Tesi: "Mécanismes de détoxification cellulaire"

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Fleurbaix, Emmanuel. "Évaluation écotoxicologique des éléments terres-rares : approches cellulaires chez différentes espèces aquatiques". Electronic Thesis or Diss., Université de Lorraine, 2021. http://www.theses.fr/2021LORR0324.

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Abstract (sommario):

Depuis 30 ans, l’utilisation croissante des Lanthanides dans les nouvelles technologies a entraîné des rejets importants de ces métaux vers les écosystèmes aquatiques. Dans une politique mondiale de développement durable visant à préserver la qualité des écosystèmes, la question de l’impact des Lanthanides sur les organismes aquatiques s’est naturellement posée. Néanmoins, les études restent peu nombreuses et aucun consensus ne subsiste concernant la toxicité des Lanthanides. Dans ce contexte, nous avons étudié la toxicité cellulaire des Lanthanides individuellement et en mélanges. Les effets toxiques ont été mis en évidence en mesurant la viabilité de cellules fibroblastiques (ZF4 ; ATCC®, CRL-2050™) et hépatiques (ZFL ; ATCC®, CRL-2643™) de poisson zèbre (Danio rerio), de cellules branchiales (RTgill-W1 ; ATCC®, CRL-2523™) de la truite arc-en-ciel (Oncorynchus mykiss), et des cellules primaires de glandes digestives de corbicule (Corbicula fluminea) exposées à ces métaux. Les résultats ont montré que les Lanthanides sont responsables d’effets toxiques directs sur nos modèles cellulaires. Concernant la toxicité des Lanthanides en mélanges, des effets synergiques ont été observés sur les 3 lignées cellulaires de poissons. Nous nous sommes également intéressés aux mécanismes de détoxification des Lanthanides dans les cellules ZF4 de Danio rerio. Nous avons décidé d’étudier ces acteurs en raison de leurs rôles respectifs dans les phases II et III de la détoxification cellulaire de métaux chez les bivalves et les poissons. Pour cela, la viabilité des cellules ZF4 a été mesurée après des expositions aux Lanthanides en présence d’inhibiteurs spécifiques des glutathion-S-transférases (acide éthacrynique) et des protéines MRP (MK571 et probénécide). Les résultats ont montré que les protéines MRP sensibles au MK571 jouent un rôle dans la détoxification des Lanthanides dans les cellules ZF4. Globalement, les résultats obtenus pour cette recherche ont confirmé que les effets toxiques des Lanthanides à l’échelle cellulaire sont pertinents pour prédire les effets in vivo, dans le cadre d’une évaluation de la toxicité de ces métaux
Since 30 years ago, the growing use of Lanthanides in new technologies has contributed to important releases of these metals into aquatic ecosystems. In a global sustainable development policy aimed at preserving the quality of ecosystems, the impact of Lanthanides on aquatic organisms has naturally been questioned. However, studies on the aquatic ecotoxicology of Lanthanides are incomplete, and no consensus is established yet. In this context, we studied the cellular toxicity of Lanthanides individually and in mixtures. To determine these toxic effects, cell viability was measured on Danio rerio fibroblast-like cells (ZF4; ATCC®, CRL-2050™), Danio rerio hepatic cells (ZFL; ATCC®, CRL-2643™), Oncorhynchus mykiss epithelial cells (RTgill-W1; ATCC®, CRL-2523™), and primary culture of Corbicula fluminea digestive glands exposed to Lanthanides. Direct toxicity of Lanthanides has been observed on all cellular models. Concerning the toxicity of Lanthanides in mixtures, synergistic effects have been underlined on the three fish cell lines. In this research, we focused on the mechanisms of the detoxification of Lanthanides in the case of ZF4 cells from Danio rerio. The effects of Lanthanides were assessed in the presence of specific inhibitors of glutathione-S-transferases (ethacrynic acid) and MRP-like (MK571 and probenecid), by cell viability measurements. We decided to study these actors of the cellular detoxification due to their respective roles in phases II and III of the cellular detoxification of metals in fishes and bivalves. Regarding the results, MRP-like proteins are effectively involved in the detoxification of Lanthanides in ZF4 cells. Overall, our results highlighted the relevance of the toxic effects of Lanthanides at the cellular level for the risk assessment of these metals

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Gava, Fabien. "Etude des mécanismes d'agrégation cellulaire tumorale". Thesis, Toulouse 3, 2018. http://www.theses.fr/2018TOU30372.

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Abstract (sommario):

Les métastases sont responsables de 90% des décès attribués au cancer justifiant qu'une large part des recherches actuelles en cancérologie soit consacrée à l'étude des mécanismes responsables de leur formation. Il a récemment été démontré que des clusters ou agrégats de cellules tumorales circulantes (CTCs) détectés dans la circulation sanguine des patients présentent un potentiel métastatique largement plus important que des cellules tumorales circulantes isolées. Il a également été montré que leur présence est corrélée avec un pronostic péjoratif pour les patients atteints de plusieurs types de cancers d'origine épithéliale. Ces observations ouvrent des perspectives diagnostiques et thérapeutiques prometteuses mais qui nécessitent de mieux comprendre comment se forment et se maintiennent ces clusters. Dans ce contexte notre laboratoire a développé un essai semi-automatisé in vitro basé sur la vidéo-microscopie permettant d'étudier les mécanismes impliqués dans l'agrégation de cellules tumorales dans des conditions ancrage indépendantes. Cet essai a permis de démontrer l'implication de la protéine de jonction adhérente E-cadhérine et des protéines de jonctions desmosomales DSG2 et DSC2 dans l'agrégation de cellules tumorales. L'objectif de mes travaux de thèse a été de poursuivre l'exploration de l'implication des protéines de jonctions intercellulaires de type épithélial dans l'agrégation des cellules tumorales en conditions ancrage-indépendantes et de chercher à identifier de nouveaux régulateurs. Dans un premier temps j'ai pu démontrer et explorer le rôle des jonctions communicantes (ou jonctions gap), ainsi que de la P-cadhérine dans l'agrégation des cellules tumorales mammaires et colorectales. Au cours de la seconde partie de mes travaux, j'ai développé une stratégie basée sur la classification de lignées tumorales selon leur comportement au cours du processus d'agrégation. Afin d'établir les paramètres de cette classification, nous avons exploré les capacités agrégatives de 28 lignées cellulaires tumorales d'origine épithéliale. Cette étude nous a permis de mettre en évidence une forte diversité de comportement au cours de ce processus et de définir des classes de lignées intégrant les aspects dynamiques du processus d'agrégation ainsi que la structure des agrégats obtenus. La combinaison de cette classification avec les données d'expression aujourd'hui disponibles pourrait permettre l'identification de nouveaux régulateurs originaux de l'agrégation. Nos résultats ont mis en évidence de nouveaux régulateurs de l'agrégation cellulaire tumorale ancrage-indépendante ainsi qu'une large diversité de comportement de différentes lignées cellulaires tumorales. Nos travaux ouvrent ainsi des perspectives vers une meilleure compréhension des mécanismes impliqués, vers l'application à l'étude des cellules tumorales circulantes provenant de patients et également au ciblage thérapeutique de ces clusters
Metastases are responsible for 90% of cancer-related deaths justifying the current cancer research's substantial part dedicated to study their formation's mechanisms. It has been recently demonstrated that clusters (or aggregates) of circulating tumor cells (CTCs) identified in patient's blood samples have a far higher metastatic potential than isolated circulating tumor cells. It also has been shown that their detection is correlated with a poor prognosis for patients suffering from epithelial cancers. These observations open up promising diagnostic and therapeutic perspectives but that still requires further investigation on the mechanisms of clusters formation. In this context our laboratory developed an in vitro semi-automated assay based on video microscopy enabling the study of mechanisms involved in tumor cell anchorage-independent clustering. This assay allowed to demonstrate the involvement of adherent junction protein E-cadherin and desmosomal junction proteins DSG2 and DSC2 during tumor cell clustering. The aim of my work was to investigate epithelial intercellular junction's proteins involvement in tumor cell aggregation in anchorage-independent conditions and to search for new regulators. In the first instance I explored and demonstrated the role of communicating junctions (or gap junctions) and P-cadherin in tumor cell aggregation of breast and colorectal cancer cell lines. In the second part, I developed a strategy based on tumor cell lines classification depending on their characteristics of the aggregation process. With the aim of determining the parameters of this classification, I examined aggregation abilities of 28 tumor cell lines derived from epithelial cancers. This study provides evidence for a high variability during this process and allows defining cell lines categories integrating both aggregation process dynamic aspects and aggregates structure. The combination of this classification with current available expression data could lead to the identification of original new aggregation regulators. Together, these results have underscored new anchorage-independent tumor cell aggregation regulators and a wide range of behaviors of different tumor cell lines observed. Our work provides opportunities into a better understanding of involved mechanisms, towards an application to study circulating tumor cells from patients and also a therapeutic targeting of these clusters

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Laporte, Fanny. "Compréhension des mécanismes de complexation de l'uranyle par les molécules du vivant : élaboration de peptides biomimétiques chélatants pour la détoxification". Thesis, Université Grenoble Alpes (ComUE), 2017. http://www.theses.fr/2017GREAV038.

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Abstract (sommario):

Les métaux lourds, et en particulier les actinides, sont toxiques pour l'homme. La compréhension des mécanismes responsables de leur toxicité constitue un champ d'investigation important dans le domaine de la toxicologie. La compréhension des interactions de l’uranyle à l’échelle moléculaire est nécessaire pour prédire sa toxicité et pour concevoir des agents décorporants efficaces. Ce travail a pour objectif de contribuer à la caractérisation des sites d’interaction protéine-uranyle et à l’identification des facteurs clés gouvernant ces interactions. Pour obtenir des données thermodynamiques et structurales sur ces sites, deux stratégies ont été adaptées à l’étude des deux protéines humaines prédites comme cibles majeures de l’uranyle et dont les propriétés et structures sont très différentes. Les deux domaines structurés de la fétuine-A, ont été produits puis étudiés indépendamment par des méthodes physico-chimiques complémentaires incluant la spectroscopie RMN multidimensionelle afin d’obtenir des informations structurales sur les sites de liaison du métal dans la protéine. Afin d’élucider les interactions entre l’uranyle et l’ostéopontine, une protéine phosphorylée intrinsèquement désordonnée, nous avons conçu des peptides préorganisés en feuillet β comme modèles de sites de liaison de l’uranyle. Des acides aminés phosphorylés ont été introduits dans ces structures, permettant ainsi de reproduire l’environnement de coordination du métal dans la protéine. Les différences de structures et de propriétés entre biomolécules peuvent représenter un frein aux études d’affinité. Une sonde fluorescente non naturelle a donc été développée pour mettre au point une méthode de hiérarchisation des cibles de l’uranyle s’affranchissant de ces différences
Heavy metals, especially actinides, are toxic for humans. Understanding the mechanisms responsible for their toxicity is an important field of research in toxicology. Uranyl toxicity is still not well understood. The understanding of uranyl interactions at the molecular level is necessary to predict its chemical toxicity and to develop efficient chelating agents. This work aims at identifying uranyl binding sites in proteins and key factors that govern these interactions. To obtain thermodynamic and structural data, strategies were developed to study two proteins predicted as major uranyl targets which present different structures and properties. We took advantage of fetuin-A structure and studied the two structured domain of the protein by complementary physico-chemical methods including multidimensional NMR spectroscopy to acquire structural information on uranyl binding sites in this protein. In order to elucidate interactions between the metal and disordered phosphorylated proteins such as osteopontin, we designed peptides preorganized in β-sheet optimized to coordinate uranyl cation. We introduced amino acids containing phosphate groups and demonstrated that these peptides are relevant models to mimic uranyl binding sites found in phosphorylated proteins. Biomolecules display different structures and properties which may constitute an obstacle to affinity studies. A tool based on a non-natural fluorescent probe was developed to investigate and compare uranyl targets affinities

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Le, Bouffant Ronan. "Facteurs de traduction et mécanismes de surveillance du cycle cellulaire". Rennes 1, 2007. http://hal.upmc.fr/tel-01117521.

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Abstract (sommario):

La division cellulaire est un processus physiologique extrêmement régulé et la moindre anomalie entraîne la mobilisation de points de surveillance. Lorsque qu’un problème survient dans le contrôle de la division, cela peut entraîner l’apparition de pathologie grave comme le cancer. L’étude de l’implication des facteurs de traduction lors de la mobilisation des points de surveillance a été réalisée en profitant des atouts du modèle de l’embryon d’oursin. Les travaux réalisés au cours de cette thèse, ont montré que le point de surveillance de l'ADN endommagé (arrêt du cycle-réparation-apoptose) était fonctionnel dès le premier cycle suivant la fécondation dans l'embryon d'oursin. Nous avons également mis en évidence que dans les embryons d'oursin, la phosphorylation de la protéine eIF2α est impliquée dans l'augmentation de synthèse protéique induite par la fécondation et dans l’inhibition de synthèse protéique induite par un traitement avec une molécule alkylant l’ADN, le MMS. Nos études montrent que la protéine 4E-BP, un inhibiteur de la traduction, est surexprimée et fonctionnelle en réponse à la mobilisation du point de surveillance de l'ADN endommagé par une molécule radiomimétique (bléomycine), à un stress hypoxique ou lors de l'exposition à un métal lourd (ChromeIII) dans l’embryon d’oursin. Enfin, nous démontrons que lors du traitement des embryons par le MMS, qui n'induit pas de surexpression de 4E-BP, la protéine eIF4G est modifiée, dégradée ou clivée selon la dose de drogue utilisée. Nos études renforcent l’intérêt et les connaissances sur l’implication des facteurs de traduction lors de la mobilisation des points de surveillance du cycle cellulaire dans l’embryon d’oursin mis en situation de stress et/ou d'endommagement de l'ADN. Ainsi les résultats obtenus permettent de poser les bases de nouvelles régulations des facteurs de traduction eIF4E et eIF4G et de leur inhibiteur 4E-BP permettant de contrôler la synthèse protéique lorsque la cellule va s'engager dans la voie de survie ou de mort cellulaire
Cell division is a highly regulated process and when a problem occurs, the cell cycle checkpoints are activated. When cell cycle checkpoints are defective, pathological disease, as cancer, can occur. The implication of translation factors during checkpoints activation was studied in sea urchin embryo model. The work realized during this PhD demonstrated a functional DNA damage checkpoint during the first cell division of sea urchin embryo. The eIF2 phosphorylation was shown to be implicated in translational activation after fertilization and in translation inhibition after MMS treatment, a DNA alkylating molecule. This study shows an expression of functional 4E-BP protein, a translational inhibitor, after induction of DNA damages by radiomimetic drug (bleomycin), hypoxic stress or heavy metal (ChromeIII) treatment in sea urchin embryo. We demonstrated that, after MMS treatment, which doesn’t induced 4E-BP expression, the eIF4G protein was modified, degraded or cleaved as a function of drug dose. Our work support interest and knowledge on translational factors implication when checkpoint was mobilisated after DNA damages or cellular stress in sea urchin embryo. These results are a starting point to study new regulations of translational factors eIF4E, eIF4G and 4E-BP when cell is directed toward survival or cell death pathways

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Escoffre, Jean-Michel. "Mécanismes moléculaires et cellulaire de l'électrotransfert de plasmides in vitro". Toulouse 3, 2010. http://thesesups.ups-tlse.fr/1296/.

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Abstract (sommario):

Le transfert de plasmides au sein d'une cellule cible représente un outil clé dans l'étude de fonctions biologiques et dans le développement de nouvelles approches thérapeutiques. Cependant, le transfert de plasmides doit être réalisé avec un minimum d'effets secondaires au niveau de la cellule cible. La technique d'électroperméabilisation est une méthode physique fondée sur la modulation du potentiel électrique transmembranaire natif de la cellule par un champ électrique externe. Cependant, l'utilisation rationnelle de l'électroperméabilisation en pharmacologie et en médecine ne pourra se faire que grâce à une parfaite compréhension des mécanismes impliqués lors de l'électroperméabilisation au niveau membranaire et de ses conséquences cellulaires. Le mécanisme de l'électrotransfert de plasmides est un processus multi-étapes avec une étape d'interaction plasmide/membrane perméabilisée pendant l'application des impulsions électriques, suivi après ces dernières, d'une étape de translocation du plasmide à travers la membrane plasmique. Ce travail de recherche pluridisciplinaire vise à une meilleure compréhension du mécanisme de l'électrotransfert de plasmides. Il intègre l'étude des conséquences membranaires de l'électrotransfert de plasmide et l'étude de l'interaction plasmide/membrane perméabilisée. L'application d'impulsions électriques millisecondes et perméabilisantes induit un désordre membranaire et une rapide translocation des phospholipides dans les régions perméabilisées. La translocation électro-induite des phospholipides n'est pas associée à une perte de la viabilité cellulaire. L'existence du processus multi-étapes de l'électrotransfert de plasmide (perméabilisation membranaire, interaction plasmide/membrane et expression génique) a été confirmé dans différentes lignées cellulaires. Pendant l'application de la première impulsion électrique, les molécules de plasmide migrent par électrophorèse et viennent interagir dans des sites distincts de la région membranaire faisant face à la cathode. L'interaction des molécules de plasmide avec la membrane perméabilisée serait donc un processus rapide (de l'ordre d'une centaine de microsecondes). Les complexes plasmide/membrane se stabilisent en un délai de 200 ms. Un rôle distinct de l'intensité du champ électrique et du nombre d'impulsions électriques a été mis en évidence. Si l'intensité du champ électrique définit la surface membranaire où l'interaction des molécules de plasmide a lieu et de fait, le nombre de spots d'interaction, le nombre d'impulsions électriques définit la quantité de molécules de plasmide présente par complexe. Les complexes plasmide/membrane ainsi formés ne diffusent pas latéralement dans la membrane. Le cytosquelette d'actine n'est pas impliqué dans la formation de ces complexes mais pourrait être impliqué dans le transport intracellulaire des molécules de plasmides. L'électroperméabilisation et l'interaction plasmide/membrane perturbent la mobilité latérale des protéines membranaire du feuillet externe de la membrane plasmique. La combinaison de la sonoporation avec l'électroperméabilisation permet d'améliorer l'efficacité de transfection obtenue par l'électroperméabilisation seule. Le transfert de plasmides par électro-sonoporation est une stratégie prometteuse en thérapie génique
Plasmid transfer within a target cell represents a key tool in the study of biological functions and the development of new therapeutic strategies. However, the transfer of plasmids must be carried out with a minimum of side effects on the level of the target cell. The technique of electropermeabilization is a physical method based on the modulation of the native transmembrane electric potential of the cell by an external electric field. However, the rational use of the electropermeabilization in pharmacology and medicine could be done only thanks to one perfect comprehension of the mechanisms involved in the electropermeabilization at the membrane level and its cellular consequences. The mechanism of the plasmid electrotransfer is a multi-steps process with a step of plasmid/membrane interaction during the application of the electric pulses, followed after these last, of a step of plasmid translocation through the plasma membrane. This multi-disciplinary research task aims at a better comprehension of the mechanism of the plasmid electrotransfer. It integrates the study of the membrane consequences of the electropermeabilization and the study of the plasmid/ membrane interaction. The application of milliseconds and permeabilizing electric pulses induces a membrane disorder and a fast phospholipid translocation in the permeabilized regions. The electro-induced translocation of phospholipids is not associated with a loss of cell viability. The existence of the multi-steps process of the plasmid electrotransfer (membrane permeabilization, plasmid/membrane interaction and gene expression) was confirmed in various cell lines. During the application of the first electric pulse, the plasmids migrate by electrophoresis and come to interact in distinct sites from the membrane region facing the cathode. The interaction of plasmids with the permeabilized membrane would be thus a fast process (about a hundred microseconds). The plasmid/membrane complexes are stabilized in a delay of 200 ms. A distinct role from the intensity of the electric field and the number of electric pulses was highlighted. If the intensity of the electric field defines membrane surface where the interaction of the plasmid molecules takes place and in fact, the number of spots of interaction, the number of electric pulses defines the amount of plasmids presents by complex. The plasmid/membrane complexes thus formed do not diffuse laterally in the membrane. The actine cytoskeleton is not involved in the formation of these complexes but could be involved in the intracellular traffic of plasmids. Electropermeabilization and plasmid/membrane interaction disturbed the lateral mobility of membrane proteins of outer leaflet of plasma membrane. The combination of the sonoporation with the electropermeabilization makes it possible to improve the effectiveness of transfection obtained by the electropermeabilization alone. The transfer of plasmids by electro-sonoporation is a promising strategy in gene therapy

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Lossaint, Gérald. "Mécanismes orchestrant la sortie du cycle cellulaire opérant en G2". Thesis, Montpellier 2, 2010. http://www.theses.fr/2010MON20040/document.

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Abstract (sommario):

La dérégulation du système de surveillance qui bloque la prolifération lorsque l'intégrité du génome est compromise fait partie intégrante de la cancérogenèse. Nous cherchons à décortiquer les mécanismes qui, en phase G2, orchestrent l'arrêt du cycle cellulaire, irréversible, en présence des lésions de l'ADN (sénescence) ou réversible (quiescence), en absence de signaux mitogéniques ou confluence. L'objectif du premier volet fut d'élucider les rôles respectifs de l'inhibiteur de CDK (CKI) p21Waf1 et des kinases Chk1 et Chk2 dans l'arrêt en G2 dû au stress génotoxique menant à la sénescence. Nous avons montré que dans les cellules humaines normales cet arrêt nécessite l'action de p21 et Chk1 tandis que Chk2 n'est pas requise. Au contraire, dans plusieurs lignées cancéreuses, malgré la présence de p53, ce rôle de p21 est compromis à cause d'une activation inefficace de la kinase ATM. Par conséquent, en dépit d'une forte activation de Chk1 bloquant la mitose, ces cellules ne parviennent pas à initier la sénescence (Lossaint et al., soumis). L'objectif du deuxième volet fut de mettre en évidence le programme déclenchant la quiescence lors de confluence ou en absence de sérum. Les travaux antérieurs de l'équipe ont montré que cette décision pouvait être prise avant la mitose même si l'arrêt du cycle n'a lieu qu'en phase G1 suivante. En étudiant les fibroblastes synchronisés nous avons trouvé que la quiescence est précédée par l'inhibition pré-mitotique de la phosphorylation de pRb due à une diminution de cycline D1 et une stabilisation du CKI p27Kip1 (Chassot et al., 2008). De plus, nos résultats récents montrent que la présence de sérum entre le point R et la mitose est requise pour initier la réplication de l'ADN au cycle suivant. Les travaux futurs devraient élucider comment différentes voies de signalisation, via la voie cycline D-pRb, affectent divers composants de l'appareil de réplication de l'ADN pour inhiber la progression du cycle de façon réversible ou irréversible
Cancer is a multi-step process resulting from abrogation of several barriers to uncontrolled proliferation. They include inhibitory pathways with appropriate checkpoints that lead to reversible (quiescence) or irreversible (senescence, apoptosis) block of cell proliferation. We are especially interested in pathways orchestrating cell cycle exit that operate in the G2 phase. The first objective of this thesis was to decipher mechanisms that prevent mitosis in response to DNA damage. We found that Cdk inhibitor p21Waf1 plays a crucial role in blocking mitotic onset in normal cells; acting in tandem with checkpoint kinase Chk1, p21 inactivates mitotic Cdks and inhibits pRb phosphorylation, thereby irreversibly blocking mitotic entry. In contrast, in p53-proficient transformed cells, the induction of p21 in G2 is impaired, most likely because of deficient ATM activation. While, in some cases, Chk1 hyper-activation prevents mitosis, the absence of p21 compromises the senescence program from G2. Finally, we showed that Chk2 is dispensable for G2 arrest in both non-transformed and transformed cells (Lossaint et al., submitted). Our second objective was to elucidate the pathways that induce quiescence (G0). This reversible cell cycle exit occurs in G1, requires pRb family members and p27Kip1-dependent Cdk inactivation. Based on observations obtained in our team and the data in the literature, we hypothesized that reversible cell cycle exit program might be launched before mitosis. By using an in vitro wounding model, we showed that confluence-driven quiescence is preceded by pre-mitotic CDK inhibition by p27, cyclin D1 downregulation and reduced pre-mitotic pRb phosphorylation (Chassot et al., 2008). Moreover, our results obtained in synchronized fibroblasts that were serum-starved after release from G1/S block suggest that cyclin D1 might stimulate proliferation by keeping pocket proteins phosphorylated during G2/M progression (Lossaint et al., in preparation)

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Khemaissa, Sonia. "Mécanismes d'interaction membranaire et de pénétration cellulaire de peptides vecteurs". Electronic Thesis or Diss., Sorbonne université, 2023. https://accesdistant.sorbonne-universite.fr/login?url=https://theses-intra.sorbonne-universite.fr/2023SORUS659.pdf.

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Abstract (sommario):

Les CPP (Cell Penetrating Peptides) sont des peptides ayant des capacités de pénétration et de transport dans les cellules. Il s’agit de peptides constitués de moins de 30 acides aminés possédant généralement un caractère cationique en raison de la forte occurrence de résidus basiques et parfois amphipathique. Toutefois, cette internalisation s'effectue de manière non sélective quelle que soit la lignée cellulaire. On distingue deux grands mécanismes pour l’entrée des CPP dans les cellules : l’endocytose et la translocation. L’endocytose fait appel à la machinerie cellulaire tandis que la translocation implique une perturbation transitoire de la bicouche lipidique. Quelle que soit la voie d’entrée empruntée, le processus d'internalisation requiert toujours comme première étape une interaction avec des partenaires membranaires à la surface des cellules, à savoir des lipides et des glycosaminoglycanes (GAG). Cependant, le mécanisme d’internalisation des CPP fait l’objet de nombreux débats au sein de la communauté scientifique. L’objectif de ce travail de thèse a été de conférer des clés permettant de mieux appréhender le mécanisme d’internalisation. Il s’est agi dans un premier temps d’étudier l’implication des GAG dans le mécanisme d’internalisation. Pour étudier ce point, des peptides chimères constitués d’une séquence de reconnaissance d’un type de GAG et d’une séquence CPP ont été conçus. La quantification de l’internalisation a été réalisée dans différentes lignées cellulaires dont la composition en GAG ainsi que leur proportion à la surface varient très fortement. La contribution du Trp dans les interactions des CPP a également été étudiée. Pour étudier ce point, les trois résidus Trp de la séquence RW9 (RRWWRRWRR-NH2) ont été substitués par d’autres acides aminés ou par des analogues de Trp aux propriétés physico-chimiques variées. Enfin, le dernier axe de cette thèse s’est attaché au développement d’une nouvelle technique de quantification de l’internalisation des CPP localisés dans le cytosol à température physiologique, basée sur la complémentation de protéines luminescentes
CPPs (Cell Penetrating Peptides) are peptides with cell penetration and transport faculties. These peptides, containing less than 30 amino acids, are generally cationic due to the high occurrence of basic residues and sometimes amphipatic. However, this internalization is non-selective, whatever the cell line. There are two main mechanisms for CPPs uptake: endocytosis and translocation. Endocytosis relies on cellular machinery, while translocation involves transient disruption of the lipid bilayer. Whatever the route of entry, the first step in the internalization process is always an interaction with membrane partners on the cell surface, namely lipids and glycosaminoglycans (GAGs). However, the mechanism of CPP internalization is the subject of much debate in the scientific community. The aim of this thesis was to provide keys for a better understanding of the internalization mechanism. The first step was to study the involvement of GAGs in the internalization mechanism. To investigate this point, chimeric peptides containing a GAG recognition sequence and a CPP sequence were designed. Quantification of internalization was carried out in different cell lines with variations in GAG composition and proportion. The contribution of Trp to CPP interactions was also investigated. To do so, the three Trp residues in the RW9 sequence (RRWWRRWRR-NH2) were substituted by other amino acids or by Trp analogues with different physico-chemical properties. Finally, the last part of this thesis focused on the development of new techniques for cytosolic CPPs quantification at physiological temperature, based on the complementation of luminescent proteins

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Dos, Santos Ferreira Jorge. "Identification des mécanismes en boucle fermée dans le comportement cellulaire". Compiègne, 2008. http://www.theses.fr/2008COMP1734.

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Abstract (sommario):

Ce travail est concentré sur le développement et l'application de techniques pour l'analyse de réseaux biochimiques. L'objectif est d'utiliser les modifications globales observées dans les systèmes vivants pour comprendre les interactions existantes au niveau des points clés de ces voies métaboliques. Nous avons travaillé sur la détermination des interactions essentielles dans le processus d'autorégulation qui décrit le cycle cellulaire d'œufs de grenouille. Les résultats nous ont permis de faire une évaluation des effets possibles de chaque protéine sur la stabilité du réseau biochimique en question. La méthodologie a été appliquée aussi pour l'analyse dynamique d'un modèle de l'activité électrique de cellules utérines. Nous présentons aussi un modèle développé pour un système enzymatique de diffusion-réaction dont l'objectif est d'analyser le comportement dynamique de trois espèces chimiques différentes, ses propriétés cinétiques enzymatiques et l'existence de comportements sophistiqués résultants de l'activité catalytique induite par l'immobilisation d'une enzyme dans une membrane artificielle. Le modèle est extrapolé à un système distribué afin d'analyser son comportement spatio-temporel. Les résultats nous permettent d'évaluer le profil de concentration de chaque espèce en fonction de l'espace et du temps simultanément, ce qui n'est pas directement observable par les biochimistes. Nous concluons avec une étude d'un modèle développé pour le métabolisme des hexoses-phosphate de la bactérie Sinorhizobium meliloti. Un algorithme a été proposé pour l'estimation des flux intracellulaires
The aim of this work is to try to use observed global changes to understand interactions between individual nodes inside biochemical networks. We have worked on the determination of the essential interactions in the auto regulatory process that describes the cell cycle of Xenopus frog eggs. The results make possible an assessment of the effect of each protein on the biochemical network stability. The technique was applied also to a dynamical analysis of a uterine cell electrical activity model with view to study the impact of physiological parameters on the response of the model and identify the main subsystems generating the electrical activity. We also present a model developed for understanding an enzymatic diffusion-reaction system. The objective is to analyze the dynamic behavior of three different chemical species, the modification of enzymatic kinetic properties and the existence of sophisticated behaviors resulting of the catalytic activity induced by immobilization of Acetylcholinesterase enzyme into an artificial membrane enzymatically inactive. The results make possible the characterization and prediction of system behavior as well as a qualitative analysis of the system stability via bifurcation diagrams. The model is then extrapolated to a distributed system in order to analyze its spatio-temporal behavior. Numerical results make possible the assessment of the concentration profile of the chemical species on space and time, what is not directly observable by biochemists. Finally, we study a model developed for a network of Sinorhizobium meliloti bacterium and propose an algorithm for intracellular fluxes estimation

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Walid, Medhioub. "Étude des mécanismes de contamination des mollusques bivalves par des neurotoxines à action rapide (FAT) & développement de procédés de détoxification". Phd thesis, Université de Bretagne occidentale - Brest, 2011. http://tel.archives-ouvertes.fr/tel-00598247.

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Abstract (sommario):

Cette étude à pour objectif de maîtriser les conditions de culture et de production toxinique chez Karenia selliformis et Alexandrium ostenfeldii dans le but de réaliser des contaminations expérimentales indépendamment du caractère aléatoire des proliférations toxiques en zones côtières. Ce travail vise également à étudier l'impact de l'alimentation sur la détoxification artificielle de la palourde Ruditapes decussatus contaminée par des gymnodimines et de l'huître Crassostrea gigas contaminées par des spirolides et enfin d'étudier l'impact physiologique de ces micro-algues toxiques au niveau des organes accumulateurs des coquillages. Dans un premier temps, il a été mis en évidence que les performances de croissance de K. selliformis (taux de croissance et concentration maximale) sont obtenues à une température de 22°C pour une salinité de 36 psu en utilisant le milieu f/2 alors que celles d'A. ostenfeldii sont obtenues à une température de 16°C pour une salinité de 35 psu en utilisant le milieu L1. Le contenu en gymnodimine dans les cellules de K. selliformis augmente en fonction de l'âge de la culture alors que le contenu en spirolide diminue au cours de la croissance cellulaire d'A. ostenfeldii plus particulièrement lors de la culture en photobioréacteur de 100 l. Dans un deuxième temps, des études expérimentales portant sur l'interaction des micro-algues toxiques avec les mollusques ont permis d'apporter des connaissances nouvelles sur le devenir des imines cycliques après contamination et lors de la détoxification. Il a ainsi été mis en évidence i) une accumulation majoritaire des GYMs et des SPXs au niveau des glandes digestives des palourdes et des huîtres ii) une accélération des cinétiques de détoxification lors de l'ajout de l'alimentation. Dans un troisième temps, les essais portant sur la contamination de C. gigas par A. ostenfeldii ont permis de déterminer i) une altération des diverticules digestifs consistant en une réduction de l'épaisseur de la paroi épithéliale et en une augmentation de la surface de la lumière des diverticules digestifs ii) une réaction inflammatoire dans la glande digestive de certains individus contaminés se caractérisant par une agglutination massive d'hémocytes autour de différents organes de la glande digestive: l'estomac, l'intestin ainsi que les conduits et tubules digestifs. Dans le cas des contaminations naturelles et expérimentales des palourdes les analyses histologiques réalisées n'ont pas permis de mettre en évidence des signes d'altération de la glande digestive comme dans le cas des les huîtres contaminées par A. ostenfeldii.

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Medhioub, Walid. "Étude des mécanismes de contamination des mollusques bivalves par des neurotoxines à action rapide (FAT) & développement des procédés de détoxification". Brest, 2011. http://www.theses.fr/2011BRES2008.

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Abstract (sommario):

Cette étude à pour objectif de maîtriser les conditions de culture et de production toxinique chez Karenia selliformis et Alexandrium ostenfeldii dans le but de réaliser des contaminations expérimentales indépendamment du caractère aléatoire des proliférations toxiques en zones côtières, Ce travail vise également à étudier l’impact de l’alimentation sur la détoxification artificielle de la palourde Ruditapes decussatus contaminée par des gymnodimines et de l’huître Crassostrea gigas contaminées par des spirolides et enfin d’étudier l’impact physiologique de ces micro-algues toxiques au niveau des organes accumulateurs des coquillages. Dans un premier temps, il a été mis en évidence que les performances de croissance de K. Selliformis (taux de croissance et concentration maximale) sont obtenues à une température de 22C pour une salinité de 36 psu en utilisant le milieu f/2 alors que celles d’A. Ostenfeldii sont obtenues à une température de 16°C pour une salinité de 35 psu en utilisant le milieu L1. Le contenu en gymnodimine dans les cellules de K. Selliformis augmente en fonction de ‘âge de la culture alors que le contenu en spirolide diminue au cours de la croissance cellulaire d’A. Ostenfeldii plus particulièrement lors de la culture en photobioréacteur de 100l. Dans un deuxième temps, des études expérimentales partant sur l’interaction des micro-algues toxiques avec les mollusques ont permis d’apporter des connaissances nouvelles sur le devenir des mines cycliques après contamination et lors de la détoxification. Il a ainsi été mis en évidence i) une accumulation majoritaire des GYMs et des SPXs au niveau des glandes digestives des palourdes et des huîtres ii) une accélération des cinétiques de détoxification lors de l’ajout de l’alimentation. Dans un troisième temps, les essais portant sur la contamination de £ gigas par A. Ostenfeldii ont permis de déterminer j) une altération des diverticules digestifs consistant en une réduction de l’épaisseur de la paroi épithéliale et en une augmentation de la surface de la lumière des diverticules digestifs il) une réaction Inflammatoire dans la glande digestive de certains individus contaminés se caractérisant par une agglutination massive d’hémocytes autour de différents organes de la glande digestive: l’estomac, l’intestin ainsi que les conduits et tubules digestifs. Dans le cas des contaminations naturelles et expérimentales des palourdes les analyses histologiques réalisées n’ont pas permis de mettre en évidence des signes d’altération de la glande digestive comme dans le cas des les huîtres contaminées par A. Ostenfeldii
This study aimed to determine the optimal conditions of growth and toxin production in Karenia selliformis and Alexandrium ostenfeldii in order to produce cells at a high concentration with known toxicity to perform further contamination and detoxification trial on edible shellfish, Moreover, this work aims to study the impact of non-toxic microalga on the detoxification kinetics of clam Ruditapes decussatus contaminated by gymnodimines anti oyster Crassostrea gigas contaminated by spirolides. The final goal of this study is to determine the physiological impact of toxic microalgae in the shellfish tissues. Initially, results revealed that the growth performance of K. Selliformis (growth rate and maximum concentration) is obtained at a temperature of 22°C and at a salinity of 36 psu when using the f/2 medium, while those of A. Ostenfeldii are obtained at a temperature of 16°C and at a salinity of 35 psu using the L1 medium. Gymnodimine concentration increases with the age of the culture of K. Selliformis while spirolide concentration decreases during cell growth of A. Ostenfeldii especially during the culture in a photobioreactor of 100l. Secondly, the experimental studies focused on the interaction between toxic micro-algae with molluscs bivalves. The results revealed i) a major accumulation of GYMs and SPXs in digestive gland of clams and oysters ii) a rapid detoxification of contaminated shellfish when adding food. Finally, this study addressed an important issue on the impact of toxic algae on shellfish. The exposure to A. Ostenfeldii showed i) a decrease in the digestive gland tubule thickness and the percentage of active digestive tubules ii) an inflammatory response consisting of hemocyte infiltration and diapedesis into the intestinal tract of the oysters. Concerning the natural and experimental clams, histological analysis did net reveal any alteration of the digestive gland as demonstrated in oysters contained by A. Ostenfeldii

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Dransart, Estelle. "Mécanismes moléculaires des rhoGDIs : le système rhoGDI3/RhoG/TrioGEF comme modèle d'nvestigation". Paris 11, 2005. http://www.theses.fr/2005PA112108.

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Zeltz, Cédric. "Analyse des mécanismes d'interaction du lumicanne avec les cellules". Reims, 2009. http://www.theses.fr/2009REIMM205.

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Le @lumicanne est une protéine riche en leucine de la matrice extracellulaire du derme. Nous avons précédemment montré que le lumicanne inhibait la progression du mélanome in vivo (Vuillermoz et al. 2004). Dans l’étude que nous présentons, nous avons caractérisé les mécanismes impliqués dans l’inhibition de la migration cellulaire par le lumicanne. Nous avons identifié le médiateur du lumicanne dans cet effet inhibiteur. Nous avons montré que l’intégrine alpha2beta1 est essentielle pour médier l’inhibition de la migration par le lumicanne. De plus, le lumicanne est capable de se fixer sur un site de l’intégrine alpha2beta1 de manière indépendante des cations divalents et d’interagir avec le domaine alpha2I (Kd=300 nm). Nous avons également localisé la séquence du lumicanne responsable de l’inhibition de la migration. La séquence est située au sein de la répétition riche en leucine 9. Nous avons proposé le nom de lumcorine (lumicanne core protéine) pour le peptide dérivé de cette séquence. Lumcorine inhibe la migration des cellules de mélanome et inhibe la phosphorylation de la tyrosine 397 de la protéine FAK, ce qui est en accord avec les résultats obtenus avec le lumicanne (Brézillon et coll. 2009). Par ailleurs, les lysines présentes dans lumcorine et correspondantes au lysine 265 et 267 du lumicanne semblent être nécessaires pour induire l’inhibition de la migration. Le lumicanne et lumcorine sont capable d’inhiber la migration de cellules non transformées comme les fibroblastes dermiques, suggérant un rôle régulateur du lumicanne dans la migration cellulaire impliquée dans des processus physiologique autre que le cancer
@Lumican is an extracellular matrix leucine-rich protein. We previously showed that lumican inhibited melanoma progression in vivo (Vuillermoz et al. 2004). In the present study, we have characterized the mechanisms involved in the anti-migratory effect of lumican. We identified the alpha2beta1 integrin as a lumican receptor to mediate the inhibitory effect of lumican on cell migration. Moreover, we provide evidence of a direct binding of lumican to the alpha2beta1 integrin and the I domain of the alpha2 integrin subunit (Kd=300 nm). In a second time, we localized the active sequence responsible of migration inhibition in the leucine-rich repeat 9 of lumican. We proposed the name lumcorin (fragment of lumican core protein) for the peptide derived from this site. Lumcorin inhibited melanoma cell migration and FAK phosphorylation, as previously observed for lumican (Brézillon et al. 2009). Furthermore, the lysine located in lumcorin and corresponding to the lysine 265 and 267 of lumican, seemed to be necessary to induce the migration inhibition. Lumican and lumcorin inhibited the migration of nontransformed cells such as dermal fibroblast, suggesting a regulator role of these molecules in cell migration involved in physiological processes different to cancer

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Dessauge, Frédéric. "Etude des mécanismes de mort cellulaire programmée dans les cellules transformées". Paris 7, 2004. http://www.theses.fr/2004PA077052.

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Jourdan, Eric. "Mécanismes de protection cellulaire endogène et exogène suite à l'irradiation ultraviolette". Université Joseph Fourier (Grenoble), 2002. http://www.theses.fr/2002GRE18005.

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Abstract (sommario):

Nous avons étudié deux grands mécanismes de photoprotection, la photoprotection endogène zinc dépendante et la photoprotection exogène apportée par les photoprotecteurs externes. Dans un premier temps nos travaux ont mis en évidence l'effet protecteur du zinc face au stress oxydant dans les cellules HeLa et montré que lorsque les cellules expriment fortement les métallothionéines dans des conditions où le zinc est non saturant, une excellente protection est observée contre les dommages oxydatifs de l'ADN et la mort cellulaire. L'induction de l'expression des métallothionéines, petites protéines riches en thiols serait donc le mécanisme principal conférant au zinc son effet protecteur vis-à-vis du stress oxydant. Par la suite nous avons pu démontrer le rôle protecteur du zinc sur des kératinocytes humains irradiés en spectre solaire total. L'effet génoprotecteur du zinc est inductible et fonction de la durée de prétraitement des cellules. L'induction des MT par le zinc et leur redistribution nucléaire fait de ces protéines un acteur prépondérant dans la protection du génome suite à l'irradiation. Notre étude montre que le couple zinc/MT serait le seul à posséder cette capacité de protection de l'ADN. La disparition progressive des MTs post-irradiation, permet de penser que suite à ce stress, les ERO générées, oxydent la protéine, qui libère alors les atomes de zinc qu'elle contient (. . . ) De plus la dégradation des MTs permet de moduler le potentiel redox nucléaire, pouvant alors moduler l'activité de la protéine Ref-1. Nos premiers résultats concernant XPA et Ref-1 montrent que, lors d'un traitement par le zinc, l'expression de ces deux protéines de réparation de l'ADN, est modifiée. Ces résultats soulignent les liens étroits entre le zinc, les MTs et le processus de réparation de l'ADN, indispensable au maintien de l'intégrité du génome. Notre étude portant sur la photoprotection exogène, apportée par les PE, nous a permis de montrer l'importance de utilisation de nouveaux biomarqueurs pour obtenir, en plus du SPF, des données indispensables quant au réel profil protecteur d'un PE. De plus ces biomarqueurs (CPF, GPF, APF, EPF), dont la détermination est réalisée in vitro, peuvent être considérés comme reflétant les capacités de protection d'un PE à long terme. Ces nouveaux biomarqueurs prennent en compte les effets délétères des UVB mais aussi des UVA
We studied two important photoprotection mechanisms, endogenous zinc dependant photoprotection and exogenous photoprotection ensured by sunscreens. Firstly our work demonstrates the protective role of zinc treatment against oxidative stress in HeLa cells. We showed that metallothioneins were strongly expressed in zinc treated cells. Then a great protection against DNA oxidative damages and cell death was observed. The induction of metallothioneins, i. E. Small cystein rich proteins, seems to represent the main way for zinc to afford protection against oxidative cellular damages. Secondly we demonstrated the protective role of zinc on keratinocytes exposed to solar light. The genoprotection afforded by zinc treatment was inductible and correlated to the time of zinc treatment. The nuclear redistribution of MTs indicates the important role of these proteins in the protection of the genome after a solar irradiation. We showed that only Zn-metallothioneins could afford genoprotection. After irradiation, the intracellular amount of MTs decreased, probably due to the protein oxidation by irradiation induced ROS. As a consequence MTs released zinc atoms which could stimulate the activity of nuclear zinc proteins such as XPA. Moreover the intracellular MTs degradation could modulate the nuclear redox potential and consequently the Ref-1 protein activity. Our results on XPA and Ref-1 show that zinc treatment modulates the expression of these two DNA repair enzymes. These results underline the interrelation between zinc, MTs, and DNA repair systems in maintaining genomic integrity. Our study concerning exogenous photoprotection induced by sunscreens demonstrates the importance of new biomarkers to assess the real photoprotective profile of a sunscreen in addition to SPF determination. These important biomarkers (CPF, GPF, APF, EPF), evaluated in vitro, could be considered as important parameters to evaluate the long term photoprotective capacity of sunscreens as they take in account both UVB and UVA deleterious effects

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Mokas, Sophie. "Mécanismes d'assemblage des granules de stress". Thesis, Université Laval, 2012. http://www.theses.ulaval.ca/2012/28583/28583.pdf.

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Abstract (sommario):

Les granules de stress (GS) sont des sites de régulation de la traduction qui permettent aux cellules cancéreuses de survivre au stress. Elles apparaissent sous différentes conditions de stress et disparaissent une fois remises de celles-ci. Elles se forment selon deux voies, l’une dépendante de la phosphorylation du facteur eIF2α et l’autre indépendante. Les mécanismes d’assemblage des GS par cette dernière voie restent méconnus. Afin de définir ces mécanismes, l’objectif principal de ma maîtrise était de caractériser les étapes critiques de la formation de GS. En utilisant des approches pharmacologiques et d’interférence à l’ARN, nous démontrons que l’inactivation de plusieurs facteurs d’initiation de la traduction provoque la formation de GS indépendamment de la phosphorylation d’eIF2α. Par contre, l’inactivation du facteur eIF4E, ainsi que ceux permettant l’association du 60S à l’ARNm, n’induit pas de GS. De nouvelles stratégies anti-cancer inhibant la traduction et bloquant la formation de GS serait alors possible.

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Rouas, Caroline. "Etude des mécanismes mis en jeu lors d'une exposition à l'uranium appauvri sur le système de détoxification in vivo et in vitro". Paris 11, 2010. http://www.theses.fr/2010PA114835.

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Abstract (sommario):

Le but de cette thèse est d'explorer, in vivo et in vitro, l'action de l'uranium (U) sur les protagonistes du système de détoxification de l'organisme, le rein et le foie. Pour mimer une contamination chronique à une dose environnementale, le modèle in vivo est basé sur une exposition de 9 mois de rats à l'U. In vivo, nos résultats montrent que la contamination à l'U n'induit ni une néphrotoxicité ni une sensibilité du rein à exacerber une néphrotoxicité due à la gentamicine. Concernant le foie, l'U induit des modifications de l'expression d’enzymes du métabolisme des xénobiotiques (EMXs). Ces modifications ne sont responsables de perturbations du métabolisme du paracétamol que lorsqu’il est administré à une dose hépatotoxique. Les résultats in vitro (1)suggèrent que les modifications des EMXs proviennent d'un effet indirect de l'U et (2)souligne le potentiel cytotoxique de l'U ainsi que sa présence dans les cellules (cytoplasme et noyau) sous forme soluble et/ou précipitée
The aim of this work is to study the effects of a uranium (U) exposure on organs involved in the detoxification: the kidney and the liver (and notably the xenobiotics metabolizing enzymes (XME)). In order to mimic population chronic exposure, rats were contaminated during 9 months through drinking water (40 mg/L). In vivo results show that U exposure does not induce neither nephrotoxicity nor sensitivity to increase a renal toxicity induced by gentamicin. In the liver, U provokes impairments on the XME gene expression. Nevertheless, paracetamol metabolism is modified only if it is administrated at a hepatotoxic dose. The in vitro results suggest an indirect effect of uranium on the XME, probably dependant of body adaptation mechanisms. Besides, in vitro studies underlined cytotoxic properties of U as well as the localisation of its soluble and/or precipited forms in cytoplasmic and nuclear compartments

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Igel, Angélique. "Mécanismes d'inactivation des protéines amyloïdes". Paris 7, 2013. http://www.theses.fr/2013PA077101.

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Abstract (sommario):

Les fibres amyloïdes correspondent à des assemblages protéiques insolubles associés aux maladies neurodégénératives. En tenant compte des propriétés biophysiques de ces fibres qui leur confèrent une très grande résistance, et du spectre de leur transmissibilité, tout laisse suggérer que des actes médico-chirurgicaux pourraient potentiellement induire ou transmettre des amyloïdoses par l'inoculation de noyaux de nucléation. L'objectif de ce travail est d'évaluer les mécanismes d'inactivation des assemblages d'Ap et de prion, afin de comprendre les mécanismes d'inactivation des protéines amyloïdes. Dans un premier temps, nous avons évalué l'évolution de la structure quaternaire des assemblages de prion issus de 3 souches (263K, vCJD et 139A) après des traitements de décontamination. L'ensemble des résultats obtenus montrent que l'inactivation du prion sont souche-dépendants. Cette propriété intrinsèque des souches serait due à une structuration différente des protomères de PrP au sein des assemblages. Enfin, des approches similaires à celles employées dans le champ des prions ont été utilisées afin d'évaluer la résistance des assemblages amyloïdes issus de la maladie d'Alzheimer (peptide Aß). Nos résultats préliminaires d'inactivation du peptide synthétique Ap, montrent que ce peptide, dans son état fïbrillaire, possède des propriétés lui conférant une haute résistance. Afin d'approfondir nos résultats dans un modèle de peptide ayant subit une maturation de repliement in-vivo, nous avons mis au point un nouveau modèle cellulaire exprimant le peptide Aß40. Ce nouvel outil d'étude est opérationnel depuis peu et semble prometteur pour l'étude des propriétés du peptide Aß
Amyloides fibers correspond to insoluble protein assemblies associated to the neurodegenerative diseases. By taking into account properties biophysics of these fibers which confer them a very high resistance, and the spectre of their transmissibility, everything lets suggest that medical surgical acts could potentially lead or transmit amyloidoses by the inoculation of nucleation seed. The objective of this work is to estimate mechanisms of inactivation of A ß and prion assemblies, to understand the mechanisms of inactivation of amyloides proteins. At first, we estimated the evolution of the quaternary structure of the assemblies of prion stemming from 3 strains (263K, vCJD and 139A) after decontamination treatments. Ail results demonstrate that the inactivation of prion are strain dependent. This intrinsic property of strain would be due to different structuring of PrP protomers within the assemblies. Finally, similar approaches to those used on the field of prions were used to estimate the résistance of amyloide assemblies stemming from the Alzheimer's disease (peptide A ß). Our preliminary results of synthetic peptide A ß inactivation, show that this peptide, in its fibrillar state, possesses properties conferring it a high strength. To deepenour results in a model of peptide having sudden a maturation of in-vivo withdrawal, we have designed a new cellular model expressing the peptide A640. This new tool is operational recently and seems promising for the study of the properties of the peptide Aß

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Alegot, Hervé. "Etude des mécanismes d'élongation du follicule ovarien de Drosophila melanogaster". Thesis, Clermont-Ferrand 1, 2016. http://www.theses.fr/2016CLF1MM06/document.

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Abstract (sommario):

L’élongation épithéliale joue un rôle prépondérant au cours du développement. Ce processus morphogénétique peut être décrit schématiquement par trois paramètres : le signal permettant d’orienter l’élongation, la force capable de générer le mouvement et le comportement cellulaire associé. Le follicule ovarien de drosophile, initialement rond s’allonge au cours de son développement résultant en un œuf 2.5 fois plus long que large. J’ai mis en évidence que les follicules traversent au moins trois phases d’élongation successives et je me suis focalisé sur la phase précoce dont les paramètres étaient inconnus. J’ai déterminé que le signal venait d’un groupe de cellules situées aux pôles par la sécrétion du ligand de la voie Jak-Stat puis de l’activation consécutive de cette voie selon un gradient depuis les pôles. La force est apportée par un gradient de pulsations apicales des cellules dépendantes de la voie Jak-Stat générant des forces de traction aux extrémités des follicules. L’élongation est stabilisée par des intercalations cellulaires orientées selon l’axe d’élongation et par un gradient de constriction apicale des cellules. Ces données permettent de proposer un mécanisme où un gradient d’activité d’un facteur de transcription induit une élongation épithéliale indépendamment d’une polarité planaire
Tissue elongation plays a key role during development. Schematically, this morphogenetic process can be described by three main parameters: the cue orienting the elongation, the movement generating force and the associated cellular behavior. The Drosophila ovarian follicle, initially spherical, elongates as it develops, ending as a 2.5 time longer than wide mature egg. I found that follicles elongate through at least three consecutive phases and I aimed to determine the parameters of the early phase. The signal comes from a cluster of cells located at each pole of the follicle secreting the Jak-Stat pathway ligand and the subsequent activation of the pathway as a gradient from the poles. A pulling force is generated by the Jak-Stat dependent apical pulsations of the cells following the same gradient. The elongation is stabilized by oriented cell intercalations along the elongation axis and a gradient of apical constriction. Our data allow proposing a mechanism where a gradient of transcription factor activity can lead to epithelial elongation without any planar polarity requirement

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Schlemmer, Frédéric. "Mécanismes de la chimiothérapie immunogène". Thesis, Paris 11, 2013. http://www.theses.fr/2013PA11T075.

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Abstract (sommario):

L’amélioration constante du pronostic des pathologies cancéreuses est le fruit des progrès réalisés dans leur prévention, leur dépistage, leur diagnostic et leur traitement. Malgré l’avènement récent des thérapies ciblées, la chimiothérapie conventionnelle reste souvent le seul recours pour des patients atteints de cancer non opérable ou non éligibles pour ces thérapeutiques novatrices. Certaines chimiothérapies conventionnelles (anthracyclines et oxaliplatine notamment) ont la capacité d’entrainer une mort des cellules tumorales dont les caractéristiques permettent d’induire une réponse immunitaire antitumorale efficace. Cette réponse immunitaire antitumorale spécifique agirait en synergie avec l’effet cytotoxique direct de ces drogues, participant ainsi à leur efficacité. La réponse immunitaire antitumorale induite par la chimiothérapie dépend de plusieurs mécanismes moléculaires et cellulaires clefs identifiés récemment. L’induction d’un stress du réticulum endoplasmique (RE) est à l’origine de l’exposition d’une protéine chaperonne résidente du RE, la calréticuline (CRT), à la surface des cellules mourantes, servant alors de signal de phagocytose pour les cellules dendritiques. La libération dans le milieu extracellulaire de signaux de danger est également essentielle : la protéine nucléaire High Mobility Group Box 1 (HMGB1) sert ainsi de ligand pour le Toll-like récepteur 4 (TLR4), présent à la surface des cellules dendritiques et son activation favorise l’apprêtement et la présentation des antigènes tumoraux aux lymphocytes T cytotoxiques. L’adénosine-5'-triphosphate (ATP) est également libéré par les cellules tumorales, entrainant l’activation des récepteurs purinergiques P2RX7 présents à la surface des cellules dendritiques, activant l’inflammasome NLRP3 et entrainant la libération d’IL-1 par les cellules dendritiques, favorisant alors l’orientation de la réponse immunitaire vers une réponse de type TH1 et la production d’interféron  par les lymphocytes T cytotoxiques. Dans ce travail, nous avons cherché à comparer la capacité de deux drogues issues d’une même classe de chimiothérapie, les sels de platine, à induire une mort cellulaire immunogène des cellules tumorales. Grace à des expériences in vitro et in vivo (modèles murins de vaccination antitumorale et de chimiothérapie sur tumeurs établies), nous avons pu montrer que l’oxaliplatine (OXP), contrairement au cisplatine (CDDP), avait la capacité d’induire une mort immunogène des cellules de cancer colique et que cette différence intra-classe dépendait de la capacité respective de ces deux drogues à entrainer un des phénomènes clés de l’induction d’une mort cellulaire immunogène, l’exposition de la CRT à la surface des cellules tumorales mourantes. Nous avons également pu montrer que l’induction d’une mort cellulaire immunogène des cellules de cancer colique par l’oxaliplatine avait une relevance clinique chez l’homme, l’existence d’un polymorphisme perte-de-fonction du gène tlr4 affectant le pronostic (survie sans progression) de patients traités par chimiothérapie pour un cancer colique métastatique. Par la suite, nous avons mis au point des biosondes permettant d’étudier à grande échelle, à l’aide d’une plateforme de vidéo-microscopie automatisée, la capacité de différentes drogues à induire les différents phénomènes clefs de la mort cellulaire immunogène des cellules tumorales (exposition de la CRT, libération d’HMGB1 et d’ATP). Nous avons ainsi pu montrer que la correction pharmaceutique du défaut d’activation d’un stress du réticulum endoplasmique par le cisplatine permettait de restaurer l’immunogénicité de la mort cellulaire induite par cette chimiothérapie. Ces résultats ouvrent la voie à la découverte de nouvelles molécules susceptibles, à elles seules ou en association à d’autres thérapies connues, d’améliorer le pronostic des néoplasies
The steady improvement of cancer prognosis is the result of progress in cancer prevention, screening, diagnosis and treatment. Despite the recent advent of targeted therapies, conventional chemotherapy often remains the only solution for patients with non-operable cancer or not eligible for these novel therapies.Some conventional chemotherapy (including anthracyclines and oxaliplatin) has the ability to cause tumor cells death with characteristics able to induce an effective antitumor immune response. This specific antitumor immune response would be synergistic with the direct cytotoxic effect of these drugs and contribute to their efficacy. The antitumor immune response induced by chemotherapy depends on several key cellular and molecular mechanisms recently identified. The induction of an endoplasmic reticulum (ER) stress is necessary for the exposure of calreticulin (CRT), an ER-resident chaperone protein, on the surface of dying cells, then acting as a phagocytosis signal for dendritic cells. Release of danger signals into the extracellular medium is also essential. The nuclear protein High Mobility Group Box 1 (HMGB1) is a ligand of the Toll-like receptor 4 (TLR4) on the surface of dendritic cells. TLR4 activation promotes the processing of tumor antigens and their presentation to cytotoxic T lymphocytes. Adenosine-5'-triphosphate (ATP) is also released by tumor cells, leading to the activation of the purinergic receptors P2RX7 expressed on the surface of dendritic cells, activating the NLRP3 inflammasome and causing the release of IL-1β by dendritic cells, while promoting the orientation of the immune response towards a TH1 response and the production of γ-interferon by cytotoxic T lymphocytes.In this work, we aimed to compare the ability of two drugs of a same class of chemotherapy, the platinum derivates oxaliplatin (OXP) and cisplatin (CDDP), to induce immunogenic death of tumor cells. Thanks to in vitro and in vivo experiments (models of tumor vaccination and chemotherapy on established tumors in mice), we showed that OXP, in contrast to CDDP, has the ability to induce immunogenic death of colon cancer cells. This intra-class difference depends on the ability of each drug to cause one of the key phenomena of immunogenic cell death: the induction of the exposure of the CRT to the surface of dying tumor cells. We could also show that the induction of immunogenic death of colon cancer cells by OXP had clinical relevance in humans. Indeed, the existence of a loss-of-function polymorphism of tlr4 affects the prognosis (PFS) of patients treated with OXP-based chemotherapy regimen for a metastatic colorectal cancer. Subsequently, we developed biosensors to study the ability of different drugs to induce key phenomena of cell death immunogen tumor cells (CRT exposure, HMGB1 and ATP release) using high-content screening by an automated video-microscopy platform. We showed that a pharmaceutical correction of the inability of cisplatin to induce an endoplasmic reticulum stress could restore the immunogenicity of cisplatin-induced tumor cell death. These results open the way to the discovery of new molecules that, alone or in combination with other known therapies, could improve the prognosis of cancer

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Cueille, Nathalie. "Etude des mécanismes de contrôle de la réplication des papillomavirus". Montpellier 1, 1999. http://www.theses.fr/1999MON1T016.

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El, hallani Soufiane. "Nouveaux mécanismes alternatifs de la vascularisation tumorale dans les glioblastomes". Paris 11, 2009. http://www.theses.fr/2009PA11T063.

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Tardy, Magalie. "Étude des mécanismes de régulation des canaux potassiques à deux domaines P". Nice, 2010. http://www.theses.fr/2010NICE4020.

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Abstract (sommario):

Les canaux potassiques forment la classe de canaux ioniques dont la diversité structurale et fonctionnelle est la plus grande. Trois grandes familles de canaux potassiques ont été identifiées, dont celle des canaux potassiques à deux domaines P, qui compte 15 membres. Ces canaux génèrent des courants « de fond », qui sont impliqués dans la régulation de l’excitabilité cellulaire et en particulier les épilepsies, l’anesthésie, la neuroprotection ou encore la dépression. Une étude approfondie des mécanismes régulant leur activité est nécessaire pour comprendre leurs rôles. Nous avons étudié l’environnement protéique du canal TREK1 et nous avons montré l’existence d’une interaction entre le canal et une protéine cytosolique associée aux microtubules Mtap2. Cette association augmente l’expression du canal à la membrane plasmique sans en modifier les paramètres biophysiques. Cette protéine est la seconde protéine associée à TREK1 décrite. Toutes deux sont capables de se fixer simultanément sur le canal et d’additionner leurs effets plaçant ainsi le canal au cœur d’un complexe multiprotéique. Ces résultats montrent combien l’environnement protéique des canaux est important pour leur activité. Nous avons aussi montré que le canal TWIK1 est localisé dans un compartiment subapical proche de la membrane plasmique. Il est en fait inséré dans la membrane puis très vite internalisé et envoyé dans les endosomes de recyclage. La sortie de ce compartiment et l’insertion à la membrane plasmique est déclenchée par l’activation de récepteurs couplés à la protéine Gi. Cette activation serait le signal physiologique permettant d’accroitre la quantité de canaux TWIK1 à la membrane plasmique
Potassium channels form the most diverse class of ion channel family. Three families of potassium channels have been identified, including the two P domain potassium channel family. This family is the last one identified and counts 15 members. These channels produce leak currents that play a key role in cellular excitability, and more particularly in seizures, anesthesia, neuroprotection or depression. A detailed study of the mechanisms regulating the channel activity is necessary for a better comprehension of their roles. We studied the protein environment of the TREK1 channel and we showed that a cytosolic protein associated to microtubules, Mtap2, is able to bind TREK1. This association leads to an increase of TREK1 expression at the plasma membrane. This protein is the second identified. Both of them can bind TREK1 simultaneously and have additive effects, placing TREK1 at the center of a protein network. These results show how much the protein environment of channels is important for their activity. We also showed that TWIK1 is localized in a subapical compartment near the plasma membrane. TWIK1 is actually inserted in the membrane then quickly internalized and addressed to the recycling endosomes. The export from this compartment is drived by activation of a Gi coupled receptor. This activation could be the physiological signal leading to an increase of TWIK1 currents at the plasma membrane

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Deluche, Cynthia. "Endoréduplication, division et expansion cellulaire : mécanismes acteurs de la croissance du fruit". Thesis, Bordeaux, 2015. http://www.theses.fr/2015BORD0199/document.

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Abstract (sommario):

La transformation de la paroi de l’ovaire en un péricarpe charnu implique une coordination entre les divisions cellulaires et l’expansion cellulaire. Des données considérables sur le développement et la maturation du fruit de tomate ont été établies, mais la coordination des divisions cellulaires, de l’expansion cellulaire et de l’endoréduplication durant la mise à fruit ainsi que durant la croissance du fruit de tomate reste grossièrement caractérisée au sein du péricarpe et de nombreuses questions ne sont pas résolues : comment ces deux processus sont-ils régulés et coordonnés durant le développement du fruit d’un point de vue cellulaire? Quand commence l’endoréduplication dans les tissus du fruit et quelle est sa fonction? La première partie de ce mémoire concerne la coordination des divisions cellulaires et de l’expansion cellulaire durant la fin du développement de l’ovaire et le début du développement du fruit. Une différenciation précoce des assises cellulaires composant la paroi de l’ovaire puis le péricarpe a été démontrée. Les divisions cellulaires se font principalement au sein de l’épiderme externe et montrent une synchronisation partielle tandis que l’expansion cellulaire se fait principalement dans le mésocarpe. L’endoréduplication semble être initiée avant l’anthèse. La deuxième partie est consacrée à l’analyse du RNA-seq nucléaire en fonction de quatre niveaux de ploïdie (4, 8, 16 et 32C). La majorité des gènes montrent une augmentation proportionnelle de leurs expressions en fonction des niveaux de ploïdie. Cependant, certains gènes révèlent une surexpression ou une sous-expression en fonction des niveaux de ploïdies
The transformation of the ovary wall into a fleshy pericarp involves a coordinated pattern of cell division and cell expansion. Considerable data have been reported on tomato fruit development and ripening, but the pattern of cell division, cell expansion and endoreduplication at the tomato fruit set and during fruit growth remains grossly appreciated at the whole pericarp level and many questions are not yet resolved: How are cell division and cell expansion coordinated in tomato fruit a cellular level and according to developmental time? When does endoreduplication begin in fruit tissues and what is its function? The first part of this deals with the coordination of cell division and cell expansion during the end of tomato ovary development and the beginning of fruit growth. Evidence for early differentiation of cell layers in the ovary wall and then in fruit pericarp are presented. Cell division happens mainly in the external epidermis and shows partial synchronization, whereas cell expansion happens mostly in mesocarp cell layers. Endoreduplication is initiated as soon as before anthesis. The second part of this work is devoted to RNA-seq based transcriptome profiling of pericarp nuclei which have been sorted according to four ploidy levels (4, 8, 16 and 32C). We demonstrate that the expression of most of the pericarp-expressed genes shows a proportional increase according to ploidy level, on a nuclear basis. However, a significant amount of genes has been identified as over-expressed or under-expressed according to ploidy level

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Daouphars, Mikaël. "Mécanismes d'action des AINS en relation avec la prolifération cellulaire et l'apoptose". Nancy 1, 2004. http://docnum.univ-lorraine.fr/public/SCD_T_2004_0258_DAOUPHARS.pdf.

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Abstract (sommario):

Les études épidémiologiques ont suggéré que la consommation régulière d'anti-inflammatoires non stéroi͏̈diens (AINS),et plus particulièrement celle d'aspirine ou de sulindac, serait capable de diminuer le nombre de polypes chez lespatients porteurs de polypose familiale. Elle serait également associée à une incidence moitié moindre du cancercolorectal, y compris en termes de mortalité. L'étude de biopsies digestives a montré que les tissus tumoraux produisent des quantités exagérées de prostaglandines E2 par rapport aux tissus sains et que ceci est dû à une expression anormalement élevée de COX-2, tant au niveau de la protéine que de ses messagers. De plus, l'activation d'oncogènes et la transformation cellulaire sont étroitement associées à l'expression de COX-2. Ainsi, même si l'action des AINS pourrait ne pas être univoque (blocage de l'activation métabolique de carcinogènes par les COX par exemple),l'inhibition de COX-2 pourrait en être un élément essentiel, d'autant que la transfection de COX-2 dans les cellulesépithéliales digestives s'accompagne de nombreuses modifications fonctionnelles dont une résistance à la mort cellulaire programmée (apoptose). La chimioprévention du cancer colorectal par les AINS semble donc trouver des bases scientifiques indéniables et a bénéficié d'un nouvel essor avec le développement d'inhibiteurs sélectifs de COX-2 doués d'une tolérance digestive améliorée, davantage compatible avec un usage prolongé. Le premier objectif de ce travail était de comparer les effets sur la prolifération cellulaire et l'apoptose, d'AINS ayant des profils de sélectivité différents vis-à-vis des isoenzymes de la COX, sur des lignées humaines de cancer colorectal,elles-mêmes différentes par leur statut COX. Les quatre lignées humaines de cancer colorectal (HT29, Caco-2, HCT15, HCT116) ont été caractérisées en termes de différenciation et de prolifération cellulaires, d'expression des COXs. Les effets d'AINS classiques (aspirine, indométacine, kétoprofène, sulfure de sulindac) et d'inhibiteurs sélectifs de COX-2 (célécoxib, NS-398) ont ensuite été étudiés vis-à-vis de la prolifération, du cycle-cellulaire et de l'apoptose. Cette étude a montré que les AINS, à l'exception de l'aspirine et du kétoprofène, inhibaient la croissance des différentes lignées cellulaires à une concentration supérieure ou égale à l0-4M. Lorsqu'il existait, cet effet antiprolifératif était généralement associé à un blocage du cycle cellulaire en phase G1, en particulier pour le sulfure de sulindac et le NS-398. Cependant, à cette concentration (I0-4M), seul le sulfure de sulindac favorisait l'apoptose dans toutes les lignées colorectales humaines, y compris la lignée HCT15 n'exprimant pas les COXs. Le second objectif de ce travail était de mettre en évidence les mécanismes impliqués, d'autant que les effets observés sur le cycle cellulaire, d'une part, et sur l'apoptose, d'autre part, suggéraient respectivement la participation de mécanismes COX-dépendants et COX-indépendants. Compte tenu de la différence de structure chimique entre le sulfure de sulindac (AINS carboxylique) et le NS-398 (arylsulfonamide), et comme leurs effets antiprolifératifs n'étaient observés qu'à des concentrations nettement supérieures à celles requises pour l'inhibition de la synthèse des prostaglandines, nous avons recherché la contribution éventuelle d'un découplage de la phosphorylation oxydative dans ce processus. Dans nos conditions expérimentales, le sulfure de sulindac, mais pas le NS-398, provoquait une chute du potentiel transmembranaire mitochondrial Dγm, et ce, indépendamment de l'expression des COXs. Cet effet découpleur précédait la libération de protéines mitochondriales pro-apoptotiques (cytochrome c, Smac/DIABLO), ainsi que l'activation des caspases 3 ou 9. La préincubation des cellules par la ciclosporine A inhibait la libération deSmac/DIABLO induite par le sulfure de sulindac, suggérant l'intervention du complexe de perméabilisation de pore dans le relarguage de protéines mitochondriales pro-apoptotiques. Le découplage de la phosphorylation oxydative n'était cependant pas suffisant pour expliquer la totalité de l'effet du sulfure de sulindac puisque le FCCP (découpleur de référence) n'induisait pas d'apoptose malgré la chute de Dγm et la libération mitochondriale de facteurs pro-apoptotiques.

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Fernet, Marie. "Etude des mécanismes impliqués dans la réponse cellulaire précoce aux radiations ionisantes". Paris 11, 2000. http://www.theses.fr/2000PA11T063.

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Abstract (sommario):

L'adaptation d'un accélérateur linéaire d'électrons à l'irradiation fractionnée de cultures cellulaires à haut débit de dose a permis de mettre en évidence une oscillation rapide et synchrone de la radiosensibilité cellulaire. Ce phénomène a été appelé "Effet W". L'effet n'est pas lié à une variation de l'incidence des cassures d'ADN ou du taux d'apoptose radio-induite. En revanche il est clairement corrélé à des altérations phénotypiques évoquant la mort cellulaire mitotique ou différée. L'utilisation d'inhibiteurs chimiques et d'une lignée PARP-1 knockout a permis de montrer que la poly (ADP-ribose) polymérase-1 (PARP-1) est indispensable à la genèse de l'effet W. Nous proposons que la reconnaissance des dommages s'accompagne de réarrangements rapides de la chromatine dans lesquels la PARP-1 jouerait un rôle prépondérant, conduisant à une altération du profil des lésions lors d'une ré-irradiation. Par ailleurs, l'étude de deux inhibiteurs spécifiques de la PARP-1 associés à une irradiation gamma conventionnelle montre que le potentiel radiosensibilisateur de ces molécules varie fortement selon l'inhibiteur et la lignée cellulaire utilisée, les lignées de rongeurs étant plus sensibles. L'utilisation de lignées mutées indique que l'interaction putative entre la PARP-1 et la DNA-PK n'est pas déterminante pour la survie cellulaire. En revanche, une mutation de la protéine ATM sensibilise fortement les cellules à l'effet des inhibiteurs. Notre travail montre que la potentialisation de l'effet létal des radiations par les inhibiteurs de PARP-1 dépend de nombreux paramètres dont il faudra tenir compte pour le test de ces molécules comme adjuvants en radiothérapie. Il souligne également l'importance du débit de dose et du fractionnement pour l'appréciation des conséquences létales et des risques mutagènes des radiations. L'observation du phénomène sous protons de 70 MeV laisse présager favorablement de possibilités d'applications en radiothérapie antimorale.

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Lévesque, Tremblay Véronique. "Mécanismes d'action de CRB3 dans le contrôle de la croissance tumorale". Thesis, Université Laval, 2010. http://www.theses.ulaval.ca/2010/27008/27008.pdf.

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Lin, Thibault. "Mécanismes du transfert intercellulaire des homéoprotéines". Thesis, Paris 6, 2015. http://www.theses.fr/2015PA066346/document.

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Abstract (sommario):

Les homéoprotéines constituent une famille de facteurs de transcription dont le point commun est la présence en leur sein d’un domaine de liaison à l’ADN particulier, l’homéodomaine. Des travaux menés au laboratoire ont permis de mettre en avant la capacité de nombreux membres de cette famille protéique à pouvoir transférer entre cellules, ouvrant la voie à un nouveau mode d’action de ces protéines, en plus de leur action sur la transcription. L’homéodomaine joue un rôle central dans ce transfert intercellulaire car il contient des séquences requises pour les deux étapes principales d’un tel transfert intercellulaire, sécrétion et internalisation. D’un point de vue mécaniste, ces deux étapes successives du transfert intercellulaire des homéoprotéines font appel à des mécanismes désignés comme non-conventionnels car propres à ce processus. Suite à de précédentes études menées dans le laboratoire mettant en évidence un rôle crucial de la localisation subcellulaire de l’homéoprotéine ENGRAILED-2 (EN-2) dans sa sécrétion, nous avons pu mettre en avant l’existence d’une interaction directe entre EN-2 et certains lipides appartenant à la classe des phosphoinositides [notamment les PI(4,5)P2]. Nous avons ensuite montré que cette interaction est à l’origine de l’association d’une fraction de EN-2 intracellulaire avec les compartiments membranaires. Ces travaux ont également permis de mieux comprendre le rôle de certains protéoglycanes dans l’accumulation de EN-2 à la surface des cellules suite à sa sécrétion et au cours de son internalisation. Enfin nous avons pu mettre en évidence l’implication du domaine d’interaction de EN-2 avec PBX dans le transfert intercellulaire de EN-2
Homeoproteins belong to a family of transcription factors which all share a common DNA binding domain, the homeodomain. Beside their action as transcription factors, homeoproteins are also able to be transferred between cells by unconventional means. The two consecutive steps of this intercellular transfer (secretion then internalisation) require sequences located in the homeodomain. Thanks to studies previously lead by our laboratory, we know that subcellular localisation of ENGRAILED-2 (EN-2) homeoprotein is a crucial step in its subsequent secretion. On this basis, we showed that EN-2 interacts directly with a certain subtype of phospholipids, phosphoinositides [e.g. PI(4,5)P2]. Then, we demonstrated than these lipids are involved in the association of EN-2 protein with membraneous compartments within the cell. PI(4,5)P2 located in the inner leaflet of the plasma membrane are also involved in the direct translocation of EN-2 across plasma membrane. This work is also focused on the role of proteoglycans, and more precisely syndecans, in EN-2 cell surface accumulation after both secretion and internalisation. At last, we also established the implication of EN-2 interaction domain with PBX in EN-2 intercellular transfer

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D'Onofrio, Marie-France. "Etude in vitro de mécanismes anti-tumoraux induits par le lumicanne recombinant sur les cellules de mélanome". Reims, 2008. http://www.theses.fr/2008REIMM201.

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Abstract (sommario):

Le @mélanome est le cancer cutané le plus grave en raison de son potentiel métastatique élevé et son pronostic redoutable. Le lumicanne est une glycoprotéine, appartenant à la famille des SLRP, retrouvée dans la matrice extracellulaire dermique. Au cours de précédents travaux, nous avons démontré que le lumicanne diminue la progression du mélanome in vivo (Vuillermoz et al. , 2004). Dans la présente étude, nous montrons que le lumicanne diminue la migration des cellules de mélanome humain A375 ainsi que leur invasion au travers d'une membrane basale artificielle reconstituée de MatrigelÒ. Ce phénomène n'est pas dû à un effet apoptotique induit par le lumicanne mais à son habilité à augmenter l'adhésion cellulaire. Afin d'élucider les propriétés anti-invasives du lumicanne, nous avons orienté notre étude sur l'identification du récepteur du lumicanne exprimé par les cellules A375 ainsi que sur les mécanismes intracellulaires mis en jeu. L'adhésion des cellules A375 au lumicanne est dose-dépendante et requiert la présence des cations divalents Mg2+ et Mn2+. A l'aide d'un panel d'anticorps bloquants monoclonaux dirigés contre les diverses sous-unités d'intégrines, nous avons montré que les cellules A375 se lient au lumicanne via la sous-unité d'intégrine b1. L'utilisation de la rhodocétine, un inhibiteur sélectif dirigé contre la sous-unité d'intégrine a2, suggère l'implication de celle-ci. Comparé à d'autres substrats de la matrice extracellulaire, le lumicanne conduit à la formation de regroupements de la sous-unité d'intégrine b1 le long de la membrane plasmique ainsi qu’à une diminution du nombre de complexes d'adhésion focale. Nous avons également observé, en présence de lumicanne, une organisation anormale du réseau d'actine du cytosquelette. Ces résultats suggèrent que le lumicanne est capable d'augmenter l'adhésion et de diminuer la migration des cellules A375 au travers d'intégrines contenant la sous-unité b1 et pourrait de ce fait contribuer à l'inhibition du phénotype migratoire de ces cellules.

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Combe, Christian. "Les mécanismes de l'adhésion leucocytaire : implications en néphrologie". Bordeaux 2, 1995. http://www.theses.fr/1995BOR28330.

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Mediouni, Chamseddine. "Analyse des voies de détoxification des métaux lourds chez les plantes et lien avec les réponses cellulaire et moléculaire après traitement aux agents génotoxiques". Strasbourg, 2009. http://www.theses.fr/2009STRA6213.

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Abstract (sommario):

Ce travail présente la réponse des plantes [la tomate, Arabidopsis thaliana Col0 et le mutant A. Thaliana cad2, déficient dans la voie de synthèse du glutathion (GSH)] à un excès métallique. Au niveau physiologique, le traitement par deux métaux lourds, le cadmium et le cuivre, entraîne une inhibition de la croissance des plantes plus prononcée sous traitement cuivrique pour les fortes doses de traitement. Cette différence de toxicité peut être due à une différence dans les mécanismes de tolérance aux métaux lourds comme la complexation par des phytochélatines. Au niveau biochimique, les deux métaux lourds provoquent l’installation d’un état de stress oxydatif. En réponse à une accumulation de ROS, il y a induction de l’activité spécifique d’enzymes antioxydantes au niveau des feuilles des plantes sauvages, cependant, la perte de la synthèse du GSH provoque une perte de la réponse antioxydative chez le mutant cad2. Au niveau moléculaire, le cadmium et le cuivre induisent, essentiellement par l’accumulation de ROS, des cassures double brin de l’ADN (DSBs) au niveau des feuilles d’Arabidopsis thaliana Col0 et du mutant cad2 et la mort cellulaire au niveau des feuilles et des racines de deux types de plantes, caractérisées par l’induction de l’expression de gènes spécifiques. D’autre part, une forte induction de la mort cellulaire est liée à une accumulation plus prononcée des DSBs et à une perte de l’expression des gènes de la réparation ce qui indique que les cellules s’orientent vers la mort cellulaire plutôt que vers la réparation de leur ADN si les dommages sont trop accentués
This work presents the response of plants [tomato, Arabidopsis thaliana Col0 and A. Thaliana cad2 mutant, defective in the glutathione (GSH) biosynthesis pathway] to heavy metal excess. At the physiological level, the treatment with cadmium or copper induce plant growth inhibition, more pronounced at high copper concentration. Differences in heavy metal toxicity could be linked to variation of heavy metal tolerance mechanisms like phytochelatine chelation. At the biochemical level, the two heavy metals induce oxidative stress. In response to ROS accumulation, there is an increase of antioxydative enzyme activity in the leaves of wild type plants, whereas, the lack of GSH biosynthesis leads to the lack of antioxydative response in the cad2 mutant. At the molecular level, cadmium and copper induce, essentially via ROS accumulation, DNA double strand break (DSBs) in the leaves of Arabidopsis thaliana Col0 and of the mutant cad2 and cell death in the leaves and the roots of both plant types, characterized by an induction of specific gene expression. On the other hand, a high induction of cell death is related to a great accumulation of DSBs and the lack of repair gene induction. This suggests that cells are directed towards cell death rather than to DNA repair if DNA damages are to much accentuated

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Plawinski, Laurent. "Nouveaux mécanismes fibrinolytiques des nanovésicules cellulaires : Détection et relevance physiopathologique". Paris 7, 2012. http://www.theses.fr/2012PA077013.

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Abstract (sommario):

Les nanovésicules sont des vésicules membranaires émises par les cellules activées. De nombreuses études démontrent que toutes les cellules sont capables de produire ces vésicules dont la fonction la plus étudiée est leur activité procoagulante. Cependant, les nanovésicules pourraient être considérées comme des vecteurs mobiles pouvant exercer un large spectre d'activités biologiques. Ainsi, les cellules qui synthétisent des activateurs du plasminogène sont capables de produire des nanovésicules ayant une activité fibrinolytique. La détection en périphérie des nanovésicules (sang, larmes, salives,. . . ) serait la signature d'un processus de souffrance ou d'apoptose de cellules, qui séquestrées dans leurs tissus, sont inaccessibles à la détection par des moyens non invasifs. Ce travail comprend, dans une première partie, un ensemble de trois articles fondamentaux et une revue de synthèse sur l'activité fibrinolytique des nanovésicules avec comme nouveau concept : le « cross-talk » fibrinolytique. La deuxième partie, traite d'une nouvelle méthodologie pour séparer spécifiquement les nanovésicules des autres nano-objets présents dans les liquides biologiques chez l'homme. Cette technique a fait l'objet le 23 mars 2011 d'un dépôt de brevet n° 11/00873 auprès de l'INPI. L'objectif du premier article a été de démontrer in vitro que les nanovésicules endothéliales, issues des cellules endothéliales microvasculaires HMEC-1, portent à leur surface le complexe uPA/uPAR et qu'elles agissent comme des surfaces catalytiques capables d'interagir avec le plasminogène pour former de la plasmine. Le deuxième article est la preuve du concept chez l'homme du mécanisme original démontré dans l'article précédent, tout en montrant une dichotomie d'origine (endothéliale ou leucocytaire) entre les nanovésicules portant le tPA et celles portant l'uPA. Le troisième article porte sur l'existence d'un nouveau mécanisme de formation de plasmine le « cross-talk » fibrinolytique au cours duquel la plasmine formée via uPA est le résultat de l'interaction entre deux surfaces distinctes. Enfin, une revue vient clore ce sujet en synthétisant l'ensemble de ces travaux et se termine par les perspectives qui s'offrent au monde des nanovésicules cellulaires fibrinolytiques
This thesis is based on a set of three fundamental articles and a review on the fibrinolytic activity of nanovesicles presenting as new concept: the fibrinolytic cross-talk. A patent on a new methodology to separate specifically the nanovesicles from the other nanoobjects present in human biological fluids has been obtained from the INPI on March 23rd, 2011 (patent registration n°l 1/00873). The objective of the first article was to demonstrate in vitro that endothelial derived-nanovesicles from human dermal microvascular endothelial cells (HMEC), carry on their surface the complex uPA/uPAR and that they act as catalytic surfaces capable of interacting with plasminogen to generate plasmin. In the second article we demonstrate the proof of concept that fibrinolytic nanovesicles are present in circulating human blood. We also show that plasminogen activators are distinctly borne by nanovesicles of specific cell origin: endothelial nanovesicles bear tPA whereas nanovesicles of leukocyte origin bear uPA. The third article concerns the existence of a new mechanism of plasmin generation: the fibrinolytic cross-talk. This mechanism raises two requirements: first the nanovesicle must bear uPA; second, plasminogen must be hold by a different surface (fibrin, membrane cells or extracellular matrix). Finally, a review close this subject by synthesizing all these studies and ends by the perspectives which they offer to the field of cellular fibrinolytic nanovesicles

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Lin, Thibault. "Mécanismes du transfert intercellulaire des homéoprotéines". Electronic Thesis or Diss., Paris 6, 2015. http://www.theses.fr/2015PA066346.

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Abstract (sommario):

Les homéoprotéines constituent une famille de facteurs de transcription dont le point commun est la présence en leur sein d’un domaine de liaison à l’ADN particulier, l’homéodomaine. Des travaux menés au laboratoire ont permis de mettre en avant la capacité de nombreux membres de cette famille protéique à pouvoir transférer entre cellules, ouvrant la voie à un nouveau mode d’action de ces protéines, en plus de leur action sur la transcription. L’homéodomaine joue un rôle central dans ce transfert intercellulaire car il contient des séquences requises pour les deux étapes principales d’un tel transfert intercellulaire, sécrétion et internalisation. D’un point de vue mécaniste, ces deux étapes successives du transfert intercellulaire des homéoprotéines font appel à des mécanismes désignés comme non-conventionnels car propres à ce processus. Suite à de précédentes études menées dans le laboratoire mettant en évidence un rôle crucial de la localisation subcellulaire de l’homéoprotéine ENGRAILED-2 (EN-2) dans sa sécrétion, nous avons pu mettre en avant l’existence d’une interaction directe entre EN-2 et certains lipides appartenant à la classe des phosphoinositides [notamment les PI(4,5)P2]. Nous avons ensuite montré que cette interaction est à l’origine de l’association d’une fraction de EN-2 intracellulaire avec les compartiments membranaires. Ces travaux ont également permis de mieux comprendre le rôle de certains protéoglycanes dans l’accumulation de EN-2 à la surface des cellules suite à sa sécrétion et au cours de son internalisation. Enfin nous avons pu mettre en évidence l’implication du domaine d’interaction de EN-2 avec PBX dans le transfert intercellulaire de EN-2
Homeoproteins belong to a family of transcription factors which all share a common DNA binding domain, the homeodomain. Beside their action as transcription factors, homeoproteins are also able to be transferred between cells by unconventional means. The two consecutive steps of this intercellular transfer (secretion then internalisation) require sequences located in the homeodomain. Thanks to studies previously lead by our laboratory, we know that subcellular localisation of ENGRAILED-2 (EN-2) homeoprotein is a crucial step in its subsequent secretion. On this basis, we showed that EN-2 interacts directly with a certain subtype of phospholipids, phosphoinositides [e.g. PI(4,5)P2]. Then, we demonstrated than these lipids are involved in the association of EN-2 protein with membraneous compartments within the cell. PI(4,5)P2 located in the inner leaflet of the plasma membrane are also involved in the direct translocation of EN-2 across plasma membrane. This work is also focused on the role of proteoglycans, and more precisely syndecans, in EN-2 cell surface accumulation after both secretion and internalisation. At last, we also established the implication of EN-2 interaction domain with PBX in EN-2 intercellular transfer

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Lassus, Patrice. "Etude des mécanismes de contrôle de l'apoptose par le gène suppresseur de tumeurs p53". Montpellier 2, 1998. http://www.theses.fr/1998MON20164.

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Abstract (sommario):

L'apoptose est un mecanisme de suicide cellulaire essentiel aux differents stades de la vie d'un organisme eucaryote. Ainsi, l'apoptose est importante pour le developpement embryonnaire, le maintien de l'homeostasie des tissus, la lutte contre les agents pathogenes et l'inhibition du developpement de pathologies telles que les tumeurs. L'apoptose est un mecanisme actif de destructuration de la cellule qui necessite l'activation de nombreux facteurs proteiques. Les proteines impliquees directement dans la machinerie de destruction cellulaire sont maintenant assez bien decrites. Cependant, l'apoptose est sujette a de nombreux controles. Les mecanismes moleculaires controlant la mort cellulaire programmee sont donc divers, complexes et pour le moment assez mal connus. Le gene suppresseur de tumeurs p53 est un des facteurs participant a la regulation de la reponse cellulaire aux nombreux stimuli apoptotiques. P53 est certainement une des proteines les plus etudiees car elle semble fondamentale pour l'inhibition de la tumorigenese. Ainsi, on retrouve un p53 mutee dans plus de 50% des cancers humains. P53 permet la suppression des tumeurs grace a ses deux activites biologiques : l'arret du cycle cellulaire et l'induction d'apoptose. Les mecanismes d'arret du cycle par p53 ont ete assez bien decrits tandis que la regulation de l'apoptose par p53 reste a ce jour assez obscure. Au cours de ma these, j'ai etudie les mecanismes moleculaires et cellulaires de controle de l'apoptose par p53. Mes deux principaux resultats sont les suivant : 1) d'une part, nous avons montre que p53 avait une activite anti-apoptotique lorsque la proteine est exprimee a un taux physiologique. Cette activite est retrouvee dans un mutant oncogenique de p53 et necessite la partie carboxyl terminale de la proteine. 2) d'autre part, nous avons montre que les formes inactives de deux petites gtpases de la famille rho, cdc42hs et racl, activent p53 et induisent l'apoptose de facon p53 dependante. Cette apoptose necessite egalement l'activation de la map kinase erk2. Ces resultats apportent des elements nouveaux a la comprehension des interactions complexes aboutissant a la regulation de l'apoptose par le gene suppresseur de tumeurs p53.

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Kolli, Kaouther. "Rôle de la protéine FAK (Focal Adhésion Kinase) dans les mécanismes d'invasion cellulaire". Thesis, Strasbourg, 2012. http://www.theses.fr/2012STRAJ003.

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Cette thèse traite du rôle de la protéine FAK (Focal Adhésion Kinase) dans les mécanismes d'invasion cellulaire
This thesis is about the role of the protein FAK (Focal Adhesion Kinase) in the cellular mechanisms of invasion

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Reix, Stéphanie. "Ré-évaluation des mécanismes de mort cellulaire programmée associée à la maladie d'Alzheimer". Aix-Marseille 2, 2006. http://theses.univ-amu.fr.lama.univ-amu.fr/2006AIX22086.pdf.

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Abstract (sommario):

La mort cellulaire programmée (PCD) intervient physiologiquement au cours du développement embryonnaire mais aussi dans le contrôle de l’homéostasie de l’organisme adulte. Son phénotype le mieux connu est l’apoptose associée à l'activation des protéases nommées caspases. Il existe également des voies de PCD indépendantes des caspases, telles que les types « necrosis-like » et « apoptosis-like ». Cependant, les mécanismes sous-jacents à la PCD de type « necrosis-like » sont peu connus alors que l’effecteur moléculaire du type « apoptosis-like » (AIF) est identifié. L’induction de la PCD de type « apoptosis-like »provoque une libération mitochondriale d’AIF suivi de sa translocation nucléaire et de la condensation de la chromatine. Mais AIF joue aussi un rôle dans le contrôle de la respiration mitochondriale indispensable à la survie cellulaire. La perturbation de cette fonction est associée à l’induction du stress oxydant. L’implication de la PCD « apoptosis-like » via AIF dans des modèles animaux de la neurodégénérescence aiguë (ischémie) et chronique (maladie de Parkinson) est démontrée. De plus, AIF joue un rôle dans l’induction de la PCD par le peptide amyloïde-bêta (Aβ) dans les neurones corticaux de rat, mais son implication dans les neurones d’hippocampe n’a pas été étudiée. Or, ces neurones constituent (avec les neurones corticaux) des cibles privilégiées de la neurotoxicité de l’Aβ dans la maladie d’Alzheimer (AD). L’objectif principal de ma thèse était donc de rechercher si AIF est impliqué dans l’AD. Pour réaliser cet objectif, j’ai utilisé deux modèles : i) des prélèvements post-mortem de cortex et d’hippocampe humains atteints ou non d’AD ; ii) des cultures primaires d’hippocampes de rats traités avec Aβ. Contrairement au modèle humain, la culture neuronale permet d’accéder aux mécanismes précoces d’action d’Aβ, éventuellement impliquant l’AIF. L'étude des tissus humains montre que l'expression d’AIF augmente au cours du vieillissement chez les sujets témoins et non chez les sujets atteints de l’AD. Cette incapacité à augmenter l’expression d’AIF pourrait être liée à l’induction du stress oxydant qui accompagne l’AD. La PCD induite par l’Aβ in vitro n’est pas du type « apoptosis-like » car elle n’implique pas la libération mitochondriale et la translocation nucléaire d’AIF. L’absence de condensation de la chromatine, combinée à la dissolution du nucléole et à la vacuolisation du cytoplasme sous l’effet d’Aβ, suggère l’implication de la PCD de type « necrosis-like », d’ailleurs compatible avec le stress oxydant. L’ensemble de ces travaux suggère que la partie d’AIF impliquée dans les fonctions mitochondriales pourrait devenir une nouvelle cible thérapeutique pour la gestion du stress oxydant et la prévention de la PCD neuronale de type « necrosis-like ».

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Orré, Thomas. "Mécanismes moléculaires d’activation des intégrines par la kindline-2 lors de l’adhésion cellulaire". Thesis, Bordeaux, 2017. http://www.theses.fr/2017BORD0824/document.

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Abstract (sommario):

Les adhérences focales (AF), structures adhésives reliant la cellule à la matrice extra-cellulaire (MEC), constituent de véritables plateformes de signalisation biochimique et mécanique qui contrôlent l'adhérence, la migration, la différenciation et la survie cellulaire. Les récepteurs transmembranaires intégrines sont au coeur des AF, où elles connectent la MEC au cytosquelette d'actine. Au début des années 2000, la protéine intracellulaire taline, qui se lie aux parties cytoplasmiques bêta des intégrines, était considérée comme le principal activateur des intégrines. Néanmoins, il a depuis été montré que la kindline, autre protéine intracellulaire se liant aux parties bêta cytoplasmiques, jouait également un rôle essentiel dans l'activation des intégrines. Ainsi,plusieurs études ont mis en évidence que la kindline et la taline étaient complémentaires et avaient une action synergique durant l'activation des intégrines. Les bases moléculaires de ces phénomènes restent à déterminer. De plus, la plupart des données sur lerôle de la kindline dans l'adhérence et l'activation des intégrines provient d'expériences menées sur des cellules en suspension et/ou avec l'intégrine plaquettaire αIIbβ3. Ainsi, la régulation de ces processus par la kindline dans les cellules adhérentes est encore peu comprise. Dans cette étude, nous combinons la microscopie PALM et le suivi de protéines individuelles pour révéler le rôle et le comportement de la kindline à l'intérieur et à l'extérieur des AF au cours des événements moléculaires clés se déroulant au niveau de la membrane plasmique, et qui mènent à l'activation des intégrines. Nous avons observé que les intégrines bêta1 etbêta3 portant une mutation ponctuelle inhibant l'interaction avec la kindline montrent un défaut d'immobilisation dans les AF. Nous avons également observé que la kindline-2, qui est enrichie dans les AF, diffusait librement au niveau de la membrane plasmique,à l'intérieur et à l'extérieur des AF. Ceci constitue une distinction majeure par rapport à la taline, qui, au niveau de la membrane plasmique, est essentiellement observée dans les AF où elle est immobile, montrant qu'elle est recrutée dans les AF directement depuis le cytosol sans diffusion latérale membranaire (Rossier et al. 2012). Afin d'identifier les bases moléculaires du recrutement et de la diffusion membranaire de la kindline, nous avons utilisé différents variants mutés de kindline précédemment décrits. Le mutant kindline-2-QW614/615AA (liaison aux intégrines inhibée) montre une diffusion membranaire accrue, ce qui suggère que la kindline peut diffuser au niveau de la membrane plasmique sans être associée aux intégrines. Par ailleurs, la baisse d'immobilisation au niveau des AF observée avec ce mutant montre qu'une partie de l'immobilisation de la kindline est due aux intégrines, suggérant l'existence d'un complexe intégrine-kindline immobile dans les AF. La délétion du domaine PleckstrinHomology (PH) de la kindline diminue considérablement son recrutement et sa diffusion membranaire. Nous avons évalué le rôle fonctionnel du recrutement et de la diffusion membranaire de la kindline en réexprimant ces mutants dans des cellules déplétéesen kindline-1 et -2 (cellules KO kindline-1 -/-, kindline-2 -/-). Ces expériences montrent que le recrutement et la diffusion membranaire de la kindline sont cruciaux pour l'activation des intégrines durant l'étalement cellulaire et favorisent la formation d’adhérences. Cela suggère que la kindline utilise un chemin différent de celui de la taline pour atteindre et activer les intégrines,ce qui pourrait expliquer au niveau moléculaire comment la kindline complémente la taline durant l'activation des intégrines
Focal adhesions (FAs) are adhesive structures linking the cell to the extracellular matrix (ECM) and constitute molecular platforms for biochemical and mechanical signals controlling cell adhesion, migration, differentiation and survival. Integrin transmembrane receptors are core components of FAs, connecting the ECM to the actin cytoskeleton. During the early 2000s, the intracellular protein talin, which directly binds to the cytoplasmic tail of β-integrins, was considered as the main integrin activator. Nevertheless, it has been shown that kindlin, another intracellular protein that bind to β-integrin, is also a critical integrin activator. In fact, several studies have shown that kindlin and talin play complementary and synergistic roles during integrin activation. The molecular basis of these phenomena remains to determine. Moreover, most studies focusing on the role of kindlin during integrin activation and cell adhesion have been performed with suspended cells and/or with the platelet integrin αIIbβ3. Here we combined PALM microscopy with single protein tracking to decipher the role and behavior of kindlin during key molecular events occurring outside and inside FAs at the plasma membrane and leading to integrin activation, as we have done previously for talin (Rossier et al., 2012). We found that beta1 and beta3-integrins with a point mutation inhibiting binding to kindlin show reduced immobilization inside FAs. We also found that kindlin-2, which is enriched inside FAs, displayed free diffusion at the plasma membrane outside and inside FAs. This constitutes a major difference with talin, which, at the plasma membrane level, is observed almost exclusively in FAs, where it is immobile, which shows that talin is recruited into FAs directly from the cytosol without lateral diffusion along the plasma membrane (Rossier et al. 2012). To determine the molecular basis of kindlin membrane recruitment and diffusion, we used a kindlin variant known to decrease binding to integrins (kindlin-2- QW614/615AA). This mutant displayed increased membrane diffusion, suggesting that kindlin-2 can freely diffuse at the plasma membrane without interacting with integrins. Moreover, the kindlin-2-QW mutant showed decreased immobilization inside FA, showing that part of kindlin immobilization depends on interaction with integrins. This suggests that kindlin can form an immobile complex with integrins inside focal adhesions. Deletion of the kindlin pleckstrin homology (PH) domain strongly reduced the membrane recruitment and diffusion of kindlin. We assessed the functional role of kindlin membrane recruitment and diffusion by re-expressing different kindlin-2 mutants in kindlin-1/kindlin-2 double KO cells. Those experiments demonstrated that kindlin-2 membrane recruitment and diffusion are crucial for integrin activation during cell spreading and favor adhesion formation. This suggests that kindlin uses a different route from talin to reach integrins and trigger their activation, providing a possible molecular basis for their complementarity during integrin activation

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Dakhli, Haithem. "Mécanismes d'induction du cannibalisme cellulaire et conséquences sur la réponse aux traitements anticancéreux". Thesis, Université Paris-Saclay (ComUE), 2017. http://www.theses.fr/2017SACLS585.

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Abstract (sommario):

Le cannibalisme d’une cellule vivante par une autre cellule vivante représente une nouvelle modalité de mort cellulaire non autonome. Mes travaux de thèse ont permis d’identifier et de caractériser les acteurs impliqués et d’apprécier l’influence de ce processus sur le devenir de la cellule cannibale. Nous avons ainsi révélé que l’activation d’une signalisation cellulaire impliquée dans la régulation du cycle cellulaire va causer une libération d’ATP qui stimulera les récepteurs purinergiques P2Y2 de la cellule de manière autocrine. Cette étape sera suivie d’une augmentation de l’exposition de la protéine d’adhérence E-cadhérine à la membrane plasmique et de réarrangements du cytosquelettes médiés par la kinase ROCK, et permettra ainsi à une cellule vivante de cannibaliser une autre cellule vivante. Ce phénomène aussi connu sous le nom de « cellule dans une cellule » est fréquemment observé dans les biopsies tumorales. De plus, nous révélons au cours de ces travaux la capacité des cellules internalisées à être éliminées par un processus qui implique la protéine de l’autophagie ATG5 et les protéines pro-apoptotiques BAK et BAX. Ce processus est associé au déclenchement d’une instabilité génétique et d’un stress oxydatif au niveau des cellules cannibales et va déclencher la sénescence de ces cellules que nous avons appelé « entescence ». Cette nouvelle modalité d’induction de la sénescence participe à la suppression des tumeurs in vivo et semble prédire la réponse des patients aux traitements néoadjuvants anticancéreux. À l’opposé, l’échappement à l’entescence favorise la progression tumorale et est associé à une mauvaise réponse des patients aux traitements. L’ensemble de ces travaux met en lumière l’existence d’une nouvelle modalité d’induction de la sénescence cellulaire qui survient à la suite du cannibalisme cellulaire. Une meilleure compréhension des mécanismes impliqués dans son déclenchement et son exécution pourrait selon nous participer au développement de nouvelles approches thérapeutiques afin de lutter contre le cancer
Cannibalism of live cells by other live cells is a new modality of non-autonomous cell death. This investigation led to the characterization of the molecular mechanisms implicated as well as the identification of the consequences of this process on the fate of the cannibal cell.We revealed that the activation of a signaling pathway involved in the regulation of the cell cycle can trigger a release of ATP that will stimulate the activity of the P2Y2 purinergic receptor in an autocrine manner. These events will lead to the increase of E-cadherin membrane exposition and change the organisation of the cytoskeleton in a ROCK-dependent manner, allowing this live cell to eat another live cell. This process called "cell in cell structure" is frequently observed in tumoral biopsies. Then, we revealed that the internalized cell will be eliminated by a process dependent on the autophagy protein ATG5 and the pro-apoptotic proteins BAX and BAK. These events are associated to the triggering of genomic instability and an oxidative stress in the cannibal cell leading these cells to a new senescence program that we called "entescence".This new senescence program seems to be a tumor suppressor mechanisms in vivo and is correlated to a better response of patient to neoadjuvant anticancer treatments. Moreover, escaping entescence seems to favor tumor growth and is associated to a bad response to anticancer treatments.Taken together, these results highlight the existence of a new senescence program that is initiated by cellular cannibalism. A better understanding of the molecular mechanisms regulating its initiation and its execution may lead to develop new innovative anticancer therapeutical approaches

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Ezan, Jérôme. "Etude des propriétés angiogéniques de FrzA : mécanismes moléculaires impliqués". Bordeaux 2, 2005. http://www.theses.fr/2005BOR21196.

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Abstract (sommario):

FrzA est une protéine Frizzled secrétée (sFRP) susceptible d'interférer dans le système de signalisation Wnt/Frizzled. Cette protéine exprimée dans le système cardiovasculaire, possède un rôle antiprolifératif sur les cellules vasculaires, induit la migration des cellules endothéliales (CE) in vitro et a des effets angiogéniques in vivo. Le but de ce travail a été d'étudier les mécanismes cellulaires et moléculaires permettant à FrzA d'exercer ses effets. Par une approche in vitro et in vivo (mudèle murin d'ischémie de la patte), nous avons démontré que FrzA retarde la transmission G1/S dans le cycle des cellules vasculaires par une diminution de l'expression des cyclines D1/E et des Cdk 2/4. Nos résultats montrent que FrzA favorise l'étalement des CE (prérequis de la migration) par un mécanisme intégrine α2β1-dépendant in vitro. Cet étalement nécessite l'activation de la GSK3β ainsi que celle de la GTPase Rac1 et pourrait impliquer les récepteurs Frizzled
FrzA is a secreted Frizzled Related Protein (sFRP) thought to interfere with the Wn/tFrizzled pathway. This protein is expressed in the cardiovascular system, has antiproliferative effect on vascular cells, induces endothelial cells (EC) migration in vitro and has proangiogenic effects in vivo. In this work, we aimed to study cellular and molecular mechanisms allowing FrzA to exert its effects. Using in vitro and in vivo (hindlimb ischemia mouse model) studies, we demonstrated that FrzA delays G1 phase and entry into S phase. This delay is associated with a decrease in the level of cyclin D1/E and Cdk 2/4. Our results showed that FrzA promotes EC spreading, a prerequisite to migration, through integrin αβ1 in vitro. This spreading requires GSK3β and GTPase Rac1 activation and might involve Frizzled receptors

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Siaussat, David. "Mécanismes moléculaires impliqués dans le contrôle de la prolifération cellulaire par les ecdysteroïdes chez le Lépidoptère Plodia interpunctella". Paris 6, 2004. http://www.theses.fr/2004PA066303.

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Nègre, Paulin. "Mécanismes de motilité et guidage sous flux des leucocytes humains". Thesis, Aix-Marseille, 2018. http://www.theses.fr/2018AIXM0747/document.

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Abstract (sommario):

La capacité des leucocytes à se déplacer dans tout l’organisme est indispensable pour une réponse immunitaire rapide et efficace. Leur migration, dite amiboïde, est caractérisée par une vitesse importante (10-20 μm/min) et une grande adaptabilité face aux divers environnements qu’ils rencontrent, qu’ils soient bidimensionnels comme la paroi luminale endothéliale ou tridimensionnels (3D) comme les tissus. Telle qu'actuellement décrite, la migration amiboïde requiert de l’adhésion ou de la friction avec un support solide. Nous avons ici montré que les lymphocytes T effecteurs sont capables de nager sans interaction avec un support solide. Le mécanisme de propulsion est basé sur le flux rétrograde d’actine qui entraine une brosse protéique de molécules transmembranaires liées au cytosquelette entrant en interaction avec le medium. Par ailleurs, lors de leur migration sur la surface luminale des parois endothéliales, les leucocytes sont soumis à un flux important et s’orientent par rapport au flux via des mécanismes mal déterminés. Nous avons montré que l’orientation des lymphocytes et des neutrophiles respectivement dans le sens ou à contresens d’un flux peut s’expliquer sans détection moléculaire du stress hydrodynamique. Le lamellipode pour les neutrophiles et l’uropode pour les lymphocytes est non-adhérent et s’oriente dans le flux comme une girouette dans le vent. La polarisation avant-arrière réaligne l’ensemble de la cellule dans le même sens que l’extrémité orientée par le flux. Le mécanotactisme des leucocytes sous flux repose ainsi sur des mécanismes passifs, c’est-à-dire sans mécanotransduction
A fast and efficient immunity response needs leukocytes’ability to migrate within the entire organism. Their migration, called amoeboid, is characterized by a high speed (10-20 μm.min-1) and a great adaptability to move through various environment, either two-dimensional as luminal endothelial surface or tri-dimensional (3D) environment as tissue. Since the observation of leukocytes migrating without adhesion through solid 3D medium, amoeboid migration is described as requiring either adhesion or friction with solid support to permit motility. We showed here that effector T lymphocytes are able to swim without any interaction with solid substrate. Propulsion is based on actin retrograde flow coupled with transmembrane proteins linked to cytoskeleton (like integrins) which drag a brush of polymeric molecules in interaction with the medium. Furthermore, cell guidance is required for many crucial functions as organism growth or immune system. However, when crawling on luminal endothelial surfaces, cells are exposed to blood flow and they robustly orient either with or against the flow with unknown mechanisms. We showed that lymphocytes and neutrophils flow orientation can be explain without any molecular flow sensor of shear stress. Lamellipodium for neutrophils and uropod for lymphocytes is non-adherent and orients in the direction of flow like a wind vane. Front-rear cell polarization aligns the axis of the whole cell with the non-adherent pole oriented by flow. Flow mechanotaxis of leukocytes relies on passive mechanisms without mechanotransduction

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Sabatier, Nancy. "Mécanismes subcellulaires de l'autocontole des neurones vasopressinergiques magnocellulaires chez le rat". Montpellier 2, 1999. http://www.theses.fr/1999MON20105.

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Abstract (sommario):

La vasopressine synthetisee par les neurones magnocellulaires des noyaux supraoptiques (nso) et paraventriculaires (npv) de l'hypothalamus est liberee au niveau de la neurohypophyse sous controle de l'activite electrique des neurones. Or l'avp est egalement liberee au niveau somato-dendritique, ou elle participe a la regulation de l'activite electrique des neurones. Dans le nso, l'avp agit directement sur les neurones avp par l'intermediaire de recepteurs specifiques, induisant ainsi une augmentation de la concentration intracellulaire de ca 2 +(ca 2 + i). L'augmentation de la ca 2 + i induite par l'avp est due essentiellement a un influx de ca 2 + extracellulaire mais implique egalement la mobilisation du ca 2 + intracellulaire. Nous avons effectue des mesures de variations de la ca 2 + i dans des neurones magnocellulaires de nso fraichement dissocies afin d'etudier les mecanismes subcellulaires impliques dans l'autocontrole des neurones avp. L'utilisation d'outils pharmacologiques a permis de mettre en evidence la presence de recepteurs fonctionnels de l'avp sensibles aux agonistes de types v 1 a et v 2 sur les neurones avp. Par ailleurs, l'augmentation de la ca 2 + i induite par l'avp active a la fois la voie de transduction intracellulaire de la phospholipase c (plc) et de l'adenylate cyclase (ac). Plus precisement, l'analyse de la messagerie intracellulaire declenchee par l'agoniste v 1 a a confirme la presence d'un recepteur de l'avp de type v 1 a couple a la plc. Quant a l'augmentation de la ca 2 + i provoquee par l'agoniste v 2, elle met en jeu des recepteurs couples a l'ac ainsi que des recepteurs couples a la plc. Enfin, l'utilisation de bloquants des canaux ca 2 + ouverts par la depolarisation a permis de montrer que l'influx de ca 2 + induit par l'avp est du a l'activation des canaux ca 2 + de types l, n et t. Ces resultats mettent en evidence la complexite des mecanismes subcellulaires mis en jeu par l'avp dans l'autocontrole des neurones avp du nso.

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Avril, Tony. "Etude des mécanismes de résistance des cellules trophoblastiques à la cytotoxicité naturelle". Tours, 2000. http://www.theses.fr/2000TOUR4007.

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Abstract (sommario):

Pendant la grossesse, la survie du foetus dépend de l'intégrité du trophoblaste, seul tissu d'origine foetale au contact du système immunitaire maternel. Le principal objectif de ce travail a été d'étudier les mécanismes de résistance des cellules trophoblastiques, En partiuclier des cellules choriocarninolateyses (CC) (issues de la transformation maligne du trophoblaste), à la cytotoxicité naturelle (lyse nk). Dans la première partie, nous montrons que le blocage de l'interaction des molécules HLA de classe I (exprimées sur les CC) avec les récepteurs inhibiteurs CD94/NKG2 ou CD158 (exprimés sur les cellules effectrices) ne diminue pas la résistance des CC JEG-3 A la lyse nk. Ces résultats indiquent que cette résistance est essentiellement indépendante des molécules HLA de classe I, notamment d'HLA-G. Dans la deuxième partie, nous montrons : 1) Qu'en présence de PHA, les CC sont sensibles à la lyse NK ; 2) Que l'engagement des récepteurs activateurs CD16 et 2B4 exprimés par les cellules NK entraine la lyse des CC JAR dans un modèle de lyse redirigée, alors que le ligand de 2B4, la molécule CD48, n'est pas exprimé sur les CC ; 3) Que les CC sont sensibles à l'ADCC exercée par des PBL en présence d'anticorps anti-TJA (produits par les femmes de phénotype P/P qui font des avortements spontanés à répétition). Ainsi l'absence d'activation des effecteurs par les CC, due au moins en partie à l'absence d'expression de ligands des récepteurs activateurs tels que CD48, pourrait constituer un mécanisme de résistance des CC à la lyse NK. Enfin, dans la dernière partie, nous montrons que le blocage de l'interaction molécules HLA de classe I / récepteurs inhibiteurs CD94/NKG2 ou CD158 n'affecte pas la sensibilité à la lyse exercée par des PBL stimulés par l'il-2 (lyse LAK) des cellules lymphoblastoides JY et CC JEG-3, ce qui suggère que les molécules HLA de classe I régulent peu la sensibilité des cellules cibles à la lyse LAK
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Coulbault, Laurent. "Mécanismes impliqués dans la régulation des MAP kinases par les récepteurs opioïdes delta". Caen, 2008. http://www.theses.fr/2008CAEN3010.

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La désensibilisation, l’endocytose et le trafic cellulaire des récepteurs opioïdes jouent probablement un rôle crucial dans la tolérance aux opiacés. Les travaux précédents du laboratoire montrent une régulation différente (en termes d’endocytose et de désensibilisation sur la voie del’AMPc) des récepteurs opioïdes delta humain (hDOP) suivant la nature de l’agoniste. Dans la suite de ces travaux, nous avons étudié la régulation des voies des Mitogen Activated Protein Kinases par des agonistes sélectifs (DPDPE, deltorphine I, UFP-512) et non sélectifs (étorphine, morphine) des récepteurs hDOP dans le modèle cellulaire SK-N-BE, et avons montré : l’activation de la voie ERK1/2 par les différents agonistes, les mécanismes mis en jeu sont similaires; une désensibilisation différente en fonction de la nature de l’agoniste, les résultats sont proches de ceux observés sur la voie de l’AMPc; la voie ERK1/2 n’est pas impliquée dans l’endocytose des récepteurs hDOP; une régulation différentielle du récepteur hDOP (endocytose et désensibilisation sur la voie de l’AMPc) par la β-arrestine 1 en fonction de la nature de l’agoniste, nos résultats suggèrent la présence sur le récepteur de deux sites d’interaction avec la β-arrestine 1, l’un impliqué dans l’internalisation et l’autre dans la désensibilisation; l’absence d’implication des β-arrestines et de l’endocytose des récepteurs hDOP dans l’activation de la voie ERK1/2; un lien entre la capacité d’un ligand (UFP-512) à produire une faible désensibilisation observée sur les voies de l’AMPc et ERK1/2, une endocytose profonde des récepteurs hDOP associée à un recyclage membranaire, et l’absence de tolérance observée in vivo
Opioid receptor desensitization, endocytosis, and cellular trafficking may play an important role in the development of opiate tolerance. Previous studies in our laboratory showed an agonist dependent regulation of human delta opioid (hDOP) receptor observed on cAMP pathway desensitisation and receptor endocytosis. In this work, we studied the effect of selective (DPDPE, deltorphin I, UFP-512) and non-selective (etorphine, morphine) agonists on Mitogen-Activated Protein Kinases pathways in SK-N-BE cell line. Our major findings are summarized as follows: selective and non-selective agonists activate Extracellular signal-Regulated protein Kinases ERK1/2 by similar pathways; as previously demonstrated on the cAMP pathway, chemical structure of agonists affects hDOP receptor desensitization on ERK1/2; ERK1/2 are not involved in the regulation of hDOP receptor endocytosis; a differential hDOP receptor regulation (internalization and desensitization on cAMP pathway) by β-arrestin 1 upon selective and non-selective opioid agonists exposure, our results suggest that β-arrestin 1 can interact with two sites on hDOP receptor producing either desensitisation or internalisation, β-arrestins and hDOP endocytosis are not involved in ERK1/2 activation with opioïd agonists; we demonstrate a link between the propensity of an opioid agonist, UFP-512, to produce a weak desensitization on adenylyl cyclase and ERK1/2 pathways, a strong hDOP endocytosis associated with a significant recycling, and the absence of tolerance in vivo

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Bernis, Cyril. "Caractérisation de nouveaux mécanismes de régulation de la kinase mitotique Cdk1-cycline B". Montpellier 2, 2007. http://www.theses.fr/2007MON20246.

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Le but de ce travail a été de caractériser de nouvelles voies de régulation de la kinase mitotique Cdk1 associée à la protéine régulatrice, Cycline B. La cycline B se lie à Cdk1 et l'active, ceci est nécessaire au bon déroulement de la mitose. Malgré cela, la kinase est maintenue inactive avant la mitose suite à la phosphorylation par les kinases Myt1 et Wee1 sur la thréonine 14 et la tyrosine 15 de Cdk1. Ce sont les phosphatases de la famille de Cdc25 qui permettent de déphosphoryler ces sites et d'activer Cdk1-cycline B lors de la transition G2/M. Ce complexe Cdk1-cycline B est inactivé lors de la sortie de mitose quand la cycline B est ubiquitiné (par le complexe E3-ubiquitine ligase APC (Anaphase Promoting Complex)) et dégradée par le protéasome. Nos travaux ont montré que Pin1 (une peptidyl-prolyl isomérase) empêche la protéolyse de l'inhibiteur mitotique Emi1 (Early Mitotic Inhibitor) en phase G2. En effet le rôle d'Emi1est de permettre l'accumulation de la cycline B, en bloquant l'APC avant l'entée en mitose. Par la suite nous avons montré qu'Emi1 était également stabilisé par Pin1 au cours de la méiose dans les ovocytes de xénope. D'autre part, une autre étude a permis de montrer que la protéine kinase MPS1 (requise au départ lors du point de contrôle du fuseau mitotique) était impliquée dans la transition G2/M, probablement en régulant négativement l'activité de Cdc25. Enfin, nous avons montré que l'isoforme Cdc25C, outre ses fonctions lors de la transition G2/M, est requise pour le maintient de l'activité de Cdk1-cycline B lors de la métaphase de deuxième division de méiose dans les ovocytes de xénope. De façon surprenante, lors de ce travail nous avons mis en évidence que la kinase Wee1, qui est montrée comme inactive en phase M, possède malgré tout une activité de phosphorylation non négligeable à ce niveau, sur Cdk1

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Michel, Virginie. "Les mécanismes de la vulnérabilité à la chaleur : implication des stress systémique et cellulaire". Phd thesis, Université Claude Bernard - Lyon I, 2007. http://tel.archives-ouvertes.fr/tel-00203725.

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Le coup de chaleur est une pathologie grave sans thérapeutique spécifique. Les animaux en coup de chaleur souffrent d'une inflammation accompagnée d'un déséquilibre métabolique en dépit de l'induction de « heat shock proteins » (Hsp70) et de la sécrétion de glucocorticoïdes. Le rôle relatif des ARNm Hsp70 et des glucocorticoïdes dans la tolérance à la chaleur est analysé. Les animaux vigiles intolérants à la chaleur présentent : une hyperthermie et une déshydratation sévères, un déséquilibre métabolique, une moindre sécrétion de glucocorticoïdes, des signes d'hyperactivation et d'agression cellulaires ainsi qu'une activation des processus inflammatoires. L'expression des ARNm Hsp70 est dépendante de l'intensité de l'agression et apparaît comme un mécanisme suiveur. Les glucocorticoïdes sont impliqués dans la tolérance en réduisant le développement des processus inflammatoires locaux et en favorisant l'expression des ARNm du facteur inhibiteur κBα (IκBα).

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Guez, Fanny. "Etude des mécanismes moléculaires impliqués dans le cycle cellulaire des cellules β pancréatiques humaines". Thesis, Paris 5, 2013. http://www.theses.fr/2013PA05T094.

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Abstract (sommario):

Le diabète est une maladie qui touche 347 millions de personnes dans le monde (90% ayant un diabète de type 2) (OMS, septembre 2012). Elle se définit par une perturbation de la régulation de l’homéostasie glucidique avec un déficit dans la fonction des cellules ß du pancréas. Dans le diabète de type 1, ce déficit est provoqué par une destruction autoimmune. Dans le diabète de type 2, il est dû à une insulino-résistance périphérique conduisant à un épuisement des cellules ß qui ne peuvent plus maintenir leur fonction. Une stratégie pour restaurer une masse fonctionnelle de cellules ß est, soit d’induire la prolifération de ces cellules in vitro avant de les greffer, soit d’induire leur prolifération in vivo. Cependant, ceci implique une meilleure compréhension des mécanismes moléculaires impliqués dans le cycle cellulaire des cellules ß pancréatiques humaines. L’objectif de ma thèse a été de disséquer ces mécanismes. Pour cela, nous disposons au laboratoire d’un outil unique, deux lignées de cellules ß pancréatiques humaines. Dans l’une d’elle, les transgènes immortalisant peuvent être délétés. Les cellules arrêtent alors de proliférer donnant des cellules ß pseudo-primaires. En comparant l’expression des régulateurs du cycle cellulaire de la lignée de cellules ß humaine immortalisées aux cellules ß humaine pseudo-primaires, nous avons pu montrer que le cycle de ces cellules était bloqué en phase G1. L’absence de plusieurs protéines responsables de la progression du cycle cellulaire en aval de cette phase a été confirmée dans les îlots humains. Nous avons également observé une diminution du temps de doublement des cellules ß humaines suite à leur traitement avec de la GH et de l’EPO. Suite à ce traitement nous observons également une activation du facteur de transcription STAT5 connue pour son implication dans la prolifération cellulaire des cellules ß de rongeurs. Enfin nous avons étudié l’effet que provoquait un apport nutritif sur la fonction et la prolifération des cellules ß humaines. Nous avons ainsi pu voir que les cellules répondaient mieux à la fonction ß avec un temps de doublement du nombre de cellules plus court dans un milieu enrichi en nutriment. De plus, dans ces conditions, l’autophagie, préexistante avant l’apport de nutriments et vraisemblablement due à un manque en énergie cellulaire, disparait. Ces résultats nous permettent de mieux comprendre les mécanismes contrôlant la prolifération des cellules ß pancréatiques humaines et d’envisager de nouvelles thérapies du diabète
Diabetes is a disease that affects 347 million people worldwide (90% with type 2 diabetes) (WHO, September 2012). It is defined by a disturbance in the regulation of glucose homeostasis with a deficit in function of pancreatic beta cells. In type 1 diabetes, this deficit is caused by autoimmune destruction. In type 2 diabetes, it is due to peripheral insulin resistance leading to a depletion of beta cells that can no longer maintain their function. A strategy to restore a functional beta cell mass is, or of inducing proliferation of these cells in vitro prior to transplant, or to induce proliferation in vivo. However, this implies a better understanding of the molecular mechanisms involved in the cell cycle of human pancreatic beta cells. The aim of my thesis was to dissect these mechanisms. For this, we have a unique laboratory tool, two lines of human pancreatic beta cells. In one of them, immortalizing transgenes may be deleted. Then, the cells stop to proliferate giving pseudo- primary beta-cells. By comparing the expression of cell cycle regulators of the lineage of human beta cells immortalized pseudo- primary human beta- cells, we could show that the cycle of these cells was blocked in the G1 phase. The lack of several proteins responsible for cell cycle progression downstream of this phase has been confirmed in human islets. We also observed a decrease in the doubling time of human beta cells following treatment with GH and EPO. Following this treatment we also observe an activation of the transcription factor STAT5 known for its involvement in cell proliferation of rodent beta cells. Finally, we studied the effect that caused a nutrient supply on the function and proliferation of human beta cells. We have seen that the cells responded better to beta function with a doubling time shorter amount of cells in a nutrient enriched environment. In addition, under these conditions, autophagy, existing before the supply of nutrients and likely due to a lack of cellular energy, disappears. These results allow us to better understand the mechanisms controlling proliferation of human pancreatic ß and consider new diabetes therapies cells

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Heitzler, Domitille. "Modélisation dynamique des mécanismes de signalisation cellulaire induits par l'hormone folliculo-stimulante et l'angiotensine". Phd thesis, Université François Rabelais - Tours, 2011. http://tel.archives-ouvertes.fr/tel-00847767.

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Abstract (sommario):

La signalisation cellulaire induite par les r écepteurs à sept domaines transmembranaires (R7TM) contrôle les principales fonctions physiologiques humaines. Ces R7TMs sont cibles de m édicaments et initient de larges réseaux d'interactions. Nous avons modélisé dynamiquement les réseaux de signalisation du récepteur à l'hormone folliculo-stimulante (FSH) régulant la fonction de reproduction et du récepteur angiotensine, un R7TM modèle régulant la tension pour comprendre le fonctionnement de ces réseaux et prédire des données inaccessibles expérimentalement. Notre modélisation a utilisé des équations différentielles ordinaires, en assimilant une variable par espèce et un paramètre par constante cinétique. Les paramètres manquant ont été déterminés par optimisation paramétrique. Puis, nous avons d éveloppé un environnement afin de comparer plusieurs algorithmes d'optimisation et de créer une nouvelle méthode hybride plus performante et adaptée à la paramétrisation des réseaux de signalisation.

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Morissette, Guillaume. "Séquestration ionique et vacuolisation cellulaire : étude des mécanismes et des répercussions physiologiques et pharmacologiques". Thesis, Université Laval, 2008. http://www.theses.ulaval.ca/2008/25646/25646.pdf.

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Debard, Virginie. "Les mécanismes de la vulnérabilité à la chaleur : implication des stress systémique et cellulaire". Lyon 1, 2007. http://tel.archives-ouvertes.fr/docs/00/20/37/25/PDF/these_definitif_corrigee.pdf.

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Abstract (sommario):

Le coup de chaleur est une pathologie grave sans thérapeutique spécifique. Les animaux en coup de chaleur souffrent d’une inflammation accompagnée d’un déséquilibre métabolique en dépit de l’induction de « heat shock proteins » (Hsp70) et de la sécrétion de glucocorticoïdes. Le rôle relatif des ARNm Hsp70 et des glucocorticoïdes dans la tolérance à la chaleur est analysé. Les animaux vigiles intolérants à la chaleur présentent : une hyperthermie et une déshydratation sévères, un déséquilibre métabolique, une moindre sécrétion de glucocorticoïdes, des signes d’hyperactivation et d’agression cellulaires ainsi qu’une activation des processus inflammatoires. L’expression des ARNm Hsp70 est dépendante de l’intensité de l’agression et apparaît comme un mécanisme suiveur. Les glucocorticoïdes sont impliqués dans la tolérance en réduisant le développement des processus inflammatoires locaux et en favorisant l’expression des ARNm du facteur inhibiteur κBα (IκBα)
Heat stroke is a serious illness without specific treatment. Heat stroked animals exhibit inflammatory processes accompanied by metabolic imbalance. These impairments take place despite of heat shock proteins (Hsp70) induction and glucocorticoid secretion. The role of Hsp70 mRNA and glucocorticoids in heat tolerance has been analyzed. Vigil animals intolerant to heat present: severe hyperthermia and dehydration, metabolic imbalance, lesser glucocorticoid production, signs of cellular hyperactivation and aggression, activation of inflammatory processes. The Hsp70 mRNA expression depends on the intensity of the stressor and appears, in the chain of causality, as a consequence of the heat aggression. Glucocorticoids are involved in tolerance by reducing local inflammatory processes and favouring the expression of the inhibitory factor κBα (IκBα) mRNA

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Rosselin, Manon. "Identification et rôle des mécanismes d'invasion cellulaire indépendants du T3SS-1 chez Salmonella Enteritidis". Thesis, Tours, 2011. http://www.theses.fr/2011TOUR4004/document.

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Abstract (sommario):

Le principal système d’invasion chez Salmonella requiert un système de sécrétion de type III(T3SS-1) qui induit un mécanisme d’entrée de type Trigger. Cependant, d’autres invasine sont été décrites chez Salmonella mais leurs rôles dans la virulence restent peu connus. Nous avons ainsi caractérisé le rôle de Rck en tant qu’invasine chez Salmonella Enteritidis, et démontré par différentes approches que Rck induit un mécanisme d’invasion de type Zipper.L'étude de la cascade de signalisation cellulaire induite par Rck a permis de suggérer un modèle d'internalisation impliquant l’actine, le complexe Arp2/3, les GTPases Rac et Cdc42,Akt, la PI3K de classe I et Src. L'analyse du pouvoir d'invasion d'un mutant de S. Enteritidis cultivé dans des conditions où il est incapable d'exprimer les facteurs d'invasion connus : T3SS-1, Rck et PagN montre l’existence d'autre facteurs d’entrée encore non identifiés chez Salmonella qui semblent induire une invasion de type Zipper et de type Trigger. L’ensemble de ces données font de Salmonella, la première bactérie capable d’envahir les cellules soit via un mécanisme de type Trigger, dépendant au moins du T3SS-1, soit via un mécanisme de type Zipper, dépendant au moins de Rck et révèlent la complexité des mécanismes d’invasion de Salmonella
The main invasion system of Salmonella requires a type III secretion system (T3SS-1) which promotes a Trigger entry mechanism. However, other invasins were described in Salmonella but their roles in virulence remain unclear. We have shown that Salmonella Enteritidis caninvade cells via the Rck outer membrane protein and we have demonstrated by different approaches that Rck mediates a Zipper entry process. Characterisation of the cellular transduction pathway induced by Rck enable us to propose a model of internalisation involving actin, Arp2/3, Rac and Cdc42, Akt, class I PI3K and Src. Finally, the invasion ability of a S. Enteritidis mutant grown under culture conditions that did not allow the expression of any identified invasion factors (T3SS-1, Rck and PagN) provides evidences for still non-characterised Salmonella invasion factors which seem to induce both Zipper and Trigger mechanisms. Overall, our data indicate that Salmonella is the first bacterium found tobe able to invade cells by both a Trigger mechanism at least mediated by the T3SS-1 and a Zipper entry process at least mediated by Rck. Study of the T3SS-1-independent invasion systems could bring to a better understanding of Salmonella pathogenicity, particularly in regard to the different diseases induced by Salmonella and to its great diversity of hosts

Tesi sul tema "Mécanismes de détoxification cellulaire"

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