Thèses sur le sujet « Bacillus subtili »

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1

Kuntumalla, Srilatha. « Patterns of reactivity of lantibiotics subtilin and nisin with molecular targets in Bacillus cereus and Bacillus subtilis 168 ». College Park, Md. : University of Maryland, 2005. http://hdl.handle.net/1903/2190.

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Résumé :
Thesis (Ph. D.) -- University of Maryland, College Park, 2005.
Thesis research directed by: Molecular and Cell Biology. Title from t.p. of PDF. Includes bibliographical references. Published by UMI Dissertation Services, Ann Arbor, Mich. Also available in paper.
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2

Beijer, Lena. « The glycerol regulon in Bacillus subtilis ». Lund : Dept. of Microbiology, Lund University, 1994. http://catalog.hathitrust.org/api/volumes/oclc/39775845.html.

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3

Svensson, Birgitta. « Heme A synthesis in bacillus subtilis ». Lund : Dept. of Microbiology, University of Lund, 1995. http://books.google.com/books?id=RwdrAAAAMAAJ.

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4

Hägerhäll, Cecilia. « On the structure and function of succinate:quinone oxidoreductase using Bacillus subtilis as model organism ». Lund : Dept. of Microbiology, University of Lund, 1994. http://books.google.com/books?id=C-5qAAAAMAAJ.

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5

Hansson, Mats. « Tetrapyrrole synthesis in Bacillus subtilis ». Lund : Dept. of Microbiology, Lund University, 1994. http://books.google.com/books?id=pJBqAAAAMAAJ.

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6

Shariati, Parvin. « Nitrate respiration in Bacillus licheniformis and Bacillus subtilis ». Thesis, Heriot-Watt University, 2004. http://hdl.handle.net/10399/350.

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7

Le, Thi Tam. « Proteomic signatures of Bacillus subtilis ». [S.l.] : [s.n.], 2006. http://deposit.ddb.de/cgi-bin/dokserv?idn=984429247.

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8

Connelly, Mariah Bindel. « Multicellular development in Bacillus subtilis / ». For electronic version search Digital dissertations database. Restricted to UC campuses. Access is free to UC campus dissertations, 2004. http://uclibs.org/PID/11984.

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9

Lin, Daniel Chi-Hong 1972. « Chromosome partitioning in Bacillus subtilis ». Thesis, Massachusetts Institute of Technology, 1999. http://hdl.handle.net/1721.1/85288.

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10

Eymard-, Vernain Elise. « Etude des interactions entre trois types de nanoparticules métalliques et une bactérie du sol, Bacillus subtilis ». Thesis, Université Grenoble Alpes (ComUE), 2017. http://www.theses.fr/2017GREAV065/document.

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Résumé :
Les nanoparticules métalliques sont utilisées dans une large gamme de produits, ce qui a pour conséquence un rejet croissant de ces nanoparticules et de leurs produits secondaires dans l’environnement. Il est donc nécessaire d’évaluer leur devenir et leurs impacts dans l'environnement. Les bactéries constituent l’une des premières cibles des nanoparticules. La plupart des études se limitent à des analyses de mortalité et ne prennent pas en compte les transformations des nanoparticules dans l’environnement. Cette étude se concentre sur un modèle bactérien, Bacillus subtilis, dont les biotopes principaux incluent la rhizosphère du sol et le tractus gastro intestinal, et sur trois nanoparticules : Ag-NPs, ZnO-NPs et TiO2-NPs. Nous évaluons d’une part l’impact des nanoparticules sur le métabolisme de Bacillus subtilis, et d’autre part celui de l’activité bactérienne et en particulier des molécules sécrétées par Bacillus subtilis sur les nanoparticules, les deux étant interdépendants
Metallic nanoparticles are used in variety of consumer products (solar screen, paint or medicine), which results in an increasing release of nanoparticles in the environment. There is a need of better evaluating their fate and impacts in the environment. Microorganisms are one of the first targets of nanoparticles in the environment. Most studies on microorganisms and bacteria have focused on cellular mortality, and did not take into account possible transformations of NPs in the environment, which modify their toxicity. This study is focused on model bacteria, Bacillus subtilis and three nanoparticles: Ag-NPs, ZnO-NPs and TiO2-NPs. We evaluate on one hand the impact of nanoparticles on the metabolism on the metabolism of Bacillus subtilis, and on the other hand the impact of Bacillus subtilis and of its secretome on the nanoparticles, both being mutually dependent
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Dobinson, Katherine Frances. « A kinetic analysis of transcription initiation by the Bacillus subtilis sigma-43 RNA polymerase : the effect of the delta subunit ». Thesis, University of British Columbia, 1986. http://hdl.handle.net/2429/27000.

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Résumé :
The initiation of transcription by the Bacillus subtilis sigma-M3 RNA polymerase at two Bacillus phage ɸ29 promoters and the effect of the delta subunit on initiation have been investigated by an in vitro kinetic analysis. The templates for the analysis were plasmids which carried the ɸ29 A2 or G2 promoter. The cloning and localization of the A2 promoter are reported here. The kinetics of RNA synthesis initiation were examined using a single-round run-off transcription assay in which multiple initiation events at a single promoter were inhibited with heparin. It was observed that the formation of heparin-resistant complexes at the A2 promoter required the presence of the initiating nucleotides, while the RNA polymerase alone was able to form heparin-resistant, non-initiated complexes at the G2 promoter. The G2 promoter was also shown by a competition assay to be a stronger promoter than A2. The effect of the delta subunit on complex formation at the two promoters was investigated with the single-round transcription assay. Delta had no effect on the formation of initiation complexes at the G2 promoter but lowered the rate and extent of complex formation at the A2 promoter. The effect of delta on the kinetic parameters of complex formation at the A2 promoter was also investigated. The data suggested that delta affects the efficiency with which the enzyme/promoter complexes undergo the transition(s) to a complex from which RNA synthesis can be initiated, although other interpretations were possible. A model for the effect of delta is proposed, in which it is postulated that the release of delta from the enzyme/promoter complex is essential for initiation. Enzyme which is associated with delta can interact with both the A2 and G2 promoters but complexes at the weaker A2 promoter do not efficiently release delta, thus slowing the formation of initiation complexes.
Science, Faculty of
Microbiology and Immunology, Department of
Graduate
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Adams, Claire. « A study of bacteriophages from Bacillus licheniformis and Bacillus subtilis ». Thesis, Heriot-Watt University, 1994. http://ethos.bl.uk/OrderDetails.do?uin=uk.bl.ethos.359798.

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Sidiq, Karzan Rafiq. « Cell wall metabolism in Bacillus subtilis ». Thesis, University of Newcastle upon Tyne, 2016. http://hdl.handle.net/10443/3243.

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Résumé :
Cell wall is a unique and essential component of bacterial cell. It defines cell shape and protects cell from bursting through its own internal osmotic pressure. It also represents a significant drain on the cells resources, particularly in Gram positives, where the wall accounts for more than 20 % of the dry weight of the cell, and approximately 50 % of ‘‘old’’ cell wall is degraded and new material made to permit cell growth. After the discovery of penicillin, there has been active study of bacterial cell wall structure and metabolism, as it represents the major target for antibacterial compounds. The biosynthetic pathways for cell wall precursors has been well investigated in bacteria generally, but the coordination of cell wall metabolic processes and the fate of turnover cell wall materials have only been well characterised in Gram-negative bacteria (e.g Escherichia coli). In Gram-positive bacteria, it has generally been accepted that the old wall is released from the surface and lost to the environment during growth, with apparent recycling of this material during stationary phase for Bacillus subtilis. It is also known that the Gram-positive wall is subject to significant post-synthetic processing, involving the linkage of wall teichoic acids and the cleavage of molecules from the structure, e.g. D-alanine, although the function of these is unclear. Understanding the importance of these processes has relevance for both the pathogenicity and biotechnological use of bacteria, as well as for understanding bacterial cell biology. As it is known that the peptidoglycan fragments (e.g muropeptides) induce the innate immune response in higher organisms and so act as a signal for infection, particularly for Gram-positive bacteria. Thus, understanding how they are generated and recycled by the bacteria may offer potential insights into novel therapeutics, also the accumulation of cell wall muropeptides should be avoided in biotechnological products. In this thesis, the D-alanine metabolism was manipulated to understand the mechanistic details of cell wall metabolism and D-alanine recycling in B. subtilis, using genetic, biochemical, bioinformatics and fluorescent microscopy approaches. Through these analyses, a D-alanine transporter (DatA, formerly YtnA) was identified by genetic screening. The roles of DatA and the carboxypeptidases, LdcB and DacA, in recycling of cell wall derived D-alanine have experimentally been confirmed. We also found that D-alanine aminotransferase (Dat) can act to synthesis D-alanine under certain conditions. From the data obtained a model for peptidoglycan assembly (coordinated synthesis and turnover) during growth of B. subtilis has been developed to take into account the various aspects of cell wall metabolism.
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Mat, Wai Kin. « Genetic code mutants of bacillus subtilis / ». View abstract or full-text, 2007. http://library.ust.hk/cgi/db/thesis.pl?BICH%202007%20MAT.

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Farquhar, R. « The spoIVC locus of Bacillus subtilis ». Thesis, University of Oxford, 1985. http://ethos.bl.uk/OrderDetails.do?uin=uk.bl.ethos.370251.

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Chaloner-Courtney, Iain James. « The spoIIA locus of Bacillus subtilis ». Thesis, University of Oxford, 1992. http://ethos.bl.uk/OrderDetails.do?uin=uk.bl.ethos.306497.

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Fitzgerald, A. V. M. « Production of bacilysin by Bacillus subtilis ». Thesis, University of Kent, 1987. http://ethos.bl.uk/OrderDetails.do?uin=uk.bl.ethos.378626.

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Allenby, Nicholas E. E. « The phosphate stimulon of Bacillus subtilis ». Thesis, University of Newcastle Upon Tyne, 2004. http://ethos.bl.uk/OrderDetails.do?uin=uk.bl.ethos.405363.

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Sassine, Jad. « Cell wall synthesis in Bacillus subtilis ». Thesis, University of Newcastle upon Tyne, 2017. http://hdl.handle.net/10443/3946.

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Résumé :
The peptidoglycan (PG) layer is responsible for maintaining cell shape and permitting cell division in almost all bacteria. Made of glycan chains connected by short peptides, PG forms a net-like structure surrounding the cytoplasmic membrane. Membrane-anchored PG synthases, called penicillin-binding proteins (PBPs), synthesize PG during cell growth and division by utilising the precursor lipid II but the molecular mechanism of these processes in Bacillus subtilis are largely unknown. The genetic and phenotypic analysis of B. subtilis has shown that PG synthesis and cell division are modulated by components of the central carbon metabolism (Weart et al., 2007). In particular, UgtP, which synthesises the glucolipid precursor for the lipoteichoic acid, has been suggested to function as a metabolic sensor governing cell size. However, the mechanism by which UgtP impacts cell wall synthesis remained unknown. Here we have constructed different B. subtilis strains with deletions in cell wall synthesis and/or carbon metabolism genes. Cells lacking the LTA precursor glucolipid grew with similar rate as wild type cells but were shorter and wider. The overexpression of ugtP caused filamentation, supporting the hypothesis that UgtP inhibits FtsZ polymerization (Weart et al., 2007). The ugtP mutant had increased level of several PG precursors and mild alterations in PG composition suggesting an increased DL-endopeptidase activity. Combining ugtP deletion/depletion with deletions with several cell wall genes resulted in morphological effects. The deletion of the PBP1 gene and simultaneous depletion of ugtP resulted in thin and bent cells. The double deletion of ugtP and lytE, a hydrolase important for cell elongation, produced shorter bent cells with severe shape defects. These results suggest that the function of UgtP contributes to balanced cell wall synthesis and hydrolysis. We also characterised several crucial cell wall enzymes. The depletion of the essential PBP2B caused cell division defects followed by lysis. Interestingly, cells expressing a catalytically inactive PBP2B were viable, but they required functional PBP3, a homologue of PBP2B that is dispensable in wild-type cells. PBP3 showed enhanced septal localisation in a strain with inactive PBP2B, but this strain produced aberrant septa. Biochemical assays were used to characterize for the first time the activities and interactions of PBP1, PBP2B, and PBP3. Novel interactions between these PBPs and with the lytic transglycosylase homologue YrrL were detected. In summary, this work contributes to our understanding of the PG synthesis during cell division.
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Brown, James. « Cell wall morphogenesis in Bacillus subtilis ». Thesis, University of Newcastle upon Tyne, 2016. http://hdl.handle.net/10443/3373.

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Résumé :
Almost all bacteria are surrounded by a peptidoglycan cell wall. This cell wall imposes the shape of the bacterial cell and enables the cell to resist turgor pressure, localise proteins and coordinate cell division. Despite being ‘essential’, bacteria can grow and divide indefinitely in a wall-less state known as the L-form. Conventionally, L-form bacteria in the laboratory are grown at high concentrations of osmoprotectant such as salt or sucrose due to their sensitivity to turgor. However, L-forms have been isolated from various environments, including from persistent infections where such isotonic conditions may not be relevant. Here I show that L-forms derived from the Gram-positive model organism Bacillus subtilis can be readily adapted to media containing very low concentrations of osmoprotectant (sucrose or salt), lending support to theories regarding the natural role of L-forms. Regeneration of the wall of the adapted strains revealed a raft of phenotypic changes including, but not limited to: cell branching, misplaced septa and increased cell length. Whole genome sequencing of these mutant strains revealed several mutations. Among the mutations identified was a partial deletion of the gene coding for the actin homologue, MreB. In the walled state, MreB directs and coordinates the peptidoglycan synthesis machinery as a means to control the morphology of the cell. Characterisation of the mutation in mreB revealed that loss of this important protein is sufficient to enable the growth of L-forms in low osmolarites. The cell wall of Gram-positive bacteria also contains teichoic acids (TA). TAs linked to the lipids in the cell membrane (Lipoteichoic acids; LTA) are essential for the viability of the pathogen Staphylococcus aureus. In contrast, LTA is dispensable in B. subtilis, where loss of the primary synthase, LtaS, acts as a suppressor mutation in strains that lack the MreB homologue, Mbl. Based on the observation that loss of ltaS improved the growth of a Δmbl mutant in B. subtilis a screening method was previously developed from which 5 candidate actinomycete strains producing potential inhibitors of LtaS were identified. Preliminary experiments narrowed the focus to one strain that reproducibly produced an active compound, which was purified and characterised. Various properties of the compound 4 were consistent with it acting as an inhibitor of LtaS. Mass spectrometry (MS) and MS-MS data suggested a potential identity for the inhibitor that could plausibly represent a substrate analogue. Treatment with the compound impaired the growth of S. aureus.
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DELATTRE, DELPHINE. « Phosphorylation des proteines chez bacillus subtilis ». Paris 7, 2000. http://www.theses.fr/2000PA077059.

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Résumé :
Les etudes concernant les phenomenes de phosphorylation des proteines sur les residus ser/thr ou tyr ont montre l'importance de ce mode de regulation chez les eucaryotes. L'objectif de cette these etait d'etudier la phosphorylation de proteines sur ces residus chez bacillus subtilis. Tout d'abord, une centaine de proteines phosphorylees ont ete detectees apres marquage in vivo et separation par electrophorese 2-d ( 3 2p). Certaines d'entre elles ont ete identifiees et les genes correspondants clones. Les proteines, fusionnees a un histag, ont ete surproduites et purifiees. Parmi elles, l'alkyl-hydroperoxyde-reductase, ahpc, impliquee dans la reponse au stress oxydant, a attire notre attention. Cette proteine fait partie des peroxyredoxines a 2 cysteines, son activite enzymatique requiert la formation de ponts disulfures intermoleculaires. Nous montrons ici pour la premiere fois que cette proteine est phosphorylee in vivo. En effet, le spot marque est reconnu par les anticorps anti-ahpc et est absent de la souche portant le gene interrompu (ahpc :: tn10). La proteine 6his-ahpc est phosphorylee in vitro en presence d'extraits proteiques de b. Subtilis et a ensuite ete purifiee. Une analyse de la stabilite de la liaison phosphate a differents agents a permis d'exclure une phosphorylation sur un residu ser, thr, arg, his, lys, asp ou glu. Nos resultats indiquent que les cysteines jouent un role important dans la phosphorylation de ahpc. En effet, la liaison phosphate est labile en presence d'agents reducteurs. Chez b. Subtilis, ahpc comporte 3 cysteines, c37, c47 et c166. L'analyse par phosphorylation in vitro des proteines mutees montre que la cysteine c37 n'intervient pas dans la phosphorylation de 6his-ahpc. Par contre, c47
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Tenesch, Aaron Chase. « The experimental silicification of bacillus subtilis ». Diss., [Missoula, Mont.] : The University of Montana, 2009. http://etd.lib.umt.edu/theses/available/etd-08292009-094408.

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Samson, Jennifer Adele. « Engineering synthetic receptors in Bacillus subtilis ». Thesis, Imperial College London, 2015. http://hdl.handle.net/10044/1/46167.

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Résumé :
Engineering signaling processes is central to building customized cells with bespoke novel functions. However, there are relatively few examples of engineering cellular control in response to artificial extracellular ligands, likely due to the complexity of engineering receptor sensor elements. Increasingly, there is also agreement that we may further our current understanding of endogenous signaling pathways through engineering new signaling behaviours. The lack of control over when and how bacterial endospores germinate has limited their use as a potential chassis for biotechnology purposes. Despite spore germination being best described in Bacillus subilis, there are still many fundamental questions about the mechanisms underlying germination. Yet, spores offer attractive characteristics over other candidates for use in biotechnology since they are inexpensive to prepare, are able to withstand harsh environmental conditions and can be stored at room temperature after dessication. Here, we describe a novel sensor system in spores of Bacillus subtilis that can detect small molecules, peptides and protein ligands. We exploit the modularity of a kinase germination receptor to engineer control over spore germination using synthetic receptors. Through engineering synthetic germination receptors we reveal unknown features of endogenous germination pathways in B. subtilis. This research contributes to our understanding of germination behaviour in B. subtilis spores and the complexity of which is necessary to understand in order for the potential of spore-based applications in biotechnology to be achieved. Using the same engineering strategy, we also describe how a synthetic receptor may regulate gene expression in cells of B. subtilis, which demonstrates the robustness of this approach.
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San, Eustaquio Campillo Alba de. « Development of a functional screen for MreB mutants in Bacillus subtilis and characterization of a putative MreB effector ». Thesis, Université Paris-Saclay (ComUE), 2017. http://www.theses.fr/2017SACLS071/document.

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Résumé :
L'acquisition et le maintien de la forme bactérienne ont été consciencieusement étudiés pendant une très longue période. Néanmoins, il reste encore beaucoup de questions sans réponse. Les bactéries Gram-positives présentent une couche externe rigide (la paroi cellulaire) qui permet de préserver la pression osmotique interne et la morphologie cellulaire. La paroi cellulaire (CW) est principalement formée par un maillage de polymères de sucres, le peptidoglycane (PG), sur lequel sont accrochés des acides téichoïques. L'absence de cette barrière essentielle provoque la perte de forme et, finalement, la lyse de la cellule. L’intégrité du CW est par conséquent d'une importance vitale pour les bactéries. La structure ainsi que la synthèse correcte du CW dépendent de supposées machineries d'élongation du peptidoglycane (PGEM) chargées d’assembler le réseau du PG. Le fonctionnement et la composition des PGEMs restent incertains, mais on sait qu’ils dépendent d’une protéine essentielle : MreB, une protéine procaryote similaire à l'actine. MreB est suspectée de contrôler l’activité et/ou l’assemblage des PGEMs, mais sa fonction exacte comme son mode de régulation sont actuellement inconnus. J’utilise Bacillus subtilis, le modèle des bactéries Gram-positives, pour mieux comprendre les fonctions de MreB via i- le développement et l’utilisation d’un criblage génétique pour l’identification de mutants de mreB non fonctionnels et ii- l'étude d'un effecteur potentiel de MreB.(i) MreB a été étudié pendant près de deux décennies et pourtant, sa (ses) fonction(s) reste(nt) mal comprise(s). Comme les approches biochimiques se sont révélées particulièrement difficiles jusqu'à présent, la plupart des études se sont concentrées sur la localisation cellulaire et la dynamique de la protéine. Au cours de mes travaux, j’ai conçu un criblage génétique au moyen duquel j’ai obtenu une collection de mutants de mreB fonctionnellement déficients, chez B. subtilis. La caractérisation de ces mutants a révélé de nombreux résidus importants pour le fonctionnement de la protéine. De façon intéressante, mes résultats indiquent que certains mutants ont conservé leurs propriétés dynamiques (suggérant une association fonctionnelle aux PGEMs) en plus d'une morphologie de type sauvage, tout en étant fortement affectés pour la croissance. Des résultats préliminaires indiquent que ces mutants sont compromis dans leur capacité à utiliser certaines sources de carbone, reliant MreB au métabolisme cellulaire. Ceci suggère l'existence soit d'un point de contrôle, soit d'un couplage entre le métabolisme du carbone et l'expansion du CW chez B. subtilis.(ii) Des résultats non publiés de notre groupe ont révélé l'existence d'un opéron non caractérisé (ydcFGH) dont l'expression est fortement induite en absence de MreB, par comparaison à la souche sauvage. J’ai 1- mis en évidence la cause probable de l’induction de cet opéron en l’absence de MreB, révélant ainsi l’existence de nombreuses mutations dans la souche MreB et 2- réalisé une caractérisation poussée de chaque gène de l'opéron ydcFGH. Bien que le lien exact entre MreB et ydcFGH soit encore inconnu, nos résultats suggèrent un rôle potentiel d’YdcH dans le contrôle du métabolisme du carbone et l'adaptation à la phase stationnaire. À la lumière de mes données issues du criblage génétique (i), ces résultats indiquent un lien fort entre MreB et le métabolisme du carbone
Acquisition and maintenance of the bacterial shape has been conscientiously studied for a long time. Nevertheless, there are still many unanswered questions. Gram-positive bacteria present a rigid external coating (cell wall) that allows them to preserve internal osmotic pressure and cell morphology. The cell wall (CW) is mainly formed by the peptidoglycan meshwork (PG), that confers its structure to the CW, to which are connected teichoic acids. The absence of this essential barrier causes the loss of shape and, ultimately, lysis of the cells. Integrity of the CW is, therefore, a matter of vital importance for bacteria. Proper CW synthesis and structure depends on the so-called peptidoglycan elongation machineries (PGEM) in charge of building the PG meshwork. The precise composition and functioning of the PGEM is not completely understood but they rely on a key player: MreB, a conserved prokaryotic actin-like protein. MreB is suspected to control PGEM activity and/or assembly but its precise function and mode of regulation are currently unknown. I used Bacillus subtilis, the model for Gram-positive bacteria, to gain a better understanding of MreB functions via i- the development and use of a genetic screen for loss-of-function mutants of mreB and ii- the study of a potential effector of MreB.(i) MreB has been studied for almost two decades now and still, little is known about its function(s). Since biochemical approaches proved to be difficult so far, most of the studies have focused on cellular localization and dynamics of the protein. Here, I have designed a genetic screen by means of which I have obtained a collection of functionally impaired mreB mutants in B. subtilis. Characterization of these mutants revealed numerous key residues for the functioning of the protein. Interestingly, my results indicate that some mutants have kept their dynamic properties (suggesting functional association to the PGEM) together with a wild type shape, while being strongly affected for growth. Preliminary results indicate an impaired ability to use certain carbon sources linking MreB to cellular metabolism. This suggests the existence of either a checkpoint or a coupling between carbon metabolism and CW expansion in B. subtilis.(ii) Unpublished results from our group revealed the existence of an uncharacterized operon (ydcFGH), whose expression is highly induced in the absence of MreB by comparison to the wild type. I have 1- deciphered the cause of ydcFGH induction in the absence of MreB, revealing the existence of multiple mutations in the MreB strain and 2- realized a thorough characterization of each gene of the ydcFGH operon. Although the exact link between MreB and ydcFGH is yet unknown, my results suggest a potential role of YdcH in the control of carbon metabolism and adaptation to stationary phase. In light of my mutagenesis screen data (i), these results are pointing towards a strong link between MreB and carbon metabolism
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Williams, Rachel C. « A comparative analysis of the Bacillus subtilis and Bacillus anthracis 'secretomes' ». Thesis, University of Newcastle Upon Tyne, 2002. http://ethos.bl.uk/OrderDetails.do?uin=uk.bl.ethos.270823.

Texte intégral
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Foucher, Anne-Emmanuelle. « Caractérisation biochimique de YphC, une protéine de Bacillus subtilis à deux domaines GTPases impliquée dans la biogenèse du ribosome ». Grenoble, 2010. http://www.theses.fr/2010GRENV040.

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Résumé :
Les grands programmes de séquençage des génomes ont révélé l'existence de nombreux gènes de fonction inconnue. L'invalidation systématique de ces gènes chez les bactéries a permis de révéler le caractère essentiel de certains d'entre eux. L'étude des protéines issues de ces gènes s'est amplifiée ces dernières années car elles sont des cibles potentiellement intéressantes pour le développement de nouvelles molécules antibactériennes. YphC est une GTPase de Bacillus subtilis qui répond à ces critères. Elle est très conservée au sein des bactéries mais n'est pas retrouvée chez les organismes eucaryotes ou les archaebactéries, ce qui fait d'elle une cible de choix pour le développement de nouvelles molécules antibactériennes. YphC a la particularité de posséder deux domaines GTPases en tandem. Unique en son genre, nous avons voulu étudier cette protéine sous son aspect biochimique afin de mieux comprendre son mécanisme de fonctionnement. Nous avons donc mis au point la production et la purification de YphC et généré des mutations ponctuelles ou des délétions. Nous avons ainsi pu mesurer les constantes enzymatiques de cette protéine et caractériser l'effet d'activation du potassium sur son activité d'hydrolyse du GTP. Nous avons ainsi montré la forte activité GTPase de la protéine portée par le premier domaine GTPase et le rôle régulateur du deuxième domaine GTPase. Nous avons également étudié le rôle de YphC par une approche in vitro. Nous avons pu ainsi montrer que YphC est capable d'interagir avec les ribosomes de façon nucléotide dépendante suggérant un rôle de la protéine dans les processus de biogenèse du ribosome
Genome sequencing programs have revealed many genes of unknown function. The systematic disruption of these genes revealed the essentiality for some of them. Studying orphan proteins became of first importance as they are ideal targets for new antibacterial compounds. YphC is a GTPase from Bacillus subtilis that meets these criteria. It is well conserved throughout bacterial kingdom but is not found in eukaryota or archeas, strengthening the choice of this protein as a future target for antibacterial drugs. YphC has the particularity to possess two GTPase domains in tandem. As a unique protein, we decided to study YphC from a biochemical point of view to better understand its catalytic mechanism. We overexpressed and purified the protein, either wild type or mutants. We measured its enzymatic constants and characterize potassium activation effect on its hydrolytic activity. We showed that YphC displays a high GTPase activity and that GD1 bears the majority of this activity. GD2 would thus have a regulatory role in the protein. We also studied the role of YphC in vitro. We showed that the protein was able to interact with ribosome from Bacillus subtilis in a nucleotide dependant manner, suggesting that YphC plays a role in ribosome biogenesis
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Crum, Morris G. (Morris Glenn). « Some Responses of Bacillus subtilis Spores to Glutaraldehyde ». Thesis, North Texas State University, 1985. https://digital.library.unt.edu/ark:/67531/metadc331507/.

Texte intégral
Résumé :
Bacillus subtilis (ATCC 19659) were damaged by exposure to various concentrations of glutaraldehyde, as shown by decreased germination rates. The damage caused was repaired or otherwise obviated by the presence of sodium lactate in the holding medium. When two different salts of lactic acid were compared for ability to overcome the effect of glutaraldehyde, it was found that calcium salt of lactate was more effective than the sodium salt. The damage repair system involved l-alanine, lactate and either the sodium or calcium ions. The study involved in determining the difference in efficiency of spore repair was due to an organic or an amino acii snowed that the presence of two carboxylic functional groups did not effectively alter the reactivity.
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Piedrahita-Aguirre, Cesar Augusto 1980. « Estudo da produção de iturina por bacillus subtilis, em fermentação semi-sólida utilizando como substrato farelos de soja, arroz, trigo e casca de arroz = Study of production of iturin by Bacillus subtilis in solid state fermentation using as substrate soybean meal, rice meal, wheat bran and husk rice ». [s.n.], 2013. http://repositorio.unicamp.br/jspui/handle/REPOSIP/255474.

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Résumé :
Orientador: Ranulfo Monte Alegre
Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia de Alimentos
Made available in DSpace on 2018-08-24T00:10:15Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Piedrahita-Aguirre_CesarAugusto_D.pdf: 6150918 bytes, checksum: bfd7a30fcb69bbbfa8cbba5856d068f5 (MD5) Previous issue date: 2013
Resumo: Este trabalho se propôs a estudar a produção da iturina A por Bacillus subtilis em fermentação semi-sólida em biorreatores de leito empacotado. O trabalho foi desenvolvido em quatro partes. Em uma primeira parte foi feito um screening com cepas silvestres e seus mutantes obtidos a partir da exposição de luz UV e acridina laranja. A cepa Bacillus subtilis subsp. subtilis NRRL NRS-1270 foi a que apresentou maior atividade antagônica contra os fungos Aspergillus fumigatus Fresenius NRRL 164, Aspergillus fumigatus Fresenius NRRL 166 e Aspergillus flavus var. oryzae NRRL 484. O extrato metanólico obtido da fermentação semi-sólida do Bacillus subtilis subsp. subtilis NRRL NRS-1270 foi analisado através da espectrometria de massas encontrando-se lipopeptídeos com massa molecular entre m/z 1021,43 e m/z 1087,48, mas sem a presença da iturina A. Em uma segunda etapa a cepa Bacillus Iso 1 foi isolada a partir das raízes de soja, e ante a dificuldade de identificar a iturina A através da cromatografia liquida de alta eficiência (HPLC), foi desenvolvida a metodologia de purificação da iturina A utilizando a cromatografia em coluna de vidro preenchida com sílica gel 60. A iturina A foi eluída com três sistemas de solventes compostos por 20 mL de clorofórmio-metanol-água (65:25:4,v/v/v), fração 1, seguido de 20 mL de clorofórmio-metanol-água (30:50:10, v/v/v), fração 2, e a fração final composta por 10 mL de clorofórmio-metanol-água (20:60:15, v/v/v). As frações obtidas foram analisadas através da HPLC e da espectrometria de massa, identificando 5 isômeros da iturina A (C13-C16). Na terceira etapa, foi feito um delineamento composto central rotacional (DCCR) para avaliar o efeito da casca de arroz como suporte inerte e da vazão volumétrica de ar na produção de iturina A; como substratos foram utilizados o farelo de soja desengordurado e o farelo de trigo. Nenhuma variável do DCCR foi estatisticamente significativa, mas operacionalmente foram importantes, devido à redução da oxigenação do Bacillus Iso 1 pela baixa vazão de ar e menor concentração de casca de arroz, favorecendo a produção de iturina; nestas condições obteve-se 6,88 g/kg de substrato seco de iturina A.Esta é a maior quantidade de iturina A produzida em biorreatores de leito empacotado (coluna) com aeração forçada até hoje. Na quarta etapa, a partir dos resultados obtidos no DCCR foram estudados os parâmetros do processo: queda de pressão, consumo de oxigênio e perfis de temperatura, visando entender o comportamento da fermentação a 0,4 L/min e 0,8 L/min. A máxima produção de iturina obtida foi 5,58 g/kg de substrato seco com a vazão de 0,4 L/min. O incremento na queda de pressão é ocasionado não unicamente pelo incremento da vazão volumétrica, mas também pela produção do biopolímero ?-PGA o qual ocupa os espaços livres entre as partículas, dificultando o fluxo normal de ar através do leito, reduzindo o consumo de oxigênio. A baixa oxigenação favoreceu a alta produção da iturina A e gerou baixo calor metabólico (5,75 W/kg-dry substrato·min). Os resultados obtidos podem ser úteis na elaboração de estratégias para ampliação de escala do processo em fermentadores aerados de leito empacotado
Abstract: This work covers a study of the production of iturin A by Bacillus by solid-state fermentation in packed bed bioreactors. The study was conducted in four parts. At first a screening was conducted with wild strains and their mutants obtained from exposure to UV light and mutagenic agent acridine orange. The strain Bacillus subtilis subsp subtilis NRRL NRS 1270 showed the highest antagonistic activity against Aspergillus fumigatus NRRL 164, Aspergillus fumigatus NRRL 166 and Aspergillus flavus var . oryzae NRRL 484. A methanolic extract obtained by solid state fermentation of Bacillus subtilis subsp subtilis NRRL NRS 1270 was analyzed with mass spectrometry showing lipopeptides with molecular mass between m/z 1021.43 and m/z 1087.48, but without the presence of iturin A. In the second stage, the strain Bacillus Iso 1 was isolated from soybean roots. Given the difficulty of identifying iturin A by high performance liquid chromatography (HPLC), a iturin A purification methodology was developed using glass column chromatography packed with activated Silica gel 60 and alumina. This methodology involved three solvent systems for elution of the iturin A from the column. A first fraction consisted of 20 ml of chloroform-methanol-water (65:25:4 , v/v/v) and was followed by 20 ml of chloroform - methanol- water (30:50 : 10, v/v/v), that was then followed by a final fraction consisting of 10 ml of chloroform-methanol-water (20:60:15, v/v/v). The fractions obtained of fermentation were analyzed by both HPLC and mass spectrometry, identifying five iturin A isomers (C13-C16). In the third stage of the study, an experimental design was constructed in the form of a central composite rotational design (CCRD) to evaluate the effect of rice husk as an inert support and air flow rates to the iturin A production, using defatted soybean meal and wheat bran as substrate. Although none of the studied variables showed statistical significance, the operational importance of reduction of oxygenation of the Bacillus Iso 1 fermentation due to the low concentration of rice husk and air flow rate was observed to favor the production of iturin; in these conditions high productivity was obtained reaching 6.88 g/kg-dry substrate of iturin A. Concluding from available literature, this is the highest concentration of iturin A ever produced in packed bed bioreactor (column) with forced aeration to date. In the fourth stage, in order to understand the behavior of the fermentation under aeration conditions between 0.4 L/min and 0.8 L/min, the following process parameters were studied, based on the results obtained from the CCRD: pressure drop, oxygen consumption and temperature profiles. The maximum production of iturin obtained was 5.58 g/kg-dry substrate with the air flow rate at 0.4 L/. The increase of the pressure gradients is caused not only by increasing the volumetric air flow rate but also by the production of biopolymer ?-PGA by Bacillus iso 1, which occupies the free interparticle space, hindering or preventing the normal flow of air through the bed and thus leading to reduced oxygen consumption. The low oxygenation favored the high iturin A production and resulted in low metabolic heat generation (5.75 W/kg-dry substrate.min). The results of this work are expected to be conducive for designing strategies to scale up the process in aerated packed bed bioreactors
Doutorado
Engenharia de Alimentos
Doutor em Engenharia de Alimentos
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Angus, Christine. « The implications of plant/bacterial interactions for the phytoremediation of Cs¹³⁷ ». Thesis, University of Newcastle Upon Tyne, 2002. http://ethos.bl.uk/OrderDetails.do?uin=uk.bl.ethos.275424.

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Carvalho, Filho Celso Duarte. « Utilização do bioteste com esporos de Bacillus subtilis na avaliação da integridade asseptica de embalagens flexiveis esterilizaveis ». [s.n.], 1996. http://repositorio.unicamp.br/jspui/handle/REPOSIP/255401.

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Résumé :
Orientador: Pilar Rodriguez de Massaguer
Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia de Alimentos
Made available in DSpace on 2018-07-21T03:39:39Z (GMT). No. of bitstreams: 1 CarvalhoFilho_CelsoDuarte_M.pdf: 7345180 bytes, checksum: 62066bb1a2a00eeaa3997a883f32b44b (MD5) Previous issue date: 1996
Resumo: Este trabalho teve por finalidade avaliar a integridade asséptica da selagem de topo das bolsas esterilizáveis, composta de um laminado de polipropileno (70µm), folha de alumínio (9µm), náilon (15µm) e poliéster (12µm) através de bioteste com esporos de Bacillus subtilis e, também, estabelecer o processo térmico adequado para produzir purê de banana comercialmente estéril nestas embalagens, processadas em autoclave por imersão total em água quente com sobrepressão. O produto selecionado foi purê de banana natural, variedade "nanica" {Musa cavendish, Lamb.) com pH 4,6 -4,7 embalado (130g) em bolsas esterilizáveis de 130 x 170mm. Microfuros de diversos diâmetros foram intencionalmente formados nestas bolsas através de fios de níquel-cromo colocados na área de selagem de topo. Após autoclavagem, os fios foram retirados das embalagens e estas foram submetidas assepticamente a um contato direto com uma suspensão de esporos da referida bactéria durante 1 hora. Foi analisado o poder de penetração dos esporos através de diferentes diâmetros de microfuros formados pelos fios na área de selagem de topo das embalagens (diâmetros dos fios : 32, 48, 79 e 97µm). O bioteste foi aplicado em bolsas cheias antes e após o processo térmico do purê a 115°C. A penetração e crescimento do B. subtilis foi confirmada por ensaios bioquímicos e subcultura em meio agar nutriente, com prévia incubação das bolsas a 30°C por 7 dias. Estas embalagens foram posteriormente submetidas ao teste eletrolítico para confirmação dos microfuros detectados. O processo térmico adequado para o purê de banana, previamente inativado enzimaticamente (97°C por 5 min.), foi de 7,5 min. a 115°C equivalente a um Fo de 0,64 min., verificado pelo método geral e ensaios de esterilidade comercial. Foi notado que o processo térmico favoreceu a penetração dos esporos através de microfuros de menor diâmetro, pois enquanto que o bioteste detectou microfuros >= 79µm m com 87,5% de penetração antes do processo, o mesmo teste detectou penetração em microfuros >= 48µm de diâmetro com 53,8% de penetração em bolsas testadas após o processo. O teste eletrolítico só foi capaz de detectar microfuros formados com fios de 79um de diâmetro em 69,23% das amostras. Em ensaios realizados antes e depois do processo térmico não foi detectada penetração em bolsas com microfuros formados com fios de 32µm .
Abstract: The aim of this work was to evaluate the integrity of the top sealing area of retortable pouches formed by a laminate of polypropylene (70 µm), aluminum foil (9um), nylon (15 µm) and polyester (12 µm), using Bacillus subtilis spores as a biotest and also to establish the proper thermal process in order to produce comercially sterile banana puree, packed in pouches processed in a full water-immersion retort. The selected product was banana puree (130g), variety "nanica" (Musa cavendish, Lamb.), pH 4.6 - 4.7, packed in 130 x 170mm retortable pouches. Microholes of different diameters were intentionally made with nickel-chrome threads placed in the top seal area. After sterilization, the threads were withdrawn from the seals and the packages were tested using the spore test. A suspension of B. subtilis spores was aseptically left on the top seal for 1 hour. The capacity of the spores to penetrate through different microholes diameters (32, 48, 79 and 97 µm) was evaluated. The biotest was carried out before and after processing the banana puree at 115°C. Bacillus subtilis penetration and growth was confirmed by biochemical tests and subculture in nutrient agar after incubation of the pouches at 30°C for 7 days. The tested packages were, latter, submitted to eletrolitic test for microholes confirmation. The proper thermal process for banana puree, previously bleached (97°C for 5 min.), was 7,5 min. at 115°C equivalent to an Fo of 0,64 min., confirmed by the general method evaluation and commercial sterility tests. It was noted that heat processing favored the penetration of spores at lower microholes sizes:while the spore test detected microholes of >= 79 µm with 87,5% of penetration before processing, the same test detected penetrations through microholes >= 48 µm with 53,8% penetration after processing. Eletrolitic test was only able to detect microholes formed with 79 µm diameter threads, showing presence of microholes in 69,23% of the tested samples. No penetration was detected in pouches with microholes formed with 32um tested before or after heat processing.
Mestrado
Mestre em Ciência de Alimentos
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Charbonnier, Teddy. « Transport du pyruvate et régulations du métabolisme central par le malate chez Bacillus subtilis ». Thesis, Université Paris-Saclay (ComUE), 2016. http://www.theses.fr/2016SACLS076/document.

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Résumé :
Chez Bacillus subtilis comme pour toutes les bactéries, le métabolisme central du carbone est essentiel pour la croissance de la cellule. Elle utilise le glucose (source de carbone glycolytique) et le malate (source de carbone gluconéogenique) comme sources de carbone préférentielles. Ces deux sources de carbone sont capables d'induire la répression catabolique au travers de la protéine régulatrice CcpA et ainsi d'établir une hiérarchie dans l'utilisation des sources alternatives de carbone. Au centre du métabolisme du carbone se trouve le pyruvate que B. subtilis est capable d'utiliser comme seule source de carbone, mais son transporteur reste inconnu.Des analyses transcriptomiques ont montré que seul l'opéron ysbAB était spécifiquement induit en présence de pyruvate, et nous avons montré que sa délétion entraînait une perte de croissance presque totale sur pyruvate. En utilisant des protéines étiquetées, nous avons mis en évidence qu'YsbA et YsbB formaient un complexe se localisant à la membrane. Nous avons ensuite montré que ce complexe est le transporteur principal du pyruvate et fonctionne comme un transporteur par diffusion facilitée. A l'aide d'une fusion rapportrice, nous avons démontré que l'opéron lytST situé en amont d'ysbAB, et codant pour un système à deux composants, était responsable de l'induction d'ysbAB. Nous avons également montré qu'en plus d'une répression par CcpA en présence de glucose ou de malate, une régulation dépendante de l'activité enzyme malique de MaeA s'exerce sur ysbAB. Cette régulation est due à l'accumulation de pyruvate dans la cellule qui perturbe l'activation d'ysbAB par LytST.Nous avons aussi montré qu'une régulation indépendante de CcpA s'exerce sur dctP, le gène codant pour le transporteur du succinate et du fumarate en présence de malate, suggérant un mécanisme similaire à celui observé pour ysbAB. Enfin, nous avons montré que le flux métabolique traversant MaeA était également impliqué dans la régulation par CcpA de l'entrée des sources glycolytique par le malate
In Bacillus subtilis like for all the bacteria, the central carbon metabolism is essential for growth. It uses glucose (a glycolytic carbon source) and malate (a gluconeogenic carbon source) as preferential carbon sources. These two carbon sources are able to induce carbon catabolite repression through the transcription factor CcpA and thus establishing a hierarchy in the use of alternative carbon sources. The pyruvate is in the middle of the carbon metabolism, and can be used by B. subtilis as sole carbon source; however its transporter remains unknown.Transcriptome analyses revealed that the only operon specifically expressed in cells grown on pyruvate is ysbAB, and we showed that its deletion led to a strong growth defect on pyruvate. Using tagged proteins, we highlighted that YsbA and YsbB formed a complex localized at the membrane. We next showed that this complex is the major pyruvate transporter, and operates as a facilitated transporter. Using a reporter fusion, we showed that the operon lytST located upstream of ysbAB, and coding for a two-component system, is responsible for the induction of ysbAB. We also showed that besides the CcpA-mediated repression by both glucose and malate, an additional regulation mechanism through the malic enzyme activity of MaeA is acting on ysbAB. This regulation is due to the accumulation of pyruvate in the cell which hinders the LytST-mediated induction of ysbAB.We also showed that a CcpA-independent repression is exerted on dctP, the gene coding for the succinate and fumarate transporter, in the presence of malate, suggesting a regulation mechanism similar to the one observed for ysbAB. Finally, we showed that the metabolic flux going through MaeA is also involved in the CcpA-dependent repression of the genes coding for glycolytic transporter in presence of malate
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Schönert, Stefan. « Maltose- und Maltodextrin-Verwertung in Bacillus subtilis ». [S.l. : s.n.], 2004. http://deposit.ddb.de/cgi-bin/dokserv?idn=973091967.

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Bernard, Rémi. « Résistance à la bacitracine chez Bacillus subtilis ». Phd thesis, Université de la Méditerranée - Aix-Marseille II, 2007. http://tel.archives-ouvertes.fr/tel-00350345.

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Résumé :
L'enveloppe bactérienne est une cible majeure d'un grand nombre d'antibiotiques naturels. Certains provoquent d'importantes perturbations de la membrane cytoplasmique, d'autres ciblent spécifiquement les différentes étapes enzymatiques de la voie de biosynthèse du peptidoglycane, constituant majeur de la paroi. Pour contrer l'action de ces antibiotiques, les bactéries ont développé divers systèmes de résistance leur conférant un avantage sélectif dans leur niche écologique. Le rejet de l'antibiotique est un des principaux mécanismes de résistance rencontré chez les bactéries. Il implique parfois des transporteurs membranaires de type ABC (pour ATP Binding Cassette) pouvant hydrolyser l'ATP pour exporter ou importer un allocrite. Les bactéries possèdent également divers systèmes leur permettant, d'une part, de détecter un signal environnemental (antibiotique ou stress de la paroi qu'il engendre), et, d'autre part, d'assurer la transduction du signal qui aboutit à une réponse adaptée. Deux types de systèmes sont impliqués dans les réponses aux stress de la paroi : les phosphorelais et les facteurs sigma à fonction extracytoplasmique.

Le groupe des Firmicutes, dont la bactérie modèle est Bacillus subtilis, est un groupe ubiquitaire producteur d'antibiotiques et contenant de nombreux organismes pathogènes. Les analyses effectuées au laboratoire ont permis d'identifier chez les Firmicutes des systèmes associant un phosphorelais et un transporteur ABC. Dans chacun des cas, les gènes codant les différents partenaires du système sont à proximité sur le chromosome et le phosphorelais régule l'expression des gènes codant le transporteur ABC. On trouve trois de ces systèmes chez B. subtilis nommés BceRSAB (anciennement YtsABCD), YvcPQRS et YxdJKLM. L'objectif de notre étude était de tester l'hypothèse selon laquelle ces systèmes pouvaient être impliqués dans la résistance aux antibiotiques ciblant l'enveloppe bactérienne.

La bacitracine est un antibiotique qui se complexe à l'undécaprényl pyrophosphate (UPP) et inhibe la dernière étape de la biosynthèse du peptidoglycane : la régénération de l'undécaprényl phosphate (UP). Nos résultats indiquent que le système BceRSAB est le composant majeur de la résistance à la bacitracine chez B. subtilis. L'expression de l'opéron bceAB est activée, en présence de bacitracine, par le phosphorelais BceRS. Nous avons également identifié une protéine, nommée BcrC, qui participe à la résistance à la bacitracine chez B. subtilis. Nous avons démontré que cette dernière est une UPP phosphatase impliquée dans la régénération de l'UP et s'oppose ainsi à l'action de la bacitracine. L'expression du gène bcrC ne dépend pas du phosphorelais BceRS mais de trois facteurs sigma à fonction extracytoplasmique. En conclusion, B. subtilis possède deux types de systèmes de résistance à la bacitracine indépendants et complémentaires.
Nous avons par la suite analysé le mécanisme de régulation de l'induction du système BceRSAB par la bacitracine. Nos résultats sont surprenants et montrent clairement que le transporteur ABC BceAB participe à l'activation de l'expression de ses propres gènes de structure avec le phosphorelais BceRS. De plus, lorsque le pool cellulaire d'UPP diminue (lorsque la phosphatase BcrC est surproduite), et en présence de bacitracine, l'expression du gène bceA diminue également. Ceci montre que l'UPP participe, avec la bacitracine, au stimulus du système BceRSAB. Notre hypothèse de travail est que le transporteur ABC, prédit comme étant un exporteur, prend en charge le complexe UPP/bacitracine et agit comme une flippase pour créer une dissymétrie membranaire ressentie par le senseur BceS. Il n'est pas exclu, qu'en présence de bacitracine, le transporteur BceAB puisse interagir avec le senseur BceS pour permettre l'activation du système.

La majeure partie des bactéries du groupe des Firmicutes possède, d'une part, des protéines similaires à BcrC, et, d'autre part, des systèmes similaires au système BceRSAB. Toutes les protéines « BcrC-like » ont un motif caractéristique permettant de les classer dans la famille des phosphatases de type PAP2. Il est tentant de penser qu'elles sont toutes des UPP phosphatases assurant une des étapes clés de la synthèse du peptidoglycane.
Par ailleurs, les deux autres systèmes « Bce-like » de B. subtilis, YvcPQRS et YxdJKLM, sont également activés en présence d'antibiotiques ciblant l'enveloppe bactérienne et nous savons que le transporteur ABC YvcRS est aussi impliqué dans le mécanisme de régulation. Nous proposons donc que les systèmes « Bce-like » des Firmicutes sont tous des systèmes de détoxification dirigés contre des antibiotiques ciblant l'enveloppe bactérienne.
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Xu, Meizhu. « Functional analysis of PBP2b in Bacillus subtilis ». Thesis, University of Oxford, 2008. http://ethos.bl.uk/OrderDetails.do?uin=uk.bl.ethos.491605.

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Résumé :
The major structural component of the eubacterial cell wall is a net like matrix of peptidoglycan (PG). The final steps of PG assembly are carried out by a large family of penicillin-binding proteins (PBPs). Some PBPs are redundant, but most bacteria have an essential PBP specialised for cell division. PBP2b of B. sllbtilis is essential for cell division and it targets division sites by interaction with one or more components of the division machinery. The aim of the work described in this thesis was to understand the function ofPBP2b in the cell cycle ofB. sllbtilis. Remarkably, substitution of the catalytic serine of PBP2b had almost no effect on cell division in B. sllbtilis, even though depletion of the entire protein is lethal. Further analysis of the catalytically inactive form of PBP2b revealed that PBP3, previously shown to be dispensable, took on an essential role. This study also revealed that the essential function of PBP3, in the absence of biochemically active PBP2b, lies in its transpeptidase (TPase) activity. Overall, this research suggests that the division machinery is constructed in such a way that if the primary TPase activity of the architectural PBP2b enzyme is inactivated, a secondary, non-architectural PBP (PBP3) can access the site and provide a back-up TPase that will allow the septum to be completed. This has interesting parallels with the mechanism of methicillin-resistance in Staphylococcus aureus (MRSA). In further studies, the combination of PBP2b Ts mutations with the divIB, divIC, andftsL mutation backgrounds suggested that different parts of the N-terrninal domain of PBP2b may be involved in interactions with specific division proteins. In addition, although the TPase function is not essential, the TPase domain may be involved in the interaction with other division proteins. The C-terminal domain of PBP2b was shown to be inessential for vegetative cell growth and sporulation at 'permissive temperatures. Its function is probably to stabilize PBP2b at elevated temperatures. Previous research suggested that that PBP2b may take part in the early stages of sporulation. In this thesis, its function has been further investigated and the results suggest that PBP2b may be also involved in the late stages of sporulation.
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Wolf, Diana. « Das Phagenschock-Protein LiaH aus Bacillus subtilis ». Diss., lmu, 2012. http://nbn-resolving.de/urn:nbn:de:bvb:19-151553.

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Moresoli, Christine. « The production of surfactin by Bacillus subtilis / ». Thesis, McGill University, 1985. http://digitool.Library.McGill.CA:80/R/?func=dbin-jump-full&object_id=65329.

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Jayaraman, Padmavathy. « Analysis of Bacillus subtilis 1604 spore germination ». Thesis, University of Cambridge, 1989. http://ethos.bl.uk/OrderDetails.do?uin=uk.bl.ethos.317752.

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Wilkinson, Jonathan Frome. « Regulation of sigmaF activity in Bacillus subtilis ». Thesis, University of Oxford, 1996. http://ethos.bl.uk/OrderDetails.do?uin=uk.bl.ethos.300121.

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Hall, Andrea. « Bacillus subtilis oxalate decarboxylase : roles and regulation ». Thesis, University of East Anglia, 2006. http://ethos.bl.uk/OrderDetails.do?uin=uk.bl.ethos.426696.

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Radford, David S. « Copper and zinc homeostasis in Bacillus subtilis ». Thesis, University of Newcastle Upon Tyne, 2005. http://ethos.bl.uk/OrderDetails.do?uin=uk.bl.ethos.427302.

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Coxon, Rosemary D. « Factors affecting protein export from Bacillus subtilis ». Thesis, University of Newcastle Upon Tyne, 1990. http://ethos.bl.uk/OrderDetails.do?uin=uk.bl.ethos.287424.

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Mackichan, Calum. « Organization of secretion components in bacillus subtilis ». Thesis, Paris 11, 2013. http://www.theses.fr/2013PA112122.

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Résumé :
La membrane bactérienne a fait l'objet de nombreuses études de localisation de protéines et de phospholipides. Par fusion d’une protéine fluorescente (GFP) aux gènes d’intérêt, il est alors possible d‘observer la localisation des protéines associées par microscopie. La plupart de ces observations ont été réalisées à l’aide de microscopes dits à épifluorescence. Afin d’obtenir une qualité d’image suffisante, il était nécessaire de surexprimer la protéine observée, insérée à un locus ectopique non naturel. Ce travail de thèse a permis d’utiliser une nouvelle technologie acquise dans notre laboratoire, le microscope à fluorescence par réflexion totale interne (TIRFM), plus puissant que le microscope à épifluorescence utilisé précédemment. Cette technologie a permis une caractérisation plus détaillée de la localisation de protéines d’intérêt, placées sous contrôle de leur promoteur naturel. Il a également été possible de caractériser la dynamique des foci observés. Nous avons concentré notre étude sur 3 protéines: (i) SecA pour l’étude de la translocation des protéines du cytoplasme vers la membrane, (ii) YidC pour l’insertion des protéines dans la membrane, (iii) PgsA pour la synthèse des phospholipids. Les foci se déplacent dynamiquement et s’associent de manière transitoire dans la membrane. L’observation sur la durée de ces foci, et l’analyse de leur intensité moyenne au cours des observations, montre que SecA se déplace sur l’ensemble de la membrane de manière uniforme. L’analyse du déplacement des foci montre une relation quadratique entre la distance moyenne parcourue par les foci en fonction du temps. Ce résultat est en accord avec l’hypothèse d’un mouvement brownien des foci. Les foci sont observés dans les différentes phases de croissance des cellules, et le nombre de foci présents dans une cellule de la longueur de celle-ci. SecA-GFP a été testés dans un certain nombre de contextes génétiques. La localisation a été perturbée lors de la déplétion de pgsA. Cependant, comme PgsA est une protéine essentielle, il ne peut être exclu que ce changement de localisation apparaît des cellules qui sont mortes ou mourantes. Dans une souche mutante ΔclsA, on n’observe aucune différence dans la localisation de SecA en phase exponentielle, mais on aperçoit une relocalisation aux poles en phase stationnaire de croissance. La voie Tat est responsable du transport des protéines devant être exportées dans un état structuré, par exemple dans le cas de l’incorporation d’un co-facteur. À ce jour, la régulation du système Tat est peu connues, de même que les interactions entre les différentes sous-unités du système Tat et d'autres protéines dans le cytoplasme, dans la membrane ou dans la paroi cellulaire. Des fusions de les gènes de la voie Tat ont été co-exprimées deux à deux dans des cellules de levure, et leur capacité à interagir in vivo a été testée par la méthode dite du double hybride chez la levure. Nous avons généré un réseau d’interaction autour des cinq composants de système Tat. Pour déterminer les implications fonctionnelles des composants du réseau, nous avons travaillé en collaboration avec le laboratoire de Jan-Maarten van Dijl. Nous avons utilisé une collection de souches mutantes pour lesquels certains composants individuels du réseau ont été retires. Trois a été observe d’etre nécessaires pour la sécrétion Tat-dépendante. Nous avons étudié la localisation des fusions GFP avec ces proteins. On a observé une localisation double de HemAT selon l’état physiologique de la cellule. En phase exponentielle, les cellules de B. subtilis sont généralement présentes sous forme de chaînes dans lesquelles le septum de division a déjà été formé, mais la séparation cellulaire n'a pas encore eu lieu. Une fusion de la GFP à CsbC apparaît de façon homogène dans la membrane
In the years since the cloning of GFP, the field of bacterial cell biology has characterized a variety of specific protein localization patterns in the bacterial membrane. The vast majority of early subcellular localization studies made use of inducible GFP fusions, which generally required the presence of high concentrations of inducer, and can therefore be considered to be overexpressed. An outstanding question remains over the organization of natively expressed proteins in the membrane. Here, we have investigated the localization of functional GFP fusions to proteins catalyzing important membrane processes; the secretion motor protein SecA, the membrane insertase YidC1, and the essential phospholipid synthase PgsA using total internal reflection fluorescence microscopy (TIRFM). This allowed natively expressed proteins to be localized with temporal resolution that can capture their dynamics. We characterized dynamic complexes dispersed throughout the membrane displaying diffusive movement with no preferred trajectories. Further characterization focused upon identifying conditions in which the localization pattern was disturbed. A polar mislocalization was identified in a cardiolipin mutant strain. The yeast two-hybrid (Y2H) approach is a robust approach to detect binary interactions on a proteome-scale. We performed genome-wide Y2H screens as well as targeted Y2H analyses for specific interactions involving components of the Sec and Tat secretion machineries of B. subtilis, revealing an intricate protein-protein interaction network involving 71 proteins. Furthermore, three proteins identified in the Tat network, WprA, CsbC and HemAT, were shown to be important for effective protein secretion via the B. subtilis Tat system, indicating that our yeast two hybrid assays reveal biologically significant interactions involving membrane proteins. The studies provide a novel proteomic view on the interaction network of the secretion systems of B. subtilis
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Souza, Renata Damasio de. « Esporos de Bacillus subtilis como adjuvante vacinal ». Universidade de São Paulo, 2014. http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/42/42132/tde-24022015-124003/.

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Résumé :
Esporos de Bacillus subtilis apresentam propriedades adjuvantes, sendo capazes de aumentar a resposta humoral após a sua coadministração com antígenos misturados ou adsorvidos à sua superfície. Mas, para isso, é necessária a produção de esporos altamente purificados e com rendimentos elevados. Neste trabalho, realizamos com sucesso uma análise quantitativa das condições de esporulação e dos métodos de purificação, o que melhorou a reprodutibilidade do processo e a obtenção de amostras com elevado grau de pureza e rendimento. Avaliamos também as propriedades imunomodulatórias destes esporos, utilizando como antígeno modelo a proteína recombinante Gag-p24 do HIV-1. A coadministração, mas não a adsorção à superfície do esporo, aumentou a imunogenicidade do antígeno sem induzir efeitos deletérios após a administração parenteral em camundongos BALB/c e C57BL/6. Além de promoveram a ativação das APCs, os esporos interagem com receptores relacionados à imunidade inata, devido à ausência do efeito adjuvante em camundongos nocautes para TLR2. Esses resultados abrem perspectivas interessantes para a utilização de esporos como adjuvantes vacinais.
Bacillus subtilis spores have been shown to behave as vaccine adjuvants, promoting the increase of antibody responses after co-administration with antigens either admixed or adsorbed on the spore surface. Nonetheless, such specialized application requires highly purified spore preparations at high yields. In this work, we successfully performed a systematic quantitative analysis of sporulation conditions and spore purification methods, which improved the reproducibility of the process and the obtainment of samples with high purity and yield. Afterwards, we further evaluated the immune modulatory properties of these spores using a recombinant HIV-1 Gag-p24 protein as a model antigen. The co-administration, but not adsorption to the spore surface, enhanced the immunogenicity of that target antigen, without inducing deleterious effects, after subcutaneous administration to BALB/c and C57BL/6 mice. Besides promoting activation of antigen presenting cells, spores interact with receptors related to innate immunity, due to the absence of the adjuvant effect on TLR2 knockout mice. These results open interesting perspectives for the use of B. subtilis spores as vaccine adjuvants.
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Deloupy, Alexandre. « Expression stochastique des gènes chez Bacillus subtilis ». Thesis, Sorbonne université, 2018. http://www.theses.fr/2018SORUS443.

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Résumé :
Une population d'individus génétiquement identiques partageant le même environnement présente une certaine variabilité phénotypique résiduelle. Cette hétérogénéité découle de la nature stochastique, ou aléatoire, de l'expression des gènes, également appelée bruit. Cette stochasticité résulte d'une part de la rencontre aléatoire d'espèces chimiques pendant la transcription et la traduction (bruit intrinsèque), et d'autre part des fluctuations dans la concentration de ces substances chimiques (bruit extrinsèque). Un modèle stochastique ne faisant intervenir que le bruit intrinsèque prédit que la force du bruit phénotypique varie linéairement avec l'efficacité de la traduction, mais qu'il ne dépend pas du taux de transcription. Cette prédiction s'est révélée compatible avec des données portant sur un nombre limité de souches et de conditions, mais n'a jamais été entièrement testée sur un grand nombre de souches ayant différentes efficacités de transcription et de traduction. Notre objectif est d'aller plus loin dans le test de cette prédiction en utilisant une collection d'une quarantaine de souches de la bactérie Bacillus subtilis où la protéine GFP est exprimée sous le contrôle de différents promoteurs, TSS et RBS. Pour chaque souche, l'hétérogénéité entre cellules est étudiée en quantifiant le signal de fluorescence au niveau de la cellule unique, à l'aide de techniques de cytométrie en flux et de microscopie en épifluorescence. Nos résultats montrent que, contrairement aux attentes, la force du bruit phénotypique montre une forte corrélation positive avec l'efficacité transcriptionnelle. Nous avons démontré que sur une large gamme d'expression couvrant la majeure partie du protéome de B. subtilis, le bruit d'expression est dominé par les sources de bruit extrinsèques. Par conséquent, les modèles stochastiques d'expression génique ne conviennent pas pour quantifier les effets de la traduction et de la transcription sur le bruit d'expression génétique
A population of genetically identical individuals sharing the same environment exhibits some residual phenotypic variability. Such heterogeneity arises from the stochastic, or random, nature of gene expression also referred as noise. This stochasticity results on the one hand from the random encounter of chemical species during both transcription and translation (intrinsic noise), and on the other hand from the fluctuations in the concentration of these chemicals (extrinsic noise). A stochastic model involving only intrinsic noise predicts that phenotypic noise strength varies linearly with translational efficiency but does not depend on transcriptional one. This prediction was shown to be compatible with data on a limited number of strains and conditions but has never been fully tested on a large collection of strains with different transcription and translation efficiencies. We aim to go further in the test of this prediction by using a collection of ~40 strains of the bacterium Bacillus subtilis where GFP is expressed under the control of different Promoters, TSS and RBS. For each strain, cell-to-cell heterogeneity is investigated by quantifying fluorescence signal at the single cell level, based on flow cytometry techniques and epifluorescence microscopy. Our results show that, contrary to expectations, phenotypic noise strength shows a strong positive correlation with transcriptional efficiency. We demonstrated that over a wide range of expression covering most of the proteome of B. subtilis, the expression noise is dominated by external noise sources. Therefore, stochastic models of gene expression are not suitable for quantifying the effects of translation and transcription on gene expression noise
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Pujic, Petar. « Etude systematique du chromosome de bacillus subtilis ». Paris 7, 1997. http://www.theses.fr/1997PA077269.

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Résumé :
Cette these a ete realisee dans le cadre du projet europeen du sequencage et de l'analyse fonctionnelle du chromosome de b. Subtilis. Une partie du chromosome de b. Subtilis situe entre les marqueurs kdg et le site d'attachement du prophage sp a ete sequence en utilisant une nouvelle strategie de sequencage basee sur l'amplification d'adn en chaine a haute fidelite (lr pcr). La determination et l'analyse de la sequence nucleotidique de cette region ont permis de reveler la presence de 38 cadres du lecture ouverte (orfs) dont 19 sans fonction attribuee. Une carte de transcription de la region situee entre les marqueurs sera et kdg (92 kpb) a ete etablie dans differentes conditions de culture. Des experiences d'hybridation en northern avec des sondes recouvrant cette region ont permis de detecter les profils de transcription de cette region. Les transcrits sont correles avec les phases vegetative, stationnaire ou de sporulation. Ce type d'etude associe a des analyses genetiques et biochimiques devrait aider a l'identification des fonction des 40% d'orfs inconnus de b. Subtilis. Ils ont aussi permis de preciser l'organisation structurale et transcriptionnelle de la region sera -kdg du chromosome de b. Subtilis. Certains operons ont ete etudies plus precisement : l'operon resabcde contenant des genes qui peuvent etre impliques dans la biogenese du cytochrome c. Cet operon est regule positivement par resd (regulateur global), qui regule aussi la transcription les autres genes impliquees dans la biogenese de cytochromes a et bf (genes ctaa et petcbd). L'etude de l'operon kdgrkat a montree qu'il code pour un regulateur : kdgr, une kinase : kdgk, une aldolase : kdga, et un transporteur kdgt. Les quatres genes sont impliques dans le metabolisme du d-galacturonate chez b. Subtilis. L'operon peut etre induit par la pectine, le polygalacturonate, le galacturonate, le tagaturonate, le glucuronate et le fructuronate.
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Bernard, Rémi Pierre. « Résistance à la Bacitracine chez Bacillus subtilis ». Aix-Marseille 2, 2007. http://theses.univ-amu.fr.lama.univ-amu.fr/2007AIX22028.pdf.

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Résumé :
L’enveloppe bactérienne est une cible majeure d’un grand nombre d’antibiotiques naturels. Certains provoquent d’importantes perturbations de la membrane cytoplasmique, d’autres ciblent spécifiquement les différentes étapes enzymatiques de la voie de biosynthèse du peptidoglycane, constituant majeur de la paroi. Pour contrer l’action de ces antibiotiques, les bactéries ont développé divers systèmes de résistance leur conférant un avantage sélectif dans leur niche écologique. Le rejet de l’antibiotique est un des principaux mécanismes de résistance rencontré chez les bactéries. Il implique parfois des transporteurs membranaires de type ABC (pour ATP Binding Cassette) pouvant hydrolyser l’ATP pour exporter ou importer un allocrite. Les bactéries possèdent également divers systèmes leur permettant, d’une part, de détecter un signal environnemental (antibiotique ou stress de la paroi qu’il engendre), et, d’autre part, d’assurer la transduction du signal qui aboutit à une réponse adaptée. Deux types de systèmes sont impliqués dans les réponses aux stress de la paroi : les phosphorelais et les facteurs sigma à fonction extracytoplasmique. Le groupe des Firmicutes, dont la bactérie modèle est Bacillus subtilis, est un groupe ubiquitaire producteur d’antibiotiques et contenant de nombreux organismes pathogènes. Les analyses effectuées au laboratoire ont permis d’identifier chez les Firmicutes des systèmes associant un phosphorelais et un transporteur ABC. Dans chacun des cas, les gènes codant les différents partenaires du système sont à proximité sur le chromosome et le phosphorelais régule l’expression des gènes codant le transporteur ABC. On trouve trois de ces systèmes chez B. Subtilis nommés BceRSAB (anciennement YtsABCD), YvcPQRS et YxdJKLM. L’objectif de notre étude était de tester l’hypothèse selon laquelle ces systèmes pouvaient être impliqués dans la résistance aux antibiotiques ciblant l’enveloppe bactérienne. La bacitracine est un antibiotique qui se complexe à l’undécaprényl pyrophosphate (UPP) et inhibe la dernière étape de la biosynthèse du peptidoglycane : la régénération de l’undécaprényl phosphate (UP). Nos résultats indiquent que le système BceRSAB est le composant majeur de la résistance à la bacitracine chez B. Subtilis. L’expression de l’opéron bceAB est activée, en présence de bacitracine, par le phosphorelais BceRS. Nous avons également identifié une protéine, nommée BcrC, qui participe à la résistance à la bacitracine chez B. Subtilis. Nous avons démontré que cette dernière est une UPP phosphatase impliquée dans la régénération de l’UP et s’oppose ainsi à l’action de la bacitracine. L’expression du gène bcrC ne dépend pas du phosphorelais BceRS mais de trois facteurs sigma à fonction extracytoplasmique. En conclusion, B. Subtilis possède deux types de systèmes de résistance à la bacitracine indépendants et complémentaires. Nous avons par la suite analysé le mécanisme de régulation de l’induction du système BceRSAB par la bacitracine. Nos résultats sont surprenants et montrent clairement que le transporteur ABC BceAB participe à l’activation de l’expression de ses propres gènes de structure avec le phosphorelais BceRS. De plus, lorsque le pool cellulaire d’UPP diminue (lorsque la phosphatase BcrC est surproduite), et en présence de bacitracine, l’expression du gène bceA diminue également. Ceci montre que l’UPP participe, avec la bacitracine, au stimulus du système BceRSAB. Notre hypothèse de travail est que le transporteur ABC, prédit comme étant un exporteur, prend en charge le complexe UPP/bacitracine et agit comme une flippase pour créer une dissymétrie membranaire ressentie par le senseur BceS. Il n’est pas exclu, qu’en présence de bacitracine, le transporteur BceAB puisse interagir avec le senseur BceS pour permettre l’activation du système. La majeure partie des bactéries du groupe des Firmicutes possède, d’une part, des protéines similaires à BcrC, et, d’autre part, des systèmes similaires au système BceRSAB. Toutes les protéines « BcrClike » ont un motif caractéristique permettant de les classer dans la famille des phosphatases de type PAP2. Il est tentant de penser qu’elles sont toutes des UPP phosphatases assurant une des étapes clés de la synthèse du peptidoglycane. Par ailleurs, les deux autres systèmes « Bce-like » de B. Subtilis, YvcPQRS et YxdJKLM, sont également activés en présence d’antibiotiques ciblant l’enveloppe bactérienne et nous savons que le transporteur ABC YvcRS est aussi impliqué dans le mécanisme de régulation. Nous proposons donc que les systèmes « Bce-like » des Firmicutes sont tous des systèmes de détoxification dirigés contre des antibiotiques ciblant l’enveloppe bactérienne.
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Minami, Hiromichi. « Studies on γ-glutamyltranspeptidase of Bacillus subtilis ». Kyoto University, 2003. http://hdl.handle.net/2433/149004.

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Kyoto University (京都大学)
0048
新制・課程博士
博士(農学)
甲第10281号
農博第1353号
新制||農||870(附属図書館)
学位論文||H15||N3802(農学部図書室)
UT51-2003-H702
京都大学大学院農学研究科応用生命科学専攻
(主査)教授 熊谷 英彦, 教授 加藤 暢夫, 教授 村田 幸作
学位規則第4条第1項該当
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Davies, Ashley. « Peptidoglycan architecture and dynamics in Bacillus subtilis ». Thesis, University of Sheffield, 2014. http://etheses.whiterose.ac.uk/8322/.

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Sanders, Rhiannon. « Segregational stability of plasmids in Bacillus subtilis ». Thesis, University of Warwick, 1986. http://wrap.warwick.ac.uk/109832/.

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The stability of plasmids in Bacillus subtilis in the absence of selective pressure under long term chemostat culture and under different conditions of nutrient limitation was investigated. Culture and sampling conditions were established to allow the detection of plasmid-free cells and samples were routinely screened in order to monitor the structural integrity of the resident plasmid. Initially the stability of the plasmid pHV14-F (carrying the repressor gene of phage 0105) in the Bacillus subtilis strain 3G18 was investigated. This plasmid was found to be segregationally and structurally highly unstable. The stability of the Staphylococcus aureus plasmids pC194 and pUB110 along with the Bacillus cereus plasmid pBC16 was examined in the Bacillus subtilis strain 168 trp in chemostat culture under carbon, magnesium and phosphate limitation. All three plasmids were found to be remarkably stably maintained through up to 100 culture generations of their host strain under all three of the nutrient limitations. Under enforced competition from plasmid-free cells at 1% of the chemostat inoculum all three plasmids were retained in the culture but in the presence of 50% plasmid-free cells in the inoculum plasmid-carrying cells were rapidly displaced from the culture. Phosphate limitation was found to exert a slightly greater stringency of selection for plasmid-free cells than either carbon or magnesium limitations (which had similar effects). A derivative of pC194 was isolated, pC194-Ki which was segregationally unstable, the Bacillus subtilis culture losing its plasmid within 30 generations. On restriction endonuclease digestion analysis the plasmid was revealed to be physically very closely related to pHV14 (pC194 and pBR322 ligated at their HindIII sites). Under magnesium limitation all Bacillus subtilis cultures after 2-3 days were predominantly composed of cells with an unusual helical morphology. The development of this morphology under the conditions employed and the actual form of the helical cells themselves was found to be different from previously reported instances of the appearance of helical cells in cultures of Bacillus subtilis.
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Slavíčková, Radka. « Optimalizace produkce vybraných enzymů pomocí Bacillus subtilis ». Master's thesis, Vysoké učení technické v Brně. Fakulta chemická, 2012. http://www.nusl.cz/ntk/nusl-216884.

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Résumé :
In this thesis, optimization of production of lipolytic enzymes by submerzed cultivation of Bacillus subtilis (BS) was studied. Production of lipolytic enzymes was tested in three nutrient media, which differed mainly in main sources of carbon, respectively of nitrogen. The first medium contained mainly extract from calf brain and beef heart (BHIB), the second medium contained peptone and yeast extract (NB) and the third one contained peptone and yeast extract with the addition of 2% (w/v) glucose (NBG). The highest lipolytic activity (0.0784 Uml-1) was measured in NBG medium. Maximum of lipolytic activity was observed before the end of the exponential phase of BS growth in all the media. Temperature optimum in NBG medium was determined from 30 to 50 °C, pH optimum in the range of 5 to 11 and subsequently the temperature stability of lipolytic enzymes produced by the BS was estimated. The activity value was determined spectrometrically using p-nitrophenyllaurate as a substrate. Produced lipolytic enzymes showed maximum activity at 37 °C in the alkaline pH of 8.0. Measurement of temperature stability showed that lipolytic enzymes are relatively thermostable enzymes retaining 100 % of the activity even after 1 hour of cultivation at 30 - 50 °C. The presence of 1% (w/v) olive oil in medium NBG caused a decrease in lipolytic activity by 65 % as well as in pH from 6.5 to 5.4 after 14 days of cultivation. After substitution of glucose by fructose in medium NBG, lipolytic activity showed comparable values during the first week of cultivation. On the other hand, the decrease of lipolytic activity by 29 % in the medium with fructose was observed after 14 days of cultivation. A procedure for the identification of lipolytic enzymes of BS by peptide massfingerprinting was developed to understand the potential of synthetic polyester - poly(e-caprolactone) as a lipase inductor. Degradation study of commercial polyester poly(e-caprolactone) was carried out by submerged cultivation of Bacillus subtilis in NBG medium at initial pH 7.0 and 30 °C for 14 days. PCL (Mn = 10,000, Mw = 14 000) was studied in the form of films (1.0 x 1.0 cm), which were prepared by melt-pressing, rapid cooling of the melt to 4 °C and evaporation of the solvent from 2 % dichlormethane solution. The evaluation of the films shown occurrence of weight loss (7.8 - 17.0 wt.%) together with the formation of numerous holes and cracks in the sample surface in relation to the method of the films preparation. Lipolytic activity values increased by 9 - 17 % in the degradation media compared to control samples. Densitometric monitoring showed also higher increase in cell mass in the degradation medium compared with control samples. Based on the results obtained, the degradation process induced by BS could be suggested.
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