Tesis:

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Cadic, Eléna. "Recherches de facteurs génétiques impliqués dans l'élaboration du rendement sous contrainte hydrique chez le tournesol Helianthus annuus par génétique d'association et analyse de liaison dans une population recombinante". Toulouse 3, 2014. http://thesesups.ups-tlse.fr/3447/.

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Resumen

La disponibilité en eau est un facteur essentiel pour le rendement des principales espèces cultivées. Le tournesol figurant parmi les espèces d'importance économique majeure est concerné par cet enjeu. L'objectif de cette thèse est d'identifier les régions génomiques permettant d'expliquer la variabilité du rendement sous contraintes hydriques. Une approche de génétique d'association a été menée sur un panel de 384 lignées cultivées et élites évalué en combinaison hybride sur un réseau expérimental de 17 environnements. L'analyse séparée de chaque environnement a permis d'identifier 157 marqueurs associés avec au moins un caractère grâce à l'utilisation d'un modèle prenant en compte la structuration du panel en deux groupes : restauratrices de fertilité et mainteneuses de stérilité mâle. Parmi ces marqueurs significatifs, 34 étaient associés avec un caractère lié à la productivité, mais ceci, le plus souvent, de manière spécifique à un environnement, soulignant ainsi l'importance de l'interaction génotype-environnement. Un modèle éco-physiologique simulant la performance de génotypes en fonction des conditions environnementales, a permis de caractériser le stress hydrique au sein du réseau. En utilisant des variétés témoins définies dans le modèle, un index de stress a été estimé pour chaque environnement. La réponse du panel à cet index a ensuite été testée en génétique d'association permettant d'identifier de nouveaux loci impliqués dans la tolérance au stress hydrique et la stabilité du rendement. Enfin, La détection de QTL à partir d'une population bi-parentale a permis de confirmer certaines zones détectées en génétique d'association et d'en découvrir de nouvelles
For most crops, water availability is a major component of yield. We must improve crop plants tolerance to water deficit in order to guarantee food security. Sunflower, a species of economic importance is also concerned by this challenge. The aim of this thesis is to identify genomic regions involved in the variability of yield and its components under drought. To this purpose, an association mapping approach has been led on a core collection of 384 cultivated and elite lines evaluated as hybrids combinations in a multi environment trial of 17 environments. In a first step, the separated analysis per environment led to the identification of 157 markers associated with at least one trait by apply a model taking into account the structuration in two groups: male restorer lines and female lines. Among these significant markers, 34 were associated with productivity but only on a specific environment, underlying the importance of genotype by environment interaction. In a second step, a crop model simulating sunflower genotypes yield depending on environmental conditions, led to the characterization of drought stress inside the multi environment trial. By using varieties defined before in the model, a drought index has been estimated for each environment. Thus, the panel response to this index has been tested in association mapping leading to the identification of several new loci involved in drought stress response and yield stability. QTL mapping in a bi parental population confirmed some regions and led to the detection of new ones

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Vancostenoble, Baptiste. "Physiological, genetic and molecular study of the impact of water stress on the germination quality of sunflower seeds". Electronic Thesis or Diss., Sorbonne université, 2022. http://www.theses.fr/2022SORUS176.

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Resumen

La tolérance des plantes cultivées au stress hydrique est un problème majeur du changement climatique et les futures conditions environnementales risquent de réduire drastiquement les rendements agricoles dans un avenir proche. La germination rapide et homogène des semences est une composante majeure du rendement final des cultures, mais elle peut être considérablement altérée par les conditions environnementales lors du semis. De plus, les conditions de l'environnement maternel pendant le développement des semences peuvent avoir un effet marqué sur la germination des semences de la génération suivante. En menant des expériences en conditions contrôlées sur la plate-forme de phénotypage Heliaphen (INRAE Toulouse), nous avons montré qu'un stress hydrique modéré appliqué sur les plantes mères de tournesol après leur floraison induit une meilleure germination, malgré différents stress appliqués lors de la germination, suggérant ainsi un effet maternel. Le traitement maternel semble influencer également le niveau de dormance des semences des deux générations suivantes, ce qui suggère l'existence de mécanismes de mémoire du stress maternel (effet transgénérationnel) sur la descendance. Nous avons recherché les gènes potentiellement impliqués dans la tolérance aux stress abiotiques, grâce à une étude transcriptomique et une validation par qPCR en micro-fluidigm qui nous ont permis de mettre en évidence une différence d’expression de certains marqueurs génétiques en fonction des conditions de stress maternels. D’autre part, nous avons déterminé qu’une composante épigénétique est associée à l'induction de la tolérance au stress hydrique par l'environnement maternel sur les semences. Pour ce faire, nous avons soumis les plantes mères à un stress hydrique et avons ainsi mis en évidence un effet sur le méthylome et le transcriptome des semences produites. Nous avons pu caractériser le méthylome des semences de tournesol grâce à un séquençage haut débit de l’ADN après traitement au bisulfite. Nous avons pu montrer que les conditions de développement des semences ont eu une influence directe sur le nombre et le niveau de méthylations des régions différentiellement méthylées (DMR). En revanche la germination n'a pas eu d'effet majeur sur le profil des DMR ce qui suggère que les modifications de la méthylation de l'ADN se sont produites pendant le développement des graines. Des DMR ont été identifiées dans la séquence codante, dans le promoteur ou dans la région de la séquence post-codante d'un ensemble de gènes dont l'expression a été modifiée par le stress hydrique appliqué sur la plante mère. La comparaison de la méthylation de l'ADN avec les changements d'expression des gènes induits par l'environnement maternel de la graine nous a permis de proposer un modèle de transmission et d'hérédité de la tolérance au stress au stade de la germination
Crop tolerance to water stress is a major climate change issue and future environmental conditions may drastically reduce crop yields in the near future. Rapid and uniform seed germination is a major component of final crop yield, but it can be significantly altered by environmental conditions during sowing. In addition, the conditions of the maternal environment during seed development can have a marked effect on seed germination in the next generation. By conducting experiments under controlled conditions on the Heliaphen phenotyping platform (INRAE Toulouse), we showed that moderate water stress applied to sunflower mother plants after flowering induced better germination, despite different stresses applied during germination, suggesting a maternal effect. The maternal treatment also seems to influence the level of seed dormancy in the two following generations, suggesting the existence of memory mechanisms of the maternal stress (transgenerational effect) on the progeny. We searched for genes potentially involved in tolerance to abiotic stresses, thanks to a transcriptomic study and a validation by qPCR in micro-fluidigm, which allowed us to highlight a difference in the expression of certain genetic markers according to the maternal stress conditions. On the other hand, we determined that an epigenetic component is associated with the induction of water stress tolerance by the maternal environment on seeds. To do so, we subjected the mother plants to water stress and thus demonstrated an effect on the methylome and transcriptome of the seeds produced. We were able to characterize the methylome of sunflower seeds using high-throughput DNA sequencing after bisulfite treatment. We were able to show that seed development conditions had a direct influence on the number and level of methylations of differentially methylated regions (DMRs). In contrast, germination did not have a major effect on the DMR profile suggesting that the changes in DNA methylation occurred during seed development. DMRs were identified in the coding sequence, promoter, or post-coding sequence region of a set of genes whose expression was altered by water stress applied to the parent plant. Comparison of DNA methylation with gene expression changes induced by the maternal seed environment allowed us to propose a model of transmission and inheritance of stress tolerance at the germination stage

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Labrousse, Pascal. "Contribution à l'étude de la résistance de différents génotypes d'HELIANTHUS (Astéracées) à Orobanche cumana Wallr. (Orobanchacées)". Nantes, 2002. http://www.theses.fr/2002NANT2020.

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Resumen

Le criblage de nombreux Helianthus, sauvages, hybrides et lignées, a été effectué en serre afin de sélectionner des génotypes résistants à Orobanche cumana. Une étude plus approfondie de ces génotypes a montré que le génotype LR1 descendant du croisement d'un tournesol cultivé avec l'espèce sauvage H. Debilis debilis, induit des nécroses du parasite conduisant à une réduction drastique du nombre d'orobanches émergées. Le génotype 92B6 issu du croisement interspécifique avec l'espèce sauvage H. Argophyllus provoque lui aussi de nombreuses nécroses mais à des stades plus tardifs du développement de l'orobanche qui ne parvient toutefois pas à la floraison. Un système de culture hydroponique du couple tournesol / orobanche a permis d'étudier les réactions de défense chez le génotype résistant LRI. La réponse de ce génotype fait intervenir des épaississements de paroi, l'occlusion des vaisseaux du xylène et des divisions cellulaires au niveau du parenchyme cortical et du phloème. Ces réactions conduisent à une diminution de l'alimentation en eau et en nutriments du parasite. En effet, l'importation d'assimilats marqués au 14C dans les orobanches fixées sur les racines du génotype résistant LR1 est réduite par rapport à celle observée chez les orobanches se développant sur un tournesol sensible
In order to find broomrape resistant Helianthus genotypes a screening of numerous wild, hybrids, lines and varieties was carried out under glasshouse conditions. A more accurate study of the most interesting genotypes shows that H. Debilis debilis-215 x H. Annuus derived genotype (LR1) induces parasite necrosis leading to a decrease in broomrape emergence and flowering

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Pelletier, Christophe. "Possibilités de sélection du tournesol (Helianthus annuus L. ), pour la résistance à certaines des ses maladies, sur plantes issues de culture in vitro d'embryons immatures". Clermont-Ferrand 2, 1992. http://www.theses.fr/1992CLF21444.

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Nous avons etudie les possibilites de selectionner le tournesol pour la resistance aux maladies en utilisant la culture in vitro d'embryons immatures. Afin de determiner les effets des differentes etapes de la culture in vitro, l'etude a porte sur des plantes issues de graines semees au champ, de graines semees en godet, de culture in vitro d'embryons matures et de culture in vitro d'embryons immatures. Une analyse de caracteres morphologiques et agronomiques a ete realisee sur quatre genotypes. Les traitements de culture in vitro induisent une diminution de la vigueur de la plante. De fortes interactions genotype-traitement sont mises en evidence. Seul le niveau de resistance a diaporthe helianthi n'est pas modifie par ces traitements. Aucun critere morphologique de la plante ne peut etre relie au niveau de resistance a d. Helianthi. Il est difficile de selectionner du materiel pour la resistance a d. Helianthi en chambre climatisee, par contre, on observe la meme difference de reaction au test mycelium sur feuille pour sclerotinia sclerotiorum en chambre climatisee et au champ, entre les genotypes resistants et sensibles. Deux tests de selection sont proposes pour evaluer la resistance des plantules, issues de culture in vitro d'embryons immatures, a plasmopara helianthi. Il est possible d'utiliser un test mildiou sur plantules issues de culture in vitro en laboratoire et egalement le test phomopsis, en plein champ. Leur integration dans un programme de selection genealogique est discutee

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Bert, Pierre-François. "Etude génétique et marquage moléculaire des facteurs de résistance aux principaux champignons pathogènes du tournesol (Helianthus annuus L. )". Clermont-Ferrand 2, 2002. http://www.theses.fr/2002CLF21341.

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Resumen

A l'heure actuelle, le mildiou, le phomopsis, la pourriture blanche et le phoma sont parmi les maladies les plus importantes chez le tournesol en France. Ces maladies, causées respectivement par les champignons Plasmopara halstedii, Diaporthe helianthi, Sclerotinia scerotiorum, et Phoma macdonaldii, sont très dommageables pour les cultures et sont responsables de fortes variations pour le rendement. La résistance du tournesol à P. Halstedii est de nature spécifique et elle entre dans le cadre du modèle gène pour gène. Pour ce qui est de la résistance aux trois autres pathogènes, elle est de nature quantitative, contrôlée par de nombreux gènes qui génèrent une gamme continue de niveaux de résistance. L'objectif de ce travail a été d'une part d'identifier et de localiser les facteurs génétiques de résistance à l'ensemble de ces agents pathogènes et d'autre part de comparer les résultats obtenus entre maladies afin de valider des QTL communs ou de mettre en évidence des QTL spécifiques de résistance à chaque pathogène. Finalement, ces résultats sont intégrés aux données d'études de résistance obtenues au laboratoire pour disposer d'une vision synthétique. L'analyse de ces résultats nous a permis de révéler des QTL de résistance spécifiques des organes de la plante, des QTL spécifiques de la résistance de chacun des pathogènes, mais aussi des QTL de résistance communs à plusieurs pathogènes. Ces résultats ont aussi été mis en relation avec ceux obtenus antérieurement dans le cadre de l'étude de la résistance à S. Sclerotiorum sur deux autres croisements, pour dégager les QTL stables des QTL spécifiques du fonds génétique ou de l'environnement. Ces résultats sont une première étape vers l'utilisation des QTL dans les programmes de sélection visant à élaborer des génotypes de tournesol résistants à ces champignons pathogènes. L'interprétation des colocalisations entre locus de résistance à différents pathogènes est discutée ainsi que l'influence des caractéristiques agronomiques de la plante sur la résistance aux pathogènes

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Expert, Jean-Michel. "Lutte biologique contre les attaques précoces de Sclerotinia sclerotiorum du tournesol à l'aide de Pseudomonas spp. Fluorescents et de Bacillus spp". Lyon 1, 1995. http://www.theses.fr/1995LYO10221.

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Resumen

Une recrudescence des attaques precoces du sclerotinia sclerotiorum sur racines et au collet a ete observee ces dernieres annees en france sur le tournesol, surtout dans les terres lourdes de charentes-poitou et de champagne. Contre ces formes d'attaques, il n'existe pas actuellement de varietes resistantes ni de substances chimiques reellement efficaces. Cependant, depuis la fin des annees 1970, de nombreux travaux ont montre que des rhizobacteries, surtout des pseudomonas fluorescents, pouvaient etre efficaces dans la lutte contre des pathogenes telluriques. Une collection de souches bacteriennes, comprenant des pseudomonas fluorescents et des bacillus spp. Isoles du rhizoplan de diverses plantes et de sclerotes de s. Sclerotiorum lysees, a ete constituee. Ces souches ont ete caracterisees et une etude taxonomique a ete entreprise sur les pseudomonas fluorescents. Cette etude a montre que l'adn de la souche type de p. Fluorescens ne s'hybride pas a plus de 70% avec l'adn des souches de p. Fluorescens de la collection. Ces resultats remettent donc en cause le statut de l'espece p. Fluorescens et souligne la biodiversite de ce groupe bacterien. Des tests d'antagonisme in vitro et des tests d'antagonisme in situ (en conditions controlees et au champ) ont ete effectues en vue de reperer les souches de pseudomonas fluorescents ou de bacillus spp. Efficaces contre les attaques precoces du s. Sclerotiorum. Aucune correlation entre les tests in vitro et in situ n'a pu etre etablie mais une bonne correlation existe entre les tests in situ en conditions controlees et les essais au champ. Dans les tests in situ en conditions controlees, une protection satisfaisante est acquise avec la souche de p. Putida t1-5, en utilisant au moins 1/0#6 bacteries par semence. Les essais au champ ont montre que l'on obtient une protection significative du tournesol par la bacterisation des semences avec des pseudomonas fluorescents

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Maury, Pierre. "Adaptation à la sécheresse et photosynthèse chez le tournesol (helianthus annuus l. )". Toulouse, INPT, 1997. http://www.theses.fr/1997INPT011A.

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Les mecanismes impliques dans la regulation du fonctionnement photosynthetique en periode seche sont plus ou moins rapidement reversibles, perturbant le fonctionnement de la plante apres rearrosage. L'objectif du travail est d'etudier la reponse genotypique du tournesol (helianthus annuus l. ) a une acclimatation au deficit hydrique, par analyse des capacites de regulation de l'energie lumineuse, et d'assimilation du co#2, a partir de modeles biochimiques. L'acclimatation induit, chez l'hybride viki, des modifications du fonctionnement du chloroplaste. Celles-ci se traduisent apres retour a des conditions d'alimentation hydrique favorable par : i) une photosynthese nette a saturation lumineuse plus elevee resultant d'une meilleure diffusion du co#2 dans la feuille, ii) un accroissement de la photorespiration sous forts eclairements permettant de dissiper l'exces d'energie photochimique. De plus, les effets sur les photosystemes ii d'un second deficit hydrique, combines a ceux des forts eclairements, sont limites par une augmentation, rapidement reversible, de la dissipation thermique. Par contre, chez la lignee t32, ce potentiel de tolerance dynamique a la photoinhibition est altere malgre une protection permanente des structures photochimiques. Une telle reponse conduit a une reduction des capacites de la feuille a valoriser les eclairements variables. Les capacites d'exportation des trioses phosphates hors du chloroplaste sont ameliorees apres acclimatation, en liaison possible avec le role des photosynthetats dans l'ajustement osmotique observe chez ces deux genotypes. Par contre, les modifications de la repartition de l'eau dans la feuille et de l'elasticite des parois cellulaires ne semblent pas liees a l'acclimatation photosynthetique de la plante. Les mecanismes regulateurs induits par l'acclimatation apparaissent selon le genotype, orientes vers la survie ou vers l'adaptation des processus photosynthetiques a la productivite en condition seches.

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Grezes-Besset, Bruno. "Sélection du tournesol pour la résistance à Sclerotinia sclerotiorum (Lib. ) de Bary. Utilisation des phytotoxines produites par le parasite et des vitro-méthodes". Toulouse 3, 1988. http://www.theses.fr/1988TOU30253.

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Resumen

Afin d'accroitre la resistance du tournesol a sclerotinia sclerotiorum, differentes techniques ont ete utilisees. La premiere approche a consiste a utiliser les phytotoxines produites par le parasite. Nous avons pour cela analyse la toxicite des filtrats de culture de s. Sclerotiorum et confirme le role toxique majeur de l'acide oxalique. Nous avons ensuite etudie la possibilite d'utiliser la toxicite selective de cette molecule pour exploiter la resistance genetique naturelle du tournesol en realisant un tri sur plantules et sur embryons immatures. Le faible niveau de specificite observe rend peu envisageable l'utilisation de l'acide oxalique dans ce type de programme. Nous avons dans un deuxieme temps verifie si la variation soma clonale pouvait etre utilisee pour selectionner des clones cellulaires de tournesol resistants a l'acide oxalique. La mise au point d'un milieu de culture permettant de conserver le calcium a l'etat soluble en presence d'acide oxalique s'est averee necessaire pour realiser la selection. Les resultats obtenus montrent qu'il est ainsi possible d'obtenir des clones cellulaires resistants a cette toxine. Finalement nous avons mis au point une methode permettant d'utiliser directement les champignons phytopathogenes comme agent de selection dans des cultures cellulaires. L'utilisation de cette technique montre que les clones cellulaires resistants a l'acide oxalique sont plus resistants a s. Sclerotiorum

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Mondolot, Laurence. "Composés caféoylquiniques et résistance du tournesol cultivé et sauvage vis-à-vis de Sclerotinia sclerotiorum". Montpellier 1, 1992. http://www.theses.fr/1992MON13510.

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Michard, Quentin. "DOPAchrome tautomérase et résistance au stress du mélanocyte". Paris 6, 2008. http://www.theses.fr/2008PA066633.

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La protéine TRP-2 est une enzyme impliquée dans la mélanogénèse, qui pourtant n’est pas exprimée dans les mélanocytes des follicules pileux humain. Cette protéine ayant été récemment impliquée dans la gestion du stress xénobiotique, l’absence de TRP-2 dans les mélanocytes folliculaires, interprétée comme une déficience dans les mécanismes de défense, pourrait expliquer une disparition prématurée de ces cellules au cours du blanchissement des cheveux. Nos travaux ont montré que l’expression de TRP-2 apportait un bénéfice au mélanocyte lorsqu’il est soumis à un stress oxydatif. Ces propriétés de résistance semblent dépendre du contexte cellulaire, puisque non reproductibles dans la lignée épithéliale HEK. Par contre, son induction dans ce même système cellulaire permet de diminuer la susceptibilité de la cellule à un stress généré par la dopamine et l’hydroquinone. TRP-2 possèderait ainsi une activité isomérase ou quinone oxydoréductase qui permettrait de limiter la production de ROS dérivées de la réduction partielle à un électron des quinones en semi-quinones, source de production d’oxygène singulet et de l’anion superoxyde.

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Deglene, Laurence. "Déterminisme génétique de la résistance du tournesol (Helianthus Annuus L. ) a Phomopsis helianthi (Diaporthe Helianthi Munt-Cvet. Et al. ) et mise au point d'un test de selection in vitro". Toulouse, INPT, 1999. http://www.theses.fr/1999INPT016A.

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Resumen

Les objectifs de ce travail sont de contribuer à la connaissance du déterminisme génétique de la résistance à Phompsis/Diaporthe helianthi Munt-Cvet et al. Chez le tournesol et de mettre au point une méthode de sélection alternative aux méthodes classiques. La culture in vitro de cellules et de tissus peut être utilisée comme outil de sélection rapide, simple et fiable. Les techniques in vitro mises en oeuvre dans ce travail sont basées sur la formation de cals et sur la viabilité des protoplastes, en réponse à des filtrats de culture partiellement purifiés de P. Helianthi, utilisés comme agents sélectifs. Le déterminisme génétique de la résistance au phomopsis en conditions de contamination naturelle, de la formation des cals et de la viabilité des protoplastes chez le tournesol, ainsi que la modification de ces deux derniers paramètres par les filtrats du pathogène, ont été étudiés dans un dispositif de plan factoriel. Nos résultats montrent que la résistance des plantes adultes de tournesol au phomopsis en conditions naturelles est controlée essentiellement par des gènes à effets additifs avec cependant des effets de dominance partielle. D'autre part, nous avons établi que la formation de cals est un paramètre à forte variabilité génétique, qui semble controlé principalement par des gènes à effet additifs, bien que les interactions inter-alléliques soient également significatives. L'apport de filtrats de culture à la dose de 5% a globalement entraîné une augmentation de la formation de cals. L'étude du niveau de mortalité des protoplastes après 48 h de culture montre que celle-ci varie en fonction du génotype et augmente significativement en présence du filtrat de culture. Le contrôle génétique de la mortalité des protoplastes, aussi bien sur le milieu témoin que sur le milieu sélectif, est apparu simplement additif. Il ressort également de cette étude que la présence de filtrats du pathogène dans le milieu de culture modifie l'expression des gènes impliqués aussi bien dans la formation des cals que dans la viabilité des protoplastes, ce qui se traduit par des valeurs différentes des aptitudes générales à la combinaison et des aptitudes spécifiques à la combinaison de plusieurs lignées et hybrides, par rapport au milieu témoin.

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Roustaee, Ali Mohammad. "La maladie des taches noires du tournesol causée par Phoma macdonaldii Boerema L. : variabilité et mode d'infection de l'agent pathogène : étude génétique de la résistance du tournesol". Toulouse, INPT, 1999. http://www.theses.fr/1999INPT013A.

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Resumen

Notre travail a suivi deux objectifs principaux, l'une sur la variabilite et le mode d'infection de phoma macdonaldii et l'autre sur l'etude genetique du tournesol vis-a-vis de cette maladie. Les resultats suivants ressortent de cette etude : 1) les souches de l'agent pathogene presentent une forte variabilite phenotypique au niveau de la croissance, de la production et de la taille des pycnides ainsi que la germination des pycniospores. Une methode de contamination artificielle a ete developpee pour apprecier le niveau d'agressivite des souches ainsi que le comportement du tournesol vis-a-vis de cette maladie. Les souches du pathogene montrent une agressivite tres variable. Aucune correlation entre l'agressivite des souches et les caracteres phenotypiques etudiees n'est observee. 2) l'etude du mode d'infection montre que, les spores sont entourees par une couche mucilagineuse de nature polysaccharidique qui joue un role important dans l'adhesion de l'agent pathogene a la surface de l'hote. Ce champignon developpe un coin d'infection qui perfore la cuticule, et penetre directement dans la plante par la cuticule et/ou par les stomates. Apres avoir traverse la cuticule il forme des hyphes subcuticulaires. 3) l'etude genetique montre une grande variabilite au niveau de la resistance entre les genotypes. Nous avons observe le phenomene d'heterosis ainsi qu'un effet nucleo-cytoplasmique sur la resistance du tournesol a cette maladie. Notre etude sur l'aptitude generale a la combinaison des differents genotypes du tournesol, montre que ces valeurs sont significative (positive ou negative). Ce qui prouve l'importance des effets additifs des genes dans le controle de la resistance. L'aptitude specifique a la combinaison de certains hybrides f1 est significative. Ce qui prouve l'existence de l'effet dominant et ou dominant incomplet de genes pour le controle de la resistance a cette maladie.

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Mojayad, Fahima. "Adaptation à la sécheresse, photosynthése et photoinhibition chez le tournesol (Helianthus annuus L. )". Toulouse, INPT, 1993. http://www.theses.fr/1993INPT020A.

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La tolérance au déficit hydrique interne est reconnue comme le mécanisme majeur de la résistance à la sécheresse, en permettant le maintien des capacités photosynthétiques de la plante. L'objectif du présent travail est d'étudier la réponse génotypique du tournesol au déficit hydrique, par l'analyse des processus photosynthétiques dans une perspective d'amélioration de la résistance à la sécheresse. La bonne tolérance au déficit hydrique interne de certains génotypes permet une fermeture progressive et tardive des stomates assurant le maintien d'une activité photosynthétique pour des potentiels hydriques foliaires bas. Cette aptitude est le résultat d'une forte capacité d'ajustement osmotique préservant la turgescence cellulaire au cours du déficit hydrique foliaire. L'acclimatation à la sécheresse après une première période de déficit hydrique entraîne une amélioration sensible du comportement des hybrides F1, comparativement à leurs lignées parentales, avec un maintien des activités photosynthétiques et une meilleure valorisation de l'eau. Le photosystème II s'est révélé peu sensible au déficit hydrique foliaire sous de faibles éclairements. Par contre, la combinaison du déficit hydrique avec des éclairements élevés entraîne des effets de photoinhibition importants.

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Langar, Kamel. "Marquage génétique et moléculaire de la résistance au Phomopsis / Diaporthe helianti (Munt. Cvet. Et al. 1981) chez le tournesol (Helianthus annuus L. )". Toulouse, INPT, 2001. http://www.theses.fr/2001INPT014A.

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Resumen

L'évaluation de la résitance au Phomopsis de différents génotypes de tournesol (Helianthus spp) nous a permis de déterminer quatre groupes de résistance: un groupe à résistance complète, un groupe à résistance partielle qui réagit tardivemnt à l'infection sur feuille, un groupe sensible présentant une résistance partielle à la pénétration du mycellium du champignon, et un groupe très sensible. Par infection artificielle avec le mycélium de Phomopsis déposé sur une feuille, nous avons d'une part confirmé que la résistance est de type horizontal et d'autre part caractérisé trois composantes de la résistance: vitesse maximale et finale de croissance des nécroses sur feuille, et vitesse de croissance des nécroses sur pétiole. Par infection semi-naturelle, nous avons révélé une composante indépendante ce celles évaluées pa infection artificielle, les taux d'attaque totaux sur tiges et feuilles à floraison. Nous avons alors construit une carte génétique de 309 marqueurs couvrant 2168,6 cM avec une distance moyenne entre marqueurs de l'ordre de 6. 1 cM, sur 171 lignées recombinantes issues du croisement intraspécifique HA89 (Sensible) X LR4 (Résistant), en utilisant des PCR spécifiques de gènes de résistance, des DALP (amplifications directes de polymorphismes de longueurs de fragments de restrictions). . .

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Béthencourt, Linda. "Le stress hydrique chez le lin et la betterave : cas particuliers du tréhalose et du gène SWEETIE". Amiens, 2010. http://www.theses.fr/2010AMIE0117.

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Resumen

Les plantes sont souvent soumises à des conditions environnementales défavorables qui entraînent une altération de leur croissance et de leur productivité. Une des stratégies développée par les plantes en cas de stress est l’accumulation de molécules (sucres, acides aminés) impliquées dans la régulation osmotique et la stabilisation des protéines et des macromolécules. Le tréhalose pourrait être une de ces molécules. La maîtrise des variations du tréhalose pourrait donc permettre d’améliorer la résistance aux stress des plantes de grande culture. Le mutant sweetie, d’Arabidopsis thaliana, présente des teneurs en tréhalose anormalement élevées et certains de ses gènes relatifs aux stress abiotiques sont surexprimés. On suppose que SWEETIE joue un rôle métabolique important, peut-être lié à la réponse au stress. Dans cette étude, nous avons confirmé l’implication de SWEETIE dans la régulation du développement de la plante, de par la mise en évidence de son expression au niveau de zones méristématiques. Deux espèces d’intérêt pour la région Picardie, le lin et la betterave, ont ensuite été étudiées. Chez celles-ci, le tréhalose et son précurseur le tréhalose-6-phosphate (T6P), s’accumulent dans les feuilles en condition de stress hydrique confirmant ainsi le rôle de ces sucres dans la réponse au stress. Nous avons constaté que le tréhalose est fortement présent dans les boutons floraux de lin, suggérant son implication dans le développement floral. La présence du gène SWEETIE chez le lin a été montrée. Son expression est plus importante dans les boutons floraux que dans les feuilles. En condition de stress hydrique son expression semble réprimée sauf en cas de stress hydrique sévère dans les feuilles. Les résultats obtenus montrent un lien entre SWEETIE, le tréhalose et le stress hydrique et devraient servir à une meilleure compréhension des mécanismes impliqués dans la réponse au stress des plantes
Growing in their natural environment, plants often encounter unfavourable environmental conditions that interrupt normal plant growth and productivity. A common response to neutralize the negative effects of climate stresses is accumulation of molecules, like trehalose, involved in osmoregulation or stabilization of protein complexes and membranes. Engineering trehalose accumulation into crop plant could improve stress tolerance. The Arabidopsis thaliana mutant, sweetie, shows strongly elevated levels of trehalose and over-expression of genes implicated in sugar metabolism and abiotic stress. It is suggested that SWEETIE plays an important metabolic function and maybe in stress-related pathways. In this study, we show in Arabidopsis the important function of SWEETIE in development because of its expression in meristematic tissues. We also worked on linseed and sugar beet, two important species for Picardy’s region. We show that trehalose accumulates in leaves of these two species in drastic drought stress condition, confirming a role of this sugar in stress response. We also show a strong presence of trehalose in floral buds of linseed suggests a role in reproductive development. Moreover, we found the presence of the SWEETIE gene in linseed. Its expression is more important in floral buds compared to leaves. We show that a drought stress seems to induce a decreased of SWEETIE expression but an increase in leaves in drastic drought stress condition. The findings presented show that the SWEETIE gene, trehalose and drought stress are linked and should help our understanding of plant resistance to abiotic stresses

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Hewezi, Tarek. "Inhibition de l'expression génique chez le tournesol par induction d'une extinction systémique des gènes ou par la stratégie des ARN antisens". Toulouse, INPT, 2003. http://www.theses.fr/2003INPT004A.

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Le tournesol demeure, à ce jour, une des plantes encore récalcitrantes à̧ la transformation génétique. Au cours de ce travail, diverses techniques ont été optimisées et une méthode originale de sélection d'embryons immatures sur kanamycine a été élaborée, permettant l'obtention de tournesols transgéniques même à partir de lignées récalcitrantes. Ces avancées techniques ont permis d'aborder l'étude de l'expression génique chez cette plante. Dans un premier temps nous avons analysé le phénomène de "silencing" sur la lignée R105 ayant intégrée la construction p35S GUS-Intron. [. . . ] Dans un deuxième temps nous avons produit des tournesols génétiquement modifiés à partir de la lignée RHA266, résistante à la race 1 du mildiou (plasmopara halstedii), par intégration d'une séquence d'ADNc (LOR48) en orientationantisens par rapport à un promoteur 35S. Cet ADNc contient des motifs "Nucleotide Binding Sites" et un domaine "Leucine Rich Repeats". Cinq plantes transgéniques, présentant des événements d'intégration uniques et indépendants, ont été identifiées, dont quatre ont donné une descendance transgénique. Ces quatre lignées ont présenté des anomalies sévères de développement, directement corrélées à l'expression du transgène. Des malformations phénotypiques, identiques dans ces lignées , indiquent clairement l'implication des gènes de type NBS-LRR dans plusieurs voies du développement chez le tournesol, et plus particulièrement dans le fonctionnement du méristème. Les résultats obtenus laissent penser à une possible interférence entre les voies de signalisation de la résistance aux pathogènes et les voies de développement.

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Elmnasser, Noura. "Effet de stress technologiques sur la survie de différents modèles bactériens : applications particulières aux stress thermique, osmotique, acide et la lumière pulsée". Nantes, 2007. http://www.theses.fr/2007NANT2053.

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Listeria monocytogenes est une bactérie très fréquemment rencontrée dans notre environnement. Ses capacités de résistance et de croissance lui permettent de contaminer très facilement nos aliments. Dans une première phase, l’effet du stress (froid, salin et acide) généralement rencontré dans l’industrie agroalimentaire sur le comportement de 3 souches de Listeria monocytogenes a été étudié dans un aliment et en milieux de culture. Nous avons montré que L. Monocytogenes est capable de survivre mais pas de croître à la surface de saumon frais congelé durant une période d’au moins 10 mois. De même, nous avons testé la capacité de croissance en présence de concentrations élevées en sel (10 % NaCl) à pH neutre et à pH acide à différentes températures d’incubation (37, 25 et 4°C). Dans une deuxième phase, l’action de la lumière pulsée sur 3 micro-organismes cibles (L. Monocytogenes, Ps. Fluorescens, Ph. Phosphoreum) a été étudiée en milieux de culture solide ou liquide. Les résultats de cette étude ont montré la grande efficacité de ce traitement. Cependant cette efficacité dépend de l’exposition des microorganismes aux flashs de la lumière pulsée. Puis une évaluation de l’action de la lumière pulsée a été effectuée sur l’ADN. La lumière pulsée a entraîné des coupures simple et double brin au niveau de l’ADN. Enfin, nous avons étudié l’effet traitement par la lumière pulsée sur les protéines de lait. Ainsi, plusieurs méthodes d’analyses (spectroscopie UV, fluorescence, électrophorèse par SDS-PAGE et HPLC) n’ont pas montré des modifications significatives des composants des protéines après traitement
Listeria monocytogenes is an ubiquitous bacterial species known to be a major hazard in food safety. At first, we have assessed the behaviour of 3 strains of L. Monocytogenes in relation to cold, saline and acid stress in food system and in laboratory conditions. Results of this study indicate that L. Monocytogenes is capable of survival but not growth on the surface of frozen raw salmon for a period of at least 10 months. Nevertheless, freezing is a way of reducing the linked risk Listeria for the seafood products industry. These 3 strains are able to grow in the presence of high concentrations in salt (10 % NaCl) in neutral and acid pH at 37, 25 and 4°C. Then, the effects of broad spectrum pulsed light on the survival of L. Monocytogenes, Ps. Fluorescens and Ph. Phosphoreum populations on agar, in a liquid medium and on food were investigated. The present study clearly demonstrates the potential of pulsed light for bacterial inactivation. Complete inactivation of these bacteria can be achieved within a few microseconds. The microbicidal effect depends on the position of the microbes, so that any shadowing of target cells must be avoided. A solution of DNA was used to demonstrate DNA strand-breaking after pulsed light treatment. The influence of pulsed light treatment on protein components of milk was evaluated by means of spectroscopy ultraviolet, spectrofluorimetry, electrophoresis and HPLC. The pulsed light treatment did not produce any significant changes of protein components

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Radwan, Osman. "Analyse moléculaire des mécanismes de résistance du tournesol à l'agent du mildiou Plasmopara halstedii contrôlés par le locus Pl5/ Pl8". Clermont-Ferrand 2, 2004. http://www.theses.fr/2004CLF21524.

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Le mildiou du tournesol causé par l'oomycète Plasmopara halstedii est l'une des maladies majeures chez cette culture. Il existe plusieurs gènes de résistance chez le tournesol nommés Pl, efficaces contre plusieurs races du parasite. Ces gènes de résistance sont organisés en clusters. L'objectif de cette thèse était l'analyse moléculaire des mécanismes de résistance contrôlés par le cluster Pl5/ Pl8. Dans une première partie du travail nous avons cloné et identifié des séquences complètes de RGAs de type CC-NBS-LRR génétiquement liés au locus Pl5/ Pl8. Nous avons également montré que ce locus est complexe et large. Dans une deuxième partie, nous avons caractérisé les mécanismes moléculaires de résistance en utilisant une interaction compatible ou incompatible entre le tournesol et P. Halstedii. Suite à une infection par les racines lors de l'interaction incompatible (résistance) un des gènes CC-NBS-LRR est activé spécifiquement en comparaison avec le cas de la compatibilité (sensibilité). Cette activation est associée à une réaction hypersensible qui se développe dans l'hypocotyle. L'activation de ce gène CC-NBS-LRR est suivie par celle des gènes défense tels que GST, PDF et PR-5. Ces résultats indiquent la mise en place d'une Résistance Systémique Acquise (SAR) dans les parties supérieures de la plante. L'ensemble de ces résultats conduit à proposer un modèle de mécanisme de résistance chez le tournesol dans lequel la réaction hypersensible et la SAR agissent de concert pour conduire à la résistance à ce parasite

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Samrakandi, Moulay Mustapha. "Biofilms bactériens : croissance, facteurs de résistance au chlore et état de stress". Toulouse 3, 1996. http://www.theses.fr/1996TOU30031.

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La colonisation des surfaces, vivantes ou inertes, par les microorganismes et la resistance aux antibacteriens des biofilms ainsi formes reste un probleme majeur de la biotherapie et de la desinfection. Nos travaux sont centres sur la formation des biofilms en conditions dynamiques sur une surface inerte (tube tygon) et l'etude de quelques facteurs impliques dans leur resistance aux biocides. Les phases de croissance des biofilms monobacteriens (staphylococcus aureus, escherichia coli, bacillus subtilis, bacillus megaterium, pseudomonas aeruginosa mucoide et non mucoide (isole d'un malade mucoviscidosique)) sont decrites moyennant des methodes de mesure de la biomasse bacterienne (denombrement des cellules viables, mesure de consommation du substrat et de l'activite deshydrogenasique), adaptees prealablement aux cellules en biofilm. Ensuite, les tests de bactericidie sur cellules planctoniques demontrent un pouvoir biocide important du chlore, superieur a celui de la monochloramine. Cependant, l'effet biocide de la monochloramine est plus important que celui chlore sur les biofilms d'e. Coli et de pseudomonas aeruginosa, cultives dans certaines conditions. Les biofilms sporules ont une resistance aux biocides superieure a celle des spores libres ou fixees, et egalement superieure a celle des formes vegetatives correspondantes sous forme de biofilm. D'autre part, la synergie observee entre le chlore et l'acide peracetique sur spores libres et fixees par la chaleur n'est pas retrouvee au niveau des biofilms sporules. A partir de ces observations, des variations significatives de la resistance des biofilms ont ete observees selon: le developpement du glycocalyx, l'age du biofilm, la vitesse de croissance du biofilm, la presence des spores, chlorations successives a des concentrations subletales. Enfin, e. Coli, planctonique ou en biofilm, stresse par des concentrations inefficaces de chlore, montre une alteration de l'enveloppe cellulaire et un affaiblissement de l'activite des deshydrogenases

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Arafah, Sonia. "Induction par un stress de la résistance aux peptides antimicrobiens chez Yersinia". Lille 2, 2009. http://www.theses.fr/2009LIL2S008.

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Lorsque les bactéries colonisent un hôte, elles sont rapidement confrontées à l'activité d'effecteurs de l'immunité innée parmi lesquels figurent les peptides anti-microbiens. Produites par de nombreux organismes vivants, ces molécules sont pourvues de charges électro-positives et de domaines hydrophobes responsables de leur activité : leurs interactions avec les charges électro-négatives portées par des composés de la surface bactérienne est suivie d'une perméabilisation de la membrane cytoplasmique susceptible d'aboutir à la mort cellulaire. Cependant, au cours de leur évolution, les bactéries ont développé des mécanismes défensifs à l'égard des peptides anti-microbiens. Ainsi, lorsque Yersinia pseudotuberculosis - une bactérie pathogène pour le tractus digestif de l'homme et de nombreux animaux et choisie comme modèle pour cette étude- a poussé dans un milieu carencé en fer, sa survie est augmentée en présence d'un peptide anti-microbien particulier : la polymyxine B. A l'opposé, celle de Y. Enterocolitica, une espèce phylogénétiquement proche, reste inchangée dans les mêmes conditions expérimentales. Nous avons donc émis l'hypothèse que des gènes, présents uniquement chez Y. Pseudotuberculosis, conféreraient au microorganisme la capacité de résister à la polymyxine B. Afin de les caractériser, nous avons construit une banque constituée de dix mille fragments génomiques (obtenus aléatoirement) de Y. Pseudotuberculosis, puis recherché le(s)quel(s) d'entre eux permet(tent) l'induction d'une résistance à la polymyxine B chez Y. Enterocolitica privée de fer. Nous avons ainsi identifié deux régions chromosomiques distinctes de Y. Pseudotuberculosis qui sont impliquées dans le phénotype de résistance. La première comporte trois gènes, YPTB0331, YPTB0332 et YPTB0333, spécifiant respectivement un transporteur putatif, une protéine de fonction inconnue et un régulateur transcriptionnel de la famille LysR. La seconde région comprend deux gènes, YPTB2685 et YPTB2686, codant des produits de fonction inconnue. L'inactivation de l'un des gènes de chacune de ces régions, YPTB0333 et YPTB2686, altère la résistance de Y. Pseudotuberculosis à la polymyxine B mais également à des peptides anti-microbiens d'Invertébrés (dérivés de cécropines, polyphémusine). Elle est également associée à une diminution de la virulence bactérienne in vivo, qui est essentiellement due à une colonisation réduite des plaques de Peyer intestinales, étape déterminante du processus infectieux chez l'hôte. Le mécanisme de résistance mis en jeu par YPTB0331-0332-0333 est une modification de la surface bactérienne, responsable d'une réduction du contact des peptides avec la bactérie. Le rôle exercé par YPTB2685 et YPTB2686 serait d'inactiver (voire de dégrader) la polymyxine B

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Edelist, Cécile. "PATRON DE POLYMORPHISME ET SIGNATURE MOLECULAIRE DE L'ADAPTATION AU MILIEU SALIN DE HELIANTHUS PARADOXUS". Phd thesis, Université Paris Sud - Paris XI, 2007. http://tel.archives-ouvertes.fr/tel-00196521.

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Deux espèces sauvages de tournesols Helianthus annuus et H. petiolaris ont donné naissance il y a plusieurs milliers d'années à une espèce hybride H. paradoxus inféodée à des marais salins. Ma thèse a consisté à caractériser les bases génétiques de l'adaptation de H. paradoxus à ce milieu extrême.
J'ai recherché des signatures de sélection à deux échelles : à l'échelle du génome et à une échelle plus fine comprise entre 20 et 90 cM. Pour cela j'ai analysé les patrons de diversité génétique pour des marqueurs microsatellites dans trois populations naturelles de H. paradoxus et des deux espèces parentales, autour de trois QTL de survie et ailleurs dans le génome. A l'échelle du génome, une baisse de diversité autour de ces QTL a été mise en évidence chez l'espèce hybride et non chez ses parents indiquant qu'il est possible de détecter une signature de la sélection à cette échelle chez cette espèce. A l'échelle plus fine, le patron de diversité est en mosaïque. L'ordre des marqueurs n'étant pas connu avec certitude chez l'espèce hybride, une méthode basée sur le déséquilibre de liaison entre des marqueurs génotypés dans des populations naturelles a été développée. Cette méthode permet de regrouper sur une carte des marqueurs en fort déséquilibre de liaison. La correspondance entre carte de déséquilibre de liaison et carte génétique varie selon les populations et l'échelle génétique.
Parallèlement une étude physiologique et d'expression génique visant à comprendre le mécanisme d'adaptation à la salinité de H. paradoxus a été conduite. L'espèce hybride est très plastique, mais se porte mieux en milieu salin, ses feuilles sont plus succulentes, avec une concentration en sodium et sulfate très élevée dans ses tissus. Plusieurs gènes candidats, impliqués dans différentes voies de réponse à la salinité, et dont certains sont cartographiés dans les régions des QTL, sont différentiellement exprimés chez l'espèce hybride et chez ses parents. Ces résultats confirment qu'ils sont des candidats potentiels importants dans l'adaptation de H. paradoxus aux marais salins et donc impliqués dans le processus de spéciation.

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Budin-Verneuil, Aurélie. "Caractérisation de la réponse au stress acide chez Lactococcus lactis". Caen, 2004. http://www.theses.fr/2004CAEN2055.

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Afin d'élargir nos connaissances sur les mécanismes moléculaires impliqués dans la réponse au stress acide chez L. Lactis MG1363, la caractérisation de l'ATR (pour Acid Tolerance Response) ainsi que celle de mutants résistants au stress acide - affectés dans les gènes guaA (codant la GMPsynthase), relA (codant la (p)ppGpp synthase) et pstS (codant une sous-unité du transporteur à haute affinité du phosphate) - a été entreprise. Deux approches ont été utilisées : la caractérisation protéomique visant à identifier les protéines impliquées dans la réponse au stress acide de L. Lactis, et la caractérisation du rôle de composants pariétaux dans la résistance au stress acide des mutants. La caractérisation protéomique de l'ATR en milieux complexe et chimiquement défini ainsi que celle des mutants guaA, relA et pstS révèlent la sur-expression de 193 protéines, dont 174 ont été identifiées, correspondant à 91 protéines différentes. Une analyse transcriptionnelle ainsi qu'une mutagenèse ciblée ont été réalisées sur certains des gènes correspondants. Nos résultats suggèrent, pour certaines de ces protéines, qu'elles ont une importance majeure dans la tolérance à l'acidité de L. Lactis. Le rôle de composants pariétaux dans la réponse au stress acide de L. Lactis a été évalué en inactivant les gènes pbp (pour penicillin binding protein) dans la souche sauvage et dans le mutant guaA. La survie des mutants correspondants en condition de stress acide suggère que la biosynthèse de la paroi participe à la tolérance au stress acide de L. Lactis.

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Mayola, Eléonore. "Etudes des mécanismes de mort cellulaire et résistance des cellules cancéreuses pour le développement de nouvelles approches thérapeutiques : modèle du mélanome". Thesis, Paris 11, 2011. http://www.theses.fr/2011PA11T012/document.

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L’apoptose est une mort cellulaire programmée nécessaire à l’homéostasie tissulaireau cours du développement. Les cellules cancéreuses acquièrent la capacité à échapper àl’apoptose. Restaurer la capacité des cellules tumorales à mourir est une stratégiethérapeutique qui permettrait de lutter contre le cancer. Il est donc important d’identifier denouvelles cibles au sein de la signalisation apoptotique et de tester de nouvelles molécules.La mitochondrie, intégrateur central des signaux de mort cellulaire et actrice de l’exécution de l’apoptose, est une cible de choix pour développer des thérapies anti-tumorales.L’ANT (Adenine Nucleotide Translocase) est la protéine majoritaire de la membrane internemitochondriale. Elle est possède une fonction de transporteur ATP/ADP, en conditionphysiologique, et suite à un stimulus apoptotique, acquiert une activité de pore létal. Ainsi, ilest intéressant d’inhiber la fonction transporteur et d’activer la fonction pore d’ANT pourinduire l’apoptose. Il existe quatre isoformes d’ANT : ANT1, 2, 3 et 4. Nous avons étudié lerôle d’ANT4, récemment identifiée, dans la signalisation apoptotique. Notre étude montre lerôle anti-apoptotique d’ANT4 dans des cellules cancéreuses et l’intérêt d’ANT comme ciblethérapeutique anti-cancéreuse.Une augmentation de l’expression de protéines anti-apoptotiques, l’adaptation auxstress cellulaires et l’activation de voies de survie sont les mécanismes les plus fréquemmentdécrits pour expliquer la chimiorésistance du mélanome. A l’aide de modèles cellulaires, nousavons étudié la capacité de deux nouvelles molécules : Withaférine A (WFA) et Plumbagine(PBG) à stimuler l’apoptose et déterminé les mécanismes moléculaires impliqués. Nous avonsmontré la capacité de WFA à induire spécifiquement la voie mitochondriale de l’apoptose decellules de mélanome par un mécanisme dépendant de la production d’espèces activées del’oxygène (EAO) qui déclenchent la voie mitochondriale et de la diminution du niveaud’expression de la protéine anti-apoptotique Bcl-2. En revanche, PBG induit une mortapoptotique et une mort nécrotique des cellules de mélanomes. Dans les deux cas, PBG agitpar l’augmentation des EAO suite au déclenchement d’un stress du reticulum endoplasmique.WFA et PBG sont donc deux molécules pro-oxydantes capables d’induire la mort des cellulesde mélanome en tirant partie de leur vulnérabilité au stress oxydant.Nos travaux ont participé à la mise en évidence d’une cible thérapeutique anticancéreusepotentielle et de deux agents capables d’induire la mort cellulaire dans un contextede chimiorésistance
Apoptosis is a programmed cell death process necessary for tissue homeostasis duringdevelopment. Cancer cells acquire the capacity to evade apoptosis. Restoring tumor cellsability to die is a therapeutic strategy against cancer. It is therefore important to identify newtherapeutic targets within the apoptotic signaling and to test new molecules.Mitochondrion being a central integrator of cell death signals and a key player inapoptosis execution, it is a target of choice to develop new anticancer therapies. ANT(Adenine Nucleotide Translocase) is the main protein of the inner mitochondrial membrane. Itpresents a ADP/ATP transporter function in physiological conditions and acquire a lethal poreactivity upon apoptotic stimulus. It is thus interesting to inhibit the transporter function and- 6 -activate ANT pore function in order to induce apoptosis. There are four isoforms: ANT1, 2, 3and 4. We studied the role of the recently discovered ANT4 in apoptotic signaling. Our studyemphasize ANT4 anti-apoptotic role in cancer cells and ANT potential as an anticancertherapeutic target.Increase in anti-apoptotic proteins, adaptation to cellular stress and activation ofsurvival pathways are the main mechanisms responsible for chemoresistance. Using cellularmodels we studied the ability of two molecules: Withaferin A (WFA) and Plumbagin (PBG)to stimulate apoptosis and determined the molecular mechanisms involved. We showed WFAcapacity to specifically induce the mitochondrial pathway of apoptosis in melanoma cellsthrough reactive oxygen species (ROS) generation leading to mitochondrial pathwayactivation and the decrease in anti-apoptotic protein Bcl-2 expression level. However, PBG isresponsible for apoptosis and necrosis induction in melanoma cells. In both cases PBG actsthrough an increase in ROS following endoplasmic reticulum stress. WFA and PBG are thustwo pro-oxidant molecules able to induce the death of melanoma cells by taking advantage oftheir vulnerability to oxidative stress.Our work took part in the demonstration of a potential anticancer target and two agentsable to induce cell death in a context of chemoresistance

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Noiraud, Nathalie. "Saccharose et mannitol chez le céleri (apium graveolens L. ) : approche moléculaire de leur transport et réponse à un stress salin". Poitiers, 1999. http://www.theses.fr/1999POIT2328.

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Le saccharose constitue le principal photoassimilat glucidique transporte par le phloeme. Cependant, chez certaines especes dont le celeri (apium graveolens l. ), il est accompagne par des polyols (mannitol). Le mannitol intervient dans la tolerance aux stress abiotiques (stress salin) en faisant office de solute compatible. Nous avons etudie l'effet d'un stress salin sur les transports d'un point de vue moleculaire. Le criblage d'une banque d'adnc de feuilles adultes de celeri branche a permis d'identifier un transporteur de saccharose (agsutl). La fonction de la proteine agsutl a ete demontree par son expression heterologue dans la levure. Les transcrits agsutl sont surtout detectes dans les feuilles adultes et le phloeme, et dans une moindre mesure dans les racines. Nous avons compare les effets d'un stress salin chez les celeris branche et rave. Suite a un stress salin severe (nacl 300 mm), l'expression du gene agsutl est diminuee chez le celeri branche notamment dans les racines tandis que cette diminution est moins prononcee chez le celeri rave. Des modifications des teneurs en glucides et des activites enzymatiques liees au metabolisme glucidique ont aussi ete observees et indiquent une orientation du metabolisme carbone vers le mannitol.

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Rachid, Alchaarani Ghias. "Variabilité génétique et identification des QTLs liés à la qualité des semences chez le tournesol (Helianthus annuus L. )". Toulouse, INPT, 2004. http://www.theses.fr/2004INPT002A.

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Afin de progresser dans le domaine de la sélection assistée par marqueurs moléculaires chez le tournesol, nous avons réalisé plusieurs expérimentations sur une population de lignées recombinantes (RILs) issues du croisement entre deux génotypes 'PAC-2' et 'RHA-266'. La variabilité génétique pour la résistance partielle au mildiou (Plasmopara halstedii) et à la maladie des taches noires (Phoma macdonaldii), ainsi que pour quelques caractères d'intérêt agronomique et des paramètres de la germination et du développement des plantules ont été étudiés chez les RILs et leurs parents. L'analyse de variance montre une grande variabilité entre les RILs pour la résistance partielle pour les deux maladies et les caractères d'intérêt agronomique étudiés. Afin d'identifier les QTLs contrôlant les caractères étudiés, la carte génétique construite à partir des RILs et leurs parents mentionnés ci-dessus a été améliorée en augmentant le nombre de marqueurs AFLPs et additionnant des marqueurs SSRs. Plusieurs QTLs liés aux caractères étudiés ont été identifiés. Les effet de chaque QTL sont entre 6. 4% et 20. 2% pour la résistance partielle aux deux maladies, entre 7% et 37% pour les caractères d'intérêt agronomique et entre 6% et 33% pour les paramètres de germination et de développement des plantules. Les QTLs détectés se trouvent parfois sur le même groupe de liaison les uns proches des autres et les corrélations génétiques entre les caractères confirment également cette relation. Ces régions chromosomiques devront être cartographiées de façon plus précise si l'on souhaite les utiliser dans un programme de sélection assistée par marqueurs. Afin d'augmenter la variabilité génétique par l'irradiation et la culture in vitro, les graines d'un hybride F1 et ses deux parents 'AS613' et 'AS616' ont été irradiées par sept doses de rayons (5, 15, 25, 35, 45, 55 et 66 Grays). Trois paramètres d'organogenèse ont été étudiés pour les génotypes avec les graines irradiées et les graines non irradiées (contrôle). La variabilité génétique, l'effet d'irradiation et l'interaction entre génotype-irradiation ont été déterminés pour tous les paramètres étudiés. L'irradiation des graines de l'hybride F1 par 5 et 15 Grays de rayons gamma a un effet positif sur l'augmentation de l'aptitude à la régénération par organogenèse à partir de cotylédons chez le tournesol. Les mutants induits par les deux moyens; irradiation et variation somaclonale peuvent être dans l'amélioration de cette espèce.

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As-Sadi, Falah. "Genetic and genomic based approaches towards a better sustainability of sunflower Helianthus annuus resistance to downy mildew Plasmopara halstedii". Toulouse 3, 2011. http://thesesups.ups-tlse.fr/1534/.

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Resumen

Le mildiou du tournesol, causé by P. Halstedii, est une des maladies les plus dévastatrice de la culture de tournesol (Helianthus annuus). Les gènes Pl qui confèrent une résistance totale et qualitative, ont été largement utilisés chez les cultivars. Probablement de type race-spécifique, les gènes Pl ont été progressivement dépassés du à la pression de sélection imposée sur l'agent pathogène. Ainsi depuis 10 ans, on assiste à une augmentation du nombre de races de P. Halstedii dans les champs. La résistance quantitative a été détectée par Tourvieille et al. (2008) et avancée comme une solution pour contrer l'évolution rapide de l'agent pathogène. Deux QTLs ont été détectés sur LG10 et LG8 dans une population de RILs issus d'un croissement XRQ*PSC8 par Vear et al. (2008). En examinant les différents aspects de l'interaction plante-agent pathogène pour améliorer la durabilité de la résistance du tournesol contre le mildiou, les objectives de cette thèse sont (i) côté agent pathogène, améliorer la caractérisation génétique et génomique de P. Halstedii (ii) côté plante, affiner la cartographie du QTL majeur localisé sur LG10 (QRM1) et (iii) comparer, par analyse transcriptomique, les voies génétiques régulés par Pl5 et QRM1-R. Le premier séquençage haut-débit a été effectué sur des échantillons de tournesol infecté et ainsi a permis d'augmenter les ressources génomiques disponibles de P. Halstedii et de mettre en évidence les premiers effecteurs putatifs RXLR et CRN chez P. Halstedii. Du côté de la plante, une cartographie fine de QRM1 a été effectué: une nouvelle banque BAC a été construite et " screenée " pour mettre en place une carte physique préliminaire de la région de QRM1 ; la carte génétique du LG10 a été construite et enrichie avec des marqueurs issus des BACs ; et une nouvelle méthode de phénotypage pour simuler la résistance quantitative dans un environnement contrôlé a été validé et utilisé pour phénotyper les nouvelles RILs obtenues. La région QRM1 a été réduite à 1. 5 cM. En utilisant les puces Affymetrix de tournesol, l'analyse transcriptomique a révélé plusieurs voies génétiques régulées par l'interaction incompatible (Pl5*race 710) ou l'interaction quantitative dépendante de QRM1-R
Downy mildew, caused by P. Halstedii, is one of the major diseases for sunflower (Helianthus annuus). Pl genes conferring full, qualitative resistance were discovered and extensively spread in cultivars. They appeared as race-specific and were progressively overcome due to the selection pressure on the pathogen. Thus since 10 years we are witnessing an increase of P. Halstedii races in the fields. Quantitative resistance was found by Tourvieille et al. (2008) and proposed as a solution to counter the rapid evolution of the pathogen. Two QTLs were detected at LG10 and LG8 in a RIL population from XRQ*PSC8 by Vear et al. (2008). With the aim to improve the sustainability of sunflower resistance in gathering knowledge on several aspects of the plant*pathogen interaction, the objectives of this thesis are (i) on the pathogen side, to better characterize P. Halstedii at the genetic and genomic level, (ii) on the plant side, to obtain a fine mapping of the main QTL located on LG10 (QRM1) and (iii) to compare the Pl5 gene and QRM1-R dependent genetic pathways by transcriptomic analysis. The first high-throughput sequencing was performed on infected sunflower which increased the available genomic resources of P. Halstedii and highlighted first putative effectors RXLR and CRN of P. Halstedii. On the plant side, we performed a fine mapping of QRM1: a new BAC library was built and screened to set up a preliminary physical map of the QRM1 region; genetic map of LG10 was enriched with BAC derived markers and a phenotyping method to mimic the quantitative resistance in controlled environment was validated and used to phenotype newly constructed RILs. The QRM1 region was restricted to 1. 5 cM. Using Sunflower Affymetrix chip, transcriptomic analysis revealed different genetic pathways depending on incompatible interaction (Pl5 gene * race 710) or quantitative interaction managed by QRM1-R

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Kondakova, Tatiana. "Pseudomonas adaptation to stress factors : role of membrane lipids and Pseudomonas fluorescens response to NO2". Rouen, 2015. http://www.theses.fr/2015ROUES016.

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La large distribution des Pseudomonas fluorescens est liée à leur grande adaptabilité aux facteurs de stress tels que les variations environnementales. Ce travail avait pour objet la réponse spécifique au milieu aéroporté de P. Fluorescens, comme l’aéroportée MFAF76a et la clinique MFN1032 comme standard. La technique récente HPTLC-MALDI-TOF MSI a permis de caractériser les divers glycérophospholipides (GP) des deux souches. En phase stationnaire de croissance, un GP inconnu (UGP - unknown GP) a été isolé et semble intervenir dans l’adaptation à la température de la souche clinique MFN1032. Quant au stress NO2 gaz, les deux souches ont été exposées aux concentrations: 0. 1, 5 et 45 ppm. Leurs phénotypes ont été confrontés à l’expression de quelques gènes ciblés. Pour les valeurs standard 0,5 and 5 ppm en NO2, aucun paramètre n’est modifié. Par contre, une réponse bactérienne est constatée suite à l’exposition à 45 ppm de NO2. Cette exposition semble impacter la production d’UGP. De plus hmp et mexEF-oprN, codant respectivement pour la flavohémoglobine et pour la pompe à efflux RND, se trouvent surexprimés, corroborant l’évolution de la résistance bactérienne aux antibiotiques. Contrairement au NO, aucune altération de la biomasse de biofilm n’est observée pour le NO2, qui favorise cependant l’augmentation de son épaisseur chez MFAF76a, mais aussi l’inhibition du swarming et la diminution du swimming, avec un taux de c-di-GMP stable. Ce faisceau de résultats offre, pour la première fois, la réponse bactérienne et le rôle des GP lors de stress comme NO2 ou à la température, autre modification environnementale
The high distribution of Pseudomonas fluorescens group is linked to its ability to adapt to stress factors. This work goaled the response of an airborne P. Fluorescens MFAF76a, and its clinical standard P. Fluorescens MFN1032 to environmental changes in order to refine the specific adaptation of airborne bacteria. First the HPTLC-MALDI TOF MSI tool defined glycerophospholipid (GP) composition of both strains. In stationary growth phase, an unknown GP, in short UGP, was found and seemed to be involved in temperature adaptation for the clinical strain. After exposure to 0. 1, 5 and 45 ppm concentrations, the bacterial response to NO2 was defined through motility, biofilm formation, antibiotic resistance and expression of several chosen target genes. While no change in parameters was seen in bacteria exposed to 0. 1 and 5 ppm of NO2, several alterations were occurred with a bacterial exposure to 45 ppm. NO2 seemed to bias the UGP production, reduced P. Fluorescens swim and decreased swarm only for MFN1032 strain. Biofilm formed by NO2-treated MFAF76a showed increased maximum thickness, with no change in c-di-GMP intracellular level. Expression of the hmp-homologue gene involved in NO detoxification was upregulated in response to NO2, suggesting a possible common pathway between NO and NO2 detoxification. Finally, NO2 was found to increase bacterial resistance to ciprofloxacin and chloramphenicol. Thus the resistance nodulation cell division (RND) MexEF-OprN efflux pump encoding genes were highly upregulated in both strains. Together these findings implement the first model of bacterial response to NO2 toxicity and the role(s) of GP in bacterial adaptation to environmental changes

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Fassi, Fehri Lina. "Activité antimicrobienne de peptides membranotropes et mécanisme de résistance chez mycoplasma pulmonis". Rennes 1, 2005. http://www.theses.fr/2005REN1S061.

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La résistance bactérienne aux antibiotiques est un problème de santé publique. Notre objectif est de mieux connaître les facteurs qui affectent l'efficacité antibactérienne des peptides antimicrobiens qui constituent des antibiotiques prometteurs. Nous avons étudié les interactions entre le mollicute Mycoplasma pulmonis et dix peptides différents. L'activité de ces peptides, à l'exception de la globomycine, est indépendante de la densité bactérienne mais est sensible à la concentration sérique du milieu de culture. Les combinaisons de peptides et d'antibiotiques ont montré des effets antibactériens additifs. Chez des clones sélectionnés pour leur résistance à la gramicidine D et à la mellitine, une surexpression de protéines de stress a été attribuée à des mutations dans le gène hrcA. La complémentation avec le gène hrcA sauvage restaure la sensibilité aux deux peptides démontrant que la résistance résulte d'une réponse au stress impliquant les gènes régulés par la protéine HrcA.

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Nguyen, Ho-Bouldoires Thanh Huong. "Rôle de la kinase MK2 dans la résistance au stress oxydatif des tumeurs hépatobiliaires". Thesis, Paris 6, 2014. http://www.theses.fr/2014PA066541/document.

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Le stress oxydatif peut conduire à la sénescence, à l'apoptose et à la mutagenèse. Les cellules cancéreuses peuvent développer un avantage prolifératif sur les cellules normales dans un environnement de stress oxydatif, qui de ce fait, participe à la progression tumorale. Nous émettons l'hypothèse que MK2, une cible directe de la p38 MAPK, pourrait conférer aux cellules de cancer du foie une résistance au stress oxydatif. Dans quatre lignées cellulaires tumorales hépatobiliaires, l'inhibition pharmacologique de MK2, MK2i, augmente la mort cellulaire induite par le stress oxydatif par une diminution de l'activité de Hsp27 et une augmentation du niveau du suppresseur de tumeur p53. MK2 favorise la survie cellulaire via l'activation de la réponse anti-oxydante Nrf2 et de la voie d'HB-EGF/EGFR. MK2 est également responsable de la production d'Il-8 induite par le stress oxydatif. Cette augmentation semble dépendre de Hsp27. De plus, nous avons identifié la protéine d'échafaudage EBP50 comme une nouvelle protéine de liaison de MK2. Dans les cellules cancéreuses hépatobiliaires, EBP50 contribue à la régulation de la voie MK2/Hsp27. La déplétion d'EBP50 provoque une diminution de la phosphorylation de Hsp27, de la survie cellulaire ainsi qu'une baisse des taux d'ARNm de HB-EGF et d'IL-8. Dans les échantillons de tissus humains, l'expression de MK2, de Hsp27 et d'EBP50 est augmentée dans le carcinome hépatocellulaire par rapport au tissu hépatique non tumoral. En résumé, ces données fournissent la preuve d'un rôle prépondérant de l'axe MK2/EBP50/Hsp27 dans la progression du cancer du foie en conférant aux cellules tumorales hépatobiliaires une résistance au stress oxydatif
Oxidative stress leads to senescence, apoptosis and mutagenesis. Cancer cells can develop a proliferative advantage over normal cells in an environment of oxidative stress, which thereby, participates in tumor progression. We hypothesized that MK2, a direct target of p38 MAPK, could mediate the resistance of liver cancer cells to oxidative stress. In four hepatocellular and biliary cancer cell lines, pharmacological inhibition of MK2 by MK2i enhanced oxidative stress-induced cell death through a decrease in Akt and Hsp27 activity and an increase in tumor suppressor p53 level. MK2 promoted cell survival via activation of the anti-oxidant Nrf2 response and the EGFR pathway. The expression of the EGFR agonist, Hb-EGF, increased in response to oxidative stress. In turn, Hb-EGF induced Hsp27 phosphorylation that was down-regulated by MK2i in liver cancer cells, indicating that EGFR activation by Hb-EGF is a potent activator of MK2. MK2 also increased oxidative stress-induced IL-8 production that depends on Hsp27. Furthermore, we found that MK2 was a binding partner of the scaffolding protein EBP50. In liver cancer cells, EBP50 contributed to up-regulate the MK2/Akt/Hsp27 pathway. Silencing of EBP50 by siRNA in these cells caused a decrease in the phosphorylation of Akt/Hsp27 and in the mRNA levels of Hb-EGF and IL-8. In human tissue samples, MK2, Hsp27 and EBP50 expressions were found to be increased in hepatocellular carcinoma compared with the matched non-tumor liver tissue. Overall, these data provide evidence for a preponderant role of MK2/EBP50/Akt/Hsp27 axis in liver cancer progression by mediating oxidative stress resistance in liver tumor cells

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Marchand, Gwenaëlle. "Gene regulatory networks involved in drought stress responses : identification, genetic control and variability in cultivated sunflower, Helianthus annuus and its relatives". Toulouse 3, 2014. http://thesesups.ups-tlse.fr/2597/.

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La sécheresse affecte le rendement des plantes de grande culture comme le tournesol. Ces plantes développent des réponses morpho-physiologiques pour améliorer leur tolérance au manque d'eau. De nombreux gènes formant un réseau de régulation (GRN) contribuent à un contrôle génétique complexe de ces réponses. Le travail présenté étudie ce réseau, ses différents gènes et leurs interactions chez le tournesol. Tout d'abord, nous avons mis en évidence trois gènes récepteurs du signal environnemental afin de construire un biomarqueur du statut hydrique. Puis, par une étude d'association, nous avons reconstruit le GRN reliant les gènes de réponse au stress et déchiffré leur contrôle génétique. Enfin, par une approche de biologie des systèmes, nous avons inféré le GRN groupant des gènes de régulation et de réponse. Cette étude nous a permis d'identifier des mécanismes majeurs de tolérance à la sécheresse chez le tournesol, ainsi que le rôle de ce réseau dans l'évolution du genre Heliantus
Drought is a major stress that affects growth, physiology and therefore yield of crops as sunflower. To become more tolerant, plants develop complex morpho-physiological responses. Various genes interacting between them and with the environment are involved in the genetic control of those responses. They form together a gene regulatory network (GRN). Here, we focused on these drought GRN, its different gene groups and their interactions in the cultivated sunflower. First, we highlighted three genes reflecting the environmental signal. From their expression we built a plant water status biomarker. Then through an association study, we built the GRN connecting drought responsive genes and we deciphered their genetic control. Finally, thanks to a systems biology approach we inferred the GRN linking regulatory and drought responsive genes. Studying this network, we examined how it could drive phenotypic changes and how it was related to Heliantus evolution and sunflower breeding

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Pham, Ba Hung. "Stress-resultant models for optimal design of reinforced-concrete frames". Cachan, Ecole normale supérieure, 2009. http://tel.archives-ouvertes.fr/tel-00538958/fr/.

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The standard design procedure of reinforced concrete frame structures starts with linear analysis to obtain the corresponding diagrams of stress resultants (bending moment, shear and axial force), followed by the ultimate analysis of each cross section. The main disadvantage of such a design procedure concerns the (highly) statically indeterminate frames, where the failure of each beam or column would not imply the complete failure of the structure, but would lead to a significant stress resultant redistribution with respect to the result obtained by linear analysis. For that reason, we propose the performance based design procedure where the behavior until complete failure of beam-column and frames imposes to consider so-called plastic hinges corresponding to the zones where plasticity and/ or damage localizes. Engineering structures are usually statically indeterminate, so that the total failure of one member would affect the global response of the structure but it would not lead to a complete loss of the structural integrity. Moreover, being capable of describing the softening response of the members of one particular structure can provide an estimate of the residual life of a partially damaged structure. Such a procedure can also help to provide a more detailed crack description, which is needed to make decisions about the maintenance and repairs.

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Mabire, Charlotte. "Résistance du monde agricole : aspects psychosociaux du bien-être et du mal-être". Thesis, Université de Lorraine, 2017. http://www.theses.fr/2017LORR0365/document.

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Les agriculteurs font partie d’une catégorie socioprofessionnelle qui exprime une certaine forme de malaise due à une multitude de pressions et de mutations de leur métier. Notre approche est focalisée sur les différences interindividuelles contribuant à l’adaptation et à la résistance dans un contexte particulièrement menaçant ou bien favorisant l’aggravation d’un état de souffrance psychologique. Dans ce but, nous nous centrons sur le concept de ressources, et notamment sur le modèle de Conservation des ressources (Hobfoll, 1989), afin de comprendre quelles sont les ressources matérielles, énergétiques, personnelles et en termes de conditions sociales dont les gains sont les plus protecteurs et les pertes les plus délétères pour la santé des agriculteurs. Pour éprouver nos hypothèses, cette recherche repose sur une méthode de recueil quantitative et longitudinale en deux temps de mesure auprès d’une cohorte d’agriculteurs lorrains. Ainsi, la santé est évaluée en termes de bien-être (bonheur, vigueur, satisfaction de vie, santé perçue) et de mal-être (stress, épuisement professionnel, douleurs musculosquelettiques). Nos résultats, obtenus à l’aide de modèles structuraux (approche Partial Least Square Path Modeling), nous confirment la prépondérance des effets délétères des pertes de ressources sur la santé à T1. À l’inverse, et dans une plus faible mesure, les gains de ressources la protègent. Par ailleurs, le changement dans la santé à T2 est prédit uniquement par l’érosion des ressources. Nos résultats soulignent la nécessité de prévenir les pertes de ressources psychologiques et de conditions sociales, puis énergétiques pour préserver la santé des agriculteurs
Farmers are part of a socio-professional category that expresses some form of unease due to multiple pressures and changes in their profession. Our approach focuses on interindividual differences contributing to adaptation and resistance, in a particularly threatening context, or favoring the worsening of a state of psychological suffering. To this end, we focus on the concept of resources and in particular on the Conservation of Resources theory (Hobfoll, 1989). This theory allows us to understand which are the material, energy, personal characteristics and conditions resources and among them, which gains are the most protective and which losses are the most destructive of the farmers' health.To test our hypotheses, this research is based on a two-stage quantitative and longitudinal measurement method for a cohort of Lorraine (France northeastern region) farmers. Thus, health is assessed in terms of well-being (happiness, vigor, life satisfaction, perceived health) and ill-being (stress, burnout, musculoskeletal pain). Our results obtained by using structural models (Partial Least Square Path Modeling) confirm the preponderance of the deleterious effects of resources’ losses on health at T1, conversely, and to a lesser extent, that the resources’ gains protect it. On the other hand, the change in health at T2 is predicted only by resource erosion. Our results underline the need to prevent the loss of personal and conditions resources and then energy to preserve farmers’ health

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Tremillon, Nicolas. "Amélioration de la secrétion hétérologue chez lactococcus lactis". Paris 11, 2009. http://www.theses.fr/2009PA112315.

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La bactérie lactique Lactococcus lactis est un hôte intéressant pour produire, sécréter et purifier des protéines hétérologues. L’INRA a construit un système d’expression et une souche hôte mutée dans l'unique protéase extracellulaire HtrA et où les protéines exportées sont stables, d’où un meilleur rendement et un avantage concurrentiel. Le système de production INRA est développé en partenariat avec GTP Technology dans le cadre de ma thèse CIFRE. Pour améliorer la souche hôte, j’ai recherché des leviers susceptibles de compenser les fonctions de HtrA, résistance au stress thermique et contrôle qualité des protéines exportées. J’ai sélectionné un suppresseur en multicopie de la thermo-sensibilité du mutant htrA : de fonction inconnue, son effet sur la production de protéines doit être testé. J’ai aussi caractérisé un facteur de repliement de surface, une PPIase, qui n’a pas d’effet sur les protéines testées, et qui aurait un rôle de ménage constitutif. Enfin, j’ai étudié une protéine induite dans le mutant htrA en conditions normales: c’est une protéine de stress de paroi, induite dans la souche sauvage par des antibiotiques qui ciblent la biosynthèse du peptidoglycane, et essentielle à la survie à la bacitracine. Ainsi, l’absence de HtrA perturbe non seulement les protéines d’enveloppe mais aussi la paroi. L’étude de cette nouvelle fonction de HtrA et du rôle de la protéine induite dans la survie va être poursuivie. Parallèlement, j’ai aussi développé l’utilisation du système INRA chez GTP-Technology. J’ai mis au point la production d’une nucléase utile en biologie moléculaire pour clarifier des extraits bactériens, avec un rendement de 200mg/L en mini-fermenteurs
The lactic acid bacterium Lactococcus lactis is an interesting host to produce, secrete and purify heterologous proteins. INRA built up an expression system and a host strain inactivated for the unique extracellular HtrA protease and in which exported proteins are stable, leading to a better yield and a competitive advantage. INRA system development in partnership with GTP Technology is the objective of my PhD thesis (CIFRE fellowship). To improve the host strain, positive factors able to compensate for HtrA functions: heat shock resistance and the quality control of exported proteins, were looked for. A multicopy suppressor of htrA mutant thermosensitivity was selected: its function is unknown and its effect on heterologous protein production has to be tested. An exported folding factor, a PPIase, was also caracterized, but it had no effect on the proteins that have been tested, suggesting a constitutive housekeeping function. At last, a protein induced in htrA mutant under normal conditions was studied. It is a cell wall stress protein, both induced in the wild type strain by several antibiotics targeting peptidoglycan biosynthesis and essential for cell viability when cells are exposed to bacitracin. Thus, the absence of HtrA not only disturbs envelope proteins, but also the cell wall. This new HtrA function and of the role of the induced protein on cell survival will be further studied. In parallel, the use of the INRA expression system at GTP Technology was also developed. The conditions for the production of a nuclease useful in molecular biology to clarify cell extracts were optimised, and a protein yield of about 200mg/L in mini-fermentors could be reached

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Bour, Aurélien. "Influence de la composition lipidique sur la résistance de membranes bio-mimétiques au stress oxydant". Thesis, Sorbonne université, 2018. http://www.theses.fr/2018SORUS394.

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La mitochondrie est à la fois le lieu de la production d’énergie de la cellule et le centre régulateur de la mort cellulaire. L’efficacité de ces 2 fonctions est liée au niveau d’oxydation de la membrane mitochondriales interne (MMI). Le but de ce travail est de comprendre l’influence des lipides de la membrane sur sa résistance au stress oxydant. Les expériences sont menées sur des liposomes mimant la MMI. Leur oxydation est déclenchée par l’irradiation de la Ce6, une molécule photo-sensibilisatrice ayant une forte affinité pour les bicouches lipidiques. D’abord, l’association entre membranes et Ce6 est quantifiée par fluorimétrie. Ces mesures permettent de garder constant le ratio Ce6/lipides d’une composition membranaire à l’autre. Nous étudions ensuite, par microscopie à contraste de phase, l’influence de la nature des têtes des lipides et de la position, du nombre et de la conformation des insaturations des chaines lipidiques sur la perméabilisation du liposome déclenchée par son oxydation. Cette perméabilisation est due à deux phénomènes : la formation de défauts dans la bicouche et l’ouverture de pores micrométriques dans la membrane. Les seconds ne permettent une fuite significative que pour des membranes de composition proche des MMI. La présence du cardiolipide, spécifique aux mitochondries, retarde et réduit la perméabilité induite. La perméabilisation est d’autant plus efficace que les lipides comportent des insaturations et qu’elles sont proches de la tête polaire. La spectrométrie Raman donne en outre accès à la chimie du phénomène. Notamment, l’oxydation de la membrane n’est possible que si les électrons engagés dans la double liaison peuvent être délocalisés
Mitochondrion is both the place of cell energy production and the regulatory center of apoptosis. The efficiency of these functions depends on the oxidation level of inner mitochondrial membranes (IMM). The aim of this work is to decipher the influence of lipids on the membrane resistance to oxidative stress. Experiments are done on IMM-mimicking liposomes. Membrane oxidation is controlled by irradiation of the Ce6, a photosensitizer with high affinity for lipid bilayers. First we quantifiy the binding of Ce6 to membrane by fluorimetry. This measures are used to have a ratio Ce6/lipids equal between membrane compositions. Then we study, by phase contrast microscopy, the influence of the nature of lipid polar head and of the number, position and conformation of aliphatic chains insaturations on the oxidation-induced liposome permeabilization. This permeabilization is due to 2 phenomena : the formation of membrane defects and micrometric pore openings. These latter allow, for IMM-like membranes, a significant leak of liposome inner medium. The presence of cardiolipin, a mitochondrion-specific lipid, delays and decreases the induced permeability. The more insaturations lipids have and the closer to the polar head they have, the more efficient is the permeabilization. Raman spectroscopy allows us to follow chemical scenario of this phenomenon. In particular, membrane oxidation is possible only if the double bonds electron can be delocalized

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Ahmad, Hafiz Bashir. "Intraspecific variability in embolism resistance and functional trade-offs in sunflower (Helianthus annuus L.) and Maritime pine (Pinus pinaster Ait.)". Thesis, Bordeaux, 2017. http://www.theses.fr/2017BORD0747/document.

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Plusieurs études ont montré que la productivité des forêts et des cultures décroît sur l’ensemble de la planète en réponse au changement climatique, et que les risques de mortalité liée à la sécheresse s’accroissent. Ces mortalités massives ont été observées dans tous les écosystèmes forestiers et seraient dues à un dysfonctionnement hydraulique des plantes, causé par de l’embolie xylémiène. Le spectre interspécifique de résistance à l'embolie a été largement étudiée, mais peu d'attention a été accordée à la variabilité intra-spécifique de ce trait. C’est pourquoi, l’objectif de ce travail de thèse était d’améliorer notre compréhension de la variabilité intra-spécifique de la résistance à l’embolie chez une espèce cultivée(Helianthus annuus L.) et chez un conifère (Pinus pinaster). Nous avons déterminé la vulnérabilité à l’embolie de quatre variétés de tournesol, présentant des différences significatives de P50 (pression induisant 50% de perte de conductivité hydraulique), allant de -2.67 à -3.22 MPa. Un compromis entre sécurité hydraulique et croissance a été observé mais pas entre la sécurité hydraulique et la capacité de transport de l'eau du xylème. Seuls quelques caractères anatomiques, tels que la densité des vaisseaux et la surface du lumen, présentent une corrélation avec la résistance à l’embolie. Dans un second temps, nous avons phénotypé pour la résistance à l’embolie et la densité du bois 477 génotypes de P. pinaster, issus d’une F2 de pleins-frères correspondant à la 3ème génération consanguine obtenue par auto-fécondation d’un hybride inter-provenance “Corse × Landes. La variabilité de la P50 au sein de l’espèce était extrêmement faible (CVP=5.6%). D’autre part, nous avons mis en évidence l’absence de compromis entre sécurité hydraulique et densité du bois. La part de variance du caractère P50 expliquée par QTLs (PEV)correspondait à 23.6% de la variance phénotypique totale mais aucun QTL commun n’a pu être détecté entre P50 et densité du bois, suggérant qu’au sein de cette famille, la plus forte résistance à l’embolie de certains génotypes n’est pas liée à un bois plus dense. Une analyse multi-caractère du fonctionnement de la feuille et du xylème a été réalisée via l’étude de la dynamique saisonnière de la fluorescence du photosystème II et des traits hydrauliques de la tige, sur une famille de pleins-frères d’un hybride interprovenance “Maroc × Landes” de P. pinaster ; en réponse à une diminution du potentiel hydrique,l’efficience du photosystème II et la conductance stomatique ont tous deux diminué, induisant une décroissance rapide du taux d’assimilation. La résistance à l’embolie du xylème n’a pas montré de relation significative avec les traits foliaires. L’absence de compromis entre ces caractères permet donc d’envisager la sélection génétique de génotypes à la fois efficients et résistants
As a consequence of current global climate change, forest and crop ecosystems are decreasing inproductivity worldwide and are under increased threat of widespread drought-induced mortality due tohydraulic failure caused by xylem embolism. The range of embolism resistance across species has been intensively studied but little attention has been paid to intraspecific variability. This thesis aimed thereforeat improving our understanding of the intraspecific variation in embolism resistance in one crop species(Helianthus annuus L.) and one conifer species (Pinus pinaster). In the first place, vulnerability to embolism was determined across four sunflower accessions with significant variations in P50 (pressure inducing 50% loss of hydraulic conductivity) ranging between -2.67 and -3.22 MPa. A trade-off between hydraulic safety and growth was observed but not between hydraulic safety and efficiency. Only few anatomical traits, such as vessel density and vessel lumen area, were found related to embolism resistance.Secondly, we phenotyped 477 P. pinaster full-sib F2 genotypes corresponding to a three-generation inbred pedigree obtained by the self-pollination of an inter “Corsica × Landes” provenance hybrid, for embolismresistance and wood density. The variability for P50 within species was remarkably low (CVP=5.6%). Wealso found a lack of trade-off between hydraulic safety and wood density. The phenotypic variance explained by QTLs (PEV) detected for P50 accounted for 23.6% of the phenotypic variation but no QTL collocated between P50 and wood density, suggesting that embolism resistant genotypes in this family are not dependent on denser wood. A multi-trait analysis of leaf and xylem functioning was performed through seasonal measurements of photosystem II fluorescence and stem hydraulic traits on a full-sib family of aninter “Morocco × Landes” provenance hybrid of P. pinaster; it revealed that with decreasing water potential, the efficiency of both photosystem II and stomatal conductance decreased which resulted in rapid decrease in assimilation rate. Xylem resistance to embolism was found having no relationship with leaf functioning traits. The absence of trade-off between these traits makes it possible to consider selection for both efficient and resistant genotypes

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Baliarda, Aurélie. "Evaluation de la réponse au stress chez les bactéries lactiques appartenant aux genres Pédiococcus et Tétragénococcus : approches physiologiques et génétiques". Bordeaux 1, 2003. http://www.theses.fr/2003BOR12747.

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L'adaptation aux variations de l'environnement est un phenomene essentiel a la survie et au developpement des bacteries. Cette these a pour objet de comprendre les mecanismes de reponse au stress developpes par pediococcus pentosaceus et tetragenococcus halophila (deux bacteries lactiques employees en tant que ferments dans l'industrie agroalimentaire). La premiere partie de ce travail a consiste a caracteriser la reponse au stress salin chez t. Halophila (caracterisation de l'orf codant une permease a glycine betai͏̈ne ; regulation de deux transporteurs de glycine betai͏̈ne par l'osmolarite exterieure) et a initier cette etude chez p. Pentosaceus (tolerance au sel, spectre de solutes compatibles, equipement en transporteurs d'osmoprotectants). La seconde partie de cette these a ete consacree a l'etude des capacites d'adaptation de p. Pentosaceus a differents types de stress (impacts du stress sur la croissance, la survie et la viabilite, influence d'un pre-stress sur les capacites d'adaptation de la souche, implication potentielle de ses deux plasmides natifs dans la reponse au stress).

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Hazard, Dominique. "Conséquences sur le fonctionnement de l'axe corticotrope d'une sélection génétique divergente sur l'immobilité tonique chez la caille". Tours, 2005. http://www.theses.fr/2005TOUR4015.

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L'activation de l'axe corticotrope est impliquée dans la réponse au stress. Les objectifs de cette étude ont été de caractériser in vivo les conséquences d'une sélection génétique pour des durées d'immbilité tonique longues (LTI : Long Tonic Immobility) ou courtes (STI : Short Tonic Immobility) sur la fonctionnement de l'axe corticotrope chez la caille japonaise. La réponse en corticostérone à un stress de contention est supérieure chez les cailles STI. Les investigations pharmacologiques suggèrent que la variabilité génétique de la réponse de l'axe corticotrope n'est pas due à des différences de fonctionnement surrénalien et hypophysaire. La sélection génétique pour des durées divergentes d'IT a donc probablement affecté différentiellement le fonctionnement de structures centrales impliquées dans les processus psycho-biologiques de la réponse au stress
Activation of the hypothalamic-pituitary-adrenal (HPA) axis and the release of corticosterone (C) in birds in response to frightening stimuli is an adaptive response allowing birds to cope with harmful stimuli. The objectives of the present study were to characterise in vivo the consequences of a genetic selection for long (LTI) or short (STI) duration of tonic immobility (TI) on the HPA axis function in japanese quail. STI quail exhibited higher C levels than LTI quail in response to a restraint stress. Pharmacological investigations suggest that difference in C responses to restraint between the two lines is probably not due to differences in adrenal and pituitary fonction. Therefore, genetic selection for divergent duration of TI has probably affected the function of central structures involved in the mechanisms underlying psycho-biological processes of the stress response

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De, Bont Linda. "Importance de l'homéostasie du NAD dans la productivité et la résistance aux stress chez Arabidospis thaliana". Thesis, Paris 11, 2014. http://www.theses.fr/2014PA112283.

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Le développement et le fonctionnement harmonieux des plantes dépendentde cofacteurscomme le nicotinamide adénine dinucléotide (NAD). Outre ses rôles dansle recyclage rédox,le NAD est aussi impliqué dans des processus de signalisationcellulaire, particulièrementsollicités en situation de stress. Cela fait du NAD l’un desdéterminants majeurs del’homéostasie énergétique des plantes et donc des rendements descultures. Par uneapproche de génétique inverse ciblant la L-aspartate oxydase (AO),première enzyme de lavoie de biosynthèse du NAD, nous avons obtenu des plantes aux teneursconstitutivementaugmentées et diminuées en nucléotides à pyridine. L’étude de cesplantes a permisd’établir que (1) le NAD stimule la croissance, le développement et laproductivité desplantes, (2) coordonne les métabolismes photosynthétique, respiratoireet azoté, et (3)intervient dans les mécanismes de résistance aux stress biotiques etabiotiques. Les travauxcités ci-dessus font l’objet d’une valorisation industrielle
The harmonious development and functioning of plants depend on severalcofactors such asnicotinamide adenine dinucleotide. Besides its roles in redox recycling,the NAD is alsoinvolved in cellular signalling processes, which are central actors instress situations. TheNAD is thus one of the main determinants of plant energy homeostasis,and therefore of cropyield. Through a reverse genetics approach targeting the L-aspartateoxidase (AO) – the firstcommitted enzyme of NAD biosynthesis – plants with constitutive eitherincreased ordecreased levels of pyridine nucleotides have been obtained. A furtherstudy of these plantsenabled to show that the NAD (1) can improve the growth, development andproductivity ofplants, (2) coordinates photosynthetic, respiratory and nitrogenmetabolisms, and (3) actsupon biotic and abiotic stress resistance mechanisms. This research isbeing valuedindustrially

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Amamou, Yahya. "Contribution à l'étude de la croissance et du développement du tournesol (helianthus annuus l.) en conditions normales et de stress. Morphologie et morphogénèse". Doctoral thesis, Universite Libre de Bruxelles, 1993. http://hdl.handle.net/2013/ULB-DIPOT:oai:dipot.ulb.ac.be:2013/212790.

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Deplanque, Dominique. "Cibles pharmacologiques de la résistance à l'ischémie cérébrale et modulation du récepteur nucléaire PPAR-α". Lille 2, 2002. http://www.theses.fr/2002LIL2MT22.

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Andrianasolo, Fety Nambinina. "Modélisation statistique et dynamique de la composition de la graine de tournesol (Helianthus annuus L.) sous l’influence de facteurs agronomiques et environnementaux". Thesis, Toulouse, INPT, 2014. http://www.theses.fr/2014INPT0100/document.

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Pour répondre à la demande mondiale croissante en huile et en protéines, le tournesol apparaît comme une culture très compétitive grâce à la diversification de ses débouchés et son attractivité environnementale et nutritionnelle. Pourtant, les teneurs en huile et protéines sont soumises à des effets génotypiques et environnementaux qui les rendent fluctuantes et difficilement prédictibles. Nous argumentons qu’une meilleure connaissance des effets les plus importants et leurs interactions devrait permettre de mieux prédire ces teneurs. Deux approches de modélisation ont été développées. Dans la première, trois modèles statistiques ont été construits puis comparés à un modèle simple existant. L’approche dynamique est basée sur l’analyse des relations source-puits au champ et en serre (2011 et 2012) pendant le remplissage. Les performances et domaines de validité des deux types de modélisation sont comparés
Considering the growing global demand for oil and protein, sunflower appears as a highly competitive crop, thanks to the diversification of its markets and environmental attractiveness and health. Yet the protein and oil contents are submitted to genotypic and environmental effects that make them fluctuating and hardly predictable. We argue that a better knowledge of most important effects and their interactions should permit to improve prediction. Two modeling approaches are proposed: statistical one, where we compared three types of statistical models with a simple existing one. The dynamic approach is based on source-sink relationships analysis (field and greenhouse experiments in 2011 and 2012) during grain filling. Performances of both modeling types and their validity domain are compared

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Ladjouzi, Rabia. "Analyse des mécanismes de tolérance aux antibiotiques ciblant la paroi chez les entérocoques". Caen, 2013. http://www.theses.fr/2013CAEN2077.

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Les bactéries sont dites tolérantes lorsqu’elles sont capables d’échapper à l’action bactéricide d’un antibiotique. Les entérocoques sont des germes plutôt inoffensifs communément rencontrés dans la flore gastro-intestinale de l’homme. Lors de ces dernières décades, ces germes sont parfois considérés comme pathogènes car ils sont de plus en plus incriminés dans différentes infections nosocomiales chez l’homme. Ces bactéries sont connues pour leur tolérance élevée aux antibiotiques bactéricides. Cependant, les mécanismes moléculaires responsables de cette tolérance n’ont toujours pas été identifiés. Dans ce travail, nous nous sommes intéressés à l’étude de la tolérance des entérocoques aux antibiotiques ciblant leur paroi. La construction de mutants déficients en activité superoxyde dismutase (SOD) a permis de montrer que leur tolérance envers les antibiotiques bactéricides est directement corrélée au niveau d’activité de cette enzyme. La recherche des mécanismes impliqués dans la mort cellulaire induite par la vancomycine ou la pénicilline chez des mutants ΔsodA a révélé que l'action bactéricide de ces antibiotiques dépend d'un métabolisme actif. Dans ce contexte, la bactéricidie s’est avérée plus importante en présence d’hexoses et significativement réduite en les substituant par des pentoses. Cependant, l’assimilation du glycérol, associé à la voie basse de la glycolyse, annihile l'action létale de l'antibiotique permettant ainsi de conclure que cette bactéricidie dépend plutôt de la partie supérieure de cette voie métabolique. Lors de ce travail, nous avons également mis en évidence l'implication du catabolisme de l’arginine dans la tolérance à la vancomycine
Tolerance refers to the phenomenon that bacteria do not significantly die when exposed to bactericidal antibiotics. Enterococci, though most commonly regarded as members of the microbial flora of the intestinal tract, have recently emerged as human pathogens of significant concern. These bacteria are known for their high tolerance to bactericidal drugs but the molecular reasons why they resist killing are not understood. In this study, we focused our interest on the analysis of the pathogenic enterococci tolerance to cell wall active antibiotics. We demonstrated that tolerance of these organisms is directly correlated to the level of superoxide dismutase (SOD) activity. This was proved by the construction of deficient mutants affected in SOD activity. The investigation on the mechanisms implicated in antibiotic-induced cell death in ∆sodA mutants showed that the bactericidal action of penicillin or vancomycin depends on an active metabolism. Furthermore, we showed that the bactericidal action is greater in the presence of hexoses than in the presence of pentoses. Interestingly, the metabolism of glycerol which is linked to the lower part of glycolysis may abolish the lethal action of the antibiotic. Therefore, we concluded that the bactericidal action of these antibiotics is linked to the upper part of glycolysis. In this work, we have also highlighted the involvement of arginine catabolism in tolerance to vancomycin. Finally, the results reported in this study allow a better understanding of the extraordinary tolerance in enterococci

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Lebreton, François. "Facteurs d'opportunisme chez Enterococcus faecium : de la pathogénicité à la résistance aux antibiotiques". Caen, 2011. http://www.theses.fr/2011CAEN3135.

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Enterococcus faecium est un pathogène opportuniste responsable d’infections nosocomiales dans le monde entier. L’émergence de souches résistantes à de nombreux antibiotiques et particulièrement adaptées au milieu hospitalier hâte le besoin de travaux afin d’identifier les facteurs responsables de la transition du commensalisme à l’opportunisme chez E. Faecium. Nous avons caractérisé la résistance à la vancomycine de type VanN chez une souche de E. Faecium isolée d’un patient. Cette résistance transférable s’explique par l’expression constitutive de précurseurs du peptidoglycane modifiés en D-Sérine. Si la résistance aux antibiotiques joue un rôle dans l’opportunisme, nous nous sommes également intéressés à la pathogénèse chez E. Faecium. La caractéristique majeure des souches de E. Faecium réside dans leur faculté à persister et à coloniser massivement leurs hôtes. Ainsi, nous avons décrit un modèle, basé sur les chenilles Galleria mellonella, permettant d’évaluer la persistance de différentes souches de E. Faecium. Enfin, le régulateur transcriptionnel AsrR (antibiotic and stress response regulator) de la famille MarR, a été décrit chez E. Faecium. La délétion du gène codant AsrR et les approches transcriptomiques et phénotypiques ont caractérisé ce dernier comme impliqué dans la perception du stress oxydatif, la résistance à la vancomycine et à l’ampicilline, la pathogénicité ou encore la persistance chez la chenille Galleria. En conclusion, ces travaux, qui associent la description du déterminant de résistance VanN et l’identification de AsrR comme un régulateur majeur de la pathogénicité, permettent une meilleure connaissance des facteurs d’opportunisme chez E. Faecium
Multiple antibiotic resistant isolates of Enterococcus faecium, an opportunistic pathogen, have emerged and spread worldwide. Fundamental studies designed to provide understanding on mechanisms for transforming E. Faecium from its commensal nature into a nosocomial pathogen are lacking. First, we characterized the VanN transferable vancomycin resistance type in an E. Faecium hospital isolates. Presence of peptidoglycan precursors ending in D-serine and D,D peptidase activities in the absence of vancomycin indicated constitutive expression of the resistance. Besides antibiotic resistance, pathogenesis is of interest. Since the most remarkable feature of E. Faecium isolates is their striking capacity to massively colonize healthy carriers and patients, to survive to the host defences and to spread, we described the use of Galleria mellonella insects as a relevant model to assess E. Feacium host-persistence. Finally, based on transcriptomic studies, gene inactivation experiments, phenotypic studies and the Galleria model, we revealed an important role for the MarR family oxidative-sensing regulator AsrR (antibiotic and stress response regulator) in vancomycin and ampicillin antibiotic resistance, stress adaptation and pathogenesis of E. Faecium. This study provides a significant resource, combining the description of the VanN vancomycin resistance determinant and the identification of AsrR as a key regulator modulating opportunistic traits and pathogenesis, and fill a missing gap on understanding the E. Faecium shift from commensal to opportunistic pathogen in colonized host

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Costa, Juslene Aparecida Oliveira da. "Avaliação da Atividade Protetora Gástrica do Extrato Hidroalcoólico da Semente de Girassol". Universidade Jose do Rosario Vellano, 2009. http://tede2.unifenas.br:8080/jspui/handle/jspui/82.

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Made available in DSpace on 2016-05-02T13:54:48Z (GMT). No. of bitstreams: 1 JusleneAparecidaOliveiraCosta-dissertacao.pdf: 896769 bytes, checksum: 1744062ba6c85af80f07a70043a38f54 (MD5) Previous issue date: 2009-10-09
Helianthus annus is a plant known as "sunflower". The use of plants as medicine for human use dates back to the old age. The hydroalcoholic extract of sunflower seed (HESS) has been indiscriminately used for gastric lesions, without scientific support to validate their action. This study assessed quantitatively and qualitatively the probable gastric protection of HESS in stress, and in the use of ethanol and indomethacin; checked the acidity (pH) through the gastric pylorus ligation (gastric residue, either pure or added with water); and compared differences in pH values in both techniques. A total of 120 rats (5 in each group) of the species Rattus norvegicus albinus, weighing 150-230g,were divided into 24 groups, which received the following treatments: HESS: 250mg/kg, 500mg/kg, 1000mg/kg and 2000mg / kg; ethanol; cimetidine; indomethacin; water; cimetidine and ethanol; cimetidine and endomethacin; pylorus ligation and water; pylorus ligation and cimeditine; HESS and ethanol; HESS and indomethacin; pylorus ligation and HESS. The results were submitted to analysis of variance (ANOVA) followed by Tukey test for evaluation of gastric lesions, and Kruskal-Wallis test followed by Dunn, to evaluate the gastric pH, with a statistically significance at p <0.05. This work was approved by the Ethics Committee of the Universidade José do Rosário Vellano, with protocol no. 04 A / 2009. The results showed that HESS 250 mg/kg and 1000mg/kg suggests probable gastric protection in stress. In the ethanol-induced gastric ulcer model, the doses of 250 and 1000 mg / kg showed probable gastric protection; the HESS 250 mg / kg + indomethacin, the dose of 250 mg / kg suggests gastric protection. Regarding the pH, the gastric residue, when pure, is more acidic than water, thus indicating that the model of addition of 3 ml of water is increasing the pH, thus proving that the pure pH model is more appropriate and more practical. Therefore, the data obtained in this study show that HESS probably provides gastric protection at certain doses. So, the results show that the sunflower,should be further studied for the development of phytomedicines or new chemicals with antiulcerogenic activity.
Helianthus annus é uma planta conhecida como girassol . A utilização das plantas, como medicamento para o tratamento das enfermidades que acometem a espécie humana remonta à idade antiga. O uso do extrato hidroalcoólico de semente de girassol (EHSG) para lesões gástricas é utilizado de forma indiscriminada, sem base em estudos científicos que tenham validado sua ação. O presente estudo tem como objetivo comparar quantitativamente e qualitativamente a provável proteção gástrica do EHSG com a cimetidina, frente ao estresse, ao uso da indometacina e do etanol e o pH gástrico por meio da ligadura pilórica (resíduo gástrico puro e com adição de água). Foram estudados 120 ratos (5 em cada grupo) da espécie Rattus norvegicus albinus, com peso de 150-230g, divididos em 24 grupos distintos, os quais receberam o EHSG nas dosagens de 250mg/kg, 500mg/kg, 1000mg/kg e 2000mg/kg, etanol 0,5ml, cimetidina 150mg/ml, indometacina 20mg/Kg e água 1ml. Estes grupos foram submetidos à associação da cimetidina com etanol e indometacina, às 4 dosagens do EHSG com etanol 70% e indometacina, aos grupos submetidos à ligadura pilórica e administração de água, cimetidina e às 4 dosagens de EHSG. As análises estatísticas dos resultados foram realizadas por meio de análise de variância (ANOVA), seguidas pelo teste de Tukey, para avaliação das lesões no estômago, e Kruskal-Wallis, seguido pelo teste Dunn, para avaliação do pH do estômago, utilizando diferença estatisticamente significante para p<0,05. O presente trabalho foi encaminhado e aprovado pelo Comitê de Ética em Pesquisa da Universidade José do Rosário Vellano, com o protocolo 04 A / 2009. Os resultados do estudo mostraram que o EHSG nas dosagens 250 e 1000mg/kg sugerem proteção contra as lesões gástricas no estresse. No modelo de indução de úlcera gástrica por etanol, as dosagens de 250 e 1000 mg/kg apresentaram provável proteção gástrica; no grupo utilizando EHSG 250 mg/kg + indometacina, a dosagem de 250 mg/kg sugere proteção gástrica. Em relação ao valor de pH, o resíduo gástrico, quando verificado puro, mostrou-se mais ácido que pelo modelo da adição de água, significando que este último aumentou o pH, verificando assim que o modelo do resíduo gástrico puro é mais indicado e mais prático. Portanto, os resultados obtidos no presente estudo apontam provável efeito protetor gástrico do EHSG em determinadas doses. Assim, pode-se concluir que a planta em questão constitui interessante alvo de estudo, visando ao desenvolvimento de fitomedicamentos ou à busca de novas entidades químicas com ação antiulcerogênica.

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Roche, Jane. "Composition de la graine de tournesol (Helianthus annuus L.) sous l'effet conjugué des contraintes agri-environnementales et des potentiels variétaux". Phd thesis, Toulouse, INPT, 2005. http://oatao.univ-toulouse.fr/7411/1/roche.pdf.

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Les graines de tournesol sont une source de matières premières recherchées par l'industrie pour l'alimentation humaine et animale et pour des applications non alimentaires. Toutefois, la composition des graines de tournesol est largement influencée par les facteurs génétiques et environnementaux. Notre démarche vise à caractériser les modes d'élaboration de constituants de la graine utiles pour les transformations industrielles par l'adaptation des conduites culturales et par le choix de génotypes. Par l'utilisation de l'expérimentation pluriannuelle de plein champ et de quelques génotypes présentant des caractéristiques intéressantes (oléiques ou non oléiques et/ou tolérants à la sécheresse), la variabilité des teneurs en composés de la graine est étudiée selon les conditions agrienvironnementales (date de semis, régime hydrique, séquences climatiques). Elle révèle le rôle déterminant de l'élévation de température ou de la contrainte hydrique survenant après floraison sur le déplacement de l'équilibre huile/protéines vers la fraction protéique. Il apparaît aussi une forte corrélation entre la teneur en acides gras insaturés à maturité (acides oléique et linoléique) et la température. Sous stress hydrique, la teneur en acide oléique chute tandis que la teneur des autres acides gras et celle des phytostérols sont renforcées. L'analyse de la dynamique d'accumulation des constituants en réponse aux contraintes appliquées permet d'identifier deux phases dans l'accumulation de l'acide oléique. L'accumulation des phytostérols dans l'huile est maximale en début de maturation des graines et sous l'effet des forts déficits hydriques. Pour caractériser les génotypes utilisés, il a été choisi de déterminer le niveau d'expression des gènes du métabolisme de base du tournesol sur une puce à ADN du tournesol (Génoplante BAP ENSAT). En réponse à une forte contrainte hydrique, ces gènes sont exprimés ou réprimés selon les conditions de stress hydrique. L'approche intégrative alliant caractérisations agro-physiologique, lipochimique et génomique permet de progresser dans la connaissance des interactions génotype*environnement pour une production de qualité, et, aussi de dégager des éléments de gestion de la culture de tournesol susceptibles d'orienter les synthèses vers les constituants d'intérêt industriel.

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Isingrini, Elsa. "Modélisation de l'impact de la dépression sur le système cardiovasculaires : utilisation du modèle de stress chronique imprédictible chez la souris". Thesis, Tours, 2010. http://www.theses.fr/2010TOUR4033/document.

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La dépression est considérée comme un facteur de risque capable de prédire l‟apparition de maladies cardiovasculaires. L'objectif de ce travail est de développer un modèle animal capable de reproduire les altérations vasculaires et la résistance aux traitements observés chez les patients dépressifs qui présentent des risques cardiovasculaires. La formation d'athérosclérose et la fonction endothéliale sont évaluées chez des souris exposées au stress chronique imprédictible (UCMS) qui constitue un modèle valide de dépression et les effets comportementaux d‟un traitement antidépresseur sont évalués chez des souris UCMS recevant un régime hyper lipidique. Nos résultats montrent que l‟UCMS induit un état de type dépressif et un dysfonctionnement endothélial qui n‟est pas suffisant pour induire de l‟athérosclérose. Le régime hyper lipidique abolit les effets antidépresseurs de la fluoxétine. Ces résultats suggèrent que ce modèle reproduit les altérations physiologiques mais non morphologique aussi bien que la résistance aux traitements des patients dépressifs présentant des facteurs de risques cardiovasculaires
Epidemiologic studies have demonstrated that depressive symptoms can predict cardiovascular disease in healthy patients. The purpose of this study was to develop an animal model able to reproduce the vascular alterations and the treatment resistance observed in depressed subjects who develop vascular disease. Atherosclerotic plaque formation and endothelial dysfunction were assessed in mice exposed to the Unpredictable Chronic Mild Stress (UCMS) that constitute a reliable animal model of depression and the reversal effect of antidepressant was assessed in UCMS mice fed a high fat diet. Our results show that high fat diet regimen prevented the reversal effect of chronic fluoxetine treatment on UCMS-induced depressive-like behaviour. Moreover, UCMS-induced endothelial dysfunction was not associated with atherosclerotic plaque formation. These findings suggest that this model can reproduce the physiological but not the morphological vascular alterations observed in depressed patients who develop vascular disease as well as the reported treatment resistance in depressed patients also suffering from cardiovascular risk factor

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Royet, Kévin. "La réponse au stress chez les bactéries : réponse au stress métallique chez Pseudomonas putida et au stress rencontré en cours d’infection de plante chez le phytopathogène Dickeya dadantii". Thesis, Lyon, 2018. http://www.theses.fr/2018LYSE1206/document.

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Les bactéries environnementales font face à de très nombreux stress dans leur milieu devie. Ces dernières doivent s’acclimater rapidement pour faire face à des variations detempérature, des changements d’osmolarité, des changements de pH ou encore descarences nutritives afin de survivre et de prospérer dans leur environnement naturel. Cetravail de thèse s’inscrit dans l’étude de la réponse aux stress chez les bactériesenvironnementales en prenant l’exemple du stress engendré par les métaux chez labactérie modèle Pseudomonas putida et du stress rencontré en cours d’infection deplante chez le phytopathogène Dickeya dadantii. La présence d’un excès d’ionsmétalliques ainsi que les défenses d’une plante sur un phytopathogène entrainent toutdeux un stress oxydatif et peut provoquer une altération membranaire ainsi queprotéique. Ces stress, à première vue éloignés, pourraient ainsi induire des mécanismesde réponses similaires chez les bactéries. La plupart des études de résistance aux stresschez les bactéries portent sur l’étude de gènes sur ou sous exprimés et peuvent alorsmanquer des gènes importants pour la réponse à un stress donné dont l’expressionreste inchangée. Afin d’identifier de nouveaux facteurs de résistance aux stressmétalliques chez P. putida ainsi que de nouveaux facteurs de résistance/virulence chezle phytopathogène D. dadantii, un crible Tn-seq (Transposon-Sequencing) a été réalisé àl’aide de banques de mutants très denses. Les deux cribles ont permis de mettre enévidence le rôle majeur de régulateurs de transcription ainsi que l’importance desmécanismes d’efflux dans la réponse à un stress. Les deux cribles ont aussi mis enévidence l’importance des voies de biosynthèses en acides aminées et acides nucléiques.Enfin, de nombreux gènes à fonction inconnue participent à la survie des deux bactériesen condition de stress. Les résultats obtenus pourraient permettre de développer denouveaux antimicrobiens chez D. dadantii. Les mécanismes de résistance aux métaux etaux antibiotiques peuvent être similaires. Nos travaux améliorent la compréhension desmécanismes de résistance aux métaux et pourraient ainsi permettre de trouver denouvelles molécules à activité antimicrobienne
Environmental bacteria have to deal with a number of stresses in their livingenvironment. The bacteria have to adapt quickly to changes in temperature, osmolarity,pH changes or nutrient deficiencies in order to survive and thrive in their naturalenvironment. This thesis work is related to the study of stress response inenvironmental bacteria by taking the example of stress caused by metals in thebacterium Pseudomonas putida model and stress encountered during plant infection inthe phytopathogen Dickeya dadantii. The presence of an excess of metal ions as well asthe defences of a plant on a phytopathogen both cause oxidative stress and can causemembrane and protein alteration. These stresses, at first sight distant, could thus inducesimilar response mechanisms in bacteria. Most stress resistance studies in bacteriafocus on the study of over- or under-expressed genes and may then lack genesimportant for the response to a given stress whose expression remains unchanged. Inorder to identify new metal stress resistance genes in P. putida and newresistance/virulence factors in D. dadantii phytopathogen, a Tn-seq (Transposon-Sequencing) screen was performed using very dense mutant banks. Both screenshighlighted the major role of transcription regulators as well as the importance of effluxmechanisms in the response to stress. Both screens also highlighted the importance ofamino acid and nucleic acid biosynthesis pathways. Finally, many genes with unknownfunction participate in the survival of both bacteria in stress conditions. The resultsobtained could lead to the development of new antimicrobials in D. dadantii. Themechanisms of resistance to metals and antibiotics may be similar. Our work isimproving our understanding of metal resistance mechanisms and could lead to newmolecules with antimicrobial activity

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Girardot, Fabrice. "Recherche et analyse de facteurs génétiques impliqués dans la résistance au stress et le contrôle de la longévité chez Drosophila melanogaster". Paris 6, 2002. http://www.theses.fr/2002PA066525.

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Narainsamy, Kinsley. "Biologie systémique de la résistance au stress oxydant métabolique : rôles du glutathion, du méthylglyoxal et des glyoxalases". Thesis, Paris 11, 2012. http://www.theses.fr/2012PA112099.

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Resumen

Apparues il y a environ trois milliards d'années, les cyanobactéries ont façonné notre planète, en produisant l’atmosphère oxygénique. De nos jours, les cyanobactéries sont les organismes photosynthétiques les plus abondants dans notre environnement, elles assurent environ 30 à 40% de la production d'O2, et de la consommation du CO2 par les océans et constituent le premier maillon de la chaîne alimentaire. A part la photosynthèse, leur métabolisme est encore très mal connu. Ainsi, pour mieux comprendre le métabolisme cyanobactérien et proposer des stratégies de reprogrammation, il est primordial de développer des méthodes analytiques permettant l’étude globale de leur métabolisme en réponse à des variations de conditions environnementales et de stress. La cyanobactérie modèle Synechocystis PCC6803 convient parfaitement à ce type d’analyse. En effet, Synechocystis est un unicellulaire, hétérotrophe facultative capable de se développer en eau douce ou saumâtre et à un pH alcalin. Synechocystis possède un petit génome d’environ 4.0 Mb entièrement séquencé et facilement manipulable grâce aux outils développés au laboratoire. Son génome prédit l'existence d'un métabolisme carboné complexe mais encore peu étudié. Mon travail de thèse est centré sur cette analyse par la combinaison de deux approches, la génomique fonctionnelle et la métabolomique. Durant ma thèse en collaboration avec le LEMM dirigé par Christophe Junot iBiTec-S/SPI, j’ai développé un protocole d’extraction des métabolites de Synechocystis, ainsi qu’une méthode d’analyse métabolomique par couplage de la chromatographie liquide à la spectrométrie de masse LTQ-Orbitrap à haute résolution. L’application de cette nouvelle méthode analytique m’a permis d’étudier l’influence de la lumière et du glucose sur le métabolisme de Synechocystis. Ainsi, j’ai montré que Synechocystis cultivée en présence du glucose reprogramme fortement son métabolisme. Parmi les résultats très intéressants, j’ai montré que le glucose engendre un stress oxydant. Chez tous les organismes, une forte activité du métabolisme carboné entraîne la production de métabolites toxiques tels que le méthyglyoxal (MG). Le MG modifie irréversiblement de nombreuses bio-molécules. Dans le cadre de ma thèse, j’ai commencé à m’intéresser à l'effet du MG sur la physiologie et le métabolisme de Synechocystis. J'ai construit 25 mutants KO pour les gènes de la glycolyse et du métabolisme du glycérol permettant de moduler la concentration intracellulaire de MG et également les gènes impliqués dans les voies de détoxication du MG dont celle dépendante de la synthèse du GSH (la voie des glyoxalases). J’ai pu montrer que les gènes responsables de la synthèse du GSH sont essentiels à la viabilité cellulaire. Je suis parvenu toutefois à obtenir un mutant déplété de gshB et ne produisant plus de GSH à un niveau détectable. En faisant une analyse métabolomique approfondie, j’ai mis en évidence pour la première fois que Synechocystis était capable produire deux tripeptides non-thiolés analogues structuraux du GSH; l’acide ophthalmique et l’acide norophthalmique identifiés jusqu’à présent uniquement chez les mammifères. La comparaison des métabolomes de culture de souches sauvage, ou dépletées en gshA, gshB ou ggt, a permis de montré que ces analogues sont synthétisés par les mêmes enzymes que le GSH à savoir GshA et GshB. Par ailleurs, une autre molécule anti-oxydante dont la synthèse est connue chez quelques champignons et qui s’accumule chez l’Homme par l’apport alimentaire a également été observée
Cyanobacteria are fascinating microorganisms. They are among the oldest life forms, regarded as the progenitors of the oxygenic photosynthesis and plant chloroplast. Furthermore, cyanobacteria have evolved as the largest and most diverse groups of bacteria in colonizing most marine and fresh waters, as well as soils. An important reason for the hardness of cyanobacteria is their successful combination of effective metabolic pathways driven by their efficient photosynthesis that uses nature's most abundant resources, solar energy, water and CO2, to produce a large part of the Planet's oxygenic atmosphere and organic assimilates for the food chain. Hence, cyanobacteria are receiving a growing attention because of their potential for the carbon-neutral production of biofuels and bioplastics. To better understand cyanobacteria and turn their biotechnological potentials into an industrial reality, we need to develop robust protocols for global analysis of their metabolism and its responses to environmental stresses. The model cyanobacterium Synechocystis PCC6803 is well suited for this purpose. Synechocystis is a basic organism, i.e. unicellular, which grows well (i) in fresh- and marine-waters; (ii) in the presence of glucose that can compensate for the absence of light; and (iii) at high pH that prevents microbial contaminations. Furthermore, Synechocystis harbors a small sequenced genome (about 4.0 Mb), which can be easily manipulated. In the present work, we developed a robust protocol for metabolome analyses of Synechocystis, using liquid chromatography (LC) for metabolite separation, coupled to a LTQ-Orbitrap mass spectrometer that provides high sensitivity and resolution, accurate mass measurements, and structural informations with MS/MS or sequential MSn experiments that facilitate metabolite identification. Consequently, we applied the PFPP-LC/MS method to analyze the metabolome of Synechocystis growing under various conditions of light and glucose, which strongly influence cell growth. We found that glucose increases glucose storage and catabolism, while it decreases the Calvin-Benson cycle that consumes photosynthetic electrons for CO2 assimilation. Depending on light and glucose availabilities, this global metabolic reprogramming can generate an oxidative stress, likely through the recombination of the glucose-spared electrons with the photosynthetic oxygen thereby producing toxic reactive oxygen species. Furthermore, we studied the metabolism of an endogenous toxic the méthylglyoxal and its main catabolic pathway going through the glyoxalases system glutathione dependent

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Ferreira, David. "Résistance au stress lors de la phase de latence en fermentation œnologique et développement de levures optimisées". Thesis, Montpellier, SupAgro, 2017. http://www.theses.fr/2017NSAM0051.

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Resumen

Résumé : Saccharomyces cerevisiae, utilisée depuis des millénaires pour la fermentation du vin du fait de son endurance et de ses qualités inégalables, est de nos jours largement utilisée pour inoculer les mouts de raisin. Néanmoins, lors de l'inoculation, les souches oenologiques doivent faire face à des stress spécifiques qui peuvent compromettre le début de la fermentation. L’objectif de ce travail est d'élucider les bases métaboliques et moléculaires de la résistance multi-stress pendant la phase de latence en conditions oenologiques. Nous avons tout d'abord caractérisé un ensemble de levures oenologiques en mettant l'accent sur des facteurs de stress caractéristiques des vins rouges et des vins blancs. La température et le stress osmotique affectent fortement cette phase pour toutes les souches, alors que le SO2, les lipides et la thiamine ont un effet souche-dépendant. Ces données ont servi de base à deux approches parallèles. Une approche d'évolution expérimentale a permis, en appliquant des pressions sélectives caractéristiques de la phase de latence, de sélectionner des souches évoluées présentant une phase de latence plus courte. Plusieurs mutations de novo potentiellement impliquées dans le phénotype évolué ont été identifiées par séquençage de leur génome. En parallèle, une approche QTL combinant des croisements inter-souches, une étape de propagation industrielle et séchage des descendants, et la sélection de cellules bourgeonnantes par FACS a été développée. Ces deux stratégies ont permis d’identifier plusieurs variants alléliques impliqués dans la paroi cellulaire, le transport du glucose, le cycle cellulaire et la résistance au stress, jouant un rôle potentiellement important pendant la phase de latence. L’ensemble de ces résultats apporte de nouvelles connaissances sur la diversité et les bases génétiques de l'adaptation des levures à la phase de latence oenologique et offre un cadre d’amélioration des propriétés des souches. De plus, nous avons montré que K. marxianus a un potentiel pour des cultures mixtes et des contributions aromatiques positives en conditions oenologiques, ouvrant de nouvelles possibilités pour des études ultérieures.Titre : Résistance au stress lors de la phase de latence en fermentation oenologique et développement de levures optimiséesMots clés : Fermentation oenologique, levure, phase de latence, résistance multi-stress, QTL, évolution adaptative, K. marxianus
Abstract: Saccharomyces cerevisiae has been used for millennia to perform wine fermentation due to its endurance and unmatched qualities and is nowadays widely used as wine yeast starter. Nevertheless, at the moment of inoculation, wine yeasts must cope with specific stress factors that can compromise the fermentation start. The objective of this work was to elucidate the metabolic and molecular bases of multi-stress resistance during wine fermentation lag phase. We first characterized a set of commercialized wine yeast strains by focusing on stress factors typically found at this stage in red wines and in white wines. Temperature and osmotic stress had a drastic impact in lag phase for all strains whereas SO2, low lipids and thiamine had a more strain dependent effect. Based on these data, we developed two parallel approaches. Using an evolutionary engineering approach where selective pressures typically present in lag phase were applied, we obtained evolved strains with a shorter lag phase in winemaking conditions. Whole genome sequencing allowed to identify several de novo mutations potentially involved in the evolved phenotype. In parallel, a QTL mapping approach was conducted, combining an intercross strategy, industrial propagation and drying of the progeny populations and selection of the first budding cells by FACS. Both strategies allowed the identification of several allelic variants involved in cell wall, glucose transport, cell cycle and stress resistance, as important in lag phase phenotype. Overall, these results provide a deeper knowledge of the diversity and the genetic bases of yeast adaptation to wine fermentation lag phase and a framework for improving yeast lag phase. Additionally, we showed that K. marxianus has potential for mixed cultures and positive aromatic contributions under oenological conditions, opening new possibilities for further studies.Title: Stress resistance during the lag phase of wine fermentation and development of optimized yeastsKeywords: Wine fermentation, yeast, lag phase, multi-stress resistance, QTL, adaptive evolution, K. marxianus

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Tesis sobre el tema "Helianthus – Résistance au stress"

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