Tesi: "Cellules souches autologues"

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Li, Yan. "Thérapie cellulaire cardiaque avec cellules souches mésenchymateuses médullaires autologues : étude expérimentale de la bio-disponibilité et la bio-distribution du greffon cellulaire". Nancy 1, 2006. http://www.theses.fr/2006NAN11318.

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Abstract (sommario):

Après un infarctus du myocarde (IDM), l'évolution vers l'insuffisance ventriculaire gauche est en partie liée à une perte apparemment irréversible des cardiomyocytes fonctionnels et des structures vasculaires responsables à terme d'une altération structurale et fonctionnelle cardiaque. La réhabilitation du muscle cardiaque défaillant, par un apport de cellules souches autologues basées en partie sur leur potentialité myogénique et/ou angiogénique, constitue les bases du nouveau concept de la thérapie cellulaire cardiaque. Cette thèse décrit les différentes phases de la mise en place des investigations pré-cliniques en vue d'évaluer la capacité réparatrice de cellules souches autologues d'origine médullaire, les cellules mésenchymateuses (CSMM), dans les territoires myocardiques infarcis et' nécrotiques. Après les étapes initiales de validation des techniques de sélection des CSMM (prélèvement, culture cellulaire et caractérisation phénotypique) et le développement d'un modèle petit animal (rat) d'infarctus du myocarde par occlusion coronaire, le point fort de cette thèse a été ensuite la mise au point de nouvelles approches méthodologiques permettant de contrôler de façon séquentielle la traçabilité in vivo du produit thérapeutique délivré (norpbre de cellules intégrant la zone cible, leur distribution relative par rapport au tissu myocardique infarci versus tissu sain). Les données de la bio-disponibilité et la bio-distribution du greffon CSMM constituent une avancée importante dans le domaine de la thérapie cellulaire cardiaque et contribuent à perfectionner le geste thérapeutique
Myocardial infarction (MI) results in an apparent loss of contractile cardiomyocytes, a diminution of cardiac vessels (angiogenesis) which are responsible for the progressive alteration in the cardiac architecture and function. Recently, the reconstruction of the damaged cardiac tissue by using autologous stem cells (cardiac cell therapy) based partly on their ability to give rise to new cardiomyocytes and/or to promote angiogenesis has been proposed as a new therapeutic approach of the cardiac cell therapy. This thesis describes difIerent steps of pre-clinical investigation in order to assess the capability of bone marrow, derived mesenchymal stem cells (BMSCs) to repair infarct and necrotic myocardium. After initial phases of validation of various techniques of BMSCs' selection (cell harvesting, culture and phenotype characterization) and the development of a rat model of myocardial infarction by permanent coronary ligation, the main focus of this project was to develop new investigational methodologies allowing to track non-invasively implanted therapeutic cells. Therefore, the number of engrafted cells, their relative distribution within infarct versus normal myocardial tissue might be precisely determined and sequentially followed up. Outcomes from the bio-availability and the bio-distribution of grafted cells might have a critical importance when analyzing the effects of cardiac cell therapy and contribute to improve the cell therapeutic indication

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Lerouxel, Emmanuelle Giumelli Bernard Malard Olivier. "Phosphates de calcium et cellules autologues base d'une ingénierie tissulaire pour la reconstruction osseuse en territoire irradié /". [S.l.] : [s.n.], 2007. http://castore.univ-nantes.fr/castore/GetOAIRef?idDoc=57226.

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Lerouxel, Emmanuelle. "Phosphates de calcium et cellules autologues : base d'une ingénierie tissulaire pour la reconstruction osseuse en territoire irradié". Nantes, 2007. https://archive.bu.univ-nantes.fr/pollux/show/show?id=bc057180-d0dc-4d31-8f81-a716260ff382.

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Abstract (sommario):

Le traitement des cancers cervico-faciaux requiert souvent une chirurgie mutilante et une radiothérapie complémentaire. Ces traitements induisent des séquelles notables au niveau de la sphère oro-faciale. L'exérèse tumorale en terrain irradié ou la résection d'ostéoradionécrose (ORN) pose le problème des difficultés pour la réparation osseuse. Les capacités de cicatrisation sont réduites après extraction dentaire ou mise en place d’implants. En l’absence d’irradiation, les Phosphates de Calcium (PCa) sont couramment utilisés comme substituts osseux en chirurgie oro-faciale. Ce travail a eu pour but d’évaluer l’association de PCa, sous forme de granules ou injectable, à une greffe de cellules autologues, soit de moelle osseuse totale (MO) soit de cellules souches mésenchymateuses (CSM), en terrain irradié. Un nouveau modèle animal d’ORN localisée a pour cela été développé au préalable. Le matériau s’est révélé biotoléré bien que faiblement ostéointégré en terrain irradié. La greffe de MO a significativement amélioré la repousse osseuse. L’adjonction de CSM, issues de MO ou du tissu adipeux, au matériau n’a pas apporté d’amélioration de la repousse osseuse. Ces résultats peuvent s’expliquer par la richesse de la MO en cellules et facteurs de croissance indispensables à la réparation osseuse. Ce travail permet d’envisager l’intérêt de comblements osseux par des PCa associés à une greffe de MO en terrain irradié. Des études ultérieures auront pour objectif d’évaluer le devenir et le rôle des cellules implantées dans les phénomènes d’ostéogenèse et d’angiogénèse. Ce travail permet aussi d’entrevoir une perspective thérapeutique dans l’ORN grâce à l’ingénierie tissulaire osseuse
Treatment of most forms of squamous cell carcinoma requires surgical procedures and high dose irradiation, which often produce major esthetic and functional injuries in the maxillofacial area. Radiotherapy produces irreversible side-effects on bone, involving damages to its reparation properties and complications such as infections, healing delays and osteoradionecrosis (ORN). Synthetic biphasic Calcium Phosphates (CaP) have been used extensively as bone substitutes in maxillofacial and dental applications as alternatives to autologous bone without irradiation. The aim of this rat study was to determine the influence on osseous repair of autologous cells grafts, bone marrow (BM) or mesenchymal stem cells (MSC), added to CaP ceramics, used as granules or injectable form, in previously irradiated bone. The development of an animal model of localized ORN has been previously developed. Ceramics were biotolerated, yet with low osteoconductive properties in irradiated bone. The BM grafts led to a significant increase in bone in growth in the irradiated areas. BM or adipose tissue derived MSC were not able to enhance bone ingrowth in irradiated osseous defects. These results could be explained by BM resources in cells and in growth factors indispensable for osseous repair. These results allow to highlight the interest of bone substitution by association of CaP ceramics and BM grafts in irradiated bone. Further studies will have to assess the role of grafted cells in osteogenesis and neoangiogenesis. This study allows also to foresee ORN treatment with tissue engineered materials

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Perez, Castiglioni Monica Patricia. "Le statut juridique des cellules souches : de la greffe d’organes à la thérapie cellulaire". Electronic Thesis or Diss., Paris 8, 2021. http://www.theses.fr/2021PA080048.

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Abstract (sommario):

Les cellules souches en tant que produits cellulaires à finalité thérapeutique (PCT) ou en tant que médicaments de thérapie innovante (MTI) dans le cadre de la médecine régénératrice ont révolutionné la médecine du XXIe siècle. Face aux découvertes récentes de nouvelles cellules souches créées par les chercheurs (parthénotes, cellules souches clonées, cellules iPS), d’autres possibilités de thérapie régénérative surgissent au fil du temps.Le droit, qui a toujours accompagné l’évolution scientifique et technique de la thérapie cellulaire depuis le XVIIe siècle, doit être plus que jamais présent pour protéger l’être humain qui se prête aux nouveaux traitements ou à l’expérimentation. L’évolution historique de cette révolution thérapeutique nous permet de montrer l’importance de la réflexion juridique et éthique pour le progrès scientifique. Des questionnements anciens, comme le statut de l’être prénatal et l’autorisation de cryopréservation des tissus ou des cellules autologues, ressurgissent face à la présence de cellules souches humaines embryonnaires surnuméraires et aux succès de la thérapie régénérative. Des traitements tératogènes et des épisodes de maltraitance des femmes en cours de grossesse ont détruit ou endommagé des milliers d’enfants à naître. Une reconnaissance de la vie prénatale est proposée dans certaines circonstances pour protéger l’embryon et le fœtus avant leur naissance
Stem cells as cellular products for therapeutic purposes (PCT) or as advanced therapy drugs (ITNs) within the framework of regenerative medicine have revolutionized the medicine of the 21st century. Faced with recent discoveries of new stem cells created by researchers (parthenotes, cloned stem cells, iPS cells), other possibilities for regenerative therapy are emerging over time.The law, which has always accompanied the scientific and technical development of cell therapy since the 17th century, must be more present than ever to protect human beings who lend themselves to new treatments or to experimentation. The historical development of this therapeutic revolution allows us to show the importance of legal and ethical reflection for scientific progress.Old questions, such as the status of the prenatal being and the authorization for cryopreservation of autologous tissues or cells, are re-emerging in the face of the presence of supernumerary human embryonic stem cells and the success of regenerative therapy. Teratogenic treatments and episodes of child abuse during pregnancy have destroyed or damaged thousands of unborn children. Recognition of prenatal life is offered in certain circumstances to protect the embryo and fetus before birth

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Sadelli, Kevin. "Potentiel thérapeutique des transplantations autologues et syngéniques de cellules souches olfactives ecto-mésenchymateuses (CSO-EMS) dans deux modèles d'atteintes du système nerveux central (SNC)". Thesis, Aix-Marseille, 2017. http://www.theses.fr/2017AIXM0669.

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Abstract (sommario):

L’objectif de mon travail de thèse était d’évaluer si des autogreffes de cellules souches olfactives ecto-mésenchymateuses (CSO-EMs) restauraient les capacités d’apprentissage et de mémorisation dans un modèle d’amnésie chez le rat, consécutive à une ischémie cérébrale globale (ICG). Cette dernière pouvant avoir lieu suite à un arrêt cardiaque (AC) et conduire à des conséquences neurologiques délétères telles que des atteintes cognitives et/ou sensorimotrices.C’est dans ce contexte scientifique que se sont inscrits mes travaux de recherche dont le premier objectif était de valider un modèle fiable et reproductible d’amnésie chez le rat. Nous avons sélectionné un modèle d’AC induisant une ICG caractérisé par des pertes neuronales ciblées au niveau de la zone CA1 des hippocampes dorsaux associées à des déficits d’apprentissage et de mémorisation.Enfin, la dernière étape de mon projet a consisté à évaluer l'effet des autogreffes de CSO-EMs sur la restauration des fonctions cognitives chez des rats ayant subi une ICG. Tout d’abord, j’ai dû élaborer un protocole permettant le suivi du devenir des CSO-EMs à la suite d’autogreffes, sans en altérer leurs propriétés endogènes. Puis j’ai démontré que ces autogreffes de CSO-EMs GFP+ : i) restauraient les capacités d’apprentissage et de mémorisation, ii) stimulaient la neurogénèse et iii) amélioraient la PLT chez des rats ayant subis une ICG.L’ensemble des données recueillies au cours de ma thèse accordent d’avantage de crédibilité à l’utilisation des CSO-EMs dans le cadre de thérapies menées contre les atteintes du SNC
The main goal of my thesis was to evaluate whether autografts of ecto-mesenchymal olfactory stem cell (EM-OSCs) restored learning and memory abilities in a rats model of amnesia following global cerebral ischemia (GCI). The latter can occur following cardiac arrest (CA) and lead to deleterious neurological consequences such as cognitive and / or sensorimotor injuries.Finally, the final step in my project was to evaluate the effect of EM-OSCs autografts on restoration of cognitive functions in ischemic rats. First of all, I had to develop a protocol to monitor the fate of EM-OSCs following autografts, without altering their endogenous properties. Then, I demonstrated that these GFP+ EM-OSCs autografts: i) restored learning and memory abilities, ii) stimulated neurogenesis, and iii) improved PLT in ischemic rats. All the data gathered during my thesis give credibility to the use of EM-OSCs in the framework of therapies against the CNS damages

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Rakic, Rodolphe. "Nouvelles stratégies thérapeutiques des affections articulaires du cheval : évaluation du potentiel thérapeutique des chondrocytes autologues et des cellules souches de cordon ombilical (sang et gelée de Wharton) : vers l'industrialisation de cellules médicaments". Thesis, Normandie, 2017. http://www.theses.fr/2017NORMC406/document.

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Abstract (sommario):

Les affections articulaires touchant le cartilage, telles que les lésions focales et l’arthrose, correspondent aux principales causes de baisse de performance et d’arrêt prématuré de la carrière sportive du cheval. Ainsi, le traitement des affections du cartilage représente un enjeu vétérinaire majeur dans le monde équin, du fait des importantes pertes financières qu’elles occasionnent à la filière. Les faibles capacités de réparation intrinsèque du cartilage, ainsi que l’absence de thérapie à long terme des dommages cartilagineux, nécessitent le recours à des thérapies de nouvelles générations telle que l’ingénierie tissulaire du cartilage. Dans ce cadre, notre étude s’est attachée à comparer différents types cellulaires pour la génération de cartilage in vitro, afin d’envisager une implantation pour traiter les atteintes cartilagineuses chez le cheval. Une technique initialement développée chez l’Homme, la transplantation de chondrocytes autologues, représente toujours un « gold standard » en ingénierie tissulaire du cartilage. Dans ce travail de thèse, après avoir développé une nouvelle génération de substitut cartilagineux de haute qualité biologique, à partir de chondrocytes articulaires équins, des limites techniques et biologiques inhérentes au type cellulaire persistent. Ainsi, nos travaux se sont tournés vers la recherche de types cellulaires alternatifs. Les cellules souches/stromales mésenchymateuses (CSM) néonatales issues de cordon ombilical telles que les CSM de sang placentaire (CSM-SPL) et les CSM de gelée de Wharton (CSM-GW) pourraient représenter un avantage thérapeutique du fait de leur isolement non-invasif, de leur forte prolifération cellulaire et de leur capacité de différenciation en chondrocyte. Il est néanmoins indispensable de définir le meilleur candidat thérapeutique, parmi ces deux sources cellulaires, pour l’obtention d’un substitut cartilagineux de qualité biologique optimale. Ces résultats de thèse ont montré d’importantes différences dans le processus de chondrogenèse de ces deux sources de CSM néonatales et plaident en faveur de l’utilisation des CSM-SPL dans le cadre d’une stratégie thérapeutique d’ingénierie tissulaire du cartilage équin. Ces travaux ont permis une meilleure compréhension de la biologie du chondrocyte et des CSM. De surcroît, ces travaux permettent d’envisager de futurs essais cliniques chez le cheval, afin de traiter les affections articulaires de ce modèle gros animal
Articular cartilage disorders, such as focal defects and osteoarthritis, are the main causes of decreased performance or early retirement of sport- and racehorses. Thus, cartilage disorders represent a major veterinary issue in the equine industry, due to significant financial losses. Poor intrinsic cartilage repair properties and the absence of long- term therapy for cartilage defects lead to the development and use of new generation therapies such as autologous chondrocytes implantation. In this context, our study aimed to compare different cell types for the in vitro cartilage generation, in order to implant the biological substitute to treat cartilage defects in the horse. A therapeutic strategy initially developed in human medicine, the autologous chondrocytes transplantation, always represents a "gold standard" in cartilage tissue engineering. In the present study, after developing a new generation of cartilaginous substitute of high biological quality, composed of equine articular chondrocytes, technical and biological limits inherent to the cell type persist. Thus, we have used alternative cell types such as neonatal mesenchymal stem/stromal cells (MSCs) from umbilical cord, such as umbilical cord blood MSC (UCB-MSCs) and umbilical cord matrix or Wharton jelly MSCs (UCM- MSCs). These MSCs sources could represent a therapeutic advantage due to their non-invasive isolation, their high cell proliferation and their ability to differentiate into chondrocytes. Nevertheless, it is essential to define the best therapeutic candidate between these two MSCs sources, to obtain an optimal quality for the neocartilaginous substitute. Our data highlighted important differences in the chondrogenesis process of these two neonatal MSCs sources, allowing us to consider UCB-MSCs as the best therapeutic candidate for equine cartilage tissue engineering. This work allows a better understanding of the chondrocyte and MSCs biology. Moreover, this work leads the way to setting-up future clinical trials in the horse, in order to treat articular defects of this large animal model

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Lorme, Bertrand de. "Etude de la qualité du greffon et de la récupération hématologique après chimio-intensification avec support de cellules souches périphériques autologues dans les tumeurs solides et les lymphopathies". Montpellier 1, 1998. http://www.theses.fr/1998MON11154.

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Marsol, Marie-Christine. "Traitement de la maladie de Kahler par autogreffe de cellules souches périphériques chez 14 patients". Bordeaux 2, 1990. http://www.theses.fr/1990BOR25082.

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Rice, Alison Mary. "Caractérisation fonctionnelle des cellules souches sanguines mobilisées par chimiothérapie". Bordeaux 2, 1993. http://www.theses.fr/1993BOR28240.

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GRAVIS, GWENAELLE. "Chimiotherapie a haute dose avec reinjection de cellules souches hematopoietiques dans les adenocarcinomes mammaires". Aix-Marseille 2, 1994. http://www.theses.fr/1994AIX20855.

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Maureira, Juan Pablo. "Traitement de l'infarctus du myocarde chronique : contribution des cellules souches mésenchymateuses de moelle osseuse autologue". Thesis, Université de Lorraine, 2012. http://www.theses.fr/2012LORR0411/document.

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Abstract (sommario):

La thérapie cellulaire et l'ingénierie tissulaire constituent de nouvelles stratégies à évaluer dans le traitement de la cardiopathie ischémique. Dans le cas particulier de l'infarctus chronique (IDMc), la possibilité de réhabiliter une zone cicatricielle à partir de cellules souches mésenchymateuses de moelle osseuse (CSMs), ainsi que la potentialité de remodeler l'architecture ventriculaire pariétale, sont particulièrement discutées. La première partie est un rappel des principaux concepts à l'origine des espoirs fondés sur ces nouvelles voies thérapeutiques. Dans la deuxième partie, nous présentons nos travaux concernant (1) l'injection cellulaire myocardique directe par voie épicardique chez le rat et chez l'homme souffrant d'IDMc et (2) l'application chirurgicale épicardique directe chez le rat IDMc, d'un patch tissulaire fabriqué à l'aide de CSMs incluses dans un réseau de collagène de type I. Les résultats montrent que l'injection cellulaire directe est responsable d'une réaction inflammatoire immédiate non spécifique. Néanmoins, ces travaux soutiennent aussi que (1) les CSMs stimulent l'angiogénèse locale en fonction de l'activité métabolique résiduelle et (2) le patch de CSMs favorise le remodelage ventriculaire inverse chez les rats infarcis. Dans la dernière partie, nous revenons, d'une manière plus générale, sur ces résultats qui restent encore trop limités pour espérer soigner une défaillance myocardique sévère. Néanmoins, bien que ces expériences ne confirment pas la potentialité cardiogénique des CSMs, elles suggèrent fortement la possibilité, par ces méthodologies, d'inverser le cours naturel de l'IDMc
Cellular therapy and tissue engineering are new strategies to be tested in the treatment of ischemic cardiopathy. In chronic infarction (MI) specifically, the possibility of rehabilitating a cicatricial zone using bone marrow mesenchymal stem cells (BMSC) as well as the feasibility of remodeling parietal ventricular architecture are especially discussed. The first part reviews the main concepts which have led to these new promising avenues of treatment. In the second part we present our work concerning (1) direct myocardial cellular injection via the epicardium in rats and in humans suffering from MI, and (2) direct epicardial surgical application of a tissular patch consisting of BMSC in a type I collagen network. The results show that direct cellular injection is responsible for an immediate non-specific inflammatory reaction. Nevertheless, the work also supports the notions that (1) BMSCs stimulate local angiogenesis on the basis of residual metabolic activity, and (2) the BMSC patch stimulates inverse ventricular remodeling in infarcted rats. The final part is devoted to a wider discussion of these results which are as yet too limited to hope to heal severe myocardial failure. However, despite the fact that these experiments do not confirm the cardiogenic potential of BMSCs, they do strongly hint at the possibility of using this methodology to invert the natural course of MI

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Cartron, Guillaume. "Etude quantitative et fonctionnelle du compartiment des progéniteurs primitifs après autogreffe de cellules souches hématopoïétiques chez l'homme". Tours, 2003. http://www.theses.fr/2003TOUR3311.

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Abstract (sommario):

L'intensification thérapeutique avec support de cellules souches hématopoïétiques (AGCS) constitue une thérapeutique de choix en hématologie. Nous avons explorer le compartiment des progéniteurs primitifs (PP) après AGCS sanguine et montré qu'il existait comme après AGCS médullaires, une altération profonde et durable de la reconstitution à long terme in vivo. In vitro, il existait une réduction constante et durable de la fréquence des LTC-IC et de la population CD34+/CD38_ associée à des anomalies fonctionnelles (réduction des potentiels prolifératifs et de différentiation érythroïde des LTC-IC). De même, il existait un déficit prolifératif des cellules CD34+ en réponse à une association de cytokines d'action précoce et une réduction du niveau d'expression de CD34 et de la capacité de c-Kit à fixer le SCF dans la population CD34+. Après AGCS il existe une altération profonde, constante et durable du compartiment des PP. Il s'agit d'anomalies quantitatives et qualitatives qui pourraient rendre compte d'une altération de la capacité d'auto-renouvellement du compartiment des PP après AGCS et compromettre la reconstitution médullaire à long terme
Intensive therapy with autologous stem cells transplantation (ASCT) is now widely used in hematology. We have assessed primitive progenitor cell compartment after ASCT using peripheral stem cells and shown a deep and durable decrease of clonogenic progenitor counts in vivo. In vitro studies have demonstrated a constant decrease of LTC-IC frequencies and CD34+/CD38_ counts associated with functional abnormalities (defect in proliferative and érythroïd differentiation of LTC-IC). We have shown also a proliferative defect of CD34+ cells in response to early-acting cytokines and a decrease of both CD34 antigen expression and ability of c-Kit to bind to SCF into CD34+ cell population. After ASCT, there are both quantitative and qualtitative defects of primitive progenitor cell compartment which could led to a impaired self-renewal of this compartment and jeopardize long-lasting marrow reconstitution

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Thepenier, Cédric. "Optimisation d'un procédé de culture d'épiderme autologue : influence d'un feeder humanisé et d'une faible tension d'oxygène". Paris 7, 2014. http://www.theses.fr/2014PA077083.

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Abstract (sommario):

Notre objectif général est l'amélioration de la technique de culture d'épiderme autologue pour le traitement des grands brûlés. Pour cela nous avons rapproché de la physiologie cutanée les conditions de culture de kératinocytes primaires humains en prenant en compte le taux d'oxygène. D'autre part nous testé l'effet que ce paramètre produisait sur la croissance des kératinocytes cultivés sur cellules nouricières murines (méthode de Green) et sur leur remplacement par des cellules nourricières humaines dans l'éventualité d'une interdiction des produits xénogéniques au sein des greffons. Nous avons pu montrer tout d'abord que la densité optimale de cellules nourricières murines dépendait de la P02, et qu'une densité optimale pour une P02 de 20% pouvait s'avérer inhibitrice à 3%. A leurs densités de feeder optimales, les cultures à basse concentration d'02 (3%) ont montré un rendement 4,2 fois supérieur à ce qu'il est à 20% pour un même jour d'arrêt de culture. Cette augmentation de prolifération est un effet stable sur plusieurs passages, et s'accompagne d'une augmentation de la clonogénicité sur les passages tardifs. Pour les cultures issues de certains donneurs, abortives dans les conditions usuelles de culture (20% de p02), une basse concentration d'02 a par ailleurs rendu la culture possible sur un plus grand nombre de passage, montrant que cet effet ne se produit pas au détriment de la capacité d'autorenouvellement de la population. Enfin, les kératinocytes issus de cette modification de la méthode classique de culture conservent leur potentiel à engendrer un épiderme in vivo sur souris NOD/SCID. Par ailleurs, l'augmentation de prolifération a également pu être observée sur deux sources de cellules nourricières humaines, des cellules stromales mésenchymateuses de moelle et des fibroblastes dermiques. La capacité à engendrer un épiderme différencié in vivo après culture sur cellules humaines en hypoxie est là aussi maintenue. Enfin, il semble que cet effet d'une basse concentration d'oxygène passe par plusieurs mécanismes : directs, la prolifération de kératinocytes de lignées HaCat sans cellules nourricières étant augmentée pour une P02 à 3%; et indirects, le milieu conditionné par des cellules nourricières murines à 3% de p02 ayant plus d'effet sur la prolifération que celui issu de 20%. Ces résultats préliminaires sont en faveur d'une modification du protocole de culture d'épiderme utilisé en clinique depuis 1981 par la culture à basse concentration d'oxygène. Les bénéfices attendus pour le patient, outre la réduction du délai de culture, portent sur le sauvetage de cultures abortives et sur l'apport de kératinocytes moins différenciés, paramètre associé à une réduction de l'évolution vers la fibrose cutanée sur des modèles murins
To enhance the production conditions for cultured epidermal autografts (CEA) for large burns, we sought to study the in vitro effect of a low oxygen level on epidermal growth. We tested this parameter on CEA grown on murin feeder cells (Green's method) as well as human feeder cells. We first could evidence that the optimal feeder density depended on the oxygen level. A feeder density made optimal at 20% 02 could prove inhibitory on keratinocyte growth at 3% 02. At their respective best feeder densities, low oxygen level (3%) led to an average 4,2 fold increase in keratinocyte yield for a same arrest day as compared with 20% culture. This effect proved to be stable on several successive passagings, showing the increase in proliferation did not take place at the expense of tell self renewal. Keratinocytes grown at a low oxygen level kept their ability to form a stratifying epidermis on an in vivo NOD/SCID mouse excisional model. In parallel, the increase in proliferation was also observed when keratinocytes were cultured on human feeder cells, bone marrow mesenchymal stroma' cells and dermal fibroblasts. This effect of a low oxygen tension on keratinocytes appears to be partly direct, as the growth rate of HaCat feederless keratinocytes was enhanced at 3% vs 20% 02. It is also partly an indirect effect, as conditioned medium from murin feeder cells cultured in hypoxia has a more pronounced positive effect on keratinocyte growth than its normoxic counterpart. These preliminary resuits could lead to the modification on the culture protocol currently in use for the majority of CEA grafts for large burns. The expected benefits for the patients, beyond slightly shortening culture time, would include salvaging abortive cultures and bringing less differentiated keratinocytes, a parameter linked with a decrease in fibrotic evolution on murin models

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Steichen, Clara. "Eléments d'évaluation pour l'utilisation d'hépatocytes dérivés de cellules souches pluripotentes induites (iPSC) en thérapie cellulaire". Paris 7, 2014. http://www.theses.fr/2014PA077045.

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Abstract (sommario):

Parmi les nombreuses applications potentielles des cellules souches pluripotentes induites (iPSC), ce travail de thèse s'est intéressé à l'utilisation d'hépatocytes dérivés d'iPSC en thérapie cellulaire. Des hiPSC ont d'abord été générées par transfection itérative d'ARN messagers. L'intégrité génomique de ces cellules a été analysée, en comparaison avec des iPSC générées en parallèle par une méthode virale. Le profil SNP des iPSC-ARN ne diffère pas de celui des fibroblastes de départ, contrairement à celui des iPSC virales, mais le nombre de délétions ou duplications (CNV) ne dépend pas de la méthode de reprogrammation. Cette analyse génomique a également permis de mettre en évidence une lignée iPSC-ARN atypique présentant un remaniement caryotypique complexe, équilibré et stable qui comprend une importante disomie monoparentale, ainsi qu'un défaut dans la capacité de formation de tératomes. La seconde partie de ce travail rapporte la génération d'hiPSC à partir de fibroblastes de patients hémophiles B. Pour corriger le déficit génétique, nous avons utilisé, dans ces iPSC, des nucléases artificielles pour insérer une cassette thérapeutique codant le FIX. La différenciation en hépatocytes de ces iPSC modifiées nous permettra de valider la correction in vitro, et in vivo dans un modèle de souris hémophiles B. Le dernier volet de ce travail consiste à différencier des iPSC simiennes en hépatocytes pour une transplantation autologue dans le foie du singe donneur, après embolisation portale partielle. Nous souhaitons ainsi établir la preuve de principe d'une thérapie cellulaire autologue dans un modèle préclinique de primate non humain
Among the various potential applications of induced pluripotent stem cells (iPSCs), this Ph. D project focused on the use of iPSC-derived hepatocytes in cell therapy. Human iPSCs have been generated by repeated transfections of messenger RNAs. The genomic integrity of these cells was analyzed, in comparison with iPSCs generated in parallel by a viral method. The SNP profile of mRNA-iPSC is not significantly different from the parental fibroblasts one, in contrary to what we observed with viral-iPSCs. The number of deletions or duplications (CNVs) is not dependent on the reprogramming method. This genomic analysis also highlighted an atypical mRNA-iPSC line displaying a complex, stable and balanced genomic rearrangement including a large region of de novo uniparental disomy, and a defect in teratoma formation capacity. The second part of this work describes the generation of hiPSCs from hemophilia B patients biopsy. To correct the genetic defect, we used artificial nucleases to drive the insertion of a therapeutic cassette coding the FIX gene. The differentiation of these corrected iPSCs into hepatocytes will allow us to validate this correction approach in vitro first and in vivo in a hemophilia B mouse model. The last part of this PHD work focused on differentiating simian iPSCs into hepatocytes to perform an autologous transplantation into the liver of the donor monkey, alter a portal vein embolization. We would like to establish the proof of principle of an autologous iPSC-based therapy in a non-human primate preclinical model

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Abed, Soumeya. "Développement et évaluation du potentiel hématopoïétique de cellules souches induites à la pluripotence chez le primate humain et non humain". Paris 7, 2014. http://www.theses.fr/2014PA077112.

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Abstract (sommario):

Les cellules souches induites à la pluripotence (iPSC) sont un modèle cellulaire prometteur pour la recherche fondamentale et appliquée. Cependant, avant d'envisager des applications cliniques, le potentiel et l'innocuité des cellules hématopoïétiques dérivées d'iPSC doivent être testés dans un modèle animal proche de l'Homme. Nous avons généré des iPSC de macaques cynomolgus (Cy-iPSC) et optimisé leur différenciation hématopoïétique, par formation d'EB et co-culture sur des cellules stromales, dans le but d'avaluer leur potentiel après transplantation autologue. Nous avons démontré l'emergence de progeniteurs hématopoïétiques CD34+/CD45+ in vitro ainsi qu'un potentiel clonogénique. Cependant, la reconstitution des compartiments hématopoïétiques à partir de cellules dérivées des Cy-iPSC dans des souris immunodéficientes reste un challenge. Dans la 2ème étude, nous avons utilisé les iPSC comme modèle d'étude de la thérapie génique de la beta-thalassémie. Nous avons généré des iPSC à partir des cellules somatiques d'un patient beta thalassémique (thal-iPSC) et les avons transduites avec un vecteur lentiviral portant le gène de globine thérapeutique. Nous avons démontré la capacité des thal-iPSC à se différencier en cellules hématopoïétiques in vitro et in vivo après transplantation dans des souris immunodéficentes ainsi qu'un switch des globines endogènes. L'intégration du vecteur lentiviral a été retrouvée dans des régions à faible et forte génotoxicité et des sites d'intégration communs entre les thal-iPSC et les cellules isogéniques et non isogéniques de patients traités par thérapie génique ont été identifiés ; suggérant une intégration non stochastique du vecteur
Induced pluripotent stem cells (iPSC) technology is a cellular model full of challenge for fundamental research and important for cellular and gene therapy applications. Before clinical application, capacity and safety of iPSC-hematopoietic derivates must be scrupulously tested in animal model close enough to humans. VVe generated Cynomolgus iPSC and carried out a kinetic analysis of hematopoietic ceil development during EB and co-culture differentiation in order to explore their capacity to engraft efficientely after autologus transplantation. We demonstrated improved hematopoietic differentiation, as evidenced by significant levels of CD34+CD45+ progenitors and CFU activity. However, achieving hematopoietic engraftment in immunodeficient mice using Cy-iPS-derived hematopoietic cells remain challenging. In the second study, we combined the iPS cells properties and the therapeutic potency of gene transfert for beta-thalassemia/HBE treatment. We have generated iPSC from the beta thalassemia/HBE patient's somatic cells and corrected them with a lentiviral vector (LV) carrying beta-globin therapeutic gene. We demonstrate their production of hematopoietic cells, in vitro, showing high expression of the transferred globin gene, differentiation into multiple blood cell types in immunocompromises mice, and endogenous globin switching in vivo. LV integration occured in regions of low and high genotoxicity and common integration sites (CIS) were identified across thal-iPSC and cells retrieved from isogenic and non isogenic gene therapy patients; suggesting that CIS observed in absence of tumorigenesis result from nonrandom LV integration rather than oncogenic in vivo selection

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Benboubker, Lotfi. "Cellules souches hématopoi͏̈étiques du sang périphérique : caractérisation fonctionnelle et facteurs intervenant dans la capacité de mobilisation". Tours, 2002. http://www.theses.fr/2002TOUR3308.

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Abstract (sommario):

Le but de notre travail a été d'évaluer in vitro puis in vivo la qualité fonctionnelle des cellules souches hématopoi͏̈étiques primitives mobilisées par le G-CSF ou le GM-CSF et de rechercher parmi les facteurs pouvant intervenir dans la capacité de mobilisation des cellules souches sanguines (CSS), l'existence d'un éventuel facteur génétique. In vitro, nous avons montré que la proportion des cellules primitives circulantes après mobilisation par chimiothérapie et G-CSF ou GM-CFS sont comparables, atteignant les valeurs de la moelle osseuse. Cependant le G-CFS mobilise des LTC-IC ayant des capacités de prolifération augmentées par rapport au GM-CSF. Les greffons de CSS, pourtant qualitativement différentes in vitro, ne semblent pas posséder in vivo une capacité de reconstitution hématopoi͏̈étique à long terme modifié. Cette reconstitution est néanmoins caractérisée par des altérations profondes et durables de l'hématopoi͏̈èse, tout comme après autogreffe de moelle osseuse. Parmi les facteurs pouvant intervenir dans la capacité de mobilisation des CSH nous avons identifié pour la première fois chez l'homme, l'existence d'un facteur génétique, représenté par le polymorphisme du gène SDF1

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Vinsonneau, Ulric. "Traitement du myélome par double intensification avec autogreffe de cellules souches périphériques CD34+ : à propos de 19 cas, étude non randomisée". Bordeaux 2, 1999. http://www.theses.fr/1999BOR2M040.

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Moby-Stutzmann, Vanessa Menu Patrick. "Multicouche de polyélectrolytes et CSM deux acteurs complémentaires nécessaires à l'endothélialisation autologue de prothèses vasculaires synthétiques en PTFEe /". S. l. : Nancy 1, 2008. http://www.scd.uhp-nancy.fr/docnum/SCD_T_2008_0121_MOBY-STUTZMANN.pdf.

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Aligier, Nathalie. "Chimiothérapie intensive avec greffe de cellules souches hématopoi͏̈etiques dans les tumeurs épithéliales malignes de l'ovaire : à propos de 11 cas". Montpellier 1, 1997. http://www.theses.fr/1997MON11102.

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Siegenthaler, Michèle. "Chimiothérapie supra-intensive et transplantation autologue de cellules souches hématopoïétiques dans les cancers du sein de mauvais pronostic : l'expérience genevoise /". Genève : [s.n.], 2004. http://www.unige.ch/cyberdocuments/theses2004/SiegenthalerMA/these.pdf.

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Delagrèverie, Héloïse. "Impact de stratégies thérapeutiques sur le réservoir viral cellulaire dans l'infection par le VIH-1". Thesis, Sorbonne Paris Cité, 2018. http://www.theses.fr/2018USPCC312.

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Abstract (sommario):

Dans l’infection par le VIH-1, la persistance de formes virales latentes insensibles aux antirétroviraux dans les cellules infectées s’oppose à l’élimination du virus. Le développement de nouvelles stratégies thérapeutiques a pour objectif de réduire ou d’inactiver ce réservoir viral.Dans ce contexte, l’impact de la chimiothérapie intensive et de l’autogreffe de cellules souches hématopoïétiques sur le réservoir viral a été étudié rétrospectivement chez 13 patients. L’ADN viral était quantifié longitudinalement dans le sang par PCR en temps réel et la diversité virale était étudiée par séquençage profond de la région C2V3 de l’enveloppe. Malgré la chimiothérapie intensive, le réservoir viral était reconstitué en quelques semaines après greffe et sa composition n’était pas modifiée. Cette reconstitution était portée par la prolifération homéostatique précoce de lymphocytes T mémoires infectés. Dans les essais de thérapie génique du VIH, l’administration de lymphocytes T modifiés en sus des cellules souches pourrait permettre d’obtenir une meilleure reconstitution en cellules résistantes au virus.Dans l’essai thérapeutique ANRS REFLATE-TB, nous avons comparé rétrospectivement l’effet de deux trithérapies à base de raltegravir (2 dosages) ou d’efavirenz sur la réduction de l’inflammation et du réservoir viral chez 153 patients co-infectés par la tuberculose initiant un traitement antirétroviral. Les niveaux d’ADN viral dans les lymphocytes T CD4+ diminuaient sous traitement de -0,9log10 copies/106 LTCD4+ en 48 semaines. Les marqueurs d’inflammation CRP, D-Dimères, IL-6 et sCD14 plasmatiques étaient très élevés initialement. Les taux diminuaient au cours du suivi mais n’étaient pas normalisés. Il n’y avait pas de différences selon le traitement sur cette période de 48 semaines.Enfin, l’analyse rétrospective de la réponse humorale anti-gp41 du VIH-1 chez 683 patients ayant une réplication virale supprimée sous traitement antirétroviral à très long terme démontrait une corrélation des taux d’anticorps avec la durée de suppression virale et la taille du réservoir d’ADN viral Les taux d’anticorps étaient plus élevés chez les participants avec une réplication résiduelle détectable. Le dosage des anti-gp41 pourrait être un nouveau marqueur du réservoir viral et de la persistance de réplication sous traitement
In HIV-1 infection, the persistence of latent viral forms in infected cells precludes the cure. New cure strategies aim at reducing or inactivating this viral reservoir. We studied the impact of intensive chemotherapy and hematopoietic stem cell transplantation on the viral reservoir in 13 retrospective patients. Blood cell-associated viral DNA (CA-DNA) was quantified longitudinally by real-time PCR. Viral diversity and phylogeny were studied by deep sequencing the viral C2V3 region. Despite intensive chemotherapy, the viral reservoir was reconstituted within a few weeks following transplantation and its diversity was unaltered. The reconstitution was driven by the early homeostatic proliferation of infected memory T cells. In HIV gene therapy trials, it may therefore be relevant to administer modified T cells in addition to stem cells to achieve a better engraftment of resistant cells. We also studied the effect of antiretroviral initiation with either raltegravir (2 doses) or efavirenz on the reduction in CA-DNA and inflammation markers in 153 patients co-infected with tuberculosis, from the ANRS REFLATE-TB trial. CA-DNA decreased on treatment by -0.9 log10 copies/106CD4+ over 48 weeks. Plasma CRP, D-dimer, IL-6 and sCD14 levels were initially high. All decreased but had not reached normal values by 48 weeks. There were no differences according to treatment; raltegravir and efavirenz were equally effective. Finally, we studied anti-HIV-1-gp41 humoral responses in 683 patients with long-term suppressed viral replication. Persistent antibody levels correlated with both the duration of viral suppression and the size of the CA-DNA reservoir. Antibody levels were higher in participants with residual replication. Measuring anti-gp41 responses may be useful as a surrogate marker of the viral reservoir and of effective viral suppression

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Lobry, Tatiana. "Cystinosis : new findings involving inflammation in the kidney pathogenesis and preclinical studies for autologous hematopoietic stem cell gene therapy". Thesis, Brest, 2019. http://www.theses.fr/2019BRES0011.

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Abstract (sommario):

La cystinose est une maladie lysosomale héréditaire due à une mutation du gène CTNS codant pour un transporteur de cystine, cystinosin, et est caractérisée par l’accumulation de cystine dans les organes causant leur dégénération.Si le rein est le premier organe affecté par la maladie, sa pathogénèse n’est pas encore totalement comprise. La recherche de nouveaux partenaires de la cystinosine a révélé une interaction avec un membre de la famille des galactines, galectine-3 (Gal3). L’étude de cette interaction a mis en évidence un nouveau rôle de la cystinosine dans l’inflammation chronique impliquée dans la pathogénèse rénale de la cystinose. Dans les reins du modèle murin de la cystinose (Ctns-/-), l’expression de Gal3 est augmentée et de nombreux infiltrats de cellules inflammatoires sont observés. De plus, l’expression de la cytokine pro-inflammatoire Monocyte Chemoattractant Protein-1 (MCP1) est augmentée dans le sérum des souris Ctns-/-.Au contraire, peu d’infiltrat et un taux normal de MCP1 sont observés dans les souris Ctns-/-Gal3-/-, ainsi qu’une meilleure structure et fonction rénale.Ce travail pourrait permettre la découverte de nouvelles cibles thérapeutiques pour la cystinose.Des études antérieures ont montré que la transplantation de Cellules Souches Hématopoïétiques (CSH) saines peut efficacement traiter la cystinose dans les souris Ctns-/-. Toutefois, dû aux risques liés à une transplantation allogénique, une transplantation autologue de CSH génétiquement modifiées ex vivo pour exprimer une copie fonctionnelle du gène CTNS a été développée.Nous résumons ici les études pharmacologiques et toxicologiques ainsi que le développement du protocole de transduction des cellules humaines qui seront inclus dans une application intitulée« Investigational New Drug » qui sera soumise à la FDA afin de débuter un essai clinique de phase I/II
Cystinosis is an inherited lysosomal storage disorder caused by mutations in the gene CTNS encoding the cystine transporter cystinosin, and is characterized by accumulation of cystine in the tissues leading to multiorgan degeneration.The kidney is the first organ impacted by cystinosis but the pathogenesis is still not fully understood. The study of new partners of cystinosin revealed an interaction with galectin-3, a member of the galectin’s family. The investigation of this interaction unraveled a new role for cystinosin in chronic inflammation associated with kidney pathology in cystinosis. Indeed, the cystinosis mouse model, Ctns-/ mice, had increased expression of Gal3 and abundant pro-inflammatory infiltrates in their kidney, as well as increased expression of Monocyte Chemoattractant Protein-1 (MCP1), a proinflammatory cytokine, in their serum.In contrast, few infiltrates and normal MCP1 levels were observed in the Ctns-/- Gal3-/- mice, which also demonstrated better kidney structure and function.This study may lead to the discovery of new drug targets for cystinosis treatment.Previous studies showed that wild-type Hematopoietic Stem Cells (HSCs) transplantation had the potential to rescue cystinosis in Ctns-/- mice.However, due to the risks associated with allogeneic transplant, an autologous transplantation of HSCs genetically modified ex vivo to express a functional CTNS gene has been developed in the laboratory. In this work, we summarized the pharmacology and toxicology studies and manufacturing development that will be included in an Investigational New Drug application to be submitted to the FDA to start a phase I/II clinical trial for cystinosis

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Magalon, Jérémy. "Développement d'un médicament de thérapie innovante utilisant la fraction vasculaire stromale du tissu adipeux autologue dans la sclérodermie systémique : de la caractérisation biologique à l'identification de biomarqueurs potentiels d'efficacité". Thesis, Aix-Marseille, 2018. http://www.theses.fr/2018AIXM0048.

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Abstract (sommario):

L’objectif de ce travail est de caractériser les effets antifibrotiques et angiogéniques de la FVS et d’évaluer l’impact du contexte sclérodermique sur ces propriétés angiogéniques. D’autre part, d’identifier une stratégie de monitoring biologique de cette thérapie applicable au contexte sclérodermique.Le premier volet a été de déterminer si la FVS injectée localement peut limiter les processus de fibrose in vivo. L’injection de FVS réalisée précocement ou tardivement s'accompagne d'une réduction significative de la surface de fibrose au profit des surfaces musculaires dans un modèle porcin d’incontinence urinaire. Le deuxième volet a été de rechercher si le contexte autologue de la sclérodermie systémique affecte les propriétés angiogéniques de la FVS. Cette étude a montré une légère altération de la capacité angiogénique sur des tests de Matrigel Plug in vivo associé à une signature transcriptomique de la FVS de patients sclérodermiques. Le troisième volet a été d’identifier une stratégie de monitoring biologique utile pour évaluer objectivement l’impact de nouvelles thérapies sur la vasculopathie associée à la sclérodermie systémique. L’élévation des PECs et de la Fractalkine prédisent de manière indépendante le score de sévérité de la maladie et la gravité de la fibrose pulmonaire. Ce travail a ainsi permis de progresser dans le développement d’une thérapie cellulaire innovante pour limiter la vasculopathie ischemique et la fibrose à l’origine du handicap des mains chez les patients sclérodermique et de monitorer son efficacité dans le futur
The aim of this work is to characterize the antifibrotic and angiogenic effects of FVS and to evaluate the impact of the scleroderma context on these angiogenic properties. On the other hand, to identify a strategy of biological monitoring of this therapy applicable to the sclerodermic context.The first step was to determine whether locally injected FVS can limit fibrosis in vivo. The injection of SVF performed early or late is accompanied by a significant reduction in the area of fibrosis in favor of muscle surfaces in a porcine model of urinary incontinence. The second component was to investigate whether the autologous context of systemic scleroderma affects the angiogenic properties of SVF. This study showed a slight alteration of angiogenic capacity on in vivo Matrigel Plug assays associated with a transcriptomic signature of SVF of scleroderma patients. The third component was to identify a biological monitoring strategy that could be used to objectively evaluate the impact of new therapies on vasculopathy associated with systemic sclerosis. The elevation of EPCs and Fractalkine independently predict the severity score of the disease and the severity of pulmonary fibrosis.This work has made it possible to progress in the development of an innovative cell therapy to limit the ischemic vasculopathy and the fibrosis causing hand handicap in scleroderma patients and to monitor its effectiveness in the future

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Luce, Eléanor. "Hépatocytes différenciés à partir de cellules souches pluripotentes induites : modèle pour la thérapie cellulaire et génique autologue de l'hémophilie B et modèle préclinique chez le primate". Thesis, Université Paris-Saclay (ComUE), 2017. http://www.theses.fr/2017SACLS520/document.

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Abstract (sommario):

Ce projet de thèse vise à modéliser puis à apporter la preuve de concept d’une thérapie cellulaire et génique autologue de maladies héréditaires du foie par la transplantation d’hépatocytes différenciés à partir des cellules souches pluripotentes induites (iPSC) spécifiques du patient, une fois celles-ci corrigées du défaut génétique. L’hémophilie B (HB) est une maladie héréditaire causée par une mutation du gène F9, codant le facteur IX (FIX) de la coagulation synthétisé dans le foie par les hépatocytes. Des fibroblastes d’un patient porteur de la « mutation royale » ont été reprogrammés en iPSC puis différenciés en hépatocytes. L’étude de l’ARNm du F9 par séquençage haut débit a confirmé la présence d’un site d’épissage anormal codant une protéine tronquée. D’autres iPSC ont été obtenues à partir des cellules d’un second patient HB exprimant un FIX inactif. Après insertion ciblée d’une cassette thérapeutique codant le FIX dans un site génomique sûr à l’aide d’endonucléases artificielles (CRISPR/Cas9), nous avons différencié les iPSC corrigées et non corrigées en hépatocytes (respectivement corr-HB-Heps et HB-Heps) et confirmé une expression plus importante de l’ARNm du F9 et de la protéine FIX dans les corr-HB-Heps. En revanche, nous n’avons pas détecté d’activité du FIX transgénique sans doute à cause d’une différenciation incomplète des hépatocytes. Nous avons alors développé un protocole de différenciation en sphéroïdes permettant une différenciation plus efficace confirmée aux niveaux ARN et protéine FIX. L’analyse de l’activité du FIX produit nous permettra de valider la correction in vitro avant de la valider in vivo en transplantant les corr-HB-Heps dans un modèle de souris F9KO. Finalement, la dernière partie de ce travail a consisté à développer un protocole de différenciation d’iPSC de singe en hépatocytes en vue d’une transplantation autologue dans le foie de l’animal donneur pour valider la faisabilité et la sécurité de cette approche chez le gros animal
This PhD project aims to model and to bring a proof of concept for autologous cell/gene therapy of inherited liver diseases by transplanting hepatocytes differentiated from patient-specific induced pluripotent stem cells (iPSCs), after correction of the genetic defect. Hemophilia B (HB) is an inherited disease caused by a mutation in the F9 gene encoding clotting factor IX (FIX), synthesized in the liver by hepatocytes. Fibroblasts of a patient with the "royal mutation" were reprogrammed in iPSCs then differentiated into hepatocytes. The study of the F9 mRNA by high-throughput sequencing confirmed the presence of an abnormal splice site leading to a truncated protein explaining hemophilia. Other iPSCs were obtained and characterized from the cells of a second HB patient expressing an inactive FIX. By targeting in these iPSCs the insertion of a therapeutic cassette encoding FIX into a safe harbor site using artificial endonucleases (CRISPR/Cas9), we differentiated the corrected and non-corrected iPSC into hepatocytes. Quantitative analyzes confirmed a higher expression of F9 mRNA and FIX protein in the corrected clones. In contrast, we did not detect transgenic FIX activity due to a lack of post-translational modifications necessary for FIX activity. We then developed a protocol of differentiation in spheroids quantitatively more efficient to produce FIX. Detection of FIX activity will validate our in vitro approach before validation in vivo by transplanting the corrected hepatocytes in a F9KO mouse model. Finally, the last part of this work consisted in the development of a differentiation protocol of nonhuman primate iPSCs into hepatocytes for autologous transplantation into the liver of the donor animal in order to validate the feasibility and the safety of such an approach in the large animal

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Weber, Leslie. "New therapeutic strategies for the treatment of β-hemoglobinopathies". Thesis, Sorbonne Paris Cité, 2018. http://www.theses.fr/2018USPCC272.

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Abstract (sommario):

Le développement de stratégies thérapeutiques curatives pour les patients affectés de β-hémoglobinopathies, c’est à dire drépanocytose et β-thalassémies, fait face à une grande demande. En effet, un accès restreint à des donneurs compatibles limite l’unique thérapie définitive autorisée, la transplantation allogénique de cellules souches hématopoïétiques (CSH). Au cours de la première partie de cette thèse,nous avons optimisé une alternative thérapeutique,la transplantation autoloque de CSH corrigées par le biais de lentivirus (LV). Le développement de lentivirus exprimant la β-globine et l’amélioration des conditions de transduction des CSH a débouché sur de probants bénéfices cliniques pour les patients drépanocytaires et thalassémiques traités par cette approche dans le cadre d’essais cliniques récents. Malgré ces progrès majeurs,cette thérapie pourrait bénéficier d’améliorations. En effet,la correction de thalassémies majeures, dépendantes de transfusion, ainsi que de la drépanocytose requiert de forts niveaux d’expression du transgène. Le but de ce projet est de choisir un LV à titre élevé, capable de transduire une large portion de CSH et d’entraîner une forte expression du transgène dans des globules rouges (GR) dérivés de CSH. A cet effet, nous avons comparé différentes combinaisons d’éléments régulateurs afin de définir la cassette régulatrice minimale nécessaire pour l’obtention de forts niveaux d’expression de la β-globine. Nous avons construit 2 mini-LCRs contenant soit HS2 et HS3 (taille totale 2.6 kb) ou HS2, HS3 et HS4 (taille totale 3.7 kb) provenant du Locus Control Region (LCR). Ces cassettes ont été insérées dans les LV β-AS3 et β-AS3 HS4, respectivement, qui contrôlent l’expression d’une globine anti-falciformante, βAS3-globine.Premièrement, nous avons comparativement évalué l’efficacité de transduction des vecteurs β-AS3 et β-AS3 HS4 dans des cellules souches progéniteurs hématopoïétiques (CSPH) drépanocytaires et dans des CSH drépanocytaires. Le deuxième volet de cette étude a permis de déterminer l’expression de la βAS3-globine issue de ces deux constructions dans des GR dérivés de CSPH drépanocytaires, et d’évaluer l’efficacité du LV le plus efficace pour secourir le phénotype drépanocytaire.La seconde partie de cette thèse vise à développer une nouvelle stratégie thérapeutique par édition du génome pour réactiver l’hémoglobine fœtale (HbF). Cette approche s’appuie sur l’observation d’une meilleure évolution clinique des β-thalassémies et de la drépanocytose en présence de niveaux élevés d’HbF.Par l’utilisation de la technologie CRISPR/Cas9, nous avons invalidé les sites de liaisons de répresseurs transcriptionnels au niveau des promoteurs de la γ-globine pour réactiver l’expression de l’HbF dans des GR dérivés de CSPH drépanocytaires. La réactivation des gènes de γ-globine fœtale dans leur locus génomique endogène permet de s’affranchir des difficultés liées à l’expression relativement faible de transgène par copie de LV, principalement lié à la faible capacité des LV qui ne permet d’insérer que de courts fragments d’ADN du LCR, arrangés de manière non-physiologique. De plus,cette stratégie offre une approche potentiellement plus sûre comparée à une stratégie addition de gène basée sur l’usage de LV. Dans la drépanocytose, cette approche thérapeutique favorise l’expression de la γ-globine anti-falciformante aux dépens de la globine βS-globine mutée. Dans le cadre d’une approche comparative,nous avons évalué des cibles thérapeutiques connues et nouvelles au niveau des promoteurs de la γ-globine. A cet effet, plusieurs ARN guides (ARNg) ont été designés pour cibler 3 régions des promoteurs de la γ-globine, où des variants associés à des niveaux élevés d’HbF et/ou à des sites de liaison de répresseurs de l’HbF ont été décrits
Highly efficient curative therapeutic strategies are in great demand for patients affected by β-hemoglobinopathies, namely sickle cell disease (SCD) and β-thalassemia. Indeed, the poor access to compatible donors restrains the application of the only approved definitive therapy, the allogeneic hematopoietic stem cell (HSC) transplantation. In the first part of this thesis, we aimed at optimizing an established therapeutic alternative consisting in the autologous transplantation of lentivirus (LV)-corrected hematopoietic HSCs. The development of β-globin expressing LVs and the improvement of HSC transduction conditions have led to a clear clinical benefit for SCD and β-thalassemia patients treated with this approach in the frame of recent clinical trials. Despite these significant progresses, there is room for further improvement. Indeed, the correction of severe transfusion-dependent B-thalassemia and SCD patients requires high levels of transgene expression. The goal of this project was to select a high-titer LV able to transduce efficiently HSCs and to drive high levels of transgene expression in HSC-derived RBCs. To this purpose, we compared different combinations of regulatory elements, in order to define the minimal regulatory cassette needed for achieving high levels of globin expression in the frame of LVs. We constructed 2 mini-LCRs containing either HS2 and HS3 (total size 2.6 kb) or HS2, HS3 and HS4 (total size 3.7 kb) derived from the 16-kb Locus Control Region. These cassettes were inserted in the β-AS3 and β-AS3 HS4 LVs, respectively, driving the expression of an anti-sickling βAS3-globin transgene. First, we aimed at comparatively evaluate the transduction efficiency of β-AS3 and β-AS3 HS4 in SCD hematopoietic stem progenitor cells (HSPCs) and long term-repopulating HSCs. The second aim of the study was to assess β-AS3 and β-AS3 HS4 derived transgene expression in RBCs produced from SCD HSPCs, and to evaluate the efficacy of the best-performing LV in rescuing the SCD phenotype. The second part of this thesis aimed to develop a novel genome editing-based strategy to restore fetal γ-globin genes expression. This therapeutic approach stems from the observation that the clinical course of β-thalassemia and SCD is improved in the presence of elevated HbF levels. By using the innovative CRISPR/Cas9 technology, we aimed at disrupting repressors binding sites in the γ-globin promoters to reactivate HbF expression in SCD HSPCs-derived RBCs. Reactivating fetal γ-globin genes at their endogenous genomic locus can circumvent the difficulties associated with the relatively low LV-derived transgene expression per vector copy, likely because the low LV vector capacity allows the usage only of short DNA stretches from the LCR, arranged in a non-physiological manner. In addition, this strategy offers a potentially safer targeted approach compared to the LV-based gene addition. In SCD, this therapeutic approach can favor the anti-sickling γ-globin expression, at the expense of the mutated βS-globin, given the competition between the fetal and the adult genes for the interaction with the LCR. In a comparative approach, we intended to evaluate novel and known therapeutic targets in the γ-globin promoters. To this purpose, several gRNAs have been designed to target 3 regions of the γ-globin promoters, where variants associated with elevated HbF levels and/or binding sites for HbF repressors have been described. We aimed to screen these gRNAs in an adult erythroid cell line (HUDEP-2) and SCD HSPCs-derived RBCs in terms of HbF reactivation and correction of the patient phenotype, to select the best therapeutic target for an efficient and safe therapeutic approach for β-hemoglobinopathies

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Girard, Anne-Claire. "Thérapies à partir du tissu adipeux : de la chirurgie esthétique et reconstructrice à la thérapie cellulaire. Application à la régénération des tendons chez les chevaux". Thesis, La Réunion, 2012. http://www.theses.fr/2012LARE0034/document.

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Abstract (sommario):

Utilisée depuis plus d'un siècle en chirurgie esthétique, la greffe autologue de tissu adipeux, ou lipofilling, est une technique sûre permettant le comblement des tissus mous. Cependant, bien que la technique ait connue de nettes améliorations au cours du temps, les chirurgiens font toujours face à une résorption du greffon qui oblige dans la majorité des cas à planifier plusieurs autres interventions afin que le résultat esthétique soit en adéquation avec les attentes du patient. Le procédé MICROFILL® a été développé dans le but d'augmenter le taux de prise de greffe en favorisant la survie cellulaire au sein du greffon. Cette dernière est optimisée par : un prélèvement et une réinjection de lobules adipeux de petite taille permettant de diminuer l'ischémie et la mauvaise nutrition des cellules - une élimination des éléments délétères (anesthésiques, cytokines inflammatoires) par un protocole de lavages et centrifugations non traumatique. D'autre part, au cours de ces dernières années, le tissu adipeux s'est révélé posséder un pouvoir thérapeutique plus important par l'hébergement de cellules souches mésenchymateuses au fort potentiel. Ces cellules sont présentes en grande quantité et facilement accessibles à partir d'une simple lipoaspiration. Cependant, la lipoaspiration implique bien souvent l'usage d'un anesthésique local et d'un vasoconstricteur qui peuvent nuire aux cellules. Nos études ont en effet montré que la lidocaïne, un anesthésique couramment utilisé, est cytotoxique pour les cellules souches du tissu adipeux, ayant pour effets l'inhibition de la prolifération cellulaire (arrêt du cycle cellulaire en phase G0-G1) et la nécrose des cellules. En revanche, une manipulation appropriée du tissu adipeux, se rapprochant du protocole MICROFILL®, permet de diminuer la mortalité cellulaire. L'effet délétère de la lidocaïne semble lié à l'apparition d'une vacuolisation cytoplasmique dont la nature est à ce jour non élucidée. De plus, la lidocaïne induit également un processus d'autophagie, dont les mécanismes moléculaires d'induction sont eux aussi inconnus et dont la finalité physiologique serait le maintien en vie de la cellule malgré le stress provoqué. Les conclusions de ces études mènent à certaines recommandations à suivre quant à l'usage de la lidocaïne en vue de la réinjection extemporanée de cellules souches adipeuses chez un patient. Aussi, dans le but de traiter les tendinopathies équines, ces études ont permis d'optimiser le protocole de prélèvement du tissu adipeux chez le cheval ainsi que le protocole d'extraction des cellules souches du tissu adipeux. Cette thèse a finalement permis de développer un kit à usage vétérinaire permettant de traiter les tendinopathies équines. Ce nouveau procédé de thérapie cellulaire a été testé chez des chevaux et s'est avéré très prometteur, permettant la régénération de la structure tendineuse et un retour au travail rapide des chevaux
Despite the dark side of obesity in the pathogenesis of metabolic diseases, adipose tissue has been shown to be a good therapeutic tool. First, autologous fat grafting, also named lipofilling, has been used for over a century and represents a safe technique for soft tissue filling. However, although the technique has seen marked improvements over time, surgeons are still facing graft resorption that often requires overcorrection of the treated area or other interventions so that the aesthetic result is in line with expectations of the patient. Thus, MICROFILL® process has been developed in order to increase the rate of engraftment by promoting cell survival within the graft. The latter is enhanced by: - sampling and reinjection of small fat lobules in order to reduce ischemia and poor nutrition of the cells- elimination of deleterious elements (anesthetics, inflammatory cytokines) by a non-traumatic protocol involving soft centrifugations and washings. Furthermore, in recent years, adipose tissue has been found to have a greater therapeutic power by hosting mesenchymal stem cells with great potential. These adipose stem cells (ASCs) are present in large quantities and can be easily obtained from a simple liposuction. However, liposuction procedure often involves the use of a local anesthetic and a vasoconstrictor that can harm cells. Our studies have shown that lidocaine, an anesthetic commonly used, exerts cytotoxic effects on adipose stem cells, inhibiting cell proliferation (cell cycle arrest in G0-G1 phase) and inducing necrosis. Nonetheless, appropriate handling of adipose tissue, quite similarly to MICROFILL® protocol, reduces cell death. The deleterious effects of lidocaine appear to be related to the occurrence of cytoplasmic vacuolization whose nature is so far unclear. In addition, lidocaine also induces a process of autophagy, including molecular mechanisms of induction also unknown and whose physiological purpose could be cell survival despite the stress. The findings of these studies lead to some recommendations to follow regarding the use of lidocaine for the extemporaneous reinjection of ASCs in a patient. Also, in order to treat equine tendinopathy, these studies have been used to optimize adipose tissue harvest by liposuction on horses and the protocol of extraction of ASCs.Finally, this thesis has allowed developing a kit for veterinary use to treat equine tendinopathy. This new method of cell therapy has been tested in horses and has shown very promising results for tendon regeneration, knowing that treated horses could rapidly return to work

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Labiad, Yasmine. "Contribution de l’approche transcriptomique dans la physiopathologie et le traitement des hémopathies malignes". Thesis, Aix-Marseille, 2016. http://www.theses.fr/2016AIXM4068.

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Abstract (sommario):

L’objectif général de cette thèse a été de mettre en évidence la contribution de l’approche transcriptomique dans la physiopathologie et le traitement des hémopathies malignes. En particulier, comment la technologie des microarrays nous a aidée à étudier diverses problématiques en onco-hématologie.Dans la première partie, notre objectif était d’étudier les cellules Natural killer (Nk) chez les patients atteints de leucémie aiguë myéloïde (LAM). Nous avons comparé la signature transcriptomique des cellules Nk de patients LAM à celle des cellules Nk de sujet sains et suggéré que le facteur de transcription ETS-1 est un bon candidat capable de réguler les récepteurs activateurs NCR (natural cytotoxicity receptors) dont les gènes sont situés sur deux chromosomes différents, même si leur expression reste fortement cordonnée.Dans la seconde partie, nous nous sommes intéressés à la prédiction du sepsis en utilisant une approche transcriptomique dans le cadre de l’autogreffe de cellules souches hématopoïétiques (auto-CSH). En utilisant le même modèle, dans la troisième partie, nous avons mis en évidence l’effet du melphalan en tant que chimiothérapie de conditionnement sur les cellules mononuclées du sang périphérique et identifié un marqueur potentiel de rechute précoce chez les patients atteints de myélome dans le cas de l’auto-CSH. Enfin, dans la dernière partie, notre objectif a été d’analyser le profil d’expression génique des lymphomes B diffus à grandes cellules liés à l’infection par le VIH afin de vérifier ou pas l’existence des sous-types décrits chez les patients immunocompétents
The aim of this research is to demonstrate transcriptomic approach contribution in the physiopathology and treatment of hematological malignancies. In particular, how microarrays technology is used to study several oncohematology difficulties; which remain deaths-related infection, as well as the failure to obtain remission and death related relapse. In the first part, our focus was to study natural killer cells (Nks) in patients affected with acute myeloid leukemia (AML). We compared transcriptomic AML-NKs signature with healthy donors-NKs signature and suggested that ETS-1 transcription factor is a good candidate able to regulate the natural cytotoxicity receptors (NCRs), whose coding genes, are located on two different chromosomes even if their expression remain strongly coordinated.Our second part, aimed to predict sepsis using a transcriptomic approach in the case of autologous stem cell transplantation (auto-HSCT). Using the same model, in the third part, we highlighted the melphalan high-dose chemotherapy effect on peripheral blood mononuclear cells and identified a potential good biomarker of early relapse in patients affected by myeloma in the case of auto-HSCT.Our final focus was to analyze gene expression profile of HIV-related large diffuse B-cell lymphoma type in order to verify the existence of subgroups described in immune-competent patients

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Bertoni, Lélia. "Évaluation du potentiel thérapeutique des cellules souches mésenchymateuses dans un modèle d'arthropathie expérimentale induite chez le cheval Characterization and use of Equine Bone Marrow Mesenchymal Stem Cells in Equine Cartilage Engineering. Study of their Hyaline Cartilage Forming Potential when Cultured under Hypoxia within a Biomaterial in the Presence of BMP-2 and TGF-ß1 Intra-Articular Injection of 2 Different Dosages of Autologous and Allogeneic Bone Marrow- and Umbilical Cord-Derived Mesenchymal Stem Cells Triggers a Variable Inflammatory Response of the Fetlock Joint on 12 Sound Experimental Horses An experimentally induced osteoarthritis model in horses performed on both metacarpophalangeal and metatarsophalangeal joints: Technical, clinical, imaging, biochemical, macroscopic and microscopic characterization Evaluation of allogeneic bone-marrow-derived and umbilical cord blood-derived mesenchymal stem cells to prevent the development of osteoarthritis in an equine model Chondrogenic Differentiation of Defined Equine Mesenchymal Stem Cells Derived from Umbilical Cord Blood for Use in Cartilage Repair Therapy". Thesis, Normandie, 2020. http://www.theses.fr/2020NORMC417.

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Abstract (sommario):

’arthropathie dégénérative est une maladie ayant des répercussions socio-économiques majeures chez l’homme et le cheval. Il n’existe pour l’heure aucun traitement curatif de cette maladie, le cartilage articulaire étant dépourvu de pouvoir de cicatrisation spontané. De nombreux espoirs reposent sur l’utilisation de cellules souches mésenchymateuses (CSM), pour leur potentiel pro-régénératif et anti-inflammatoire. Le premier objectif de cette étude était d’évaluer la tolérance des CSM de sang de cordon ombilical (SCO) et de moelle osseuse (MO) dans des articulations saines. L’étude contrôlée en aveugle menée sur 12 chevaux expérimentaux a démontré que l’injection de CSM-MO provoquait significativement plus de signes de réaction inflammatoire que l’injection de CSM-SCO, et que l’injection des CSM, quelle que soit leur origine, provoquait une réaction inflammatoire discrète à modérée, supérieure à celle d’une injection de placébo, avec une grande variabilité individuelle de sensibilité à une même lignée de cellules. Le second objectif était d’évaluer l’efficacité des CSM-MO et -SCO dans un modèle d’arthropathie induite. L’étude contrôlée en aveugle menée sur 8 chevaux expérimentaux a mis en évidence une réduction significative de la progression des signes indicateurs d’arthropathie à l’imagerie après injection de CSM-MO allogéniques par rapport à l’injection du placébo. Ces résultats encourageants, à considérer à la lumière des limites des études menées, indiquent un effet bénéfique des CSM-MO allogéniques dans la prise en charge de l’arthrose chez le cheval. Ils soulignent la nécessité de poursuivre les recherches afin de confirmer ces résultats, et d’optimiser les effets des CSM à travers leur combinaison à un vecteur ou par une approche acellulaire avec administration des nanovésicules qu’elles sécrètent, et considérées être à l’origine de leurs effets thérapeutiques
Osteoarthritis is a common cause of pain and economic loss in both humans and horses. There is currently no curative treatment for osteoarthritis, because of the lack of spontaneous regenerative capacity of the articular cartilage. Mesenchymal stem cells (MSC) based regenerative medicine comes across as a promising strategy given their pro-regenerative and anti-inflammatory potential. The first objective of this study was to evaluate the safety of umbilical cord blood (UCB) and bone marrow (BM) derived MSC in healthy joints. The blind controlled study conducted on 12 experimental horses showed that the injection of BM-MSC caused significantly more signs of inflammatory reaction than the injection of UCB-MSC, and that the injection of MSC, regardless of their origin, caused a discrete to moderate inflammatory reaction, greater than that of the placebo, with great individual variability in sensitivity to the same cell line. The second objective was to evaluate the efficacy of BM-MSC and UCB-MSC in a model of induced osteoarthritis. The blind controlled study conducted on 8 experimental horses showed a significant reduction in the progression of osteoarthritis associated signs with imaging techniques after injection of allogeneic BM-MSC compared to placebo. These promising results, to be considered in light of the limitations of the studies, indicate a beneficial effect of allogeneic BM-MSC in the management of osteoarthritis in horses. They underline the need for further research to confirm these results, and to optimize the effects of MSC through their combination with a vector or through an acellular approach with administration of the nanovesicles they secrete that ared considered to be responsible for their therapeutic effects

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Eilers, Smith Olivia. "Dérivation de cellules souches pluripotentes induites autologues à partir du clonage somatique équin". Thèse, 2013. http://hdl.handle.net/1866/11564.

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Abstract (sommario):

Le recours aux cellules souches pour améliorer la réparation et guérison des blessures et maladies musculosquelettiques chez le cheval est de plus en plus fréquent. Les développements récents dans la reprogrammation cellulaire ont permis le développement de nouvelles sources de cellules souches pour ces thérapies régénératives. Des cellules souches pluripotentes induites (iPS) autologues peuvent être dérivées de cellules adultes par la reprogrammation directe à travers l'expression induite des gènes de pluripotence. Le clonage par transfert nucléaire (SCNT) suivi de la dérivation de cellules souches embryonnaires (ES) permet la reprogrammation indirecte des cellules adultes. Cependant, l’efficacité de ces deux méthodes pour la dérivation de cellules pluripotentes génétiquement stables est faible. Nous avons donc combiné les techniques SCNT et iPS dans le but de développer un protocole efficace de dérivation de cellules iPS autologues à partir de fibroblastes de la peau équine. Quatre facteurs de reprogrammation ont été introduits dans les cellules fibroblastes de fœtus clonés (ntFF) ainsi que les cellules ES provenant d’embryons clonés (ntES) pour induire leur reprogrammation en cellules iPS autologues. Les cellules ntFF-iPS et ntES-iPS ont des capacités prolifératives avancées et expriment des marqueurs de pluripotence importants. Par contre, les cellules ntES ont une efficacité de reprogrammation significativement supérieure aux cellules nt-FF et forment des colonies trois fois plus rapidement. Contrairement aux cellules ntES, les cellules ntES-iPS démontrent une augmentation de l’expression des marqueurs de pluripotence et survivent à la culture cellulaire prolongée. Les résultats présentés dans ce mémoire attestent que l’utilisation de la reprogrammation secondaire de cellules FF et ES clonées permet la production de cellules souches pluripotentes autologues stables chez le cheval.
For veterinarians, regenerative medicine in horses has focused mainly in the use of stem cells for arthritis, tendon and ligament repair, indicating a need for treating musculoskeletal injuries. The recent developments in cell reprogramming have paved the way for alternative cell sources for stem cell therapies. Autologous pluripotent stem cell lines can be derived from adult cells either by direct reprogramming through induced expression of pluripotency genes (iPS) or indirectly by reprogramming through somatic cell nuclear transfer (SCNT) followed by the derivation of embryonic stem cells (ESC). However, outcome efficiencies of SCNT and iPS protocols are invariably low, indicating that alone neither of these reprogramming routes is sufficient for deriving genetically and epigenetically stable pluripotent stem cells. We hereby report on the production of autologous equine iPS cells by combining SCNT and iPS reprogramming protocols. Adult skin fibroblasts were used for SCNT, and the resulting cloned embryos were either used to obtain cloned fetal fibroblast cells (ntFF), or used for ESC culture (ntES). Cells were then transfected with reprogramming factors to derive autologous iPS cells. Both ntFF-iPS and ntES-iPS cells are capable of extensive proliferation and express important pluripotency factors. However, ntES reprogramming efficiency is significantly higher than ntFF cells, with ntES-iPS colonies forming three times faster. Additionally, ntES-iPS cells showed improved pluripotency marker expression when compared with ntES cells. The results presented in this memoir indicate that stable equine iPS cell lines may be readily obtained from secondary reprogramming of cloned ntFF and ntES cells, opening novel avenues for developing autologous pluripotent stem cell therapies.

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Alary, Anouck. "La conservation autologue de sang de cordon ombilical : une ouverture sur une forme émergente de «citoyenneté biologique»". Thèse, 2015. http://hdl.handle.net/1866/16231.

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Abstract (sommario):

La transformation du sang de cordon ombilical en une précieuse source de cellules souches a, dès le début des années 1990, donné naissance à une industrie commerciale globale de conservation faisant désormais concurrence à un large réseau de conservation public. Ce mémoire cherche à comprendre et à expliquer les soubassements socio-culturels liés à l’émergence de cette industrie, ainsi qu’à mieux cerner les enjeux éthiques et politiques qu’elle pose. En exposant en premier lieu la manière dont les institutions publiques de conservation de sang de cordon se définissent, et sont généralement définies par les comités bioéthiques, comme étant porteuses des valeurs d’altruisme et de solidarité nationale traditionnellement liées au modèle « redistributif » d’échange de sang et d’organes né au lendemain de la Seconde Guerre mondiale, nous problématisons la manière innovatrice par laquelle les banques privées structurent le rapport entre les mères et leurs propres produits biologiques comme l’expression d’une reconfiguration du lien social et politique caractérisée par l’émergence de nouvelles socialisés. L’hypothèse au coeur de ce mémoire est que celles-ci peuvent être comprises comme l’aboutissant de l‘espoir collectivement partagé par les consommatrices d’améliorer leur propre condition biologique familiale, étant lui-même le fruit d’une financiarisation croissante des sciences du vivant. En analysant le discours « promissif » que représente le matériel promotionnel des banques autologues, notre objectif est alors d’identifier la manière par laquelle les multiples potentialités attribuées au sang de cordon définissent des subjectivités maternelles caractérisées par des obligations morales spécifiques.
The recent transformation of cord blood to a precious source of stem cells has given rise to a global commercial industry of conservation, which is now competing with a large network of public cord blood banks. This dissertation explores the socio-cultural context surrounding the emergence of that industry and aims at elucidating the ethical and political concerns that it generates. It begins by examining how public cord blood banks define themselves (and are defined by ethical commitees) as purveyors of values such as altruism and national solidarity -that is, values which were traditionally linked to the « redistributive » model of human blood and organs exchanges that emerged after World War II. It next argues that private banks are bringing about a radical transformation of the relationship between mothers and their biological “products”. This dissertation suggests that this innovative model of exchange is an expression of contemporary reconfigurations of the very notion of community, which is now characterized by what we call new forms of “biosociality”. Our hypothesis is that these new socialities can be understood as the consequence of a collective hope to improve familial biological conditions, which is itself the product of the growing financiarization of life sciences. By way of a foray into the « promissive » discourse employed by private banks for their promotional material, the dissertation attemps to identify how these potentialities attributed to cord blood define new maternal subjectivities characterized by specific moral duties and obligations.

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