Littérature scientifique sur le sujet « Metabolismo del colesterolo »

Objetivo: Determinar las modificaciones normales del metabolismo después de la ingestión de alimentos. Material y métodos: Se ha estudiado a 33 personas de ambos géneros, adultos mayores, de nivel del mar, tanto en ayunas como después de la ingesta de una mezcla alimenticia consistente en 730 kcal, con 55,4% de grasas, 37,2% de hidratos de carbono y 7,4% de proteínas. Se ha medido el perfil metabólico en ayunas y luego de la ingesta alimentaria, la glucosa, triglicérido (Tg), ácidos grasos no esterificados (AGNE), insulina por métodos convencionales hasta la 6a hora; se ha calculado las concentraciones de colesterol LDL y VLDL utilizando la fórmula de Friedewald; el colesterol no-HDL, mediante la sustracción del valor del colesterol HDL al valor de colesterol total (CT). Resultados: La glicemia se elevó discretamente, regresando a valores basales a la 2a hora; la insulinemia se incrementó durante 4 horas; los triglicéridos comenzaron a elevarse en sangre a partir de la 2a hora y llegaron al máximo a la 4a hora, para luego iniciar el descenso no completo en la 6a hora. Los AGNE disminuyeron a partir de los 30 minutos, llegando al máximo de caída a las 2 horas; luego se apreció un rebote máximo a la 6a hora, inclusive mayor al valor basal. Conclusiones: Estos resultados demuestran que no es suficiente obtener información del metabolismo intermediario en ayunas, sino que el estudio posprandial permite mayor información. Es la primera vez en nuestro país que se obtiene información sobre el metabolismo intermediario en fase posprandial en una muestra de la población normal que se encuentra en una edad de mayor riesgo cardiovascular.

Fructose consumption has increased during the last decades, while a simultaneous rise in the incidence of pathologies such as type 2 diabetes and metabolic syndrome has also taken place. Although there is evidence that fructose can cause alterations in the offspring related to the development of the aforementioned diseases, exposure to fructose during pregnancy is not contraindicated for women. This effect is explained by the concept of foetal programming, which suggests that changes that occur during the embryogenic and foetal stages are permanent in the adult, due to maternal health, diet and other environmental factors. Therefore, the effect of fructose on cholesterol metabolism in the offspring of mothers fed with or without fructose during gestation was studied. In addition, the progeny also received different diets: fructose (with and without supplementation of cholesterol) or tagatose solutions. Tagatose increased non-HDL cholesterol in the offspring of water-fed mothers, whereas fructose consumption during gestation dampened this effect, indicating foetal programming. In addition, fructose and tagatose feeding increased atherogenic indices by decreasing HDL-cholesterol concentration and increasing triglycerides levels. On the other hand, the addition of cholesterol to fructose consumption caused an increase in total cholesterol and a change in its distribution: higher concentration of non-HDL cholesterol and lower concentration of HDL cholesterol, independently of maternal feeding. This also caused an increase in atherogenic indices. Ultimately, the results indicate that cholesterol metabolism is influenced by both maternal fructose consumption, and the subsequent intake of fructose (alone or in combination with cholesterol) and tagatose in the offspring.

El Síndrome de Smith-Lemli-Opitz (SLO) es uno de los múltiples síndromes de malformaciones congénitas arquetípicas. El reciente descubrimiento de la causa bioquímica de SLO y la consiguiente redefinición de SLO como un error innato del metabolismo del colesterol han dado lugar a nuevas e importantes posibilidades de tratamiento para los pacientes afectados. El papel del colesterol en la formación de hormonas esteroides también ha proporcionado una posible explicación de las características del comportamiento anormal de SLO.

El cortisol y la corticosterona son hormonas sintetizadas y secretadas por la corteza (cortico) de las glándulas suprarrenales a partir del metabolismo del colesterol (esteroides). Debido a su papel en el metabolismo de carbohidratos se clasifican como glucocorticoides. Su regulación es dada por el eje hipotálamo– adenohipofisiario y tienen un papel pleiotrópico en homeostasis, metabolismo celular y regulación inmune.

Introducción. Los pilares terapéuticos del control metabólico de la diabetes mellitus tipo 2 (DM2) son el régimen alimenticio y la actividad física. Objetivo. Estudiar el efecto del ejercicio preprandial de corta duración y ocasional sobre el metabolismo intermediario basal y postprandial en personas con DM2. Métodos. Estudio experimental, transversal, en 16 mujeres y 15 varones con DM2, de nivel del mar, de 40 a 68 años, sometidos a dos pruebas, basal (A) y a post-ejercicio preprandial (B), consistente en una caminata durante 30 minutos a 4 Km/hora en faja sin fin. En ayunas y luego de un desayuno con 730 Kcal., 55,4% de grasas, 37,2% de hidratos de carbono y 7,34% de proteínas, se midió en sangre, glucosa, colesterol total, colesterol HDL, triglicéridos, insulina y ácidos grasos no esterificados (AGNE) durante 6 horas . El colesterol VLDL, LDL NoHDL y HOMA fueron calculados. Resultados. El ejercicio determinó una disminución de las concentraciones de glucosa, insulina y AGNE en la fase postprandial. Conclusión. El ejercicio mejoró elcontrol metabólico postprandial en DM2.

Se estudió el efecto del extracto de Solanum sessiliflorum Dunal- "cocona" sobre la glucosa, colesterol, LDL- c, HDL-c., triglicéridos, en 100 sujetos voluntarios de ambos sexos con dislipidemia e hiperglucemia. Determinadas las concentraciones basales de los parámetros en estudio, se administró a los pacientes 40 mL./ día de extracto de cocona durante 3 días. El estudio matemático estadístico de los resultados obtenidos, permitió establecer que las disminuciones de colesterol, LDL, triglicéridos y glucosa séricos, son estadísticamente significativas ( p < 0.05 ): el colesterol alcanzó niveles normales en el 61 % de los sujetos, el LDL en el 62 %; los triglicéridos en el 92 %, se observó un incremento significativo del HDL en el 82 %, así mismo cabe destacar que, con respecto a la glucemia basal normal de algunos de los sujetos normales, en ninguno de los casos se llegó a la hipoglicemia.

La Xantomatosi Cerebrotendinea (CTX) e la Paraparesi Spastica di tipo 5 (SPG5) sono due malattie neurometaboliche rare legate a difetti nel catabolismo del colesterolo ad acidi biliari (BA). La CTX è causata da mutazioni della sterolo 27-idrossilasi (CYP27A1), un enzima della sintesi degli acidi biliari il cui deficit ha come conseguenza una ridotta produzione di acido chenodeossicolico (CDCA) ed un incrementata sintesi di colestanolo (un derivato saturo del colesterolo). I pazienti CTX sono caratterizzati da xantomi a livello cerebrale e tendineo e progressivi sintomi neurologici. Sin dagli anni ‘80 è stato riportato che la somministrazione di BA è efficace nel ridurre i livelli plasmatici di colestanolo, bloccando potenzialmente la progressione della malattia. Tuttavia, le attuali conoscenze sulla CTX derivano principalmente da casi report mentre sono rari studi su ampie popolazioni. Inoltre alcuni report hanno evidenziato che, nonostante il trattamento, alcuni pazienti mostrano un declino delle funzioni cerebrali nel lungo periodo. Per questi motivi una più ampia ricerca sul metabolismo del colesterolo nei pazienti CTX potrebbe essere utile al fine di consolidare le conoscenze su questa patologia. Il primo scopo di questa tesi era dunque quello di riportare le modificazioni dei principali processi metabolici del colesterolo osservate in un gruppo di pazienti CTX e le eventuali correlazioni tra queste, lo stato clinico dei pazienti ed il decorso della malattia. Per raggiungere questo obbiettivo tecniche di analisi in gascromatografia-spettrometria di massa (GC-MS) sono state utilizzate per dosare la concentrazione plasmatica di specifici ossisteroli e steroli non colesterolici la cui concentrazione è indicativa dei processi metabolici del colesterolo. L’analisi è stata condotta, in modo in gran parte retrospettivo, su una serie di campioni di plasma provenienti da 34 soggetti CTX e ha coperto un periodo di follow-up che, complessivamente, andava dal momento della diagnosi (in assenza di qualunque trattamento) fino a diversi anni di terapia sostitutiva con BA. La SPG5, invece, è una paraparesi spastica ereditaria (HSP) dovuta a mutazioni nel gene codificante per l’ossisterolo-7α-idrossilasi (CYP7B1), un enzima della via alternativa di sintesi di BA necessario per la conversione del 27-idrossicolesterolo (27-OHC) in acido colico e chenodeossicolico. I pazienti SPG5 mostrano elevati livelli plasmatici di 27-OHC e i tipici sintomi di una paraparesi spastica. Attualmente le informazioni sulla SPG5 sono molto limitate e non c’è una terapia definita indirizzata a limitare l’accumulo di 27-OHC. Il secondo scopo di questa tesi era dunque quello di indagare, sempre mediante GC-MS, il metabolismo del colesterolo in una coppia di fratelli SPG5, in qualità di soggetti probandi, e di verificare l’efficacia di farmaci ipocolesterolemizzanti (simvastatina e ezetimibe) nel ridurre il 27-OHC plasmatico. Riguardo i risultati ottenuti, i pazienti CTX hanno mostrato un profilo basale degli steroli caratterizzato da elevati livelli di 7α-idrossicolest-4-en-3-one (7αC4) (indicativi di un’iperstimolazione della via classica di sintesi degli BA), di latosterolo e fitosteroli (markers, rispettivamente, della biosintesi e dell’assorbimento di colesterolo), oltre che (come atteso) di colestanolo. Inoltre sono state evidenziate correlazione significative tra i valori di 7αC4 e colestanolo (ρ=0,51, p<<0,01) e tra i valori di 7αC4 e latosterolo (ρ=0,66, p<<0,01). Al contrario nessuna correlazione significativa è emersa tra i dati biochimici ed il fenotipo clinico dei pazienti. I livelli di tutti questi metaboliti sono significativamente diminuiti in seguito al trattamento con BA (p<0,01) e, successivamente, si sono mantenuti sostanzialmente stabili anche sul lungo periodo. Nel 36% dei pazienti, tuttavia, tale risposta non si è tradotta in una stabilizzazione dello stato clinico dei pazienti. Inoltre, il 24-idrossicolesterolo (24-OHC), un marker dell’omeostasi del colesterolo cerebrale, non ha mostrato particolari alterazioni nei suoi livelli plasmatici basali, né è stato possibile evidenziare un effetto del trattamento con BA sulla sua concentrazione. Questo dato è risultato assai differente da quanto invece osservato in un gruppo di 15 soggetti affetti da Alzheimer dove, sia i livelli di 24-OHC che di 27-OHC sono risultati nettamente ridotti rispetto a soggetti controlli ultrasettantenni. La correlazione tra alterazioni dell’omeostasi del colesterolo, fenotipo clinico e decorso della CTX rimane quindi poco chiara ed ulteriori studi si rendono necessari per chiarire questo aspetto. Riguardo alla SPG5, entrambi i pazienti hanno mostrato (come atteso) elevati livelli basali di 27-OHC e di 25-OHC (25-idrossicolesterolo), mentre non è stato possibile confermare alterazioni nei valori degli altri steroli ed ossisteroli dosati (7αC4, 24-OHC, latosterolo e fitosteroli). Simvastatina ed ezetimibe si sono mostrati efficaci nel ridurre il 27-OHC plasmatico, anche se non fino a livelli normali. Non è stato invece possibile evidenziare un chiaro effetto del trattamento sui valori plasmatici di 25-OHC. Ulteriori studi su un più ampio numero di pazienti saranno necessari al fine di verificare se l’accumulo di 27-OHC sia effettivamente la causa del danno al tratto cortico-spinale e se una terapia a lungo termine con statina/ezetimibe possa essere proposta come trattamento per la SPG5.

Los esteroles vegetales son los análogos del colesterol en los vegetales. Comparten su misma estructura y se diferencian únicamente por sus cadenas laterales. Los estanoles vegetales proceden de la saturación del doble enlace en el anillo. Desde los años 90, tanto los esteroles como los estanoles vegetales están aprobados como alimentos funcionales para disminuir las concentraciones de colesterol total y de LDL. Aunque su mecanismo de acción no es aún del todo conocido, se estima que 2g/día de esteroles vegetales disminuyen el colesterol de LDL en aproximadamente un 10%. Sin embargo, se están desarrollando nuevas formas y combinaciones para aumentar esta eficacia. El primer trabajo de la presente tesis estudia el comportamiento y acción de una de ellas, el llamado FM-VP4. FM-VP4 es un compuesto sintético derivado del sitostanol y campestanol que ha mostrado una acción hipocolesterolemiante mayor que la de sus componentes aislados. Sin embargo, su mecanismo de acción es todavía desconocido. En este trabajo se estudió la capacidad de FM-VP4 para alterar la homeostasis del colesterol en ratones, fundamentalmente a nivel hepático e intestinal. Como conclusiones, se pudo establecer que FM-VP4 redujo con gran eficacia la absorción intestinal de colesterol, así como sus concentraciones plasmáticas y hepáticas. Además, alteró la homeostrasis de los ácidos biliares aumentando su reabsorción intestinal y cambió la expresión hepática de genes que juegan un papel principal en la homeostasis del colesterol. Se trata del primer esterol/estanol vegetal que altera el metabolismo de los ácidos biliares y que es capaz de disminuir las concentraciones plasmáticas de colesterol en ratones normocolesterolémicos. Por otro lado, existe cierta controversia sobre la seguridad de los esteroles vegetales. Los pacientes aquejados de una rara enfermedad autosómica recesiva, llamada sitosterolemia, acumulan grandes cantidades de esteroles vegetales en plasma y tejidos, y desarrollan una aterosclerosis masiva y precoz a pesar de que sus concentraciones de colesterol son normales. Entre los efectos de los esteroles vegetales está el activar al receptor nuclear LXR, capaz de producir un aumento en las concentraciones de triglicéridos. Este hecho podría contribuir al desarrollo de aterosclerosis por parte de los enfermos sitosterolémicos. En el segundo trabajo de esta tesis estudiamos el metabolismo de los triglicéridos en ratones deficientes en los transportadores ABCG5/G8, modelo de sitosterolemia. Como conclusiones, se pudo comprobar que la deficiencia de ABCG5/G8 aumenta efectivamente y de forma notoria las concentraciones plasmáticas de triglicéridos a través de múltiples vías. Aparte de observarse cierto grado de resistencia a la insulina, la acumulación masiva de esteroles vegetales aumentó la secreción hepática e intestinal de triglicéridos y redujo su catabolismo periférico. Además, muchos de estos efectos se aprecian también en ratones heterocigotos para la enfermedad, en los que la acumulación de esteroles vegetales es sensiblemente inferior.
Plant sterols are cholesterol analogs in plants. They share its same structure, only differing in their side chains. Plant stanols derive from the saturation of the double bond in the ring. Since the 90s, both sterols and plant stanols are approved as functional foods to lower total and LDL cholesterol. Although their mechanism of action is not yet fully known, it is estimated that 2g/day of plant sterols lower LDL cholesterol levels by approximately 10%. However, new forms and combinations are being developed in order to increase this effectiveness. The first work of this thesis studies the behavior and action of one of them, the so-called FM-VP4. FM-VP4 is a synthetic derivative of sitostanol and campestanol which showed greater hypocholesterolemic action than their isolated components. However, its mechanism of action is still unknown. In this work, the ability of FM-VP4 to alter cholesterol homeostasis in mice was studied. In conclusion, it was found that FM-VP4 effectively reduced the intestinal cholesterol absorption as well as plasma and liver cholesterol. FM-VP4 also affected bile acid homeostasis by inducing bile acid intestinal reabsorption and changed the liver expression of genes that play an essential role in cholesterol homeostasis. This is the first phytosterol or stanol that affects bile acid metabolism and lowers plasma cholesterol in normocholesterolaemic mice. On the other hand, the safety of plant sterols is still controversial. Patients suffering from a rare autosomal recessively inherited disease, called sitosterolemia, accumulate large amounts of plant sterols in plasma and tissues, and develop a massive and early atherosclerosis despite their cholesterol levels are usually normal. It has been proven that certain plant sterols can activate LXR, a nuclear receptor that regulates fatty acid metabolism and leads to increased plasma triglyceride levels. This action could contribute to the development of atherosclerosis by sitosterolemic patients. In the second paper of this thesis we studied the triglyceride metabolism in ABCG5/G8 deficient mice, an animal model of sitosterolemia. In conclusion, it was found that ABCG5/G8 deficiency markedly raises plasma triglyceride levels through multiple pathways. The massive accumulation of plant sterols increased liver and intestinal triglyceride secretion and decreased triglyceride peripheral catabolism. Moreover, it caused a degree of insulin resistance. Moreover, many of these effects are also seen in heterozygous mice, in which plant sterol accumulation is significantly lower.

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Determina la prevalencia y factores asociados con la dislipidemia en trabajadores de algunos centros de salud del nivel primario. La investigación fue transversal. Se incluyó a 163 trabajadores, de algunos centros de salud del nivel primario durante el mes de agosto del año 2014 la mediana de edad fue 49,0 años y fluctúo entre 22 y 67 años. Se realizó una entrevista mediante un cuestionario que fue previamente sometido a juicio de experto, mejorando la presentación de las preguntas, posteriormente se realizó la prueba de piloto. El estado nutricional se determinó mediante el índice de masa corporal (IMC), siguiendo las normas técnicas para la valoración nutricional antropométrica del Ministerio de Salud. Adicionalmente se realizó la extracción de muestra de sangre a través de la punción venosa central para determinar las dislipidemias y se consideraron colesterol total (CT) elevado > 200 mg/dl, LDL-C > 100 mg/dl, HDL-C bajo (varones HDL-C < 40 mg/dl y mujeres HDL-C < 50 mg/ dl), y triglicéridos ≥ 150 mg/d. Las muestras fueron procesadas en un laboratorio particular. El perímetro abdominal se evaluó mediante la cinta métrica, se midió al participante en posición erguida, con el torso descubierto, y con los brazos relajados y con los pies separados por una distancia de 25 a 30 cm, de acuerdo a la Guía Técnica de valoración nutricional del Ministerio de Salud. Se solicitó el consentimiento informado por escrito para la extracción de muestras sanguíneas. Encuentra que la prevalencia de hipercolesterolemia fue 30,1%, hipertriglicéridemia 40,5%, HDL-C bajo 69,3%, LDL-C elevado 55,2%, y la dislipidemia global fue 87,7%. Los factores asociados a dislipidemia por Hipertrigliceridemia son la edad entre 50-59 años (OR 4, IC 95% : 1.2-13.6), obesidad (OR 2.8, IC 95% : 1.2- 6.7), riesgo cardiovascular muy alto según perímetro abdominal (OR 2.5, IC 95% : 1.1-1,7), relacionado a Hipercolesterolemia es la edad entre 40-49 años (OR 12.1, IC 95% : 1.4-100,7), 50-59 años (OR 8,9 IC 95% : 1.1-72.8), 60-69 años (OR 10.7, IC 95% : 1.2-93.6), sobrepeso (OR 2.8, IC 95% : 1.1-7,2), obesidad (OR 5.1, IC 95% : 1.9-13.8), por su parte el factor asociado a HDL-C bajo , es el riesgo cardiovascular muy alto (OR: 2.5, IC 95% : 1.1-5-9), y el factor asociado a LDL- C elevado es la edad entre 30-39 años (OR 6.7, IC 95% : 1.8-24.7), 40-49 años (OR 7.1, IC 95% : 1.9-25.7), 50-59 años (OR 6, IC 95% : 1.7-20, 6), 60-69 años (OR 4.3, IC 95% : 1.1-16.7) y la obesidad (OR 2.5, IC 95% : 1.1 – 5.8) Concluye que la prevalencia de hipertrigliceridemia fue de 40,5%, hipercolesterolemia 30,1%, HDL-C bajo 69,3 %, LDL-C elevado 55,2% en trabajadores de algunos centros de salud del nivel primario y la prevalencia de dislipidemia global fue 87,7%. La edad entre 50-59 años, la obesidad y el riesgo cardiovascular muy alto están asociados a la hipertrigliceridemia y la edad entre 40-49 años, 50–59 años, 60–69 años, el sobrepeso y la obesidad están asociados a la Hipercolesterolemia. El riesgo cardiovascular muy alto está asociado al HDL –C bajo. La edad entre 30-39 años, 40-49 años, 50–59 años, 60–69 años y la obesidad están asociados al LDL – C alto en trabajadores de algunos centros de salud del nivel primario.
Tesis

INTRODUCCIÓN: La hipercolesterolemia, como factor de riesgo cardiovascular,provoca aumento de la producción de radicales libres de oxígeno y disminución de labiodisponibilidad de óxido nítrico (NO) a nivel vascular. Ambos mecanismos sepostulan precursores del desarrollo de arteriosclerosis. El NO asegura la correctafunción endotelial; es un derivado directo de la arginina a través de la óxido nítricosintasa endotelial (eNOS). El LDL oxidado es capaz de desplazar a la eNOS. Otrosderivados de la arginina, metilargininas y poliaminas, pueden tener implicación en ladisfunción endotelial provocada por la hipercolesterolemia (HC). A las estatinas se lesatribuyen efectos antiateroscleróticos al margen del efecto hipolipemiante, debido aacciones antioxidantes y antiinflmatorias entre otras. MATERIAL-MÉTODOS: Estudiotransversal, 90 pacientes distribuidos en tres grupos: control (CT<200 mg/dL),hipercolesterolémico (HC) (CT>200 mg/dL) y hipercolesterolémico tratado conestatinas. Ninguno presentaba enfermedad arteriosclerótica ni recibía tratamiento connitratos. Se realizaron dos determinaciones separadas por 6 meses. Se determinarondiversos parámetros del metabolismo de la arginina (nitrato plasma y orina; arginina yderivados metilados ADMA, SDMA y L-NMMA, y poliaminas putrescina, espermidinay espermina) y parámetros del daño oxidativo a lípidos (hidroperóxidos lipídicos yTBARM) y proteínas (grupos carbonilo y sulfhidrílo). En el laboratorio clínico perfillipídico y bioquímica básica. La mayoría se cuantificaron espectrofotométricamente omediante diversas modalidades de HPLC. RESULTADOS-DISCUSIÓN: Media de CTen el grupo HC bastante moderada (244 mg/dL) y HDLc relativamente elevada en lostres grupos (55-60 mg/dL). Nuestros resultados apoyan una inactivación del NO porradicales libres como ha sido descrito en trabajos previos. La arginina y sus derivadosmetilados muestran tendencia a disminuir en el grupo HC, sin estar descrito conclaridad su significado en la hipercolesterolemia. Los niveles de poliaminas disminuyenen el grupo hipercolesterolémico, hecho que no apoyaría su elevación en general encasos de hiperproliferación (como la arteriosclerosis) sino su relación con la situaciónde estrés oxidativo asociada a la hipercolesterolemia. Los marcadores de daño oxidativoa lípidos muestran tendencia cualitativa a aumentar en los casos de hipercolesterolemia,que se hace estadísticamente significativa al fraccionar en función de la presencia deHTA, apoyando la contribución de dos FRCV a la oxidación lipídica. Uncomportamiento similar se observa con los grupos sulfhidrilo proteicos. En cuanto a losgrupos carbonilo sí muestran una elevación clara y significativa en los dos gruposhipercolesterolémicos, que no se modifica cuando se fracciona la población en funciónde las diversas variables registradas, y que muestra una excelente correlación con losdiversos parámetros del metabolismo lipídico. En términos generales, las estatinas noafectan significativamente ninguno de los parámetros analizados. Sin embargo, laatorvastatina, sí disminuye los niveles de TBARM y nitrato en orina, apoyando lahiperproducción compensatoria de NO frente a situación de daño oxidativo en la HC.CONCLUSIONES: Existe una situación de estrés oxidativo asociada a lahipercolesterolemia, que se hace más evidente cuando confluye con la presencia deHTA. Los grupos carbonilo proteicos serían el marcador más sensible y fiable de dañooxidativo a proteínas en situaciones de HC moderada y pacientes sin complicacionesateroscleróticas. Los diversos metabolitos de la arginina analizados no se alteran ensituaciones únicamente de HC. La alteración de la biodisponibilidad del NO asociada ala HC sería debida a su inactivación por ROS. La disminución de ADMA en mujeresjunto con la elevación de los niveles de nitrato apoya el descrito efecto protector de losestrógenos sobre el endotelio. La constancia en los niveles de ADMA en los grupos deestudio apoya el efecto protector del HDL sobre el endotelio vascular. Se confirma laestabilidad de las poliaminas sanguíneas ante diversos cambios fisiopatológicos.
INTRODUCTION: Hypercholesterolemia increases free oxygen radicals productionand diminishes nitric oxide (NO) biodisponibiliy at endothelium. Both precursorymechanisms of arteriosclerosis. NO, direct derived from arginine through endotelialnitric oxide sintasa (eNOS), assures endothelial function. The oxidized LDL is able tomove eNOS. Other derivatives from arginina, methylarginines and polyamines, couldhave implication in endothelial dysfunction caused by hypercolesterolemia (HC).Statins have antiarterosclerotic effects attributed to antioxidant and antiinflmatoryactions. METHODS: 90 patients; groups: control, hypercholesterolemic (CT>200mg/dL) and treated with statins. Without arteriosclerosis or treatment with nitrates.Parameters determined of arginine metabolism (plasma and urine nitrate, arginine,ADMA, SDMA, L-NMMA, putrescine, spermidine and spermine) and oxidativedamage parameters to lipids (lipidic hidroperoxids and TBARM) and proteins (carbonyland sulphydryl groups). Spectrophotometryc procedures and HPLC were used.RESULTS: Average of quite moderate CT (244 mg/dL) and relatively elevated HDLc(55-60 mg/dL). Our results support the described inactivation of NO by ROS. Arginineand its derivates show tendency to diminish in group HC. Polyamines diminish inhypercholesterolemic group, fact that support its relation with oxidative stress inhypercholesterolemia. Lipidic oxidative stress markers show tendency to increase inhypercholesterolemia, that reaches statistical meaning when dividing by hypertension.Similar results observed with sulfhydryl groups. Carbonyl groups shows clear elevationin both hypercholesterolemic groups, with an excellent correlation with parameters oflipidic metabolism. Statins significantly do not affect any of the analyzed parameters.Although atorvastatina diminishes TBARM and urine nitrate, supporting thehyperproduction of NO as opposed to the oxidative damage in HC. CONCLUSIONS:Associate to hypercholesterolemia exists an oxidative stress, that becomes more evidentwhen comes together with hypertension. Carbonyls would be the most sensible markerof protein oxidative damage in mild HC and patients without aterosclerotic disease. Theanalyzed arginine metabolites aren´t altered in only HC situations. The alteration of NObiodisponibility in HC would be associated to its inactivation by ROS. The diminutionof ADMA in women along with the elevation of urine nitrate levels supports theprotective endothelium effects of estrogens. The stability in ADMA levels supports theprotective endothelium effect of HDL. The stability of sanguineous polyamines isconfirmed as in several fisiopathologycal changes.

ANTECEDENTS:

L'ApoA-II és la segona proteïna més abundant en l'HDL. La proteïna transferidora d' èsters de colesterol (CETP) actúa intercanviant èsters de colesterol per triglicèrids entre les partícules d'HDL i les lipoproteïnes que contenen apoB. El transportador ABCA1 és una proteïna reguladora del flux de colesterol. El transportador ABCG5-G8 és una proteïna reguladora de l'excreció biliar. Totes aquestes son proteïnes que intervenen en la estructura i metabolisme de l'HDL, però es desconeix el seu paper en el transport revers de colesterol específic de macròfags (TRC).

HIPÒTESI DEL TREBALL:

Estudis clínics i epidemiològics han demostrat l'existència d'una relació inversa entre la concentració en plasma de colesterol HDL i el risc de patir malalties cardiovasculars aterotrombòtiques. Aquest efectes cardioprotectors son atribuïts al paper de l'HDL en el TRC, i especialment el transport revers de colesterol específic de macròfags. L'expressió i/o inactivació selectiva de gens en ratolins ha permès d'obtenir una valuosa informació sobre el paper fisiològic d'aquestes proteïnes involucrades en aquest mecanisme potencial de prevenció de l'aterogènesi per part de les HDL. Així la modificació d'aquestes proteïnes en ratolins modificats genèticament ens permetrà estudiar com afecta el TRC i explicar així el paper aterogènic d'aquests ratolins.

CONCLUSIONS:

Del primer article vam concloure que malgrat la deficiència d'HDL que presentaven els ratolins transgènics d'apoA-II humana, el TRC des de macròfags a femtes in vivo funcionava de forma efectiva. Els nostres resultats també suggereixen que l'augment de les lesions arterioscleròtiques trobades en els ratolins transgènics d'apoA-II alimentats amb dieta rica en greixos no són degudes al bloqueig del TRC específic de macròfags. Resultats previs suggereixen que l'apoA-II podria exercir el seu efecte proaterogènic reduint les propietats antioxidants de l'HDL.
Del segon article vam concloure que la deficiència del transportador ABCA-1 en ratolins knockout reduïa el TRC específic de macròfags in vivo. Aquest resultats demostren la importància d'ABCA-1 en aquesta funció antiaterogènica de les HDL i, demostren la possible relació entre la disminució del TRC depenent de macròfags i l'augment de la susceptibilitat a l'arteriosclerosi.
Del tercer article vam concloure que l'expressió de CETP de macaco o humana en ratolins transgènics no afectava al TRC específic de macròfags in vivo ni les propietats antioxidants de l'HDL. L'efecte proaterogènic de l'expressió de CETP en ratolins sembla doncs degut a mecanismes independents d'aquestes dues funcions antiaterogèniques de les HDL.
I finalment, en l'últim article vam concloure que la deficiència del transportador ABCG5/G8 en ratolins knockout no alterava el TRC des de macròfags a femtes in vivo. Tanmateix, l'expressió ABCG5/G8 és necessària per a la inducció del TRC específic de macròfags induït pels agonistes de LXR. Els nostres resultats donen suport a la hipòtesi que aquests transportadors tenen un paper determinant en la fase final d'aquesta via i els confirmen com a dianes moleculars de gran interès per a prevenir o tractar l'arteriosclerosi.
Epidemiological studies have demonstrated that increased HDL is a protective factor against atherosclerotic cardiovascular disease. The evaluation of antiatherogenic functions of HDL is an important area of research which includes the role of HDL in reverse cholesterol transport (RCT), especially macrophage-specific RCT, and its antioxidant and antiinflammatory roles.
The development of transgenic and knockout mice provides us a lot of information about the role of some proteins that are important in these potencial antiatherogenic mechanisms.
We studied four proteins that are important in the HDL metabolism: apoA-II is the second major HDL protein. The action of CETP results in a heteroexchange between HDL cholesteryl ester and VLDL- or chymolicron -triglycerides. The ABCA-1 transporter is a protein that regulates the cholesterol efflux. The ABCG5/G8 transporter is a crucial protein for hepatobiliary and intestinal sterol excretion. Thus, the modification of these proteins in genetical modified mice and the development of a new strategy to mesure the macrophage-specific RCT in vivo permit us to know the atherogenic role of these mice.
We concluded that human apoA-II maintains effective RCT from macrophages to feces in vivo despite an HDL deficiency. These findings suggest that the increased atherosclerotic lesions observed in apoA-II transgenic mice fed an atherogenic diet are not due to impairment in macrophage-specific RCT. The results of the study with ABCA-1 knockout mice provide definitive in vivo evidence of the crucial role of ABCA1 in macrophage-specific RCT. This fact may also indicate, together with previous works, that ABCA1 exerts, at least in part, its antiatherogenic effect by promoting macrophage-specific RCT. The CETP overexpression in transgenic mice does not affect RCT from macrophages to feces in vivo or the protection conferred by HDL against LDL oxidative modification. Finally, the results of the study with ABCG5/G8 demonstrate that the presence of ABCG5/G8 transporters is required for LXR-mediated induction of macrophage-specific RCT, and support the hypothesis that these transporters play a key role in the final step of this pathway. These data also suggest that upregulation of ABCG5/G8 may be an effective strategy to increase macrophage-specific RCT and reduce atherosclerosis.

Tesis (Doctor en Ciencias Químicas) - - Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas, 2019
La aterosclerosis es la enfermedad cardiovascular causal del mayor número de muertes prematuras en la población activa a nivel mundial. Su desarrollo se encuentra vinculado a diversos factores de riesgo como, tabaquismo, sedentarismo, dieta desbalanceada, obesidad, predisposición genética, entre otros. Alguno de estos factores o la combinación de más de uno de ellos conduce a la disfunción del endotelio vascular y la formación de la placa de ateroma llevando al estrechamiento de la luz vascular y los riegos cardiovasculares asociados. En este contexto de disfunción endotelial y aumento de la permeabilidad, la extravasación de monocitos a la íntima de las arterias propicia un microambiente responsable de la oxidación y/o acetilación de las lipoproteínas de baja densidad y de la formación de numerosos lípidos bioactivos. Las lipoproteínas modificadas (LDLm) son incorporadas por los macrófagos tisulares a través de receptores de tipo scavenger, principalmente CD36 y LRP1 (Low Density Lipoprotein Receptor-related Protein 1). La incorporación de LDLm por macrófagos lleva a una retroalimentación positiva en la expresión del receptor CD36 favoreciendo: mayor incorporación de lipoproteínas modificadas, excesiva acumulación intracelular de lípidos y la diferenciación a célula espumosa. CD36 es una glicoproteína de membrana que une diversos ligandos, los cuales pueden ser internalizados o también activar vías de señalización intracelular. Entre sus ligandos, además de las LDLm, se encuentran fosfolípidos oxidados y ácidos grasos de cadena larga los cuales interaccionan con una región rica en aminoácidos hidrofóbicos conocida como dominio de unión a ligandos. En este dominio del receptor se encuentra la Lys164, la cual representa un residuo crítico tanto para iniciar la señalización como para el reconocimiento e internalización de sus ligandos. En el proceso inflamatorio crónico, en el cual se desarrolla la patología, se forman numerosos productos bioactivos derivados de las reacciones mediadas por especies reactivas del oxígeno dentro de los cuales encontramos los ácidos grasos nitrados. La administración de estos nitrolípidos en animales deficientes de apolipoproteina E (ApoE) alimentados con dieta rica en grasas redujo el desarrollo de la placa de ateroma, su contenido inflamatorio y la acumulación de colesterol en la aorta. De la mano con esto, en el presente trabajo de tesis demostramos que el ácido nitro oleico (NO2-OA) modula la expresión de los receptores CD36 y LRP1 a través de diferentes mecanismos y que además, interacciona de manera directa con CD36. Estos resultados fueron confirmados por ensayos in vitro con la proteína recombinante de CD36 e in silico. Dicha interacción, NO2-OA-CD36, inhibió el reconocimiento e internalización de LDLm sugiriendo la participación del residuo Lys164. Estos hallazgos se acompañaron de la reducción en los niveles de colesterol y esteres de colesterol intracelulares en macrófagos RAW264.7 expuestos a LDLm, determinado por espectrometría de masas. Como consecuencia del efecto biológico dual observado por los nitrolípidos sobre CD36, por un lado incrementando su expresión y por otro actuando como ligando de dicho receptor e impidiendo la captación de LDLm, se estudió el efecto de los nitrolípidos sobre mecanismos involucrados en el metabolismo del colesterol y en la evolución de la placa de ateroma. De este modo, mostramos que el NO2-OA incrementó la liberación o eflujo de colesterol al medio de cultivo de manera independiente de los transportadores lipídicos ABC, por un mecanismo que involucraría al flujo autofágico. En conjunto estos resultados muestran como los nitrolípidos participan en la reducción de los depósitos intracelulares de colesterol en macrófagos disminuyendo la incorporación de mLDL, así como también promoviendo mecanismos que están involucrados en la regresión de la placa de ateroma, como es la migración y el eflujo de colesterol en macrófagos. Por lo tanto, los hallazgos del presente trabajo, postulan a los nitrolípidos como mediadores bioactivos con capacidad de regular el metabolismo lipídico de macrófagos que podrían afectar el desarrollo de la placa de ateroma.
2021-12-31
Vazquez, Matías Maximiliano. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas; Argentina.
Bonacci, Gustavo Roberto. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas. Departamento de Bioquímica Clínica. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro de Investigaciones en Bioquímica Clínica e Inmunología; Argentina.
Bregonzio, Claudia. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas. Departamento de Farmacología. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Farmacología Experimental de Córdoba; Argentina.
Daniotti, José Luis. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas. Departamento de Química Biológica; Argentina.
Chiabrando, Gustavo Alberto. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas. Departamento de Bioquímica Clínica. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro de Investigaciones en Bioquímica Clínica e Inmunología; Argentina.
Ramirez, Dario. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto Multidisciplinario de Investigaciones Biológicas de San Luis; Argentina.

Introdução: Mesoterapia com deoxicolato de sódio (DEOXI) é um procedimento minimamente invasivo utilizado para contorno corporal. No Brasil, a Agência Nacional de Vigilância Sanitária (ANVISA) proibiu o uso para este fim, mas ainda é utilizado na redução da gordura subcutânea, mesmo sem estudos sobre a segurança. Objetivo: Avaliar o efeito crônico do DEOXI sobre massa corporal e perfil metabólico em camundongos. Material e métodos: CEUA 1011/2017. Camundongos suissos fêmeas (3 meses) receberam água (C) ou frutose 20% (F) ad libitum por 8 semanas, seguido de 8 aplicações subcutâneas (região inguinal direita) de 100µL salina ou DEOXI 50µg 2x/semana (grupos C/Sal n=7; C/Deoxi n=7; F/Sal n=6 e; F/Deoxi n=6). Analisou-se a massa corporal (MC), glicemia, intolerância à glicose (TOTG), resistência à insulina (IPITT), massa adiposa e hepática, colesterol total (CT) e triglicerídeo (TG) sanguíneo. Dados em média±DP, 2-way ANOVA, pós teste de Tukey, p<0,05 (GraphPad Prism 6.0). Resultados: A análise macroscópica mostrou nódulos fibróticos na gordura inguinal (GI) direita, conforme descrito em humanos. Não houve diferença na MC entre os grupos C e F após 8 semanas (antes das aplicações). As aplicações de DEOXI também não alteraram a MC após 4 semanas. Nos depósitos de tecido adiposo, notou-se um maior peso da gordura genital (GG) no grupo F/Deoxi vs. C/Sal (p<0,05), mas sem diferença entre os grupos na GI direita ou na relação GI/GG. Ingestão de frutose por 8 ou 12 semanas não alterou a glicemia, nem provocou intolerância à glicose ou resistência à insulina (RI) no grupo F/Sal. Também não houve alteração nesses parâmetros nos grupos C/Deoxi e F/Deoxi após 8 aplicações, exceto a RI no grupo C/Deoxi vs. C/Sal (p<0,01). O CT e o TG não se alteraram entre os grupos, assim como o peso hepático. Conclusão: Os dados preliminares não mostraram efeito adverso expressivo sobre o metabolismo de nenhum grupo e a dose escolhida não reduziu a gordura subcutânea no local da aplicação como esperado, porém, foram observados nódulos no local, mostrando a necessidade de mais estudos.