Bibliografías temáticas / Stabilité in vitro

Literatura académica sobre el tema "Stabilité in vitro"

Autor: Grafiati
Publicado: 27 de julio de 2024
Última modificación: 28 de julio de 2024

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Artículos de revistas sobre el tema "Stabilité in vitro"

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Basille, C., L. Hesters, M. C. Bourrier, R. Frydman, R. Fanchin y N. Frydman. "La stabilité des résultats en fécondation in vitro est-elle possible ?" Journal de Gynécologie Obstétrique et Biologie de la Reproduction 38, n.º 4 (junio de 2009): 312–20. http://dx.doi.org/10.1016/j.jgyn.2009.03.005.

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2

Rode, A., C. Hartmann, M. Dron, E. Picard y F. Quetier. "Stabilité de l'ADN chloroplastique et de l'ADN mitochondrial isolés de lignées deTriticum aestivumobtenues par androgenésein vitro". Bulletin de la Société Botanique de France. Actualités Botaniques 133, n.º 4 (enero de 1986): 74. http://dx.doi.org/10.1080/01811789.1986.10826804.

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Aldrees, Abdullah M., Sahal A. Al-Foraidi, Mohammed S. Murayshed y Khalid A. Almoammar. "Stabilité chromatique et dégradation de la force de chaînettes élastomériques orthodontiques transparentes : une étude in vitro". International Orthodontics 13, n.º 3 (septiembre de 2015): 287–301. http://dx.doi.org/10.1016/j.ortho.2015.06.013.

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Lagoutte, Priscillia. "La présentation sur ribosome". médecine/sciences 36, n.º 8-9 (agosto de 2020): 717–24. http://dx.doi.org/10.1051/medsci/2020126.

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Resumen
La présentation sur ribosome (en anglais, ribosome display) est une méthode d’évolution moléculaire et de sélection de banques peptidiques et protéiques. Le ribosome display est réalisé in vitro dans un milieu acellulaire et repose sur la formation d’un complexe ternaire ribonucléoprotéique entre l’ARN, le ribosome et la protéine. Le ribosome display est devenu de nos jours l’une des méthodes de présentation les plus utilisées. Elle a notamment permis le criblage et la sélection de peptides, de protéines, d’échafaudages moléculaires afin d’améliorer leur affinité, leur spécificité, leur activité catalytique ou même leur stabilité. Cette revue présente la mise en œuvre du ribosome display et les applications qui découlent de l’utilisation de cette technologie.
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Daou, Mark, Pascale Habre-Hallage y Elie Zebouni. "In Vitro Evaluation of the Color Stability of Two Different Layering Ceramics after Thermocycling in Coffee = Evaluation In Vitro de la Stabilité de Couleur de Deux Différentes Céramiques de Stratification Après Thermocyclage dans le Café". International Arab Journal of Dentistry 12, n.º 2 (noviembre de 2021): 73–80. http://dx.doi.org/10.12816/0060162.

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Aloulou, A., D. Puccinelli, J. Sarles, R. Laugier, Y. Leblond y F. Carrière. "O028 Étude comparative in vitro de trois préparations enzymatiques pancréatiques : profils de dissolution, libération d’enzymes actifs et stabilité à pH acide". Nutrition Clinique et Métabolisme 21 (noviembre de 2007): 45. http://dx.doi.org/10.1016/s0985-0562(07)78801-5.

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Jolivot, P. A., C. Dunyach-Remy, A. Roussey, A. Jalabert, M. Mallié y S. Hansel-Esteller. "Étude d’activité in vitro et de stabilité de suspensions antifongiques pour bain de bouche : vers une remise en question de pratiques empiriques ?" Pathologie Biologie 60, n.º 6 (diciembre de 2012): 362–68. http://dx.doi.org/10.1016/j.patbio.2012.01.002.

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REZAEI, H., J. GROSCLAUDE, F. EGHIAIAN, T. HAERTLE, M. MARDEN, M. KNOSSOW y P. DEBEY. "Lien entre type génétique et résistance des ovins à la Tremblante : une approche structurale et physico-chimique". INRAE Productions Animales 17, HS (20 de diciembre de 2004): 45–50. http://dx.doi.org/10.20870/productions-animales.2004.17.hs.3626.

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Resumen
Le polymorphisme génétique de la protéine prion ovine associé à des degrés divers de résistance ou de sensibilité à la tremblante ouvre une voie féconde pour comprendre le lien entre les propriétés structurales de la protéine et le mécanisme du développement de la pathologie. Les travaux menés par les équipes de l’INRA, en collaboration avec d’autres équipes nationales, ont apporté des renseignements inattendus sur la stabilité et la convertibilité des variants naturellement rencontrés dans les troupeaux européens. Les mécanismes, au niveau atomique, sous-tendant ces caractéristiques ont pu être explicités par la détermination cristallographique de la structure tri-dimensionnelle de la protéine ovine, apportant en même temps une première information expérimentale sur la structure de la protéine pathologique. Des formes intermédiaires de repliement, sous forme d’oligomères solubles, ont pu être isolées in vitro, et se sont révélées neurotoxiques, ouvrant de nouvelles pistes de recherche vers les déterminants respectifs de la mort neuronale et de la réplication du prion.
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Kitten, Olivier y Pierre Martineau. "Les formats alternatifs aux anticorps". médecine/sciences 35, n.º 12 (diciembre de 2019): 1092–97. http://dx.doi.org/10.1051/medsci/2019217.

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Resumen
Les anticorps sont désormais devenus d’une utilisation courante dans un large champ thérapeutique qui n’est plus restreint à la cancérologie et à l’inflammation. Cette explosion du domaine conduit à des besoins nouveaux qui peuvent être mieux remplis par des molécules inspirées mais différentes des anticorps classiques. En particulier, la molécule anticorps a de multiples fonctions qui ne sont pas toujours nécessaires, comme sa capacité à recruter les cellules du système immunitaire, à se lier de façon bivalente à sa cible ou à présenter une demi-vie plasmatique élevée. En revanche, dans la grande majorité des applications, sa remarquable capacité à reconnaître spécifiquement sa cible moléculaire et surtout sa diversité de reconnaissance doivent être conservées. De plus, les anticorps sont des molécules de très haut poids moléculaire, coûteuses à produire et qui présentent des propriétés physicochimiques limitées ne permettant pas leur utilisation dans des milieux agressifs. Finalement, dans certaines applications thérapeutiques, la grande taille de la molécule (environ 150 kDa) peut également limiter sa diffusion dans les tissus et empêcher la reconnaissance de certaines structures moléculaires peu accessibles. Pour répondre à ces limitations, de nombreux formats alternatifs aux anticorps entiers ont été développés au cours de ces vingt dernières années. Les applications couvrent les domaines de la biotechnologie, du diagnostic in vitro et in vivo et de la thérapie. Deux grandes familles de molécules permettent de couvrir ce champ et seront présentées dans cette mini-revue. Une première famille s’appuie sur la diversité naturelle des anticorps mais en en réduisant la taille, comme les fragments d’anticorps classiques (Fab, scFv) ou ceux provenant des camélidés ou des requins (VHH, V-NAR). La deuxième famille a été développée en partant des propriétés finales désirées et notamment la stabilité en milieu extrême et la productivité en système simple et économique de production comme l’utilisation de bactéries et en y greffant des propriétés de liaison comparables aux anticorps par des méthodes d’évolution moléculaire dirigée in vitro. Cette mini-revue se concentrera sur les molécules les plus avancées, mais le domaine est en très forte et rapide expansion. Il faut noter que beaucoup de ces molécules, voire ces approches, sont couvertes par des brevets et sont souvent développées dans le cadre de jeunes sociétés innovantes dont certaines ont déjà été rachetées par de grands groupes de la pharmacie.
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Couteau, C., E. Paparis y L. J. M. Coiffard. "Comparaison de produits de protection solaire ayant un statut de cosmétique ou de dispositif médical par détermination de leur efficacité, de leur photo-stabilité et de leur résistance à l’eau grâce à une méthode in vitro". Annales de Dermatologie et de Vénéréologie 143, n.º 2 (febrero de 2016): 124–29. http://dx.doi.org/10.1016/j.annder.2015.08.010.

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Más fuentes

Tesis sobre el tema "Stabilité in vitro"

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Arien, Albertina. "Étude in vitro et in vivo de la stabilité de liposomes contenant de la calcitonine". Bordeaux 2, 1995. http://www.theses.fr/1995BOR28364.

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Leenhardt, Julien. "Synthèse et études de radiomarquage au 68Ga, 99mTc, 177Lu et 161Tb de nouveaux chélatants dérivés de l'oxine en vue d'application théranostique". Electronic Thesis or Diss., Université Grenoble Alpes, 2024. http://www.theses.fr/2024GRALS009.

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Resumen
Les applications théranostiques en médecine nucléaire permettraient idéalement de diagnostiquer les cancers et d’effectuer une radiothérapie interne vectorisée avec la même molécule, simplement en permutant le radionucléide utilisé. L’agent théranostique est constitué d’une partie chélatante susceptible de complexer fortement les radionucléides et d’une partie ligand qui permet d’assurer la vectorisation sur une cible tumorale. Aujourd’hui, un des couples de radionucléides le plus prometteur est constitué du Gallium-68 ou [68Ga]Ga3+ (diagnostic, émetteur de particules β+) et du Lutétium-177 ou [177Lu]Lu3+ (thérapeutique, émetteur de particules β-), mais il n’existe pas pour l’instant de système chélatant qui soit aussi bon pour les deux radionucléides. Le chélate DOTA qui est actuellement largement utilisé en médecine nucléaire possède pourtant une cinétique de radiomarquage lente, qui nécessite un chauffage du milieu réactionnel, contre-indiquant son utilisation avec des molécules vectrices thermosensibles. Au Département de Chimie Moléculaire de l’Université Grenoble Alpes, les chimistes ont l’expertise des sidérophores ou de modèles bio-inspirés, qui permettent de complexer très efficacement le gallium, ainsi que d’autres cations métalliques, qui pourraient avoir un intérêt en médecine nucléaire. Mon travail de thèse a donc été initié par des études de radiomarquage de deux de ces sidérophores abiotiques avec le [68Ga]Ga3+ et le [99mTc]Tc3+. Les données obtenues ont clairement démontré que ces sidérophores, O-TRENSOX et O-TRENOX, complexaient efficacement, à température ambiante, ces deux radioisotopes utilisés quotidiennement en imagerie nucléaire. Les études préliminaires de radiomarquage obtenues avec le Terbium-161 ou [161Tb]Tb3+ (thérapeutique, émetteur de particules β- et d’électrons Auger) ont également confirmé que ces structures pouvaient complexer des cations métalliques plus "grands" ouvrant ainsi les portes de la théranostique. Le second aspect traité au cours de cette thèse a été le développement d’un nouveau système chélatant octadentate acyclique N4O4, permettant une meilleure complexation des radionucléides plus exigeants en indice de coordination comme les lanthanides ou les actinides, en conditions douces. En utilisant plusieurs voies de synthèse différentes, nous avons réussi à synthétiser et caractériser ce nouveau ligand afin de pouvoir initier des études de radiomarquage. Ces études ont démontré une excellente complexation avec le [68Ga]Ga3+, le [177Lu]Lu3+ et le [161Tb]Tb3+ à température ambiante permettant de considérer cette nouvelle structure comme efficace pour la complexation de divers radiométaux utilisables en théranostique.L’ensemble de ces résultats indiquent que ces nouveaux systèmes chélatants possèdent des caractéristiques favorables pour le radiomarquage de nombreux radiométaux dans des conditions douces. Ces résultats ouvrent ainsi de nouvelles perspectives dans le développement de nouveaux radiopharmaceutiques pour la théranostique en médecine nucléaire
Theranostic applications in nuclear medicine would ideally allow cancer diagnosis and internal vectorised radiotherapy to be carried out using the same molecule, simply by substituting the radionuclide used. The theranostic agent is made up of a chelating part capable of strongly complexing the radionuclides and a ligand part that enables delivery to a tumour target. Today, one of the most promising pair of radionuclides is Gallium-68 or [68Ga]Ga3+ (diagnostic, β+ particle emitter) and Lutetium-177 or [177Lu]Lu3+ (therapeutic, β- particle emitter), but there is currently no chelating system that is as good for both radionuclides. The DOTA chelate currently used extensively in nuclear medicine, although it has slow radiolabelling kinetics that require heating of the reaction medium, contraindicating its use with heat-sensitive molecules. At the Department of Molecular Chemistry at Grenoble Alpes University, chemists have expertise in siderophores or bio-inspired models, which enable gallium to be complexed very efficiently, as well as other metal cations that could be of interest in nuclear medicine. My thesis work therefore began with radiolabelling studies of two of these abiotic siderophores with [68Ga]Ga3+ and [99mTc]Tc3+. The data obtained clearly demonstrated that these siderophores, O-TRENSOX and O-TRENOX, complexed effectively, at room temperature, these two radioisotopes used daily in nuclear medicine imaging. Preliminary radiolabelling studies obtained with Terbium-161 or [161Tb]Tb3+ (therapeutic, emitting β- particles and Auger electrons) also confirmed that these structures could complex 'larger' metal cations, thus opening the doors to theranostics. The second aspect dealt during this thesis was the development of a new N4O4 acyclic octadentate chelating system, allowing better complexation of radionuclides with higher coordination index requirements, such as lanthanides or actinides, under mild conditions. Using several different synthetic routes, we succeeded in synthesising, purifying and characterising this new ligand in order to initiate radiolabelling studies. These studies demonstrated excellent complexation with [68Ga]Ga3+, [177Lu]Lu3+ and [161Tb]Tb3+ at room temperature, enabling us to consider this new structure as effective for complexing various radiometals that can be used as theranostics.Taken together, these results indicate that these new chelating systems have favourable characteristics for the radiolabelling of many radiometals under mild conditions. These results open up new prospects for the development of new radiopharmaceuticals for theranostics in nuclear medicine
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Courraud, Julie. "Etude du comportement des caroténoïdes et rétinoïdes en digestion in vitro : stabilité, bioaccessibilité et pouvoir antioxydant au niveau intestinal". Thesis, Montpellier 1, 2013. http://www.theses.fr/2013MON13513/document.

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Resumen
Selon la FAO, 2 milliards de personnes souffrent de la « faim cachée » qui correspond aux carences en micronutriments incluant la carence en vitamine A, principale cause de cécité dans le monde. Par ailleurs, une alimentation excédentaire est source de stress oxydant pour le corps, facteur de risque de nombreuses maladies non transmissibles comme le diabète et les maladies cardiovasculaires. Contenus dans les produits végétaux, certains caroténoïdes représentent une source indirecte de vitamine A et pourraient participer aux effets bénéfiques de la consommation de fruits et légumes via des propriétés antioxydantes. Dans cette thèse, le comportement in vitro des caroténoïdes et rétinoïdes pendant la digestion a été étudié, depuis leur libération de la matrice alimentaire jusqu'à leurs interactions avec les cellules intestinales. Mes recherches s'articulent autour de la micellisation : processus clé de l'absorption des caroténoïdes et rétinoïdes. Dans un premier temps, la stabilité et la bioaccessibilité en digestion in vitro de ces composés purs ont été comparées à celles de leurs homologues issus d'un jus de carotte, d'épinards crus et cuits et d'une farine fortifiée. Dans un deuxième temps, un nouveau modèle d'oxydation de nano-émulsions intestinales à base de sels biliaires (SB) a été développé. Les relations entre structure des micelles mixtes, réactivité à l'oxydation et protection par des antioxydants ont été étudiées grâce notamment au suivi de la dégradation des acides gras. Enfin, des expériences préliminaires ont été menées sur la réactivité enzymatique de cellules coliques (Caco-2) à divers oxydants et aux micelles mixtes. Pendant la digestion in vitro, le β-carotène et palmitate de rétinyl purs étaient particulièrement instables contrairement à la lutéine et à l'acétate de rétinyl. De plus, la matrice alimentaire protège ces composés et favorise leur bioaccessibilité surtout lorsqu'elle est broyée ou cuite. En effet, les prétraitements ont un impact conséquent sur la libération des caroténoïdes et doivent être considérés comme des moyens sérieux pour optimiser les apports. Les nano-émulsions intestinales mises au point se composaient de micelles mixtes sphériques ou cylindriques, ces dernières étant les moins résistantes à l'oxydation. En effet, la distribution des molécules de SB doit être différente selon la morphologie de la micelle, impactant ainsi leur réactivité. Dans nos conditions expérimentales, l'AAPH fut le seul oxydant efficace. L'α-tocophérol et la lutéine ont significativement ralenti la dégradation des acides gras contrairement au β-carotène. Leur place au sein de la micelle (cœur ou bordure) pourrait expliquer ces observations. Enfin, aucun des oxydants testés n'a significativement modifié l'activité catalase des cellules Caco-2. En revanche, la mise en contact avec les micelles à base de SB ont significativement diminué l'activité des 3 enzymes suivies. L'effet était positivement corrélé à la concentration en SB dont la conjugaison fut un élément déterminant. Finalement, le β-carotène, la lutéine, et l'acétate de rétinyl présents dans ces micelles ont en partie rétabli l'activité de la catalase contrairement au rétinol, palmitate de rétinyl et à l'α-tocophérol
According to the FAO, two billions of people suffer from the « hidden hunger » which corresponds to micronutrient deficiencies and includes the vitamin A deficiency, principal cause of blindness throughout the world. Besides, an excessive food consumption entails an oxidative stress for the organism which increases the risk to develop non communicable diseases such as diabetes and cardiovascular diseases. Present in numerous fruits and vegetables, some carotenoids are an indirect source of vitamin A and could also contribute to the health benefits of the consumption of fruits and vegetables via antioxidant properties. In this thesis, in vitro behaviour of carotenoids and retinoids during in vitro digestion (IVD) has been studied, from their release from dietary matrices to their interactions with intestinal cells. My research is structured around micellisation: key process of carotenoid and retinoid absorption. First, stability and bioaccessibility during IVD of these pure compounds have been compared with those of their homologues from carrot juice, raw and cooked spinach and fortified flour. Second, a new model of oxidation of intestinal bile salt (BS)-based nanoemulsions has been developed. Relations between mixed micelles structure, reactivity to oxidation and protection by antioxidants have been studied using fatty acid degradation monitoring. Finally, preliminary experiment were carried out on enzymatic reactivity of colon cells (Caco-2) to various oxidants and mixed micelles. During IVD, pure β-carotene and retinyl palmitate were particularly unstable conversely with lutein and retinyl acetate. Moreover, the dietary matrix protected these compounds and favoured their bioaccessibility especially when it was grounded or cooked. Indeed, pre-treatment have a significant impact on carotenoid release and should be considered as serious means to optimize intake. Developed intestinal nanoemulsions constituted of spherical or cylindrical micelles, the latter being less resistant to oxidation. Distribution of BS molecules is likely to differ according to the micelle morphology, thereby influencing their reactivity. In our experimental conditions, AAPH only was efficient as oxidant. Lutein and α-tocopherol significantly slowed fatty acid degradation, conversely with β-carotene. Their location within the micelle (core or border) could explain these observations. Besides, none of the tested oxidant significantly modified the catalase activity of Caco-2 cells. However, the contact with BS-based nanoemulsions significantly decreased the activity of the three tested enzymes. This effect was positively correlated with BS concentration whose conjugation revealed determining. Finally, β-carotene, lutein and retinyl acetate in micelles partly re-established catalase activity, conversely with retinol, retinyl palmitate and α-tocopherol. To conclude, IVD is an easy tool which allows independent comparisons of several parameters on micronutrient behaviour during digestion. Furthermore, the confrontation of different matrices may help to develop relevant strategies against vitamin A deficiency. Proposed nanoemulsions displayed various physical and chemical characteristics, thereby influencing their reactivity to oxidation. The antioxidant capacity of lutein and α-tocopherol could be observed in this new model. Lastly, the preliminary results on Caco-2 cells revealed some interesting interactions between micellised BS and antioxidant enzymes. Numerous questions arose that could not be addressed in this work but open perspectives for the future
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Debin, Arnaud. "Formation et stabilité des triples hélices purines : études in vitro et dans les cellules de mammifères". Paris 11, 2000. http://www.theses.fr/2000PA11T013.

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Resumen
Les oligonucléotides qui forment des triples hélices (OFT) sont de courts fragments d'acides nucléiques capables de reconnaître sélectivement des séquences d 'ADN double brins. Dans ce travail, nous avons étudié la formation et la stabilité de triples hélices obtenues à l'aide d'oligonucléotides composés de purines, les OFT (G,A). Nous avons sélectionné in vitro les séquences d'ADN double brin capable de former des triples hélices stables à 20°C et 50°C dans des conditions ioniques déterminées. Cette sélection a été obtenue par une double approche aptamère dans laquelle les séquences de départ des oligonucléotides et les duplex cibles d 'ADN sont aléatoires. Les séquences sélectionnées obéissent à 2 règles : - elles possèdent toutes un grand pourcentage de guanine: elles sont dites riches en G - pour un nombre de G donné, la stabilité du triplex résultant est plus grande si les guanines se suivent en bloc non interrompu par des adénines. Cette étude démontre l 'importance cruciale de la composition relative en guanine de l'OFT sur la stabilité de la triple hélice. Elle conduit à la notion de triples hélices riches en G, qui englobe les triples hélices purines G,A mais aussi les triples hélices mixtes G,T. L'étude de la formation et de la stabilité des triples hélices riches en guanine in vitro, dans des conditions ioniques mimant les conditions ioniques intracellulaires, a confirmé la grande sensibilité des triples hélices purines aux concentrations en magnésium mais aussi au potassium, notamment sur la cinétique de formation, limitant potentiellement leur utilisation en culture cellulaire. Afin de surmonter l'effet inhibiteur du potassium, un nouveau concept d'oligonucléotide OFT, que nous appelons le concept " oligonucléotide ZIPPER", a été développé. Nous avons ensuite étudié la stabilité et la formation des triples hélices purines ex vivo, grâce à l'utilisation d'une technique d 'empreinte au Diméthylsulfate (DMS), permettant la visualisation de l'empreinte de 1'oligonucléotide sur l'ADN directement dans les cellules. Ceci a permis de démontrer la stabilité des triples hélices dans les cellules de mammifères lorsqu'elles sont introduites artificiellement dans les cellules après préformation in vitro. En revanche, nous n’avons pu détecter par cette méthode la formation des triples hélices directement dans les cellules
Triplex-Forming Oligonucleotides (TFOs) are short nucleic acid fragments able to recognize selectively double-stranded DNA sequences. In this thesis, we have studied the formation and stability of triples helices using purine TFOs (composed of Guanines and Adenines). Firstly, we have selected double-stranded DNA sequences capable offorming stable triplexes at 20 or 5. Q. °C with corresponding 13mer purine oligonucleotides. This selection was obtained by a double aptamer approach where both the starting sequences of the oligonucleotides and the target DNA duplex were random. The results of selection were confirmed by a cold exchange method and the influence ofthe position of a 'mismatch' on the stability ofthe triplex was documented in several cases. The selected sequences obey two rules: (i) they have a high G content; (ii) for a given G content the stability of the resulting triplex is higher if the G residues lie in stretches. Secondly, triplex formation was studied in conditions mimicking potassium concentrations and temperatures in cells. In presence of 1OmM Mgcl2, KCl concentrations up to 150 mM significantly lowered both efficiency (triplex: initial duplex) and rate constants of triplex formation. For 20 mer TFO, no dissociation of triplex was observed during 24 hours either in the absence of monovalent cations or in the presence of 150 mM KCl. In this case, the negative effect of the KCl is probably due to the self-association of the oligonucleotide in competitive structures. This negative effect may be overcome by the prior formation of a short duplex either on the 3 '-or 5'- end of the 20mer TFO. We refer to these partial duplexes as 'zipper' TFOs. It was demonstrated that a 'zipper' TFO could forma triplex over the full lengh of the target, thus unzipping the short complementary strand. Thirdly, triplex stability and formation was studied in live mammalian cells. Ex vivo DMS footprint analysis after electroporation of the pre-formed into the cell have shown the presence of the triple helix inside the cells. However we were unable to show triplex formation inside cells using various methods of oligonucleotide delivery, and using various target sequences. Our results show that neither (i) chromatinization of the DNA target, (ii) intracellular K+ concentration nor (iii) cytoplasmic versus nuclear separation of the TFO and DNA target are responsible for the intracellular arrest of triplex formation. We suggest the existence of a cellular mechanism, based on a compartmentalization of TFOs and/or TFO trapping, which separates oligonucleotides from the DNA target. Further work is needed to find oligonucleotide derivatives and means for their delivery to overcome the problem of triplex formation inside cells
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Pinguet, Frédéric. "Optimisation du schéma d'administration du MELPHALAN : Etudes in vitro sur des lignées cellulaires cancéreuses d'origine humaine et étude in vivo chez l'homme : [thèse soutenue sur un ensemble de travaux]". Montpellier 1, 1998. http://www.theses.fr/1998MON13515.

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Rouinsard, Alexandre. "Étude du caractère de panachure et de sa stabilité lors de la micropropagation de plantes monocotylédones". Thesis, Rennes, Agrocampus Ouest, 2021. http://www.theses.fr/2021NSARC156.

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La micropropagation des variétés à feuillage panaché (plusieurs couleurs sur une même feuille) peut générer des plantes non conformes au phénotype d’origine, particulièrement dans le cadre de plantes monocotylédones acaules. Or, par leur caractère fortement ornemental, ces variétés présentent un fort potentiel commercial. L’objectif était de déterminer les potentialités de micropropagation des monocotylédones panachées dans un contexte industriel et commercial, de définir la stabilité de leurs phénotypes, et de comprendre l’apparition des plantes hors-type. Les observations de coupes foliaires au microscope confocal à balayage laser sur les quatre cultivars étudiés Yucca gloriosa ‘Variegata’ (YgVAR), Yucca flaccida ‘Golden Sword’ (YflGS), Phormium tenax ‘Jessie’ (PtJE) et Cordyline australis ‘Pink Passion’ (CaPP) ont révélé que tous les cultivars étaient des chimères périclines, soit une panachure liée à un méristème stratifié avec plusieurs génotypes différents. En micropropagation,YgVAR a présenté des taux de conformité élevés, PtJE des taux modérés et CaPP de faibles taux. Des analyses histologiques sur les vitroplants ont mis en évidence des différences majeures dans le développement et le comportement de multiplication in vitro de ces trois espèces de l’ordre des Asparagales : YgVAR n'a développé que des méristèmes axillaires (AxM), PtJE principalement des AxM et quelques méristèmes adventifs (AdM), et CaPP à la fois des AxM et des AdM. Alors que les méristèmes axillaires préformés maintiennent la structure chimérique, les méristèmes adventifs la maintiennent peu. Donc la stabilité de la panachure de ces variétés dépend de leur propension à se propager par méristèmes adventifs. Des essais pour abaisser la dominance apicale et stimuler les méristèmes axillaires ont été menés, ainsi qu’une analyse du transcriptome des différents tissus panachés chez YflGS. Des protocoles de production industrielle adaptés à chaque cultivar sont finalement proposés
The micropropagation of variegated cultivars (several colors on the same leaf) can generate off-type plants to the original phenotype, particularly in the case of monocotyledonous plants. However, because of their highly ornamental character, these cultivars have a strong commercial potential. The objective were to determine the micropropagation potential of variegated monocots in an industrial and commercial context, to define the stability of their phenotypes, and to understand the origin of off-types. Observations of leaf sections under a confocal laser scanning microscope on the four studied cultivars: Yucca gloriosa 'Variegata' (YgVAR), Yucca flaccida 'Golden Sword' (YflGS), Phormium tenax 'Jessie' (PtJE), and Cordyline australis 'Pink Passion' (CaPP) revealed that all cultivars were periclinal chimeras, i.e., a variegation bound to stratified meristem with several different genotypes.In micropropagation, YgVAR showed high compliance rates, PtJE moderate rates and CaPP low rates. Histological analyses on vitroplants revealed major differences in the development and in vitro propagation behavior of these three species of the order Asparagales: YgVAR developed only axillary meristems (AxM), PtJE mainly AxM and some adventitious meristems (AdM), and CaPP both AxM and AdM. While preformed axillary meristems maintain the chimeric structure, adventitious meristems maintain little. Thus, the variegation stability of these chimeras depends on their propensity to propagate by adventitious meristems. Trials to lower apical dominance and stimulate axillary meristems were conducted, as well as transcriptome analysis of different variegated tissues in YflGS. Industrial production protocols adapted to each cultivar are finally proposed
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Vernier, Arnaud. "Développement instrumental en spectrométrie de masse pour le diagnostic in vitro en microbiologie clinique". Phd thesis, Université Claude Bernard - Lyon I, 2014. http://tel.archives-ouvertes.fr/tel-00986856.

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Resumen
La spectrométrie de masse, en particulier le couplage HPLC/MRM3, est un outil bien adapté au diagnostic in vitro, particulièrement en microbiologie clinique. L'utilisation en routine de cette technologie est cependant tributaire de sa sensibilité et de sa spécificité. Ce travail de thèse a pour objectif d'étudier la possibilité d'éjecter et de détecter simultanément et de façon sélective des ions de ratio masse/charge donnés, ceux-ci étant confinés dans un piège ionique quadrupolaire. Cette approche permet de supprimer les étapes de balayage en masse et d'intégration mathématique du signal en mode MRM3 ce qui permet de gagner à la fois en sensibilité et en spécificité (en diminuant le temps de cycle et en diminuant le rapport signal sur bruit). Cet objectif a été poursuivi premièrement par une étude théorique approfondie des équations du mouvement des ions dans un piège radiofréquence ; deuxièmement par une étude numérique de la stabilité de ces équations et enfin troisièmement par une validation expérimentale de ces résultats théoriques. La présentation de ces trois approches fait l'objet du présent mémoire
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Helary, Christophe. "Hydrogels de collagène concentrés pour des substituts dermiques améliorés : évaluation in vitro et in vivo". Paris 6, 2010. http://www.theses.fr/2010PA066288.

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Ibrahim, Hany. "Développement de méthodes analytiques : détermination de médicaments dans les fluides biologiques et études de stabilité de nouveaux composés antiplasmodiaux in vitro". Toulouse 3, 2008. http://www.theses.fr/2008TOU30283.

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Resumen
L'analyse de composés ou de métabolites dans les fluides biologiques nécessite des méthodes sélectives et très sensibles pour leur détection et leur quantification lors des études pharmacologiques et cliniques. La première partie du travail a pour objet l'analyse d'antiinflammatoires non stéroïdiens dans des médicaments et du sérum, par HPLC et détection de fluorescence. En complément, une comparaison entre l'HPLC avec fluorescence conventionnelle et la µHPLC avec fluorescence induite par laser a été menée pour déterminer la chloroquine et la quinine dans le sérum humain en utilisant de très faibles volumes d'échantillons injectés. Ceci a conduit à la méthode la plus sensible connue à ce jour (LOD < 2 femtomoles). Dans une seconde partie, la biotransformation de nouvelles entités chimiques (NCE) à activité antiplasmodiale a été étudiée en utilisant plusieurs systèmes analytiques incluant les méthodes LC-MS. La stabilité des NCE in vitro et leurs interactions avec les globules rouges ont été recherchées afin d'approcher leurs mécanismes d'action. L'utilisation de molécules marquées a permis de confirmer l'interprétation des spectres de masse et de comprendre les premières étapes de la biotransformation
The analysis of compounds and/or metabolites in biological fluids needs very sensitive and selective methods for the detection and quantification in pharmacological and clinical studies. The first part of the work concerns the determination of NSAIDs in pharmaceuticals and human serum by dual-mode gradient HPLC and fluorescence detection. In addition a comparison between HPLC with conventional fluorescence, and µHPLC with laser induced fluorescence detection was carried out to determine chloroquine and quinine in human serum, using very small injected samples. This resulted in the most sensitive method known to date (LOD < 2 femtomoles). In the second part of the work, the biotransformation of new chemical entities (NCEs) showing promising antiplasmodial activity has been studied with several analytical systems including LC-MS methods. The stability of the NCEs in vitro and their interactions with human red blood cells have been investigated to begin to understand their mechanisms of action. Tagged molecules have been used to confirm the interpretation of the mass spectra and the first step in the biotransformation pathway
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Gonnet, Maud. "Evaluation in vitro et in vivo de la stabilité et de la biodisponibilité de molécules liposolubles encapsulées et incluses dans une matrice modèle". Phd thesis, Université d'Angers, 2010. http://tel.archives-ouvertes.fr/tel-00538930.

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Resumen
Ce travail de thèse porte sur l'encapsulation du β-carotène (βC) dans des nanocapsules lipidiques (NCLs) formulées avec des constituants de grade alimentaire, afin d'augmenter sa biodisponibilité. Dans un premier temps, nous avons mis en évidence, in vitro, que les NCLs étaient dégradées par l'association de sels biliaires et d'enzymes pancréatiques. La déstabilisation des NCLs pourrait rendre le βC accessible à l'absorption grâce à son inclusion dans des structures de type micellaire. Dans un deuxième temps, la modélisation des propriétés rhéologiques et électriques de l'interface des NCLs a été réalisée par tensiométrie et zétamétrie. Ces études ont montré que l'encapsulation du βC n'avait pas d'impact sur les propriétés rhéologiques et électrophorétiques de l'interface. Une étude sur matrice modèle (émulsion alimentaire complexe) a montré que l'inclusion du βC dans les NCLs protégeait le βC et augmentait ses propriétés antioxydantes. Enfin, des études in vivo chez le rat ont souligné que l'encapsulation d'un composé radiomarqué lipophile augmentait son absorption intestinale. Ce système devrait par conséquent augmenter la biodisponibilité du βC grâce à sa solubilisation dans le coeur lipidique et la dispersion fine de la phase huileuse dans un milieu digestif.
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Más fuentes

Libros sobre el tema "Stabilité in vitro"

1

Bense, Christine Adelle. The in vitro stability of cross-linked fibrin and fibrin/hyaluronan-coated polyurethanes in the presence of plasmin. Ottawa: National Library of Canada, 1998.

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2

Schulz-Gebhard, Burkhard. Experimentelle Untersuchungen in vitro zur Stabilität von Sehnennähten nach verschiedenen Nahttechniken unter der Verwendung von unterschiedlichem synthetischem Nahtmaterial. [s.l.]: [s.n.], 1989.

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3

Kaupp, Holger. Formulierung, In-vitro-Verfügbarkeit und Stabilität von Hexetidin. 1992.

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4

Kumar, Mohan B. Genetic stability of micropropagated and in vitro cold-stored strawberries. 1995.

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5

Pierson-Perry, James F. CLSI EP25-A: Evaluation of Stability of In Vitro Diagnostic Reagents; Approved Guideline, EP25A. CLSI, 2009.

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6

Jacob, Margareta. In-vitro-Charakteristik von konserviertem autologen Plazentablut: Zellzählung, Differentialblutbild, Extrinsic-Gerinnung, Inhibitoren, Sterilität, Stabilität bei Lagerung. 1990.

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7

Reeb, Rainer. In-vitro-Charakteristik von konserviertem autologen Plazentablut: Erythrozytenparameter, Intrinsic-Gerinnung, Fibrinolyse, Sterilität und Stabilität bei Lagerung. 1990.

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8

Schröder, Susanne. Untersuchungen zur Stabilität des gesamten und freien prostataspezifischen Antigens und deren Einfluss auf die in vitro-Diagnostik. 2000.

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9

Wen, Chuck Kaung. Atomic force microscopy studies of fibrous long spacing type collagen aggregates formed in-vitro: Self-assembly, structure and stability. 2003, 2003.

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10

Atomic force microscopy studies of fibrous long spacing type collagen aggregates formed in-vitro: Self-assembly, structure and stability. Ottawa: National Library of Canada, 2003.

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Capítulos de libros sobre el tema "Stabilité in vitro"

1

Camin, Leopoldo L. y Eugene L. Saklad. "In Vitro Stability of Radiotracers". En Principles of Radiopharmacology, 179–92. Boca Raton: CRC Press, 2021. http://dx.doi.org/10.1201/9780429288760-11.

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2

Logue, Susan J. "Genetic stability in microspore-derived doubled haploids". En In Vitro Haploid Production in Higher Plants, 1–51. Dordrecht: Springer Netherlands, 1996. http://dx.doi.org/10.1007/978-94-017-0477-9_1.

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3

Potter, R. H. y M. G. K. Jones. "Molecular analysis of genetic stability". En In Vitro Methods for Conservation of Plant Genetic Resources, 71–91. Dordrecht: Springer Netherlands, 1991. http://dx.doi.org/10.1007/978-94-011-3072-1_4.

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4

Savic, Snezana, Slobodanka Tamburic, Biljana Jancic, Jela Milic y Gordana Vuleta. "The Impact of Urea on the Colloidal Structure of Alkylpolyglucoside-Based Emulsions: Physicochemical and In Vitro /In Vivo Characterization". En Colloid Stability, 259–74. Weinheim, Germany: Wiley-VCH Verlag GmbH & Co. KGaA, 2014. http://dx.doi.org/10.1002/9783527631193.ch51.

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5

Awrejcewicz, J. y K. Tomczak. "Stability improvement of the vibro-impact discrete systems". En Dynamics of Vibro-Impact Systems, 109–18. Berlin, Heidelberg: Springer Berlin Heidelberg, 1999. http://dx.doi.org/10.1007/978-3-642-60114-9_12.

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6

Ivanov, A. P. "Stability of periodic motions in systems with unilateral constraints". En Dynamics of Vibro-Impact Systems, 119–26. Berlin, Heidelberg: Springer Berlin Heidelberg, 1999. http://dx.doi.org/10.1007/978-3-642-60114-9_13.

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7

Rahnemai-Azar, Amir Ata, Masahito Yoshida, Volker Musahl y Richard Debski. "In Vitro Biomechanical Analysis of Knee Rotational Stability". En Rotatory Knee Instability, 3–14. Cham: Springer International Publishing, 2016. http://dx.doi.org/10.1007/978-3-319-32070-0_1.

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8

Harding, K. y E. E. Benson. "Biochemical and Molecular Methods for Assessing Damage, Recovery and Stability in Cryopreserved Plant Germplasm". En Genetic Preservation of Plant Cells in Vitro, 113–69. Berlin, Heidelberg: Springer Berlin Heidelberg, 1995. http://dx.doi.org/10.1007/978-3-642-78661-7_8.

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9

Ecker, Horst. "Nonlinear stability analysis of a single mass rotor contacting a rigid backup bearing". En Dynamics of Vibro-Impact Systems, 79–88. Berlin, Heidelberg: Springer Berlin Heidelberg, 1999. http://dx.doi.org/10.1007/978-3-642-60114-9_9.

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Rohela, Gulab Khan, Phanikanth Jogam, Pawan Saini, Dulam Sandhya, Venkataiah Peddaboina y Mahipal S. Shekhawat. "Assessing the Genetic Stability of In Vitro Raised Plants". En Commercial Scale Tissue Culture for Horticulture and Plantation Crops, 245–76. Singapore: Springer Nature Singapore, 2022. http://dx.doi.org/10.1007/978-981-19-0055-6_11.

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Actas de conferencias sobre el tema "Stabilité in vitro"

1

Kovačević, Danijel, Dražen Kovačević, Vanja Kovačević, Mira Majkić, Radojica Đoković y Marko Cincović. "In vitro stability of hormones in cow blood samples". En Zbornik radova 26. medunarodni kongres Mediteranske federacije za zdravlje i produkciju preživara - FeMeSPRum. Poljoprivredni fakultet Novi Sad, 2024. http://dx.doi.org/10.5937/femesprumns24017k.

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Resumen
Hormones are very important in cows because they participate in the orchestrated rearrangement of the organism for the coming lactation (homeoresis) and as such have great diagnostic and prognostic significance, so maintaining their stability in the sample is of crucial importance. Three hundred samples originating from dairy cows in different periods of lactation participated in this research. The samples were divided into 6 groups: according to the time from sampling to processing in the laboratory (0-4h, 4-8h and over 8h) and according to the presence of pre-analytical factors (group with hemolysis, group transported at ambient temperature and group with small sample volume). he samples were left at +4°C and were tested once a day during 6 days of sample storage. Samples that were placed at -20°C were tested once a month for 6 months. The maximum permissible instability calculated on the basis of analytical and intraindividual variability ranged from 6.2 to 6.8 % (T3, T4, STH. IGF-I and progesterone) and up to 7.1 to 7.2 % (for insulin and cortisol) and it is considered that the sample has lost its stability if during the time there is a change in the value of the parameters in a percentage above this maximum determined value. The lowest stability at +4°C was shown by progesterone, which can be stored for up to 48 hours. Next was insulin, which can be stable for up to 3 days in a sample affected by preanalytical errors, but was more stable in samples not affected by preanalytical errors. Cortisol, T3 and T4 have less stability and can be stored for up to 4 or 5 days if the sample is loaded with pre-analytical errors. With frozen samples, no significant decrease in stability was found during the experimental period. The stability of endocrinological parameters is influenced by the properties of hormones and the existence of pre-analytical errors in the test tube.
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Senavongse, Wongwit. "Stability characteristics of patellofemoral prostheses: An in-vitro pilot study". En 2011 Biomedical Engineering International Conference (BMEiCON) - Conference postponed to 2012. IEEE, 2012. http://dx.doi.org/10.1109/bmeicon.2012.6172063.

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3

Smirnova, Vera B., Anton V. Proskurnikov y Natalia V. Utina. "New Criteria for Self-Synchronization of Two Unbalanced Vibro-Exciters". En 2022 16th International Conference on Stability and Oscillations of Nonlinear Control Systems (Pyatnitskiy's Conference) (STAB). IEEE, 2022. http://dx.doi.org/10.1109/stab54858.2022.9807478.

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4

Morrow, Kaity, Fallon Fitzwater y Lorin Maletsky. "Assessing Rotary Stability of the Knee In Vitro Using Principal Component Analysis". En ASME 2012 Summer Bioengineering Conference. American Society of Mechanical Engineers, 2012. http://dx.doi.org/10.1115/sbc2012-80733.

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Resumen
Clinicians typically assess the functional status of the knee subjectively through manipulations to the knee’s passive connective tissue restraint under minimal load. The resulting translation or rotation at a given flexion angle is defined as the laxity of the knee which is used to suggest (in)stability. However, recent studies have shown that instability is not necessarily determined by knee laxity1. Dynamic stability at the knee is achieved through a complex interaction between soft tissue structures, neuromuscular control and articular geometry. It is during dynamic functional movements, such as walking, that patients suffer from buckling or giving way sometimes resulting in falls 2.
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Srivastava, Dr Smita y Dr A. K. Srivastava. "Stability enhancement of Azadirachtin (a biopesticide) produced in vitro against atmospheric degradation". En Annual International Conference on BioInformatics and Computational Biology & Annual International Conference on Advances in Biotechnology. Global Science and Technology Forum, 2011. http://dx.doi.org/10.5176/978-981-08-8119-1_biotech07.

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Manee, Sirikhwan y Jasadee Kaewsrichan. "Stability AND in Vitro Permeability of Body Lotion Containing Okra Seeds' Extract". En ICBBS '17: 6th International Conference on Bioinformatics and Biomedical Science. New York, NY, USA: ACM, 2017. http://dx.doi.org/10.1145/3121138.3121193.

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Vayron, Romain, Patrick Karasinski, Domitille Loriot y Guillaume Haiat. "Ultrasonic assessment of the in vitro biomechanical stability of a dental implant". En ICA 2013 Montreal. ASA, 2013. http://dx.doi.org/10.1121/1.4800632.

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Awrejcewicz, Jan y Krzysztof Tomczak. "Analytical Stability Improvement of the Periodic Vibro-Impact Processes". En ASME 1999 Design Engineering Technical Conferences. American Society of Mechanical Engineers, 1999. http://dx.doi.org/10.1115/detc99/vib-8002.

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Resumen
Abstract In this paper an attention is focused on stabilisation improvement of periodic orbits of a one- and two-degree-of-freedom nonautonomous vibro-impact systems. This approach, among others, includes two problems. 1. A possibility of a sufficient stability improvement of the considered vibro-impact periodic motion using a feedback loop control is presented. 2. An original analytical averaging technique applied to a one-degree-of-freedom system is demonstrated. It enables to predict the efficient delay loop coefficients in order to achieve the desired stabilisation. In addition, an efficient delay loop control applied to two-degree-of-freedom system is proposed and illustrated.
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Taylor, C. y R. F. Baugh. "IN VITRO DEMONSTRATION OF "HEPARIN REBOUND"". En XIth International Congress on Thrombosis and Haemostasis. Schattauer GmbH, 1987. http://dx.doi.org/10.1055/s-0038-1644184.

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Resumen
"Heparin rebound", the in vivo appearance of measurable heparin anticoagulant activity following theapparent neutralization of heparin by protamine, hasbeen a problem sporadically associated with the use of heparin in cardiovascular surgery. A number of mechanisms have been proposed to explain rebound, and to some extent each may contribute to the phenomena. As yet no reliable, predictable method has been demonstrated for measuring, reproducing or quantifying "heparin rebound".We have demonstrated and measured the appearance of heparin anticoagulant activity following neutralization with protamine in citrated whole blood. The reappearance of heparin anticoagulant activity was associated with a rapid loss of protamine. The loss of protamine followed 1st order enzyme kinetics, and was indicative of the action of an enzyme. The anticoagulant activity which eappeared could be titrated againwith protamine. The loss of protamine neutralizing activity, in whole blood, could be followed by titration with heparin using a recalcified activated clotting time. The rate of loss varied with both individual blood donors and with the type and source of protamine. The rate of loss of protamine was great enough to influence in. vivo heparin/protamine neutralization ratios, i.e. at 4 units of heparin/ml, 1 unit/ml anticoagulant activity was routinely recovered within 30 minutes following initial neutralization. The indications for cardiovascular surgery are:1)the in vivo neutralization ratio should be adjusted to account for loss of protamine activity, 2) the higherthe blood levels of heparin used during surgery, themore significant the potential for heparin rebound, and 3) protamines may be evaluated in an in vitro test which measures the stability of protamine neutralizing activity in whole blood.
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Bin Yang, Sheng-Yong Geng y Jin-Ye Wang. "Physical stability of cholesterol derivatives combined with liposomes and their in vitro behavior". En 2013 35th Annual International Conference of the IEEE Engineering in Medicine and Biology Society (EMBC). IEEE, 2013. http://dx.doi.org/10.1109/embc.2013.6610450.

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Informes sobre el tema "Stabilité in vitro"

1

Packard, Alan B. In Vitro Assessment of the In Vivo Stability of Cu-64 Radiopharmaceuticals. Office of Scientific and Technical Information (OSTI), diciembre de 2011. http://dx.doi.org/10.2172/1031323.

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2

Saini, Ravinder, Saeed Hassan y Abdulkhaliq Alshadidi. Effect of chemical disinfection on the dimensional stability of polyvinyl ether siloxane impression material: a systemic review and meta-analysis. INPLASY - International Platform of Registered Systematic Review and Meta-analysis Protocols, mayo de 2023. http://dx.doi.org/10.37766/inplasy2023.5.0042.

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Resumen
Review question / Objective: Does chemical disinfection effects the accuracy and dimensional stability of the dental impressions made from PVES elastomers?” Eligibility criteria: All in vitro studies with data on the effects of disinfection on PVES were included. Studies were selected based on the following criteria: (1) studies should have comparison data between native and disinfected PVES impressions, (2) methods of disinfection should be chemical disinfectants, and (3) studies published in English.pves,
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Castillo Saldarriaga, Carlos. Evaluation of the stability of granulated prototypes based on a Colombian yeast strain of Meyerozyma uilliermondii and oregano essential oil. Corporación Colombiana de Investigación Agropecuaria - AGROSAVIA, 2016. http://dx.doi.org/10.21930/agrosavia.poster.2016.7.

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Resumen
Nuevos aditivos funcionales a las dietas de rumiantes son necesarios para sostener la leche. La productividad en países tropicales como Colombia, donde el cambio climático se ha convertido en un inconveniente. En CORPOICA, se identificó una levadura colombiana nativa Meyerozyma guilliermondii cepa Lv196 como un microorganismo prometedor con un alto potencial probiótico en ensayos in vitro cuando se mezcla con aceite esencial de orégano (OEO). Debido a la propiedad antimicrobiana de OEO, una alternativa diferente de prototipos debe proponerse para evitar la pérdida de viabilidad de células de levadura durante el tiempo de almacenamiento. Por lo tanto, el objetivo de este estudio fue evaluar la estabilidad de diferentes prototipos compuesto por biomasa de levadura Lv196 y OEO para seleccionar el que garantiza la viabilidad de las células de levadura
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Mawassi, Munir y Valerian V. Dolja. Role of the viral AlkB homologs in RNA repair. United States Department of Agriculture, junio de 2014. http://dx.doi.org/10.32747/2014.7594396.bard.

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Resumen
AlkB proteins that repair DNA via reversing methylation damage are conserved in a broad range of prokaryotes and eukaryotes including plants. Surprisingly, AlkB-domains were discovered in the genomes of numerous plant positive-strand RNA viruses, majority of which belong to the family Flexiviridae. The major goal of this research was to reveal the AlkB functions in the viral infection cycle using a range of complementary genetic and biochemical approaches. Our hypotheses was that AlkB is required for efficient replication and genetic stability of viral RNA genomes The major objectives of the research were to identify the functions of GVA AlkB domain throughout the virus infection cycle in N. benthamiana and grapevine, to investigate possible RNA silencing suppression activity of the viral AlkBs, and to characterize the RNA demethylation activity of the mutated GVA AlkBs in vitro and in vivo to determine methylation status of the viral RNA. Over the duration of project, we have made a very substantial progress with the first two objectives. Because of the extreme low titer of the virus particles in plants infected with the AlkB mutant viruses, we were unable to analyze RNA demethylation activity and therefore had to abandon third objective. The major achievements with our objectives were demonstration of the AlkB function in virus spread and accumulation in both experimental and natural hosts of GVA, discovery of the functional cooperation and physical interaction between AlkB and p10 AlkB in suppression of plant RNA silencing response, developing a powerful virus vector technology for grapevine using GLRaV-2-derived vectors for functional genomics and pathogen control in grapevine, and in addition we used massive parallel sequencing of siRNAs to conduct comparative analysis of the siRNA populations in grape plants infected with AlkB-containing GLRaV-3 versus GLRaV-2 that does not encode AlkB. This analysis revealed dramatically reduced levels of virus-specific siRNAs in plants infected with GLRaV-3 compared to that in GLRaV-2 infection implicating AlkB in suppression of siRNA formation. We are pleased to report that BARD funding resulted in 5 publications directly supported by BARD, one US patent, and 9 more publications also relevant to project. Moreover, two joint manuscripts that summarize work on GVA AlkB (led by Israeli PI) and on viral siRNAs in grapevine (led by US PI in collaboration with University of Basel) are in preparation.
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Christopher, David A. y Avihai Danon. Plant Adaptation to Light Stress: Genetic Regulatory Mechanisms. United States Department of Agriculture, mayo de 2004. http://dx.doi.org/10.32747/2004.7586534.bard.

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Resumen
Original Objectives: 1. Purify and biochemically characterize RB60 orthologs in higher plant chloroplasts; 2. Clone the gene(s) encoding plant RB60 orthologs and determine their structure and expression; 3. Manipulate the expression of RB60; 4. Assay the effects of altered RB60 expression on thylakoid biogenesis and photosynthetic function in plants exposed to different light conditions. In addition, we also examined the gene structure and expression of RB60 orthologs in the non-vascular plant, Physcomitrella patens and cloned the poly(A)-binding protein orthologue (43 kDa RB47-like protein). This protein is believed to a partner that interacts with RB60 to bind to the psbA5' UTR. Thus, to obtain a comprehensive view of RB60 function requires analysis of its biochemical partners such as RB43. Background & Achievements: High levels of sunlight reduce photosynthesis in plants by damaging the photo system II reaction center (PSII) subunits, such as D1 (encoded by the chloroplast tpsbAgene). When the rate of D1 synthesis is less than the rate of photo damage, photo inhibition occurs and plant growth is decreased. Plants use light-activated translation and enhanced psbAmRNA stability to maintain D1 synthesis and replace the photo damaged 01. Despite the importance to photosynthetic capacity, these mechanisms are poorly understood in plants. One intriguing model derived from the algal chloroplast system, Chlamydomonas, implicates the role of three proteins (RB60, RB47, RB38) that bind to the psbAmRNA 5' untranslated leader (5' UTR) in the light to activate translation or enhance mRNA stability. RB60 is the key enzyme, protein D1sulfide isomerase (Pill), that regulates the psbA-RN :Binding proteins (RB's) by way of light-mediated redox potentials generated by the photosystems. However, proteins with these functions have not been described from higher plants. We provided compelling evidence for the existence of RB60, RB47 and RB38 orthologs in the vascular plant, Arabidopsis. Using gel mobility shift, Rnase protection and UV-crosslinking assays, we have shown that a dithiol redox mechanism which resembles a Pill (RB60) activity regulates the interaction of 43- and 30-kDa proteins with a thermolabile stem-loop in the 5' UTR of the psbAmRNA from Arabidopsis. We discovered, in Arabidopsis, the PD1 gene family consists of II members that differ in polypeptide length from 361 to 566 amino acids, presence of signal peptides, KDEL motifs, and the number and positions of thioredoxin domains. PD1's catalyze the reversible formation an disomerization of disulfide bonds necessary for the proper folding, assembly, activity, and secretion of numerous enzymes and structural proteins. PD1's have also evolved novel cellular redox functions, as single enzymes and as subunits of protein complexes in organelles. We provide evidence that at least one Pill is localized to the chloroplast. We have used PDI-specific polyclonal and monoclonal antisera to characterize the PD1 (55 kDa) in the chloroplast that is unevenly distributed between the stroma and pellet (containing membranes, DNA, polysomes, starch), being three-fold more abundant in the pellet phase. PD1-55 levels increase with light intensity and it assembles into a high molecular weight complex of ~230 kDa as determined on native blue gels. In vitro translation of all 11 different Pill's followed by microsomal membrane processing reactions were used to differentiate among PD1's localized in the endoplasmic reticulum or other organelles. These results will provide.1e insights into redox regulatory mechanisms involved in adaptation of the photosynthetic apparatus to light stress. Elucidating the genetic mechanisms and factors regulating chloroplast photosynthetic genes is important for developing strategies to improve photosynthetic efficiency, crop productivity and adaptation to high light environments.
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