Tesi sul tema "Fœtal"

L’analyse visuelle du rythme cardiaque fœtal (RCF) est une excellente méthode de dépistage de l’hypoxie fœtale. Cette analyse visuelle est d’autre part sujette à une variabilité inter- et intra-individuelle importante. L’hypoxie fœtale au cours du travail s’exprime par des anomalies du RCF. La sous-évaluation de la gravité d’un RCF entraine une prise de risque indue pour le fœtus avec une augmentation de sa morbi-mortalité et sa surévaluation entraine un interventionnisme obstétrical inutile avec une augmentation du taux de césariennes. Ce dernier point pose par ailleurs en France un problème de santé publique.L’analyse automatisée du signal RCF permet de diminuer la variabilité inter- et intra-individuelle et d’accéder à d’autres paramètres calculés visant à augmenter la valeur diagnostique. Les critères d’analyse morphologiques du RCF (ligne de base, nombre d’accélérations, nombre et typage des ralentissements, variabilité à long terme (VLT)) ont été décrits ainsi que d’autres tels que les surfaces des ralentissements, les indices de variabilité à court terme (VCT) et les analyses fréquentielles. Il n’en demeure pas moins que la définition de la ligne de base, à partir de laquelle sont repérés les accélérations et les ralentissements reste, dans certains cas, difficile à établir.L’objectif principal de la thèse est d’établir un modèle prédictif de l’acidose fœtale à partir d’une analyse automatisée du RCF. L’objectif secondaire est de déterminer la pertinence des différents paramètres élémentaires classiques (CNGOF 2007) (fréquence de base, variabilité, accélérations, ralentissements) et celle d’autres paramètres inaccessible à l’œil (indices de variabilité à court terme, surfaces des ralentissements, analyse fréquentielle…). Par la suite, nous voulons identifier des critères de décision qui aideront à la prise en charge obstétricale.Nous proposons d’aborder l’analyse automatisée du RCF pendant le travail par l’intermédiaire d’une étude cas-témoins ; les cas étant des tracés RCF de nouveau-nés en acidose néonatale (pH artériel au cordon inférieur ou égal à 7,15) et les témoins, des tracés RCF de nouveau-nés sans acidose (pH artériel au cordon supérieur ou égal à 7,25). Il s’agit d’une étude monocentrique à la maternité de l’hôpital Saint Vincent de Paul, GHICL – Lille, sur notre base de données « Bien Naitre » (archivage numérique des tracés RCF depuis 2011), comptant un un nombre suffisant de cas sur ce seul centre. La maternité Saint Vincent de Paul (GHICL) présente depuis 2011 environ 70 cas par an d’acidose néonatale (pHa ≤ 7,10) (3,41%). Le logiciel R sera utilisé pour l’analyse statistique
Visual analysis of the fetal heart rate FHR is a good method for screening for fetal hypoxia but is not sufficiently specific. The visual morphological analysis of the FHR during labor is subject to inter- and intra-observer variability – particularly when the FHR is abnormal. Underestimating the severity of an FHR leads to undue risk-taking for the fetus with an increase in morbidity and mortality and overvaluation leads to unnecessary obstetric intervention with an increased rate of caesarean section. This last point also induces a French public health problem.FHR automated analysis reduces inter and intra-individual variability and accesses other calculated parameters aimed at increasing the diagnostic value. The FHR morphological analysis parameters (baseline, number of accelerations, number and typing of decelerations, long-term variability (LTV)) were described as well as others such as the decelerations surfaces, short-term variability (STV) and frequency analyzes. Nevertheless, when attempting to analyze the FHR automatically, the main problem is computation of the baseline against which all the other parameters are determined.Automatic analysis provides information on parameters that cannot be derived in a visual analysis and that are likely to improve screening for fetal acidosis during labor.The main objective of the thesis is to establish a predictive model of fetal acidosis from a FHR automated analysis. The secondary objective is to determine the relevance of the classical basic parameters (CNGOF 2007) (baseline, variability, accelerations, decelerations) and that of other parameters inaccessible to the eye (indices of short-term variability, surfaces of decelerations, frequency analysis ...). Later, we want to identify decision criteria that will help in the obstetric care management.We propose to validate FHR automated analysis during labor through a case-control study; cases were FHR recordings of neonatal acidosis (arterial cord pH less than or equal to 7.15) and controls, FHR recordings of neonatal without acidosis (arterial cord pH upper than or equal to 7.25). This is a monocentric study at the maternity hospital of Saint Vincent de Paul Hospital, GHICL - Lille, on our « Well Born » database (digital archiving of RCF plots since 2011), with a sufficient number of cases on this only center. Since 2011, the Saint Vincent de Paul hospital (GHICL) has had about 70 cases per year of neonatal acidosis (pHa less than or equal to 7.10) (3.41%). The R software will be used for statistical analysis

La multiplication des gestes invasifs pendant la grossesse et un meilleure connaissance de l’expérience de la douleur chez le prématuré nous conduisent à réfléchir sur la possibilité pour le fœtus de percevoir des sensations douloureuses. Le but de ce travail est l’étude des conséquences hémodynamiques et endocriniennes, immédiates mais aussi à long terme, d’une stimulation nocioceptive foetale dans un modèle de fœtus chroniquement instrumenté. Les effets de certaines hormones de stress sur la circulation fœtale ont été étudiés. Nous avons montré que la noradrénaline a, in vivo, un puissant effet dilatateur sur la circulation pulmonaire fœtale. Les glucocorticoïdes n’ont pas d’effet sur le tonus vasculaire pulmonaire de base mais augmentent la réponse vasodilatatrice pulmonaire à la noradrénaline. A la naissance, ils améliorent l’adaptation à la vie extra-utérine en augmentant la vasodilatation pulmonaire induite par la ventilation mécanique. Dans un second temps , nous avons mis au point différents modèles d’étude de la douleur fœtale. Un réflexe nociceptif a été mis en évidence après stimulation du nerf sural in utero. Une analgésie fœtale par morphinomimétiques diminue ce réflexe. Nous nous sommes ensuite intéressés aux conséquences d’un stimulus nociceptif de type inflammatoire (test au formol). L’injection de formol entraîne une augmentation du taux de cortisol plasmatique, de la fréquence cardiaque et de la pression artérielle. De plus, une vasoconstriction pulmonaire est observée. Cette vasoconstriction pulmonaire est probablement secondaire à l’activation du système sympathique. En effet, le formol n’a pas d’action sur la circulation pulmonaire après blocage des α1-adrénocepteurs. De même, l’analgésie fœtale est efficace. Enfin, nous nous sommes demandés si une stimulation nociceptive répétée pendant la vie fœtale pouvait entraîner des conséquences à long terme. Nous avons testé la réactivité de l’axe hypothalamo-hypophyso-surrénalien et la réponse à la noradrénaline à 2 mois de vie. Nous n’avons pas mis en évidence de modification de ces réponses chez les animaux stressés in utero
The development of fetal invasive procedures and a better knowledge about pain in preterm and full-term newborn infants explai the increasing interest in the subject of fetal pain. The aim of our work is to study the immediat hemodynamic and hormonal response to nociceptive stimulus hormones in chronically instrumented fetal lambs. The long term consequences of fetal pain are also evaluated. We found that norepinephrine induces a potent pulmonary vasodilatation. Glucocorticoids hav no effext on basal pulmonary vascular tone but potentiate norepinephrine induced pulmonary vasodilatation ; they enhance pulmonary vasodilatation induced ventilation and so improve circulatory adaptation at birth. Then, we developed different experimental models to investigate the consequences of fetal pain. A nociceptive flexion reflex was demonstrated in utero after electrical sural stimulation. Sufentanil decreased the response. Then, we studied the effects of an inflamatory nociceptive stimulation induced by subcutaneous injection of formalin. Formalin increased plasmatic cortisol, fetal heart rate and systemic blood pressure. Furthermore, a pulmonary vasoconstriction was observed, probably induced by sympathetic stimulation ; Indeed, formalin had no action on the pulmonary circulation after α1-adrénoceptor blockage. Fetal analgesia reduced the immediat hemodynamic response. Finally, we studied the long term effects of repeated nociceptive stimulation during fetal life. We tested the HPA axis and vascular reactivity in lambs aged of 2 months. We did not demonstrate any difference between lambs stressed in utero and controls

Thèse (M.Tr.Soc.) -- Université du Québec à Chicoutimi, programme en extension de l'Université du Québec en Outaouais, 2006.
La p. de t. porte en outre: Mémoire présenté à l'Université du Québec à Chicoutimi comme exigence partielle de la maîtrise en travail social offerte à l'Université du Québec à Chicoutimi en vertu d'un protocole d'entente avec l'Université du Québec en Outaouais. CaQCU Bibliogr.: f. [177]-184. Document électronique également accessible en format PDF. CaQCU

Durant la vie fœtale, il existe un échange de cellules entre la mère et le fœtus permettant le passage et la persistance à long terme de cellules fœtales pluripotentes dans le sang et dans différents tissus maternels. Ce phénomène est appelé microchimérisme fœtal. Les cellules fœtales ont la capacité de migrer de manière préférentielle au sein des tissus maternels lésés et de s’y différencier pour participer à certains processus de réparation tissulaire maternelle. Le cancer du sein fait partie des cancers les plus fréquemment diagnostiqués pendant ou au décours d’une grossesse. Or, les cancers du sein pendant la grossesse ont certaines caractéristiques histologiques et pronostiques qui les distinguent des formes sporadiques. L’objectif de cette thèse a été de déterminer si des tumeurs du sein associées à la grossesse pouvaient être infiltrées par des cellules fœtales et par quel type de cellules fœtales. Si ce phénomène était mis en évidence, il fallait également en déterminer l’incidence. Dans ce travail, nous avons montré que tous les cas de cancers du sein survenant chez la femme au cours de la grossesse (9 cas) étaient infiltrés par des cellules fœtales, contre aucun des 4 lésions bénignes mammaires contrôle (P<0. 01). Les cellules fœtales exprimaient des marqueurs mésenchymateux ou épithéliaux suggérant leur participation au stroma. Nous avons également utilisé un modèle murin transgénique exprimant l’oncogène Ha-RAS sous le contrôle du promoteur du MMTV (Mouse Mammary Tumor Virus) permettant le développement de tumeurs malignes du sein durant la période de la gestation. Nous avons confirmé la migration élective des cellules fœtales vers les tumeurs du sein par rapport au foie sain des mêmes souris (P=0. 01). Le phénotype de ces cellules fœtales était également épithélial et la fréquence du microchimérisme au sein des tumeurs augmentait significativement dans les tumeurs de haut grade de malignité (P=0. 032). Dans aucune de ces deux études nous n’avons identifié de cellules leucocytaires ou de cellules endothéliales. Enfin, pour établir l’origine des cellules microchimériques, nous avons étudié et caractérisé les cellules fœtales au niveau du sang placentaire maternel dans les espaces intervilleux de placenta à terme. Les cellules fœtales identifiées dans ces espaces pouvaient exprimer des marqueurs endothéliaux, mésenchymateux ou épithéliaux. Nous avons ainsi montré que les cellules fœtales transférées au décours de la gestation migraient préférentiellement vers les tissus tumoraux et qu’elles avaient un phénotype épithélial et mésenchymal pouvant intervenir dans le contrôle de la prolifération tumorale. D’autres études sont nécessaires pour mesurer l’impact de la présence des cellules fœtales dans le processus tumoral.

La surveillance du bien-être fœtal pendant le travail repose essentiellement sur l’enregistrement du rythme cardiaque fœtal (RCF). Celui-ci, même continu pendant le travail, ne permet pas d’évaluer parfaitement l’oxygénation du fœtus ni le risque d’asphyxie néonatale. En effet, cet outil est imparfait et son évaluation subjective avec une importante variabilité d’interprétation inter et intra opérateur. Des examens dits de seconde ligne sont utilisés en pratique courante pour caractériser l’état fœtal : le prélèvement de sang fœtal au scalp pour l’étude de l’équilibre acido-basique du fœtus (pH ou lactates) ou la pose d’électrode au scalp pour étudier l’ECG fœtal (analyse du segment ST). Ces techniques sont néanmoins invasives et sont soumises à des contraintes techniques. Il y a donc un intérêt à développer des moyens d’évaluation du bien être fœtal à la fois objectifs et non invasifs afin de diminuer la survenue d’une asphyxie périnatale. En effet, celle-ci touche 3 à 8 nouveaux nés pour 1000 naissances. La mortalité en période post-natale est de 25 à 50% des cas et ceux qui survivent développeront des troubles sévères (épilepsie, retard neuro-cognitif et comportemental, paralysie cérébrale…). Au cours de l’accouchement, l’asphyxie périnatale se caractérise par une diminution du pH artériel ombilical. Cette mesure du pH sanguin est donc la mesure de référence pour déterminer la sévérité de l’asphyxie.Une des voies étudiées pour améliorer le dépistage des fœtus à risque d’acidose est l’analyse des modifications du système nerveux autonome (SNA) par analyse de la variabilité du rythme cardiaque fœtal. En effet, la fréquence cardiaque fœtale est en permanence sous l’influence du système nerveux autonome et sa variabilité (VFC) est un reflet de la balance sympathique / parasympathique. Le CHU de Lille a développé une nouvelle méthode d’analyse continue de la VFC ayant montré son efficacité chez l’adulte et chez le nouveau né pour l’évaluation du SNA. L’objectif de ce travail de Thèse est d’adapter cette technologie à l’analyse du SNA fœtal pour obtenir un nouvel indice appelé Fetal Stress Index (FSI) et d’évaluer sa pertinence en situation d’acidose.Cette preuve de concept a été effectuée de manière expérimentale chez le fœtus de brebis. Elle s’est réalisée en 2 temps. Nous avons tout d’abord évalué la performance du FSI par rapport aux méthodes classiques d’analyse de la VFC en termes d’aptitude à détecter les variations du SNA. Après injection d’Atropine, parasympatholytique, ou de Propranolol, sympatholytique, nous avons montré que le FSI était une méthode efficace et spécifique d’évaluation des variations du tonus parasympathique du SNA. Cette étude a également montrée la supériorité du FSI par rapport aux méthodes classiques d’analyse de la VFC en termes de sensibilité et de spécificité. Dans un second temps, nous avons évalué ce nouvel indice comme facteur prédictif de l’état acido basique du fœtus dans 2 modèles expérimentaux d’occlusion cordonale. Dans le premier modèle, l’acidose était obtenue par une occlusion continue du cordon avec une réduction de partielle du débit ombilical. Dans le second, nous réalisions des occlusions totales répétées à intervalles réguliers afin de mimer les contractions utérines lors du travail. Dans les 2 études, nous avons observé une hausse du FSI en cas d’acidose avec une corrélation significative entre le FSI et le pH, mais aussi entre le FSI et les lactates dans le second modèle.En conclusion, le FSI constitue un bon reflet de l’activité parasympathique fœtale. Cet indice permet d’étudier les variations du SNA fœtal avec une meilleure sensibilité et une meilleure spécificité que les méthodes usuelles d’analyse de la VFC et semble bien corrélé à l’état acido basique fœtal. Il s’agit donc d’un indice prometteur qu’il sera intéressant d’incorporer dans une analyse multi paramétrique du rythme cardiaque fœtal
The monitoring of fetal well being during labor is essentially based on fetal heart rate (FHR) analysis. The recording of FHR, even continuously during labor, does not fully assess fetal oxygenation or neonatal risk of asphyxia. Indeed, this tool is imperfect and subjective with an important inter and intra-operator variability. Second-line examinations to characterize the fetal state are currently used in routine practice, i.e. scalp fetal blood sampling to study the fetal acid-base balance (pH or lactates) or scalp electrode placement to study the fetal ECG (ST segment analysis). These techniques are nevertheless invasive and subject to technical constraints. There is therefore an interest in developing both objective and non-invasive means of evaluating fetal wellbeing to reduce neonatal encephalopathy. Indeed, its prevalence is about 3 to 8 per 1000 births. Post natal mortality is about 25 to 50% and survivors will hav severe diseases (epilepsy, neurologic impairment, cerebral palsy…).One of the possibilities studied to better identify fetuses at risk for acidosis is the analysis of changes in the autonomic nervous system (ANS) in response to hypoxia.Indeed, the regulation of heart rate is dependent on the ANS and thus, its variability is a reflection of the sympathetic / parasympathetic balance. Analysis of heart rate variability (HRV) is a recognized non-invasive tool that is used to assess ANS regulation. The CHU Lille has developed a new continuous tool for the analysis of HRV, which demonstrated its efficacity in adults and neonates to evaluate the ANS. The objective of this thesis was to develop its index, called Fetal Stress Index (FSI), in the fetus and to evaluate it in conditions of acidosis.The study was experimental in a sheep model chronically instrumented and was in 2 steps. First, we evaluate the performance of our method compared to commonly used HRV analysis, regarding the ability to detect the variation of variations of the ANS. After injection of atropine, to inhibit parasympathetic tone, or propranolol to block sympathetic activity, we shown that our method appeared to be effective in detecting parasympathetic inhibition and, moreover, was superior to classical analysis of HRV in terms of sensibility and specificity.In a second time, we evaluated this new index as a predictive factor of the fetal acid-base state in 2 experimental models of fetal hypoxia by occlusion of the cord. In the first one, acidosis was obtained through a partial occlusion of the umbilical cord and in the second one, though repetitive complete occlusion as uterine contractions during labor. In those two studies, we observed a raise of our index in case of acidosis with a correlation beetween FSI and pH and also FSI and lactates in the second model.In conclusion, the FSI reflects fetal parasympathetic activity, has a better detection than others usual methods, and seems well correlated to fetal acid-base status. It is a promising index and it will be interesting to incorporate it in a multi parametric analysis of fetal heart rate to predict acidosis

Cette thèse analyse les pratiques du diagnostic prénatal (DPN) en France et au Brésil, entre mondialisation des savoirs et des techniques et régulations locales, à la recherche des modalités d’anticipation du handicap. Le DPN s’est développé dans les pays d’Europe et d’Amérique du Nord en lien direct avec les législations sur l’avortement. Il a pris ancrage dans le suivi des grossesses comme l’un des modes de prévention des handicaps à la naissance. Son expansion aux pays où l’accès à l’avortement est restreint oblige à des adaptations fonction des régulations locales. Les dispositifs réglementaires encadrent le travail professionnel (travail en réseau, pluridisciplinarité) et l’enregistrement des pratiques (omniprésent en France, absent au Brésil). Ils modulent, en France, l’expérience des femmes ayant vécu une interruption de grossesse pour pathologie fœtale, comme en témoigne l’analyse de questionnaires semi directifs soumis à deux groupes de femmes à deux époques différentes. En 1999 les femmes réclament plus d’autonomie dans la prise de décision d’interruption. En 2005, elles sollicitent plus volontiers une décision partagée avec les praticiens, mais considèrent que la décision leur revient plus spécifiquement lors des termes tardifs, dans les situations à risque de retard mental, de grande incertitude pronostique, ainsi que dans le cadre de situations spécifiquement recherchées lors du parcours anténatal (telle la trisomie 21). Ces dispositifs réglementaires conditionnent aussi l’usage des techniques et les informations délivrées aux couples. Au Brésil, dans un contexte d’accès restreint à l’avortement et de fortes inégalités sociales, l’échographie en situation de normalité foetale glorifie la « naissance sociale anticipée» de l’enfant et de sa famille. En cas d’anomalie fœtale, une rupture radicale se produit. A l’hôpital public, qui concerne la majorité des femmes, la poursuite obligée de la grossesse règle l’attitude des praticiens : l’étude ethnographique menée à Rio de Janeiro montre que les obstétriciens optent alors pour l’éducation des femmes (dans l’espoir d’un accès progressif à l’autonomie, chemin espéré vers une société plus juste). Les pédiatres provoquent pour leur part un glissement sémantique proposant une utilisation positive de l’incertitude médicale qui modifie le cadre de la réflexion préservant une approche dynamique de l’accueil de l’enfant. Dans le secteur privé au Brésil, les interruptions de grossesse possibles hors des cadres légaux, sont maintenues sous le sceau du secret et ne laissent que peu entrevoir la dynamique décisionnelle préalable. L’anticipation du handicap lors des consultations prénatales met partout en avant la crainte du retard mental et de la souffrance pour l’enfant, le couple ou la fratrie, mais le discours varie selon les contextes : l’analyse comparative des observations souligne qu’en France, les praticiens utilisent la médecine basée sur les preuves pour informer le couple et réduire risques et incertitude en vue d’un choix nécessaire et dans le respect de l’autonomie décisionnelle des couples. Au Brésil, à l’hôpital public, la hiérarchie des priorités diffère: devenir mère, avoir un enfant vivant passent au premier plan. Le risque est présenté comme faisant partie de la vie et l’incertitude dynamique préserve l’avenir de l’enfant malade au sein de sa famille. Ces approches différenciées du risque et du handicap amènent à évoquer les évolutions récentes du champs du handicap qui ont peu pénétré l’univers du DPN. Portées notamment par les « disability studies », études menées par les personnes elles mêmes concernées par le handicap, elles considèrent le handicap comme un processus dynamique résultant d’une interaction entre l’état de santé et une situation sociale donnés. La thèse suggère en conclusion un rapprochement des savoirs, des expériences et des pratiques entre l’univers du prénatal et celui du handicap par le biais d’un dialogue inter et transdisciplinaire
In search of modes of anticipating disability, this thesis examines and compares prenatal diagnosis (PND) practices in France and Brazil. In Europe and North America, PND has developed directly in line with legislation on abortion and is rooted in the monitoring of pregnancy, as one of the ways of preventing disability at birth. Its expansion into countries where access to abortion is restricted, is led by the globalization of knowledge and techniques, and has to be adapted to suit local regulations. Regulatory frameworks govern professional work (networking, multidisciplinarity) and the recording of PND practices (omnipresent in France, non-Existent in Brazil). As can be seen from our analysis of semi-Directive questionnaires given to two groups of women at two different periods of time, in France such mechanisms modulate the experiences of women who have undergone an abortion due to a foetal pathology. In 1999 women wanted greater autonomy when deciding whether or not to terminate a pregnancy. In 2005 they were more readily in favour of sharing decision-Making with doctors, but felt that the decision was theirs to make when it was a question of late-Term pregnancies, of situations with a risk of mental retardation, of major prognostic uncertainty, and of situations subject to specific tests during the prenatal period (such as Down’s Syndrome). These regulatory mechanisms also affect how technical tools are used and the information given to couples. In Brazil, in a context of restricted access to abortion and of very significant social inequality, an ultrasound in a situation of foetal normality glorifies the “anticipated social birth” of the child and its family. When a foetal anomaly is diagnosed, a radical rupture occurs. In public hospitals – used by the majority of women – obligatory continuation of pregnancy regulates doctors’ attitudes: the ethnographic study carried out in Rio de Janeiro shows that obstetricians have opted for the education of women (in the hope of gradual access to autonomy, hopefully the road towards a fairer society). Paediatricians produce a semantic shift, encouraging a positive use of medical uncertainty, which modifies the decision-Making framework and maintains a dynamic approach to welcoming the child-To-Be. In the private sector in Brazil, terminations of pregnancy which are possible outside of any legal framework are kept behind a wall of secrecy, revealing next to nothing about the prior decision-Making process. During prenatal consultations, the anticipation of a disability systematically brings out fears of mental retardation and of the suffering which will be caused to the child, the couple or siblings, but the discourse varies, depending on the context: a comparative analysis of our observations shows that, in France, doctors use evidence-Based medicine to inform couples and to reduce risks and uncertainties with a view to making a necessary choice, whilst at the same time respecting the couple’s decision-Making autonomy. In public hospitals in Brazil, there is a different hierarchy of priorities: the primary focus is that of becoming a mother and having a life-Born child. Risk is presented as being part of life and the dynamic aspects of medical uncertainty safeguard the future of the “sick” child within its family. These differentiated approaches to risk and disability lead us to consider recent evolutions in the field of disability which has so far had little impact on PND. Led in particular by “disability studies” – studies carried out by people who are themselves affected by disability – these evolutions consider disability to be a dynamic process resulting from an interaction between a given state of health and a given social situation. In its conclusion, the thesis suggests that the knowledge, experiences and practices of the prenatal world and that of disability be brought together through inter and transdisciplinary dialogue
Essa tese analisa as práticas de diagnóstico pré-natal (DPN) na França e no Brasil, entre a mundialização de saberes, técnicas e regulações locais, focando as modalidades de antecipação da deficiência. O DPN desenvolveu-se nos países da Europa e América do Norte de forma diretamente relacionada com as leis sobre o aborto. Enraizou-se no monitoramento da gravidez como um dos modos de prevenção das deficiências. Sua expansão em países onde o acesso ao aborto é restrito leva a adaptações de acordo com as regulamentações locais. Disposições regulamentares enquadram o trabalho profissional (em rede, pluridisciplinar) e o registro das práticas (onipresente na França e ausente no Brasil). Elas modulam, na França, a experiência de mulheres que se submeteram ao aborto devido a uma patologia fetal, conforme evidenciado pela análise de questionários semi-estruturados aplicados em dois grupos de mulheres em duas épocas diferentes. Em 1999, as mulheres exigiam mais autonomia na tomada de decisões de interrupção. Em 2005, elas procuravam mais frequentemente uma decisão compartilhada com os médicos, porém consideravam que a decisão cabia a elas, especificamente em gestações mais adiantadas, em situações com risco de retardo mental, com elevada incerteza prognóstica, e no contexto de situações específicas rasteadas ao longo do percurso pré-natal (tal como a síndrome de Down).Estes mecanismos reguladores também condicionam o modo de utilização das técnicas e as informações fornecidas para os casais. No Brasil, em um contexto de acesso restrito ao aborto e de fortes desigualdades sociais, a ultrassonografia em situações de normalidade fetal glorifica o "nascimento social antecipado" da criança e a « ampliação » da família. Em caso de anomalia fetal, uma ruptura radical se produz.No hospital público, para onde vai a maioria das mulheres, a impossibilidade de interromper a gestação define a atitude dos profissionais: o estudo etnográfico realizado no Rio de Janeiro mostra que os obstetras optam então pela educação das mulheres (na esperança de um ganho progressivo de autonomia, em direção a uma sociedade mais justa). Os pediatras realizam, por sua vez, uma mudança semântica, proporcionando um uso positivo da incerteza médica que muda o contexto do debate, preservando uma abordagem dinâmica sobre a chegada da criança. No setor privado no Brasil, a interrupção da gravidez, possível fora dos quadros jurídicos, é mantida sob o selo do segredo e dá pequeno vislumbre da dinâmica anterior da decisão.A antecipação da deficiência durante o pré-natal dissemina o medo do retardo mental, do sofrimento para a criança, para o casal ou irmãos, mas o discurso varia de acordo com o contexto: a análise comparativa de observações destaca que na França, os médicos utilizam a medicina baseada em evidências para informar o casal e reduzir o risco e a incerteza, tendo em vista uma escolha necessária e o respeito à autonomia das decisões dos casais. No Brasil, no hospital público, a hierarquia de prioridades é diferente: tornar-se mãe, ter um filho vivo vêm em primeiro plano. O risco é apresentado como parte da vida e a dinâmica da incerteza salvaguarda o futuro do filho doente no seio de sua família. Estas abordagens diferenciadas de risco e deficiência nos remetem ainda mais aos recentes achados nas áreas da deficiência, que pouco penetraram no universo do DPN. Impulsionados principalmente pela área dos « disability studies », pesquisas conduzidas pelas próprias pessoas afetadas pela deficiência, esses estudos consideram a deficiência como um processo dinâmico, resultante de uma interação entre um estado de saúde e uma situação social determinada. A tese apresenta como conclusao a necessidade da aproximaçao entre o universo do pré-natal e o da deficiência, por meio de um diálogo inter e transdisciplinar, compartilhando conhecimentos, experiências e práticas

L’architecture des cellules myocardiques en trois dimensions du cœur normal et malformé est un sujet de recherche initié depuis plusieurs siècles, mais il existe encore des questions non résolues. Cette thèse apporte de nouveaux éléments de réponse grâce à l'utilisation d'une technique originale d'Imagerie en Lumière Polarisée et l'étude d'une période précise du développement des tissus cardiaques, celle de l'adaptation postnatale. Dans cette thèse, nous introduisons deux nouvelles représentations de l'information : un paramètre d'Isotropie régional et la dissection virtuelle à la base de représentation en LIC-3D qui permet l'exploration à volonté des masse ventriculaires selon des angles de coupes arbitraires.Le remodelage ventriculaire physiologique postnatal (étudié sur 16 cœurs) s'accompagne globalement d'une diminution de l'isotropie régionale et localement par l'apparition de zones fortement isotropes dont la topologie est identique aux plans de clivage décrits dans le modèle de Torrent - Guasp. Cette étude apporte pour la première fois des éléments complémentaires pour la description des composantes profondes de la voie de sortie du ventricule droit. L'architecture 3D du septum de sortie, du repli ventriculo-infundibulaire et des « fibres » latitudinales de la paroi de deux ventricules est documentée et précisée dans dix cœurs normaux. Dans une étude de 11 cœurs malformés représentant 7 pathologies différentes, 3 patrons topologiques ont été décrits : 1) le patron normal : Alignement du repli ventriculo-infundibulaire et du septum de sortie, dans les malformations de type de communication interventriculaire ou canal atrio-ventriculaire ; 2) le patron parallèle : le repli ventriculo-infundibulaire et septum de sortie sont parallèles dans la Tétralogie de Fallot ; 3) le patron en V : le repli ventriculo-infundibulaire dans les cœurs avec discontinuité musculaire mitro-artérielle.En conclusion, nous apportons des nouveaux éléments de compréhension de la mise en place de l'architecture du myocarde en situation normale et pathologique. Cependant, ces données nouvelles devront être consolidées statistiquement sur un plus grand nombre de cas. Elle devront être confrontées aux données physiologiques observables grâce au méthodes d'imagerie fonctionnelle
The 3D architecture of the ventricular mass is poorly known, although in vivo imaging techniques show the physiological inhomogeneity of transmural myocardial mechanics. Polarized light imaging makes it possible to quantitatively analyse the myocardial cell orientation to study the regional isotropy of myosin filaments (a new parameter) and to provide virtual dissection (a new tool) of the myocardial ventricular mesh. This deep inside is complementary of superficial anatomical description.Sixteen normal hearts of human term stillbirths, newborns and infants were studied. During the first months of postnatal age, the median regional isotropy values decreased in the ventricular three-dimensional mesh. There was a progressive appearance of a particularly inhomogeneous secondary arrangement of myocardial cells with alternation of thick low-RI and thin high-RI areas. The topology of Torrent-Guasp' cleavage plans and intercalated high RI areas were identical. The outlet septum was constantly identified.Eleven malformed hearts were studied. The deep components of the ventriculo-infundibular fold, the outlet septum and the latitudinal fibres of the ventricular walls were described and 3 different patterns could be portrayed : 1) a normal aligned pattern ; 2) a parallel pattern of the ventriculo-infundibular fold and the outlet septum in Tetralogy of Fallot ; 3) a V pattern of the ventriculo-infundibular fold in heart with mitro-arterial muscular discontinuity.To conclude, we uncover new elements to understand the onset of the myocardial architecture in normal and pathological hearts. However, this new data need to be statistically consolidated by studying a greater numbers of cases. As a perspective, these observations will be confronted to physiological data provided by functional imaging technique

Chez l’Homme, en réponse à une néphrectomie unilatérale (1/2Nx) ou subtotale (5/6Nx), le rein controlatéral assure la filtration du rein manquant ; une hypertrophie glomérulaire et tubulaire se développe, le poids et la taille du rein augmentent. Le nombre de néphrons étant fixé dès la naissance, des néphrons supplémentaires ne peuvent être formés et la surcharge de filtration entraine à long terme des lésions structurelles. Quelques études chez le fœtus suggèrent que la compensation rénale secondaire à la réduction néphronique peut débuter in utero. Les données expérimentales sont rares et concernent uniquement le modèle 1/2Nx en fin de néphrogénèse ou ex utero. Nous avons étudié les conséquences morphologiques, fonctionnelles et moléculaires de deux modèles de réduction néphronique (1/2Nx et 5/6Nx) chez le fœtus de brebis. Dans les deux modèles, la masse rénale et le nombre de glomérules augmentent, mais la réponse diffère. Chez les 5/6Nx, deux lobes sont formés de part et d’autre des sites d’incision conférant une morphologie rénale en forme de « papillon » et la compensation en nombre de néphrons est relativement plus importante. Dans la perspective d’améliorer la régénération rénale dans le modèle 5/6Nx, nous avons envisagé l’utilisation de cellules souches; les premiers résultats ont permis d’isoler et de caractériser les cellules souches ovines du liquide amniotique. En conclusion, notre étude a permis de mettre en évidence des capacités de compensation rénales insoupçonnées chez le fœtus, propre à la période de néphrogénèse ; d’autres travaux nous permettront de déterminer si elles peuvent être encore améliorées par l’apport exogène de cellules souches
In humans, in response to unilateral (1/2Nx) or subtotal (5/6Nx) nephrectomy, the contralateral kidney ensures filtration for the missing kidney; tubular and glomerular hypertrophy develop, the kidney weight and renal size increase. As glomerular number is determined at birth, no additional nephrons may be formed and the overload filtration results in structural lesions. Few studies in fetuses suggest that the renal response to renal mass reduction can begin in utero. Experimental data are rare and restricted for the 1/2Nx model only, performed at the end of nephrogenesis or ex utero. In our work, we studied the morphological, functional and molecular effects for both groups (1/2Nx and 5/6Nx) in the ovine fetus. In both models, the renal mass and glomerular number increased, but the response was strikingly different. In the 5/6Nx group, two lobes were formed at the incision sites of the kidney displaying a “butterfly-like” remodelling and glomerular number markedly increased. To improve renal regeneration in the 5/6Nx model, we studied the possibility of transplanting stem cells; in vitro, our first experiments have allowed to isolate and characterize ovine stem cells from amniotic fluid. In conclusion, our study highlighted unsuspected renal compensation capacity in the fetus during the period-specific nephrogenesis; additional work will enable us to determine if renal compensation can be further improved by an exogenous contribution of stem cells

Le retard de croissance intra-utérin est une pathologie fréquente et complexe en médecine périnatale, mais sa définition et son dépistage ne sont pas clairement définis. De nombreuses courbes de références de poids de naissance sont utilisées dans le monde afin d’identifier les enfants de faible poids. Cependant l’utilisation d’un seuil de poids (le plus souvent le 10ème percentile) ne tient pas compte du potentiel de croissance individuel. Des alternatives consistant à modéliser la croissance et rechercher une cassure de la courbe existent, mais sont difficiles à utiliser. En 1995, Jason Gardosi a suggéré la construction de courbes ajustées sur des facteurs individuels dont le sexe foetal, la taille et le poids maternels, la parité, et cette approche semble montrer un bénéfice dans l’identification d’enfants à risque. En l’absence de courbes de poids satisfaisantes en France, un modèle ajusté adapté aux naissances de notre pays a ainsi été développé. Ce modèle, appliqué à un large échantillon multicentrique (N=56606), montre une amélioration du dépistage de la morbidité et mortalité périnatale liées au faible poids. La question du choix des paramètres d’ajustement dans ces modèles reste à débattre. L’exclusion du facteur parité ne semble pas altérer la pertinence du modèle. En France, l’utilisation des courbes ajustées individuelles à l’aide d’un outil validé pourrait améliorer les soins en maternité et harmoniser la définition du RCIU entre cliniciens et épidémiologistes. Cependant, leur impact sur les soins et la santé périnatale nécessite d’être évalué de façon prospective en pratique clinique.

L’objectif de notre étude est d’identifier chez la brebis les gènes impliqués: la méiose des cellules germinales et la formation des follicules. La technique Hybridation Suppressive Soustractive nous a permis d’obtenir deux banques soustraites spécifiques de ces deux stades. L’analyse de ces deux banques a permis d’étudier une dizaine de transcrits encore jamais étudiées dans l’ovaire. Parmi ces transcrits, Topaz1 (Testis Ovary-specific PAZ domain gene 1) est exprimé uniquement dans les gonades mâles et femelles chez l’ovin et la souris. Dans l’ovaire fœtal, l’expression la plus élevée de ce transcrit coïncide avec la période où les cellules germinales sont en méiose. Cette étude nous a permis d’une part de caractériser de nouveaux gènes impliqués dans la différenciation ovarienne et d’autre part de constituer une collection de transcrits dédiée à la différenciation de l’ovaire chez la brebis qui servira à comparer le transcriptome d’ovaires dans différentes conditions physiologiques
The aim of our study was to identify in sheep, genes involved in the two mains steps of ovarian development during fetal period: germ cells meiosis and follicles formation. By using Suppression Subtractive Hybridization, we obtained two cDNA libraries specific at the two stages studying. By analyzing these two libraries, we isolated and study around ten ESTs, which were never described in ovary. Among these ESTs, Topaz1 (Testis Ovary-specific PAZ domain gene 1) was only expressed in male and female gonads with an increase expression during the period of germ cell meiosis in mouse and sheep. This study allows us to isolate and characterize new genes involved in ovary differentiation in sheep and to obtain a set of transcripts dedicated to the ovine ovary differentiation. This latter will be a useful tool to analyze and compare the transcriptome of ovaries in various physiological conditions

Depuis plusieurs années, un nombre conséquent d’études décrivent une augmentation de l’incidence de pathologies liées à la fonction de reproduction masculine. Ces anomalies ont été regroupées sous le terme de « syndrome de dysgénésie testiculaire ». Ce syndrome aurait pour origine les effets délétères de polluants environnementaux sur le développement du testicule en période fœtale. Parmi ces polluants environnementaux, les phtalates et le bisphénol A (BPA) sont les plastifiants les plus produits et les plus répandus dans les objets de consommation courante. De nombreuses études leur sont consacrées et ont permis de les classer au rang de perturbateurs endocriniens en mettant notamment en cause leurs effets reprotoxiques. Mon travail de thèse est une étude des effets de ces deux perturbateurs endocriniens sur le développement du testicule fœtal.Nous avons réalisé une première étude concernant les effets du BPA sur le développement du testicule fœtal. Grâce au modèle de culture organotypique, nous avons développé notre étude dans trois espèces : le rat, la souris et l’Homme. Nous démontrons que le BPA diminue la sécrétion de testostérone dans le testicule fœtal humain à partir d’une concentration de 10-8M, alors que chez le rat et la souris, la sécrétion de testostérone n’est affectée qu’à partir de 10-5M de BPA. Nous avons également démontré une diminution de l’expression du gène de l’Insl-3, dans ces mêmes conditions. Ceci nous a permis de mettre en évidence une différence de sensibilité entre les espèces. Pour tenter de comprendre les mécanismes par lesquels le BPA exerce son effet toxique, nous avons comparé ses effets à ceux du DES, autre perturbateur endocrinien œstrogénomimétique. Contrairement au BPA, le DES diminue la sécrétion de testostérone fœtale chez les rongeurs, et non chez l’Homme. Ce résultat suggère l’implication de deux voies de signalisation différentes pour ces deux xéno-œstrogènes. Cette hypothèse est d’ailleurs renforcée par l’étude que nous avons SourceMécanismes d’action des perturbateurs endocriniens bisphénol A et phtalates sur le développement du testicule fœtal / par Thierry N’Tumba-Byn ; sous la direction de Virginie Rouiller-Fabre, Université Paris Sud, 2013 [Thèse de Biologie de la Reproduction et du Développement]réalisée sur des souris invalidées pour le récepteur des œstrogènes ERα, dans lesquelles l’effet anti-androgénique du BPA persiste, contrairement à celui du DES.Parallèlement, nous avons recherché les mécanismes d’action des phtalates et de leur métabolite actif le plus répandu, le MEHP (mono-2-éthyl-hexyl phtalate). Dans la continuité de plusieurs travaux réalisés dans notre laboratoire sur les effets du MEHP, nous avons tenté de comprendre les mécanismes par lesquels le MEHP induit un effet pro-apoptotique dans les cellules germinales mâles. Nous avons mis en évidence une augmentation de l’expression du gène Stra8 dans les cellules germinales traitées au MEHP. Ce résultat nous suggère que le MEHP pourrait induire une différenciation erronée des cellules germinales mâles. De plus, nous avons recherché les récepteurs et la voie de signalisation activée par le MEHP. Nous observons que les agonistes des récepteurs PPARα et de PPARγ entrainent dans les cellules germinales les mêmes phénotypes que le MEHP, à savoir une augmentation du taux d’apoptose et de l’expression du gène Stra8
For several years, an increase in the incidence of pathologies connected to the male reproductive functions has been described in numerous studies. These anomalies are classified under the term “testicular dysgenesis syndrome”. This syndrome might find its origins in the deleterious effects of environmental pollutants on the testis development in fetal period. Among theses environmental pollutants, phthalates and bisphenol A (BPA) are the most produced plasticizers found in products of common use. Many studies were performed in order to determine their effects, and allowed to classify them as endocrine disruptors because of their reprotoxic effects. My thesis work is a study of the effects of these two endocrine disruptors on the fetal testis development.Our first study focuses on the effects of BPA on the fetal testis development. Using the organotypic culture model, we developed our study in three species: rat, mouse and human. We demonstrated that BPA decreases the testosterone secretion in the human fetal testis from a 10-8M concentration, while in rat and mouse the testosterone secretion is only affected by 10-5M BPA. We also demonstrated a decreased Insl-3 gene expression, in the same conditions. These results allowed us to evidence a difference of sensibility between species. To understand the mechanisms involved in the BPA toxic effect, we compared it with the effect of DES, another endocrine disruptor with estrogenic activity. Unlike BPA, DES decreases the fetal testosterone secretion in rodents and not in human. This result suggests the involvement of two different signalisation pathways for these two xenoestrogens. This hypothesis is reinforced by the study that we performed in mice invalidated for the estrogen receptor ERα. In those mice, the anti-androgenic effect of BPA is maintained, unlike DES effect.In parallel, we investigated the mechanisms of action of phtalates and particularly of their most prevalent active metabolite, the MEHP (mono-2-ethyl-hexyl phthalate). Following previous studies performed in our laboratory concerning the effects of MEHP, we intended to understand the mechanisms by which MEHP induces the apoptosis in male germ cells. We evidenced an increase in Stra8 gene expression in MEHP treated germ cells. This result suggests that MEHP might induce a wrong differentiation in male germ cells. Furthermore, we investigated the receptors and the signalisation pathway activated by MEHP. We observe that PPARα and PPARγ receptors agonists induce the same phenotypes as MEHP, namely an increase in the apoptosis and in Stra8 gene expression in germ cells

Chez la souris, les quatre derniers jours de la gestation représentent un stade critique du développement intestinal. Durant cette période, les villosités se forment et les cellules indifférenciées à 15 jours de gestation vont se différencier rapidement en cellules absorbantes, en cellules à mucus et en cellules entéroendocrines. À partir de 16-17 jours de gestation, la plupart des activités enzymatiques essentielles au bon fonctionnement des cellules absorbantes ont fait leur apparition et vont augmenter rapidement jusqu'à la naissance. Le développement intestinal chez la souris fœtale constitue donc un excellent modèle pour étudier à la fois la morphogénèse et la cytodifférenciation, car ces deux processus se déroulent très rapidement et il est possible de suivre leur évolution tant morphologique que biochimique. L'approche adoptée dans le présent travail consistait à prélever le segment proximal de l'intestin grêle de souris à 17 jours de gestation et à le maintenir sous forme d’explants en culture organotypique à 37°C, avec un milieu complètement synthétique. La mise au point d'un tel modèle nous a permis d'entreprendre une étude systématique visant à identifier les facteurs impliqués dans la régulation extrinsèque du développement de la muqueuse intestinale. Dans ce travail, nous avons pu évaluer la capacité des glucocorticoïdes, du facteur de croissance épidermique (EGF), de la thyroxine, de l'insuline et d'un sucre, le lactose, à exercer directement une influence sur la maturation et sur la prolifération de l'épithélium duodénal. Il ressort clairement de ces études que les glucocorticoïdes exercent un effet direct qui est déterminant et généralisé sur la maturation des cellules absorbantes, sur la différenciation des cellules à mucus et sur la prolifération des entérocytes. Concernant les effets de l'EGF, nos résultats nous incitent à penser que ce facteur pourrait agir en complémentarité avec les glucocorticoïdes dans la régulation de l'expression du phénotype. Nos observations avec la thyroxine et le lactose nous amènent à croire que, contrairement à ce que d'autres ont observé in utero, ces deux substances n'exerceraient directement que des influences mineures sur la maturation des cellules absorbantes. Enfin, en ce qui a trait â l'insuline, nos résultats indiquent que cette hormone n'exercerait aucun effet direct et spécifique sur la maturation de l'épithélium. En conclusion, il appert que les glucocorticoïdes et l'EGF exercent un rôle de premier plan dans la régulation extrinsèque de la maturation de l'intestin grêle. Cependant, il est évident que le développement de certaines fonctions intestinales échappent au contrôle exclusif de ces deux substances. C'est le cas entre autres des activités de la lactase et de la sucrase. Ces disparités suggèrent que d'autres facteurs seraient susceptibles d'intervenir dans le développement prénatal de l'intestin grêle. Il est à espérer que le système de culture mis au point dans ce travail permettra d'identifier les autres facteurs qui sont vraisemblablement requis pour un développement architectural et fonctionnel complet.

Ce projet consiste à fractionner le Sérum Foetal Bovin (FBS) dans l'espoir de découvrir de nouveaux facteurs mitogéniques. Une plateforme de séparation a été conçue comprenant différentes techniques de manière itérative séquentielle: l'utilisation d'agents chaotropiques suivie par l'ultrafiltration et la chromatographie d'échange d'anions. Les fractions obtenues sont testées pour leur effet sur l'expansion cellulaire, individuellement et en combinaison selon une méthode de planification statistique des expériences (DOE). Le rétentat du FBS dénaturé avec l'urée a été identifié comme la fraction la plus prometteuse par rapport à la prolifération des cellules précurseurs de muscle et a été séparé dans une seconde étape par échange anionique produisant cinq fractions différentes. Le traitement d'images a été utilisé afin de réduire le temps, l'effort, et l'erreur, associés à l'application de l'hémaecytomètre pour les comptes cellulaires. L'analyse par electrophorèse sur gel a également été réalisée afin d'identifier les facteurs enjeu dans ce liquide biologique.

Contexte : L’étude MecoExpo a été menée en Picardie, une région agricole hautement utilisatrice de pesticides et dotée d’un taux de natalité élevé. Cette étude vise à mettre en relation l’exposition l’imprégnation maternelle et fœtale aux pesticides avec les paramètres cliniques du développement fœtal. Dans la présente thèse, nous avons étudié la relation entre les différentes sources d’exposition maternelle aux pesticides (professionnelle, alimentaire, domestique et environnementale), via un questionnaire, l’imprégnation fœtale aux pesticides mesurés dans le méconium des nouveau-nés et les paramètres cliniques du développement fœtal observés à la naissance (âge gestationnel, poids, taille et périmètre crânien) ainsi que la prévalence de risque du retard affectant ces paramètres (prématurité, restriction de croissance fœtale pour le poids ou la taille de naissance et microcéphalie). Population et méthodes : La cohorte MecoExpo inclut 993 couples mère-nouveau-né, issus de 11 sur les 16 maternités en Picardie et réparties dans les trois départements. Pendant leur séjour en maternité, les mères recrutées ont rempli un questionnaire concernant les différentes sources d’exposition aux pesticides pendant la grossesse. Une sous-cohorte « Méconium » a été extraite de la population de l’étude MecoExpo pour l’analyse du méconium. Elle comporte 293 couples mère-nouveau-né. 20 pesticides appartenant à 5 familles différentes ont été recherchés dans le méconium des bébés. Les paramètres cliniques du développement fœtal ont été renseignés à partir des dossiers médicaux des nouveau-nés. Des analyses de régression multiple linéaire et logistique ont été utilisées dans l’étude de la relation entre les caractéristiques de l’exposition maternelle évaluée par questionnaire ou les variables de l’imprégnation fœtale aux pesticides détectés dans le méconium et les paramètres cliniques étudiés. Les facteurs confondants connus ou suspectés avoir un effet sur le développement fœtal ont été pris en compte dans ces analyses. Résultats : Nos résultats mettent en évidence une association entre l’exposition professionnelle maternelle déclarée aux pesticides pendant la grossesse et le risque d’une restriction de la croissance fœtale pour le poids de naissance [OR : 4,2 (1,2 – 15,4) ; p=0,01]. Une association entre l’exposition professionnelle paternelle déclarée aux pesticides et un âge gestationnel réduit (-0,7 semaine ; p=0,0002) ou un risque plus élevé de prématurité [OR : 3,7 (1,4 - 9,7) ; p=0,02] a également été observée. L’exposition maternelle aux produits appliqués sur les plantes d’intérieur ou sur les animaux domestiques était liée avec une diminution du poids de naissance (-160 g, p=0,005 ; -70 g ; p=0,02, respectivement). La proximité de la résidence maternelle pendant la grossesse d’un espace vert était associée avec une augmentation du poids (+190 g ; p=0,03) et de la taille de naissance (+0,4 cm ; p=0,03). Le poids de naissance moyen était significativement moins élevé et le risque d’une restriction de croissance fœtale pour le poids de naissance était significativement plus élevé chez les nouveau-nés des mères ayant habité dans des communes urbaines pendant la grossesse [-0,4 cm ; p=0,006 et OR : 2,9 (1,5 – 5,5) ; p=0,002, respectivement). Sur les 20 pesticides recherchés dans le méconium, 17 ont été détectés à des prévalences et concentrations variables. La prévalence de détection la plus élevée était celle des pesticides organophosphorés (65,5%), notamment celle de DMTP (52,9%) suivie par celle des métabolites des Ethylène-Bis-Dithio-Carbamates (ETU et EU) (38,9%) tandis que la concentration de quantification la plus élevés était celle de la cyfluthrine (80144,1 ng/mL ). Le risque de la microcéphalie est plus élevé chez les nouveau-nés imprégnés à l’ETU (OR : 4,7 (1,2-18,1) ; p=0,01). Les nouveau-nés imprégnés au DMTP ou aux pyréthrinoïdes totaux ont une taille de naissance plus petite que les nouveau-nés non imprégnés (-0,6 cm ; p=0,01 et -0,7 cm ; p=0,04, respectivement). Les nouveau-nés imprégnés à la deltaméthrine (pyréthrinoïdes) ont un âge gestationnel plus court (-2,3 semaines ; p=0,002). L’augmentation des concentrations de l’ETU dans le méconium est associée avec une taille de naissance plus petite (p=0,01). L’augmentation des concentrations de l’EU, du DMTP seule ou de la somme des concentrations des métabolites organophosphorés communs est associée avec une augmentation du périmètre crânien de naissance (p<0,05). Conclusion : La détection des pesticides les plus utilisés en agriculture dans la région Picardie démontre l’imprégnation fœtale à ces substances. L’étude MecoExpo met en évidence l’impact négatif de l’exposition déclarée parentale professionnelle et domestique aux pesticides sur le développement fœtal.

Le carcinome hépatocellulaire (CHC) est le plus fréquent des tumeurs primitives du foie. La carcinogenèse hépatique est un processus complexe et multifactoriel qui fait intervenir à la fois des facteurs génétiques de prédisposition (e.g. les SNPs) et environnementaux. Près de 50% des CHC ont pour étiologie une infection par le virus de l'hépatite B (VHB). Au cours de cette infection, de multiples altérations génétiques et virales s'accumulent et favorisent le développement tumoral. Nous avons montré que les CHC liés au VHB présentaient des caractéristiques cliniques et pathologiques différents que ceux d’autres étiologies : 1). Les mutations inactivatrices d’HBx sont sélectionnées dans les tissus tumoraux des CHC liés au VHB, suggérant qu’il existe une pression de sélection spécifique au cours de l’hépatocarcinogenèse. 2). Chez les patients ayant un faible nombre de copies d'ADN VHB par cellule dans le foie non-tumoral, une corrélation avec les facteurs de risque supplémentaires (VHC/OH/NASH) a été identifiée, suggérant un effet coopératif pour la carcinogenèse induite par le VHB. 3). Les mutations TP53 sont associées à un pronostic moins favorable chez les patients ayant un CHC liés au VHB. 4). Les CHC liés au VHB montrent plus fréquemment des phénotypes progéniteurs, avec une surexpression des gènes impliqués dans la régulation du cycle cellulaire et codant pour les protéines onco-fœtales. Quatre SNPs précédemment identifiés par des études pangénomiques (GWAS) asiatiques ont été validés dans la population européenne. Les distributions alléliques semblent varier selon l’étiologie de la pathologie hépatique. Ces résultats soulignent la complexité de la prédisposition génétique au CHC, dont l’étude doit prendre en considération l’origine géographique des patients ainsi que les facteurs de risque associés
Hepatocellular carcinoma (HCC) is the most common primary liver tumors. Hepatic carcinogenesis is a complex and multifactorial process involving both genetic predisposition (e.g. SNPs) and environmental factors. Nearly 50% of HCC are caused by the hepatitis B virus (HBV) infection worldwide. During HBV infection, multiple genetic and viral alterations accumulate and promote tumor development. By analyzing resected HCC in France, we identified specific molecular features related to HBV infection. First, HBx inactivating mutations are selected in HCC tissues suggesting specific pressure of selection during hepatocarcinogenesis. Second, in patients with a low number of HBV DNA copies per liver cell, we identified additional risk factors like HCV infection, alcohol intake or NASH, suggesting a cooperative effect of these factors with HBV to induce the malignant transformation. Third, TP53 mutations associated with a poor prognostic for HBV infected resected HCC patients. At last, HBV-related tumors demonstrate more frequent progenitor phenotype compared to non-HBV HCC, with an up-regulation of genes that involved in cell cycle regulation and encoded onco-fetal/progenitor proteins. Four SNPs previously identified by genome-wide studies (GWAS) in Asian, have been validated in our European population. Allelic distributions seem to vary according to the etiologies of adjacent liver diseases. These findings underscore the complexity of the genetic predisposition of HCC; further study must consider the geographical origin of patients and associated risk factors

Le bisphénol A (BPA) présente des propriétés perturbatrices thyroïdiennes. Compte-tenu du rôle essentiel du système thyroïdien sur le développement du système nerveux central, l'exposition de la femme enceinte au bisphénol A est très préoccupante. Ainsi, cette thèse visait à déterminer les conséquences d'une exposition gestationnelle au BPA sur le développement du SNC conjointement aux effets sur la fonction thyroïdienne dans un contexte d'exposition interne parfaitement documenté et évalué par rapport aux expositions décrites chez l'être humain. L'exposition de brebis gestantes au BPA perturbait l'homéostasie thyroïdienne maternelle et modulait chez le fœtus, le métabolome de différentes structures cérébrales. Les modulations observées suggéraient que le BPA pouvait altérer la neurogenèse, la plasticité neuronale, la structure membranaire et le métabolisme énergétique au niveau central. La dose induisant les perturbations de la fonction thyroïdienne maternelle et du système nerveux central fœtal conduisait à des concentrations sériques en BPA similaires à celles décrites chez l'homme
Bisphenol A (BPA) is able to disturb the thyroid function. Given the key role of thyroid function in the development of the central nervous system (CNS), gestational exposure to BPA is a matter of particular concern. Our goal was to evaluate the consequences of a BPA gestational exposure on the developing CNS jointly to its effects on the thyroid function within a context of a well-documented internal exposure compared to BPA human exposure. BPA exposure of pregnant ewes disrupted the maternal thyroid homeostasis and modulated the metabolome of specific fetal brain regions. The different modulations we observed suggested that BPA might alter neurogenesis, neuronal plasticity, membrane structure and energy metabolism. Interestingly, the BPA dose inducing maternal thyroid disruption and fetal CNS modulations led to BPA serum concentrations similar to those described in human biomonitoring studies

L'organisation du reseau collagenique de la matrice extracellulaire du cartilage articulaire ftal bovin et des cultures de chondrocytes ftaux bovins a ete etudiee par immunomarquage en microscopie photonique et electronique. Les resultats montrent que le reseau fibreux du cartilage est compose des collagenes de type ii, ix et xi arranges de la facon suivante: le collagene de type ii forme la majorite de la fibrille alors que le collagene de type xi en forme le cur. Le collagene de type ix est situe a la surface de la fibrille avec son domaine amino-terminal no collagenique oriente vers l'exterieur. L'organisation du reseau fibreux synthetise par les cultures est identique a celle observee dans le tissu, ces trois collagenes etant synthetises au debut de la culture. Les collagenes de type i et iii sont localises a la surface du cartilage ftal. Le collagene de type i apparait dans les cultures de chondrocytes ftaux au bout de quinze jours, indiquant un etat de senescence des cultures. Des etudes statistiques sur la variation du diametre des fibres de collagene au cours du developpement ftal montrent que la proportion de fibres larges augmente au cours du temps. Ceci pourrait etre en rapport avec la diminution des proportions des collagenes de type ix et xi. Les resultats obtenus nous permettent de conclure que les collagenes de type ix et xi sont impliques d'une part dans la regulation de la fibrillogenese et dans la regulation du diametre des fibres, et d'autre part dans les interactions avec les autres macromolecules de la matrice extracellulaire du cartilage articulaire ftal bovin

Le développement pulmonaire chez le fœtus s’accompagne d’une prolifération cellulaire, d’un renouvellement intense de la matrice extracellulaire et d’une augmentation des dépôts d'élastine responsables d’une évolution des caractéristiques tissulaires au cours de la gestation. L’élastographie ultrasonore impulsionnelle 2D en mode Shear Wave Elastography (2D-SWE) consiste à focaliser un faisceau ultrasonore à différentes profondeurs pour générer des ondes de cisaillement dont la vitesse de propagation dépend de l’élasticité du tissu étudié.L’objectif de cette thèse est de proposer une nouvelle approche du développement pulmonaire fœtal humain à travers l’étude de son élasticité au cours de la gestation grâce à l’utilisation de l’élastographie ultrasonore impulsionnelle 2D-SWE. En tenant compte des différents paramètres acoustiques des sondes d’échographie utilisées, nous avons pu respecter les critères de sécurité acoustique réglementaires pour explorer la poumon fœtal humain in vivo. Nous avons d’abord recherché les facteurs limitant la mesure de l’élasticité d’un tissu mou par 2D-SWE selon une approche fondamentale avec l’utilisation de tests rhéométriques. Dans une première étude pilote nous avons évalué la faisabilité et la reproductibilité de la mesure de l’élasticité pulmonaire fœtale in vivo par 2D-SWE. Dans une deuxième étude, nous avons suivi l’évolution de l’élasticité du poumon fœtal entre 24 et 39 semaines d’aménorrhée et comparé les valeurs obtenues à celle du foie fœtal. Enfin, nous avons étudié les variations du coefficient d’élasticité dans un modèle d’occlusion trachéale chez le singe d’une part, et lors de l’exploration de pathologies pulmonaires congénitales d’autre part.L’élastographie 2D-SWE permet d’apprécier l’élasticité moyenne d’un tissu mou mais ne semble pas appropriée pour en estimer sa valeur absolue. Il existe une variabilité du module d’élasticité, mais cette variabilité semble constante selon la profondeur d’exploration. L’utilisation de sondes convexes de basses fréquences parait plus adaptée à l’exploration de tissu profond en garantissant une meilleure stabilité du module de cisaillement. La première étude pilote chez 103 fœtus a permis de confirmer que les mesures de l’élasticité moyenne du poumon et du foie étaient faisables par 2D-SWE avec une reproductibilité acceptable. L’analyse intermédiaire des résultats de la deuxième étude pilote chez 63 fœtus montrait que l’évolution de l’élasticité moyenne selon l’âge gestationnel semblait différente pour le poumon et le foie. Alors que l’élasticité hépatique moyenne semblait augmenter avec l’âge gestationnel (3,76 kPa à 24 SA versus 4,52 à 39 SA, p<0,001) celle du poumon évoluait par pallier. De 24 SA à 32 SA, il existait une tendance à l’augmentation progressive de l’élasticité du poumon fœtal (3,82 kPa à 24 SA, 4,92 kPa à 28 SA, 5,15 kPa à 32 SA p<0,001). Après 32 SA, l’élasticité diminuait pour atteindre 4,42 kPa à 36 SA puis 4,09 kPa à 39 SA. Nous avons observé une dispersion plus importante des mesures pour le poumon par rapport à celle du foie pouvant témoigner d’une évolution tissulaire différente de ces deux organes au cours de la grossesse(p<0,001). Dans cette étude, les distances moyennes entre la sonde et le site de mesure au niveau du poumon et du foie étaient respectivement de 4,6 cm [2,5-8] et 5,8 cm [3-10]. On retrouvait une variation modérée de l’élasticité pulmonaire moyenne selon la profondeur d’exploration
Fetal Lung development is accompanied by cell proliferation, intense renewal of the extracellular matrix and increased deposits of elastin responsible for changes in tissue characteristics during gestation. Two dimensional Shear Wave Elastography (2D-SWE) consists in focusing an ultrasonic beam at different depths to generate shear waves whose propagation speed depends on the elasticity of the tissue.The objective of this thesis is to propose a new approach to human fetal lung development throughthe study of its elasticity during gestation with 2D-SWE. Considering the different acoustic parameters of the ultrasoundprobes used in this project, we were able to respect the regulatory acoustic safety criteria to explore the human fetal lung in vivo. We first investigated the factors limiting the measurement of the elasticity with 2D-SWE on soft tissue according to a fundamental approach through rheometric tests. In a first pilot study we evaluated the feasibility and the reproducibility of the measurement of the fetal lung elasticity in vivo by 2D-SWE. In a second study, we monitored the evolution of the elasticity of the fetal lung between 24 and 39 weeks of gestation (WG) and compared the values obtained with those of the fetal liver. Finally, we studied variations of lung elasticity during tracheal occlusion in monkeys and during the exploration of congenital pulmonary malformations.It is possible to assess the average elasticity of a soft tissue with 2D-SWE but this technique does not seem appropriate to estimate its absolute value. The use of convex probes with low frequency seems more suitable for eploring deep tissue by ensuring better stability of the shear modulus.The first pilot study in 103 human fetuses confirmed that measurement of the average elasticity of the lung and liver was feasible by 2D-SWE with acceptable reproducibility. Intermediate analysis of the results of the second pilot study in 63 fetuses showed that the evolution of the average elasticity according to gestational age seems different for the lung and the liver. While the average hepatic elasticity seemeed to increase with gestational age (3.76 kPa at 24 WG versus 4.52 at 39 WG, p<0,001) that of the lungs progressed by stages. From 24 WG to 32 WG, fetal lung elasticty increased gradually (3.82 kPa at 24 WG, 4.92 kPa at 28 WG, 5.15 kPa at 32 WG, p<0,001). After 32 WG, the elasticity decreases to reach 4.42 kPa at 36 WG and then 4.09 kPa at 39 WG. We observed a greater dispersion of the measurements for the lung compared to the liver, which could be related to a different tissue evolution of both organs during pregnancy. In this study, the average distances between the probe and the measurement site in the lung and liver were 4.6 cm [2.5-8] and 5.8 respectively cm [3-10] There was a moderate variation for lung average elasticity according to the depth of exploration

Objectif : Déterminer le rôle du sexe en réponse aux glucocorticoïdes anténataux (GCA) pour la prévention du syndrome de détresse respiratoire (SDR). Méthode : Une revue systématique et une méta-analyse des essais randomisés contrôlés ont été réalisées afin de comparer les risques relatifs entre les garçons et les filles pour le risque de SDR, et secondairement, les hémorragies intraventriculaires (HIV) et la mortalité néonatale. Les risques relatifs globaux ont été calculés à l'aide du modèle à effets aléatoire avec des intervalles de confiance à 95 %. Résultats : Huit études ont rencontré les critères d'inclusion et ont été analysées. Nous n'avons pas démontré de différence significative entre mâles et femelles pour la diminution du risque de RDS (mâles RR: 0.50 [0.33, 0.77], femelles RR: 0.57 [0.43, 0.75], p=0.99), de l'HIV ou de la mortalité néonatale. Conclusion : L'évidence provenant de la littérature ne nous a pas permis d'observer de différences sexuelles dans la réponse aux GCA en prévention du SDR.

Le RCF est utilisé en routine dans la surveillance du travail depuis plus de 30 ans sans avoir été évalué au préalable. Une augmentation du taux de césarienne a été constatée alors que son utilité sur l’amélioration du bien-être fœtal est contestée. L’imprécision de la signification des anomalies du RCF et la grande variabilité de leur interprétation pourraient en partie expliquer ces mauvaises performances. Dans un large essai suédois l’association du STAN au RCF a permis de diminuer les taux d’extraction pour anomalie du RCF et d’encéphalopathie néonatale modérée ou sévère. Constatant une divergence des pratiques obstétricales nordiques et françaises, nous avons évalué le STAN entre 2002 et 2006. L’objectif de cette thèse était de déterminer si l’association du STAN permet d’améliorer la prise en charge en salle de travail des patientes avec anomalie du RCF. Une étude d’observation sur 433 cas a permis de montrer que le STAN avait une sensibilité de 63% pour le diagnostic de l’acidose sévère et de 38% pour celui de l’acidose modérée. Dans un essai randomisé sur 799 patientes, l’utilisation du STAN n’a pas entraîné une diminution du taux d’extraction pour anomalie du RCF, mais à permis une diminution de 56% du recours au pH au scalp. Nous avons montré, à partir de 30 tracés analysés par 7 obstétriciens, que le STAN permettait d’accroître l’homogénéité dans les décisions d’extraction grâce à la réduction des extractions non justifiées. Le STAN permet d’augmenter l’homogénéité des décisions d’extraction en salle de travail. L’incrémentation de la variabilité dans l’algorithme décisionnel du STAN est une piste pour augmenter la fiabilité du diagnostic de l’acidose
Fetal heart rate (FHR) has been routinely measured by cardiotocography (CTG) to monitor labor for more than 30 years, despite the absence of any formal evaluation. The rate of cesarean delivery has increased over this time, while the usefulness of FHR in improving fetal well-being has been contested. The imprecision in the significance of FHR abnormalities and the great variability in their interpretation may explain this poor performance in part. A large Swedish trial showed that the combination of the STAN (ST segment analysis) with CTG diminished the rate of operative intervention for fetal distress, as well as the rate of moderate or severe neonatal encephalopathy. In view of the divergences between the Nordic countries and France in obstetrical practices, we assessed the STAN in France between 2002 and 2006. The objective of this dissertation was to determine whether combining STAN with CTG improves in labor room management of patients with fetal distress. An observational study of 433 cases showed that STAN had a sensitivity of 63% for a diagnosis of severe acidosis and of 38% for moderate acidosis. In a randomized trial of 799 patients, the use of STAN did not reduce the rate of operative intervention for fetal distress but did lead to a 56% reduction in use of scalp pH tests. In an analysis of 30 tracings by 7 obstetricians, we showed that STAN increased the consistency of decisions for operative intervention by reducing the number of unjustified interventions. STAN increases the consistency of decisions for operative intervention in the labour room. Breaking down the degree of FHR variability into increments in the STAN decision algorithm is one pathway for increasing the reliability of its diagnosis of acidosis

Au cours des dernières décennies, nous avons progressivement vu augmenter un certain nombre d'anomalies de la fonction de reproduction masculine dans les pays industrialisés. Ces constatations ont fait émerger l'hypothèse selon laquelle certains polluants de notre environnement pourraient altérer le développement du testicule fœtal et ainsi être responsables de ces anomalies. Parmi les composants incriminés se trouvent les phtalates, largement répandus dans l'environnement. Ces composés ont été décrits comme reprotoxiques, ils altèrent le développement de la lignée germinale dans différentes espèces et entraînent une diminution de la production de testostérone chez le rat. Toutefois, très peu de données sont disponibles quant à leurs effets chez l'Homme. Dans cette étude, nous avons analysé les effets d'un phtalate, le MEHP, sur le développement du testicule fœtal humain au premier trimestre de la grossesse, dans un modèle de culture organotypique qui permet le maintien des différentes structures de l'organe. Nous avons tout d'abord démontré que le MEHP (10-4M) n'altère pas la production de testostérone du testicule fœtal humain, contrairement aux résultats décrits chez le rat. En revanche, nous avons montré que l'exposition au MEHP entraîne une rapide diminution du nombre de cellules germinales par apoptose. A la suite de ces résultats, nous avons testé l'effet de doses plus faibles de MEHP afin de se placer à des concentrations de phtalates ayant été mesurées dans les liquides biologiques. Nous avons ainsi démontré que les cellules germinales du testicule fœtal humain sont altérées suite à l'exposition à des doses de MEHP de 10-5M. Enfin, dans la 3ème partie de ce travail, nous nous sommes intéressés aux mécanismes d'action des phtalates. Différentes études, notamment dans le foie, démontrent l'implication des récepteurs nucléaires dans les effets de ces composés. Il nous a donc semblé important de rechercher leur implication dans les effets des phtalates sur le testicule fœtal. Nous avons démontré que LXRα est très certainement impliqué ces effets puisque l'expression des ARNm de ce récepteur est augmentée. Par ailleurs, ce récepteur nucléaire contrôle deux voies métaboliques, la synthèse de cholestérol et la synthèse des acides gras qui semblent toutes deux modulées par les phtalates dans le testicule fœtal humain. Enfin, nous avons montré que l'implication de ces voies métaboliques est commune entre la gonade mâle et la gonade femelle, sans pour autant que l'effet sur les cellules germinales mâles ai pu être mis en évidence dans l'ovaire fœtal. En conclusion, cette étude a contribué à caractériser les effets des phtalates sur la mise en place des fonctions de reproduction chez le fœtus humain. Nous avons également pu mettre en évidence un nouveau mécanisme de ces composés, impliquant la superfamille des récepteurs nucléaires ainsi que la synthèse du cholestérol et des acides gras.

Nous avons étudié 2 protéines impliquées dans l'absorption iléale de la vitamine B12 ou cobalamine : le récepteur du complexe facteur intrinsèque-cobalamine et la transcobalamine. Le récepteur du complexe facteur intrinsèque-cobalamine est exprimé dès la dixième semaine du développement fœtal chez l'homme. Le récepteur iléal porcin a été purifié par chromatographie d'affinité sur un support sépharose-facteur intrinsèque. Il se compose de 4 polypeptides dont trois sont glycosyles. La liaison entre le récepteur et son ligand peut être inhibé en présence d'agglutinine de germe de blé. L'inhibition est due à la fixation de cette lectine à la sous-unité alpha du récepteur qui contient le site de fixation du complexe facteur intrinsèque-cobalamine. Les résidus galactosyls de la copule glucidique du facteur sont importants dans la formation de la liaison entre le récepteur et son ligand. Enfin, nous avons montré l'existence de la synthèse et de la sécrétion de transcobalamine par les cellules HT 29. Ces cellules ont été stabilisées à partir d'un carcinome colique et représentent un modèle entérocytaire in vitro

Le cerveau fœtal est vulnérable aux stress environnementaux comme l’exposition prénatale à l’alcool (EPA), première cause non génétique de retard mental. Ce stress induit un large spectre de défauts neurodéveloppementaux souvent diagnostiqués tardivement. Mieux comprendre les mécanismes moléculaires à l’origine de ces défauts permettrait d’élaborer des outils diagnostics fiables, pour une prise en charge précoce des sujets à risques.Le facteur de transcription HSF2 est un acteur majeur de la réponse à l’EPA dans le cerveau en développement. Bien que nécessaire au développement physiologique du cortex, il conduit, en contexte de stress, à des anomalies du développement cérébral, en changeant de cibles génomiques. De plus, dans le cortex embryonnaire, dans un contexte physiologique ou suite à une EPA, HSF2 lie DNMT3A, protéine responsable de la méthylation de novo de l’ADN.Comme, il a été montré que des adultes ayant subi une EPA présentent une perturbation de leur méthylome, il était concevable que l’interaction DNMT3A/HSF2 dans un contexte de stress, puisse, en partie, être à l’origine de cette modification du méthylome. Pour tester cette hypothèse, une alcoolisation de type binge drinking dans des cortex embryonnaires murins a été réalisée et trois études de séquençage à haut débit (NGS) ont été menées en parallèle, puis intégrées.Un ChIP-seq ciblant HSF2 dans le cortex cérébral fœtal murin a permis de cartographier les sites de fixation de ce facteur et d’identifier 280 cibles de HSF2 après cette EPA. La plupart de ces cibles sont des gènes impliqués dans le développement cérébral, dans la réponse au stress et/ou associées dans la littérature à des effets d’une EPA.L’identification de 432 régions différentiellement méthylées (DMRs), immédiatement après EPA entre des cortex fœtaux témoins (traités au PBS) ou traités à l'alcool a été possible, par une capture du méthylome. Cette analyse a nécessité la mise au point d’un outil et d’une approche bio-informatiques spécifiques. Ces DMRs se situent majoritairement au niveau d’enhancers actifs du cortex adulte. Une forte proportion des gènes affectés correspond à des gènes soumis à l’empreinte ou des gènes codant des protocadhérines (impliquées dans le neurodéveloppement ou des fonctions cérébrales), connus comme étant perturbés chez l’adulte à la suite d’une EPA. Ces gènes sont donc porteurs de marques épigénétiques anormales, déposées dès la fin de l’EPA, et constituent de potentiels biomarqueurs d’exposition. Ainsi, des cicatrices épigénétiques sont mises en place rapidement après l’EPA et suggèrent, à la lumière de la littérature, que certaines persistent chez l’adulte.Pour estimer les conséquences fonctionnelles de l’EPA sur le cerveau en développement, une étude de l’accessibilité de la chromatine et de l’expression des gènes sur la période encadrant le stress a été réalisée en contexte physiologique, en analysant des données publiques (ENCODE) d’ATAC-seq et de RNA-seq provenant de cortex préfrontaux murins non stressés. Ce data mining, a permis de dénombrer et d’identifier les régions chromatiniennes différentiellement ouvertes ou fermées, ainsi que les gènes activés ou réprimés entre les stades embryonnaires E13 et E16 dans le cortex en développement. Les DMR sont associées à des régions chromatiniennes dont l’accessibilité varie au moment du stress, mais aussi au niveau de gènes dont l’expression augmente au cours du développement, suggérant une sensibilité particulière de ces régions dynamiques du génome.L’analyse intégrée des différents jeux de données NGS, n’a pas permis de mettre en évidence une corrélation entre les sites fixés par HSF2 et les DMR. En revanche, les sites de fixation de HSF2 étant souvent associés à des sites de liaison de readers du méthylome ou des remodellers de la chromatine, il est possible que HSF2 soit impliqué dans les conséquences fonctionnelles des perturbations du méthylome dues à l’EPA, plutôt que dans la mise en place de ces défauts
Fetal brain is vulnerable to environmental stress such as prenatal alcohol exposure (PAE), the leading non-genetic cause of mental retardation. This stress induces a wide spectrum of neurodevelopmental defects that are often lately diagnosed. A better understanding of molecular mechanisms underlying these defects would help to develop reliable diagnostic tools for the early care of high-risk subjects.HSF2 transcription factor is a major actor of PAE response in the developing brain. Necessary for cortical physiological development, it also leads, in the context of chronic PAE stress, to abnormalities in brain development by changing its genomic targets. In addition, V. Mezger's team has demonstrated, in the embryonic cortex, that HSF2 binds DNMT3A - in a physiological context or following a PAE, DNMT3A being responsible for de novo DNA methylation.Since it has been shown that the methylome profile of adults that were exposed to a PAE stress, is often perturbed, it was conceivable that the DNMT3A/HSF2 interaction, in a stressful context, may, in part, be responsible for this methylome profile modifications. To test this hypothesis, three integrative high-throughput sequencing (NGS) studies were conducted, using cerebral cortices of mouse embryos exposed, or not, to PAE corresponding to a binge drinking alcoholization.ChIP-seq experiments, targeting HSF2 in alcohol-exposed fetal cortices, allowed us to map its binding sites in the genome, and identify 280 HSF2 targets. Most of these target sites are associated with genes involved in brain development or in stress response. Some of these genes are also linked, in the literature, with PAE effects.Few hours after PAE, 432 differentially methylated regions (DMRs) were identified between control (PBS treated) or alcohol-treated fetal cortices, using a methylome capture protocol. This analysis required the development of specific bioinformatics tools and approaches. These DMRs are mainly localized in active enhancers of the adult cortex. A high proportion of their associated genes correspond to imprinted genes or genes encoding clustered Protocadherins, both involved in neurodevelopment or brain function, and known to be impacted in adults prenatally exposed to an alcoholic stress. Because their deposition is linked to PAE per se and show some persistence in the postnatal/adut period, this strongly reinforces their potential as biomarkers of exposition. These results indicate that epigenetic ‘scars‘ are deposited very quickly after PAE and suggest, based on the literature, that some of them persist in adults.To estimate the functional consequences of PAE on the developing brain, a study of chromatin accessibility and gene expression over the stress period was conducted in a physiological context, analyzing public data (ENCODE) of ATAC-seq and RNA-seq from unstressed murine prefrontal cortices. This data mining study allowed us counting and identifying the chromatin regions that are differentially opened or closed, as well as the genes that are activated or repressed between the embryonic stages E13 and E16 in the developing cortex. Of note, a proportion of DMRs are significantly associated with chromatin regions whose accessibility varies - under physiological conditions - during the stress period, but also with genes whose expression increases during development, suggesting a particular vulnerability at these dynamic regions of the genome to stress.Our integrative analysis of the different NGS datasets did not reveal any correlation between HSF2 binding sites and the DMRs. However, since HSF2 target sequences contain often binding sites of methylome readers or chromatin remodellers, HSF2 might be involved in functional consequences of PAE-induced methylome disturbances, rather than in the establishment of these defects

Nous avons étudié la différenciation neuronale dans les greffons de tissu nerveux fœtal homotypique (moelle épinière) ou hétérotypique (néocortext, ganglions rachidiens) non dissocié, après transplantation dans une cavité faite par aspiration dans la moelle épinière cervicale de rats adultes. Cette évolution a été en partie comparée à celle du tube nerveux maintenu in situ, au cours du développement normal. Dans ce but, nous avons mis en œuvre des techniques principalement immunocytochimiques utilisant des anticorps dirigés soit contre des éléments structuraux du neurone ou de la fibre nerveuse (neurofilaments = NF, périphérine = P, protéine basique de la myéline = MBP), soit contre des molécules impliquées dans la transmission synaptique (calcitonin gene-related peptide = CGRP, choline acétyl-transférase = ChAT, gamma amino-butyric acid = GABA, tyrosine hydroxylase = TH). A titre de complément, une étude délibérément restreinte de l'ultrastructure des seuls transplants de moelle épinière fœtale a été également entreprise. Les trois types de greffons survivent à la transplantation tout en s'intégrant aux tissus de l'animal receveur. Bien que l'organisation d'ensemble des transplants reste généralement très atypique, on observe, au niveau cellulaire, un processus systématique de maturation des neurones survivants et de leur environnement neuronal, glial et vasculaire qui présente certains analogies avec le développement normal. Dans les transplants de moelle épinière fœtale, la différenciation neuritique a pu être appréciée par l'immunoréactivité vis-à-vis de l'anticorps anti-NF. Certains de ces neurites sont myélinisés (MBP+). Une immunoréactivité P+, CGRP+ ou ChAT+ et observée au niveau de certains neurones, dispersés dans les transplants. Ces marqueurs sont spécifiques des motoneurones ou des neurones sympathiques préganglionnaires. L'existence d'un système inhibiteur est démontrée par l'immunoréactivité de quelques neurones et de très nombreux boutons vis-à-vis d'un anticorps anti-GABA. L'étude ultrastructurale témoigne de l'existence de nombreuses synapses axo-somatiques et axo-dentritiques, ainsi que du processus de myélinisation des axones par les oligodentrocytes. La maturation astrocytaire est révélée par la présence de faisceaux denses de gliofilaments. Un processus comparable de maturation neuronale est observé dans les transplants de néocortex. Il est mis notamment en évidence par une large immunoréactivité anti-NF, anti-MBP et anti-GABA. L'immunoréactivité anti-CGRP est confinée au niveau des fibres nerveuses qui très probablement d'origine exogène. La présence de neurones catécholaminergiques est démontrée par leur immunoréactivité anti-TH. L'existence de neurones et de fibres immunoréactives pour la périphérine est d'interprétation malaisée. Dans les transplants de ganglions rachidiens, seuls survivent à long terme des neurones sensoriels primaires de petite taille qui sont tous très immunoréactifs pour la périphérine. Une étude comparative de l'immunioréactivité pour la périphérine et pour le CGRP a montré l'existence de nombreux neurones P+/CGRP- et d'un nombre beaucoup plus faible de neurones P+/CGRP+. Les résultats du présent travail démontrent que les différents transplants utilisés sont le siège d'un important processus de maturation neuronale et glio-vasculaire. Ils s'ajoutent à ceux obtenus précédemment par le même groupe de recherche, révélant d'une part d'importantes capacités d'axogenèse )à partir des neurones transplantés et démontrant d'autre part des possibilités de réafférentation des transplants par les fibres nerveuses de l'animal hôte. Ils devront être complétés par des études visant à établir dans quelle mesure les transplants nerveux peuvent être fonctionnellement intégrés dans les circuits sensori-moteurs de l'animal hôte.

Le test de rotation mentale (TRM) est robuste pour faire émerger une grande différence de sexe en faveur des hommes. Il existe un stéréotype, communément admis, de moins bonnes performances des femmes en aptitude spatiale. Deux théories explicatives cohabitent. La première, biologique, est liée à une masculinisation du cerveau des garçons sous l'action des androgènes durant la vie fœtale. Dans cette hypothèse, et en raison d'un transfert d'hormones supposé durant la vie intra-utérine, les femmes qui ont un cojumeau doivent avoir des performances meilleures que celles ayant une cojumelle (Vuoksimaa et al., 2010). L'autre hypothèse, que nous défendons, suppose que les différences de sexe au TRM peuvent être socialement construites ou activées par des éléments du Contexte évaluatif et ceci quel que soient les compétences des personnes. Nous avons, pour la première fois dans une étude gémellaire, confronté ces deux hypothèses. Des paires de jumeaux jeunes adultes dizygotes de même sexe (DZMS), 23 paires d'hommes et 34 paires de femmes, et de sexe différent (DZSD), 62 paires, ont passé un TRM informatisé dans deux conditions expérimentales où l'exactitude des réponses et les temps de réponse sont enregistrés. Dans une condition, les consignes du test rendent la situation de comparaison au cojumeau possible (CSP) : « vous et votre jumeau ferez le même test aujourd'hui », dans l'autre condition (CSI) la comparaison est rendue improbable : « vous et votre jumeau ferez des tâches différentes ». Nos résultats n'accréditent pas la théorie biologique et sont en faveur d'une explication en termes d'interférence du stéréotype
The mental rotation test (MRT) is the most robust test revealing that men outperform women. Two major causes have been proposed for explaining the origin of this difference. The first focused on brain masculinization under the action of androgen during the fetal development. Vuoksimaa et al., (2010) showed that dizygotic opposite-sex female have greater performances than dizygotic same-sex female. For the second hypothesis, sex difference is mainly due to social regulation factors and stereotype threat interaction. We test here this second hypothesis. In a twin design we tested, for the first time, these two causal explanations. Same-sex dizygotic young adult pairs (23 pairs of males and 34 pairs of females), and opposite-sex dizygotic pairs (62 pairs) took a computerized MRT in two experimental co-action conditions. In the first condition, the experimental situation make the co-twin comparison possible (CSP): “you and your co-twin do the same test today”, and in the other experimental condition called, improbable comparison situation (CSI), they are told that: “you and your co-twin do different test today”. Accuracy and responses time where analyzed. Our results do not support the biological model but, in contrary, support the social regulation and stereotype threat model

Le développement fœtal est une période particulièrement vulnérable aux déséquilibres du milieu dans lequel il se déroule. Le testicule fœtal joue un rôle capital dans la masculinisation des organes reproducteurs via sa fonction endocrine, et toute altération peut engendrer un spectre de malformations pouvant impacter la fertilité future de l’homme. Au cours du développement, l’embryon puis le fœtus va être exposé à un l’environnement chimique complexe qu’est l’exposome maternel. Parmi les familles de substances constituant l’exposome se trouvent les médicaments que la femme enceinte consomme pour soigner une pathologie chronique ou de façon aigue pour traiter un symptôme lié à la grossesse. Nous nous sommes intéressés à deux classes de médicament : les antiépileptiques (AEs) d’une part, et les antalgiques d’autre part car des études épidémiologiques ont rapporté un risque accru d’hypospadias chez les nouveau-nés exposés in utero à l’acide valproïque, un AE, et de malformations de l’appareil reproducteur chez ceux exposés au paracétamol et à l’ibuprofène notamment. Or la survenue de ces altérations pourrait être liée à des perturbations de l’équilibre hormonal. Nous avons utilisé un modèle de culture organotypique d’explants testiculaires fœtaux humains afin de comparer les profils de perturbation générés par une exposition courte, de 3 jours, aux antalgiques et une exposition courte et longue - 28 jours - pour les AEs. Pour cela, nous avons adapté et optimisé notre modèle pour nous rapprocher de la chronicité du traitement in vivo. Ces études utilisant des cultures organotypiques de testicules fœtaux humains ont permis de démontrer que trois AEs pouvaient à plus ou moins longue échéance induire une altération de la fonction endocrine de cet organe, ce qui laisse ouverte la possibilité qu’avec un traitement chronique, l’imprégnation androgénique du fœtus puisse être affectée, et que cela puisse avoir des conséquences sur les organes cibles. Pour les antalgiques de la famille des AINS étudiés, s’ils semblent avoir des effets moins spectaculaires sur la fonction endocrine du testicule fœtal humain en développement, leur utilisation pendant la grossesse continue de présenter un risque sur d’autres organes dont le développement est sensible ou dépend des prostaglandines
Fetal development is a period that is particularly vulnerable to imbalances in the environment in which it takes place. The fetal testis plays a crucial role in the masculinization of the reproductive organs via its endocrine function, and any alteration can give rise to a range of malformations that can have an impact on a man's future fertility. During development, the embryo and then the fetus are exposed to a complex chemical environment known as the maternal exposome. Among the families of substances that make up the exposome are the medicines that pregnant women take to treat a chronic pathology or acutely to treat a pregnancy-related symptom. We are interested in two classes of drugs: anti-epileptics (AEs) on the one hand, and analgesics on the other, because epidemiological studies have reported an increased risk of hypospadias in newborns exposed in utero to valproic acid, an AE, and of malformations of the reproductive system in those exposed to paracetamol and ibuprofen in particular. The occurrence of these alterations could be linked to disturbances in hormonal balance. We used an organotypic culture model of human fetal testicular explants to compare the disruption profiles generated by a short exposure - 3 days - to analgesics and a short and long exposure - 28 days - to AEs. To do this, we adapted and optimized our model to approximate the chronicity of treatment in vivo. These studies, using organotypic cultures of human fetal testes, showed that three AEs could, over a more or less long period, induce an alteration in the endocrine function of this organ, leaving open the possibility that with chronic treatment, the androgenic impregnation of the fetus could be affected, and that this could have consequences for the target organs. Although the NSAID analgesics studied appear to have less spectacular effects on the endocrine function of the developing human fetal testis, their use during pregnancy continues to present a risk for other organs whose development is sensitive to or dependent on prostaglandins

Les résultats d'études expérimentales auprès d'animaux suggèrent qu'une diète riche en acides gras polyinsaturés à longue chaîne (AGPI-LC) et/ou un ratio élevé d'oméga-3/oméga-6 a des effets protecteurs sur le développement neurologique et sensoriel du foetus suite à une exposition gestationnelle à l'éthanol. À ce jour, aucune étude n'a évalué les possibilités bienfaisantes de ces interventions nutritionnelles sur les humains. Le but de cette thèse est de déterminer si un ratio élevées d'acides docosohexanoïques (DHA)/ acides arachidonique (ARA) dans le cordon ombilical peut protéger contre les effets de l'exposition prénatale à l'alcool sur trois aspects du développement: 1) la croissance prénatale (poids, circonférence crânienne et taille à la naissance), 2) le développement cognitif, et 3) l'acuité visuelle. Une étude de cohorte longitudinale prospective a été effectuée dans une population inuite de la région du Nunavik au Québec. La consommation d'alcool au cours de la grossesse a été documentée à la mi-grossesse et dans le mois suivant l'accouchement auprès de 215 femmes. Le sang du cordon ombilical et de la mère a été prélevé suivant l'accouchement. Les paramètres de croissances prénatales ont été documentés à la naissance du nouveau-né. Le traitement de l'information et l'acuité visuelle des enfants ont été évalués à 6 mois postnatal en utilisant le Fagan Test of Infant Intelligence et le Teller Acuity Cards. Les résultats de cette étude suggèrent que l'exposition prénatale à des doses excessives d'alcool par épisode au cours de la gestation est associée à un poids et une circonférence crânienne inférieure à la naissance ainsi qu'à une acuité visuelle réduite. Le ratio DHA/ARA dans le cordon ombilical est associé à un poids plus élevé à la naissance. Aucune interaction significative ne peut être observée entre le ratio DHA/ARA dans le cordon ombilical du nouveau-né et l'exposition prénatale à l'alcool sur les marqueurs de développement pré- et postnatal. Les résultats de la présente étude suggèrent que le ratio DHA/ARA ne joue ni un rôle médiateur, ni un rôle modérateur dans la relation entre d'une part, l'exposition prénatale à l'alcool et d'autre part, la croissance prénatale et l'acuité visuelle à 6 mois. Compte tenu de la méthodologie utilisée pour cette étude il est impossible de conclure sur le rôle de la nutrition prénatale et de l'appart nutritif en DHA dans la relation entre l'exposition à l'alcool et le développement.

L’objectif prioritaire de ce travail était de provoquer un état de tolérance immunologique à des allogreffes cardiaques et cutanées chez des souris injectées avec des cellules souches hématopoïétiques (CSH) transduites avec le gène de l’interleukine 10. Un deuxième but était d’améliorer la survie des greffons cutanés en utilisant des cellules dendritiques immatures tolérogène. Le foie fœtal de souris contient en moyenne 2% de cellules souches capables de se différencier dans toutes les lignées hématolymphoïdes. De plus, leur relativement faible expression des antigènes du CMH fait d’elles un matériel biologique parfois susceptible de s’adapter à un environnement allogénique. L’IL-10 est une cytokine anti-inflamatoires. Produite par les lymphocytes Th2 principalement, elle inhibe la production de cytokines pro-inflamatoires telle l’IL-2. Elle empêche aussi la fonction de présentation des antigènes des CPA. Les cellules dendritiques (DC) dérivent de CSH, elles jouent un rôle central dans l’immunité et sont capables d’interagir avec les cellules du système immunitaire inné et adaptatif. Elles sont essentielles à la mise en place d’une réponse régulatrice ou tolérogène, ceci en fonction des informations fournies par le microenvironnement cellulaire. Les résultats montrent d’une part que les CSH fœtales, de souris C57 BL/6 transduites avec le gène de l’IL-10 et injectées plusieurs fois à des souris allogéniques (BALB/c), induisent une prolongation de survie du greffon cardiaque de même souche. Cette survie est de 86.25+13.8 jours versus 11.5+0.6 jours pour les groupes contrôles. Les DC tolérogènes (tol-DC) de souris DBA1 traitées avec le TNFα sont injectées à des souris allogéniques (BALB/c). Il en résulte une prolongation de survie du greffon cutané de même souche que les tol-DC : 15 jours vs 7.5 jours pour les contrôles. Seuls les animaux transplantés avec des tol-DC présentent un état de tolérance autorisant la prolongation de la survie de greffonsallogéniques
The main objective of this work was to induce a state of immunological tolerance to cardiac and skin allografts in mice injected with hematopoietic stem cells (HSCs) transduced with the gene for interleukin 10 (IL-10). A second goal was to improve the survival of skin grafts using immature dendritic cells well known for their tolerogenic function. Mouse fetal liver contains 2% of stem cells on average that can differentiate into all blood-lymphoid lineages. In addition, their relatively low antigen expression of major histocompatibility complex (MHC) makes them a biological material sometimes capable to adapt to an allogeneic environment. IL-10 is a cytokine with anti-inflammatory properties. Mainly produced by Th2 lymphocytes cells, IL-10 inhibits the production of pro-inflammatory cytokines such as IL-2. It prevents antigen presenting function of APCs. Dendritic cells (DC) derived from HSCs and play a central role in immunity. They are able to interact with cells of the innate and adaptive immune system. They are essential to the establishment of a regulatory or tolerogenic response, this based on the information provided by the cellular microenvironment. Results firstly show that fetal HSC of C57 BL/6 mice transduced with IL-10 gene and injected several times to allogeneic mice (BALB/c) sublethally irradiated induce a prolongation of heart transplant survival of the same strain. This survival is of 86.25+13.8 days in comparison with 11.5+0.6 days for control groups. Tolerogenic dendritic cells (tol-DC) of DBA1 mice treated with TNFα are injected into allogeneic mice (BALB/c) sublethally irradiated. This results in a prolongation of skin graft survival of same strain as tol-DC: 15 days compared to 7.5 days for the control groups. Only tol-DC transplanted animals have a tolerance state allowing prolonged survival of allogeneic skin grafts

Nous avons étudié les propriétés de plasticité ainsi que les possibilités de réparation de la moelle épinière du rat et du chien adultes, après lésion traumatique, en mettant en œuvre des techniques de transplantation de tissu nerveux. Voici, résumés, les principaux résultats de cette étude : 1) à la suite d'une lésion traumatique localisée de la moelle épinière cervicale du rat adulte ou lombaire du chien adulte, un certain nombre de neurones médullaires, y compris des motoneurones, (ré)expriment une capacité à générer (ou a regénérer) des prolongements cytoplasmiques de type axonal dans des segments de nerfs périphériques autologues implantés à leur voisinage. Il en est de même pour des neurones respiratoires du bulbe rachidien du rat adulte ; 2) chez le rat adulte, certains de ces axones, notamment ceux issus de motoneurones, peuvent atteindre un muscle squelettique auquel le greffon de nerf périphérique est connecté et y former des jonctions neuro-musculaires cholinergiques, principalement ectopiques, parfaitement fonctionnelles et stables tout au long de la vie de l'animal ; 3) des fragments non dissociés de moelle épinière fœtale, de néocrotex fœtal, ainsi que des ganglions rachidiens fœtaux ou adultes entiers, transplantés dans une cavité faite par aspiration dans le moelle épinière cervicale de rats adultes, survivent à cette transplantation tout en s'intégrant au tissu médullaire des animaux receveurs ; 4) les neurones présents dans ces transplants survivent en grand nombre. Ils se différencient en émettant des neurites, dont certains se myélinisent, et en exprimant leurs neurotransmetteurs ou neuropeptides spécifiques ; 5) les neurones transplantés ont également la capacité, à des degrés très divers, de faire croître des axones dans des segments de nerfs périphériques autologues placés au contact des transplants. Cette aptitude s'est en effet révélée nulle pour les neurones corticaux fœtaux, limitée pour les neurones médullaires fœtaux et très grande pour les neurones médullaires fœtaux et très grande pour les neurones sensoriels primaires des ganglions rachidiens, tant fœtaux qu'adultes. Cependant, quelque soit le type de transplant utilisé, on observe qu'un nombre non négligeable et assez constant de neurones intrinsèques de la moelle épinière hôte contribue également à la réinnervation des nerfs greffés ; 6) il en résulte que dans des expériences de pontage nerveux entre un transplant de moelle épinière fœtale, inséré dans la moelle épinière de rats adultes, et un muscle squelettique dénervé, il subsiste une ambiguïté dans l'origine de la réinnervation fonctionnelle du muscle reconnexté. En effet, l'injection intramusculaire d'un marqueur axonal rétrograde marque à la fois des neurones médullaires transplantés et des neurones médullaires de la moelle épinière hôte ; 7) les transplants de moelle épinière et de néortex fœtaux peuvent être afférentés par différents types de fibres nerveuses d'origine extramédullaire mais qui se projettent normalement dans la moelle épinière de l'animal hôte : fibres cortico-spinales priovenant du cortex moteur, fibres sérotoninergiques originaires du raphé, fibres sensorielles primaires SP + et/ou CGRP + issues des racines rachidiennes dorsales voisines. Nos travaux démontrent ainsi que la mise en œuvre d'une méthodologie de transplantation intra-médullaire de tissu nerveux permet de révéler d'importantes capacités de repousse axonale et d'axogenèse dans la moelle épinière lésée des mammifères adultes. Ce type de résultat constitue une étape essentielle dans la recherche de solutions thérapeutiques visant à une restructuration anatomique et fonctionnelle de la moelle épinière lésée.

Introduction : L'infection foetale avec syndrome de réponse inflammatoire foetale (SRIF) pendant le travail est associée au risque de développer une septicémie néonatale, des troubles du développement neurologique, une paralysie cérébrale, voire un décès. Lorsque l’acidose se surajoute au SRIF pendant le travail, cela induit une situation à très haut risque pour le foetus. Les méthodes actuelles pour diagnostiquer le SRIF sont insuffisantes. Nous avons émis l'hypothèse que l'analyse de la variabilité de la fréquence cardiaque foetale (VFC) pourrait être utilisée pour détecter le SRIF. Par conséquent, le premier objectif de notre travail était d'explorer si la VFC se modifiait au cours d’un SRIF. Le second objectif était d'étudier les changements de la VFC pendant une hypoxie progressive associée à un SRIF, en comparaison à une hypoxie isolée.Matériel et méthodes : Le modèle de SRIF était obtenu par l’injection de lipopolysaccharide (LPS) par voie intraveineuse à des foetus de brebis instrumentés, proches du terme. Un groupe témoin recevait une injection de sérum physiologique. Les paramètres hémodynamiques, les gaz du sang, le dosage d’interleukine-6 (IL-6) et 14 indices de VFC étaient enregistrés pendant six heures. Des comparaisons étaient faites entre les groupes LPS et le groupe témoin toutes les heures. Pour le second objectif, deux autres groupes ont été comparés : l’un avec une hypoxie isolée, l'autre avec une hypoxie associée à un SRIF. L'hypoxie progressive était induite par des occlusions répétées du cordon ombilical d’une minute pendant trois phases d’occlusions : légères, modérées et sévères. Les paramètres hémodynamiques et gazométriques ainsi que la VFC étaient comparés entre les groupes.Résultats : Concernant le premier objectif, 15 agneaux ont été instrumentés. Dans le groupe LPS (n = 8), l'IL-6 augmentait significativement après l'injection de LPS (p < 0,001), confirmant ainsi le modèle SRIF. La fréquence cardiaque foetale augmentait significativement à partir de H5 (p < 0,01). Cinq mesures de la VFC étaient significativement différentes entre le groupe LPS et le groupe témoin (le SDNN (déviation standard des intervalles NN / Standard Deviation of Normal to Normal), la SD2 (déviation standard 2 / Standard Deviation 2), le DFA (analyse des fluctuations sans tendances / Detrended Fluctuation Analysis) alpha 1 et 2 et la VLT (Variabilité à Long Terme). Concernant le second objectif, la mortalité était plus élevée dans le groupe hypoxie + SRIF (n = 4/9) en comparaison au groupe hypoxie isolée (n = 0/9). L'état gazométrique était modifié plus tôt en cas d’hypoxie associé au SRIF. Après les occlusions légères, le pH était significativement plus bas (7,22 [7,12-7,24] vs 7,28 [7,23-7,34], p = 0,01) et les lactates étaient significativement plus élevés (10,3 mmol/L [9,4-11,0] vs 6,0 mmol/L [4,1-8,2], p <0,001) dans le groupe hypoxie + SRIF. Après les occlusions légères, six indices de VFC étaient significativement augmentés dans le groupe hypoxie + SRIF en comparaison au groupe hypoxie isolée (le SDNN, le RMSSD (racine carrée de la moyenne des carrés des différences entre intervalles NN successif / Root Mean Square of Successive Differences), la VCT (Variabilité à court terme), la VLT, les LF (basses fréquences / Low Frequencies) et les HF (hautes fréquences / High frequencies)). Après les occlusions modérées, le SDNN et le RMSSD restaient significativement augmentés.Conclusion : Au cours d'un SRIF aigu, isolé ou associé à une hypoxie, la VFC est significativement modifiée. Ces changements semblent être médiés par une augmentation de la variabilité globale et une perte de complexité de la VFC. Ainsi, la VFC pourrait être utilisée pour la détection précoce de ces deux situations à risque
Introduction: Fetal infection during labor, accompanied by fetal inflammatory response syndrome (FIRS), is linked to neurodevelopmental impairments, cerebral palsy, neonatal sepsis, and even mortality. Existing diagnostic methods for FIRS remain insufficient. Acidosis associated with FIRS during labor presents a significant risk to the fetus. This study hypothesizes that analysing fetal heart rate variability (HRV) could serve as a tool for detecting FIRS. Therefore, the first study aim was to explore whether fetal HRV change during FIRS and the second aim was to explore how HRV changes during acute FIRS-associated hypoxia, compared to isolated hypoxia. Material and methods: In near-term fetal sheep with chronic instrumentation, lipopolysaccharide (LPS) was administered intravenously to simulate FIRS, while a control group received an injection of saline solution. Hemodynamic parameters, blood gas levels, interleukin-6 (IL-6), and 14 heart rate variability (HRV) indices were recorded during a stability period and for six hours after injection. For these different parameters, hourly comparisons were made between the LPS and control groups. For the second aim, two other groups were compared: one with isolated hypoxia, the other with hypoxia and FIRS. Worsening hypoxia was induced by repeated umbilical cord occlusions in three one-hour phases: mild, moderate, and severe. Hemodynamic, gasometric, and HRV parameters were compared between the groups. Results: For the first aim, a total of 15 lambs were instrumented. In the LPS-treated group (n = 8), IL-6 levels significantly increased following LPS administration (p < 0.001), validating the FIRS model. Additionally, fetal heart rate showed a significant increase after H5 (p < 0.01). Significant differences between LPS and control groups were observed between H2 and H4 for five HRV measures (Standard Deviation of Normal to Normal (SDNN), Standard Deviation 2 (SD2), Detrended Fluctuation Analysis (DFA) alpha 1 and 2 and Long-Term Variability (LTV)). The hypoxia and FIRS group had a higher mortality rate (n = 4/9) compared with isolated hypoxia group (n = 0/9). Gasometric state was altered earlier in the hypoxia and FIRS group after mild occlusions (pH = 7.22 [7.12–7.24] vs 7.28 [7.23–7.34], p = 0.01; lactate = 10.3 mmol/L [9.4–11.0] vs 6.0 mmol/L [4.1–8.2], p <0.001). After mild occlusions, the hypoxia and FIRS group had higher values for six HRV parameters compared with the hypoxia group (SDNN, Root Mean Square of Successive Differences (RMSSD), Short Term Variability (STV), LTV, Low Frequencies (LF) and High frequencies (HF). After moderate occlusions, only SDNN and RMSSD remained significantly higher. Conclusion: During acute FIRS, associated or not with hypoxia, HRV is significantly changed. These changes appear to be mediated by an increase of global variability and a loss of signal complexity. HRV indices may therefore be valuable for early detection in these two situations

L'objectif principal a été d'établir une relation quantifiée entre l'amplitude et la durée de la réponse fœtale et la survenue d'anomalies fonctionnelles (trouble du rythme cardiaque fœtal : RCF) ou organiques (lésions cérébrales) liées à l'hypoxie. Pour suivre l'évolution relative des résistances ombilicales et placentaires en condition d'hypoxie nous avons utilisé le rapport cérébro-placentaire (RCP). Ce rapport est supérieur à 1,1 lors de grossesses normales quelque soit l'âge de la grossesse et il est inférieur à 1,1 en cas de réduction significative de la pO2 fœtale et dans tous les cas il est indépendant du RCF. Plusieurs expériences sur des fœtus de brebis nous ont permis de montrer que la variation du RCP même de quelques pourcents suit celle de la pO2. Il existe plusieurs étapes dans la réponse artérielle à l'hypoxie. Tout d'abord la redistribution des flux fœtaux vers le cerveau (le RCP devient inférieur à 1,1, puis continue à diminuer au cours du temps). L'IH permet de quantifier le déficit en oxygène cumulé au fil des jours en prenant en compte d'une part l'amplitude de la chute de pO2, d'autre part la durée d'exposition à l'hypoxie et il est prédictif des conséquences fonctionnelles de l'hypoxie (anomalies du RCF) que ce soit en situation d'hypoxie aigue͏̈ ou chronique. Dès que le RCP passe en dessous de 1,1, un IH supérieur à 150 prédit la survenue d'anomalies de RCF dans 88 % des cas. Si l'on place la limite normale pour le RCP à 1, un IH supérieur à 150 prédit la survenue de lésions cérébrales dans 80 % des cas. Le monitoring de l'hypoxie débutante par l'IH s'adresse à des fœtus certes en danger mais non encore atteints par des séquelles irréversibles liées à l'hypoxie.

L’exposition prénatale à l’alcool est une cause non génétique majeure d’anomalies structurales et fonctionnelles du système nerveux central dont la forme la plus sévère est le syndrome d’alcoolisation fœtale, et dont les effets perdurent tout au long de la vie, associant retard mental, troubles neurocognitifs et comportementaux. L’exposition prénatale à l’alcool est un enjeu de Santé Publique, car actuellement, la plupart des enfants ne sont pas précocement dépistés en l’absence des signes majeurs que sont la dysmorphie crânio-faciale caractéristique et le retard de croissance. Si de nombreuses études sur les anomalies neurodéveloppementales ont été réalisées chez l’animal et dont les résultats sont souvent contradictoires, très peu de données sont disponibles chez l’humain et concernent essentiellement l’enfant. Afin d’expliquer la symptomatologie de ces enfants, nous avons réalisé une étude de la mise en place des interneurones et de la glie de myélinisation, éléments essentiels intervenant dans la synchronisation des réseaux neuronaux. A partir d’une cohorte de 15 fœtus humains à tous les stades du développement et de deux cas post-nataux âgés de trois mois et deux ans exposés à l’alcool, nous avons étudié l’ontogenèse des interneurones GABAergiques et calrétininergiques ainsi que les caractéristiques de leur migration vasculaire dans le cortex. Nous avons identifié une interneuronopathie consistant en un retard majeur de génération dans les zones de production (éminences ganglionnaires) aux stades précoces de développement et une malposition des interneurones calrétininergiques au sein du cortex des fœtus alcoolisés aux stades plus tardifs comparativement à des contrôles appariés. Ce retard de génération touche également les précurseurs des oligodendrocytes exprimant le PDGFRα qui restent ensuite anormalement nombreux aux dépends des précurseurs et préoligodendrocytes exprimant Olig2. Ces derniers restent pratiquement absents dans le cortex des fœtus alcoolisés jusqu’en fin de la grossesse. L’interneuronopathie et le défaut de différentiation oligodendrogliale pourraient expliquer en partie les troubles neurologiques observés chez les enfants et adultes exposés in utero à l’alcool, la modulation de l’activité neuronale et la myélinisation étant indispensables à l’établissement des réseaux neuronaux et à la conduction des influx nerveux
Prenatal alcohol exposure is a major non-genetic cause of structural and functional abnormalities of the central nervous system, the most severe form of which is fetal alcohol syndrome, and the effects of which persist throughout life, associating mental retardation, neurocognitive and behavioural disorders. Prenatal alcohol exposure is a public health issue, since currently most children are not early detected in the absence of the major signs consisting of characteristic cranio-facial dysmorphism and growth retardation. While numerous studies on neurodevelopmental abnormalities have been carried out in animals and the results of which are often contradictory, very little data is available in humans and mainly concerns children. In order to explain the symptoms of these children, we have conducted an ontogenetic study of interneurons and oligodendrocyte lineage, two essential events involved in the synchronization of neural networks. Using a cohort of 15 human fetuses at all stages of development and two postnatal cases aged three months and two years exposed to alcohol in utero, we studied the development of GABAergic and calretinergic interneurons as well as the characteristics of their vascular migration within the cortex. We identified an interneuronopathy consisting of a major generation delay in the production areas (ganglionic eminences) at the early stages of development and a mispositioning of calretinergic interneurons within the cortex of fetuses exposed to alcohol at later stages compared with age matched controls. This delay in generation also affects precursors of oligodendrocytes expressing PDGFRα, which then remain abnormally numerous at the expense of precursors and pre-oligodendrocytes expressing Olig2. The latter are virtually absent in the cortex of fetuses exposed to alcohol until the end of pregnancy. Interneuronopathy and the lack of oligodendroglial differentiation could partly explain the neurological disabilities observed in children and adults exposed in utero to alcohol, modulation of neuronal activity and myelination being essential for the establishment of neural networks and conduction of nerve outputs

Le terme Foetal Alcohol Spectrum Disorder (FASD) définit l’ensemble des perturbations observées dans la descendance de femme consommant de l’alcool durant leur grossesse. La variabilité des phénotypes du FASD suppose des mécanismes complexes de l’effet tératogène de l’alcool, et leur compréhension nécessite l'emploi d'une multiplicité de modèles animaux. A la lumière de ces modèles, quatre grands effets de l’alcoolisation d’un cerveau immature sont observés au niveau comportemental, avec des modifications de : (i) l’attention et la locomotion ; (ii) l’apprentissage et la mémoire ; (iii) du niveau de stress, d’anxiété et de dépression ; (iv) la sensibilité aux drogues. Le travail de cette thèse a porté à la fois sur les conséquences psycho-comportementales de l’alcoolisation fœtale et sur la possibilité de modulation de ces effets par des approches pharmacologique et/ou comportementale. Nous avons pour cela travaillé à partir de deux modèles murins d’alcoolisation précoce, le premier issu d’un protocole d’alcoolisation pré- et post-natale et le second correspondant à un protocole d’alcoolisation néonatale. Ce travail nous a permis tout d'abord d’établir que les rats pubères, précédemment alcoolisés en période pré- et post-natale, développaient un trouble hyperactif combiné à un déficit attentionnel. Dans un deuxième temps, nous avons observé qu’un traitement par un agoniste des Peroxisome Proliferator-Activated Receptors contrecarrait l’apparition de ces troubles de l’activité locomotrice et des capacités attentionnelles. Enfin dans un troisième temps, nous avons tenté d’accentuer ces effets de l’alcoolisation d’un cerveau immature. Ainsi l’apparition d’un trouble mnésique n’a pu être observée que consécutivement à l’application successive, soit d’un protocole d’alcoolisation pré- et post-natale et d’un traitement amphétaminique à l’adolescence, soit d’un protocole d’alcoolisation néonatale et d’un protocole de perturbation de la rythmicité circadienne à l’âge adulte. Les deux principales conclusions de ce travail portent sur : (i) la modélisation, chez le rat, de certains symptômes décrits dans le FASD et (ii) la modulation des effets de l’alcoolisation précoce qui peuvent être contrecarrés ou aggravés
The term Foetal Alcohol Spectrum Disorder (FASD) defines the set of foetal alcohol-induced alterations. The variability of FASD phenotypes may be due to the complex teratogenic effects of alcohol, and implies the use of multiple animal models to study them. In light of these models, the effects of alcohol on an immature brain have been shown to induce four major behavioural alterations: (i) attention and locomotion, (ii) learning and memory, (iii) Stress, anxiety and depression, (iv) drug sensitivity. Our work has focused on the consequences of foetal alcoholization to induce psycho-behavioural effects and their modulation. Using two rodent models of early alcohol exposure (by pre- and post-natal or neonatal alcoholization) we modulated the effects of alcohol by pharmacological or behavioural approaches. First, this work has allowed us to observe that early (pre-and post-natal) alcohol-exposed rats have a hyperactivity disorder combined with an attention deficit during puberty. Secondly we observed an improvement in those disorders treated by a peroxisome proliferator-activated receptors agonist. Thirdly, we tried to accentuate the effects of alcohol on an immature brain. We showed that the use of an amphetamine treatment during puberty on rats under a pre-and post-natal alcoholic treatment, as well as disruption of the circadian rhythm in adulthood on rats under a neonatal alcoholic treatment, induced a memory disorder. The two main conclusions of this work are: (i) the ability to model some FASD symptoms in the rat; (ii) the modulation of these early alcohol effects that can be reversed or aggravated

This thesis deals with the performance of a diagnostic protocol designed to determine the underlying causes of early fetal and perinatal deaths. It is subdivided into three chapters. The first chapter is a review of the literature. It surveys the underlying causes of fetal and perinatal deaths and the informativeness of different tests applied to assess these causes. The second chapter is a manuscrrpt describing the real performance of one of these protocols applied since 1982 in a geographlcally determined area. This area, located in the south east of France, covers annually 23,000 births. This descriptive study carried out on 1019 consecutive stillbirths and perinatal deaths shows the importance of both clinical information and necropsy among the overall tests. This chapter is preceded by an overview of the context and the objectives. In the third chapter, written as a classical chapter of a thesis, a decision tree presents the theoretical performance of each relevant combination of tests for the diagnosis only of fetal causes of death. The theoretical informativeness of each test was coded with the aid of two medical geneticists. Non fetal causes are not considered in this part of the study because the underlying objective of the clinicians who implemented the protocol was only to screen genetic causes of death.
Cette thèse se divise en trois chapitres écrits dans le cadre d'une étude d'évaluation de la performance d'un protocole de diagnostic des causes initiales de mortalité foetale précoce et périnatale. Le premier chapitre est constitué d'une revue de la littérature sur les causes initiales de mortalité et sur l'informativité des examens clinique et paracliniques à la naissance d'un enfant mort-né. Le deuxième chapitre est un manuscrit d'article décrivant la performance réelle d'un protocole de diagnostic mis en place en 1982 dans une zone géographique délimitée du sud est de la France couvrant 23 000 naissances annuelles. Cette étude descriptive porte sur 1019 décès consécutifs. Elle montre l'importance de l'information clinique et de l'autopsie parmi l'ensemble des examens. Elle est précédée d'une présentation du contexte et des objectifs. Le troisième chapitre est rédigé non plus sous la forme d'un article scientifique mais comme un chapitre de thèse classique. Il présente un arbre de décision évaluant la performance théorique de chaque combinaison des différents éléments du protocole. Le codage de l'informativité théorique de chaque élement inclus dans le protocole a été réalisé en collaboration avec deux experts en génétique médicale. Cette performance a été considérée uniquement pour la détermination des causes fœtales de mortalité. En effet, ce protocole mis en place à l'initiative d'une équipe de médecins pédiatres et généticiens, avait seulement pour objectif initiai le dépistage des causes fœtales de décès d'origine génétique et non celles d'origine maternelle ou obstétricale.