ-lille.fr/LIBRE/Th_Num/1998/50376-1998-197.pdf.
Abstract (sommario):
L'acide tout-trans retinoique, principal derive actif de la vitamine a, presente des activites pleiotropiques comme l'inhibition de la proliferation cellulaire, l'induction de la differenciation cellulaire ou la regulation de l'apoptose. Il est donc utilise dans le traitement de certaines affections cutanees ou de certains cancers. L'activite des retinoides est controlee par des recepteurs nucleaires, rars et rxrs (, et ), qui regulent l'activation transcriptionnelle de genes cibles specifiques. Le developpement de nouveaux retinoides a permis d'aboutir a la synthese d'agonistes et d'antagonistes specifiques et selectifs des differentes classes de rars et des rxrs avec des applications therapeutiques mieux definies. La cristallographie du domaine de liaison au ligand de rar a permis de mettre en evidence la conformation et les acides amines de la poche de liaison de l'acide retinoique. Nous avons principalement cible notre etude sur les trois residus de tyrosine du domaine de liaison au ligand de rar et notamment sur le role determinant de la tyrosine 277. Nous avons note une inactivation dose dependante de la liaison rar-#3ht-ra apres traitement du recepteur au tetranitromethane, reactif specifique des tyrosines. Grace au couplage hplc-spectrometrie de masse, nous avons observe une protection par l'acide retinoique contre la nitration de la tyrosine 277. La mutation de ce residu par une alanine engendre une diminution de l'affinite de liaison de l'acide retinoique et de ligands synthetiques et reduit considerablement l'activite transactivatrice du recepteur. D'autres residus d'acides amines de la poche de liaison au ligand de rar ont egalement ete etudies. Les mutants obtenus ont des affinites de liaison et des activites de transactivation differentielles selon le ligand utilise. Ces acides amines semblent donc impliques dans le mecanisme d'activation agoniste et antagoniste de rar.
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Devaux, Yvan. "Vitamine A et interactions hote-pathogène : effets de l'acide retinoique sur certaines composantes de la réaction immunitaire chez le rat". Nancy 1, 2001. http://www.theses.fr/2001NAN11312.
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Grandemenge-Arnould, Cécile. "Caractérisation d'une fusion génique originale au cours d'une leucémie aiguë promyélocytaire atypique : STAT5b, nouveau partenaire du gène codant le récepteur [alpha] de l'acide rétinoïque". Nancy 1, 1999. http://www.theses.fr/1999NAN19911.
Abstract (sommario):
Les leucémies aiguës promyélocytaires (LAP) sont caractérisées par une signature chromosomique, la translocation t(15;17) résultant en un gène de fusion associant PML au gène codant le récepteur [alpha] de l'acide rétinoïque (RARA). Dans de rares cas de LAP atypiques (LAP-L), RARA est fusionné à différents partenaires : PLZF, NPM et NuMA. Au cours de ce travail, nous avons réalisé l'étude moléculaire d'un der(17) associé à une LAP-L. Par la technique de 5' RACE PCR, nous avons identifié un cinquième partenaire de RARA, STAT5b qui appartient à la famille des facteurs de transcription cytosoliques (Signal Transducer and Activator of Transcription) activés par les tyrosine kinases JAK. [. . . ]Acute promyelocytic leukaemia (APL) exhibits a characteristic t(15;17) translocation that fuses the PML gene on 15q22 to the retinoic acid receptor [alpha] (RARA) gene on 17q12-q21. 1. In a small subset of acute promyelocytic-like leukaemias (APL-L), RARA is fused to a different partner: PLZF, NPM or NuMA. We report on the molecular characterization of a RARA gene rearrangement in a patient with an APL-L associated with a der(17). Thanks to the 5' RACE PCR approach, we demonstrate that the Signal Transducer and Activator of Transcription STAT5b gene is fused to RARA; STAT5b belongs to a family of latent cytosolic transcription factors activated by JAK tyrosine kinases
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Drujont, Lucile. "Étude de nouveaux acteurs de l'immunité de type 17 à travers l'exploration du rôle des canaux ioniques TMEM176A et B dans les cellules RORγt+". Nantes, 2016. https://archive.bu.univ-nantes.fr/pollux/show/show?id=36471303-ef4e-453c-94a1-59fb808e17a9.
Abstract (sommario):
Le récepteur nucléaire d'hormone RORγt est un facteur de transcription clé qui orchestre la différenciation des cellules Th17 mais aussi définit les cellules TγƠ17 et les Cellules Lymphoïdes Innées du groupe 3 (ILC3s). Notre avons identifié TMEM176B, une protéine à quatre domaines transmembranaires qui interagit avec son homologue TMEM176A de structure identique. Des expériences d'électrophysiologie ont révélé que TMEM176A et B fonctionnent comme des canaux ioniques et peuvent s'hétérodimériser. Ces deux homologues font partie des rares cibles directes de RORγt. Nous avons prouvé que ces deux gènes sont hautement exprimés dans les cellules Th17 murines générées in vitro en comparaison des Th1, Th2 ou iTregs. Cette observation s'applique aussi aux Th17 humains et corrèle avec leurs niveaux de RORC ou IL17A. Nous avons aussi démontré que Tmem176a et b sont fortement exprimés dans les ILC3s et les celulles TγƠ17, nous avons donc émis l'hypothèse que ces deux gènes pourraient jouer un rôle crucial dans le développement de pathologies autoimmunes dépendantes des cellules RORγt+. En effet, les souris déficientes en Tmem176b sont partiellement mais significativement protégées des lésions psoriasiformes. Ces résultats suggèrent que la délétion des deux gènes serait requise pour élucider clairement leur rôle. Nous avons généré avec succès une souris double KO et avons débuté l'étude de l'impact de cette double déficience en conditions non-pathologiques et sur des modèles d'inflammation. En parallèle, nous avons trouvé que les protéines TMEM176A et B sont fortement associées avec l'appareil de Golgi, mettant ainsi en évidence de nouveaux mécanismes potentiels de modifications post-traductionnelles ou du traffic intracellulaires dans lesquels ces canaux ioniques pourraient être impliqués. Nous pensons que l'étude de TMEM176A et B peut permettre la mise en lumière de nouvelles voies spécifiques de la biologie des cellules RORγt+ qui pourraient être manipulées en thérapeutiqueThe nuclear hormone receptor RORγt is the key transcription factor that orchestrates the differentiation of Th17 cells but also defines γƠT17 cells and group 3 Innate Lymphoid Cells (ILC3s). We identified TMEM176B, a fourspan transmembrane protein that interacts with its structurally identical homolog protein TMEM176A. Electrophysiological experiments revealed that TMEM176A and B function as cation channels and can heteromerize to exert their function. Strikingy, these two homologs were found among the few direct targets of RORγt. We show that both genes are highly expressed in in vitro-generated mouse Th17 cells compared to Th1, Th2 or iTregs. We also observed that human Th17 cells strongly express TMEM176A and B mRNA, correlating with the level of RORC or IL17A. We further demonstrate that Tmem176a and b are highly expressed in ILC3s and γƠT17 cells. We thus hypothesized that these genes could play a crucial role in the development of a variety of autoimmune diseases dependent on RORγt+ cells. In this regard, Tmem176bdeficient mice were partially but significantly protected from psoriasis-like lesions when compared to control mice. These results suggest that the deletion of both genes may be required to clearly elucidate their role. We have successfully generated a double KO mouse and started to assess the impact of this double deficiency in the steady states as well as in models of inflammation. In parallel, we found that TMEM176A and B protein localizations are strongly linked to the Golgi apparatus, thus highlighting novel potential mechanisms of post-translational modifications or intracellular trafficking in which these cation channels could be involved. We believe that the study of TMEM176A and B will help decipher novel specific pathways of the RORYt+ cell biology that could be therapeutically manipulated
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Boucheron, Catherine. "Etude des effets de la consommation d'alcool sur l'action cellulaire de l'acide rétinoi͏̈que et de la triiodothyronine en fonction de l'âge : approches expérimentale et biomédicale". Bordeaux 1, 2004. http://www.theses.fr/2004BOR12826.
Abstract (sommario):
Un ensemble de données plaide en faveur de l'intervention de l'alcool dans les métabolismes de l'acide rétinoi͏̈que (AR) et de la triiodothyronine (T3). Les conséquences potentielles sont importantes compte tenu des rôles joués par l'AR et la T3 dans les processus neurobiologiques et congnitifs. Par ailleurs, divers arguments expérimentaux suggèrent qu'une hypoexpression des voies de signalisation cellulaire de l'AR et de la T3 puisse être impliquée dans l'apparition de certaines altérations neurobiologiques liées au vieillissement. Le premier objectif de notre recherche était de mieux comprendre l'influence d'une consommation chronique d'alcool sur l'action cellulaire de l'AR et de la T3, chez des souris C57B1/6 adultes et âgées, et ses conséquences neurobiologiques, en mesurant (i) l'expression des récepteurs nucléaires de l'AR (RAR, RXR) et de la T3 (TR) et de certains de leurs gènes cibles impliqués dans la plsticité synaptique (la transglutaminase tissulaire, la neuromoduline et la neurogranine), (ii) les perfomances mnésiques des animaux. Les principaux résultats obtenus montrent que : L'administration d'un antagoniste de synthèse des RAR à des animaux adultes alcoolisés supprime la rurexpression des RAR et RXR dans le cerveau et améliore leurs capacités mnésiques. Une consommation modérée d'alcool, chez l'animal âgé, est susceptible de réinduire les voies de signalisation de l'AR et de la T3, hypoactivées avec l'âge, et d'atténuer certains déficits mnésiques liés au vieillissement. Ainsi dans les conditions d'alcoolisation chronique mises en oeuvre nos résultats montrent que les répercussions neurobiologiques et cognitives induites par la consommation d'alcool dépendent de l'âge du sujet et produisent des effets "bi-directionnels" (i. E, une perturbation ou une facilitation). Par la suite, nous avons cherché à éprouver chez l'homme nos hypothèses construites à partir de données obtenues chez l'animal. Nous avons mis en évidence une corrélation entre la consommation d'alcool et l'expression des ARNm des TRα et RARα dans les cellules mononucléés du sang de sujets âgés, sans variation des paramètres sériques des statuts vitaminique A et thyroi͏̈dien. Ces résultats suggèrent (i) une augmentation de la biodisponibilité intracellulaire de l'AR et de la T3 induite par l'alcool, (ii) que l'expression des récepteur nucléaires de l'AR et de la T3 dans les cellules mononuclées pourraient constitué un marqueur de l'impact de l'alcool sur les systèmes biologiques.
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Lakhlef, Ratiba. "Régulation transcriptionnelle de l'expression du gène de la molécule d'adhésion intercellulaire-1 (ICAM-1) par l'interaction entre les récepteurs à l'acide rétinoïque et les rcepteurs thyroïdiens". Thesis, National Library of Canada = Bibliothèque nationale du Canada, 1999. http://www.collectionscanada.ca/obj/s4/f2/dsk1/tape7/PQDD_0004/MQ44685.pdf.
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St-Jean, Stéphanie. "La transcription du gène PEDF est contrôlée par le corépresseur NCOR1 au niveau des cellules épithéliales intestinales et PEDF agit comme un gène suppresseur de tumeur". Mémoire, Université de Sherbrooke, 2011. http://savoirs.usherbrooke.ca/handle/11143/4074.
Abstract (sommario):
PEDF (pigment epithelium derived factor) joue un rôle de gène suppresseur de tumeurs dans plusieurs cancers humains. PEDF est impliqué entre autres dans l'arrêt de la prolifération, dans la migration et dans le potentiel d'invasion de plusieurs modèles cellulaires tumoraux. PEDF est également impliqué dans l'apoptose et aussi dans l'inhibition du processus d'angiogénèse chez les cellules endothéliales de plusieurs organes. Notre laboratoire a démontré que PEDF est modulé à la hausse dans des cellules épithéliales intestinales déficientes pour l'expression de NCOR1 (nuclear receptor corepressor 1). Cependant, le lien transcriptionnel entre ces molécules et le rôle de PEDF au sein de l'épithélium intestinal demeurent peu élucidés. L'hypothèse de ce travail fut que la transcription du gène PEDF est contrôlée par NCOR1 au niveau des cellules épithéliales intestinales humaines et que PEDF agit comme gène suppresseur de tumeurs dans ce contexte. Nos résultats ont permis de démontrer que le gène PEDF est régulé transcriptionnellement par les récepteurs à l'acide rétinoïque et par le corépresseur NCOR1. Des analyses de PCR en temps réel ont permis de montrer une distribution spécifique de PEDF au sein des diverses lignées cellulaires cancéreuses colorectales. Les résultats obtenus ont montré que seules quelques lignées cellulaires cancéreuses colorectales expriment PEDF. Les niveaux d'expression des régulateurs de PEDF identifiés précédemment (NCOR1, RAR[alpha] et RXR[alpha]) ont été mesurés par PCR quantitatif en relation avec les variations d'expression de PEDF au sein des lignées cancéreuses colorectales humaines. Des immunofluorescences et des immunobuvardages ont montré que la protéine PEDF est détectable au niveau des cellules épithéliales localisées au niveau des villosités intestinales du jéjunum et de l'illéon chez le foetus humain. Les modèles DLD1, HT29 et HCT116 qui ne possède [i.e. possèdent] qu'une faible expression de PEDF ont été utilisés afin de moduler à la hausse l'expression de PEDF et ainsi pouvoir étudier l'impact de cette protéine dans ces modèles. La surexpression de PEDF dans les cellules DLD1 a permis d'observer un ralentissement de la prolifération de celles-ci. Des essais de croissance en absence d'ancrage en utilisant les cellules DLD1, HT29 et HCT116 ont montrés [i.e. montré] que PEDF est capable de ralentir la croissance en absence d'ancrage des cellules DLD1 et HT29, mais pas des cellules HCT116. Des essais préliminaires d'angiogenèse in vivo ont permis de suggérer que la surrexpression [i.e. surexpression] de PEDF dans les cellules HT29 pourrait réguler négativement l'angiogenèse tumorale de même que le processus de croissance tumorale. Finalement, le statut d'expression de PEDF a été mesuré dans une banque de tissus provenant de patients atteints de cancer colorectal. Les résultats obtenus lors de ces travaux suggèrent que PEDF joue un rôle fonctionnel au sein de l'épithélium intestinal et supportent l'hypothèse selon laquelle PEDF agit en tant que gène suppresseur de tumeurs dans les cellules épithéliales intestinales humaines.
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Blanchet, Sandrine. "Role des récepteurs nucléaires (RAR) de l'acide rétinoique au cours de la morphogenèse cutanée et dans les métaplasies induites par les rétinoides". Université Joseph Fourier (Grenoble), 1997. http://www.theses.fr/1997GRE10172.
Abstract (sommario):
La peau des vertebres forme des annexes tegumentaires caracteristiques de chaque region du corps. L'apport ectopique d'acide retinoique tout-trans (ar-tt) provoque deux types de changements homeotiques de morphogenese (formation d'un type d'annexe en lieu et place d'un autre) : la formation de plumes sur les ecailles de la face anterieure du tarsometatarse chez le poulet et la formation de glandes en lieu et place des follicules pileux de vibrisse chez la souris. L'action de l'ar-tt s'exerce in vivo par l'intermediaire de deux classes de recepteurs nucleaires : les recepteurs de l'acide retinoique (rar, et ) et les recepteurs de retinoide x (rxr, et ) qui possedent de multiples isoformes. Le criblage d'une banque d'adnc derives d'arn de peau dorsale d'embryon de poulet avec des sondes specifiques, a permis d'isoler des adnc codants pour trois isoformes du rar (1, 2-1 et 2-2) et l'isoforme 2 des rar et de poulet. Les domaines amino-terminals des rar2-1, 2-2 et 2 possedent des acides amines particuliers a des position conservees entre les autres classes de vertebres. Des experiences d'hybridation in situ ont permis de mettre en evidence les transcrits des trois rar au cours de la morphogenese des plumes et des scuta tarso-metatarsiennes du poulet. La mise en evidence de transcrits et de longueurs differentes aux stades du bourgeon et du filament plumaire suggere que les differentes isoformes des rar pourraient etre impliquees dans le controle des differents stades de la morphogenese de la plume. Des experiences de rt-pcr et de rnase protection suggerent que les isoformes 2-1, 2-2 et 2 de poulet pourraient representer des isoformes mineures impliquees dans la regulation des premiers stades du developpement. Le role des differents rar dans les metaplasies glandulaires des vibrisses a ete etudie par traitement d'explants de levre superieure de souris sauvages par differents retinoides de synthese et d'explants issus de mutants nuls pour l'un ou l'autre des trois rar par l'ar-tt. Nous avons pu ainsi montrer que les rar sont les principaux effecteurs des metaplasies glandulaires, dans lesquelles le rar parait jouer un role preponderant. Finalement, l'activation simultanee des trois rar par un panagoniste specifique fait apparaitre une hyperplasie des glandes sebacees.
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Matt, Nicolas. "Etude de la voie de signalisation de l'acide rétonoïque au cours du développement embryonnaire chez la souris : Approches génétiques et pharmacologiques". Université Louis Pasteur (Strasbourg) (1971-2008), 2004. http://www.theses.fr/2004STR13199.
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Gagné, David. "Influence de l'altération des isoformes des récepteurs de l'acide rétinoïque [bêta] sur l'expression des gènes Hox et leur implication possible dans la tumorigénèse pulmonaire et l'homéostasie du surfactant pulmonaire". Mémoire, Université de Sherbrooke, 2001. http://savoirs.usherbrooke.ca/handle/11143/3268.
Abstract (sommario):
Au laboratoire nous avons démontré, dans des modèles animaux de souris transgéniques, que l'altération des niveaux d'expression des quatre isoformes du récepteur RAR[bêta] prédispose les souris à un risque très élevé de développer des cancers pulmonaires. Le but visé est de démontrer l'hypothèse selon laquelle l'altération d'expression des isoformes de RAR[bêta] affecte l'expression des gènes Hox qui peuvent à leur tour être impliqués dans la tumorigénèse pulmonaire et l'homéostase du surfactant pulmonaire. Les résultats démontrent que les souris transgéniques ont une incidence de tumeurs pulmonaires très élevée, que le niveau d'expression des protéines SP-A, SP-B et SP-C du surfactant pulmonaire est fortement diminué et que l'expression de plusieurs gènes Hox est affectée. La diminution de SP-A, -B et -C indiquerait un problème de différenciation cellulaire des cellules alvéolaires et de bronches dans les poumons des souris transgéniques."--Résumé abrégé par UMI.
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Gutierrez, Mazariegos Juliana. "Evolution of the retinoic acid receptor". Thesis, Lyon, École normale supérieure, 2014. http://www.theses.fr/2014ENSL0886.
Abstract (sommario):
L’acide rétinoïque (AR) est un morphogène dérivé de la vitamine A qui contrôle des processus clés au niveau cellulaire et pendant le développement embryonnaire des chordés. Chez les vertébrés les principaux acteurs de la voie de signalisation de l’AR sont les récepteurs de l’acide rétinoïque (RAR) et les récepteurs des x rétinoïdes (RXR). L’évolution de RAR est encore très mal connue cependant, des données récentes indiquent qu’il est également présent chez des animaux non-chordés. Suggérant ainsi, que l’origine évolutive de RAR et de la voie de signalisation de l’AR est plus ancienne qu’initialement prévu. Durant ma thèse j’ai pu retracer l’histoire évolutive de ce récepteur depuis son origine chez Urbilateria jusqu'à sa diversification, suite aux duplications génomiques chez les vertébrés. En caractérisant les RARs d’un annélide, un mollusque et un oursin j’ai démontré que chez l’annélide et l’oursin RAR est activé par l’AR, contrairement au RAR de mollusque qui n’est pas fonctionnel avec l’AR. De plus, des études menées chez l’annélide ont montré que les gènes régulés par l’AR chez cette espèce sont différents de ceux régulés chez les vertébrés. Ces données permettent donc de s’interroger sur la fonction ancestrale probable que ce récepteur avait chez Urbilateria. Finalement, la caractérisation moléculaire des RAR de cyclostomes nous a permis d’étudier l’impact des duplications génomiques sur l’évolution de la poche de liaison au ligand. Ainsi, les résultats obtenus pendant ma thèse permettent de mieux comprendre les relations entre le récepteur et son ligand ainsi que de découvrir de nouveaux aspects sur la fonction de RAR en présence de ligands non-classiquesRetinoic acid (RA) is a fat-soluble morphogen derived from vitamin A that controls key cellular and developmental processes in chordates. In vertebrates, the major actors of the RA signaling pathway are the retinoic acid receptors (RARs) and the retinoid X receptors (RXRs). The evolution of RAR is still poorly understood, however, recently RARs have been identified in the genome of non-chordate species, suggesting that RAR and the RA pathway might have a more ancient evolutionary origin than previously thought. The work presented in this manuscript allowed us to retrace the evolutionary history of RAR from its origin in Urbilateria to its diversification following whole genome duplication events in vertebrates. We describe the characterization of the RARs from an annelid, a mollusk and a sea urchin. We showed that the receptors from the annelid and the sea urchin are functional RARs, however, the receptor from the mollusk is not functional with RA. Studies carried out in the annelid revealed that the signaling pathways regulated by RA in this species are different to the ones it regulates in vertebrates. These observations raise questions about the function of RA and RAR on the embryonic development of non-chordate species and their possible function in Urbilateria. Finally, the molecular characterization of cyclostome RARs allowed us to characterize the impact of whole genome duplications on the evolution of the ligand-binding pocket. Altogether, these data will allow us to better understand the relationship between the receptor and its ligand and to reveal novel insights on the function of RAR in response to non-classical ligands
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Viallet, Jean. "Modification homéotique de la morphogenèse cutanée chez l'embryon de souris et distribution des transcrits des gènes des récepteurs nucléaires de l'acide rétinoique et de deux classes de gènes à homéoboîte". Grenoble 1, 1994. http://www.theses.fr/1994GRE10048.
Abstract (sommario):
Afin de mettre en evidence des facteurs impliques dans la differenciation regionale de la peau, l'expression des genes des recepteurs nucleaires de l'acide retinoique rar , et , du gene de la keratine k5, et des genes a homeoboite otx1, otx2, hoxc8, hoxd9, hoxd11, et hoxd13 a ete suivie par la technique d'hybridation in situ, au cours de la formation des follicules pileux et des glandes eccrines de l'embryon de souris in vivo, ainsi qu'apres modification de cette morphogenese in vitro, par traitement a l'acide retinoique (ra) ou par la realisation de recombinaisons dermo-epidermiques heterotopiques traitees ou non. Le gene de la keratine k5 est un marqueur des ebauches d'annexes dont le type est encore malleable; son inactivation coincide avec la predifferenciation des cellules epitheliales de la matrice du poil et du glomerule des glandes. L'expression des genes rar et est liee a l'activite inductrice des cellules dermiques responsables de l'initiation et du developpement des follicules pileux et des glandes plantaires. La morphogenese des glandes nasales, de meme que la transformation homeotique de bourgeons pileux de vibrisse en glandes apres traitement par ra s'accompagne de l'expression du gene rar dans les cellules dermiques. Cependant, l'analyse de recombinaisons dermo-epidermiques heterotopiques traitees ou non par ra montre que l'expression du gene rar n'est pas le facteur determinant de cette metaplasie. Des modifications parallelement induites par ra doivent affecter les capacites pilaires dermiques. Seule l'origine de l'epiderme etablit sa competence a former des glandes en presence d'un derme modifie. Cette regionalisation epidermique semble definie par une expression differentielle de genes a homeoboite. Ainsi, les transcrits du gene otx1 identifient l'epiderme facial, ceux du gene hoxc8 l'epiderme dorsal, et ceux des genes hoxd9, 11 et 13 l'epiderme caudal
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Teletin, Marius. "Modèles murins de cancer du foie et de la prostate par invalidation de TIF1A (Transcription intermediary factor 1 alpha) et de PTEN (Phosphatase and tensin homolog), respectivement". Université Louis Pasteur (Strasbourg) (1971-2008), 2007. http://www.theses.fr/2007STR13083.
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Cras, Audrey. "Résistance des cellules tumorales aux rétinoïdes : paramètres moléculaires prédictifs d'une réponse thérapeutique aux rexinoïdes et aux drogues épigénétiques". Paris 7, 2009. http://www.theses.fr/2009PA077087.
Abstract (sommario):
Les rétinoïdes participent à la régulation de processus biologiques essentiels tels que la croissance cellulaire, la différenciation et l'apoptose. Les effets de l'acide rétinoïque s'exercent par l'intermédiaire de récepteurs nucléaires - les récepteurs de l'acide rétinoïque (RAR) et les récepteurs X aux rétinoïdes (RXR) - qui agissent en tant que facteurs de transcription dépendants du ligand. Malgré le succès de l'acide rétinoïque tout-trans (ATRA) en tant qu'agent différenciant dans la leucémie aiguë promyélocytaire, l'utilisation des rétinoïdes en clinique reste limitée. Dans ce travail, nous avons étudié l'action des rétinoïdes dans des modèles cellulaires de tumeurs résistantes aux rétinoïdes, les cancers différenciés de la thyroïde et les leucémies aiguës myéloïdes. Nos résultats soulignent l'importance du profil d'expression des RAR et des RXR, ainsi que de leur induction dans la sensibilité des cellules aux rétinoïdes. Le bexarotène, un agoniste RXR, inhibe la croissance cellulaire et la capacité d'invasion de cellules tumorales résistantes à l'ATRA par répression transcriptionnelle de la voie de signalisation NF-kB. En outre, la résistance aux rétinoïdes est associée à un défaut de fonctionnalité du complexe transcriptionnel des RAR suite à des modifications épigénétiques. Cependant, la combinaison de l'ATRA avec des molécules modifiant la structure de la chromatine permet de lever la répression transcriptionnelle et d'induire l'expression des RAR dans des lignées résistantes à l'ATRA seul. L'analyse du profil de méthylation de l'ADN confirme que la modulation épigénétique peut expliquer l'efficacité de cette combinaison thérapeutique. Ces travaux nous ont permis, d'une part de définir des paramètres moléculaires prédictifs d'une réponse aux rétinoïdes et, d'autre part d'identifier des moyens thérapeutiques pour contourner la résistance et/ou pour restaurer la sensibilité à l'ATRARetinoids are involved in the regulation of key biological processes such as cell growth, differentiation and apoptosis. The effects of retinoic acid are mediated through nuclear receptors - retinoic acid receptors (RAR) and retinoid X receptors (RXR) - which act as ligand-dependent transcription factors. Despite the success of retinoic acid all-trans (ATRA) as differentiating agent in acute promyelocytic leukemia, the clinical use of retinoid remains limited. In this work, we studied retinoid actions in retinoid-resistant tumors cellular models, differentiated thyroid cancers and acute myeloid leukemia. Our results highlight the importance of RAR and RXR expression profile, and their induction in the retinoid sensitivity of cells. Bexarotene, a RXR agonist, inhibits cell growth and invasion ability of tumor cells resistant to ATRA by transcriptional repression of NF-kB signaling pathway. In addition, retinoid résistance is associated with lack of functionality of RAR transcriptional complex by epigenetic modifications. However, combination of ATRA with molecules modifying chromatin structure removes the transcriptional repression and induces the expression of RAR in ATRA-resistant cells. DMA methylation pattern analysis confirms that epigenetic modulation may be linked to drug efficacy. This work has enabled us, first, to define molecular parameters predictive of retinoid response, and secondly to identify therapeutic ways to bypass resistance and/or to restore ATRA sensitivity
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Commere, Oustric Julie. "Apports nutritionnels en acides gras polyinsaturés n-3 et action cellulaire de la vitamine A : effets sur la plasticité cérébrale et la mémoire spatiale chez le rat agé". Thesis, Bordeaux 1, 2010. http://www.theses.fr/2010BOR14211/document.
Abstract (sommario):
Les acides gras polyinsaturés à longue chaîne (AGPI-LC) de la série n-3 jouent des rôles essentiels dans le fonctionnement du cerveau et notamment dans les processus de plasticité synaptique et de mémoire, altérés au cours du vieillissement. Il est maintenant bien admis que ces AGPI peuvent réguler la transcription génique en se liant à des récepteurs nucléaires spécifiques, les PPAR (peroxisome proliferator-activated receptors), mais aussi aux récepteurs de l’acide 9-cis rétinoïque, les RXR (retinoid X receptors). En tant que partenaires communs d’hétérodimérisation des PPAR et des RAR (récepteurs de l’acide tout-trans rétinoïque), les RXR sont des acteurs clés de la modulation de l’expression génique par les acides gras et les rétinoïdes. Dans ce contexte, l’objectif de ce travail de thèse était d’étudier, au cours du vieillissement chez le rat, les effets d’une supplémentation en AGPI-LC n-3 sur l’activité des voies de signalisation des acides gras et des rétinoïdes, les processus de plasticité cérébrale (plasticité synaptique et neurogenèse) et la mémoire spatiale. Nos principaux résultats montrent qu’une supplémentation en AGPI-LC n-3, pendant 21 semaines chez des rats à mi-vie, maintient dans l’hippocampe les niveaux d’expression des ARNm codant pour RXRγ et GAP-43 (protéine synaptique) altérés au cours du vieillissement. De plus les rats âgés supplémentés en AGPI-LC n-3 présentent une augmentation du nombre de néo-neurones hippocampiques et une amélioration de la mémoire spatiale de travail, comparés aux rats âgés contrôle. Les résultats de cette étude plaident en faveur d’un effet bénéfique des AGPI-LC n-3 sur la mémoire de travail au cours du vieillissement via notamment, une action sur la plasticité cérébrale. De plus, nos travaux suggèrent l’implication des RXR dans l’effet neuroprotecteur des AGPI-LC n-3, qui réguleraient l’expression de certains gènes cibles impliqués dans la plasticité synaptique et les processus de neurogenèse hippocampiqueLong chain polyunsaturated fatty acids (LC-PUFA) of the n-3 series play essential roles in brain functions, including brain plasticity and memory processes which are altered during aging. It is now well accepted that these PUFA regulate gene transcription through binding and activating specific nuclear receptors such as PPAR (peroxisome proliferator-activated receptors) and RXR (retinoid X receptors, which also bind 9-cis retinoic acid). As a common heterodimeric partner of both PPAR and RAR (all-trans retinoic acid receptors), RXR is a key factor in the modulation of gene expression by fatty acids and retinoids. In this context, the purpose of this work was to study the effects of a n-3 LC-PUFA supplementation on fatty acid and retinoid signalling pathways and on cerebral plasticity and spatial memory processes. Our main results show that n-3 LC-PUFA supplementation for 21 weeks in mid-life rats, maintains the mRNA levels of RXRγ and GAP-43 (synaptic protein) which were altered in aged rat hippocampus. Besides, supplemented aged rats exhibited increased numbers of newly generated neurons and improved spatial working memory, when compared with control aged rats. To summarize, our results support the neuroprotective effects of n-3 LC-PUFA during aging, in particular on cerebral plasticity and working memory. Furthermore, our works suggest the implication of RXR in the set up of these effects through notably the regulation of some target genes involved in synaptic plasticity and hippocampal neurogenesis processes
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Bellutti, Laura. "Régulation transcriptionnelle et entrée en méiose". Thesis, Université de Paris (2019-....), 2019. https://wo.app.u-paris.fr/cgi-bin/WebObjects/TheseWeb.woa/wa/show?t=4244&f=28602.
Abstract (sommario):
La méiose est un processus hautement conservé, central dans la reproduction sexuée, permettant la production de cellules haploïdes à partir des cellules germinales diploïdes. Chez les mammifères l’entrée en méiose est étroitement régulée et dépendante du sexe : elle a lieu au cours de la vie fœtale chez la femelle et pendant la vie post-natale chez le mâle. À l’heure actuelle, l’acide rétinoïque (AR) est considéré comme le principal régulateur de l’entrée en méiose : il induirait l’expression de Stra8 (Stimulated by the retinoic acid gene 8), facteur transcriptionnel clé de la transition mitose/méiose. Dans les testicules fœtaux, CYP26B1, enzyme capable de cataboliser l’AR, inhibe l’expression de Stra8 et l’entrée en méiose. Cependant, il n’existe pas de preuve définitive du rôle de l’AR endogène dans l’initiation de la méiose. Nous avons donc tenté de clarifier l’implication de l’AR dans la régulation de Stra8 en vie fœtale. Pour cela nous avons développé une méthode de surexpression ex vivo des enzymes CYP26B1 et CYP26A1, une autre enzyme avec une activité catalytique de l’AR. Nous montrons que CYP26B1 est suffisant pour inhiber STRA8 dans l’ovaire fœtal, indépendamment de la voie de signalisation de l’AR. Nous proposons ainsi que l’AR agisse dans l’amplification de Stra8 plutôt que dans son induction primaire. Récemment deux autres facteurs ont été caractérisés pour leur rôle clé dans la régulation de la transition mitose/méiose au niveau post-transcriptionnel : MEIOC et son partenaire YTHDC2. Nous avons effectué une analyse des mutants Stra8, Meioc et Ythdc2, qui révèlent de nombreuses similarités. Nous émettons donc l’hypothèse de l’existence d’un continuum entre la régulation transcriptionnelle (par STRA8) et post-transcriptionnelle (par MEIOC/YTHDC2) en début de méiose. En outre, la double-invalidation de Stra8 et Meioc ne prévient pas l’entrée en méiose de quelques rares spermatocytes. Nous suggérons donc l’existence de facteurs additionnels, encore à découvrir, contrôlant la transition mitose/méiose.Enfin, nous montrons qu’au moment de la transition mitose/méiose les spermatocytes I sont trancriptionnellement silencieux. Cette répression transcriptionnelle est en partie régulée par Stra8 mais elle est indépendante des évènements clés de la prophase I : cassures double brin, synapsis des chromosomes homologues, changements de la structure chromatinienne. En exploitant une méthode de synchronisation de la spermatogenèse et en immunoprécipitant les ARN néotranscrits, nous avons alors caractérisé le paysage de la transcription en début de méiose pour la première fois. Nous mettons ainsi en évidence des évènements de stabilisation/déstabilisation des ARN ayant lieu au cours de la prophase I. Ces travaux ont donc mis en lumière le haut degré de complexité caractérisant l’entrée en méiose des cellules germinales. Cette dernière est régulée par plusieurs facteurs, dont certains demeurent encore inconnus, aux niveaux transcriptionnel et post-transcriptionnelMeiosis is a conserved process, allowing the production of haploid germ cells. In mammals, entry into meiosis is sexually dichotomic, taking place during fetal life in ovaries and during postnatal life in testes. In fetal ovaries, Retinoic Acid (RA) is believed to activate Stra8 (Stimulated by the retinoic acid gene 8), a key factor of mitosis/meiosis transition. In fetal testes, CYP26B1, a RA-metabolising enzyme, prevents Stra8 expression. However, the exact role of endogenous RA remains uncertain.The first objective of my work was to clarify the function of endogenous RA in meiotic initiation. For this purpose, we created a model of artificial RA deficiency by ex vivo electroporation of fetal gonads with plasmids encoding Cyp26b1 or Cyp26a1, two RA-metabolising enzymes. We observed that ectopic CYP26B1 is sufficient to prevent STRA8 appearance in germ cells from fetal ovaries. In contrast, overexpression of CYP26A1 only mildly affects the expression of Stra8 mRNA. We thus conclude that CYP26B1 acts independently of RA signalling pathway on meiotic initiation. We propose a two-step model with first a RA-independent Stra8 induction, followed by its RA-dependent amplification.Recently, MEIOC and YTHDC2 have been caracterised as key post-transcriptional regulators of mitosis/meiosis transition. Here, we compare the phenotypes of Stra8, Meioc and Ythdc2 mutant mice Their high similarity prompt us to hypothesise a continuity between transcriptional and post-transcriptional regulations. In parallel, we show that double invalidation of Stra8 and Meioc does not completely prevent meiotic initiation. Thus, we hypothesise the existence of other unknown mitosis/meiosis regulators.Finally, we characterised a genome wide arrest of transcription taking place during mitosis/meiosis transition. This transcriptional silencing is partly dependent of Stra8 but is independent of other key events of meiotic prophase I: double-strand breaks, homologous chromosome synapsis, axe-loop chromosome structure. We took advantage of a spermatogenesis synchronisation protocol and nascent RNA immunoprecipitation, to characterise the transcriptional landscape of early-meiotic germ cells. This highlighted stabilization and destabilization phemomena taking place during prophase I. As a whole, we show the high complexity level of meiosis initiation, which has to be finely regulated by the orchestration of transcriptional and post-transcriptional events
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El, hajj Joelle. "Régulation de la télomérase dans un modèle de leucémie aigue promyélocytaire : rôle de l'ARN long non codant H19". Thesis, Université Paris-Saclay (ComUE), 2018. http://www.theses.fr/2018SACLS123.
Abstract (sommario):
Le couple télomère/télomérase apparaît comme une cible prometteuse pour de potentiels agents anticancéreux qui seraient actifs sur un large éventail de tumeurs. Le laboratoire d’accueil a montré dans un modèle de leucémie aiguë promyélocytaire (LAP), qu'un agent utilisé en clinique, l'acide rétinoïque (ATRA), exerce une activité anti-tumorale en réprimant la transcription de la sous-unité catalytique hTERT indépendamment de la différenciation. Ce modèle (NB4) avec ses variants cellulaires résistant (NB4-LR1SFD) ou non à la répression de hTERT (NB4-LR1) par l’ATRA constitue un outil de choix pour l’identification de facteurs régulateurs de hTERT et la recherche des bases moléculaires de sa réactivation.Une approche transcriptomique a été utilisée afin d’identifier de nouveaux gènes et/ou réseaux de signalisation induits par l’ATRA et régulateurs de hTERT. L’analyse bioinformatique nous a permis de construire des profils d’expression différentielle entre les 2 lignées et des réseaux d’interaction. Parmi les candidats, H19, un ARN long de 2.5Kb, polyadénylé et non codant. H19 est classé parmi les gènes supresseurs de tumeurs : en son absence il y a développement de cancer (cas de la tumeur de Wilms, rhabdomyosarcome embryonnaire, Syndrome Beekwith-Wiedman) ; sa réintroduction par transfection conduit à une perte de tumoriginicité. Cependant H19 est reconnu de plus en plus comme un oncogène vu que son expression est élevée dans plusieurs types de cancers solides. Par contre peu d’études s’intéressent au rôle de H19 dans les leucémies, d’où notre intérêt pour l’étudier dans le modèle LAP que nous avons développé.Nous avons mis au point la mesure d’expression de H19 par RT-PCR quantitative, validé les données obtenues dans l’analyse transcriptomique et montré que le traitement ATRA induit l’expression de H19 dans les cellules NB4-LR1 alors que cette expression est plutôt diminuée dans les cellules NB4-LR1SFD. L’induction observée dans les cellules NB4-LR1 existe indépendamment de la différenciation. Par contre, cette induction peut être observée associée à la différenciation ou à l’apoptose dans la lignée cellulaire NB4-LR1SFD parallèlement à une diminution importante de l’expression de hTERT. Ce résultat important montre que la lignée NB4-LR1SFD ne présente pas de défaut général d’induction de H19. Ces données suggèrent l’existence d’une corrélation inverse entre le niveau d’expression de hTERT et celui de H19 dans ce modèle cellulaire. De façon importante, l’analyse des banques de données issues de patients LAP publiquement accessibles retrouve cette corrélation inverse.Une diminution d’activité télomérasique est observée dans des extraits cellulaires incubés en présence de l’ARN H19 transcrit in vitro. Cette diminution d’activité est observée aussi après surexpression de H19 in cellulo. Les expériences de RIP (RNA immunoprecipitation) ont montré une diminution de la quantité de hTR lié à hTERT suite à une augmentation d’expression de H19 après traitement ATRA in vitro ou après surexpression de H19 in cellulo. Une hypothèse serait que H19 induirait un déplacement de hTR du complexe hTR-hTERT. Cependant, les expériences de « pull-down » n’ont pas réussi à confirmer l’hypothèse d’une interaction possible entre l’ARN H19 et la protéine TERT.Mon travail de thèse identifie pour la première fois H19, un ARN long non codant, comme facteur régulateur potentiel de hTERT pouvant modifier son activité. Ce travail proposerait non seulement un mécanisme nouveau de régulation de l’activité télomérase mais aussi une fonction nouvelle pour H19 dans ce type de cancerThe telomere / telomerase pair appears to be a promising target for potential anticancer agents that would be active on a wide range of tumors. The host laboratory has shown in a model of acute promyelocytic leukemia (APL), that a clinically used agent, retinoic acid (ATRA), exerts anti-tumor activity by repressing the transcription of the catalytic subunit hTERT regardless of differentiation. This model (NB4) with its resistant cell variants (NB4-LR1SFD) or not to the repression of hTERT (NB4-LR1) by ATRA is a tool of choice for the identification of hTERT regulatory factors and the search for molecular bases of its reactivation.A "microarray" approach has been used to identify new ATRA-mediated genes and / or signaling networks and potential hTERT regulators. Bioinformatic analysis allowed us to build differential expression profiles between the 2 lineages and interaction networks. Among the candidates, H19, a 2.5Kb long, polyadenylated and non-coding RNA. H19 is classified as a tumor suppressor gene: in its absence there is cancer development (case of Wilms tumor, embryonic rhabdomyosarcoma, Beckwith-Wiedman syndrome); its reintroduction by transfection leads to a loss of tumorigenicity. However H19 is increasingly recognized as an oncogene as its expression is elevated in several types of solid cancers. However, few studies are interested in the role of H19 in leukemias, hence our interest in studying it in the APL model that we have developed.We developed the H19 expression measurement by quantitative RT-PCR, validated the data obtained in the "microarray" analysis and showed that the ATRA treatment induces the expression of H19 in NB4-LR1 cells whereas this expression is rather diminished in NB4-LR1SFD cells. The induction observed in NB4-LR1 cells exists independently of differentiation. On the other hand, this induction can be observed associated with the differentiation or apoptosis in the NB4-LR1SFD cell line in parallel with a significant decrease in the expression of hTERT. This important result shows that the NB4-LR1SFD line does not have a general H19 induction defect. These data suggest the existence of an inverse correlation between the expression level of hTERT and that of H19 in this cellular model. Importantly, the analysis of publicly accessible APL patients’ databases finds this inverse correlation as well.We observed a decrease in telomerase activity in cellular extracts incubated in the presence of in vitro transcribed H19 RNA. This decrease in activity was also observed after overexpression of H19 in cellulo. The RIP (RNA immunoprecipitation) experiments showed a decrease in hTR amount bound to hTERT following an increase in H19 expression after ATRA treatment in vitro or after overexpression of H19 in cellulo. We hypothesize that H19 induces a displacement of hTR from the hTR-hTERT complex. However, the "pull-down" experiments failed to confirm the hypothesis of a possible interaction between H19 RNA and TERT protein.My thesis work identifies, for the first time, the long non-coding RNA H19, as a potential regulator of hTERT that can modify its activity. This work would propose not only a new mechanism of regulation of telomerase activity but also a new function for H19 in this type of cancer
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Grenier, Émilie. "Modulation de la différenciation cellulaire, des apolipoprotéines et des lipoprotéines par l'acide rétinoïque". Thèse, 2007. http://hdl.handle.net/1866/18208.
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Dumouchel, Annie. "Étude du rôle de l'acide rétinoïque dans le développement de la prostate". Thèse, 2005. http://hdl.handle.net/1866/15557.