Literatura académica sobre el tema "Particules pseudo-virales (VLPs)"

En este trabajo se investigó la respuesta de linfocitos de memoria y la identificación de péptidos en la proteína Ll del virus del papiloma humano (VPH) responsables de la estimulación de estos linfocitos, en muestras de sangre de 44 individuos expuestos a la infección, distribuidos en cuatro grupos: mujeres sanas, trabajadoras sexuales, pacientes con neoplasia intracervical NIC y hombres. La expansión in vitro con interleuquina-2 (IL-2) representó una importante ventaja para evidenciar la respuesta de linfocitos de memoria, específicos contra el virus en la mayoria de individuos estudiados. Para investigar el estatus de la respuesta de estos linfocitos, se utilizaron células dendriticas (CDs) autólogas pulsadas con pseudo particulas virales (VLPs) construidas a partir de la proteína Ll del VPH-16 [VLPs VPH-16/L1] como células presentadoras del antígeno (APCs). El uso de CDs como APCs en este estudio nos permitió evidenciar por una parte una vigorosa producción de IFN-y por linfocitos de memoria en la mayoría de individuos estudiados y por otra descubrir un fenotipo supresor inducido por las CDs en la respuesta de linfocitos de memoria, específicos contra el virus detectable en especial en pacientes con NIC. La universalidad de la respuesta inmune celular ala proteína Ll, puesta en evidencia en nuestros resultados, quizás explique la alta eficacia protectora mostrada por las vacunas basadas en VLPs VPH-161L1, en experimentación por otros investigadores.Abreviaturas utilizadas en el texto: virus del papiloma humano (VPH); pseudo partículas virales (VLPs); VLPs construidas de la proteína Ll del VPH serotipo 16 (VLPs VPH-161L1); linfocitos de sangre periférica (PBLs); índice de estimulación (IE); neoplasia intra cervical (NIC); células presentadoras del antígeno (APCs); interleuquina-2 (IL-2), células dendríticas humanas derivadas de monocitos de sangre periférica (CDs). linea celular de linfocitos T específica contra VLPs dependiente de IL-2 (TCLs).

Diverses stratégies de fonctionnalisation de surface visent à améliorer la biocompatibilité des matériaux pour les dispositifs implantables, notamment en ingénierie tissulaire. Par exemple, le polydiméthylsiloxane (PDMS), bien qu’utilisé dans de nombreux domaines, présente des propriétés de surface défavorables à l’adhérence cellulaire. La fonctionnalisation par des protéines de la matrice extracellulaire (MEC) ou des peptides synthétiques dérivés de celles-ci permet d’améliorer l'adhérence des cellules. Bien que ces approches offrent certaines solutions, des défis tels que le coût de production et le contrôle de la présentation en 3D entravent leur manipulation. Pour répondre à ces défis, nous avons développé des particules pseudo-virales (VLPs) présentant des peptides bioactifs à leur surface. La protéine d’enveloppe CP3, dérivée du bactériophage à ARN AP205, a été modifiée génétiquement à ses extrémités N- et C-terminales pour produire des VLPs présentant des peptides d’adhésion (RGD et YIGSR) et ostéogéniques (BMP2). La bioactivité des VLPs a été testée sur du PDMS avec des cellules de myoblastes C2C12, montrant une stimulation de l'adhérence, de la migration, de la prolifération et de la différenciation cellulaires. Des VLPs hétéromériques co-exprimant les peptides RGD et YIGSR ou BMP2 ont montré une bioactivité combinée. Des comparaisons entre la fibronectine et les VLP-RGD ont révélé des similarités et des différences dans les interactions cellulaires et la formation des adhésions focales. Ces résultats démontrent que les VLPs d’AP205 peuvent servir de nano-plateformes de signalisation, avec des applications potentielles en nanomédecine et dans les biomatériaux
Scientists have explored various surface functionalization strategies to improve the biocompatibility of materials used in implantable devices, particularly in tissue engineering. For example, polydimethylsiloxane (PDMS), although used in many fields, has surface properties that are unfavorable for cell adhesion. Functionalization with extracellular matrix (ECM) proteins or synthetic peptides derived from ECM components improves cell adhesion. While these approaches offer some solutions, challenges such as production cost and control over 3D presentation limit their use. To overcome these challenges, we developed virus-like particles (VLPs) displaying bioactive peptides on their surface. The coat protein CP3, derived from the RNA bacteriophage AP205, was genetically modified at both its N- and C-termini to produce VLPs displaying adhesion peptides (RGD and YIGSR) and an osteogenic peptide (BMP2). The bioactivity of the VLPs was tested on PDMS with C2C12 myoblast cells, demonstrating enhanced cell adhesion, migration, proliferation, and differentiation. Heteromeric VLPs co-expressing RGD and YIGSR or BMP2 peptides showed combined bioactivity. By comparing focal adhesions formed by RGD VLPs and those formed by fibronectin, we elucidate both the similarities and the differences in cell interactions. These results demonstrate that AP205 VLPs can be used as nanoscale signaling platforms to stimulate multiple cell functions, with promising applications in nanomedicine and biomaterials

Le norovirus est l'agent étiologique le plus prédominant de la gastro-entérite virale à travers toutes les tranches d’âge, dans le monde entier. Jusqu'à récemment, l'étude du norovirus humain était entravée par l'absence d'un système de culture cellulaire robuste. Les études biologiques de la capside reposent en grande partie sur l'analyse des particules pseudo-virales (VLP) exprimées par le baculovirus. Le génotype GII.4 parmi les norovirus humains est la variante prédominante depuis des décennies, tandis que le génotype GII.17 a été souvent détecté en Asie de l'Est depuis 2014. Ici, les VLP exprimées par les baculovirus GII.17 et GII.4 ont été utilisées pour étudier les aspects biologiques (liaison aux HBGA) et propriétés physicochimiques (taille, morphologie et charge) de la capside des norovirus humains dans différentes conditions (tampon, température, pH et force ionique). Nous avons démontré que les VLP GII.17 et GII.4 ne semblent pas suivre un mécanisme commun d’assemblage et de désassemblage. GII.17 a montré une stabilité à une force ionique inférieure et supérieure, tandis que GII.4 s'est agrégé à une force ionique de 10 mM. La nature des tampons influence la morphologie et la stabilité des VLP. Ici, les deux VLP étaient très stables entre un pH de 7 et 8,5 à 25°C. À pH acide et basique, les VLP formaient des agrégats qui, dans certains cas, reconnaissaient encore les HBGA. L'augmentation de la température au-dessus de 65°C a modifié la morphologie des VLP, provoquant une agrégation et diminuant l'affinité pour les HBGA. En comparant les deux isolats, GII.17 a montré un meilleur profil de stabilité et a été utilisé dans la seconde partie de nos travaux pour la conception d’une particule hybride silice-protéine. Les GII.17 ont été activées par EDC et NHS puis fonctionnalisées par deux précurseurs de silice APTES et TEOS. Par une analyse physico-chimique, nous avons produit une particule hybride de 44 nm qui reconnait encore les HBGA. L’ITCF a été greffé sur la couche de silice dans le but d’avoir une particule hybride fluorescente. Les expériences d’accroche de ces VLP réalisées sur tissus sains et cancéreux, montrent que ces particules reconnaissent les tissus inflammatoires. Ces VLP multifonctionnelles peuvent servir alors de plateforme pour le développement de systèmes de délivrance ou de traceurs « intelligents » à des fins thérapeutiques ou agroalimentaires
Human Norovirus (HuNoV) is the predominant etiological agent of viral gastroenteritis in all age groups, worldwide. Until recently, the study of human norovirus was hampered by the lack of a robust cell culture system. Biological studies of the capsid rely largely on the analysis of virus-like particles (VLPs) expressed by the baculovirus. Genotype GII.4 among HuNoVs has been the predominant variant for decades while GII.17 genotype was often detected in East Asia since 2014. Here, GII.17 and GII.4 baculovirus-expressed VLPs were used to study the biological (binding to HuNoV ligand, namely the ABO and Lewis antigens) and physicochemical properties (size, morphology, and charge) of the HuNoV capsid under different conditions (temperature, pH, and ionic strength). We demonstrated that GII.17 and GII.4 VLPs do not seem to follow a common mechanism of unfolding and disassembly. GII.17 showed a stability at lower and higher ionic strength while GII.4 aggregated at 10 mM ionic strength. The nature of the buffers influences the morphology and the stability of the VLPs. Here, both VLPs were highly stable from a pH 7 to 8.5 at 25°C. At acidic and basic pH, VLPs formed aggregates, which, in some cases, still recognized HBGAs. Increasing the temperature above 65°C altered the morphology of VLPs causing aggregation and decreased the affinity to HBGA. By comparing both isolates, GII.17 showed a better stability profile than GII.4 and was used in the second part of our work for the design of a silica-protein hybrid particle. GII.17 was activated by EDC and NHS and then mineralized by two silica precursors APTES and TEOS. Through physicochemical analysis, we produced a 44 nm hybrid particle which still recognizes HBGAs. The FITC was grafted onto the silica layer in order to obtain a fluorescent hybrid particle. The binding experiments of these VLPs carried out on healthy and cancerous tissues showed that these particles recognize inflammatory tissues. The multifunctional VLPs that we produced can then serve as a platform for the development of delivery systems (drug delivery) or “intelligent” vectors for therapeutic or agri-food purposes

Chez la guêpe parasitoïde Venturia canescens, des particules virales dépourvues d'ADN appelées VLP (pour "Virus-like Particules") sont produites spécifiquement dans les ovaires et tapissent le chorion des oeufs qui sont injectés dans la chenille hôte. Les VLP ont une fonction immunosuppressive pour l'hôte parasité et permettent ainsi la survie des oeufs du parasitoïde. Ces VLP résultent de l’intégration d’un nudivirus dans le génome de l’ancêtre de la guêpe, nudivirus qui a été ensuite domestiqué pour former des liposomes viraux capables de véhiculer dans l’hôte des protéines de virulence d'origine cellulaire. L’étude réalisée au cours de cette thèse a eu pour objet, d’une part, d'étudier les mécanismes de domestication virale qui ont conduit au virus symbiotique endogène actuel nommé VcENV (pour V. canescens endogenous nudivirus) et d’autre part, d'apporter des éléments de réponse sur le processus de morphogénèse et le mode d'action parasitaire des VLP
Viral particles devoid of DNA called VLPs (for Virus-Like Particles) are specifically produced in the ovaries of the parasitoid wasp Venturia canescens and line the chorion of the wasp’s eggs injected into the host caterpillar. VLPs are immunosuppressive and allow parasitoid eggs survival. These VLPs result from the integration of a nudivirus into the wasp ancestor genome, nudivirus which was then domesticated to form viral liposomes capable of carrying, into the host, virulence proteins of cellular origin. The aim of the study carried out during this thesis was, first, to analyze the viral domestication mechanisms that led to the current endogenous symbiotic virus called VcENV (for V. canescens endogenous nudivirus) and secondly to provide some answers on VLPs morphogenesis process and parasitic mode of action

Les pseudo-particules virales (VLP) sont une alternative dans le développement d’un vaccin contre le rotavirus (RV). Chez la souris, l’administration intra-nasale (IN) de VLP-2/6 (contenant les protéines internes VP2 et VP6) en présence de différents adjuvants muqueux induit des anticorps sériques et fécaux ainsi que la protection. Dans le but de mieux comprendre l’origine et le rôle de ces IgA intestinales, nous avons étudié la réponse B spécifique du RV dans différents tissus lymphoïdes (respiratoires et intestinaux) grâce à une technique de cytométrie en flux permettant la quantification et la caractérisation phénotypique des lymphocytes B. D’autre part nous avons évalué les cellules sécrétant les anticorps dans la rate et la lamina propria intestinale (ILP). Une importante réponse B spécifique du RV a été détectée dans les tissus lymphoïdes respiratoires et dans la rate. Parmi les lymphocytes B détectés, seule une faible proportion de lymphocytes B spécifiques exprime l’intégrine α4β7 permettant leur migration au niveau intestinal. A l’opposé, dans les tissus lymphoïdes intestinaux, la réponse B est très faible, de plus elle n’est pas augmentée après une deuxième immunisation IN
Virus-like particles containing the rotavirus (RV) internal proteins VP2 and VP6 (2/6-VLP) have been shown to induce serum and fecal antibodies as well as protection in mice after intranasal administration with mucosal adjuvant. To better understand the origin of fecal IgA induced by this protocol, we studied the RV-specific B cell response in systemic and mucosal lymphoid tissues by using a FCM assay that allows quantification and phenotypic characterization of RV-specific B lymphocytes. We also assessed the RV-specific antibody secreting cells in the spleen and intestinal lamina propria (ILP). A remarkably high frequency of RV-specific B cells was evidenced in the respiratory lymphoid tissues and spleen of which only a minority expressed the α4β7 integrin (intestinal homing receptor). In contrast, but in accordance with α4β7expression at the induction site, a very low response was observed in intestinal lymphoid tissues which did not increase after a second immunization. Thus, intranasal immunization with a non replicating antigen does not induce an important number of RV-specific B cells with an intestinal homing profile