Tesi sul tema "Lymphocytes innés"
Segui questo link per vedere altri tipi di pubblicazioni sul tema: Lymphocytes innés.
Cita una fonte nei formati APA, MLA, Chicago, Harvard e in molti altri stili
Vedi i top-47 saggi (tesi di laurea o di dottorato) per l'attività di ricerca sul tema "Lymphocytes innés".
Accanto a ogni fonte nell'elenco di riferimenti c'è un pulsante "Aggiungi alla bibliografia". Premilo e genereremo automaticamente la citazione bibliografica dell'opera scelta nello stile citazionale di cui hai bisogno: APA, MLA, Harvard, Chicago, Vancouver ecc.
Puoi anche scaricare il testo completo della pubblicazione scientifica nel formato .pdf e leggere online l'abstract (il sommario) dell'opera se è presente nei metadati.
Vedi le tesi di molte aree scientifiche e compila una bibliografia corretta.
1
Grau, Morgan. "Identification de nouveaux biomarqueurs permettant la caractérisation des lymphocytes T CD8 mémoires innés". Thesis, Lyon, 2016. http://www.theses.fr/2016LYSE1023/document.
Abstract (sommario):
Deux grandes classes de cellules composent le pool de lymphocytes T (LT) CD8 mémoires. D'une part, les LT CD8 mémoires conventionnels sont générés via la reconnaissance spécifique d'antigènes dérivés de pathogènes ou de tumeurs. D'autre part, les LT CD8 mémoires innés sont générés via différents mécanismes impliquant de fortes stimulations par des cytokines γc indépendamment de la reconnaissance d'antigènes du non soi. Le phénotype extrêmement similaire de ces deux populations cellulaires ne permet pas de les distinguer in vivo. En conséquence, la population de LT CD8 mémoires innés est relativement peu caractérisée. Mon travail de thèse comportait donc deux objectifs majeurs : 1 / Identifier des marqueurs permettant de distinguer in vivo ces deux classes de LT CD8 mémoires. 2/ Caractériser la population de LT CD8 mémoires innés. Dans cette étude, nous démontrons qu'au sein du pool de LT CD8 mémoires, seules les cellules conventionnelles expriment la chimiokine CCL5 et le récepteur NKG2D. Ces deux biomarqueurs permettent ainsi pour la première fois de distinguer les LT CD8 mémoires innés et conventionnels in vivo, à la fois chez la souris et chez l'homme. Grâce à l'expression de NKG2D, nous démontrons que ces LT CD8 mémoires innés possèdent des caractéristiques typiques de cellules mémoires, notamment une réactivité augmentée ainsi qu'un programme génétique comparable à celui des LT CD8 mémoires conventionnels. Néanmoins, cette population cellulaire conserve certaines caractéristiques de cellules naïves. Ainsi, le répertoire TCR diversifié de cette population cellulaire permet à ces cellules de participer à des réponses immunitaires primaires contre différents pathogènes. Enfin, dans un contexte inflammatoire, les LT CD8 mémoires innés présentent un défaut d'accès au tissu pulmonaire comparé aux LT CD8 mémoires conventionnels. Ceci corrèle avec un déficit d'expression de certaines intégrines par les LT CD8 mémoires innés. L'ensemble de nos résultats démontre que les LT CD8 mémoires innés, caractérisés par l'absence d'expression de CCL5 et NKG2D, constituent une population cellulaire hybride, à la frontière entre cellules naïves et cellules mémoires conventionnellesThe pool of memory CD8 T cells is composed of two major cell classes. On one hand, conventional memory CD8 T cells are generated consequently to the specific recognition of pathogen or tumor derived antigens. On the other hand, innate memory CD8 T cells are generated through several mechanisms involving strong yc cytokine stimulation in the absence of cognate antigen recognition. However, these cell classes harbor a very similar phenotype. As a consequence, innate memory CD8 T cell population remains poorly characterized. This PhD has two main objectives : 1 / Identify new biomarkers that enable the discrimination between memory CD8 T cell classes 2/ Characterize the population of innate memory CD8 T cells in physiological condition Our results show that among the pool of memory CD8 T cells, only the conventional ones express the chemokine CCL5 and the NK receptor NKG2D. These two biomarkers enable for the first time the discrimination of memory CD8 T cell classes in physiological settings, in both mouse and human. Thanks to these new tools, we show that innate memory CD8 T cells hold typical memory features, such as an increased reactivity compared to naïve cells and a genetic program similar to the one of conventional memory cells. Nevertheless, this cell population also retains some features typical of naïve cells. The diversified TCR repertoire of this cell population allows it to participate to primary immune responses against various intracellular pathogens. Moreover, like naïve cells, innate memory CD8 T cells fail to access peripheral tissues upon local inflammation, which correlate with an absence of expression of some integrins. Altogether, these results demonstrate that innate memory CD8 T cells, characterized by the absence of expression of CCL5 and NKG2D, represent a hybrid cell population, at the boundary between naïve cells and conventional memory cells
2
Cayssials, Émilie. "Les lymphocytes T CD8 innés et immunosurveillance antitumorale : application au modèle de la leucémie myéloïde chronique". Thesis, Poitiers, 2020. http://www.theses.fr/2020POIT1407.
Abstract (sommario):
Nous avons récemment identifié chez l’Homme une nouvelle sous population lymphocytaire T constituée par les lymphocytes T (LT) CD8 innés. Ils possèdent un TCRαβ, expriment le facteur de transcription Eomesodermine, les récepteurs membranaires KIR/NKG2A et sont dotés de fonctions de type « Natural Killer » (NK-like). Leurs caractéristiques phénotypiques et fonctionnelles sont compatibles avec leur définition comme potentiel équivalent humain des LT CD8 « innate memory » décrits chez la souris, dont la génération dépend de la sécrétion de l’IL-4 par les LT exprimant le facteur de transcription « promyelocytic leukemia zinc finger protein » (PLZF), notamment les lymphocytes « invariant Natural Killer T » (iNKT). Nous avons pris appui sur le modèle physiopathologique de la leucémie myéloïde chronique (LMC) pour tester l’implication potentielle des LT CD8 innés dans l’immunosurveillance antitumorale chez l’Homme. Ce choix repose sur le fait qu’en matière de cancers, la LMC constitue un modèle d’étude du rôle du système immunitaire, comme l’attestent les données de la littérature documentant que les lymphocytes sont capables de contrôler la maladie.La LMC est une hémopathie maligne de la famille des syndromes myéloprolifératifs qui résulte de la formation d’un gène chimérique BCR-ABL1, lequel est responsable de l’expression d’une protéine dont l’activité tyrosine kinase est dérégulée. Le traitement de la LMC repose sur une thérapie ciblée non curative : les inhibiteurs de tyrosine kinase (ITK) dont le chef de file est l’imatinib. Nous avons précédemment montré que les lymphocytes iNKT, une sous population T innée dont l’implication dans l’immunosurveillance antitumorale est clairement établie chez l’Homme et la Souris, sont anergiques chez les patients en LMC au diagnostic de la maladie. Leur défaillance fonctionnelle, notamment en termes de sécrétion d’IL-4, est corrigée chez les patients obtenant une rémission cytogénétique complète sous traitement par imatinib. Tout comme pour les lymphocytes iNKT, nos résultats montrent au diagnostic de la maladie un déficit numérique profond des LT CD8 innés, auquel s’ajoute une altération sévère de leurs fonctions NK-like (capacité de sécrétion d’IFN-γ en réponse à une combinaison de cytokines pro-inflammatoires IL-12+IL-18 et de cytotoxicité via CD16). De manière intéressante, nous avons observé chez les patients traités par imatinib et en rémission moléculaire majeure (RMM), une restauration numérique et fonctionnelle partielle en termes de sécrétion d’IFN-γ de type inné des LT CD8 innés. Les données collectées chez les témoins sains, les patients au diagnostic de la maladie et en RMM sous ITK, en mettant en évidence une association entre la fréquence des lymphocytes iNKT et celle des LT CD8 innés, renforcent l’hypothèse de l’existence chez l’Homme, à l’instar de chez la Souris, d’un axe iNKT/ LT CD8 innés. Pour éprouver notre hypothèse que les LT CD8 innés participent au contrôle de la LMC, nous avons analysé leur statut chez des patients en rémission prolongée après arrêt de leur ITK en dépit de la persistance d’une maladie résiduelle tumorale. Chez ces patients, un taux significativement plus élevé de LT CD8 innés est mis en évidence comparativement aux patients en RMM sous ITK et aux témoins sains. Leurs capacités fonctionnelles sont, de plus, restaurées de manière complète en référence aux sujets sains. L’ensemble de ces résultats qui plaide en faveur d’une implication des LT CD8 innés dans l’immunité anti-leucémique au cours de la LMC, nous conduits à émettre l’hypothèse qu’ils pourraient constituer un biomarqueur potentiel du succès d’arrêt du traitement par ITK dans la LMC et nous encouragent à explorer des stratégies d’immunothérapie antitumorale visant à valoriser leurs propriétés fonctionnellesWe have recently identified a new subset of innate T cells in humans, which we have termed « innate CD8 T-cells ». These cells express TCRαβ along with the transcription factor Eomesodermine (Eomes) and KIR/NKG2A membrane receptors. Innate CD8 T-cells share functional and phenotypic features with “innate memory” CD8 T-cells discovered in mice in the early 2000s. The development of these cells depends on the secretion of IL-4 by the T cells expressing the transcription factor Promyelocytic Leukemia Zinc Finger (PLZF), and particularly iNKT, also called « invariant Natural Killer T-cells ». We have used the physiopathological model of chronic myeloid leukemia (CML) to study the potential role of innate CD8 T -cells in anticancer immunity in humans. Indeed, CML is considered to be one of the cancers most sensitive to immunological manipulation. CML is a malignant hemopathy that belongs to the family of myeloproliferative neoplasms characterized by the presence of the BCR-ABL1 oncogene. This oncogene is responsible for expression of the oncoprotein BCR-ABL with deregulated tyrosine kinase activity. Tyrosine kinase inhibitors (TKI) represent the standard of care for CML patients, of which the first in class was Imatinib. This targeted therapy has dramatically improved outcomes CML patients' outcomes, but they cannot achieve a cure. We previously reported that iNKT lymphocytes, a sub-population of innate T cells of which the implication into anti-tumoral immunosurveillance has been clearly demonstrated in human and in mouse models, are anergic in CML patients at diagnosis. Although these cells are functionally impaired, particularly in terms of IL-4 secretion, we have shown that their functional deficiencies are totally restored in CML patients in complete cytogenetic remission upon Imatinib therapy. Similarly to the iNKT lymphocytes, we presently show a major defect in the innate CD8 T-cells during the chronic phase in CML patients compared to those of healthy donors (HD) or patients in major molecular remission (MMR). This numerical defect is associated with a loss of NK-like functions (interferon-γ expression after innate stimulation by IL-12+IL-18 cytokines and with a loss of degranulation after stimulation via CD16). Interestingly, we have observed in patients in MMR under Imatinib a numeric and functional restoration that is at least partial, in terms of interferon-γ secretion after innate stimulation, of the innate CD8 T-cells. In analysis of cohorts of HD, CML patients at diagnosis and those in MMR under TKI, we have observed a correlation between Eomes expression by innate T CD8 T-cells and PLZF expression by iNKT cells. This finding underscores a possible dynamic process of generation of innate CD8 T-cells in humans that would depend on iNKT cells, as is the case in mice. To test the hypothesis that innate CD8 T-cells contribute to the control of CML, we have analyzed their status in a cohort of CML patients who, in spite of a persistent minimal residual disease, had maintained remission (MMR) more than two years after TKI discontinuation. In these patients, we demonstrate a dramatic increase of functional active innate CD8 T-cells as compared to HD and patients in MMR under TKI. All in all, these results underscore the major role of innate CD8 T-cells in anti-leukemic immunity during CML disease. We believe and we will test the hypothesis that the numeric and functional restoration of this subset might constitute a potential biomarker of successful TKI cessation in CML. We will also investigate whether innate CD8 T-cells could be a target for immunotherapy-based strategy
3
Hariss, Fatima. "Etude du rôle des Lymphocytes Intraépithéliaux innés dans la réponse immune protectrice contre Cryptosporidium parvum". Thesis, Université de Lille (2018-2021), 2021. http://www.theses.fr/2021LILUS047.
Abstract (sommario):
Les lymphocytes intraépithéliaux (LIE) résident entre les cellules épithéliales (CE) intestinales et sont donc les premières cellules immunitaires à entrer en contact avec les agents pathogènes. En plus de répondre rapidement à l'infection, ils régulent l'homéostasie intestinale et maintiennent la barrière épithéliale. Ces fonctions sont assurées par différentes sous-populations de lymphocytes T et innés. Les LIE innés ont été identifiés récemment. Ils sont majoritaires dans l'épithélium intestinal à la naissance et lorsque l'immunité adaptative est compromise. Leur rôle dans la réponse immunitaire contre les pathogènes intestinaux reste cependant peu étudié.Au cours de ma thèse, j'ai étudié le rôle des LIE innés dans l'infection à Cryptosporidium, un parasite opportuniste qui infecte l'épithélium intestinal. L'infection est bénigne chez les individus immunocompétents, mais peut être sévère chez les individus immunodéprimés et les enfants.Pour étudier le rôle spécifique des LIE innés, nous avons développé un modèle in vitro qui consiste à co-cultiver des organoïdes intestinaux murins infectés par C parvum avec des LIE innés de souris RAG2-/-. Grâce à ce modèle original, nous avons démontré que les LIE innés contrôlent la prolifération du parasite et bien qu’ils sécrètent l'IFN-ƴ en réponse à C parvum, cette sécrétion n’est pas suffisante pour inhiber la prolifération du parasite. L'effet protecteur des LIE innés est en fait médié par un mécanisme cytotoxique dépendant des granzymes. L’analyse du transcriptome a révélé que les CE infectées régulent négativement la serpinb9b, un inhibiteur de granzyme, et pourraient ainsi être plus sensibles aux attaques cytotoxiquesIntraepithelial lymphocytes (IEL) reside between intestinal epithelial cells and thus are the first immune cells to contact intestinal pathogens. In addition to respond rapidly to infection, they regulate intestinal homeostasis and maintain the epithelial barrier. This wide range of functions is achieved by distinct subsets of T and innate lymphocytes. Innate IEL which share many features with NK/ILC1 cells have been identified recently. These cells dominate the gut epithelium at birth and when the adaptive immunity is compromised. Their role in the immune response against intestinal pathogens remains however poorly studied.During my PhD thesis, I have investigated the role of innate IEL subsets in Crysptosporidium infection. Crysptosporidium is a common parasite that infects the gut epithelium. The infection is self-limiting in immunocompetent individuals, but it can be severe in immunocompromised individuals and children in whom innate IEL dominate.To study the specific role of innate IEL, we have developed an in vitro model that consist to co-culture mice 3D intestinal organoids infected with C parvum with innate IELs from RAG2-/- mice. Thanks to this original model, we demonstrated that innate IELs control parasite proliferation. We further showed that although innate IEL secrete IFN-ƴ in response to C parvum infection, the IFN-ƴ secretion was not sufficient to inhibit parasite proliferation. The protective effect of innate IELs was in fact mediated by a cytotoxic, granzyme-dependent mechanism. Moreover, transcriptomic analysis revealed that infected epithelial cells down regulated serpinb9b, a granzyme inhibitor, and thus may be more sensitive to cytotoxic attack
4
Daniel, Lauren. "Les lymphocytes T CD8 innés, une nouvelle population T non conventionnelle (re)programmée en transplantation rénale". Thesis, Poitiers, 2021. http://www.theses.fr/2021POIT1403.
Abstract (sommario):
Les lymphocytes T (LT) CD8 innés sont une population de LT non conventionnels récemment décrits dans le laboratoire. On les qualifie de « non conventionnels » car ils possèdent des caractéristiques de l’immunité acquise (facteur de transcription Eomesodermine et phénotype T mémoire) mais aussi de l’immunité innée (récepteurs des cellules NK, réponse à une stimulation cytokinique de type inné). Les fonctions de ces cellules sont encore peu connues, même s’il existe un faisceau d’argument en faveur de leur implication dans l’immunité anti-infectieuse et anti-tumorale.Il a été décrit que l’immuno-sénescence et/ou la stimulation antigénique chronique (induite par exemple par les infections virales chroniques au cytomégalovirus ou CMV) entraîne(nt) l’expression de marqueurs NK par les LT. Ce phénotype se rapproche donc de celui de nos cellules d’intérêt. Pour étudier l’effet de la stimulation antigénique chronique sur le compartiment LT CD8, et spécialement sa composante innée, nous avons choisi comme modèle la transplantation d’organe. Dans ce domaine, la recherche s’intéresse aux populations immunitaires susceptibles de jouer un rôle dans la tolérance ou le rejet du greffon. Parmi elles, les LT CD8 innés méritent une attention spéciale, ceci du fait de leurs fonctions innées effectrices/cytotoxiques. Nous avons présumé leur (re)programmation par la stimulation antigénique chronique (du greffon et/ou virale) pendant la transplantation. Cette hypothèse a été testée à partir d’une cohorte de patients transplantés rénaux depuis plus de dix ans, sous traitement immunosuppresseur minimisé (ciclosporine A (CsA) en monothérapie), en l’absence de signe clinico-biologique de rejet. Notre travail a d’abord permis de révéler dans les LT CD8 innés issus des donneurs sains (DS) un phénotype sénescent accentué (fréquence de cellules CD27(-)CD28(-) augmentée) que les LT CD8 conventionnels. En outre, la fréquence de cette population T innée, contrairement aux LT CD8 conventionnels, ne corrélait pas avec l’âge. Dans la cohorte de patients transplantés, nous avons observé une augmentation de la fréquence des LT CD8 innés, accompagnée d’un phénotype sénescent et effecteur terminal (CD45RA(+)CCR7(-)) exacerbé, comparativement aux cellules des DS. Les patients présentant une sérologie positive pour le CMV avaient un phénotype sénescent accru par rapport aux patients présentant une sérologie négative.En altérant la signalisation du TCR, le traitement immunosuppresseur CsA pourrait faciliter la (re)programmation des LT CD8 en faveur de leur versant inné. En accord avec cette hypothèse, une modélisation in vitro des effets de la CsA sur les LT CD8 provenant de DS en présence d’une stimulation du TCR et d’IL-15 a permis de documenter une augmentation du pool de LT CD8 innés au détriment du pool de LT naïfs, laquelle est accompagnée d’une valorisation de leurs fonctions (production innée d’IFN-γ). A l’inverse, chez les patients, les LT CD8 innés étaient dysfonctionnels, avec une production innée d’IFN-γ diminuée qui pourrait résulter de leur expression membranaire diminuée du récepteur de l’IL-15, cytokine indispensable aux LT CD8 innés. Ce dysfonctionnement, qui ne peut être attribué à un programme d’exhaustion ni être relié à un antécédent de cancer, pose la question du rôle de la stimulation allo-spécifique chronique. De façon générale, ce travail suggère que le contexte d’allogreffe rénale entraîne une reprogrammation et un phénotype de type « vieillissement » des LT CD8 innés, liés au moins en partie au traitement immunosuppresseur. Cette hypothèse devra être confortée par une analyse fine de l’allo-spécificité des LT CD8 innés dirigée contre le greffonInnate CD8 T-cells are a non-conventional αβ-T-cell population recently described in our laboratory. We call them “non-conventional” because of their expression of markers from both adaptive immunity (transcription factor Eomesodermin and memory T-cell phenotype) and innate immunity (Natural Killer cell receptors, response to innate-like cytokine stimulation). The functions of innate CD8 T-cells are not well-known, although there are strong arguments for their involvement in anti-infectious and anti-tumor immunity.It has been reported that immunosenescence and/or chronic antigenic stimulation (induced, for example, by chronic viral cytomegalovirus (CMV) infections) result(s) in NK marker expression by T-cells. This phenotype is therefore similar to that of our cells of interest. To study the influence of chronic antigen stimulation on CD8 T-cells, and especially their innate component, we chose organ transplantation as a model. In this domain, research has been focused on immune cell populations that may play a role in graft tolerance or rejection. Among them, innate CD8 T-cells deserve special attention due to their effector/cytotoxic innate functions. We presumed their being reprogrammed by graft and/or viral chronic stimulation during organ transplantation. This hypothesis was tested in a cohort of patients with kidney-transplants for more than ten years, under minimized immunosuppressive treatment (ciclosporin A (CsA) monotherapy), without any clinical and biological sign of rejection. First, our work revealed a more accentuated senescent phenotype (increased frequency of CD27(-)CD28(-) cells) in innate CD8 T-cells from healthy donors (HD) than in their conventional counterpart. Moreover, the frequency of the innate T-cell population, unlike that of conventional CD8 T-cells, did not correlate with age.In the cohort of transplant patients, we observed an increased frequency of innate CD8 T-cells, accompanied by an exacerbated senescent and terminal effector (CD45RA(+)CCR7(-)) phenotype, compared to HD cells. Patients with positive CMV serology had an increased senescent phenotype compared to patients with negative serology.By altering TCR signaling, CsA immunosuppressive therapy could also facilitate the (re)programming of CD8 T-cells in favor of their innate counterpart. In agreement with this hypothesis, in vitro modeling of CsA effects on CD8 T-cells from HD in the presence of IL-15 and TCR stimulation enabled us to document an increased innate CD8 T-cell pool to the detriment of the naive CD8 T-cell pool, accompanied by an enhancement of their functions (innate production of IFN-γ).Conversely, in transplant patients, innate CD8 T-cells were dysfunctional, with decreased innate IFN-γ production, which may result from their decreased membrane expression of the IL-15 receptor, a cytokine essential for innate CD8 T-cells. This dysfunction, which cannot be attributed to cellular exhaustion or cancer history, raises the question of the role of chronic allo-specific stimulation.All in all, this work suggests that the context of renal allogenic transplantation leads to reprogramming and aging-like phenotype of innate CD8 T-cells, linked (at least partially) to immunosuppressive treatment. This hypothesis requires confirmation by a precise analysis of the direct allo-specificity of innate CD8 T-cells against the graft
5
Dupraz, Louise. "Régulation des lymphocytes T innés par le microbiote intestinal Enterobacteriaceae are essential for the modulation of colitis severity by fungi Impaired Aryl Hydrocarbon Receptor Ligand Production by the Gut Microbiota Is a Key Factor in Metabolic Syndrome". Thesis, Sorbonne université, 2019. http://www.theses.fr/2019SORUS598.
Abstract (sommario):
Dès la naissance, un très grand nombre de micro-organismes commensaux tels que bactéries, levures et virus colonise le tractus gastro-intestinal humain. Ce microbiote intestinal est essentiel pour développer les défenses immunitaires de l'hôte contre les infections, permettre une réparation tissulaire et un métabolisme nutritionnel adéquat. Les lymphocytes T gamma-delta, ou lymphocytes T innés sont des cellules T résidentes dans les tissus, impliquées dans l’inflammation intestinale telle que les maladies inflammatoires chroniques de l’intestin (MICI). Placée à l’interface entre l’immunité innée et adaptative, cette population présente des capacités d’activation et des propriétés fonctionnelles qui lui confère des fonctions à la fois bénéfiques et délétères. Décoder leur régulation est cruciale pour prévenir les réponses immunes inappropriées sans compromettre les mécanismes protecteurs intrinsèques. Au cours de ma thèse, nous avons mis en évidence que les acides gras à chaine courte (AGCC), métabolites produits par le microbiote intestinal, sont capables d’inhiber la production d’IL-17 et d’IL-22 par les lymphocytes T innés in vitro et in vivo en diminuant l’activité des histones déacétylases (HDACs) (Dupraz et al. soumis). Ces résultats contribuent à une meilleure compréhension de la physiologie intestinale ainsi que des mécanismes environnementaux impliqués dans les MICI, ce qui ouvre potentiellement des perspectives thérapeutiquesFrom birth, a very large number of commensal microorganisms such as bacteria, yeasts and viruses colonize the human gastrointestinal tract. This gut microbiota is essential to develop the immune defences of the host against the infections, to allow a tissue repair and an adequate nutritional metabolism. Gamma-delta T lymphocytes, or innate T lymphocytes, are resident T cells in tissues, implicated in intestinal inflammation such as inflammatory bowel disease (IBD). Placed between innate and adaptive immunity, this population has activation capacities and functional properties, that give it functions both beneficial and deleterious. Decoding their regulation is crucial to prevent inappropriate immune responses without compromising intrinsic protective mechanisms. During my PhD, we have highlighted that short chain fatty acids (SCFA), metabolites producted by the gut microbiota, inhibit IL-17 and IL-22 productions by innate T cells, in vitro and in vivo by decreasing histone deacetylases (HDACs) (Dupraz et al. submit). These data contribute to a better understanding of the intestinal physiology as well as the environmental mechanisms involved in IBD and thus will open potentially new therapeutic perspectives
6
Chabab, Ghita. "Caractérisation d'une sous-population de LT γδ régulateurs dans les cancers solides humains". Electronic Thesis or Diss., Université de Montpellier (2022-....), 2022. http://www.theses.fr/2022UMONT067.
Abstract (sommario):
Les LT γδ contribuent à l'immunité anti-tumorale au sein du microenvironnement tumoral dans divers cancers. Malgré leurs fonctions effectrices bien décrites, de récentes études ont corrélé leur présence dans le microenvironnement tumoral à une meilleure progression des tumeurs solides, suggérant que les LT γδ peuvent présenter des activités pro-tumorales. Mon projet visait à caractériser ces LT γδ présentant des activités tumorales et à déchiffrer leur rôle dans le cancer. Nous avons démontré in vitro que les signaux inflammatoires favorisent le développement d'une sous-population de LT γδ régulateurs caractérisée par l'expression de CD73 et affichant des fonctions immunosuppressives par la production de molécules immunosuppressives telles que l'IL-10, l'adénosine et le facteur angiogénique et chimiotactique IL-8. Le défi associé à la caractérisation des LT γδ CD73+ réside dans l'évaluation de leur existence in vivo ainsi que de leur pertinence dans les cancers humains. Nous avons montré dans le cancer du sein que ~20% des lymphocytes γδ infiltrant la tumeur (γδ TILs) expriment CD73 et présentent les mêmes fonctions immunosuppressives que celles décrites in vitro, suggérant qu'ils pourraient favoriser le développement tumoral via ces mécanismes. En accord avec ces observations, nous avons montré que la présence de γδ TILs est associée à des grades tumoraux tardifs dans le cancer du sein. Nous avons étendu ces observations au cancer ovarien et montré que la densité des CD73+ γδ TILs est négativement corrélée à la survie des patients, suggérant que la densité des γδ TILs CD73+ pourrait être utilisée comme facteur pronostic en clinique. En utilisant l'imagerie par cytométrie de masse, nous avons étudié les réseaux cellulaires des γδ TILs régulateurs (CD73+) et de leurs homologues effecteurs (CD73-) dans les tumeurs d’ovaire afin de mieux comprendre leur rôle dans le cancer. Nos données montrent des écosystèmes immédiats différents pour les γδ TILs CD73+ par rapport aux CD73 renforçant l'idée que les LT γδ CD73+ et CD73- sont fonctionnellement différents.Dans l'ensemble, ces données améliorent nos connaissances sur l'immunobiologie des LT γδ dans le développement du cancer chez l’Homme, avec notamment la caractérisation approfondie du ce nouvel sous-ensemble de LT γδ régulateurs, leur localisation et leurs fonctions au sein du microenvironnement tumoralΓδ T cells contribute to the anti-tumor immunity within the tumor microenvironment in various cancers. Despite their well-described effector functions, recent studies correlated their presence in the tumor microenvironment with solid tumor progression suggesting that γδ T cells may display pro-tumor activities. My project aimed to characterize those regulatory γδ T cells and decipher their role in cancer.We demonstrated in vitro that inflammatory signals promote the development of a regulatory γδ T cell sub-population characterized by the expression of CD73 and displaying immunosuppressive functions through the production of immunosuppressive molecules such as IL-10, adenosine and the angiogenic and chemotactic factor IL-8. The challenge associated with the characterization of CD73+ γδ T cells resides in assessing their existence in vivo as well as their relevance in human cancers. We showed in human breast cancer that ~20% of tumor infiltrating γδ T lymphocytes (TILs) expressed CD73 and displayed the same immunosuppressive functions as described in vitro, suggesting that they could promote tumor development via these mechanisms. In line with these observations, we showed that the presence of γδ TILs is associated with late tumor grades in breast cancer. We extended such observations to ovarian cancer and showed that the density of CD73+ γδ TILs negatively correlates with patient survival, suggesting that CD73+ γδ TILs density could be used as a prognosis factor. Using Imaging by Mass Cytometry, we investigated the cellular networks of regulatory γδ TILs (CD73+) and their effector counterpart (CD73-) in breast and ovarian tumors to better understand their role in cancer. Our data show different ecosystems for CD73+ compared to CD73- γδ TILs reinforcing the idea that CD73+ and CD73- γδ T cells are functionally different.Altogether, these data improve our knowledge on human γδ T cell biology during cancer development, with the in-depth characterization of the new regulatory γδ T cell subset, their localization and their functions within the tumor microenvironment
7
Velut, Yoan. "Caractérisation des clusters de lymphocytes T CD8+, T régulateurs FoxP3+ et des neutrophiles CD66b+ dans le cancer broncho-pulmonaire et son impact dans l'immunothérapie". Electronic Thesis or Diss., Sorbonne université, 2022. http://www.theses.fr/2022SORUS457.
Abstract (sommario):
Le cancer du poumon est la première cause de mortalité par cancer. Bien qu’ayant bénéficié des nombreuses avancées médicales dans la prévention, le diagnostic et le traitement des cancers, la survie des patients souffrants de cancer du poumon reste médiocre avec une survie à 5 ans d’environ 20%, tous stades confondus. L’influence du système immunitaire sur le contrôle et la progression tumorale est maintenant clairement établie. De nombreuses études ont démontré que la composition en cellules immunitaire du microenvironnement tumoral a un fort impact pronostique et prédictif de la réponse aux traitements. Dans ce contexte, l’immunothérapie ciblant notamment l’axe PD1/PD-L1 et CTLA4 a connu une croissance rapide, mais seulement 20% de patients vont bénéficier de ce traitement dans le cancer pulmonaire. Au delà de la densité des cellules immunitaires, l’influence mutuelle des cellules immunitaires impacte probablement leurs fonctions anti-tumorales et cet élément doit être pris en compte dans l’analyse des tumeurs. Ceci expliquerait les discordances observées entre la densité d’un sous-type cellulaire, la survie attendue et la survie réelle. Les travaux de l’équipe ont montré la présence de proximités cellulaires entre différentes cellules immunitaires du stroma tumoral. Dans ce travail, nous avons déterminé l’impact de ces contacts et les mécanismes cellulaires impliqués. Nous avons quantifié, par une approche d’immunohistochimie multiplexe, les interactions spatiales entre les lymphocytes T CD8+, les lymphocytes T FoxP3+ et les neutrophiles CD66b+ dans le microenvironnement tumoral de 3 cohortes de patients souffrant de cancers broncho-pulmonaires non à petites cellules (CBNPC), traités ou non par immunothérapie, radiothérapie et leurs impacts pronostiques et prédictifs de la réponse aux traitements. Nous avons complété notre étude par des analyses en cytométrie de flux, d’expression de gènes et de protéomique et transcriptomique spatiale. Un Index d’interaction normalisé (IND) a été calculé pour normaliser la densité des interactions entre 2 types cellulaires par rapport à leurs densités respectives. Nous avons montré l’impact pronostique de l’IND, en particulier l’IND CD66b-FoxP3, sur la survie globale. Par cytométrie en flux nous avons observé une diminution de l’expression des checkpoints immunitaires CTLA-4, TIM-3 et LAG-3 et une augmentation de l’expression de PD-1 sur les lymphocytes T CD8+, mais pas sur les lymphocytes T CD4+ lorsque l’IND est élevé. Une analyse d’expression de gènes dans le microenvironnement tumoral a montré que l’IND était lié à un environnement tumoral immunosuppresseur, avec une diminution de l’expression des gènes impliqués dans l’activation et la différenciation des cellules immunitaires, et une surexpression de gènes du versant épithélial de la transition épithélio-mésenchymateuse. Nous avons confirmé ces résultats par Digital Spatial Profiling en analysant l’expression de protéines de l’immunité à l’échelle paucicellulaire. Nous avons observé une augmentation de l’expression des protéines de co-stimulation et d’activation sur les lymphocytes T CD8+ dans les régions d’interaction, comparé aux régions de CD8 « libres ». L’utilisation d’une base de données en ligne de transcriptomique spatiale à l’échelle cellulaire (CosMx) a permis de confirmer la régulation des fonctions immunitaires dans les interactions cellulaires comparé aux cellules « libres » d’interaction. Ces interactions cellulaires influencent la réponse aux thérapies conventionnelles, notamment l’IND CD66b-FoxP3, mais ne parait pas modifier l’efficacité des immunothérapies. L’ensemble de ces résultats suggère que les interactions entre les neutrophiles et les lymphocytes T FoxP3+ favorisent l’activation des lymphocytes T CD8+ et une réponse anti-tumorale efficace, soulignant la complexité de l’immunité anti-tumorale, dont son organisation et les interactions cellulaires présentsLung cancer is the leading cause of cancer death. Although having benefited from numerous medical advances in the prevention, diagnosis and treatment of cancers, survival of patients suffering from lung cancer remains poor with a 5-year survival of approximately 20%, all stages combined. Nowadays, the immune system influence on tumor control and progression is clearly established. Numerous studies have shown that the immune cell composition of the tumor microenvironment has a strong prognostic and predictive impact on the anti-tumor treatment response. In this context, immunotherapy targeting the PD1/PD-L1 and CTLA4 axis has experienced rapid growth, but only 20% of patients will benefit from this treatment in lung cancer. Beyond the density of immune cells, the mutual influence of immune cells probably affects their anti-tumor functions, thus this factor must be taken into account in the analysis of tumors. This would explain the discrepancies observed between the density of a cell subtype, the expected survival and the observed survival. The team's work has shown the presence of cellular proximities between different immune cells in the tumor stroma. In this work, we determined the impact of these contacts and the cellular mechanisms involved. We quantified, by multiplex immunohistochemistry, the spatial interactions between CD8+ T lymphocytes, FoxP3+ T lymphocytes and CD66b+ neutrophils in the tumor microenvironment of 3 cohorts of patients suffering from non-small cell lung cancer (NSCLC ), treated or not by immunotherapy, radiotherapy and their prognostic and predictive impacts of response to treatment. We completed our study using flow cytometry, gene expression and spatial proteomic and transcriptomic. A Normalized Interaction Index (IND) was calculated to normalize the density of interactions between 2 cell types according to their respective densities. We have shown the prognostic impact of IND, particularly IND CD66b-FoxP3, on overall survival. By flow cytometry, we observed a decrease in the expression of immune checkpoints CTLA-4, TIM-3 and LAG-3 and an increase in the expression of PD-1 on CD8+ T lymphocytes, but not on CD4+ T lymphocytes when IND is high. An analysis of gene expression in the tumor microenvironment showed that IND was related to an immunosuppressive tumor environment, with decreased expression of genes involved in immune cell activation and differentiation, and overexpression of genes from the epithelial side of the epithelial-mesenchymal transition. We confirmed these results by Digital Spatial Profiling by analyzing the expression of immunity proteins at the paucicellular level. We observed an increase in the expression of co-stimulatory and activation proteins on CD8+ T cells in interaction regions, compared to the “free” CD8-enriched regions. The use of an online database of spatial transcriptomic at cellular scale (CosMx) made it possible to confirm the regulation of immune functions in cellular interactions compared to cells “free” of interaction. These cellular interactions influence the response to conventional therapies, notably IND CD66b-FoxP3, but do not seem to modify the efficacy of immunotherapy. Taken together, these results suggest that interactions between neutrophils and FoxP3+ T cells promote CD8+ T cell activation and an effective anti-tumor response, highlighting the complexity of anti-tumor immunity, its organization and the presence of cellular interactions
8
Ranson, Thomas. "Homéostasie des lymphocytes de l'immunité innée chez la souris". Paris 7, 2004. http://www.theses.fr/2004PA077150.
9
Deknuydt, Florence. "L'il-17 : polarisation innée et adaptative". Nantes, 2011. http://archive.bu.univ-nantes.fr/pollux/show.action?id=0a95bdaa-9fdf-4d66-bc51-42db3353fd4d.
Abstract (sommario):
Ma thèse a porté sur la caractérisation des origines de cellules pouvant produire de l'IL-17 et appelées les Th17. Ces cellules semblent être impliquées aussi bien dans les maladies auto-immunes que dans certaines infections bactériennes. Dans ces différentes pathologies, deux types cellulaires connus comme cellules immunitaires non conventionnelles : les Tregs et les cellules T γδ jouent un rôle primordial. Les premières données obtenues chez la souris suggéraient que ces deux sous populations étaient capables de produire de l'IL-17. J'ai donc employé plusieurs techniques afin de caractériser les cellules immunitaires humaines capables de produire de l'IL-17 et les conditions nécessaires à cette production. Premièrement, j'ai réalisé un travail sur les cellules du sang périphérique en conditions non infectées. Ces travaux m'ont permis de démontrer la capacité des cellules Tregs et particulièrement des cellules MTregs à se polariser en Th17. J'ai mis en évidence que la présence d'IL-1, d'IL-2 et d'un signal TCR permet au MTreg de se polariser en cellules Th17 et que celles-ci perdent leur capacité suppressive ainsi que l'expression de Foxp3. Dans un deuxième temps, je me suis intéressée à cette cytokine dans un contexte pathologique : la Tuberculose. Pour réaliser ce projet, j'ai utilisé un modèle de formation de granulome humain in vitro mis au point par F. Altare et son équipe. J'ai ainsi pu mettre en évidence la présence d 'IL-17 au sein du granulome mycobactérien aussi bien in vitro que sur des coupes histologiques issues de biopsies de patients. De plus, la population la plus apte à se polariser en cellules productrices d'IL-17 au sein du granulome est la population LT γδ. Chez l'homme, il existe deux sous populations de LT γδ : Vδ2- ou Vδ2. Seule la sous population de δ2- semble être capable de produire de l'IL-17 dans le contexte du granulome mycobactérien humain. J'ai aussi pu mettre en évidence que cette production d'IL-17 survient tardivement, dans les stades avancés de granulomes. Enfin il semble exister un lien entre la présence d"IL-17, des cellules δ1 et de la nécrose, puisque ces cellules sont retrouvées uniquement sur les coupes de patients à lésions nécrotiques et que ceci est associé à la présence d'IL-17 au sein de ces mêmes biopsiesDuring my PhD, I characterized the cells producing the pro-inflammatory cytokine: IL-17. These cells seem to be implicated in autoimmune diseases and some bacterial infections. In these pathologies, the immune system plays an important role and particularly two cell subsets: Treg and γδ T cells. During a first period, I investigated these cells in uninfected PBMCs. During this work I demonstrated the capacity of Treg to polarise into Th17. I also demonstrated that Treg could produce IL-17 when they are activated via the TCR combined with IL-1 and IL-2. Moreover when these cells produce IL-17 they loose the expression of Foxp3 and their suppressive capacity. During a second period, I studied this cytokine in a pathologic context: human tuberculosis. To develop this project, I used an in vitro granuloma model developed by F. Altare’s team. During this work, I demonstrated the presence of IL-17 within characteristic structure of human tuberculosis: the granuloma. This cytokine is present in vitro and in sample biopsies of human granuloma. Moreover, within granuloma, γδ T cells have the best capacity to polarise. In Humans, the γδ T cells are composed of two subset: δ1 and δ2. The δ2 cells are mainly found within epithelia, whereas δ1 are mainly circulating. During my study, I could demonstrate that δ1 cells are the only cells to be able to produce IL-17 within human granulomas. This production is only displayed in late stage of granuloma. A relationship seems to exist between IL-17, δ1 and the necrosis present in the middle of granuloma, because these cells are present only in necrotic biopsies thus strongly suggesting a direct role of δ1-induced IL-17 in necrosis induction
10
Simoni, Yannick. "L’immunité innée dans le diabète sucré". Thesis, Paris 5, 2013. http://www.theses.fr/2013PA05T074/document.
Abstract (sommario):
Le diabète de type 1 (T1D) est une maladie auto-immune caractérisée par la destruction des cellules β du pancréas par les lymphocytes T auto-réactifs. Durant ma thèse, nous nous sommes intéressés au rôle des cellules de l’immunité innée dans le T1D à l’aide d’un modèle murin de la maladie : la souris NOD. Au contraire des cellules du système adaptatif (lymphocytes T et B), les cellules de l’immunité innée constituent la première ligne de défense de l’organisme lors d’une infection. Cette population est constituée entre autre de neutrophiles, cellules dendritiques plasmacytoïdes (pDC), macrophages, mais aussi de lymphocytes T et B non conventionnels tel que les cellules iNKT et B-1a. Précédemment, notre laboratoire a mis en lumière le rôle des lymphocytes iNKT dans le développement du T1D. Durant la première partie de ma thèse, nous avons démontré que les lymphocytes iNKT17, une sous-population des lymphocytes iNKT, ont un rôle délétère dans le T1D chez la souris NOD. Ces cellules infiltrent le pancréas et y produisent de l’IL-17, une cytokine pro-inflammatoire. Grâce à des expériences de transferts, nous avons mis en évidence que les lymphocytes iNKT17 exacerbent la maladie via la production d’IL-17. Dans la deuxième partie de ma thèse, nous nous sommes intéressés aux mécanismes qui induisent l’activation des lymphocytes T auto-réactifs. Nous avons observé chez la souris NOD, que la mort physiologique des cellules β conduit à l’activation de cellules de l’immunité innée : les neutrophiles, les lymphocytes B-1a et les pDC. La coopération entre ces cellules conduit à l’activation des pDC qui produisent de l’IFNα. Cette cytokine active les lymphocytes T auto-réactifs qui vont détruire les cellules β du pancréas. Nos résultats montrent que l’immunité innée est un acteur important dans la physiopathologie du diabète sucréThe type 1 diabetes ( T1D ) is an autoimmune disease characterized by the destruction of β cells in the pancreas by autoreactive T lymphocytes. During my thesis, we are interested in the role of cells of innate immunity in T1D using a mouse model of the disease: NOD mice. In contrast to cells of the adaptive system (T and B lymphocytes ) cells of innate immunity is the first line of defense of the body during infection . This population consists of neutrophils , among other , plasmacytoid dendritic cells ( pDC ) , macrophages , T lymphocytes but not conventional B as iNKT cells and B -1a.Previously, our laboratory has highlighted the role of iNKT cells in the development of T1D . During the first part of my thesis , we demonstrated that iNKT17 cells, a subpopulation of iNKT cells, have a deleterious role in T1D in NOD mice . These cells infiltrate the pancreas and there produce IL -17 , a proinflammatory cytokine. Through transfer experiments , we demonstrated that lymphocytes iNKT17 exacerbate disease through the production of IL-17 . In the second part of my thesis , we investigated the mechanisms that induce the activation of autoreactive T lymphocytes. We observed in NOD mice , the physiological death of β cells leads to activation of innate immunity cells : neutrophils, lymphocytes B- 1a and pDCs . The cooperation between these cells leads to activation of pDC that produce IFNa . This cytokine activates autoreactive T cells which will destroy the β cells of the pancreas. Our results show that innate immunity is an important player in the pathogenesis of diabetes mellitus
11
Posso, Cécilie. "Développement des cellules lymphoïdes innées RORγt⁺". Paris 7, 2011. http://www.theses.fr/2011PA077147.
Abstract (sommario):
RORyt est un facteur de transcription exprimé par différentes populations de la famille des cellules lymphoïdes innées (ILC), parmi lesquelles les cellules inductrices d'organes et les cellules NKR⁺RORyt⁺. Nous proposons ici un modèle de différenciation des ILC RORyt⁺ à partir du progéniteur lymphoïde commun (CLP). Par des cultures clonales de CLP de foie fœtal, nous montrons qu'il existe un progéniteur commun aux cellules B, T, NK et RORyt⁺. Le CLP perd successivement le potentiel B puis T, parallèlement à l'acquisition des marqueurs α4ß7 et CXCR6. L'acquisition de RORyt se fait dans l'environnement du foie fœtal. Les précurseurs RORyt⁺ sont retrouvés dans la circulation sanguine et les ébauches des organes périphériques. Nous identifions deux précurseurs RORyt⁺ distincts, l'un se différenciant en cellules RORyt⁺CCR6⁺ et l'autre en cellules NKR⁺RORyt⁻in vitro. Ces deux précurseurs RORyt⁺se différencient indépendamment dans le foie fœtal et sont observés dans la rate et les ébauches des ganglions mésentériques. Nous établissons également leur potentiel de différenciation in vivo. L'analyse de souris permettant de tracer les cellules ayant exprimé RORyt montre que les cellules NK issues de précurseurs RORyt⁺ se développent et se maintiennent dans les organes périphériques déjeunes souris adultes. L'étude des ILC RORyt⁺adultes montre que la moelle osseuse ne contient pas de cellules RORyt+et que les progéniteurs de la moelle osseuse ne se différencient pas en cellules RORyt⁺/n vitro. Par des expériences de transfert, nous identifions le CLP comme le précurseur des ILC RORyt⁺ observées dans les organes périphériques adultes. Des populations présentant un phénotype de CLP sont observées dans la lamina propria et la rate de souris adultes. Ces CLP périphériques son capables de se différencier in vitro en cellules RORyt⁺, indiquant que le progéniteur adulte des ILC RQRyt⁺ doit migrer vers la périphérie pour recevoir le signal nécessaire à sa différenciationRORyt is a transcription factor expressed by several populations of innate lymphoid cells (ILC), like lymphoid tissue inducer cells and NKR+RORyt+ cells that co-express RORyt and the NK cell receptor, NKp46. Here, we propose a model for RORyt+ ILC differentiation from the common lymphoid progenitor (CLP). Based on clonal assays of fetal liver CLP, we hâve shown that B, T, NK and RORyt+ cells are originating from a common progenitor. CLP lose B and T potential as they express a4b7 and CXCR6 respectively. The acquisition of RORyt occurs in the fetal liver. RORyt+precursors are observed in the blood and in the anlagen of peripheral organs. We have identified two distinct RORyt+ precursors that differentiate into RORyt+CCR6+ and NKR+RORyf cells. These precursors develop independently in the fetal liver. They are also observed in the spleen and the anlagen of mesenteric lymph nodes. We have also established the potential of these precursors in vivo by transfer into immunodeficient mice. The analysis of fate-mapping mice has shown that RORyt+-derived NK cells develop and are maintained in the peripheral organs of young adult mice. In adult mice, the bone marrow does not contain RORyt+ and in vitro cultures of bone marrow progenitors do not give rise to RORyt+ cells. Transfer experiments allowed us to identify the CLP as the progenitor of adult RORyt+ ILC. Populations that display a CLP phénotype are observed in the spleen and the lamina propria of adult mice. These peripheral CLP differentiate into RORyt+cells in vitro, indicating that the adult progenitor of RORyt+ ILC has to migrate to the periphery to receive the signal required for its differentiation
12
Bresler, Priscillia. "Étude de la régulation des cellules lymphoïdes innées par les lymphocytes T chez la souris". Electronic Thesis or Diss., Sorbonne Paris Cité, 2018. http://www.theses.fr/2018USPCB078.
Abstract (sommario):
Plusieurs rapports de la littérature ont relaté que la composition, la fréquence et l'activité des ILC sont fortement impactées dans le contexte d'un déficit du système immunitaire adaptatif chez la souris. Cependant les mécanismes par lesquels l'immunité adaptative régule l'homéostasie des ILC restent en grande partie inconnus. L'objectif de ma thèse a été dans un premier temps d'évaluer l'implication des lymphocytes T dans cette régulation au sein de tissus lymphoïdes tels que les ganglions périphériques et mésentériques et dans l'intestin grêle. Dans un deuxième temps, j'ai entrepris d'identifier les mécanismes de régulation impliqués dans le dialogue entre ILC et lymphocytes T et de déterminer leur spécificité tissulaire. Au cours de ma thèse j'ai pu confirmer que la régulation des ILC3 NKp46+ sécrétrices d'IL-22 de la lamina propria de l'intestin par les lymphocytes T CD4+ repose sur la capacité de ces derniers à participer au confinement des bactéries commensales. Par ailleurs, j'ai également mis en évidence un rôle encore peu étudié des lymphocytes T CD4+ dans la régulation de la fréquence et de l'activité des ILC de type 2 dans les ganglions mésentériques. Ce dernier est indépendant de l'activation des lymphocytes T CD4+ par les antigènes du microbiote et repose en partie sur la régulation indirecte de l'expression de l'alarmine IL-33. En effet, j'ai montré que l'expression du gène codant l'IL-33 est augmentée dans les ganglions mésentériques en absence de lymphocytes T et que la neutralisation de l'IL-33 à court terme a pour effet de réduire significativement la fréquence des ILC2 et leur production de cytokines dans les ganglions mésentériques de souris dépourvues de lymphocytes T. Une collaboration avec le laboratoire de Lucie Peduto à l'Institut Pasteur a permis de montrer que les lymphocytes T pourraient indirectement réguler l'expression de l'IL-33 au sein du compartiment stromal des ganglions mésentériques. Il reste cependant à déterminer les mécanismes par lesquels les lymphocytes T régulent l'expression de l'IL-33 dans les cellules stromales des tissus lymphoïdes. Enfin, l'intervention d'autres facteurs environnementaux dépendants des lymphocytes T reste également à évaluer. Des expériences préliminaires indiquent que les lymphocytes B pourraient jouer un rôle non-redondant dans la régulation des ILC2 par les lymphocytes T dans un contexte de reconstitution du système immunitaire adaptatifMany articles in the literature report that the composition, the frequency and the activity of ILCs are strongly affected when the adaptive immune system is deficient in mice. However, the mechanisms by which adaptive immunity regulates the homeostasis of ILCs remain largely unknown. The objective of my thesis was to address the role played by T cells in this regulation within lymphoid tissues such as peripheral and mesenteric lymph nodes and in the small intestine. I also characterised some of the regulatory mechanisms involved in this dialogue between ILCs and T cells and determined their tissue specificity. During my thesis, I confirmed that the regulation of gut resident ILC3 by CD4+ T cells is based on their ability to participate in the containment and diversification of bacterial communities colonizing the gut. In addition, I have also highlighted the role of CD4+ T cells in the regulation of the frequency and activity of type 2 ILCs in the mesenteric lymph nodes. The latter does not rely on the activation of CD4+ T cells by the gut microbiota. Indeed, I showed that the expression of the gene encoding IL-33 is increased in the mesenteric lymph nodes of T cell deficient mice and that the short-term neutralization of IL-33 signalling in vivo significantly reduces the frequency of type 2 ILCs in the mLNs of these mice. In collaboration with Lucie Peduto's team, we showed that T lymphocytes indirectly regulate the expression of IL-33 by mesenteric lymph nodes stromal cells. However, the mechanisms underlying these interactions remain to be elucidated. Finally, the role of other T-cell dependent environmental factors remains to be characterised. Indeed, our preliminary results indicate that T-B cooperation may be instrumental in the regulation of mesenteric lymph nodes resident ILC2 while it is redundant in the regulation of gut resident type 3 ILCs by CD4+ T cells
13
Soulard, Valérie. "Etude des réponses des lymphocytes NKT et NK à l' infection par Plasmodium yoelii 265BY chez la souris C57BI/6". Paris 6, 2005. http://www.theses.fr/2005PA066358.
14
Mozeleski, Brian Matthew. "The presence of an effector CD4 T cell population at birth". Paris 7, 2014. http://www.theses.fr/2014PA077009.
Abstract (sommario):
La réponse immunitaire chez le nouveau-né est caractérisée par une protection limitée ( < 6 mois) , les réponses Ab faibles ( < 12 à 24 mois) , et le réponses des cellules T restreintes caractérisé par un biaisée vers des réponses Th2. Les réponses de l'IFN minimale produisant cellules T ne parviennent pas à se défendre contre l'infection microbienne contribuant à l'estimation de l'OMS que les enfants 2M entre 1-6 mois meurent chaque année d'infections évitables. Le développement des cellules T humaine commence à 10 semaines de gestation (GW) , où les cellules puis l'évacuation du thymus pour coloniser 1 périphérie. Environ 20 gw , désoxynucléotidyltransférase terminale expression est lancée , conférant la diversité des TCR maximum. [La] Grossesse exige l'établissement d'un état de tolérance foeto-maternelle entre la mère et antigènes foetaux à l'interface du foetus. De même, le foetus se développe des cellules T régulatrices aux antigènes maternels. Par conséquent à la naissance et à l'absence de toute infection foetale , le compartiment des cellules ' contient supposément cellules T naïves seulement et réglementaires. Ici nous avons caractérisé compartiment de cellules CD4 + T périphérique du nouveau-né en fonction de sa maturité et de son potentiel à développer ou à obtenir une diversité de fonctions effectrices. CD127hi et d'expression CD12710 sépare les cellules T CD4 + classiques de Tregs respectivement. En plus de cellules T et CD127hi CD127lowFoxp Tregs , nous avons identifié une petite population de cellules CD45RO + CD127hi dépourvu d'expression Foxp3 dans le sang de cordon. Ces cellules représentent environ 3% de la population totale de lymphocytes CD4 + et sont toujours associés à tous les échantillons de sang de cordon ( n = 10) , et l'absence de toute infection naturelle rapporté du foetus. À la suite de l'anti-CD3 et anti- CD28 stimulation , et à l'intérieur de ces 'cellules produites heures Thl et Th2 cytokines effectrices de l'IFN- y , IL-13 et IL-4, mais l'IL - 22 et IL- 17 a pas été détecté. La présence d' adultes Th sous-ensemble associé chimiokines récepteurs ( CXCR3 , CCR4 , CCR6 ) dans le sang du cordon parrainé la sous-ensembles Th putatifs classiques de réponse d cytokine et a montré que la réponse IFN a pu être isolé à CXCR3 + , alors que l'IL- 4 et IL- 13 étaient produit sur tous les sous-ensembles exprimait une CCR associé Th de sous-ensemble. Comparaisons directes d'analyse de puces à ADN de sang de cordon par rapport aux sous-ensembles putatif T Th adulte défini des sous-ensembles ont révélé des signatures de l'adulte comme distinctes , ainsi qu'un degré de plasticité à partager les fonctions Th2 like tels que IL-4 et IL-13 production. La preuve éclatante que le compartiment des cellules T matures existe à la naissance soulève la question de savoir comment la mémoire T classique se développe et quels antigènes stimulent une réponse. Dans l'ensemble, ces cellules T mémoires peuvent également influer sur le développement des réponses des lymphocytes T en début de vie et offrir un aperçu important pour la conception de nouveaux et futurs vaccins néonatalsThe immune response in the newbom is characterized by limited protection (<6 mo), low Ab responses (<12-24 mo), and limited T cell responses characterized by a biased towards Th2 responses. Minimal IFN-D producing T cell— responses fail to defend against microbial infection contributing to the WHO estimation that 2M children between 1-6 mo die each year from preventable infections. Human T cell development begins at —10 gestational weeks (g. W. ) where cells then egress from the thymus to colonize the periphery. Around 20 g. W. , terminal deoxynucleotidyl transferase expression is initiated, conferring maximum TCR diversity. Pregnancy requires establishment of a feto¬maternai tolerance state between mother and fetal antigens at the fetal interface. Similarly, the fetus develops regulatory T cells to maternai antigens. Therefore at birth and in the absence of any fetal infection, the T cell compartment putatively contains only naïve and regulatory T cells. Here we characterized the newbom' s peripheral CD4+ T cell compartment in ternis of its maturity and its potential to develop or elicit a diversity of effector functions. CD127hi and CD12710 expression separates conventional CD4+ T cells from Tregs respectively. Apart from CD127hi T cells and CD127lowFoxp3 Tregs, we identified a small population of CD45RO+CD127hi cells devoid of Foxp3 expression in cord blood. These cells represent around 3% of the total CD4+ population and were consistently found in ail cord blond samples (n=10), in the absence of any reported natural infection of the fetus. Following anti-CD3 and anti-CD28 stimulation, and within hours these cells produced Thl and Th2 effector cytokines IFN-y, IL-13, and IL-4, but IL-22 and IL-17a remained undetected. The presence of adult Th subset associated chemokine receptors (CXCR3, CCR4, CCR6) in cord blond promoted the screening conventional putative Th subsets for cytokine response and showed that the 1FNy response could be isolated to CXCR3+ while IL-4 and IL-13 were produced on ail subsets expressing a Th subset associated CCR. Direct microarray analysis comparisons of putative cord blood Th subsets versus defmed adult Th subsets revealed distinct adult-like signatures as well as a degree of plasticity in sharing Th2-like functions such as IL-4 and IL-13 production. The striking evidence that a mature T cell compartment exists at birth raises the question of how conventional T memory develops and winch antigens stimulate a response. Overall, these T memory cells may also influence the development of T cell responses in early life and offer important insight for the design of new and future neonatal vaccines
15
Simoni, Yannick. "L'immunité innée dans le diabète sucré". Phd thesis, Université René Descartes - Paris V, 2013. http://tel.archives-ouvertes.fr/tel-00944309.
Abstract (sommario):
Le diabète de type 1 (T1D) est une maladie auto-immune caractérisée par la destruction des cellules β du pancréas par les lymphocytes T auto-réactifs. Durant ma thèse, nous nous sommes intéressés au rôle des cellules de l'immunité innée dans le T1D à l'aide d'un modèle murin de la maladie : la souris NOD. Au contraire des cellules du système adaptatif (lymphocytes T et B), les cellules de l'immunité innée constituent la première ligne de défense de l'organisme lors d'une infection. Cette population est constituée entre autre de neutrophiles, cellules dendritiques plasmacytoïdes (pDC), macrophages, mais aussi de lymphocytes T et B non conventionnels tel que les cellules iNKT et B-1a. Précédemment, notre laboratoire a mis en lumière le rôle des lymphocytes iNKT dans le développement du T1D. Durant la première partie de ma thèse, nous avons démontré que les lymphocytes iNKT17, une sous-population des lymphocytes iNKT, ont un rôle délétère dans le T1D chez la souris NOD. Ces cellules infiltrent le pancréas et y produisent de l'IL-17, une cytokine pro-inflammatoire. Grâce à des expériences de transferts, nous avons mis en évidence que les lymphocytes iNKT17 exacerbent la maladie via la production d'IL-17. Dans la deuxième partie de ma thèse, nous nous sommes intéressés aux mécanismes qui induisent l'activation des lymphocytes T auto-réactifs. Nous avons observé chez la souris NOD, que la mort physiologique des cellules β conduit à l'activation de cellules de l'immunité innée : les neutrophiles, les lymphocytes B-1a et les pDC. La coopération entre ces cellules conduit à l'activation des pDC qui produisent de l'IFNα. Cette cytokine active les lymphocytes T auto-réactifs qui vont détruire les cellules β du pancréas. Nos résultats montrent que l'immunité innée est un acteur important dans la physiopathologie du diabète sucré.
16
Tout, Issam. "Rôle du TLR9 et des lymphocytes B dans l'échappement du virus de l'hépatite B à l'immunité innée". Thesis, Lyon, 2017. http://www.theses.fr/2017LYSE1308/document.
Abstract (sommario):
L'infection chronique par le virus de l’hépatite B (HBV) est un problème de santé majeur dans le monde et peut conduire à la cirrhose et à l’hépatocarcinome. Des réponses défectives des cellules T ont été démontrées, mais les événements précis qui peuvent contribuer à l'insuffisance des réponses des cellules B restent à déterminer. L'expansion et la différenciation optimales des cellules B reposent sur l'activité du récepteur Toll Like Receptor 9 (TLR9) qui détecte l'ADNdb et est exprimée chez l'homme principalement par les cellules dendritiques plasmacytoïdes (pDC) et les cellules B. L'impact de HBV sur TLR9 dans les cellules B humaines reste à explorer. Dans cette étude, nous avons exploré les effets de HBV sur l’expression et les fonctions médiées par TLR9 dans les cellules B humaines en utilisant une lignée cellulaire de cellules B ainsi que des lymphocytes B primaires. De plus, on a corroboré nos résultats dans une cohorte de patients HBV chroniques. L'expression de TLR9 a été réduite chez les toutes les sous-populations de cellules B du sang périphérique, exposées au VHB. Les fonctions des cellules B médiées par TLR9 comme la prolifération et la sécrétion de cytokines pro-inflammatoires ont été abrogées en présence de HBV. Nos résultats montrent que l’antigène de surface HBsAg inhibe la phosphorylation du facteur de transcription CREB qui ne peut plus se lier sur son site CRE situé sur le promoteur TLR9 ce qui affecte la transcription de ce dernier. Enfin, nous avons corroboré nos résultats in vitro dans une cohorte de porteurs chroniques du HBV et constaté que l'expression et la fonction de TLR9 étaient significativement diminuées. Nos résultats révèlent le mécanisme qui induit une réponse immunosuppressive par HBV sur la fonction TLR9 dans les cellules B humaines, ce qui peut contribuer à la persistance de ce virus chez l'hôte et la complication de la phase chronique de la maladieChronic HBV infection is a major health problem worldwide. Ineffective T cell and antibody responses have been demonstrated, yet the precise events that may contribute to insufficient B cell responses remain to be determined. Optimal B cell function, expansion and differentiation rely on Toll Like Receptor 9 (TLR9) activity which senses dsDNA and is expressed in human mainly by plasmacytoid dendritic ( pDC) and B cells. The impact of HBV on TLR9 in human B cell subsets remains to be explored.Here, we investigated the effects of HBV on TLR9 function in human B cells. Both primary and B cell lines were used to analyze the effect of HBV on TLR9 expression and function. These results were corroborated in a cohort of chronically infected HBV patients. TLR9 expression was reduced in all peripheral blood B cells subsets exposed to HBV. B cell function mediated by TLR9, such as proliferation and pro-inflammatory cytokines secretion were abrogated in the presence of HBV. Our results show that the viral surface antigen HBsAg inhibited the phosphorylation of the transcription factor CREB which could no longer bind the CRE site located on the TLR9 promoter. Finally, we corroborated our in vitro findings in a cohort of chronic HBV carriers (CHB) and found that TLR9 expression and function were significantly suppressed.Our findings reveal the mechanism that induces an immunosuppressive response by HBV on TLR9 function in human B cells, which may contribute to HBV persistence in the host
17
Thierry, Antoine. "Implication de l'immunité innée au cours des phénomènes d'ischémie-reperfusion : rôle de l'axe IL-33/lymphocytes iNKT". Thesis, Poitiers, 2013. http://www.theses.fr/2013POIT1409.
Abstract (sommario):
Les lésions d'ischémie reperfusion (IR) sont indissociables de la transplantation et leur sévérité impacte sur le devenir du greffon. Les mécanismes physiopathologiques de ces lésions restent méconnus. Les molécules HMGB1 et IL-33 sont des alarmines, capables d'initier la réponse inflammatoire et pourraient être de potentiels biomarqueurs de l'IR. Le porc est un modèle pertinent d'IR. Les cellules iNKT étant une composante de l'immunité innée impliquée dans l'IR, nous avons d'abord identifié et caractérisé ces cellules dans le sang périphérique du porc puis montré qu'elles étaient ciblées par l'IL-33. Nous avons ensuite cherché à déterminer le rôle des alarmines après IR en transplantation rénale chez l'homme. Les excrétions urinaires d'HMGB1 et d'IL-33 sont augmentées précocement après la reperfusion et les taux urinaires et sériques d'IL-33 sont corrélés avec la durée d'ischémie froide. In vitro, les cellules veineuses ombilicales humaines soumises à une séquence d'hypoxie libèrent de l'HMGB1 et de l'IL-33, alors que seule cette dernière est produite durant la phase de réoxygénation. De plus, nous avons montré que les leucocytes périphériques des receveurs étaient ciblés par HMGB1 et IL-33, comme en témoigne l'augmentation des transcrits de leurs récepteurs. Nous avons enfin mis en évidence que les cellules iNKT, ciblées par l'IL-33 mais pas par HMGB1, étaient activées une heure après transplantation. Ces résultats confortent l'hypothèse d'un rôle de l'IL-33 en tant que médiateur de la réponse immunitaire innée au cours de l'IR rénale chez l'hommeIschemia reperfusion injury (IRI) is inherent to the transplantation process and its severity is correlated with graft outcome. The pathophysiological mechanisms of these lesions are still poorly understood. The endogenous molecules high mobility group box 1 (HMGB1) and interleukin (IL)-33 have been identified as alarmins, capable of initiating the inflammatory response and thereby to be potentially useful biomarkers in IRI. The pig is a relevant preclinical model to investigate IRI. Because iNKT cells are a component of innate immunity implicated in IRI, we first identified and characterized these cells in pig peripheral blood and showed that they are targeted by IL-33. We then addressed the role of alarmins as innate immune mediators in IRI following human kidney transplantation. Urinary HMGB1 and IL-33 levels were increased early after reperfusion, whereas increased serum and urinary IL-33 were positively correlated with cold ischemia time. In vitro, human umbilical vein endothelial cells subjected to hypoxia conditions released both HMGB-1 and IL-33, while only the latter was further increased upon subsequent re-oxygenation. Moreover we showed that peripheral leukocytes from recipients are potentially targeted by both HMGB1 and IL-33, as attested by increased transcription of their respective receptors. Consistent with this view, we found that iNKT cells that are targeted by IL-33 but not by HMGB1 were activated as soon as 1 hour post-transplantation. Altogether, these results are in keeping with a potential role of IL-33 as an innate-immune mediator during kidney IRI in humans
18
Lisbonne, Mariette. "Rôle des lymphocytes iNKT dans les réponses immunes innée et acquise : application à l' asthme allergique expérimental". Paris 7, 2005. http://www.theses.fr/2005PA077037.
19
Lafarge, Sandrine. "Signalisation dans le lymphocyte B humain au décours de son activation in vitro via les molécules de l'immunité innée". Saint-Etienne, 2008. http://www.theses.fr/2008STET007T.
Abstract (sommario):
Une activation lymphocytaire B anormale ou déréglée est souvent la cause de nombreuses maladies auto-immunes ou cancéreuses, en particulier onco-hématologiques. Cette activation cellulaire est sous le contrôle de différentes voies de signalisation intracellulaire d'où l'émergence de nombreux axes d'études sur le rôle et la modulation de la signalisation. L'objectif de mon travail de thèse était donc d'étudier la signalisation dans les lymphocytes B in vitro dans un contexte expérimental inflammatoire. Les cytokines/chimiokinies et les TLR ayant un rôle majeur dans l'inflammation, nous avons dans un premier temps, détecté l'expression du TLR9 par les lymphocytes B. Ainsi, nous avons identifié deux populations lymphocytaires B distinctes (naïve et mémoire) exprimant toutes deux le TLR9 membranaire. Après stimulation par le sCD40L, l'IL-2, l'IL-10 et des oligonucléotides de type CpG-ODN, ces populations produisaient d'importantes quantités d'IL-6. Cette dernière induisant la différenciation des lymphocytes B en plasmocytes, ces données montrent le rôle indirect de la signalisation via le TLR9 dans la production d'anticorps en réponse à un signal de danger. Par la suite, nous nous sommes posé la question des mécanismes sous-jacents entrant en jeu lors de l'activation des lymphocytes B et nous sommes donc intéressés plus précisément à la signalisation intracellulaire. Tout d'abord, nous avons développé une technique d'analyse de cytométrie en flux permettant d'observer les voies de signalisation NF-κB et STAT3. Ensuite nous avons cherché à savoir si la voie de signalisation STAT3 était impliquée dans la production d'IgA lorsque le BCR n'était pas engagé par un antigène c'est à dire en cultivant des lymphocytes B en présence de sCD40L, IL10 et TGF-β. Nous avons tout d'abord montré que la production d'IgA, dans ce modèle, ne nécessitait pas d'ajout de TGF-β exogène et que cette production dépendait bien des voies intracellulaires NF-κB et STAT3. De plus, la voie STAT3 était directement activée par l'IL-10 sans dépendance vis à vis de IL-6 et coopérait avec la voie NF-κB, ce qui rendait la voie STAT3 encore plus sensible à l'IL-10 en augmentant l'expression d' IL-10R par les lymphocytes B. Ces travaux montrent une fois de plus l'importance de la voie intracellulaire STAT3 dans les réponses immunitaires. Le rôle prépondérant de la voie STAT3 dans le développement lymphocytaire B la désigne comme une cible potentielle pour le développement de vaccins muqueux, en particulier pour l'obtention de réponses humorales (IgA) aux interfaces muqueuses.
20
Lim, Ai Ing. "Cytokine control of human innate lymphoid cell development and function". Thesis, Sorbonne Paris Cité, 2017. http://www.theses.fr/2017USPCC272/document.
Abstract (sommario):
Les cellules lymphoïdes innées (ILC) représentent une famille de cellules hématopoïétiques récemment identifiée, qui joue un rôle essentiel dans la réponse immunitaire précoce via la production rapide de cytokines. Trois groupes - ou types - d’ILC ont été définis selon l’expression de certaines molécules membranaires ou intracellulaires, ainsi que la production différentielle de cytokines. Les ILC du groupe 1 (ILC1) expriment le facteur de transcription(FT) T-BET et sécrètent des cytokines inflammatoires de la réponse immune de type 1, l’IFN-? et le TNF-?. Les ILC2 sécrètent des cytokines associées à la réponse immune de type 2,notamment l’IL-5 et l’IL-13, et ce de façon dépendante du FT GATA-3. Enfin, les ILC3 se caractérisent par la production de cytokines telles que l’IL-17 et l’IL-22, et expriment le FTROR?t. J’ai étudié en utilisant des techniques de biologie moléculaire et cellulaire, et à partir d’échantillons sanguins et tissulaire de donneurs sains ou de patients atteints de maladies inflammatoires chroniques, la fonction de ces trois groupes d’ILC chez l’homme. Ces travaux ont permis la construction d’un nouveau modèle de développement de ces cellules à partir de précurseursInnate lymphoid cells (ILC) represent a novel family of hematopoietic effectors that serve essential roles in early immune response by rapid cytokines production. Three distinct groups of ILC subsets have been described. Group 1 ILC include cytotoxic natural killer (NK) cells and other type-1 cytokines (IFN-? and TNF-?) producing cells that regulated by T-BET. Group 2 ILC (ILC2) express GATA-3 and ROR?, secrete type-2 cytokines, IL-5 and IL-13. Group 3 ILC (ILC3) utilize ROR?t to drive production of the TH17-associated cytokines, IL-17 and/or IL-22. In this thesis, I have performed series of experiments to uncover the developmental pathway and function of human ILC that may allow us to harness ILC in diverse clinical settings. First, I analyzed the phenotypic and functional heterogeneity of human peripheral blood ILC2. I found human IL-13+ ILC2 can acquire the capacity to produce IFN-?, thereby generating ÔplasticÕ ILC2. ILC2 cultures demonstrated that IFN-?+ ILC2 clones could be derived and were stably associated with increased T-BET expression. The inductive mechanism for ILC2 plasticity was mapped to the IL-12/IL-12R signaling pathway and was confirmed through analysis of patients with Mendelian susceptibility to mycobacterial disease (MSMD) due to IL-12R?1 deficiencies that failed to generate plastic ILC2. This IL-13+IFN-?+ ILC2 are detected ex vivo in gut tissues from CrohnÕs patients. Second, I identified and isolated ILC precursors (ILCP) in peripheral blood of healthy donors. This circulating ILCP can give rise to four lineages of mature ILC including cytotoxic NK cells and helper ILC1, 2 and 3 in vitro and in vivo. Transcirptomic and epigenetic analysis showed ILCP have ILC-committed transcription factor profiles but have mature ILC signature locus at the epigenetics poised states. We further identified ILCP in various tissues including fetal liver, cord blood, postnatal lung and tonsil. Our result proposed a new model of ÒILC-poiesisÓ where circulating ILCP serve as cellular substrates to generate mature ILC subsets in tissues. Understanding the role of IL-12 on driving ILC2 to ILC1 plasticity may allow us to target plastic ILC2 in various diseases. The identification and isolation of ILCP from circulating blood allow further transfer into clinical setting for cellular therapy, especially for various diseases that ILC has been shown to be importance including infection, allergy, cancer and metabolic diseases
21
Vourc'h, Mickaël. "Immunosubversion du Lymphocyte Natural Killer par Pseudomonas aeruginosa". Thesis, Nantes, 2017. http://www.theses.fr/2017NANT1042/document.
Abstract (sommario):
Pseudomonas aeruginosa (PA) est un pathogène opportuniste responsable d’infections pulmonaires chez le patient immunodéprimé. Parmi ses facteurs de virulence, PA exprime le système de sécrétion de type III (SSTIII) et ses effecteurs (Exoenzymes S, T et Y). Les cellules Natural Killer (NK) jouent un rôle clef dans la défense antibactérienne et particulièrement anti-PA. Leur activation est dépendante du microenvironnement myéloïde. Les NKs présentent 2 fonctions principales : La sécrétion de cytokine et la libération de granules cytotoxiques capables de lyser les cellules anormales. Nous avons étudié l’effet de PA sur ces 2 aspects. Les manipulations in-vitro ont été réalisées sur cellules de volontaires sains (PBMC), NK triées à partir de PBMC et 2 lignées NK humaines (NK92 et NK3.3). Un modèle de pneumonie murine à PA nous a permis de confirmer nos hypothèses in vivo. L’activité cytotoxique a été évaluée par exposition des NKs à des cibles déficientes en HLA de type I (lignée 721.221). Au cours de l’infection, la NK nécessite une stimulation IL-12 pour synthétiser de l’IFN-g. PA augmente la réponse IFN-g comparée à la stimulation IL-12 en condition non infectée. Cette modulation nécessite un contact direct entre PA et la cellule. Parmi les effecteurs du SSTIII, l’ExoT régule la réponse IFN-g via un mécanisme dépendant de ERK. Concernant la fonction cytotoxique, l’activité de la NK diminuait de façon importante après infection à PA. Cette altération de fonction est multifactorielle avec notamment une modification du répertoire activateur (NKG2D) de la cellule NK et une influence du microenvironnement en particulier des lymphocytes TPseudomonas aeruginosa (PA) is an opportunistic pathogen that causes lung infections in immunosuppressed patients. Among its virulence factor PA expresses the type III secretion system (T3SS) and effector Exoenzymes (ExoS, T and Y). Natural killer (NK) cell plays a key role in anti-bacterial immunity especially after PA infection. Their activation is highly dependent on their microenvironment especially on myeloid cells. NK cell exhibits two main functions: Cytokines production and cytotoxicity toward stressed or abnormal cells. We studied PA influence on these two main functions. We used peripheral blood mononuclear cells (PBMC), sorted human NK cells and two human NK cell lines (NK92, NK3.3) for in vitro experiments and a PA-pneumonia mouse model to validate our hypothesis in vivo. Degranulation was assessed by cytotoxicity assay, exposing NK cells to 721.221 targets lacking HLA-A, B and C class I antigens. NK cells required IL-12 priming to produce IFN-g in response to the infection and PA increased IFN-g activity as compared to IL-12 stimulation in noninfected conditions. The modulation of IFN-g production after PA infection required bacteria-to-cell contact. Among T3SS and its effector, ExoT is the key regulator of IFN-g activity through a ERK dependant signalisation. Our hypotheses were confirmed in vivo. Alongside with cytokine function, CD107a activity, a surrogate marker of degranulation (Cytotoxic function), dramatically decreased after NK cells infection with PA. Cytotoxicity impairment could be explained by the modification of NK cells receptor expression after infection (notably NKG2D) or accessory cells, especially T cells
22
Brest, Patrick. "Interaction entre les Escherichia coli pathogènes et la muqueuse intestinale : mécanismes cellulaires et moléculaires de la réponse immunitaire innée induite par les facteurs de virulence bactériens". Nice, 2003. http://www.theses.fr/2003NICE4038.
Abstract (sommario):
Escherichia coli (E. Coli) est la bactérie la plus fréquente du tube digestif. Bien qu'habituellement saprophytes, certaines de ces bactéries peuvent être pathogènes responsables alors de diarrhée aigue͏̈ Des souches d'E. Coli sont également potentiellement impliquées dans la physiopathologie des maladies inflammatoires chroniques de l'intestin (MICI), essentiellement représentées par la rectocolite ulcérative et la maladie de Crohn. Ces bactéries et/ou l'inflammation chronique qu'elles peuvent déclencher et pérenniser, pourraient jouer un rôle dans la transformation dysplasique puis néoplasique de la muqueuse colique. Cette transformation surviendrait notamment chez certains patients présentant une susceptibilité génétique, et selon des mécanismes moléculaires encore incertains. Le but de ce travail a été d'étudier les différentes conséquences in vitro de l'interaction entre différentes populations cellulaires présentes au niveau de la muqueuse intestinale (cellules épithéliales, lymphocytes et polynucléaires neutrophiles) avec certains groupes d'E. Coli pathogènes, les DAEC, ou avec une toxine, le facteur cytotoxique nécrosant ou CNF1, produite par des souches d'E. Coli appelées NTEC. Cette étude a montré que l'activation par le CNF1 de la petite protéine G Rho présente au niveau des lymphocytes, augmentait l'adhérence de ces lymphocytes au niveau de l'épithélium intestinal et induisait alors des altérations morphologiques de cet épithélium. Nous avons également observé que le CNF1, via l'activation permanente sur les cellules épithéliales des petites protéines Rho, retarde leur cicatrisation après blessure mécanique. Une deuxième partie de ce travail a permis de montrer que l'adhérence des DAEC au niveau de l'épithélium intestinal induisait le recrutement des polynucléaires neutrophiles. Cette étude a également permis de montrer que la migration des neutrophiles induite par les DAEC conduisait à une augmentation d'expression de leurs récepteurs (DAF-CD55) à la surface des cellules épithéliales, réalisant ainsi une boucle d'amplification positive en potentialisant leur adhérence. Ce travail s'est poursuivi par l'analyse des conséquences de l'infection des polynucléaires neutrophiles par les DAEC, montrant en particulier l'induction de l'apoptose de ces cellules associée à leur agrégation, en l'absence d'internalisation intracytoplasmique. L'ensemble de ces travaux apporte ainsi des éléments nouveaux sur la connaissance de la physiopathologie des infections intestinales induites par certains groupes d'E coli et sur la caractérisation de certains facteurs de virulence produits par ces bactéries.
23
Pallandre, Jean-René. "Régulation de l'activation des cellules NK par les cellules dendritiques et étude des interactions entre le système immunitaire inné et adaptatif". Besançon, 2008. http://www.theses.fr/2008BESA3009.
Abstract (sommario):
La rencontre entre un lymphocyte NK et une cellule présentatrice d'antigène (la cellule dendritique, DC) est un évènement central dans l'initiation et le développement de la réponse immunitaire adaptative. L'interaction entre ces deux cellules entraîne des réorganisations moléculaires au niveau de l'aire de contact intercellulaire conduisant à la formation d'une structure dynamique et spécialisée remplissant diverses fonctions biologiques : la synapse immunologique (SI). Cette interaction permet à un lymphocyte NK de s'activer et de mettre en place une signalisation intracellulaire à la production de cytokines comme l'IFN-γ qui permettra une amplification sélective de la réponse immunitaire adaptative de type Th1. - Les lymphocytes T CD4+CD25+FoxP3+ régulateurs (Treg) jouent un rôle essentiel dans le maintien de la tolérance périphérique au soi. Leur absence conduit au développement de syndromes lymphoprolifératifs auto-immuns. Les Treg sont également impliqués dans le contrôle des réponses immunitaires anti-infectieuses et ont un rôle délétère lors des réponses immunitaires anti-tumorales. - Mon travail de thèse présente les interactions entre ces différents partenaires et les modalités de régulation de l'initiation des réponses immunitaires. Nous avons évalué ainsi l'implication de la chimiokine CX3CL1 lors de la formation de 1e SI NK-DC et le rôle de l'IFN-γ sécrété par les cellules NK dans l'initiation des réponses immunes. - Ce travail a permis d'identifier CX3CL1 comme étant une molécule clef impliquée dans l'initiation de la SI NK-DC; et de montrer que l'IFN-γ favorise une polarisation Th1 en réprimant la conversion périphérique des Treg exprimant FoxP3. Ainsi, ces deux molécules exerceraient un rôle primordial dans les interactions entre les réponses innées et adaptatives. - Dans un second temps, nous avons évalué l'influence du facteur de transcription STAT3 dans les mécanismes moléculaires permettant la génération et les fonctions des Treg et de leurs conséquences au niveau de la réponse immune anti-tumorale. - Ces résultats nous ont permis d'identifier STAT3 comme étant un facteur critique dans la génération des lymphocytes Treg et les réponses immunes anti-tumorales qui pourraient permettre d'appréhender le potentiel des Treg à réguler finement les réponses immunitairesThe cross-talk between a natural killer lymphocyte (NK) and an antigen presenting dendritic cell (DC) is a central event in the initiation and development of the adaptive immune response. - Contact between the cells (IS, immunological synapse) is a dynamic process involving many molecular changes with consequential biological implications. For example, the interaction allows the NK cell to initiate the production of IFN-γ which initiate specifically an immunological adaptative Th1 response. - Regulatory T lymphocytes (CD4+CD25+FoxP3+ also play an essential role in peripheral tolerance. Their absence in the body leads to auto-immune disease. Equally they are complicated in response to infections or tumoural challenge. - This study has centered on the regulatory initiation steps of the immune response. We have identified the chemokine CX3CL1 (fractalkine) as a key molecule in the formation of SI and the production of lFN-γ by NK cells. This secretion favours Th1 polarisation and peripheral conversion of FoxP3 (Forkhead transcription factor 3) expressing regulatory T cells (Treg). - ln the ongoing second part of our study we show that STAT3 is a critical transcription factor in the generation and function of Tregs. - These results may help to appreciate the possibility of modulating the immune response by manipulation of Treg populations
24
Fichou, Nolwenn. "Implication des récepteurs de l'immunité innée dans l'activation des lymphocytes T CD8+ et dans la fonction immunostimulante des miARNs. Application au diabète auto-immun". Nantes, Ecole nationale vétérinaire, 2012. https://doc-veto.oniris-nantes.fr/GED_CHN/197444691562/Fichou_Nolwenn.pdf.
Abstract (sommario):
Le système immunitaire possède la capacité de reconnaître des motifs microbiens, les Pathogen-Associated Molecular Pattern (PAMPs) à travers des récepteurs, les Pathogen Recognition Receptors (PRRs), exprimés dans les cellules de l’immunité innée. Les PRRs regroupent trois grandes familles de récepteurs : les Toll-Like Receptors (TLRs), les NOD-Like Receptors (NLRs) et les RIG-I-Like Receptors (RLRs). Suivant leur localisation, ils détectent différentes catégories de PAMPs et permettent d’activer la première ligne de défense de l’organisme. Certains PRRs reconnaissent aussi des éléments signant des dommages cellulaires d’origine non-infectieuse, les Danger-Associated Molecular Pattern (DAMPs). Cependant, les PRRs peuvent aussi jouer un rôle dans le développement de maladies auto-immunes telles que le diabète auto-immun, dit de type 1 (T1D), en agissant sur la balance tolérance/auto-immunité. Dans des études récentes, des acides ribonucléiques (ARNs) endogènes, de petite taille et proches des ARNs viraux, les miARNs (micro-ARNs) ont été découverts. Ces ARNs endogènes pourraient aussi activer des PRRs et jouer un rôle dans la régulation ou la stimulation de la réponse immunitaire et l’auto-immunité. Les TLRs sont les PRRs les plus documentés. En plus de leur action sur l’immunité innée, ils ont la capacité d’orienter l’immunité adaptative et contribuent à la mise en place de la réponse immune spécifique vis-à-vis d’antigènes exprimés par un pathogène. Ils peuvent aussi agir directement sur les cellules de l’immunité adaptative, comme les lymphocytes T. Quelques études seulement ont fait état d’une modulation de l’expansion et de la fonction de ces lymphocytes par stimulation directe de leurs TLRs. Leur activation spécifique implique la détection par leur récepteur T (TCR) de peptides dérivés d’un antigène et présentés par le complexe majeur d’histocompatibilité (CMH). Ils ont aussi la capacité de reconnaître des peptides antigèniques provenant du soi, les impliquant dans certaines maladies auto-immunes comme le T1D au cours duquel ils participent activement et spécifiquement à la destruction des cellules bêta des îlots pancréatiques sécrétant l’insuline. Dans une première partie expérimentale, nous avons déterminé l’expression des NLRs et RLRs dans les lymphocytes T CD8+ en fonction de leur état d’activation. Par l’utilisation de ligands spécifiques de ces récepteurs (Tri-DAP, 5’ppp-dsRNA), nous avons étudié leurs effets sur la modulation de l’activation des lymphocytes T CD8+ naïfs. Aucun effet notable de ces ligands n’a pu être observé sur les différentes fonctions du lymphocyte T CD8+ naïf testées. Nous avons recherché une implication essentielle de l’expression de ces récepteurs dans le T1D de la souris NOD. Dans une deuxième partie, nous avons donc étudié le rôle immunostimulant potentiel d’un analogue d’un miARN du soi, le miARN29b. Nous avons notamment pu mettre en évidence un rôle tolérogène de ce miARN dans le transfert du T1D dans le modèle murin RIP-HA.
25
Gigante, Marc. "Mise au point d'un modèle ex-vivo d'étude de l'immunité innée des anticorps naturels lors de l'ischémie-reperfusion rénale". Nice, 2008. http://www.theses.fr/2008NICE4076.
Abstract (sommario):
The participation of innate immunity mediated by natural autoreactive an polyreactive IgM antibodies is shown in recent developpements of ischemia reperfusion injury. The purpose of this thesis was to settle an ex-vivo model to confirm this theory. Lymphoblastic cells lines (LCLs) were established with infection by Eptein-Barr Virus (EBV) associated with unmethylated single-stranded DNA motifs (CpG oligonucleotides) as an antigenic stimulus. For each subtype of B Cell (Transitional, Mature naive and Memory), the effect of immortalization on phenotypic markers was studied in flowcytometry. The production of immunoglobulin was estimated by ELISA as well as the Polyreactivity of these antibodies. Autoreactivity was appreciating by an ana HEP-2 test. On the other hand, an ex-vivo normothermic reperfusion device was built using a modified (oxygenation an temperature control) perfusion pulsatile machine (MOX 100 or RM3). All 4 subtypes of B-cells from human peripheral blood were transformed into actively proliferating lymphoblastoid cell lines. He effect of transformation were relevant for 8 out of 16 studied phenotype markers: CD5, CD10, CD23, CD24, CD27, CD38, IgD, IgM. Immunoglobulin secretion : IgM, IgA or IgG can be secreted, but no IgD. The type of Ig secreted differs according to the original subtype of B-Cell. There is a very strong and coherent link between Ig membrane expression and Ig secretion. Some LCLs were secreting IgM type autoreactive antibodies. Ther were no IgA or IgG type autreactive antibodies. Some LCLs were secreting IgM type polyreactive antibodies. We succeed in building a ex-vivo normothermic reperfusion kidney device with an active diuresis of 6 hours. We succeed in building a ex-vivo normothermic reperfusion kidney device with an active diuresis of 6 hours in order to study Innate immunity mediated by Natural IgM during ischemia reperfusion injury. Mass production of autoreactive an polyreactive antibodies for this model is possibleMise au point d’un modèle ex-vivo d’étude de l’immunité innée des anticorps naturels lors de l’ischémie reperfusion rénale. Les développements récents des études sur le syndrome d’ischémie-reperfusion tendent à mettre en évidence le rôle de l’immunité innée avec une participation d’anticorps naturels autoréactifs et polyréactifs de type IgM. Afin d’étayer cette hypothèse il nous fallait mettre au point un modèle associant un système ex vivo d’ischémie perfusion normothermique d’une part et d’un moyen de production d’anticorps de type IgM autoréactifs et polyréactifs. Les lignées cellulaires lymphoblastiques B (LCLs) obtenues par transformation par le virus d’Epstein-Barr (EBV) sont largement utilisées en pratique courante. En utilisant l’infection par virus EBV associée à une stimulation du Toll like receptor 9 (TLR9), le but de ce travail était d’établir des lignées cellulaires lymphoblastiques B issues de différentes sous population lymphocytaire B sanguines (lymphocytes B transitionnels, lymphocytes B naïfs, lymphocytes B mémoires) et d’étudier l’effet de cette transformation sur l’expression des marqueurs phénotypiques ainsi que sur la capacité de production d’immunoglobulines, et ce, pour chacune des sous-populations étudiées. Après sélection des différentes sous-populations, chacune était immortalisée. L’expression des marqueurs phénotypiques des LCLs obtenues (12 marqueurs CD et 4 Ig membranaires) était étudiée. Par une méthode ELISA, la présence d’Ig dans le surnageant était mesurée et leur poly-réactivité était estimée. Le caractère autoréactif de ces anticorps était apprécié par un test ana HEP-2. Parallèlement, un système de perfusion de rénal normothermique était construit à partir d’une machine à perfusion pulsatile modifiée (MOX100 ou RM3), notamment pour ses variables d’oxygénation et de contrôle de température. Obtention de lignées lymphoblastiques produisant des anticorps autoréactifs semblables aux anticorps IgM naturels : Les quatre sous-populations lymphocytaires B peuvent être immortalisées par le virus EBV associé au Cpg. Ce résultat n’avait jamais été rapporté. Parmi tous les marqueurs phénotypiques étudiés, les effets de l’immortalisation sont pertinents pour 8 d’entre eux : CD5, CD10, CD23, CD24, CD27, CD38, IgD, IgM. Concernant la sécrétion d’immunoglobuline : Des IgM, IgA ou IgG peuvent être secrété mais pas des IgD. Les classes d’immunoglobulines sécrétées diffèrent selon la sous-population lymphocytaire B à l’origine de la transformation. Il existe une forte corrélation entre l’expression des Ig membranaires et la sécrétion d’immunoglobulines. Certaines LCL secrètent des anticorps autoréactifs de type IgM ; il n’a pas été mis en évidence d’autoanticorps de type IgA ou IgG. Certaines LCL secrètent des anticorps poly-réactifs de type IgM. Les résultats obtenus concernant les caractères phénotypiques. Les tentatives d’immortalisation de la sous-population lymphocytaire B1 furent un échec. Le système de perfusion rénal normothermique, utilisant des reins porcins entiers permettait d’obtenir une diurèse efficace pendant 6 heures avec un pic à la deuxième heure de 140ml/h
26
Jacomet, Florence. "Étude d'une nouvelle population de lymphocytes T « innate-memory » : implication dans l'immunité anti-leucémique au cours de la leucémie myéloïde chronique". Thesis, Poitiers, 2015. http://www.theses.fr/2015POIT1406/document.
Abstract (sommario):
La leucémie myéloïde chronique (LMC) est une hémopathie maligne caractérisée par un syndrome myéloprolifératif. Elle est secondaire à la formation d’un gène chimérique BCR-ABL dont le produit de ce gène de fusion est une protéine possédant une activité tyrosine kinase dérégulée, nécessaire et suffisante à la leucémogénèse. Plusieurs arguments suggèrent l’implication des cellules du système immunitaire dans le contrôle de la LMC.Nous avons montré que les lymphocytes Natural Killer T invariant (iNKT), une population minoritaire de lymphocytes T non conventionnels impliqués dans l’immunosurveillance, sont anergiques chez les patients en phase chronique (LMC-PC). Ce défaut est corrigé chez les patients en rémission cytogénétique complète après traitement par Imatinib Mesylate (LMC-IM) ou IFN-α.Les lymphocytes iNKT sont impliqués chez la Souris dans la génération de cellules T CD8+ « innate-memory », une autre population de lymphocytes T innés découverte récemment chez la Souris. Nous avons mis en évidence chez l’Homme, l’existence d’une population de cellules T ayant un phénotype inné et mémoire, exprimant fortement le facteur de transcription Eomesodermine et capable de produire rapidement de l’IFN-γ en réponse à une stimulation innée par les interleukines (IL)-12 et IL-18.Cette population de cellules est déficiente sur le plan numérique et fonctionnel chez les patients LMC-PC. Ces défauts sont partiellement corrigés chez les patients LMC-IM.L’ensemble de ces résultats souligne le rôle des lymphocytes T innés dans l’immunité anti-leucémique et pourrait permettre le développement de stratégies d’immunothérapies ciblées contre la LMCChronic myeloid leukemia (CML) is a myeloproliferative disorder that results from dysregulated tyrosine kinase activity of the fusion oncoprotein BCR-ABL, which is sufficient to induce malignant transformation. A critical role of the immune system in the control of CML is supported by several reports. Invariant Natural Killer T (iNKT) lymphocytes are a population of non-conventional T cells that are believed to play a key role in cancer immunosurveillance. Here, we showed that CML in chronic phase is associated with anergy of iNKT cells that is restored upon complete cytogenetic remission (CCyR) following Imatinib Mesylate (IM) or IFN-α therapy. In mouse, iNKT cells are involved in the generation of a recently characterized subset of innate CD8 T cells. Importantly, we provided definitive evidence of the existence of an equivalent of these innate CD8 T cells in humans, harboring innate and memory phenotype with high Eomesodermin expression. These cells also exhibited innate functions such as prompt IFN-γ expression in response to innate stimulation by interleukin (IL)-12 and IL-18 and cytolytic activity in a TCR independent manner.Size and functions of this innate-like CD8 T cell subset were severely impaired in CML patients at chronic phase. These defects were partially reversed in patients who achieved CCyR following IM treatment.Altogether, these results reveal a possible contribution of innate CD8 T lymphocytes in anti-leukemic immunity and should contribute to development of immunotherapeutic strategies against CML
27
Boeglin, Emmanuelle. "Contrôle de la prolifération et de la différenciation des lymphocytes B murins par des signaux de l'immunité innée et de l'immunité adaptative". Strasbourg, 2010. http://www.theses.fr/2010STRA6260.
Abstract (sommario):
La différenciation terminale des cellules B nécessite deux signaux : un signal provenant de la reconnaissance de l’antigène par le récepteur des cellules B (BCR) spécifique et un signal fourni par l’interaction de la molécule CD40 exprimée sur les cellules B avec son ligand CD40L exprimé par les cellules T activées. Mais récemment, il a été montré qu’un troisième signal provenant de la reconnaissance du pathogène par les TLR (Toll-Like Receptor) pouvait être important voire même nécessaire pour le développement d’une réponse immunitaire humorale. Ainsile rôle des TLR, mais également de deux NLR (NOD-Like Receptor), seuls ou associés à un signal de l’immunité adaptative (CD40L + BCR) sur l’activation et la différenciation des cellules Ba été évalué. Nous avons montré que tous les agonistes des TLR, à l’exception des TLR3 et 9, induisent la prolifération, l’activation et la différenciation des cellules B, et que l’ajout d’un signal de l’immunité adaptative aux agonistes des TLR permettait d’augmenter soit l’activation et la prolifération des cellules B (TLR3, 4, 9) soit la différenciation de ces cellules en cellules sécrétrices d’anticorps (TLR1/2, 2/6, 4, 7) soit le développement de cellules B mémoires. De plus, nous avons montré que le ligand de Nod1 n’induit pas de différenciation des cellules B mais son association avec un signal CD40 permet de l’augmenter. Ainsi, nous avons montré que les pathogènes seuls ou en association avec des signaux de l’immunité adaptative peuvent déclencher et contrôler la réponse des cellules B. Ces différents stimuli peuvent induire le développement soit de plasmocytes soit de cellules B mémoires, ce qui pourrait être intéressant pour le développement de nouveaux vaccinsTerminal differentiation of B cells requires two signals: a signal deriving from the recognition of the antigen by the specific B cell receptor (BCR) and a signal provided by the interaction between the CD40 molecule expressed on B cells and its ligand CD40L expressed by activated T cells. Nevertheless, it has been recently shown that a third signal deriving from the pathogen recognition by Toll-Like Receptors (TLR) could be important and even necessary for the development of a humoral immune response. Thus the role of TLRs, but also of two NLR (NOD-Like Receptor), alone or combined with a signal of adaptive immunity (CD40L + BCR) on the activation and differentiation of B cells have been investigated. We have demonstrated that all TLR agonists, with the exception of TLR3 and 9, induce proliferation, activation and differentiation of B cells. Moreover, the addition of a signal from adaptive immunity to TLR agonists can increase B cell activation and proliferation (TLR3, 4, 9), differentiation of these cells into antibody secreting cells (TLR1/2, 2/6, 4, 7), and the development of memory B cells. Furthermore, we showed that the Nod1 ligand does not induce B cell differentiation but its association with a CD40 signal can enhance it. Thus, we have shown that pathogens alone or combined with signals of adaptive immunity can trigger and control the B cell response. These different stimuli can induce the development of either plasma cells or memory B cells, this could be an important asset for the development of new vaccines
28
Ronet, Catherine. "Lymphocytes T utilisant la chaîne V & 14 invariante du TCR (cellules NKT) : rôle et fonction lors de la réponse immunitaire innée". Paris 6, 2003. http://www.theses.fr/2003PA066290.
29
Gérart, Stéphane. "Identification d'un nouveau mécanisme de contrôle de l'homéostasie des lymphocytes T iNKT et MAIT". Phd thesis, Université René Descartes - Paris V, 2012. http://tel.archives-ouvertes.fr/tel-00754934.
Abstract (sommario):
Les cellules Invariant Natural Killer T (iNKT) représentent une sous-population particulière de cellules T qui se distingue par son développement, ses fonctions et les ligands qu'elle reconnaît. Chez l'homme, les cellules iNKT expriment le réarrangement Vα24-Jα18/Vβ11 et reconnaissent des glycosphingolipides présentés par la molécule monomorphe du CMH de classe I CD1d. De plus, elles produisent rapidement de grandes quantités de cytokines, et sont ainsi considérées comme des cellules T ayant des caractéristiques innées. Les mécanismes moléculaires qui régulent l'homéostasie descellules iNKT ne sont pas complètement compris. La protéine XIAP (X-linked Inhibitor of Apoptosis) est un inhibiteur physiologique des caspases 3, 7 et 9. Des mutations du gène XIAP sont à l'origine du syndrome lymphoprolifératif lié à l'X de type 2 (XLP-2), un déficit immunitaire primitif (DIP) caractérisé par une susceptibilité accrue à l'infection par le virus Epstein Barr (EBV). Les patients souffrant du XLP-2 présentent une forte réduction de leur nombre de cellules iNKT dans le sang. Au cours de mon travail de thèse, j'ai montré que XIAP est requis pour la survie des cellules iNKT humaines. Cette fonction de XIAP corrèle avec un phénotype pro-apoptotique des cellules iNKT qui n'est pas retrouvé dans les cellules T conventionnelles. La susceptibilité accrue à l'apoptose des cellules iNKT est observée en utilisant des stimuli de la voie intrinsèque ou extrinsèque de l'apoptose. Les cellules iNKT, contrairement aux cellules T conventionnelles expriment des quantités élevées de protéines pro-apoptotiques comme les caspases 3 ou 7 ou Bid. Ce phénotype proapoptotique est acquis de manière précoce, puisqu'il est déjà présent dans des cellules iNKT de thymus ou de sang de cordon. L'extinction de XIAP dans des cellules iNKT et l'analyse de patients déficients en XIAP indiquent que XIAP est un inhibiteur efficace de l'apoptose dans les cellules iNKT alors qu'il n'a qu'un effet modéré dans les cellules T conventionnelles. J'ai ensuite montré que le phénotype pro-apoptotique des cellules iNKT est dépendant de l'expression du facteur de transcription PLZF. Celui-ci est déjà connu comme étant nécessaire à l'acquisition des fonctions effectrices de cescellules. De manière concordante, la surexpression de PLZF dans des cellules T conventionnelles conduit à un phénotype pro-apoptotique et à une augmentation de l'expression de la caspase 3. Récemment, une deuxième population de cellules T invariantes, les cellules MAIT (Mucosal Associated Invariant T) a été décrite. Ces cellules expriment un TCR semi-invariant Vα7.2-Jα33 et partagent avec les cellules iNKT certaines caractéristiques qui en font des cellules T innées comme les cellules iNKT. De la même manière que les cellules iNKT, les cellules MAIT ont un phénotype proapoptotiqueet sont diminuées dans le sang des patients déficients en XIAP. Ce phénotype proapoptotique est aussi dépendant de PLZF. De manière intéressante, un patient déficient en XIAP et ayant un nombre normal de cellules iNKT a été identifié. Ce patient n'a pas encore rencontré l'EBV, suggérant que la diminution des cellules iNKT chez les patients déficients en XIAP est due à une apoptose augmentée dans un contexte d'infection par l'EBV. Enfin, j'ai obtenu des données préliminaires suggérant que l'EBV utilise un mécanisme d'échappement aux cellules iNKT en diminuant l'expression de CD1d à la surface des cellules B. Mon travail de thèse a donc permis d'identifier une voie de régulation inconnue des lymphocytes T innés qui dépend de XIAP et de PLZF. PLZF est donc un facteur clé pour la différentiation et l'homéostasie des cellules T innées en régulant l'acquisition de leurs fonctions effectrices et en limitant leur survie. Ces observations ont aussi permis d'identifier le premier DIP associé à un déficit en cellules MAIT. Enfin, ces résultats suggèrent un rôle des cellules iNKT dans le contrôle de l'infection par l'EBV.
30
De, Wilde Virginie. "Dialogue entre l'immunité innée et acquise en réponse au lipopolysaccharide". Doctoral thesis, Universite Libre de Bruxelles, 2008. http://hdl.handle.net/2013/ULB-DIPOT:oai:dipot.ulb.ac.be:2013/210371.
Abstract (sommario):
Le système immunitaire nous protège contre les infections et les cancers. Cependant, des réponses immunitaires excessives ou incontrôlées peuvent causer des pathologies potentiellement mortelles comme le choc endotoxinique, des maladies auto-immunes, ou le rejet d’allogreffe. Une compréhension claire des mécanismes de régulation des réponses immunes permettrait d’envisager de nouvelles thérapeutiques plus ciblées. Dans ce travail réalisé chez la souris, la modulation de la réponse inflammatoire à une toxine bactérienne, le lipopolysaccharide (LPS), a été utilisée comme archétype de la régulation immunitaire. Ceci nous a permis de démontrer que la régulation de la prolifération homéostatique de lymphocytes T CD4+CD25- par des lymphocytes T régulateurs naturels tempère la réponse inflammatoire au LPS. Cet effet est notamment dépendant d’une diminution de la sécrétion d’IFN-γ par les lymphocytes activés par la prolifération induite par la lymphopénie. Nous avons aussi observé, que la désensibilisation du système immunitaire inné vis-à-vis du LPS, suite à des injections répétées d’endotoxine, induit le développement de cellules myéloïdes suppressives (myeloïd-derived suppressor cells MDSC) capables de réguler des réponses lymphocytaires T in vitro et in vivo. Nous avons pu mettre en évidence que l’effet suppresseur des MDSC est dépendant de leur expression de l’enzyme hème oxygénase-1 et de leur production d’IL-10. Le dialogue constant entre les cellules de l’immunité innée et de l’immunité acquise assure donc à la fois l’activation et la régulation du système immunitaire. Dans la majorité des cas, ceci permet aux réponses immunitaires d’être efficaces sans être excessives. La mise en évidence de ces processus identifie les lymphocytes T régulateurs et les cellules myéloïdes suppressives comme des éléments clefs de la régulation d’un processus inflammatoire. Les traitements immunosuppresseurs, les thérapies cellulaires et les greffes de moelle ont des effets variables et mal connu sur ces populations de cellules régulatrices. Tenir compte de ces interférences thérapeutiques avec les processus naturels de régulation de notre système immunitaire permettra certainement d’optimaliser l’utilisation de ce type de traitements. D’autre part, l’utilisation thérapeutique de ces deux types de cellules régulatrices pourrait être envisagé dans de nouvelles stratégies d’immuno-modulation plus « physiologique ».
Doctorat en Sciences médicales
info:eu-repo/semantics/nonPublished
31
Duban, Livine Annie Alice. "Les cellules M. A. I. T. (Mucosal-associated Invariant T) : une nouvelle sous-population de lymphocytes Tαß conservée entre espèces". Paris 5, 2006. http://www.theses.fr/2006PA05D052.
Abstract (sommario):
Les cellules MAIT (Mucosal-Associated Invariant T) constitue une nouvelle sous-population de LT phylogénétiquement conservée (homme, souris, vache), exprimant un répertoire du TCRα invariant, défini par l'utilisation de la chaîne canonique Vα7. 2/19-Jα33. Ces cellules sont localisées préférentiellement dans les ganglions mésentériques (MLN) et la lamina propria (LP) de l'intestin. Elles reconnaissent la molécule du CMH de classe Ib MR1 et l'expression de cette molécule par des LB est suffisante pour la sélection/expansion de ces cellules. L'étude de souris transgéniques iVα19-Jα33, a montré que le biais de répertoire Vß6/8, caractéristique de ces cellules, disparaît dans le thymus, les MLN et la LP en l'absence de la molécule MR1, et la sur-expression d'une chaîne du TCRß spécifique de ces cellules permet d'augmenter la sélection/expansion de ces cellules dans le thymus, les MLN et la LP. Enfin, leur sélection est dépendante de la présence de bactéries commensales gram+ ou Gram-Mucosal-Associated Invariant T (MAIT) cells display unique T cell feature : they are phylogenetically conserved (human, mouse and cattle) and used an invariant TCRα chain, iVα7. 2/19-Jα33. These cells localized in the mesenteric lymph nodes (MLN) and the gut lamina propria (LP). They recognize the phylogenetically conserved class Ib MHC molecule MR1 and it expression on B cells is sufficient for selection/expansion of MAIT cells. The study of iVα19-Jα33 transgenic mice showed that the characteristic Vß6/8 biais of repertoire is loss in the thymus, the MLN and LP in the absence of MR1. Expression of a MAIT cells specific TCRß chain induces an increased selection/expansion of these cells in the thymus, MLN and LP. Finally, there selection/expansion is dependant upon the presence of commensal flora in the gut, as they are absent in germfree mice and both Gram+ and Gram- bacteria can induce MAIT selection/expansion
32
Raffray, Loïc. "Immunopathologie de la leptospirose humaine : exploration de la réponse immunitaire innée". Thesis, La Réunion, 2017. http://www.theses.fr/2017LARE0006/document.
Abstract (sommario):
La leptospirose est une zoonose causée par les bactéries du genre Leptospira. Elle touche près de 1 million d'individus par an dans le monde entier et sévit à l'état endémique dans les pays au climat tropical tel que La Réunion. Les manifestations habituelles sont variables d'un individu à l'autre et englobent une simple fièvre jusqu'aux défaillances poly-viscérales avec mortalité dans 5 à 10% des cas. Sa physiopathologie est encore mal comprise, en particulier la part que joue une réponse immunitaire inappropriée dans la genèse des manifestations graves qui surviennent en quelques heures, et avant la mise en place d'une réponse immunitaire adaptative propre à éliminer le microorganisme. Si l'échappement de la bactérie au système du complément est bien documenté, le rôle des acteurs cellulaires du système immunitaire inné reste à étayer. Notre étude avait donc pour objectif d'explorer l'immunopathologie de la leptospirose humaine dans la phase initiale de l’infection. Notre méthodologie s'est appuyée principalement sur des analyses quantitatives et qualitatives des acteurs cellulaires du système immunitaire inné à partir de prélèvements sanguins en phase précoce de la maladie, et comparaison avec la phase de convalescence et des sujets contrôles. Dans un premier temps nous avons montré qu'une population particulière de lymphocytes T impliquée dans la réponse immune innée, les lymphocytes Tγδ, avaient un taux abaissé et que cette baisse était corrélée à la charge bactérienne ainsi qu'à l’intensité de l'atteinte hépatique classiquement retrouvée lors de la leptospirose. Dans un deuxième temps, nous avons analysé les polynucléaires neutrophiles circulants dont le taux augmente d’autant plus que la maladie est sévère, mais sans pour autant présenter de modification de certains marqueurs d’activation ou de recrutement tissulaire (CD15, CD11b, CD182). Une des principales chimiokines des neutrophiles, l'interleukine 8, était à taux peu élevés. Les derniers travaux concernent les principales formes solubles issues des molécules membranaires impliquées dans le processus de recrutement/diapédèse leucocytaire. Nous retrouvons de manière isolée une forte élévation des formes solubles d'E-sélectine et ICAM-1 qui sont notamment exprimées par les cellules endothéliales. Ces augmentations n'étaient pas corrélées aux marqueurs de gravité de la maladie. La signification biologique de cette élévation n’est pas encore connue lors de la leptospirose. L'ensemble de nos données permet d’apporter des informations nouvelles sur des acteurs du système immunitaire inné présents dans le compartiment vasculaire lors de la leptospirose humaine. Cette réponse immunitaire semble inadaptée pour permettre une clairance du pathogène au stade de dissémination hématogèneLeptospirosis is a bacterial zoonosis caused by Leptospira and affecting 1 million people each year worldwide and mainly in tropical areas such as Reunion Island. Usual presentations encompass flu-like syndrome to multiorgan failure with mortality rate between 5 to 10%. To date, pathophysiology in humans is poorly understood, notably the capacity of innateimmunity to mount a robust response to clear pathogen or to induce tissue damages and contributing to disease severity. Our study aimed at assessing the role of innate immune cells and molecules within the first days of leptospiral infection.Using blood samples, we performed quantitative and qualitative assessment of circulating innate immune cells from leptospirosis cases and healthy controls. The first study explored the levels of gamma-delta T-cells (γδT-cells), a subset of unconventional T cells with innate immune functions. Gamma-delta T cells were found deeply decreased and levels wereinversely correlated to bacterial burden and liver damage. The second study focused on membrane bound receptors indicative of activation and tissue migration ability of neutrophil polymorphonuclear cells: CD15, CD11b, and CD182. Although neutrophil rates were high in leptospirosis cases, the levels of studied receptors were either lower (CD15) or identical to healthy controls (CD11b, CD182). In addition, only low levels of interleukin-8, a key chemokine for neutrophils, was detected in patients. Lastly, we ascertained the plasmatic levels of several shed cell adhesion molecules notably expressed by endothelial cells. The levels of soluble E-selectin and ICAM-1 were significantly increased compared to controls, while P-selectin level was lower. We did not find any correlation with disease severity or organ failure. This finding indicates that endothelial cell may be activated but further experiments are warranted to explain the functional impact of our findings. Altogether, our results add to the field of knowledge of leptospirosis pathophysiology, and in particular the implication of key innate immune cells at the stage of plasmatic bacterial dissemination. Our findings will support the view that there is an inappropriate immune response to Leptospira
33
Fernandez, Nadine. "Modulation de l'immunité antitumorale innée et acquise par transfert de gènes codant pour des immunomodulateurs ou par flt3 ligand". Paris 11, 1998. http://www.theses.fr/1998PA11T052.
Abstract (sommario):
L'immunothérapie active spécifique (lAS) du cancer a pour but de générer une réponse immune anti-tumorale spécifique susceptible de protéger le patient contre une rechute liée à la présence de cellules métastatiques. Plusieurs études pré-cliniques ont été réalisées dans le cadre de trois objectifs : - premièrement, comment augmenter l'immunogénicité (hépatocarcinome) ou rendre immunogène (mésothéliome) des tumeurs par des stratégies d'lAS? Nous avons montré qu'un protocole d'immunisation, efficace dans un modèle de tumeur implantée par voie sous-cutanée à des animaux naïfs, ne permet pas d'inhiber l'établissement ni même de ralentir la croissance d'une tumeur se développant spontanément dans des animaux transgéniques. Une autre étude, réalisée avec un modèle de tumeur non immunogène, a indiqué qu'une vaccination thérapeutique, permettant de générer une réponse immune protectrice dans un modèle de tumeur immunogène, n'induit au mieux que des régressions transitoires. Le transfert de gènes codant pour des immunomodulateurs, in vitro ou in vivo dans les cellules tumorales, permet d'induire une immunité innée et/ ou acquise, le plus souvent d'efficacité partielle, sur la croissance d'une tumeur non immunogène. - deuxièmement, est-il possible de détecter directement in vivo des amplifications clonotypiques de lymphocytes T spécifiques suite à un protocole de vaccination thérapeutique et de corréler cette réponse avec l'observation d'un effet anti-tumoral? L'analyse de la réponse immune dans un modèle de tumeur immunogène, à l'aide de la technique lmmunoscope, nous a permis de montrer que, contrairement à l'IFN-y et l'IL-2, la sécrétion paracrine d'IL-12 induit très efficacement des régressions tumorales complètes qui sont corrélées à des expansions clonales de LT CD8 spécifiques détectées dans la tumeur et en périphérie. - troisièmement, quel est le rôle des cellules dendritiques dans la modulation d'une réponse anti-tumorale dont les effecteurs principaux sont les cellules "natural killer" (NK)? L'administration de Flt3 ligand, dans un but de vaccination thérapeutique, nous a permis de démontrer que les cellules dendritiques sont capables d'activer directement les cellules NK. Cette nouvelle fonction place les cellules dendritiques à l'interface de l'immunité innée et de l'immunité acquise.
34
Gérart, Stéphane. "Identification d’un nouveau mécanisme de contrôle de l’homéostasie des lymphocytes T iNKT et MAIT". Thesis, Paris 5, 2012. http://www.theses.fr/2012PA05TO22/document.
Abstract (sommario):
Les cellules Invariant Natural Killer T (iNKT) représentent une sous-population particulière de cellules T qui se distingue par son développement, ses fonctions et les ligands qu’elle reconnaît. Chez l’homme, les cellules iNKT expriment le réarrangement Vα24-Jα18/Vβ11 et reconnaissent des glycosphingolipides présentés par la molécule monomorphe du CMH de classe I CD1d. De plus, elles produisent rapidement de grandes quantités de cytokines, et sont ainsi considérées comme des cellules T ayant des caractéristiques innées. Les mécanismes moléculaires qui régulent l’homéostasie descellules iNKT ne sont pas complètement compris. La protéine XIAP (X-linked Inhibitor of Apoptosis) est un inhibiteur physiologique des caspases 3, 7 et 9. Des mutations du gène XIAP sont à l’origine du syndrome lymphoprolifératif lié à l’X de type 2 (XLP-2), un déficit immunitaire primitif (DIP) caractérisé par une susceptibilité accrue à l’infection par le virus Epstein Barr (EBV). Les patients souffrant du XLP-2 présentent une forte réduction de leur nombre de cellules iNKT dans le sang. Au cours de mon travail de thèse, j’ai montré que XIAP est requis pour la survie des cellules iNKT humaines. Cette fonction de XIAP corrèle avec un phénotype pro-apoptotique des cellules iNKT qui n’est pas retrouvé dans les cellules T conventionnelles. La susceptibilité accrue à l’apoptose des cellules iNKT est observée en utilisant des stimuli de la voie intrinsèque ou extrinsèque de l’apoptose. Les cellules iNKT, contrairement aux cellules T conventionnelles expriment des quantités élevées de protéines pro-apoptotiques comme les caspases 3 ou 7 ou Bid. Ce phénotype proapoptotique est acquis de manière précoce, puisqu’il est déjà présent dans des cellules iNKT de thymus ou de sang de cordon. L’extinction de XIAP dans des cellules iNKT et l’analyse de patients déficients en XIAP indiquent que XIAP est un inhibiteur efficace de l’apoptose dans les cellules iNKT alors qu’il n’a qu’un effet modéré dans les cellules T conventionnelles. J’ai ensuite montré que le phénotype pro-apoptotique des cellules iNKT est dépendant de l’expression du facteur de transcription PLZF. Celui-ci est déjà connu comme étant nécessaire à l’acquisition des fonctions effectrices de cescellules. De manière concordante, la surexpression de PLZF dans des cellules T conventionnelles conduit à un phénotype pro-apoptotique et à une augmentation de l’expression de la caspase 3. Récemment, une deuxième population de cellules T invariantes, les cellules MAIT (Mucosal Associated Invariant T) a été décrite. Ces cellules expriment un TCR semi-invariant Vα7.2-Jα33 et partagent avec les cellules iNKT certaines caractéristiques qui en font des cellules T innées comme les cellules iNKT. De la même manière que les cellules iNKT, les cellules MAIT ont un phénotype proapoptotiqueet sont diminuées dans le sang des patients déficients en XIAP. Ce phénotype proapoptotique est aussi dépendant de PLZF. De manière intéressante, un patient déficient en XIAP et ayant un nombre normal de cellules iNKT a été identifié. Ce patient n’a pas encore rencontré l’EBV, suggérant que la diminution des cellules iNKT chez les patients déficients en XIAP est due à une apoptose augmentée dans un contexte d’infection par l’EBV. Enfin, j’ai obtenu des données préliminaires suggérant que l’EBV utilise un mécanisme d’échappement aux cellules iNKT en diminuant l’expression de CD1d à la surface des cellules B. Mon travail de thèse a donc permis d’identifier une voie de régulation inconnue des lymphocytes T innés qui dépend de XIAP et de PLZF. PLZF est donc un facteur clé pour la différentiation et l’homéostasie des cellules T innées en régulant l’acquisition de leurs fonctions effectrices et en limitant leur survie. Ces observations ont aussi permis d’identifier le premier DIP associé à un déficit en cellules MAIT. Enfin, ces résultats suggèrent un rôle des cellules iNKT dans le contrôle de l’infection par l’EBVInvariant natural killer T (iNKT) lymphocytes represent a peculiar T cell-lineage that differs from conventional T cells by its development, function, and ligands it recognizes. In humans, iNKT cells express an invariant TCR made of the V?24-J?18/V?11 rearrangement, which recognizes glycosphingolipids presented by the MHC class I monomorphic molecule CD1d. Moreover, they rapidly produce high amounts of cytokines when stimulated and are thus considered as innate-like T cells. The molecular mechanisms that control the homeostasis of iNKT are poorly understood. XIAP (X-linked Inhibitor of Apoptosis) is a physiological inhibitor of caspases 3, 7 and 9 and is mutated in the X-linked lymphoproliferation syndrome 2 (XLP-2), a rare primary immunodeficiency (PID) characterized by a peculiar susceptibility to Epstein-Barr virus (EBV) infection. Patients with a XIAP deficiency exhibit a strong reduction of their iNKT cells in blood. Here, I report that XIAP is required for the survival of iNKT cells in humans. The requirement of XIAP correlates with a pro-apoptotic phenotype of iNKT cells that is not observed in conventional T cells. The increased susceptibility to apoptosis of iNKT cells was observed upon stimuli that trigger either extrinsic or intrinsic apoptosis pathways. iNKT cells by contrast to conventional T cells express elevated amounts of pro-apoptotic molecules including caspases 3 or 7 and Bid. The pro-apoptotic phenotype of iNKT cells is early acquired since iNKT cells from cord blood and thymus display a similar pro-apoptotic phenotype. Knock-down of XIAP in iNKT cells and analysis of XIAP-deficient humans indicate that XIAP is a potent inhibitor of apoptosis in iNKT cells while it has only a moderate effect in conventional T cells. I also show that this pro-apoptotic phenotype of iNKT cells is dependent of the expression of the transcription factor PLZF. This factor is already known to be necessary for the acquisition of the effector functions of these cells. Conversely, over expression of PLZF in conventional T cells leads to a pro-apoptotic phenotype and to an increased expression of caspase 3. Recently, a second invariant T cell subpopulation, the mucosal associated invariant T (MAIT) cells was identified both in humans and mice. These cells express a semi-invariant TCR made of V?7.2-J?33 rearrangements and share with iNKT cells a number of developmental, functional and phenotypical features that lead to consider MAIT cells as innate-like T cells like iNKT cells. Similarly, MAIT cells also exhibit a pro-apoptotic phenotype and are decreased in XIAP-deficient humans. The pro-apoptotic phenotype of MAIT cells is also dependent on PLZF. Interestingly, one XIAP-deficient patient with normal iNKT cell number was identified. This patient has not yet encountered EBV, suggesting that reduction of iNKT cells in XIAP-deficient patients is likely due to increased apoptosis in the context of EBV infection. I also show that EBV might have an escape mechanism from iNKT cells by down-regulating the expression of CD1d on the surface of B cells. My thesis works identify a previously unknown pathway controlling innate T cell homeostasis depending on XIAP and PLZF. PLZF is thus a key factor involved in the differentiation and the homeostasis of innate T cells by regulating the acquisition of their effector functions and their survival. I also identified the first PID associated with a defect in MAIT cells. Finally, these results provide evidences that iNKT cells might play a role against EBV infection
35
Thiriot, Aude. "Identification et caractérisation, grâce aux lignées de souris dérivées d'individus sauvages, d'une nouvelle population de lymphocytes B conservée dans le genre Mus : les cellules Bw". Paris 6, 2008. http://www.theses.fr/2008PA066673.
Abstract (sommario):
L'utilisation de lignées de souris dérivées d’individus sauvages nous a permis d’identifier une nouvelle sous-population de lymphocytes B, nommée "Bw", qui se distingue par de nombreux critères des sous-populations de cellules B déjà connues chez la souris. Alors que la présence des cellules B-1a CD5pos est quasiment restreinte aux lignées de souris appartenant à la sous-espèce Mus musculus domesticus, les lymphocytes Bw sont conservés à travers l’évolution du genre Mus. Les souris de laboratoire ont hérité la population B-1a CD5pos de la sous-espèce M. M. Domesticus. Les lymphocytes Bw péritonéaux présentent le phénotype caractéristique suivant : CD19posCD5negMac-1posB220highIgMhighIgDhighCD43negCD9neg. Les cellules Bw sont retrouvées, à des fréquences variables dans la rate, les ganglions, la cavité péritonéale ainsi que les PBL. Le répertoire anticorps de ces lymphocytes est enrichi en spécificités autoréactives contre des antigènes tels que l’ADN, la tubuline ou l’actine, ainsi qu’envers des globules rouges traités par de la broméline. En réponse au LPS et au CpG, ligands des TLR 4 et 9 respectivement, les cellules Bw produisent plus d’anticorps anti-PC que les cellules B-2. Il en est de même suite à une immunisation par la bactérie S. Pneumoniae. Les précurseurs issus de la moelle osseuse sont capables, au même titre que les précurseurs foetaux, de se différencier en cellules Bw, contrairement aux précurseurs des cellules B-1 qui sont enrichis dans le foie foetal. Ce travail révèle la présence d’une nouvelle population de cellules B Mac-1pos, les lymphocytes Bw, conservée à travers l’évolution du genre Mus et impliquée dans des réponses immunitaires innées.
36
Grimaldi, David. "Mécanismes cellulaires et moléculaires de l’immunodépression post-infectieuse". Thesis, Paris 5, 2013. http://www.theses.fr/2013PA05T049/document.
Abstract (sommario):
Les infections graves entraînent une dysrégulation de la réaction inflammatoire associée à une immunodépression complexe associée à la survenue d’infections nosocomiales. Les mécanismes cellulaires et moléculaires qui régulent ces phénomènes demeurent largement incompris. A l’interface entre système immunitaire inné et adaptatif, les cellules dendritiques et les lymphocytes innés pourraient être impliqués dans l’immunodépression post-infectieuse. Par ailleurs, les récepteurs de type Toll (TLR) déterminent l’amplitude de la réponse inflammatoire initiale, mais leur contribution dans le développement de l’immunodépression post-infectieuse n’a pas été établie. Les objectifs de ce projet de recherche étaient d’investiguer le rôle des cellules dendritiques, des lymphocytes de type innés et des voies de signalisation dépendantes des TLRs dans l’immunodépression induite par le sepsis. Nous avons mené ce programme de recherche en combinant une double approche translationnelle et expérimentale. Nous avons étudié la cinétique des cellules dendritiques circulantes chez le patient septique et montré que leur déplétion était associée à la survenue d’infections nosocomiales. L’analyse des trois souspopulations de lymphocytes T innés (lymphocytes γδ, NKT et MAIT) chez le patient septique a montré que seuls les lymphocytes MAIT présentaient une déplétion associée au sepsis sévère, dont la persistance était également corrélée à la survenue d’infections nosocomiales. Enfin, à l’aide de souris knockout nous avons étudié le rôle de TLR2, TLR4 et TLR5 sur la réponse anti-bactérienne dans un modèle murin de pneumonie secondaire à P. aeruginosa à distance d’un sepsis polymicrobien sublétal. Nous avons montré que les souris déficientes pour TLR2 étaient protégées de l’infection secondaire grâce à une meilleure clairance bactérienne. Ce travail introduit des perspectives nouvelles dans la physiopathologie de l’immunodépression post-infectieuse et suggère des applications thérapeutiques potentiellesSevere sepsis leads to a dysregulated inflammatory response followed by a complex immunosuppressive state that can favor the emergence of nosocomial infections. The cellular and molecular mechanisms that drive the post-infective immunosuppression remain poorly understood. They may involve immune cells that link innate and adaptive immunity such as dendritic cells or innate-like lymphocytes. Furthermore, Toll-like receptors (TLR) are critical determinants of the inflammatory response but their role to the development of sepsis-induced immune dysfunction are unknown. The aim of this research project was to investigate the role of dendritic cells, innatelike T cells and TLR-dependent signalling pathways in the sepsis-induced immunosuppression process. For this purpose, we combined a translational and experimental approach. We assessed dendritic cells blood count in septic patients and showed that the depletion of dendritic cells was associated with the advent of nosocomial infections. We studied 3 populations of innate-like T-cells (γδ lymphocytes, NKT- and MAIT-cells) in septic patients and demonstrated that only the MAIT-cells presented a significant depletion following severe sepsis, the persistence of which was correlated with the advent of nosocomial infection. Last, using knockout mice, we analyzed the relative contribution of TLR2, TLR4 and TLR5 to the host response in a model of late-onset secondary Pseudomonas aeruginosa pneumonia following a sublethal polymicrobial sepsis. We observed that TLR2 deficient mice were specifically protected against the secondary pneumonia through a better bacterial clearance. Our results provide new insights in the pathophysiology of post-infective immunosuppression and suggest potential therapeutic applications
37
Dubois, Natasha. "Caractérisation de la réponse immune induite par un adjuvant comprenant un agoniste du TLR4 dans des modèles murins". Thesis, Université Paris-Saclay (ComUE), 2016. http://www.theses.fr/2016SACLS131/document.
Abstract (sommario):
En 2014 la Tuberculose (TB) à dépassé le VIH comme la principale cause de décès par maladie infectieuse dans le monde soulignant le besoin urgent de développer un vaccin plus efficace contre cette maladie. Le candidat vaccin contre la TB, ID93/GLA-SE, dévéloppé à l’Infectious Disease Research Institute (IDRI), est aujourd’hui en essai clinique de phase IIa et a montré des résultats pré-cliniques et cliniques promettants. Dans de modèle murin de TB, ce vaccin induit une forte réponse TH1, considérée comme centrale dans la protection contre la TB, et la production d’IgG2 par les lymphocytes B. Néanmoins, les mécanismes d’action de GLA-SE sont encore peu connus.L’objectif principal de cette thèse est donc d’élucider les méchanismes clés qui relient les réponses innées et adaptatives induites par cet adjuvant dans le modèle murin. Un objectif secondaire est d’établir un modèle murin de rechute de TB après traitement et d’évaluer l’utilisation d’ID93/GLA-SE en tant que vaccin immuno-thérapeutique et sa capacité à réduire les taux de rechute dans ce modèle. L‘ensemble de ce travail nous a permis de mieux comprendre les mécanismes impliqués dans la réponse immunitaire adaptative induite par GLA- SE et de montrer la capacité de ID93/GLA- SE a être utilisé comme un vaccin thérapeutique contre la tuberculose dans le but de réduire les taux de rechute post-thérapeutiquesIn 2014 tuberculosis (TB) surpassed HIV as the leading cause of death by an infectious disease worldwide emphasizing the urgent need to develop a more effective vaccine against this airborne disease. The Infectious Disease Research Institute (IDRI) TB candidate vaccine ID93/GLA-SE is currently undergoing a Phase IIa clinical trial and has shown promising preclinical and clinical results. In murine models of TB this vaccine drives a strong CD4 TH1 response, which is thought to be important for protection against TB, and an IgG2c skewed B cell response. However, little is known about the cellular and molecular events that drive GLA-SE adjuvanticity.To that end, the main objective of my thesis was to elucidate the key mechanisms that connect innate and adaptive immune responses elicited by this adjuvant in the murine model. A secondary objective was to evaluate the possibility of using ID93/GLA-SE as adjunct therapy to existing antibiotic treatments to reduce relapse rates after TB treatment.Collectively the results obtained during this research project and thesis broaden our knowledge and our current understanding of the mechanisms involved in the adaptive immune response induced by GLA-SE and show the capacity of ID93/GLA-SE to be used as a therapeutic vaccine against TB to reduce post-therapeutic relapse rates
38
Alyanakian, Marie-Alexandra. "Rôles de l'immunorégulation et de l'environnement dans la physiopathologie du diabète auto-immun". Paris 5, 2006. http://www.theses.fr/2006PA05D030.
Abstract (sommario):
Notre travail a eu pour but l'étude de l'immunorégulation dans les pathologies auto-immunes et plus particulièrement dans le diabète insulinodépendant. Pour ce faire nous avons utilisé le modèle de la souris NOD (pour non obese diabetic). Nos recherches ont comporté essentiellement deux volets. Premièrement, l'analyse approfondie des caractéristiques phénotypiques et fonctionnelles des sous-populations de lymphocytes T responsables de l'immunorégulation. Nous avons également étudié la spécificité fine de ces cellules régulatrices grâce à un modèle de transfert adoptif, toujours chez la souris NOD. Deuxièmement, nous avons réalisé une série de travaux pionniers démontant le rôle protecteur de certains constituants d'agents infectieux dans le développement du diabète auto-immun. L'étude des mécanismes qui sous-tendent cet effet protecteur a révélé que les lymphocytes T régulateurs jouent un rôle central dans l'induction et/ou le maintien de cette protectionThe major focus of our studies was the analysis the role of immunoregulation in the development of autoimmune diseases and more particularly of autoimmune insulindependent diabetes. To that aim we have used the experimental model of the NOD (non obese diabetic) mouse. We have developed our work around two essential themes. First, the detailed analysis of the phenotypic and functional characteristics of the main T cell subsets that control autoimmune responses. We have also attempted to study more in depth their antigen specificity using an adoptive transfer model. Secondly, we have described original models showing the protective effect on the development of autoimmune diabetes of certain components of infectious agents. The analysis of the immune mechanisms affording this protection revealed that regulatory T lymphocytes play a central role in the induction and/or the maintenance of the protective effect
39
Kiaf, Badr. "Les lymphocytes MAIT induisent l'inflammation, la dysbiose et le diabète de type 2 au cours de l'obésité". Thesis, Sorbonne Paris Cité, 2017. http://www.theses.fr/2017USPCC314/document.
Abstract (sommario):
Le surpoids et l’obésité touchent plus de 1,9 milliard d’adultes à travers le monde et pourraient atteindre 3,3 milliards de personnes dans une dizaine d’année. L’obésité est associée à une inflammation tissulaire et systémique chronique de bas grade, qui contribuent à l’apparition de la résistance à l’insuline. Récemment, notre laboratoire a mis en évidence des anomalies d’une nouvelle population de lymphocytes T innés, les cellules MAIT (Mucosal Associated Invariant T) chez des patients obèses et/ou ayant un diabète de type 2 (T2D). Les cellules MAIT sont des lymphocytes T non conventionnels, qui expriment un récepteur des cellules T (TCR) avec une chaîne alpha invariante. Leur TCR reconnait la molécule d’histocompatibilité de classe 1 non classique MR1, présentant des métabolites dérivés de la voie de biosynthèse des vitamines B, notamment les vitamines B2 et B9. Dans cette étude, nous utilisons les modèles murins pour analyser le rôle des cellules MAIT dans le developpement du T2D. Au cours de l’obésité induite par un régime riche en graisse, les cellules MAIT du tissu adipeux viscéral (TA) et de l’iléon sont activées de façon précoce et anormale et produisent plus de cytokines pro-inflammatoires (i.e. IL-17, TNFa et l’IFN?). De plus, l’augmentation de la fréquence tissulaire des MAIT chez des souris Va19 transgéniques conduit à l’apparition de la résistance à l’insuline et à une intolérance au glucose, au cours de l’obésité. A l’inverse, les souris obèses déficientes en MAIT, MR1-/-, sont protégées contre ces anomalies métaboliques. Une fréquence élevée de MAIT est associée au changement de macrophages M2 (anti-inflammatoires) en M1 (inflammatoires) et à une infiltration des cellules NK et des LTaß-CD8 au niveau du TA. Par ailleurs, les MAIT contrôlent la fréquence des Treg, ILC2 et ILC3 dans l’iléon et des Treg, ILC2 et éosinophiles dans le tissu adipeux. La modification de la fréquence des ILC2 et ILC3 est associée à la production intestinale d’IL-33 et d’IL-25. De plus, nous montrons que le rôle délétère des MAIT dans le développement du T2D est associé à une dysbiose intestinale. Finalement, des expériences de transfert de flores intestinales montrent que cette dysbiose intestinale est en partie responsable des anomalies immunitaires et métaboliquesObesity and type 2 diabetes are associated with low-grade chronic inflammation. Immune cells are recruited and activated in several tissues, including adipose tissue, thereby contributing to insulin-resistance and diabetes. Recent studies described gut microbiota dysbiosis as a consequence as well as a driver of obesity and type 2 diabetes. Mucosaassociated invariant T cells (MAIT) are innate-like T cells expressing a semi-invariant T-cell receptor restricted by the non-classical MHC class I molecule MR1 presenting bacterial ligands. In obese/T2D patients MAIT cells in blood and adipose tissue exhibit a pro-inflammatory profile. In the present study, we show that during high fat diet-induced obesity MAIT cells produce inflammatory cytokines in adipose tissue and the ileum and induce inflammation in these tissues by modifying other immune cell populations (i.e. macrophages, CD8 Taß cells, NK cells, LTreg, eosinophils and ILC2 in the adipose tissue and ILC2, ILC3 and LTreg in the ileum). These changes impair the function of both tissues leading to insulin resistance, glucose intolerance, impaired lipid metabolism and increased gut permeability. MAIT cells also impact gut microbiota dysbiosis during obesity and microbiota transfer experiments highlight a bidirectional crosstalk between MAIT cells and the gut microbiota leading to inflammation and gut leakage. Altogether these results reveal the major role of MAIT cells in promoting the development of type 2 diabetes during obesity
40
Ebbo, Mikaël. "Rôle des cellules lymphoïdes innées chez l'homme : analyse au cours de déficits immunitaires, pathologies auto-immunes et inflammatoires". Thesis, Aix-Marseille, 2017. http://www.theses.fr/2017AIXM0398.
Abstract (sommario):
Les cellules lymphoïdes innées (ILCs) sont des populations cellulaires d’identification récente, mais leur rôle in vivo chez l’homme reste mal connu. Dans une 1ère étude, nous avons pu montrer qu’un déficit sévère en NK au cours de déficits immunitaires communs variables est associé à un risque accru de manifestations non infectieuses et infectieuses bactériennes sévères, suggérant un rôle protecteur non redondant des cellules NK lorsque le système immunitaire adaptatif n’est pas fonctionnel. Dans une 2ème étude, nous avons montré que des patients atteints de déficits immunitaires combinés sévères ɣc et JAK3 déficients n’ont pas d’ILCs. Après allogreffe de moelle osseuse, le nombre d’ILCs circulantes reste indétectable, sans manifestation clinique notable associée. Ces résultats sont en faveur d’une redondance des fonctions des ILCs chez l’homme, lorsque les fonctions T et B sont conservées. Nous avons ensuite étudié les modifications phénotypiques et fonctionnelles des cellules NK au cours du purpura thrombopénique immunologique, et observé un défaut de production d’interféron-ɣ par les cellules NK circulantes et une augmentation de la cytotoxicité dépendante des anticorps des cellules NK spléniques. Une inhibition des fonctions des cellules NK par les immunoglobulines polyvalentes est également mise en évidence. Enfin, une étude des ILCs circulantes au cours de la maladie associée aux IgG4 ainsi qu’une revue de la littérature sur l’étude des ILCs au cours des pathologies inflammatoires sont rapportées. En conclusion, l’apparente redondance des ILCs chez l’homme ainsi que leur implication en pathologies inflammatoires en font de potentielles cibles thérapeutiquesInnate lymphoid cells (ILCs) are recently identified components of the immune system, but their functions in vivo in humans are still elusive. In a first study, we show in patients with common variable immunodeficiency that non-infectious inflammatory complications and severe bacterial infections were more frequent in patients with severe NK cell lymphopenia, indicating potential non-redundant immune functions of NK cells when the adaptive immune response is not optimal. In a second study, we observe that in patients with ɣc and JAK3 severe combined immunodeficiencies, all ILC subsets are absent. After hematopoietic stem cell transplantation, ILCs remain indetectable with no susceptibility to disease, suggesting that ILCs might be redundant and dispensable in humans, if T and B cells functions are preserved. In the second part of this thesis, we study phenotypic and functional modifications of NK cell compartment in primary immune thrombocytopenia. Interferon gamma production by the peripheral blood NK cells of ITP patients is decreased. In contrast, splenic NK cells of ITP patients tend to be more efficient in antibody-dependent cell cytotoxicity. Intravenous polyvalent immunoglobulins lead to the inhibition of blood NK cell activation. Finally, we present the preliminary results of a study investigating the modifications of circulating ILCs in IgG4-related disease, and present an extensive litterature review concerning the role of ILCs in inflammatory diseases. In conclusion, the apparent redundancy of ILCs for protective immunity and their pathogenic role in inflammatory diseases make their targeting in humans for therapeutic purposes particularly promising
41
Pham, Van Linh. "Modulation de la réponse immunitaire par des agonistes de la voie de signalisation TLR/IL - 1R dans le modèle d'asthme". Paris 5, 2010. http://www.theses.fr/2010PA05T013.
Abstract (sommario):
Dans le travail portant sur l'immunorégulation de la réponse immunitaire dans le modèle expérimental d'asthme, nous avons montré que les basophiles étaient activés par des ARN double brin poly (A:U) et que cette stimulation exacerbait les réponses d'asthme. Nous avons ensuite étudié la modulation de l'asthme en utilisant des agonistes de la voie TLR/IL1R. Les résultats obtenus ont montré que le R848 , agoniste de TLR7 qui induit les réponses immunitaires antivirales de type Th1, et l'IL-33 qui favorise les réponses Th2, activaient les cellules NKT dont la production rapide et modulée des cytokines pourraient avoir un effet modulateur dans l'asthme. Nous avons montré que les cellules NKT avaient une fonction régulatrice sur le développement et l'activité des cellules Th17. Enfin, nous avons décrit les effets protecteurs et suppresseurs induits par le R848 dans le modèle d'asthme et montré que ces effets suppresseurs étaient dépendants des cellules T régulatrices et du TGF-βIn our experimental work focusing on the immunoregulation response in a model of asthma, we showed firstly that the basophils were activated by double-stranded RNA poly(A:U) and that this stimulation exacerbated asthmatic responses in vivo. We then investigated the modulation of asthmatic responses using natural and synthetic ligands of TLR/il1r signaling pathway. The results showed that R848, a synthetic TLR7 agonist which promotes Th1 antiviral responses, and IL-33, which is known to favor Th2 responses, activated NKT cells whose rapid and modulated production of cytokines suggested that these cells might have a modulatory effect in asthma. We demonstrated that NKT cells have a regulatory function on development and activity of newly identified Th17 cells. Finally we described the protective and suppressive effects by R848 in the model of asthma and showed that suppression effects were dependent on regulatory T cells and the TGF-β
42
Grimaldi, David. "Mécanismes cellulaires et moléculaires de l'immunodépression post-infectieuse". Phd thesis, Université René Descartes - Paris V, 2013. http://tel.archives-ouvertes.fr/tel-00924659.
Abstract (sommario):
Les infections graves entraînent une dysrégulation de la réaction inflammatoire associée à une immunodépression complexe associée à la survenue d'infections nosocomiales. Les mécanismes cellulaires et moléculaires qui régulent ces phénomènes demeurent largement incompris. A l'interface entre système immunitaire inné et adaptatif, les cellules dendritiques et les lymphocytes innés pourraient être impliqués dans l'immunodépression post-infectieuse. Par ailleurs, les récepteurs de type Toll (TLR) déterminent l'amplitude de la réponse inflammatoire initiale, mais leur contribution dans le développement de l'immunodépression post-infectieuse n'a pas été établie. Les objectifs de ce projet de recherche étaient d'investiguer le rôle des cellules dendritiques, des lymphocytes de type innés et des voies de signalisation dépendantes des TLRs dans l'immunodépression induite par le sepsis. Nous avons mené ce programme de recherche en combinant une double approche translationnelle et expérimentale. Nous avons étudié la cinétique des cellules dendritiques circulantes chez le patient septique et montré que leur déplétion était associée à la survenue d'infections nosocomiales. L'analyse des trois souspopulations de lymphocytes T innés (lymphocytes γδ, NKT et MAIT) chez le patient septique a montré que seuls les lymphocytes MAIT présentaient une déplétion associée au sepsis sévère, dont la persistance était également corrélée à la survenue d'infections nosocomiales. Enfin, à l'aide de souris knockout nous avons étudié le rôle de TLR2, TLR4 et TLR5 sur la réponse anti-bactérienne dans un modèle murin de pneumonie secondaire à P. aeruginosa à distance d'un sepsis polymicrobien sublétal. Nous avons montré que les souris déficientes pour TLR2 étaient protégées de l'infection secondaire grâce à une meilleure clairance bactérienne. Ce travail introduit des perspectives nouvelles dans la physiopathologie de l'immunodépression post-infectieuse et suggère des applications thérapeutiques potentielles.
43
Lopez-Lastra, Silvia. "Humanized Mice as Models to study Human Innate Immunity and Immunotherapies". Thesis, Université Paris-Saclay (ComUE), 2017. http://www.theses.fr/2017SACLS039/document.
Abstract (sommario):
Les modèles animaux ont largement contribué à notre compréhension de l’immunologie humaine et des mécanismes pathologiques associés au développement des maladies. Cependant, les modèles murins ne permettent pas de reproduire toute la complexité des pathologies humaines. Les souris à système immunitaire humain (HIS), par leur capacité à récapituler l’hématopoïèse humaine et à être infectées par des pathogènes humains, constituent une solution de choix pour combler ce fossé inter-espèce. Après greffe de cellules souches hématopoïétiques humaines, des souris hôtes sévèrement immunodéprimées permettent un haut niveau de développement du système hémato-lymphoïde humain tout au long de leur vie. Cependant, certains types cellulaires, comme les cellules lymphoïdes innées, ne parviennent pas à se différencier et à fonctionner normalement dans les modèles murins HIS actuels. Ici, nous décrivons le développement d’un modèle souris HIS original, nommé BRGSF, montrant une amélioration de la maturation, de la fonction et de l’homéostasie des cellules natural killer (NK) humaines et des autres ILCs. De plus, en récapitulant les différentes étapes du développement des ILCs humaines, ce modèle souris BRGSF nous a permis d’identifier pour la première fois un précurseur d’ILC (ILCP) présent à la fois dans notre modèle HIS ainsi que dans le sang périphérique et plusieurs organes lymphoïdes et non-lymphoïdes humains. Cette population circulante d’ILCPs pourrait constituer un substrat pour la production d’ILCs matures dans les tissus périphériques en réponse à des stress environnementaux, inflammatoires et/ou infectieux. Dans une seconde partie de ce travail de thèse, nous avons utilisé ces souris BRGS afin de tester l’efficacité de deux immunothérapies reposant sur les lymphocytes innés pour le traitement d’un carcinome colorectal exprimant EGFR et muté pour KRAS. La première approche a consisté en la co-administration des cellules NK dérivées de sang de cordon ombilical et d'anticorps monoclonal cetuximab afin de promouvoir le mécanisme de cytotoxicité cellulaire dépendante des anticorps (ADCC) contre la tumeur. La seconde stratégie a reposé sur l’injection de nanobodies VHH combinant l’inhibition de l’EGFR et l’activation spécifique du récepteur Vγ9Vδ2 des cellules T effectrices. Les résultats de cette étude soulignent l’importance des modèles murins HIS pour la compréhension du développement des lymphocytes innés humains et pour mieux les mettre à profit dans les thérapies anti-tumeursAnimal models have extensively contributed to our understanding of human immunobiology and to uncover the underlying pathological mechanisms occurring in the development of the disease. However, mouse models do not always reproduce the genetic complexity inherent in human disease conditions. Human immune system (HIS) mouse models that are susceptible to human pathogens and can recapitulate human hematopoiesis provide one means to bridge the interspecies gap. Severely immunodeficient host mice support life-long, high level human hematolymphoid development after engraftment with human hematopoietic stem cells (HSC). However, the differentiation and function of some blood cell types, including innate lymphoid cells (ILCs), is poorly characterized in current HIS mice. Here we describe the development of a novel HIS mouse model, named BRGSF, which demonstrate enhanced maturation, function and homeostasis of human natural killer (NK) cells and other ILCs. Furthermore, the BRGSF-based HIS mouse model recapitulated the developmental stages of human ILCs. We could identify for the first time an ILC precursor (ILCP) population that is present both in HIS mice and in human peripheral blood as well as in several lymphoid and non-lymphoid human tissues. This circulating human ILCP population may provide a substrate to generate mature ILCs in tissues in response to environmental stressors, inflammation and infection. In a second part of the thesis we used BRGS immunodeficient mice to assess two innate lymphocyte-based immunotherapeutic approaches for treating EGFR-expressing KRAS-mutated colorectal carcinoma in vivo. The first model used a combination of umbilical cord blood (UCB)-derived NK cells and the monoclonal antibody cetuximab to promote antibody dependent cell cytotoxicity (ADCC) against the tumors. In a second model, we evaluated the therapeutic suitability of novel bispecific VHH constructs that combine inhibition of the EGFR with the target-specific activation of effector Vγ9Vδ2-T cells. These studies highlight the utility for HIS-based mouse models to understand human innate lymphocyte development and to harness these potent effectors for anti-tumor therapies
44
Fathallah, Ikbal. "Characterization of the molecular mechanisms of Epstein-Barr Virus-mediated inhibition of the innate sensor TLR9". Thesis, Lyon 1, 2009. http://www.theses.fr/2009LYO10323.
Abstract (sommario):
L’infection chronique est à l’origine de 15-20% des cancers dans le monde. Dans la plupart des cas, les infections sont éliminées par le système immunitaire, sans incidence importante sur les hôtes infectés. Toutefois, les oncovirus peuvent échapper au système immunitaire et induire une transformation cellulaire, ce qui constitue deux éléments clés de la cancérogenèse associée aux virus. L’EBV est un herpesvirus ubiquitaire à ADN double brin qui infecte plus de 90% de la population, avec un tropisme spécifique pour les cellules B. Après primo-infection, le virus persiste dans l’hôte pour toujours. L’EBV est responsable de la mononucléose infectieuse bénigne et est associé à plusieurs tumeurs malignes telles que le lymphome de Burkitt, le lymphome de Hodgkin et certaines formes de cancers gastriques. Les récepteurs Toll-like (TLRs) mammaires jouent un rôle important dans la défense de l’hôte lors de l’infection pathogène en régulant et reliant les réponses immunitaires innées et adaptatives. Dans cette étude, nous avons montré que l’EBV pouvait altérer la régulation et l’expression de TLR9, une des molécules effectrices majeures de la réponse immunitaire innée. L’infection par l’EBV des lymphocytes B primaires humains a entraîné l’inhibition de la fonctionnalité de TLR9. Nous avons observé que l’EBV exerçait sa fonction inhibitrice en diminuant les niveaux d’ARNm et de la protéine du récepteur TLR9. De plus, nous avons établi que LMP1, oncoprotéine majeure de l’EBV, inhibait fortement la transcription de TLR9. La sur-expression de LMP1 par transfection transitoire ou transduction des cellules B réduit l’activité du promoteur de TLR9, l’ARNm et les niveaux protéiques. Bloquer la voie de signalisation de NF-κB induite par la signalisation de LMP1 permet de récupérer l’activité du promoteur de TLR9 et l’expression de la protéine. L’ensemble de nos résultats mettent en évidence un nouveau mécanisme utilisé par l’EBV pour supprimer la réponse immunitaire de l’hôte en dérégulant la transcription de TLR9 via l’activation de NF-κB par LMP1Chronic infection causes about 15-20% of cancer worldwide. In most cases, infections are cleared by the immune system with no dramatic consequence for the infected hosts. However, oncoviruses can escape the immune system and induce cellular transformation, two key events in cancer mediated by viruses. EBV is a ubiquitous double-stranded DNA herpesvirus, which infects more than 90% of the population with a specific tropism to B-cells. Upon primo-infection the virus persists in the host for lifetime. EBV is responsible of the benign infectious mononucleosis and is associated to several malignancies such as the Burkitt lymphoma, Hodgkin’s lymphoma and some forms of gastric cancers. Mammalian Toll-like receptors (TLRs) play a key role in host defense during pathogen infection by regulating and linking the innate and adaptive immune responses. TLRs belong to a family of receptors that recognize pathogen-associated molecular patterns and are expressed on immune and non-immune cells, endowing them with the capacity to sense pathogen-derived products and to alert the immune system . In this study we show that EBV can alter the regulation and expression of TLR9, one of the key effector molecules of the innate immune response. EBV infection of human primary B cells resulted in the inhibition of TLR9 functionality. Stimulation of TLR9 on primary B cells led to the production of IL-6, TNFα and IgG, which was inhibited in cells infected with EBV. We observed that EBV exerts its inhibitory function by decreasing TLR9 mRNA and protein levels. This event was observed twelve hours post EBV infection of primary cells as well as in an immortalized B cell line, demonstrating the specific role of the virus to turn down TLR9 levels. In addition, we determined that the EBV oncoprotein LMP1 is a strong inhibitor of TLR9 transcription. Over expression of LMP1 by transient transfection or transduction of B cells, reduced TLR9 promoter activity, mRNA and protein levels. Blocking the NF-κB pathway induced by LMP1 signaling, recovered TLR9 promoter activity and protein expression. Moreover LMP1 mutants deficient in activating the NF-κB pathway inversely restored TLR9 transcription. Taken together, our study reveals a novel mechanism used by EBV to suppress the host immune response by deregulating the TLR9 transcript through LMP1-mediated NF-κB activation
45
Massot, Bérangère. "ETUDES DE POPULATIONS LYMPHOCYTAIRES T NATURELLES : iNKT17 et Th17". Phd thesis, Paris 5, 2012. http://tel.archives-ouvertes.fr/tel-00738051.
Abstract (sommario):
Le thymus est un organe permettant le développement des lymphocytes T, partie intégrante du système immunitaire. Ces cellules sont communément associées au système immunitaire adaptatif, bien que certaines populations, dont les lymphocytes iNKT et Tγδ, soient associées au système immunitaire inné. De manière générale, ces lymphocytes " innés " sont capables de répondre très rapidement à différents signaux d'activation, par la production rapide et massive d'IL-4, d'IFN-γ et d'IL-17. Notre laboratoire a mis en évidence l'existence de deux sous-populations de lymphocytes iNKT, iNKT conventionnels et iNKT17, ayant deux voies de différenciation thymique bien distinctes, mais dont les mécanismes de détermination sont encore inconnus. Il a été montré que " SLAM-associated protein " (SAP) est indispensable au développement des lymphocytes iNKT, puisqu'ils sont absents chez les souris déficientes en SAP. D'autre part, ces mêmes souris montrent également une déficience de la réponse Th2. Nous avons alors émis l'hypothèse que SAP pourrait être impliqué dans la production d'IL-4 par les lymphocytes iNKT, et dans la détermination des deux sous-populations de lymphocytes iNKT conventionnel ou producteur d'IL-17. Dans une première partie, nous avons utilisé des souris triple mutantes Sap-/- Vα14Tg-ROR(γt)-Egfp, permettant l'étude des sous-populations de lymphocytes iNKT malgré la déficience en SAP. Nous avons ainsi montré que SAP est indispensable à l'acquisition thymique de la capacité de production d'IL-4 par les lymphocytes iNKT conventionnels. Chez ces souris déficientes en SAP, nous avons observé une augmentation de la fréquence des lymphocytes iNKT17 RORγtpos producteurs d'IL-17, ce qui montre clairement que SAP n'est pas nécessaire pour l'acquisition des propriétés fonctionnelles des lymphocytes iNKT17. Nous avons ainsi mis en évidence une nouvelle fonction de SAP dans le développement thymique des cellules iNKT productrices d'IL-4. De plus, nos résultats montrent que SAP est un point de contrôle obligatoire déterminant l'orientation de la différenciation thymique des cellules iNKT vers les cellules iNKT17 ou vers les cellules iNKT conventionnelles. En parallèle des lymphocytes iNKT17 présents dans le thymus, nous avons également analysé une autre population T particulière : des thymocytes TCRαβposCD4pos matures et producteurs d'IL-17, les lymphocytes Th17 naturels. Nous avons mis en évidence que ces lymphocytes expriment le facteur de transcription RORγt. Ces lymphocytes T CD4posCD8negCD44hiRORγtpos sont capables de produire rapidement et massivement de l'IL-17, mais requièrent l'IL-23 pour co-produire l'IL-22. De plus, ils se distinguent des lymphocytes Th17 induits, ou conventionnels, par l'expression du facteur de transcription PLZF et par leur capacité à répondre très rapidement à des stimuli pro-inflammatoires, nommément l'IL-23 associé à l'IL-1β et un agoniste TLR4. Les résultats obtenus durant cette thèse ouvrent donc de nombreuses perspectives de recherches fondamentale et thérapeutique, domaine dans lequel l'IL-17 est devenu une cible privilégiée pour le traitement des maladies auto-immunes.
46
Sanchez, Carole. "Analyse des sous populations lymphocytaires, et plus particulièrement les cellules NK, dans la polyglobulie primitive". Thesis, Aix-Marseille, 2012. http://www.theses.fr/2012AIXM5059/document.
Abstract (sommario):
Caractérisée par la présence de la mutation JAK2 V617F, la polyglobulie primitive voit son développement contenu par des saignées mais est associée à une incidence plus élevée de cancers. Une exploration globale de l'immunité des patients a été réalisée par la quantification des sous populations lymphocytaires de l'immunité innée et adaptative. Ceci a permis la mise en évidence d'une diminution des lymphocytes B et d'une augmentation des cellules NK. Les cellules NK sont réputées pour leurs propriétés antitumorales mais elles ne sont pourtant pas capables d'éradiquer la PV, posant la question de leurs capacités fonctionnelles. Si les cellules NK des patients présentent une activité cytotoxique basale inférieure aux témoins, elles ne présentent pas d'anomalies de l'expression de leurs récepteurs, de la production de molécules cytolytiques ou de prolifération. Par contre, les cellules NK d'un patient ayant développé une érythroleucémie ou des cellules NK de sujets âgés par rapport à des témoins plus jeunes présentent des anomalies d'expression des récepteurs. L'augmentation des cellules NK pourrait être liée à la mutation JAK2 V617F. Si cette mutation est présente dans les lymphocytes de tous les patients, il existe des arguments pour sa présence dans les cellules NK de certains patients. Enfin, une analyse transcriptomique a permis de définir un profil d'expression propre aux cellules NK des patientsCharacterized by the presence of the JAK2 V617F mutation, polycythemia vera's development is content by phlebotomy but is associated with a higher incidence of cancer. A global exploration of the immunity of patients was performed by quantification of lymphocyte subpopulations of innate and adaptive immunity. This allowed the detection of a decrease in B cells and an increase in NK cells. NK cells are known for their antitumor properties but they are not yet able to eradicate PV, raising the question of their functional abilities. If NK cells of patients have a lower basal cytotoxic activity than healthy donors, they do not show abnormal expression of their receptors, the production of cytolytic molecules or proliferation. On the contrary, NK cells from a patient who developed erythroleukemia or NK cells from elderly healthy donors compared with younger healthy donors exhibit abnormalities of receptors expression. The increase in NK cells could be related to the JAK2 V617F mutation. If the mutation is present in cells of all patients, there are arguments for its presence in the NK cells of some patients. Finally, transcriptome analysis has identified an expression profile specific to NK cells of patients
47
Verrier, Thomas. "Function and plasticity of NKp46 expressing innate lymphoid cells". Thesis, Sorbonne Paris Cité, 2016. http://www.theses.fr/2016USPCC173/document.
Abstract (sommario):
Les cellules lymphoïdes innées de groupe 3 (ILC3) contribuent activement à l’homéostasie intestinale par leur production d’Interleukin-22 (IL-22). Ces ILC3 regroupent 2 sous-populations majeures, les LTi (« Lymphoid Tissue inducer »), caractérisées par l’expression du récepteur au chimiokine CCR6, et les ILC3 exprimant le facteur de transcription (FT) T-bet, qui comprennent une population positive pour le marqueur de surface NKp46, récepteur originalement utilisé pour identifier les ILC de groupe 1 (ILC1). Les ILC1 jouent un rôle prépondérant dans la réponse aux pathogènes intracellulaires et anti-tumorale. Jusqu’à présent, trois populations majeures composent les ILC1 : les lymphocytes cytotoxiques Natural Killer (NK ou ILC1b), qui dépendent largement du FT Eomes et expriment l’intégrine CD49b ; les ILC1 hépatiques et intestinaux, qui dépendent du FT T-bet et expriment CD49a (ILC1a) ; et une population CD49a+ et DX5+ indépendante du FT Nfil3 localisée dans les glandes salivaires ou l’utérus (ILC1ab). Mes travaux visent à comprendre la biologie des ILC exprimant NKp46, ainsi que les facteurs impliqués dans leur développement, leur maturation et leur fonction. La majeure partie de ma thèse se concentre sur les NKp46+ ILC3. Premièrement, nous démontrons un rôle majeur pour le récepteur aux chimiokine CXCR6 dans la localisation des NKp46+ ILC3 dans les villi de la lamina propria intestinale (Satoh-Takayama et al. 2014). Deuxièmement, j’ai mis en évidence que NKp46+ ILC3 pouvait perdre l’expression de NKp46 (Verrier et al. 2016). Déclenchée par le TGFβ, cette perte d’expression est associée à une plus forte capacité à produire de l’IL-22, mais aussi à l’acquisition de marqueurs identifiant les LTi (CCR6, MHC-II), démontrant ainsi la plasticité des NKp46+ ILC3. Enfin, en collaboration avec le groupe de Rachel Golub, nous avons confirmé le rôle présumé de la molécule Notch dans cette plasticité (Chea et al. 2016). Dans ce manuscrit, je discuterai du développement et de l’hétérogénéité des ILC3, ILC1a, ILC1b et ILC1ab. L’ensemble de mes résultats soutient une vision dynamique de la biologie des ILC reflétant l’adaptation de ces cellules effectrices face à leur environnement. En caractérisant les différents acteurs impliqués dans ce processus dynamique, mes travaux pourront servir au développement de thérapies visant à contrôler l’équilibre entre ces différentes populations dans divers pathologies comme le cancer, les infections virales, ou encore les maladies intestinalesGroup 3 Innate Lymphoid cells (ILC3) actively maintain mucosal homeostasis through the production of Interleukin-22 (IL-22). ILC3 encompass 2 major populations, LTi (« Lymphoid Tissue inducer »), characterized by the expression of the chemokine receptor CCR6, and ILC3 that express the transcription factor T-bet, which include a population expressing the surface marker NKp46, a receptor originally used to identify group 1 ILC (ILC1). ILC1 plays a major role in the defense against intracellular pathogens and anti-tumoral responses. Three major ILC1 populations have been identified: the cytotoxic lymphocytes « Natural Killer » (NK or ILC1b), which largely rely for on the transcription factor Eomes their generation and express the integrin CD49b; hepatic and intestinal ILC1 that depends on the T-bet transcription factor and express CD49a (ILC1a); and a population that expresses CD49a and CD49b (ILC1ab) and populates the salivary gland and the uterus, which is independent of the transcription factor Nfil3. My work aimed to understand the biology of NKp46 expressing ILC, as well as factor involved in their development, maturation and function. The major part of my work focuses on NKp46+ ILC3. First, we demonstrate a major role for the chemokine receptor CXCR6 in their localisation in the lamina propria villi (Satoh-Takayama et al. 2014). Second, I showed that NKp46+ ILC3 could lose NKp46 expression (Verrier et al. 2016). Induced by TGFβ, this loss of expression was associated with higher IL-22 production and by the acquisition of markers identifying LTi (CCR6, MHC-II), demonstrating NKp46+ ILC3 plasticity. Finally, in collaboration with Rachel Golub’s group, we confirmed a putative role for Notch-signaling in this plasticity (Chea et al. 2016). In this manuscript, I will discuss the development and the heterogeneity of ILC3, ILC1a, ILC1b and ILC1ab. All the results I generated support a dynamic vision of ILC biology, which reflects how they adapt in response to environmental cues. By characterizing the different actors involved in this dynamic process, my work could be used to design therapies aiming at controlling the equilibrium between these different populations in diverse pathologies such as cancer, viral infection, or intestinal diseases