Littérature scientifique sur le sujet « LLA pediatrica »

La traslocazione t(12;21) è il riarrangiamento cromosomico più frequente nei tumori pediatrici e si associa esclusivamente alla leucemia linfoblastica acuta (LLA) a precursori B. La traslocazione avviene in utero nelle cellule staminali-progenitrici ematopoietiche ma è insufficiente per la leuchemogenesi, poiché il gene di fusione ETV6-RUNX1 (E/R) che ne deriva genera un clone pre-leucemico clinicamente silente; mutazioni secondarie sono quindi necessarie per completare la trasformazione. Queste ultime avvengono nel periodo post-natale verosimilmente in seguito ad una risposta immunitaria disregolata a infezioni /infiammazioni comuni. Le recidive E/R+ non sono molto frequenti ma è plausibile che siano determinate dall’accumulo di nuove mutazioni nel clone pre-leucemico chemioresistente. In passato abbiamo dimostrato che TGFβ, una citochina prodotta durante l’infiammazione, limita la proliferazione delle cellule normali pro-B mentre favorisce il clone pre-leucemico che è insensibile al suo effetto; in più, TGFβ seleziona cellule pre-leucemiche staminali in progenitori CD34+ derivati da sangue cordonale umano. Abbiamo anche precedentemente dimostrato che cellule pro-B murine E/R+ mostrano alterazioni in molecole di adesione e nella migrazione verso CXCL12, suggerendo un loro possibile comportamento anomalo all’interno della nicchia midollare. Le cellule mesenchimali stromali (MSC) sono regolatori chiave sia delle cellule ematopoietiche nella nicchia che dell’infiammazione. È stato inoltre dimostrato che alterazioni delle MSC attivano pathways infiammatori nelle cellule staminali/progenitrici del sangue promuovendo la loro trasformazione a leucemia mieloide acuta in sindromi genetiche predisponenti. Grazie a due modelli cellulari esprimenti E/R (la linea cellulare murina proB Ba/F3 e cellule CD34+ di sangue cordonale umano), il presente studio dimostra che le cellule pre-leucemiche sono avvantaggiate dalla copresenza di MSC e infiammazione in termini di migrazione, sopravvivenza e potenziale progressione. Ba/F3 E/R+ mostrano un profilo di espressione genica pro-infiammatorio, con una particolare signature migratoria e pro-mieloide. Inoltre, sia Ba/F3 che CD34+ esprimenti E/R migrano di più verso i surnatanti di MSC infiammate rispetto alle cellule controllo; nel primo caso, la migrazione dipende dal recettore CXCR2. Molto importante, Ba/F3 E/R+ sono favorite rispetto al controllo quando coltivate su MSC e infiammazione, poiché questa condizione diminuisce molto proliferazione e sopravvivenza delle Ba/F3 normali mentre ha effetti minori o assenti sulle pre-leucemiche. Il vantaggio è mediato da fattori solubili, ma né TGFβ né CXCR2 sono implicati. In aggiunta, MSC e infiammazione aumentano il danno genotossico sia nelle Ba/F3 controllo che E/R+, come indicato dagli aumentati livelli di fosforilazione dell’istone H2AX e di espressione dell’enzima AID, il quale è stato dimostrato favorire la transizione da pre-leucemia a leucemia E/R+. Tuttavia, mentre le Ba/F controllo vanno incontro ad apoptosi, le pre-leucemiche resistono accumulando danni genetici che possono favorirne la trasformazione. Infine, infiammazione e MSC cooperano nel far emergere il compartimento CD34+IL7R+ all’interno della popolazione di CD34+ pre-leucemiche, mentre sfavoriscono quello della popolazione normale. Questa osservazione è particolarmente importante alla luce del fatto che tale compartimento rappresenta lo stadio dell’ematopoiesi fetale che è suscettibile all’azione pre-leucemica di E/R. Concludendo, il presente lavoro dimostra che cellule mesenchimali stromali di midollo osseo e infiammazione cooperano nel favorire la persistenza e la possibile progressione del clone pre-leucemico ETV6-RUNX1+. L’elucidazione dei meccanismi che sottendono tale azione favorente potrebbe fornire strategie innovative per l’eradicazione del clone pre-leucemico chemioresistente.<br>Translocation t(12;21) is the most frequent chromosomal rearrangement in pediatric cancers, exclusively leading to B-cell Precursors Acute Lymphoblastic Leukemia (BCP-ALL). Translocation occurs in utero in stem-progenitor cells (HSPC) but it is insufficient for leukemogenesis, since the consequent ETV6-RUNX1 (E/R) fusion gene only generates a silent B-progenitor pre-leukemic clone; additional mutations are thus required for transformation. These latter occur in the post-natal period likely due to dysregulated immune response to common infections/inflammation. Our published data demonstrated that TGFβ, a cytokine produced during inflammation, limited the proliferation of normal pro-B and cells while favoring the insensitive E/R+ clone; moreover, TGFβ selected putative pre-leukemic stem cells (preLSC) in umbilical cord blood (UCB) CD34+ progenitors transduced with the oncogene. On the other hand, we previously showed that ETV6-RUNX1+ murine B-progenitors were altered in adhesion molecules expression and CXCL12-directed migration, suggesting possible dysregulated interactions within the bone marrow (BM) niche. Mesenchymal Stromal Cells (MSC) are key regulators of both HSPC and inflammation in the niche. Importantly, it has been shown that mesenchymal inflammation promotes secondary myeloid leukemia in predisposing syndromes by increasing DNA damage in HSPC, while MSC/BCP-ALL blasts cross-talk profoundly modifies cytokine and chemokine signalling within the niche excluding normal hematopoiesis in favor of leukemia. Taking advantages from two ETV6-RUNX1-expressing cell models (Ba/F3, a murine pro-B cell line, and ETV6-RUNX1-expressing human UCB-CD34+ progenitors) the present PhD study demonstrates that ETV6-RUNX1-expressing cells take advantage from mesenchymal inflammation in terms of migration, persistence and potential progression. In particular, we have found that pre-leukemic Ba/F3 show a peculiar pro-inflammatory gene expression profile characterized by a marked migratory and myeloid signature. Concordantly, ETV6-RUNX1+ Ba/F3 and CD34+ cells preferentially migrate toward inflamed compared to unstimulated BM-MSC supernatants; in case of the first, migration is CXCR2-dependent. Moreover, ETV6-RUNX1+ Ba/F3 are favored compared to controls in presence of BM-MSC and inflammatory cytokines, as they decrease normal cells proliferation and survival while minimally affecting pre-leukemic cells. The effect is mediated by soluble factors, but neither TGFβ nor CXCR2 axis are implicated. Importantly, the inflamed mesenchymal niche increases genotoxic stress in both control and E/R+ Ba/F3, as indicated by high levels of H2AX phoshorilation, as well as transcription of the activation-induced cytidine deaminase (AID) enzyme (which is implicated in ETV6-RUNX1+ pre-leukemia to leukemia transition). However, while control cells go through apoptosis, pre-leukemic Ba/F3 are resistant to this fail-safe mechanism, increasing chance to accumulate secondary mutations and malignantly transform. Finally, an inflamed MSC favor the emergence of CD34+ILR7+ compartment within ETV6-RUNX1+ UCB-CD34+ population while decreasing its frequency in the normal counterpart; of note, such differential effect doesn’t occur in case of unstimulated MSC. This observation is particularly important as the CD34+ILR+ compartment seems to represent the critical developmental stage during early fetal hematopoiesis for ETV6-RUNX1 pre-leukemic activity. Concluding, our work demonstrated that BM-MSC and inflammation cooperate in favoring the persistence and transformation of ETV6-RUNX1+ pre-leukemic clone. Elucidating mechanisms that underlay such promoting action could provide novel strategies for the pre-leukemic clone eradication.

Made available in DSpace on 2014-12-17T15:39:05Z (GMT). No. of bitstreams: 1 DeboraSLS_DISSERT.pdf: 842349 bytes, checksum: edfd0464865223ade8a750fe80589852 (MD5) Previous issue date: 2014-07-11<br>Conselho Nacional de Desenvolvimento Cient?fico e Tecnol?gico<br>The present study investigated the impact of the treatment modalities of Acute Lymphoblastic Leukemia on neurocognitive abilities of children and adolescents survivors, aged between 6 and 16 years of age, accompanied in pediatric oncology sectors of public health services in the cities of Campina Grande-PB and Natal-RN. The study included 52 children, 13 of these being children and adolescents diagnosed with leukemia and 39 healthy children matched in relation to the study group considering gender, age, school type and level of maternal education. Later the group of children with leukemia was subdivided into two subgroups depending on treatment modality which were submitted: Group 1A (only chemotherapy) and 1B (chemotherapy and radiotherapy). All participants were subjected to a battery of neuropsychological tests that investigated the following neurocognitive abilities: intellectual ability, memory system, attention, visuospatiality and visuoconstruction, processing speed and executive functions. Data were analyzed using descriptive and inferential measurements with the aid of the U test of Mann-Whitney and T test, considering the influence of the variables: sex, age at diagnosis, time since completion of treatment and level of schooling mothers, on the performance of children. Overall, it is concluded that the illness and the treatment of acute lymphoblastic leukemia significantly favors the emergence of cognitive deficits, particularly in terms of visuospatial skills, and executive skills visoconstrutivas. In turn, the treatment modality of radiotherapy is associated with the presence of more severe deficits, highlighting the significant impact on the speed of information processing. It is hoped that the results presented here will contribute to a better understanding of the nature and extent of neurocognitive effects arising ALL treatment<br>O presente estudo investigou o impacto das modalidades de tratamento da Leucemia Linf?ide Aguda sobre as habilidades neurocognitivas de crian?as e adolescentes sobreviventes, com faixa et?ria entre 6 e 16 anos de idade, acompanhados nos setores de oncologia pedi?trica de servi?os p?blicos de sa?de das cidades de Campina Grande- PB e Natal-RN. Participaram deste estudo 52 crian?as, sendo destas 13 crian?as e adolescentes diagnosticados com leucemia e 39 crian?as saud?veis pareadas em rela??o ao grupo de estudo considerando-se o sexo, idade, tipo de escola e n?vel de escolaridade materna. Posteriormente o grupo de crian?as com leucemia foi subdividido em dois subgrupos em fun??o da modalidade de tratamento as quais foram submetidos: Grupo 1A (exclusivamente tratamento quimioter?pico) e 1B (tratamento quimioter?pico e radioter?pico). Todos os participantes foram submetidos ? bateria de testes neuropsicol?gicos que investigou as seguintes habilidades neurocognitivas: capacidade intelectiva, sistema mnem?nico, aten??o, visoespacialidade e visoconstru??o, velocidade de processamento e fun??es executivas. Os dados foram analisados atrav?s de medidas descritivas e inferenciais com o aux?lio do Teste U de Mann-Whitney e do Teste t, considerando-se a influ?ncia das vari?veis: sexo, idade ao diagn?stico, tempo decorrido desde o t?rmino do tratamento e n?vel de escolariza??o das m?es, sobre o desempenho das crian?as. De forma geral, conclui-se que o adoecimento e o tratamento da leucemia linfoide aguda favorece significativamente o surgimento de d?ficits cognitivos, em especial em termos de habilidades visoespaciais, visoconstrutivas e habilidades executivas. Por sua vez, a modalidade de tratamento da radioterapia est? associada ? presen?a de d?ficits mais severos, com destaque para o impacto significativo sobre a velocidade no processamento da informa??o. Espera-se que os resultados ora apresentados venham a contribuir para uma melhor compreens?o acerca da natureza e da extens?o dos efeitos neurocognitivos advindos do tratamento da LLA

Made available in DSpace on 2014-12-17T15:38:52Z (GMT). No. of bitstreams: 1 EdianaROG_DISSERT.pdf: 2182777 bytes, checksum: a6c802e96d340606dfb3cbb335b79787 (MD5) Previous issue date: 2011-04-01<br>The present work investigated the cognitive operation of children diagnosed with acute lymphoblastic leukaemia (ALL), accompanied at pediatric oncologic institutions at the city of Natal/RN. Had participated in this study twenty children, of both sexes, between six and twelve years old, with the ALL diagnostic, who were in treatment (n=10) and out of treatment for at least one year (n=10) and were submitted exclusively to chemotherapy as CNS prophylaxis. The utilized protocol of neuropsychological evaluation covered the following cognitive abilities: intellective capability, attentional and memory systems, and executive functions. Data was analyzed through descriptive and inferential measures, with the support of the Mann-Whitney U Test and T-test, considering the influence of the variables sex, age at diagnostic and the past time since the beginning of the treatment over children s performance. The intellective capability evaluation showed low score to the out-of-treatment groups, female and children under five years old to the diagnostic. In concern of attentional systems, groups showed the expected performance. In a relevant way, in the evaluation of executive functions, were found reduced scores within all groups, especially inside the in-treatment group. Memory evaluation pointed to reduced performance in items concerning to learning evolution and spontaneous evocation after interference to the several groups. It can be concluded, reffer to the occurrence of transitory and permanent impact associated to the intrusion of chemotherapic components during the maturational course of the CNS. It s expected that the present investigation and the development of similar studies enable major comprehension about the mode, extension and repercussion of these damages subsidizing the development of strategies which may minimize them and provide better xxiii life quality to this clinical subgroup<br>O presente trabalho investigou o funcionamento cognitivo de crian?as diagnosticadas com Leucemia Linf?ide Aguda (LLA) acompanhadas por institui??es oncol?gicas pedi?tricas no munic?pio de Natal/RN. Participaram deste estudo 20 crian?as diagnosticadas com LLA, de ambos os sexos, com idades entre seis e doze anos, que estavam em tratamento (n=10) e fora de tratamento h? pelo menos 1 ano (n=10), submetidas exclusivamente ? quimioterapia como profilaxia do SNC. O protocolo de avalia??o neuropsicol?gica utilizado contemplou as seguintes habilidades cognitivas: capacidade intelectiva, sistemas atencionais e de mem?ria e fun??es executivas. Os dados foram analisados atrav?s de medidas descritivas e inferenciais com o aux?lio do Teste U de Mann-Whitney e do Teste t, considerando-se a influ?ncia das vari?veis sexo, idade ao diagn?stico e tempo decorrido desde o in?cio do tratamento sobre o desempenho das crian?as. A avalia??o da capacidade intelectiva revelou baixas pontua??es para os grupos fora de tratamento, sexo feminino e crian?as menores de cinco anos ao diagn?stico. Quanto aos sistemas atencionais os grupos apresentaram desempenho dentro do esperado. De forma relevante, na avalia??o das fun??es executivas foram encontradas pontua??es reduzidas em todos os grupos, com destaque para o grupo em tratamento. A avalia??o da mem?ria indicou desempenho rebaixado em itens concernentes ? evolu??o da aprendizagem e evoca??o espont?nea ap?s interfer?ncia para os diversos grupos. Conclui-se que estas informa??es aludem ? ocorr?ncia de impactos transit?rios e permanentes associados ? intrus?o de componentes quimioter?picos no curso maturacional do SNC. Espera-se que a presente investiga??o e o desenvolvimento de estudos semelhantes possibilitem maior compreens?o acerca da modalidade, extens?o e repercuss?o de tais preju?zos, subsidiando o desenvolvimento de xxi estrat?gias que possam minimiz?-los e proporcionar maior qualidade de vida para este subgrupo cl?nico

La Leucemia Linfoblastica Acuta (LLA) è il tumore più frequente in età pediatrica. Nonostante l’alto successo terapeutico raggiunto, una percentuale di pazienti non risponde alle terapie convenzionali. Numerosi studi hanno mostrato come il microambiente midollare giochi un importante ruolo nella progressione tumorale. Il nostro scopo è stato quello di identificare i pahways cruciali coinvolti nel cross-talk tra le cellule leucemiche e il microambiente stromale e che possano essere dei potenziali target terapeutici. Abbiamo studiato AttivinaA, molecola della superfamiglia del TGF-β, all’interno della nicchia midollare leucemica. Questa molecola è nota nel contesto dei tumori solidi per la sua capacità di promuovere la progressione tumorale attraverso la regolazione della motilità e invasività cellulare. Abbiamo qui definito per la prima volta AttivinaA come un fattore associato alla leucemia: all’esordio di leucemia, questa molecola è altamente espressa nel midollo leucemico e risulta essere prodotta a più alti livelli dalle cellule stromali mesenchimali (MSC) in seguito a co-coltura con le cellule leucemiche. Anche nel contesto della B-LLA, abbiamo dimostrato che AttivinaA promuove la motilità ed invasività cellulare in presenza o meno del fattore chemiotattico CXCL12, fondamentale nella localizzazione delle cellule staminali ematopoietiche (HSC) e delle cellule leucemiche all’interno della nicchia midollare. In particolare, il meccanismo d’azione di AttivinaA dipende dall’incremento dei livelli di calcio intracellulare e della polimerizzazione dell’actina che sono importanti regolatori della riorganizzazione del citoscheletro e del movimento cellulare. Interessante, AttivinaA modula in modo specifico le proprietà biologiche delle cellule leucemiche in quanto svolge un effetto contrario sulle HSC, favorendo quindi le cellule leucemiche nella competizione per la nicchia. Come già riportato in letteratura, abbiamo trovato livelli ridotti di CXCL12 nel midollo leucemico e abbiamo osservato che AttivinaA è responsabile almeno in parte di questa riduzione a causa di un suo effetto diretto sulla secrezione della chemochina da parte delle MSC. Tuttavia, essendo AttivinaA capace di aumentare la migrazione cellulare anche verso concentrazioni subottimali di CXCL12, questi dati suggeriscono un possibile meccanismo tramite il quale le cellule leucemiche persistono all’interno della nicchia midollare distruggendo l’ematopoiesi sana. I nostri dati in vitro circa il ruolo pro-migratorio e pro-invasivo di AttivinaA sono stati confermati anche in vivo. I processi di regolazione dei flussi di calcio e della riorganizzazione del citoscheletro da parte di AttivinaA sono importanti per stimolare anche la vescicolazione da parte delle cellule. Abbiamo dimostrato che AttivinaA è in grado di aumentare il rilascio di vescicole extracellulari (VE) da parte delle cellule di B-LLA. Tali vescicole trasportano al loro interno l’oncogene t(1;19), tipico delle cellule dalle quali esse originano. Sia AttivinaA sia le VE da essa indotte conferiscono chemioresistenza alle cellule leucemiche, diminuendo in maniera significativa la loro sensibilità al farmaco Asparaginasi, che viene poi ripristinata bloccando la via di segnalazione di AttivinaA. Il meccanismo alla base della chemioprotezione esercitata dalle VE può essere spiegato dalla presenza al loro interno di microRNA differenzialmente espressi in seguito al trattamento con AttivinaA, tra cui il miRNA-491-5p precedentemente associato a chemioresistenza all’Asparaginasi nella leucemia pediatrica. Complessivamente, i nostri dati suggeriscono che AttivinaA è una molecola chiave della nicchia leucemica, che conferisce un vantaggio migratorio alle cellule leucemiche e le protegge dai farmaci convenzionali attraverso la produzione di VE. Il nostro lavoro potrebbe portare dunque allo sviluppo di nuovi farmaci in grado di agire sul cross-talk stroma-leucemia.<br>Acute Lymphoblastic Leukemia (ALL) is the most common type of cancer in children. About 80% of the cases arises from precursor B cells (BCP-ALL), which abnormally accumulate as a consequence of genetic alterations associated to differentiation inhibition and abnormal expansion. Despite the 85% survival rate, a total of 10-15% of patients retains leukemic stem cells and their progenitors in the bone marrow (BM), thereby relapsing following treatment cessation. The importance of BM microenvironment for cancer progression has been widely recognized in recent years. In this study, we aimed to identify the crucial pathways involved in the bi-directional leukemia-stroma cross-talk that could be an attractive target for future antileukemic therapy. We focused our attention on the characterization of ActivinA, a TGF-β family member, within the BM leukemic niche. Here, we identified ActivinA as a new crucial factor exploited by leukemic cells to create a self-reinforcing niche: indeed, this molecule was highly expressed in the BM plasma of leukemic patients. Furthermore, we reported that BCP-ALL cells, along with the highly pro-inflammatory environment of leukemic BM, induced a strong increase in the molecule secretion by Mesenchymal Stromal Cells (MSCs). In accordance with its protumoral role in solid tumors, ActivinA strongly induced both random and CXCL12-driven migration of cells also in the context of BCP-ALL. We observed that ActivinA selectively stimulated these leukemic cell biological properties with a calcium- and actin polymerization-mediated mechanism as this molecule showed an opposite effect on Hematopoietic stem cells (HSCs). According to the literature, we found reduced CXCL12 levels in the leukemic BM, but ActivinA enhanced cell migration also towards suboptimal CXCL12 concentrations, suggesting a possible mechanism by which leukemic cells could persist in the BM niche, displacing healthy hematopoiesis. Our in vitro data about the pro-migratory and pro-invasive role of ActivinA were confirmed also in vivo. By using a xenograft mouse model of human BCP-ALL, we demonstrated the ability of ActivinA to enhance both BM engraftment and metastatic potential intro extra-medullary sites of leukemic cells. Notably, the regulation of calcium influx and cytoskeleton organization by ActivinA is an important process to stimulate also cell vesiculation. Recent studies have shown that cancer extracellular vesicles (EVs) can mediate cell-cell communication and potentially contribute to tumor progression. Therefore, we investigated whether ActivinA was able to influence vesiculation by leukemic cells. We demonstrated that ActivinA increased the production of both exosomes and MVs by BCP-ALL cells. We found that EVs transport the t(1;19) fusion transcript, typical of cells from which they originate. We then studied the biological effects by which ActivinA-induced leukemia EVs can actively promote BCP-ALL disease, focusing our attention on resistance to therapy. Firstly, we demonstrated that ActivinA significantly decreased the sensitivity of leukemic cells to the anti-leukemic drug Asparaginase (ASNase) which was re-stored by blocking ActivinA signaling. Interestingly, also ActivinA-induced leukemia EVs conferred resistance to leukemic cells. To understand the mechanism underlying EV chemoprotection, we explored their miRNA cargo and identified differentially expressed miRNAs induced by ActivinA treatment. Of these, miR-491-5p has been previously reported to be associated with ASNase chemoresistance in childhood leukemia. The discovery of ActivinA signaling between BCP-ALL cells and MSCs adds significant insights into the mechanisms of communication in the leukemic niche. Moreover, ActivinA-induced leukemia EVs seem to play a crucial role in sustaining leukemic cells, by conferring them drug resistance. Our data provide a new concept to develop alternative therapeutic strategies that include targeting of the leukemic niche in BCP-ALL.

Made available in DSpace on 2014-12-17T14:46:46Z (GMT). No. of bitstreams: 1 IsabellePM_DISSERT.pdf: 1853141 bytes, checksum: c1b9542a45d8048b614bdda01b92d40c (MD5) Previous issue date: 2010-12-17<br>Conselho Nacional de Desenvolvimento Cient?fico e Tecnol?gico<br>The accompanying the growth and development of the child is the guiding line of basic health measures directed at this public, acting within the scope of health monitoring and inferring positively in the rate of infant morbidity and mortality, which are still a preoccupation worldwide and in Brazil. However, mostly, this practice is based on the biomedical model of care, individualized, with emphasis on the medicalization and complaints, favoring the passivity of users. Given this issue, aim to develop accompanying the growth and development of the child in a Basic Unit Family Health, through a collective approach of medical care next to a health team, especially nurses and caregivers. This is a qualitative study, with the research-action method. Involved the four nurses and twenty-six of children's caregivers of the area of Basic Unit Family Health of Cidade Nova, in Natal, in the period from February to July 2010. The results were analyzed following the direction of the thematic analysis of Freire. In the situation analysis of the current reality of the accompanying the growth and development the children in the Basic Unit Family Health, through participant observation and applying a questionnaire to the nurses, we realize that despite these professionals have a knowledge tied to the paradigm of health promotion, in practice the monitoring of child is done through individual consultations in outpatient room, based on complaints brought by caregivers, with little solvability in actions employed. Given the need for change in medical care model, we decided jointly, in the focal group, for the collective monitoring of children's the growth and development, featuring then this proposal to the multidisciplinary team, discussing the participation of professional categories and planned collectively the actions. In the implementation stage of collective action, we contemplate the execution by the caregivers of anamnesis and physical examination, recording data in the Child Health Handbook and discussion of clinical findings, under the supervision of nurses and facilitators. In the evaluation, we found that this collective accompanying strategy allowed to caregivers learn new knowledge, exchange experiences, assistance in home care, beyond reduce the waiting time for medical care and creating opportunity of more time for debate about the children&#8223;s health situation, differing of ambulatory care. As difficulties, we face with a high rate of defaulters (53.8%), lack of motivation and passivity of the users, little participation of other health professionals and nurses' involvement in other activities, technical and bureaucratic in the moment of care. Thus, we note also a strong rooting of individual clinical model on the way of thinking and acting of nurses and caregivers<br>O acompanhamento do Crescimento e do Desenvolvimento (CD) da crian?a ? o eixo norteador das a??es b?sicas em sa?de voltadas para essa clientela, atuando no ?mbito da vigil?ncia ? sa?de e inferindo positivamente nos ?ndices de morbidade e de mortalidade infantil, que ainda hoje s?o uma preocupa??o no mundo e no Brasil. Por?m, na maioria das vezes, essa pr?tica ? pautada no modelo biom?dico de atendimento, individualizado, com ?nfase nas queixas e medicaliza??o, favorecendo a passividade dos usu?rios. Diante dessa problem?tica, objetivamos desenvolver o acompanhamento do CD da crian?a em uma Unidade B?sica de Sa?de da Fam?lia (UBSF), atrav?s de uma abordagem coletiva de atendimento junto ? equipe de sa?de, em especial as enfermeiras, e cuidadoras. Trata-se de um estudo qualitativo, tendo como m?todo a pesquisa-a??o. Envolveu as quatro enfermeiras e vinte e seis cuidadoras de crian?as da ?rea de abrang?ncia da UBSF de Cidade Nova, no munic?pio de Natal, no per?odo de fevereiro a julho de 2010. Os dados foram analisados seguindo o direcionamento da an?lise tem?tica freireana. No diagn?stico situacional da realidade atual de acompanhamento do CD das crian?as na referida UBSF, atrav?s da observa??o participante e aplica??o de question?rio junto as enfermeiras, percebemos que apesar dessas profissionais terem um conhecimento atrelado ao paradigma de promo??o ? sa?de, na pr?tica o acompanhamento da crian?a ? feito atrav?s de consultas individuais em sala ambulatorial, pautado nas queixas trazidas pelas cuidadoras, com pouca resolubilidade nas a??es empregadas. Vista a necessidade de mudan?a no modelo de atendimento, decidimos conjuntamente, no grupo focal, pelo acompanhamento coletivo do CD das crian?as, apresentando, em seguida, essa proposta ? equipe multiprofissional, sendo discutida a participa??o das categorias profissionais e planejadas coletivamente as a??es. Na etapa de implementa??o da a??o coletiva, contemplamos a execu??o pelas cuidadoras da anamnese e exame f?sico, registro dos dados na Caderneta de Sa?de da Crian?a e discuss?o dos achados cl?nicos, sob supervis?o das enfermeiras e facilitadoras. Na avalia??o, constatamos que essa estrat?gia de acompanhamento coletivo permitiu ?s cuidadoras a aprendizagem de novos conhecimentos, a troca de experi?ncias, o aux?lio nos cuidados domicili?rios, al?m de diminuir o tempo de espera pelo atendimento e oportunizar maior tempo de discuss?o sobre a situa??o de sa?de das crian?as, diferenciando-se do atendimento ambulatorial. Como dificuldades, deparamos-nos com o alto ?ndice de faltosos (53,8%), falta de motiva??o e passividade das usu?rias, pouca participa??o de outros profissionais de sa?de e envolvimento das enfermeiras em outras atividades t?cnicas e burocr?ticas no momento do atendimento. Assim, constatamos ainda um forte enraizamento do modelo cl?nico individual no modo de pensar e agir das enfermeiras e das cuidadoras

Made available in DSpace on 2014-12-17T14:47:06Z (GMT). No. of bitstreams: 1 FernandaCM_DISSERT.pdf: 1137756 bytes, checksum: 7cb24bccd724ebccb062ea10fea94d2d (MD5) Previous issue date: 2014-02-26<br>Coordena??o de Aperfei?oamento de Pessoal de N?vel Superior<br>Popular practices correspond to the resources used by households, lay people and popular therapists, whose perception of knowledge is constructed in the everyday. In this context, the sick child can become vulnerable to be dependent on a family caregiver, who often decide to employ popular practices. Thus, the child care should be shared between carer and health professional. However, they know little about the resources that the family uses to detect a grievance in infant. Therefore, the present research aimed to analyse the use of popular practices by caregivers of children with zero to five years old. We conducted an exploratory and descriptive study with a qualitative approach, together with 15 caregivers of children who were treated at the Joint Unit Felipe Shrimp, located in Natal, Rio Grande do Norte, Brazil. To select the participants, they should be age and above 18 years; be caregivers of children up to five years of age; and reside in the area ascribed the Joint Unit Felipe Shrimp. The data collection took place between September and October 2013, through in depth interview. This step was preceded by the approval of the Health Department of the city of Natal; the direction of the Joint Unit Felipe Shrimp; as well as, the Committee on Ethics in Research from the Federal University of Rio Grande do Norte with Certificate of Presentation and Consideration Ethics, No 15467013.8.0000.5537. Furthermore, the interviewees formally authorized their participation in the research by signing the consent form. The data were treated according to the technique of content analysis in the form of thematic analysis according to Bardin. This process, four categories emerged: "Types of popular practices used in the care of the child"; "Source of information of popular practices"; "Results obtained with popular practices"; "Factors that hinder the adoption of common practices." The results showed the use of popular practices by caregivers in the case of illness to children such as the homemade preparations with medicinal plants and folk healers. The family environment was referenced as the main learning space and spread of popular practices, which are influenced by cultural relations present in this context. As to the results obtained with popular features, the caregivers said to be satisfactory, and this triggers a feeling of confidence and acceptability of such measures. It is concluded that the use of popular practices in child care persists in everyday most of the participants, despite the hegemony of allopathic therapy. The caregivers stated that such practices are effective and easy to obtain, being secured in context by popular culture. In addition, health professionals, especially nurses, were seldom mentioned by the caregivers as to the information concerning popular resources used by them, which suggests the weakness in dialogic process of negotiating practices between both of them<br>As pr?ticas populares correspondem aos recursos utilizados pelas fam?lias, pessoas leigas e terapeutas populares, cuja apreens?o do saber se constr?i no cotidiano. Nesse contexto, a crian?a doente pode se tornar vulner?vel por estar na depend?ncia de um cuidador familiar, o qual, muitas vezes decide empregar pr?ticas populares. Assim, o cuidado ? crian?a deveria ser compartilhado entre cuidador e profissional de sa?de. Entretanto, estes pouco sabem sobre os recursos que a fam?lia emprega ao perceber algum agravo no infante. Diante disso, a pesquisa em apre?o objetivou analisar o uso de pr?ticas populares por cuidadoras de crian?as com zero a cinco anos de idade. Realizou-se um estudo explorat?rio e descritivo, com abordagem qualitativa, junto a 15 cuidadoras de crian?as, que eram atendidas na Unidade Mista de Felipe Camar?o, localizada no munic?pio de Natal, Rio Grande do Norte, Brasil. Para escolha das participantes, estas deveriam ter idade igual ou superior a 18 anos; ser cuidadora de crian?a(s) com at? cinco anos de idade; e, residir na ?rea adscrita da Unidade Mista de Felipe Camar?o. A coleta de dados ocorreu entre os meses de setembro e outubro de 2013, por meio da entrevista em profundidade. Esta etapa foi antecedida pela anu?ncia da Secretaria de Sa?de do munic?pio de Natal; da dire??o da Unidade Mista de Felipe Camar?o; bem como, do Comit? de ?tica em Pesquisa da Universidade Federal do Rio Grande do Norte, com Certificado de Apresenta??o e Aprecia??o ?tica, n? 15467013.8.0000.5537. Al?m disso, as entrevistadas autorizaram formalmente a participa??o na pesquisa, atrav?s da assinatura do Termo de Consentimento Livre e Esclarecido. Os dados foram tratados conforme a t?cnica de An?lise de Conte?do na modalidade de an?lise tem?tica, segundo Bardin. Deste processo, emergiram quatro categorias: Tipos de pr?ticas populares utilizadas nos cuidados com a crian?a ; Fonte de informa??es das pr?ticas populares ; Resultados obtidos com as pr?ticas populares ; Fatores que dificultam a ado??o de pr?ticas populares . Os resultados revelaram a utiliza??o de pr?ticas populares pelas cuidadoras, nos casos de adoecimento da crian?a, a exemplo: das prepara??es caseiras com plantas medicinais e da rezadeira. O ambiente familiar foi referenciado como principal espa?o de aprendizado e propaga??o das pr?ticas populares, as quais s?o influenciadas pelas rela??es culturais presentes nesse contexto. Quanto aos resultados obtidos com os recursos populares, as cuidadoras afirmaram ser satisfat?rios, e isto desencadeia um sentimento de confian?a e aceitabilidade de tais medidas. Conclui-se, que o uso de pr?ticas populares no cuidado ? crian?a persiste no cotidiano da maioria das fam?lias estudadas, apesar da hegemonia da terapia alop?tica. As cuidadoras afirmaram que tais pr?ticas s?o eficazes e de f?cil obten??o, estando asseguradas no seu contexto pela cultura popular. Al?m disso, os profissionais de sa?de, sobretudo os enfermeiros, foram pouco citados pelas cuidadoras quanto ?s informa??es referentes aos recursos populares utilizados por elas, o que sugere a fragilidade no processo dial?gico e de negocia??o de pr?ticas entre ambos

Tese de mestrado, Oncobiologia, Faculdade de Medicina, Universidade de Lisboa, 2015<br>Acute lymphoblastic leukemia (ALL) is the most frequent childhood malignancy and it is characterized by the accumulation of immature lymphoid cells within the bone marrow and lymphoid tissues. Approximately 85% of pediatric ALL patients have a B-cell phenotype (B-ALL), and, despite significant improvements in treatment outcome, around 10-20% still relapse. Thus, there is a clear need for new prognostic factors capable of accurately predicting response to therapy. PI3K/Akt/mTOR and JAK/STAT5 pathways are extensively implicated in cancer. Both cell-autonomous factors and microenvironmental cues, such as interleukin 7 (IL-7), contribute to the activation of these pathways in ALL. However, it remains to be determined whether their activation status has a prognostic value in this malignancy. In the current thesis, we proposed to tackle this issue by analyzing the phosphorylation levels of key elements of both pathways in a retrospective cohort (n=58) of pediatric B-ALL cases. Methodologically, we decided to use phospho-flow cytometry, given its potential applicability in clinical diagnostics. Overall, our results show that pediatric B-ALL samples display significant interpatient heterogeneity in the constitutive and IL-7-triggered levels of PI3K/Akt/mTOR and JAK/STAT5 pathway activation. Interestingly, we found that the response to IL-7 does not correlate with the levels of IL-7 receptor α expression. Most importantly, correlation of basal activation levels of both pathways with clinical features with known prognostic value revealed that higher constitutive levels of phosphorylation of S6 on S235/236 and Akt on S473, but not on T308, are associated with higher white blood cell counts. These results suggest the existence of two independent mechanisms leading to Akt activation in ALL, with different biological outcomes. Overall, our preliminary results suggest that there is a positive association of high Akt S473 and S6 S235/236 phosphorylation levels with high risk, which is often associated with a poor prognosis<br>A leucemia linfoblástica aguda (LLA) é o cancro mais frequente em crianças, apresentando um pico de incidência entre os 2 e os 5 anos de idade. Esta doença caracteriza-se pela expansão clonal descontrolada e consequente acumulação de linfócitos imaturos na medula óssea, com posterior infiltração de outros órgãos. O subtipo mais comum de LLA é a leucemia linfoblástica aguda de células B (LLA-B), constituindo cerca de 85% dos casos pediátricos e 75% dos casos adultos. Os tratamentos actuais apresentam uma elevada eficácia e aproximadamente 80% dos doentes pediátricos apresentam-se livres de doença 5 anos após o início do tratamento. Contudo, cerca de 10-20% dos doentes sofrem recidivas, frequentemente associadas a complicações a longo prazo, resultantes da elevada toxicidade dos tratamentos. Existem vários factores de prognóstico em LLA pediátrica essenciais para definir o tratamento mais adequado dos doentes, incluindo idade, contagem de leucócitos na fase de diagnóstico e presença de anomalias citogenéticas (trissomia 21 ou cromossoma de Filadélfia). Um factor de grande importância para a progressão da doença é a activação de vias de transdução de sinal fundamentais. Sabe-se, por exemplo, que mutações em elementos destas vias podem afectar a resposta dos doentes ao tratamento. No entanto, e apesar da contribuição destas vias para o desenvolvimento de LLA-B, o seu valor prognóstico não é conhecido. Importa salientar que a caracterização da activação das vias de transdução de sinal à data do diagnóstico poderá auxiliar na escolha de terapias mais específicas, com consequente aumento da eficácia e diminuição da toxicidade do tratamento. As vias de sinalização PI3K/Akt/mTOR and JAK/STAT5 têm sido amplamente implicadas em cancro de um modo geral e, em particular, em LLA. A via PI3K/Akt/mTOR encontra-se constitutivamente hiperactivada em doentes pediátricos com leucemia linfoblástica aguda de células T (LLA-T), promovendo a viabilidade das células leucémicas. Foi também demonstrado que esta via é activada pela citocina IL-7 (que se encontra presente no microambiente tumoral), modulando a resistência das células leucémicas face à quimioterapia. A corroborar este facto, diferentes estudos indicam que a citocina IL-7 é capaz de modular, tanto in vitro como in vivo, a resposta das células de LLA-B a inibidores farmacológicos de mTOR (Rapamicina). Existe igualmente evidência a nível genético que apoia um possível valor prognóstico para esta via em LLA. Vários estudos realizados em LLA-T mostram que mutações ou delecções que levam à inactivação do principal regulador negativo da via, o supressor tumoral PTEN, estão associadas a um pior prognóstico. Este regulador pode ainda estar sujeito a inactivação pós-tradução, um processo bastante frequente tanto em LLA-T como em LLA-B. Tal como a via PI3K/Akt/mTOR, a via de sinalização JAK/STAT5 é activada em resposta a estimulação com IL-7, ou quando o receptor desta citocina, IL-7R, se encontra constitutivamente activado devido a mutações. O principal papel desta via no desenvolvimento de LLA-B tem sido maioritariamente demonstrado pela activação constitutiva do factor de transcrição STAT5 a jusante da translocação BCR-ABL. Doentes com esta translocação, conhecidos como Filadélfia-positivos, apresentavam outrora muito mau prognóstico, uma situação resolvida com a inclusão no tratamento de terapias direccionadas especificamente para BCR-ABL, entre as quais o Imatinib foi o primeiro exemplo. Tendo em conta as razões acima descritas, o principal objectivo desta tese é determinar, pela primeira vez, se o estado de activação das vias de sinalização PI3K/Akt/mTOR e JAK/STAT5 tem valor prognóstico em LLA-B pediátrica. Para responder a esta questão, avaliaram-se os níveis de fosforilação de elementos chave de cada uma das vias de transdução de sinal num grupo retrospectivo (n=58) de casos pediátricos de LLA-B provenientes do Departamento de Pediatria do Instituto Português de Oncologia de Lisboa Francisco Gentil (IPOLFG). Para determinar o estado de activação de PI3K/Akt/mTOR analisaram-se os níveis de fosforilação de Akt e de S6, um alvo de mTOR; quanto à segunda via, JAK/STAT5, avaliou-se o nível de fosforilação de STAT5. Estes níveis foram medidos tanto basalmente como após estimulação com IL-7, utilizando citometria de fluxo (phosphoflow cytometry). Posteriormente, e uma vez que dispomos dos dados clínicos de todos os doentes utilizados neste estudo, correlacionaram-se os valores de fosforilação obtidos com os parâmetros clínicos com valor prognóstico, tais como idade, contagem de leucócitos à data do diagnóstico e doença residual mínima após a terapia de indução. Correlacionaramse, também, com o estado de maturação de LLA-B (classificação de EGIL), com o objectivo de melhor compreender a biologia da doença. Adicionalmente a esta análise molecular, procedeu-se a uma análise funcional onde se avaliou a sensibilidade de cada amostra primária à citocina IL-7, medindo parâmetros como a viabilidade e a proliferação das células primárias em resposta à IL-7. Mediram-se, ainda, os níveis de expressão da subunidade α do IL-7R (IL-7Rα) nestas amostras, com o intuito de os correlacionar tanto com os resultados moleculares como com os funcionais. É importante referir que a metodologia phospho-flow cytometry foi seleccionada tendo por base a enorme quantidade de informação passível de ser obtida através da análise de uma única célula, e também por facilmente poder ser introduzida como técnica de diagnóstico em contexto clínico num futuro próximo. Na verdade, a técnica de citometria de fluxo já é actualmente utilizada na clínica para proceder à sub- lassificação dos doentes com LLA com base no imunofenótipo das células. Tendo em conta os nossos resultados, demonstrou-se que as amostras pediátricas de LLA-B são bastante heterogéneas no que diz respeito aos níveis de activação constitutiva das vias de transdução de sinal PI3K/Akt/mTOR e JAK/STAT5. Verificou-se, também, que a estimulação com IL-7 induz um aumento de activação de ambas as vias, embora com grande variabilidade entre as amostras. Quanto à análise funcional, e em concordância com o que já se tinha observado, a maioria das amostras primárias é sensível à estimulação com IL-7, traduzindo-se num aumento de viabilidade e proliferação celular. No que diz respeito aos níveis de expressão do IL-7Rα, também eles bastante variáveis, verificou-se que os mesmos não se correlacionam com os resultados moleculares e/ou funcionais. Isto é, níveis elevados de expressão do receptor não se traduzem necessariamente em maior activação das vias após estimulação com IL-7, nem num maior aumento de viabilidade ou proliferação celular. Para terminar, procedeu-se à correlação dos níveis de activação de ambas as vias de sinalização, tanto basais como após estimulação com IL-7, com as características clínicas anteriormente mencionadas. Não se encontrou nenhuma correlação significativa quando os níveis de activação foram comparados com a idade, o estado de maturação ou a doença residual mínima. Curiosamente, níveis basais elevados de fosforilação de S6 nas serinas 235 e 236 e de Akt na serina 473 (mas não na treonina 308) correlacionam-se com níveis elevados de leucócitos no diagnóstico que, por sua vez, estão associados a um risco elevado. Compararam-se, também, os níveis de expressão do IL-7Rα com os mesmos parâmetros clínicos e, embora não se tenha encontrado nenhuma associação significativa, existe uma tendência para níveis elevados de expressão em crianças com idade igual ou superior a 10 anos, normalmente associada a um pior prognóstico. Concluindo, estes resultados, embora preliminares, parecem sugerir uma possível associação entre níveis elevados de fosforilação de S6 (serinas 235 e 236) e Akt (serina 473) e risco elevado, que se encontra normalmente associado a um mau prognóstico. O facto de esta correlação apenas abranger a fosforilação de Akt na serina 473, e não a na treonina 308, aponta para possível existência de dois mecanismos de activação de Akt em LLA, afectando diferencialmente os dois resíduos com consequências biológicas distintas. É nossa intenção repetir as análises realizadas neste estudo num maior número de amostras primárias, com o objectivo de validar as conclusões apresentadas nesta tese.