Tesis sobre el tema "Rats spontanément hypertendus"

L'influence du diabète streptozotocique non insulino dépendant et du vieillissement sur lemétabolisme des acides gras à longues chaînes, particulièrement sur la biosynthèse des acides gras essentiels de la famille linoléique, a été étudiée dans les microsomes hépatiques de rats spontanément hypertendus (SHR) en comparaison avec des rats normotendus wistar Kyoto (WKY), agés de 10, 30 et 90 jours, soumis ou non, dès l'âge de deux jours, à des injections intrapéritonéales de streptozotocine. Les activités microsomales hépatiques de carbone-9 désaturation de l'acide stéarique, de carbone-6 désaturation de l'acide linoléique et de carbone-5 désaturation de l'acide dihomo-y-linoléique sont diminuées chez le SHR diabétique. Les modifications de la composition en acides gras des phospholipides, des triglycérides et des lipides totaux des microsomes hépatiques, des coeurs, des reins et des cerveaux ne sont que partiellement en accord avec les altérations des étapes de conversion des acides gras à longues chaînes observées chez les SHR diabétiques. Nous montrons d'autre part que l'évolution avec l'âge des activités de désaturation dépend du substrat étudié mais pour chacun d'entre eux l'évolution est différente. Cette étude, conduite sur la base d'un même régime alimentaire permet donc d'obtenir des informations sur les perturbations du métabolisme des acides gras insaturés impliquées dans le diabète non insulino dépendant seul ou associé à l'hypertension artérielle. Notre objectif est de déterminer, dans un travail ultérieur, s'il est possible ou non de moduler ce métabolisme lors de l'association diabète-hypertension artérielle, par un régime lipidique et/ou une thérapie appropriés, et d'établir des recommandations nutritionnelles et/ou thérapeutiques ciblées sur les acides gras insaturés
Streptozotocin non-insulin-dependent diabetes mellitus and aging effects on long chain fatty acids metabolism, and paerticulary on the biosynthesis of N-6 series essential fatty acids, wistar Kyoto normotensive rats (WKY) , 10 30 and 90 days old, submitted or not, at 2 days of age, to intraperitoneally injections of streptozotocin. Decreased 9 carbons (N-9) 6 and 5 (N-6 series) desaturations were observed in liver microsomes of diabetic SHR. The fatty acid composition of microsomes, heart, kidney and brain total lipids, phospholipids and triglycerides is partially in agreement with the altered desaturase activities. Besides, our results indicate that evolution of desaturation activities with age depended on the substrate being studied, but that for each substrate desaturation activity desaturation evolution was different. This study on the basis of the same diet, allow data on unsaturated fatty acid metabolism pathways involved in non insulin dependent diabetes mellitus, alone or associated to hypertension, our aim is to determine, in a subsequent work, if it is possible or not to modulate this metabolism, during associated diabetes-hypertension, using appropriated lipid diet and/or therapy, and to established nutritional and/or therapy recommendations focused on unsaturated fatty acids

Des altérations de la fluidité des membranes cellulaires pourraient intervenir dans le développement des maladies cardiovasculaires, probablement en modulant le fonctionnement de certaines protéines. La protéine de transfert des esters de cholestérol (CETP) est responsable du transfert des esters de cholestérol (EC) entre les différentes classes de lipoprotéine plasmatique. Les acides gras non estérifiés (AGNE) présents à la surface des lipoprotéines favorisent ce transfert des HDL vers les LDL et VLDL ; au contraire, un enrichissement en Apolipoprotéine A-II (APO A-II) provoque une inhibition du transfert. La capacité des AGNE à stimuler ce transfert est dépendante de la structure de la chaine hydrocarbonée. Le mécanisme par lequel cette structure influence ce transfert reste encore mal défini. Les AGNE ayant des propriétés physico-chimiques différentes, nous avons déterminé l'influence, in vitro, des AGNE saturés et insaturés de longueur de chaine variable sur la fluidité des LDL et HDL#3 humaines en résonance paramagnétique électronique (RPE), par le calcul du paramètre d'ordre S des acides 5, 10 et 12 doxyl stéarique incorporés a la surface des particules enrichies ou non en AGNE, ou enrichies artificiellement en APO A-II. Des concentrations croissantes en AGNE provoquent une augmentation de la fluidité des particules. Lorsque les lipoprotéines sont enrichies en AGNE, les modifications de la fluidité dépendent de la structure de la chaine. Les AGNE à chaine moyenne (12:0 et 14:0) sont plus efficaces que leurs homologues à chaine courte (8:0 et 10:0) et a chaine longue (16:0 et 18:0). L'introduction d'une double liaison dans la chaine favorise la capacité des acides gras à augmenter la fluidité des lipoprotéines. Comparativement a des HDL#3 natives, un enrichissement artificiel en APO A-II provoque une diminution de la fluidité de ces particules. La capacité des AGNE de structure de chaine variable à stimuler la réaction de transfert des EC, et l'enrichissement des HDL#3 en APO A-II à inhiber cette réaction, pourraient être liées à des altérations de la fluidité de la surface des lipoprotéines. La fluidité de cette dernière pourrait être déterminante dans la réaction de transfert, ceci en conditionnant la disponibilité des EC à la surface de la lipoprotéine. Les acides gras polyinsaturés (AGPI) sont des constituants majeurs des membranes cellulaires pouvant en influencer la fluidité. Il pourrait exister une relation entre hypertension artérielle, biosynthèse des AGPI et fluidité membranaire. Nous avons évalué la fluidité des membranes microsomales hépatiques, site des réactions de désaturation des AGPI, la composition en AGPI et en cholestérol de ces membranes, ainsi que les activités de delta 9, delta 6n-6, delta 6 n-3 et delta 5 n-6 désaturantes ont été déterminées chez le rat spontanément hypertendu (SHR) adulte comparativement au rat normotendu Wistar Kyoto (WKY). Un régime enrichi soit en acide éicosapentaènoïque (régime EPA 30), soit en acide arachidonique (regime ARASCO) a également été administré à ces animaux pendant trois semaines. Sous l'influence d'un régime standard, le coeur des membranes microsomales des SHR est plus fluide que celui des WKY. Les teneurs en 18:1n-9, 20:3 n-6 et 20:4 n-6 sont différentes de celles des WKY. Les activités de delta 9 et delta 6 n-6 désaturations sont partiellement inhibées chez le SHR. Apres trois semaines de régime EPA 30, nous avons observé une diminution de la pression artérielle systolique des SHR. La différence de fluidité existant entre les deux souches persiste avec les régimes EPA 30 et ARASCO. Toutefois, comparativement au régime standard, la fluidité du coeur des membranes microsomales est augmentée lorsque les SHR sont nourris avec le régime ARASCO. Sous l'influence des régime EPA 30 et ARASCO, un enrichissement des microsomes en AGPI en n-3 et en n-6, respectivement, est mis en évidence chez les deux souches. La présence d'AGPI précurseurs des prostaglandines hypotensives devrait favoriser l'installation d'un état anti-hypertensif chez le SHR nourris avec le régime EPA 30. Quel que soit l'enrichissement du régime, l'augmentation de la fluidité du coeur des membranes microsomales des rats SHR s'accompagne d'une diminution des activités de désaturation. Nous observons le même phénomène chez les shr soumis au régime ARASCO. Ces résultats suggèrent l'existence d'un lien étroit entre les activités de désaturation et la fluidité des membranes microsomales hépatiques lors de l'hypertension génétique.

Introduction: Malgré l'absence d'innervation cholinergique, les vaisseaux sont très réactifs à la présence d'acétylcholine (ACh). De plus, ce neurotransmetteur est couramment utilisé pour évaluer la fonction endothéliale des vaisseaux. Cependant, les informations sur les cholinestérases vasculaires (ChE), les enzymes qui mettent fin à l'action de l'ACh, sont rares. Le principal objectif de cette thèse de doctorat était de caractériser les ChE vasculaires et l'ensemble du système cholinergique de l'aorte dans des conditions normales et pathologiques. Méthodes: Des rats Wistar mâles adultes et des rats spontanément hypertendus (SHR) nourris avec une alimentation régulière ou riche en graisses ont été utilisés dans le cadre du projet. L'expression relative des enzymes et des transporteurs étudiés a été déterminée par la méthode RT-qPCR. Les activités de ChE dans les extraits de tissus ont été mesurées par la méthode d'Ellman, la coloration de l'activité a été réalisée par la méthode de Tsuji et la localisation des protéines a été faite par double immunohistochimie. Les formes moléculaires de ChE ont été séparées par des gradients de saccharose. Résultats et conclusion: Toutes les enzymes et tous les transporteurs impliqués dans la synthèse, le stockage, la libération et la dégradation de l’ACh ont été détectés dans l'aorte du rat au niveau de l'ARNm et au niveau des protéines. Cela confirme que l'aorte est un tissu cholinergique non neuronal, capable de soutenir pleinement le cycle de vie des ACh. Les ChE sont présents principalement sous forme de formes ancrées dans la PRiMA dans chaque partie de l'aorte, tandis que la butyrylcholinestérase (BChE) est l’enzyme dominante, localisée principalement sur le muscle lisse. Dans les rat SHR, des niveaux plus faibles de BChE ont été détectés, accompagnés d'une diminution des expressions relatives de la carnitine acétyltransférase et des transporteurs de cations organiques. Cela suggère une signalisation cholinergique plus faible dans l'aorte de la SHR par rapport aux rats normotendus. Dans l'expérience pharmacologique, l'inhibition du BChE et l'alimentation riche en graisses ont toutes deux entraîné une prise de poids significative et une augmentation des taux sériques de TAG. De plus, un régime riche en graisses a induit une augmentation des niveaux d'ARNm du BChE, indiquant son implication dans le métabolisme des lipides
Introduction: Despite the lack of cholinergic innervation, vessels are highly reactive to the presence of acetylcholine (ACh). Moreover, this neurotransmitter is commonly used to assess the endothelial function of vessels. However, information about vascular cholinesterases (ChE), the enzymes that terminate ACh action, is spares. The main aim of this dissertation thesis was to characterize vascular ChE and overall non-neuronal cholinergic system in the aorta under physiological and pathological conditions. Methods: Adult male Wistar rats and spontaneously hypertensive rats (SHR) were used in the project, fed either with regular or high-fat diet. Relative expression of studied enzymes and transporters were determined by RT-qPCR method. ChE activities in tissue extracts were measured by Ellman's assay, activity staining was performed by Tsuji’s method and proteins localizations were done by dual immunohistochemistry. Molecular forms of ChE were studied by sucrose gradients. Results and conclusion: The enzymes and transporters necessary for ACh synthesis, storage, release, and degradation were detected in the rat aorta at mRNA and at protein levels. This confirms that aorta is a non-neuronal cholinergic tissue, capable to fully support the ACh life cycle. ChE are present mainly as PRiMA-anchored forms in each part of the aorta, while butyrylcholinesterase (BChE) is the dominant ChE, localized primarily in the smooth muscle. In SHR, lower levels of BChE were detected, accompanied by decreased relative expressions of carnitine acetyltransferase and organic cation transporters. This suggests lower cholinergic signaling in SHR aorta as compared to normotensive rats. In the pharmacological experiment, both inhibition of BChE and high-fat diet resulted in significant weight gain and increased serum TAG levels. Moreover, a high-fat diet induced mRNA expression of BChE. Our data suggest BChE involvement in lipid metabolism
Úvod: Napriek absencii cholínergickej inervácie, cievy sú vysoko reaktívne na prítomnosť acetylcholínu (ACh). Okrem toho, práve tento neurotransmiter sa využíva vo fyziologických experimentoch na sledovanie funkčnosti endotelu. Napriek tomu však chýbajú informácie o prítomnosti cholínesteráz (ChE), enzýmov, ktoré ukončujú jeho účinok v cievach. Cieľom tejto dizertačnej práce bola detailne charakterizovať tieto enzýmy a kompletne preštudovať prítomnosť komponentov neneuronálneho cholínergického systému v aorte normotenzných a spontánne hypertenzných potkanov (SHR). Metódy: V experimentoch boli použité 12-týždňové potkany rodu Wistar a SHR, ktoré boli kŕmené buď štandardnou alebo vysoko-tukovou stravou. Relatívna expresia študovaných enzýmov a transportérov bola stanovená metódou RT-qPCR. Aktivity ChE boli stanovené v tkanivových extraktoch pomocou Ellmanovej metódy, aktivitné farbenie bolo prevedené podľa Tsujiho metódy. Na vizualizáciu a lokalizáciu bola využitá metóda dvojfarebnej immunohistochémie. Molekulové formy ChE boli charakterizované pomocou metódy sacharózového gradientu. Výsledky a diskusia: Všetky enzýmy a transportéry, ktoré sú potrebné na syntézu, uchovávanie, vylučovanie a degradáciu ACh boli potvrdené nielen na úrovni mRNA, ale aj na úrovni proteínov. Tieto zistenia potvrdzujú, že aorta patrí medzi neneuronálne cholínergické tkanivá. ChE sú prítomné primárne v PRiMA-kotvenej forme v každej časti aorty, pričom butyrylcholínesteráza (BChE) je dominantná a je prítomná hlavne v hladkom svalstve. V spontánne hypertenznom modeli bola detegovaná nižšia BChE aktivita a tiež nižšia relatívna expresia karnitínacetyltransferázy a organických katiónových transportérov. Vo farmakologickom experimente, aj inhibícia BChE, aj vysoko-tuková strava spôsobila signifikantný prírastok hmotnosti a zvýšenie sérových hladín triacylglycerolov. Okrem toho, vysoko-tuková strava indukovala zvýšenie hladín mRNA pre BChE, čo naznačuje dôležitú úlohu tohto enzýmu nielen vo fyziológii ciev, ale aj v metabolizme lipidov

Afin de rechercher une origine moléculaire du dérèglement de l'homéostasie calcique observé dans la cellule du muscle lisse vasculaire dans l'hypertension primaire, nous avons étudié et comparé le métabolisme des phospholipides membranaire chez le Rat spontanément hypertendu (SHR) et son témoin normo tendu WKY. En raison des nombreuses analogies existantes entre les cellules du muscle lisse vasculaire et les plaquettes sanguines, ces dernières constituent un modèle intéressant pour étudier le métabolisme du calcium chez le sujet hypertendu et pour tenter d'identifier l'anomalie qui pourrait intervenir dans la pathogénèse de l'hypertension. Dans les plaquettes, comme d'ailleurs dans nombre d'autres cellules où les réponses physiologiques sont dépendantes de la concentration en ions calcium libre dans le cytosol, il est maintenant bien établi que c'est le déclenchement du métabolisme des phospholipides contenant l'Inositol (C'est-à-dire phosphoinositides) qui constitue l'étape initiale dans la mobilisation de calcium. Les phosphoinositides comprennent le phosphatidyl inositol (PI), la phosphatidylinositol 4 phosphate (PIP) et le phosphatidylinositol 4,5 bi phosphate (PIP2). Lors de la stimulation des plaquettes par la thrombine par exemple, c'est l'hydrolyse de PIP2 par une phospholipase C qui initie le processus d'activation cellulaire. Dans la 1ère partie de ce travail, nous avons donc étudié et comparé le métabolisme des phosphoinositides dans les plaquettes du Rat SHR et de son témoin normo tendu WKY : à l'état basal, dans les plaquettes au repos c'est à dire non stimulées et lors de l'activation plaquettaire par la thrombine. Pour ce faire, les plaquettes isolées sont marquées au 32p et la mesure de la radioactivité associée à PI, PIP, PIP2 et à l'acide phosphatidique (PA), permet l'analyse quantitative et comparative du métabolisme de ces lipides dans les deux souches. De rats. Des réponses physiologiques à la thrombine telles que l'agrégation et la sécrétion de sérotonine (SHT) sont mesurées en parallèle. Nos résultats montrent que dans les plaquettes non activées, le métabolisme basal des phosphoinositides est identique et suggèrent que les quantités de PI, PIP, PIP2 et PA sont identiques. Lors de l'activation par la thrombine nos résultats montrent que comparées aux plaquettes de WKY, celles de SHR se sont avérées plus réactives en ce qui concerne les réponses physiologiques (Agrégation et sécrétion de Sérotonine) et en ce qui concerne l'Hydrolyse et la resynthèse des phosphoinositides. Nos résultats montrent donc une hyperréactivité des plaquettes de SHR vis à vis de la thrombine. Cette hyperréactivité serait due à l'activité accrue de la phospholipase C que nous avons montrée chez SHR. Puisque les plaquettes libèrent un grand nombre de substances vase­ actives, leur hyperréactivité chez SHR peut être liée au spasme artériolaire observé dans l'HTA primaire, et aux thombi vasculaires fréquentes dans cette pathologie. Afin d'essayer de déceler une cause éventuelle de l'altération de cette enzyme qui agit au niveau membranaire nous avons dans la 2ème partie de ce travail, étudié et comparé le métabolisme des autres phospholipides dans les plaquettes des deux souches en faisant des marquages isotopiques avec différents précurseurs radioactifs ( 32P,3H glycérol, H choline). Nos résultats montrent que dans les plaquettes de SHR, non stimulées le marquage de la PC est plus rapide que dans celles de WKY. La composition des membranes plaquettaire de phospholipides s'est avérée similaire entre les 2 souches. Ceci montre donc que le marquage accru de PC que nous avons observé· représentait une vitesse de renouvellement rapide et non une synthèse nette. Ce renouvellement rapide mettant en jeu t9ute la tête polaire de PC serait dû à l'activité accru d'une phospholipase C spécifique pour PC. Cette enzyme n'avait jamais été décrite dans. La plaquette sanguine. Ce renouvellement rapide de PC chez SHR pourrait provoquer des anomalies membranaires pouvant expliquer plusieurs altérations observées dans plusieurs métabolismes membranaires dans l'hypertension artérielle. Chacune de ces deux phospholipase C hyperactives chez SHR pourrait être impliquée directement ou indirectement dans la génèse et (ou) le maintien de l'hypertension artérielle chez le rat spontanément hypertendu

Le rat spontanément hypertendu ou SHR, développé par Okamoto et Aoki, est le modèle expérimental le plus fréquemment étudié de l'hypertension artérielle humaine essentielle. Cependant, il n'existe que très peu d'étude des effets de traitements antihypertenseurs au cours de la gestation sur les paramètres gestationnels, et sur le développement ultérieur de l'hypertension des sujets issus des sujets traités. Nous avons observé, à la suite d'un traitement parental par la nicergoline 100 µg/ kg/j i. P. De l'âge de 5 semaines à la mise -bas, une moindre élévation de la pression artérielle chez les petits âgés de 13 semaines, au cours de 2 portées successives. De plus, l'activité rénine plasmatique de ces petits issus de rats traités était significativement plus basse que celle des petits issus de parents non traités. Pour essayer d'expliquer ces résultats, nous avons traité des rats par la prazosine, du captoril et de l'indométhacine, chaque produit représentant une des facettes de l'activité pharamacologique connue de la nicergoline. La prazosine n'avait aucun effet sur les rats parentaux, ni sur leur progéniture. Le captopril, bien que normalisant la pression artérielle des rats traités, n'influe pas sur celle de leur descendance. L'indométhacine diminue de façon modérée mais significative , du même ordre que la nicergoline, la pression artérielle tant des rats traités que leur progéniture. Il semble donc qu'il faille chercher dans une action sur la synthèse des prostaglandines l'origine de l'action sur la nicergoline sur ce modèle. Ces résultats posent également la question du rôle des prostaglandines dans la genèse de l'hypertension artérielle, et la possibilité d'une intervention pharamcologique très précoce sur une entité supposée génétique.

L'hypothèse que l'hypertension peut conférer un état d'hypercoagulabilité découle des principales complications liées à l'hypertension, l'infarctus du myocarde et accident vasculaire cérébral. Notre objectif était de déterminer si l'hypertension spontanée confère des changements dans les protéines de la coagulation et de la capacité de production de thrombine dans le sang et la paroi vasculaire. Nous avons utilisé le modèle de rats spontanément hypertendus (SHR) par rapport aux rats Wistar. La génération de thrombine est plus faible dans le plasma riche en plaquettes et plasma sans plaquettes de SHR par rapport à Wistar. Ceci est lié aux faibles concentrations en facteur tissulaire (TF) et en prothrombine, ainsi qu?un taux plus élevé de TFPI dans le plasma des SHR. En revanche, l'ajout d'anneaux d'aorte thoracique de SHR à un pool de plasma Wistar a donné lieu à une augmentation plus importante dans la génération de thrombine par rapport à l'ajout d'anneaux équivalent du Wistar. Alors qu'aucune différence n'a été observée pour les cellules endothéliales, la formation de thrombine était plus élevée à la surface de culture CML aortiques des SHR que des Wistar. L'exposition des phospholipides chargés négativement est plus élevée sur les anneaux et les CML des SHR que les Wistar. Les activités TF et TFPI étaient plus élevés chez les CML des SHR. Ces résultats montrent une opposition de génération de thrombine à la surface de la paroi artérielle et dans le plasma des rats SHR par rapport aux rats Wistar. Le phénotype thrombotique plus élevé de la paroi vasculaire SHR est dû à la capacité du CML à soutenir la génération de thrombine. Ces résultats suggèrent que le remodelage de la membrane phospholipidique et la synthèse de molécules pro-coagulantes induites par hypertension dans les CML sont des substrats pour une formation de thrombine accrue dans la paroi vasculaire
The hypothesis that hypertension may confer a hypercoagulable state arises from the main complications associated with hypertension, stroke and myocardial infarction. Our objective was to determine whether spontaneous hypertension confers changes in the coagulation proteins and the thrombin generating capacity in blood and the vascular wall. We used the model of spontaneously hypertensive rats (SHR) compared with Wistar rats. Thrombin generation was lower in platelet-rich plasma and platelet-free plasma from SHR compared to Wistar. This was related to lower tissue factor (TF) and prothrombin as well as higher TFPI levels in SHR plasma. In contrast, the addition of thoracic aorta rings of SHR to a Wistar plasma pool resulted in a higher increase in thrombin generation compared to the addition of equivalent rings from Wistar. Whereas no difference was observed for endothelial cells, thrombin formation was higher at the surface of cultured SHR aortic SMCs than from Wistar. Exposure of negatively-charged phospholipids was higher on SHR than on Wistar rings as well as on SMCs. TF and TFPI activities were higher in SHR SMCs. These results show opposite thrombin generating capacity of plasma and vessel walls in SHR compared to Wistar. The higher prothrombotic phenotype of the SHR vessel wall was due to the ability of SMCs to support thrombin generation. These findings suggest that the hypertension-induced membrane phospholipid reorganization and synthesis of procoagulant molecules in SMCs provide substrates for increased thrombin formation within the vessel wall

La qualité de l'alimentation influence fortement l'apparition et le développement de l'hypertension artérielle et des maladies cardiovasculaires. Certains nutriments, comme la vitamine E (α-tocophérol) ou les acides gras polyinsaturés (AGPI), auraient des propriétés hypotensives. Cependant, les résultats concernant ces effets restent controversés. Dans ce travail, nous étudions l'action de ces nutriments sur la pression artérielle, chez le rat génétiquement hypertendu SHR. Nous mesurons aussi le statut antioxydant, l'agrégation plaquettaire, le profil lipidique plasmatique et lipoprotéique qui sont également impliqués dans le développement des maladies cardiovasculaires. La supplémentation en α -tocopherol n'a pas d'effet sur la pression artérielle, ni sur la résistance des VLDL+LDL à la peroxydation lipidique. Par contre, l'agrégation plaquettaire et la cholestérolémie sont diminuées. L’ajout, dans le régime, d'un mélange d'acides eicosapentaenoique, docosahexaenoique et α-linolénique (EPA+DHA+GLA) a un effet antihypertenseur et augmente les capacités de défense antiradicalaire, ainsi que la résistance des VLDL+LDL a la péroxydation lipidique. Ces AGPI diminuent la vitesse de l'agrégation plaquettaire chez les rats SHR. En conclusion, l'effet protecteur de la vitamine E vis à vis des maladies cardiovasculaires serait plutôt dû à la diminution de l'agrégation plaquettaire et de la cholestérolémie qu'à la diminution de la quantité de LDL oxydées. Le mélange EPA+DHA+GLA serait plus efficace. Il diminue l'agrégation plaquettaire et la pression artérielle, il augmente la résistance à l'attaque radicalaire et à la peroxydation lipidique. Ces AGPI apparaissent donc comme des nutriments pharmacologiquement actifs pour prévenir et combattre l'hypertension et les maladies cardiovasculaires.

La vasorelaxation β-adrénergique (β-A) est assurée par trois sous-types de récepteurs (Rβ1-, β2- et β3-A), dont les effets sont plus ou moins altérés dans l’hypertension artérielle (HTA). Ce travail a consisté à évaluer la participation de ces Rβ-A dans les effets relaxants du cartéolol et du céliprolol, dans l’aorte et les vaisseaux du train postérieur de rats Wistar Kyoto (WKY) et spontanément hypertendus (SHR). La stimulation des récepteurs AT1 par l’angiotensine II, principal composant du système rénine-angiotensine (SRA), induit une vasoconstiction qui contribue au déséquilibre entre les phénomènes vasodilatateurs et vasoconstricteurs observé dans l’HTA. Ainsi ce travail a aussi consisté à déterminer si les effets vasodilatateurs des deux β-bloquants étaient modifiés par un inhibiteur des récepteurs AT1 du SRA. Cette étude montre l’altération de la relaxation aortique β1/β2-A, dépendante du NO endothélial, induite par le céliprolol chez le rat SHR. En revanche, la relaxation des vaisseaux du train postérieur n’est pas modifiée. Elle révèle le rôle des Rβ3-A dans les effets vasodilatateurs du céliprolol au niveau des vaisseaux du train postérieur de rats WKY. Elle met en évidence les propriétés antagonistes α1-adrénergiques et antioxydantes du cartéolol dans l’aorte de rats SHR. Cette étude montre enfin que l’inhibition des récepteurs AT1 du SRA améliore les relaxations induites par le cartéolol et le céliprolol dans l’aorte de rats SHR, probablement par des mécanismes limitant les effets α1-adrénergiques et potentialisant les effets β-A. En revanche, le SRA ne semble pas jouer de rôle physiopathologique dans la relaxation des vaisseaux du train postérieur de rats SHR
The β-adrenergic (β-A)-induced vasorelaxation is mediated by three receptor subtypes (β1-, β2- and β3-AR), whose effects are more or less impaired in hypertension. This work consisted in assessing the role of β-ARs in carteolol and celiprolol-induced relaxant effects in Wistar Kyoto (WKY) and spontaneously hypertensive rat (SHR) aorta and hinquarter vessels. Angiotensin II, the major component of renin-angiotensin system (RAS), by stimulating AT1 receptors, induces a vasoconstrictor effect that contributes to unbalance between vasonconstrictor and vasodilator events in hypertension. Thus, this work also consisted in determining if the two β-blockers-induced vasodilator effects were modified by a RAS AT1 receptor antagonist. This study shows that, in SHR, the endothelial β1/β2-A NO dependant-induced relaxant effect of celiprolol is impaired in aorta, whereas it is not in hinquarter vessels. It lights for the first time the β3-AR involvement in vasodilator-induced effects of celiprolol in WKY rat hinquarter vessels. It shows carteolol-induced α1-adrenergic antagonist and antioxydant properties in SHR aorta. This study also shows that RAS AT1 receptor inhibition improves carteolol and celiprolol-induced relaxant effects in SHR aorta, maybe by reducing α1-adrenergic effects and by promoting β-A effects respectively. However, RAS does not seem to play any pathophysiologic role in relaxation of hinquarter vessels

L'hypertension artérielle (HTA) est associée à des anomalies lipidiques, notamment de la composition membranaire en acides gras polyinsaturés (AGPI). La delta-6 désaturase (D6D) est l'enzyme clé de la biosynthèse hépatique des AGPI. Une inhibition partielle de D6D a été montrée chez le rat spontanément hypertendu SHR. Les conséquences de cette inhibition sur l'HTA et les anomalies lipidiques hépatiques restent à déterminer. Une inhibition pharmacologique chronique de D6D a été réalisée chez le SHR. Ce traitement, en plus de bloquer la biosynthèse des AGPI, aggrave les anomalies lipidiques hépatiques habituellement observées chez le SHR, sans modifier la pression artérielle. Des supplémentations en CLA (acides cis-9 trans-11, ou trans-10 cis-12 linoléiques) ont été conduites chez le SHR. Chaque isomère active D6D, et corrige certaines des anomalies lipidiques, tout en ralentissant l'HTA. En outre, PPARγ et SREBP1c auraient un rôle dans les anomalies lipidiques hépatiques du SHR
Arterial hypertension (AHT) frequently coexists with numerous metabolic abnormalities, particularly abnormalities of polyunsaturated fatty acids (PUFA) composition. Delta-6 desaturase (D6D) is the key step enzyme of hepatic PUFA biosynthesis. D6D is partially inhibited during AHT in spontaneously hypertensive rat (SHR). The consequences of such an inhibition of PUFA biosynthesis on AHT and on hepatic lipid metabolism remain to be investigated. We firstly generated a pharmacological chronic D6D inhibition. This treatment, in addition to block PUFA biosynthesis, exacerbates lipid abnormalities usually shown in SHR, without changing blood pressure. Then, we performed a CLA supplementation (cis-9 trans-11, or trans-10 cis-12 linoleic acids) in SHR. Each isomer activates D6D and corrects some of the lipid abnormalities reported in SHR, while slowing AHT evolution. Moreover, PPARγ and SREBP1c transcription factors could be involved in such SHR hepatic metabolic dysfunctions

Introduction: L’ocytocine (OT) était connue pour ses effets lors de la parturition et de la lactation. Depuis quelques années, d’autres rôles de l’OT ont été proposés. Ainsi, la découverte de l’OT et de son récepteur (OTR) dans le cœur a suggéré le rôle fonctionnel de cette hormone dans cet organe. Aujourd’hui, il existe une controverse concernant l’implication de l’OT dans la régulation de la pression artérielle (PA). Des études additionnelles sont donc requises pour préciser le rôle de l’OT dans le contrôle de la PA. C’est dans ce cadre que se situe la présente étude. Méthodes: Deux types d’expériences ont été faites: Une pour l’étude des paramètres métaboliques et l’autre pour les paramètres cardiovasculaires. Pour la première, l’OT (0.04 mg/kg) a été testée pour son effet métabolique. Les rats SD sont injectés avec l’OT et immédiatement placés dans des cages métaboliques individuelles et adaptées pour recueillir les urines. Les urines recueillies sur 3 heures nous ont permis de mesurer la diurèse, la natriurèse et la kaliurèse chez les rats. Pour le 2ème type, des rats spontanément hypertendus (SHR) et des Sprague-Dawley (SD) ont subi une chirurgie pour l’implantation de la sonde de télémétrie. Après 10 jours de récupération, nous avons commencé l’expérience qui s’est déroulée en 2 séries: la série des injections intraveineuses (i.v.) (0.04, 0.08, 0.1, 0.2 et 0.4 mg/kg en une seule injection) et la série des injections sous-cutanées (s.c.) (0.5 et 1 mg/kg/jour pendant 5 jours d’injection). La pression artérielle (PA), la fréquence cardiaque (FC) et de l’activité des rats ont été mesurées continuellement pendant toute l’expérience. Résultats: En i.v. la plus petite dose d’OT (0.04 mg/kg/0.3 ml) utilisée pour les effets rénaux a amené une diurèse significative, montre une tendance de natriurèse et de diminution de kaliurèse. Cette dose et celle d’OT (0.08 mg⁄kg⁄0.3 ml) sont sans effets sur la PA mais diminuent la FC des SHR et des SD (seulement les nuits). Pour les doses élevées en i.v. (0.1, 0.2 et 0.4 mg/kg d’OT), à l’exception de l’effet vasopresseur transitoire observé avec OT 0.4 mg/kg chez SD, l’OT 0.1 et 0.2 mg/kg ont diminué la PA. Les doses (0.2 et 0.4 mg/kg) d’OT ont diminué la PA chez les SHR. Elles ont augmenté la FC en journée aussi bien chez les SD que chez les SHR pendant que 0.1 mg/kg l’a diminuée. Pendant les nuits, c’est seulement la dose de 0.4 mg/kg qui a un effet sur la FC qu’elle diminue aussi bien chez les SD que les SHR. Les doses de 0.5 et 1 mg/kg injectées en s.c. ont diminué significativement la PA chez les SHR. Mais, chez les SD c’est l’OT à la dose de 1 mg/kg qui a amené une baisse de PA. À l’exception de OT 0.5 mg/kg/jour qui a augmenté la FC et l’activité chez les SHR en journée et ce au cours des injections, l’OT en s.c. a également entraîné une diminution de la FC et de l’activité. Conclusion: Ces résultats démontrent que l’OT intervient dans la régulation de la PA et la FC et les effets de l’OT dépendent de la souche de rats, de la dose, de la voie d’administration et du moment d’enregistrement des paramètres cardiovasculaires (jour ou nuit). Parlant de dépendance des résultats en fonction des voies d’administration, force est de signaler qu’avec les injections s.c. l’effet hypotenseur de l’OT est puissant et sans équivoque. Cela serait dû au fait que la duré de vie de l’OT est très courte (5 à 10 minutes) quand elle entre dans le sang. Ainsi, contrairement à la voie i.v., l’efficacité de l’OT en s.c. résulterait de sa libération lente dans le sang et donc toute la quantité administrée en s.c. ne se dégrade pas d’un seul coup.
Introduction: Oxytocin (OT) is known for its effects during parturition and lactation. In recent years, new roles of OT have been brought to light. Thus, the discovery of OT and its receptors (OTR) in the heart suggest a functional role in the body. Nowadays, the involvement of OT in blood pressure (BP) regulation is still controversial. Additional studies are therefore required to accurately determine the role of OT in the control of BP. Methods: Two types of experiments were carried out: Diuretic effect: conscious male, Sprague-Dawley rats were administered OT intravenously (0.04 mg/kg) and immediately placed in metabolic and individual cage; urine was collected and measured every hour for 3 hours. Urine measurement allowed diuresis, natriuresis and kaliuresis to be determined Telemetry: telemetry implants and catheters were inserted into the abdominal aorta of spontaneously hypertensive (SHR) and Sprague-Dawley (SD) rats. After 10 days (of necessary recovery), heart rate (HR), BP and animal locomotor activities were measured continuously. The same experiment was done on two batches of rats. Different doses of OT: 0.04; 0.08; 0.1, 0.2 or 0.4 mg/kg were injected once by intravenous (i.v) route. After each injection, we waited for the normalization of BP and HR before the next dose. Further more, 5 consecutive injections of OT were made (0.5 and 1 mg/kg) subcutaneously (s.c.). Results: The dose of 0.04 mg/kg of OT administrated for renal effects led to significant diuresis, a tendancy in natriuresis and kaliuresis decreased with no effect on BP. That dose as well as 0.08 mg/kg decreased HR in SHR and SD rats (only in the night). Whereas the highest doses in i.v. (0.1, 0.2 et 0.4 mg/kg d’OT), except a transient vasopressor effect observed with the OT 0.4 mg/kg in SD rats, OT 0.1 and 0.2 mg/kg decreased BP. OT 0.2 and 0.4 mg/kg decreased BP in SHR but increased HR during the days in both strains. The dose of 0.4 mg/kg led to a decrease of HR in SHR and in SD rats. The s.c. injections (0.5 and 1 mg/kg) of OT led to a significant decrease in BP in SHR, whereas in SD rats the lowering was only significant with a dose OT 1 mg/kg. HR significantly decreased in both strain with 1 mg/kg, whereas with 0.5 mg/kg, HR increased in SHR only and during the day. Conclusion: These results demonstrate that oxytocin acts on blood pressure and heart rate depending on strain, dose and route of administration. It’s important to point out that with s.c. injections the hypotensive effect of OT is powerful and unequivocal. This is probably because OT administered s.c. is slowly released into the bloodstream. Therefore the entire amount administered s.c. does not degrade at once and leads to the effectiveness of s.c. results.
réalisé avec la codirection de Marek Jankowski

Contribuant à la pathophysiologie des maladies vasculaires comme dans le cas de l’hypertension, le remodelage vasculaire est associé à une altération de la croissance des cellules musculaires lisses vasculaires (CMLV) (prolifération, taille, etc.). Or la prolifération des CMLV est augmentée par les peptides vasoactifs tels que l’angiotensine II (AngII) et l’endothéline-1 (ET-1). Ces peptides étant surexprimés lors de l’hypertension, cette étude fut entreprise pour déterminer leur contribution endogène ainsi que celles du facteur de croissance épidermique (EGF), du facteur de croissance insulinique (IGF-1) et du facteur de croissance dérivé des plaquettes (PDGF) à la prolifération accrue des CMLV et aux mécanismes sous-jacents. Des CMLV A-10 et des CMLV de rats WKY et SHR âgés de 12 semaines ont été utilisées pour cette étude. La prolifération cellulaire fut déterminée par incorporation de [3H]thymidine. La phosphorylation de ERK 1/2 et du récepteur de EGF fut déterminée par immunobuvardage. Les CMLV de SHR, comparées à celles de WKY, ont montré une prolifération accrue qui fut atténuée par le losartan, un antagoniste du récepteur AT1 de l’AngII et par le BQ-123 et le BQ-788, antagonistes des récepteurs ETA et ETB de l’ET-1. La prolifération accrue des CMLV de SHR fut ramenée à celle des WKY par les inhibiteurs des récepteurs au PDGF (AG-1295), au IGF-1 (AG-1024) et au EGF (AG-1478). La phosphorylation du récepteur au EGF, accrue dans les CMLV de rats SHR comparée à celle des WKY, fut atténuée par le losartan, le BQ-123, le BQ-788 et l’AG-1478, mais ne fut pas atténuée par l’AG-1295 et l’AG-1024. De plus, la phosphorylation accrue de ERK 1/2 dans les CMLV de rats SHR fut atténuée par le losartan, le BQ-123, le BQ-788 et les inhibiteurs des récepteurs aux facteurs de croissance. Parallèlement, le rôle de la transactivation de EGF-R dans la prolifération accrue induite par AngII et ET-1 fut aussi examiné dans les CMLV A-10. L’augmentation, induite par AngII et ET-1, de la prolifération et de la phosphorylation de ERK 1/2 dans les CMLV A-10 fut ramenée au niveau contrôle par AG-1478. Ces données suggèrent que les peptides vasoactifs endogènes induisent la prolifération accrue des CMLV par la signalisation des MAP kinases résultant de la transactivation de EGF-R.
Vascular remodelling that contributes to the pathophysiology of vascular diseases, including hypertension, is associated with alteration in vascular smooth muscle cell (VSMC) growth, hypertrophy, etc. We have recently shown that vasoactive peptides such as angiotensin II (AngII) and endothelin-1 (ET-1) increased the proliferation of VSMC. Since the levels of AngII, ET-1 and growth factors are increased in hypertension, the present studies were undertaken to examine if these endogenous vasoactive peptides and growth factors contribute to the enhanced proliferation of VSMC in spontaneously hypertensive rats (SHR) and to further investigate the underlying mechanisms responsible for enhanced proliferation. A10 VSMC and aortic VSMC from 12 week old SHR and age-matched WKY rats were used for these studies. Cell proliferation was determined by [3H]thymidine incorporation and ERK ½ and growth factor receptor phosphorylation was determined by Western blotting. VSMC from SHR exhibited enhanced cell proliferation as compared to WKY as determined by enhanced [3H]thymidine incorporation which was attenuated by AngII AT1 receptor antagonist losartan, as well as by endothelin receptor ETA and ETB antagonists BQ-123 and BQ-788, respectively. The inhibitors of platelet derived growth factor receptor (PDGF-R); AG-1295, epidermal growth factor receptor (EGF-R); AG-1478, and insulin-like growth factor receptor (IGF-R); AG-1024 also attenuated the enhanced proliferation of VSMC from SHR to WKY control levels. In addition, VSMC from SHR exhibited enhanced phosphorylation of EGF-R as compared to WKY, which was attenuated by losartan, BQ-123, BQ-788 and AG-1478, and not by AG-1295 and AG-1024. Furthermore, the enhanced phosphorylation of ERK ½ in VSMC from SHR was also attenuated by losartan, BQ-123 and BQ-788 as well as by growth factor receptor inhibitors, AG-1478, AG-1024 and AG-1295. The implication of growth factor receptor transactivation in AngII and ET-1 induced enhanced cell proliferation was also examined in A10 VSMC. Ang II or ET-1 induced enhanced proliferation of A-10 VSMC and enhanced ERK ½ phosphorylation was also restored to control levels by EGF-R inhibitor. These data suggest that vasoactive peptide-induced growth factor receptor transactivation through MAP kinase signaling may contribute to the enhanced proliferation of VSMC from SHR.

Nous avons précédemment montré que les cellules musculaires lisses vasculaires(CMLV) des rats spontanément hypertendus (SHR) présentent une expression augmentée des protéines G inhibitrices (Gi) et une prolifération cellulaire accrue par rapport aux CMLV des rats Wystar-Kyoto (WKY). Le niveau d'AMPc s’est également avéré plus faible dans les CMLV de SHR. La présente étude a donc été entreprise afin d'examiner la contribution de la diminution du niveau intracellulaire d'AMPc à l’augmentation de l'expression des protéines Gi et à la prolifération accrue des CMLV de SHR et de continuer à explorer les mécanismes moléculaires sous-jacents responsables de cette réponse. Les CMLV de SHR ont montré par rapport aux CMLV des WKY une expression accrue de Giα-2 et Giα-3 qui a été diminué d'une manière dépendante de concentration par le dbcAMP, un analogue d'AMPc perméable à la membrane cellulaire. En outre, les fonctions augmentées des protéines Gi comme démontrées par l'amplification de l’inhibition de l'adénylate cyclase par les hormones inhibitrices et l'activité forskoline (FSK)-stimulée de l’adénylate cyclase par une faible concentration de GTPγS dans les CMLV de SHR ont également été restaurées aux niveaux de WKY par le dbcAMP. La prolifération accrue des CMLV de SHR a également été atténuée par le dbcAMP et la forskoline, un activateur de l'adénylate cyclase. De plus, dbcAMP a restauré la production augmentée d'anion superoxyde (O2-), l'activité de la NAD(P)H oxydase et l’expression accrue des protéines Nox 4 et p47phox observée dans les CMLV de SHR jusqu’au niveau contrôle. Par ailleurs, la phosphorylation accrue des PDGF-R, EGF-R, c-Src et ERK1/2 énoncée par les CMLV de SHR a également été diminuée par le dbcAMP d'une manière dépendante de concentration. Ces résultats suggèrent que le niveau réduit d'AMPc intracellulaire montré par les CMLV de SHR contribue à l'expression accrue des protéines Gi et à l’hyperprolifération cellulaire à travers l’augmentation du stress oxydatif, la transactivation des EGF-R, PDGF-R et la voie de signalisation des MAP kinases.
We have previously shown that vascular smooth muscle cells (VSMC) from spontaneously hypertensive rats (SHR) exhibit enhanced expression of inhibitory G proteins (Gi) and enhanced cell proliferation as compared to VSMC from Wystar-Kyoto rats (WKY). The levels of cAMP were shown to be decreased in VSMC from SHR. The present study was therefore undertaken to examine the contribution of the decreased intracellular level of cAMP in the enhanced expression of Gi proteins and increased proliferation of VSMC from SHR and to further explore the underlying molecular mechanisms responsible for this response. VSMC from SHR showed an enhanced expression of Giα-2 and Giα-3 as compared to VSMC from WKY which was decreased in a dose-dependent manner by dbcAMP, a cell-permeable cAMP analog. In addition, the enhanced functions of Gi proteins as demonstrated by enhanced inhibition of adenylyl cyclase by inhibitory hormones and forskolin (FSK)-stimulated adenylyl cyclase activity by low concentration of GTPγS in VSMC from SHR were also restored to the WKY levels by dbcAMP. The enhanced proliferation of VSMC exhibited by SHR was also attenuated by dbcAMP and forskolin, an activator of adenylyl cyclase. In addition, dbcAMP also restored the increased production of superoxide anion (O2-), NAD(P)H oxidase activity and enhanced expression of Nox 4 and p47phox proteins observed in VSMC from SHR to control levels. Furthermore, the increased phosphorylation of PDGF-R, EGF-R, c-Src and ERK1/2 exhibited by VSMC from SHR were also decreased by dbcAMP in a dose-dependent manner. These results suggest that decreased levels of intracellular cAMP exhibited by VSMC from SHR contributes to the enhanced expression of Gi proteins and hyperproliferation through increasing oxidative stress and transactivation of EGF-R, PDGF-R and MAP kinase signaling pathway.

Résumé Introduction L’amlodipine et l’atorvastatine offrent des avantages thérapeutiques au-delà de leur indication primaire, soit la réduction de la pression artérielle et des lipides sanguins, respectivement. L’amlodipine induit l’apoptose des cellules de muscle lisse vasculaire (CMLV) in vivo, contribuant à la régression de l'hypertrophie aortique chez le rat spontanément hypertendu (SHR). L'atorvastatine induit l’apoptose des CMLV in vitro, un effet proportionnel à la dose. Toutefois, cet effet reste à être démontré in vivo. Nous postulons que l’atorvastatine induira la régression de l’hypertrophie aortique via l’apoptose des CMLV chez le SHR, et que la combinaison de l’amlodipine et de l’atorvastatine aura un effet synergique sur la régression de l’hypertrophie aortique via l’apoptose des CMLV chez le SHR. Méthodologie L’amlodipine et l’atorvastatine ont été administrées à des SHR âgés de 11 semaines durant trois ou six semaines, individuellement ou en combinaison. Les points principaux à l'étude étaient le remodelage vasculaire et la pression artérielle. La fragmentation et le contenu en ADN, le stress oxydant, le taux de cholestérol et les niveaux de nitrates ont aussi été mesurés. Résultats Lorsque l’atorvastatine a été administrée seule, une diminution significative du stress oxydant et de la pression artérielle a été observée après trois et six semaines de traitement, respectivement. Par contre, aucune différence n’a pu être décelée quant au remodelage vasculaire. L'amlodipine a réduit la pression artérielle et l'hypertrophie aortique de façon dépendante de la dose. Une diminution significative de l'hyperplasie a été détectée après trois semaines de traitement avec la combinaison, et après six semaines avec une faible dose d'amlodipine. Conclusion Nos résultats ne supportent pas l'hypothèse que l'atorvastatine induit l'apoptose des CMLV in vivo. Par contre, lorsque combinée à l'amlodipine, elle pourrait ajouter un bénéfice supplémentaire au niveau de la réduction de l'hyperplasie aortique.
Abstract Background and purpose Antihypertensive drugs such as the calcium channel blocker (CCB) amlodipine and cholesterol lowering agents such as statins exhibit pleiotropic effects. Amlodipine reduces aortic hypertrophy and hyperplasia in spontaneously hypertensive rat (SHR) by inducing a transient wave of apoptosis. Atorvastatin induces apoptosis of vascular smooth muscle cell (VSMC) in vitro, independently of cholesterol synthesis, an effect that remains to be shown in vivo. The present studies were designed to test the hypothesis that atorvastatin can induce vascular remodeling by VSMC apoptosis in vivo in SHR, and to test whether combined therapy with low dose amlodipine would provide synergistic effects on regression of aortic hypertrophy. Experimental approach 11-week old SHR were given atorvastatin and amlodipine, alone or in combination, for three or six weeks. Primary end-points were vascular remodeling and blood pressure. Secondary end-points included DNA fragmentation and content in the aorta, oxidative stress, cholesterol and serum total nitrite and nitrate (NOx) concentrations. Key results Treatment with atorvastatin did not modify vascular structure, although it significantly reduced oxidative stress after three weeks and blood pressure after six weeks. Amlodipine dose-dependently reduced blood pressure and aortic hypertrophy. Significant reduction of cellular hyperplasia was reached after 6 weeks with a low dose of amlodipine alone or after 3 weeks when atorvastatin was combined with low dose amlodipine. Conclusions and implications Our results do not support the notion that atorvastatin induces VSMC apoptosis in vivo, although the data suggest a possible interaction with amlodipine in reducing VSMC hyperplasia in the hypertensive aorta.