Dissertations / Theses on the topic 'Photodermatosis'

Polymorphic light eruption (PLE) is the most common photodermatosis, affecting ~17% of the population. PLE is a delayed-type hypersensitivity response to an antigen induced by solar ultra-violet radiation (UVR). Its effects vary between patients, but the main symptom is a non-scarring, red papular rash in areas exposed to UVR. An effective therapy is low dose ultra-violet B (NBUVB) phototherapy. It is thought that NBUVB phototherapy desensitises the skin to further UVR exposure, but the mechanism by which this happens is unknown. Current immune based studies have been unable to clarify a mechanism as to how PLE arises. However, research in other skin diseases, such as psoriasis and atopic dermatitis, has shown that the barrier function of the skin is compromised by these disorders. Furthermore, research in lesional PLE skin showed an increase in barrier permeability of the skin. Recent research has specifically linked claudin proteins of tight junctions to the barrier dysfunction. Therefore, this study used quantitative immunofluorescent staining to measure tight junction (TJ) proteins and other barrier proteins of interest. Barrier function was also measured by transepidermal water loss (TEWL); a tracer dye penetration assay was used to measure TJ barrier function specifically. All measurements were made in non-lesional PLE skin, as compared to skin from healthy human volunteers. In photoprotected PLE skin the TJ protein claudin-1 was significantly reduced compared to healthy skin. The use of a tracer dye highlighted there was a reduction in TJ barrier function in PLE skin compared to healthy individuals. PLE and healthy skin were then exposed to ultra-violet B (UVB) and 24h later TJ proteins and TJ barrier function were measured. There was no change to claudin-1 after UVB exposure in PLE skin, but claudin-7 was reduced and claudin-12 increased. In contrast, in UVB-irradiated skin in normal controls after UVB exposure claudin-7 and claudin-12 were both increased, whilst claudin-1 was reduced. In PLE patients there was no further change to TJ barrier function, however, in normal controls, skin TJ barrier function was reduced post UVB. Both in healthy and PLE skin TEWL was unchanged before and after UVB exposure. Lastly TJ proteins were investigated after NBUVB in PLE patients. There was a further reduction in claudin-1 in PLE patients as well as a reduction in the TJ protein occludin, however the stratum corneum was significantly thickened. It could be suggested that this is a compensatory measure for the reduction seen in TJ barrier proteins, however further studies are needed to understand this. These data show significant differences in the TJ skin barrier in patients with PLE as compared to healthy human volunteers before and after UVB exposure. Furthermore, in PLE skin there is a significant change to the epidermis after NBUVB phototherapy. These data demonstrate that TJ protein expression and function is altered in PLE skin and may contribute to aetiology of the disorder, however the role of TJ barrier in aetiology is yet to be firmly established.

Le cancer demeure aujourd'hui la principale peur des français. Le cancer est donc aujourd'hui un problème majeur de santé publique. Malheureusement, les traitements actuels restent encore trop souvent impuissants ou trop lourds par rapport au produit national brut de nombreux pays. L'utilisation de la photochimiothérapie ou Photodynamic therapy (PDT) dans le traitement des tumeurs malignes suscite actuellement de grands espoirs. Cette méthode physico-chimique est basée sur l'action combinée d'un médicament non toxique injecté par voie générale au patient et de la lumière visible délivrée localement au niveau de la tumeur. Le rayonnement va activer la substance sensible fixée préférentiellement sur les cellules cancéreuses et provoquer la mort des cellules tumorales en libérant des espèces radicalaires toxiques. Cependant, l'utilisation de ces photosensibilisants pose un problème de photosensibilité cutanée pouvant durer plusieurs mois, nécessitant de la part du patient une attention particulière vis-à-vis de l'exposition à la lumière solaire. Au cours de cette thèse nous avons réalisé l'évaluation préclinique d'une diphénylchlorine (SIM03) comparée à une molécule de référence en photochimiothérapie la meta-tétrahydroxyphényle chlorine (rn- THPC) et à une autre diphénylchlorine, le SIM01. SIM03 est porteuse de deux phényles au lieu de quatre sur une chlorine, à la différence du SIM01 ces phényles ne possèdent chacun qu'une liaison OH au lieu de deux. L'objectif de ce travail était d'acquérir l'argumentaire préclinique spécifique, à partir de l'analyse de SIM03, pour la définition d'un photosensibilisant ayant une pharmacocinétique rapide. L'étude pharmacocinétique in vitro-a. Permis de mettre en évidence une pharmacocinétique plus rapide de SIM03 comparée aux deux autres photosensibilisants (m-THPC et SIM01) dans les mêmes conditions. En effet SIM03 est fortement présent dans les cellules dès 1 h d'incubation où il atteint son niveau maximal. In vivo, en revanche vingt-quatre heures après injection, SIM03 décroît rapidement dans tous les tissus, pour atteindre un niveau proche de celui obtenu avec. Les témoins après 336 h. Cependant, le SIM01 possède une propriété importante par rapport au m-THPC et au SIM03 puisqu'il n'est plus détectable au niveau de la peau 144 h après injection (donnée importante en terme de photosensibilité cutanée). Une étude d'élimination, de cinétique et de biodistribution en HPLC et en fluorescence est nécessaire pour vérifier la présence potentielle de produits métaboliques pour le SIM03 et le SIM01. En HPLC, nous détectons pour le SIM01 un nouveau composé présent dans quelques tissus (foie, vésicule biliaire et selles), qui pourrait être un métabolite du SIM01, L'apparition d'un tel pic avec le SIM03 n'a pu être vérifiée pour les concentrations testées quel que soit l'organe. Concernant la cinétique de nos molécules, les observations en HPLC et la détection en fluorescence in vivo donnent des résultats comparables. Les profils cinétiques du SIM01 sont soit comparables soit plus rapides que ceux du SIM03, et le SIM01 est en général beaucoup plus rapidement éliminé que le SIM03 au niveau du foie, des selles, des reins et de là vessie. Les profils cinétiques sont similaires, à l'exception de la rate. Les deux techniques utilisées devraient être considérées comme complémentaires plutôt qu'exclusives. En ce qui concerne le maximum d'efficacité en terme de réduction de tumeur après traitement pour le SIM03, celui-ci est obtenu pour un délai compris entre 3 h et 12 h entre l'injection et l'irradiation, selon l'intensité d'irradiation. Sa forte absorption dans le rouge prédispose cette molécule à un large champ d'indications photochimiothérapiques. Le SIM03 absorbe dans l'UV et le visible avec un maximum d'absorption à 650 nm et une fluorescence à 650 nm. C'est un agent photosensible très efficace avec un mode d'action comparable à celui de m-THPC et du SIM01 mais avec une pharmacocinétique plus rapide que m-THPC et nettement moins favorable que SIM01. Son efficacité tant sur nos modèles in vitro qu'in vivo fait de ce produit un photosensibilisant intéressant. Par ailleurs, notre travail a permis de compléter l'étude préclinique du SIM01, un agent photosensible très prometteur pour la PDT.

Nous nous sommes intéressés à la préparation et l'étude physico-chimique et thérapeutique de nouveaux dérivés de l'acridine. Dans un premier temps, 50 nouvelles molécules issues de la substitution d'aminoacridines ont été synthétisées. L'aspect physico-chimique des acridines a été étudié et nous avons réalisé une étude de spectrométrie de masse corrélée par plusieurs calculs théoriques sur des mono-aminoacridines acylées pour valider les différences de fragmentation observées sur chaque isomère préparé. Nous avons également préparé et caractérisé une nouvelle série de récepteurs bis-amino acridiniques dans le but d'obtenir des molécules complexantes originales. La cytotoxicité photo-induite et l’activité mutagène d’une série de ces composés ont ensuite été évaluées et certains résultats se sont montrés très encourageants. Enfin, nous avons élargi notre étude des hétérocycles par la synthèse de composés analogues du Ragaglitazar, molécule connue pour son activité antidiabétique (type II)
We were interested in the preparation and physico-chemical and therapeutic study of new acridine derivatives. First of all, 50 new molecules were synthetized by acridine substitution. Physicochemical studies of these compounds were realized using mass spectrometry technique, correlated by several theoretical calculations on acylated mono-aminoacridines in order to validate the fragmentation process observed on every isolated isomer. Moreover, we prepared and characterized a new series of bis-aminoacridinics receptors with the aim to led to original complexing molecules. Then, biological studies of photo-cytotoxicity and clastogenic activity of these molecules were realized, leading to very encouraging results. Finally, we enlarged these heterocycles studies by the synthesis of new analogues of ragaglitazar, known molecule for its antidiabetic activity (type II)

La protoporphyrie érythropoïétique (PPE) est une maladie métabolique héréditaire rare résultant d’un déficit en ferrochélatase (FECH), dernière enzyme de la voie de biosynthèse de l’hème. Ce déficit entraîne l’accumulation anormale de protoporphyrine IX (PP) libre, produit phototoxique déclenchant chez le patient une photodermatose algique et rarement des incidents hépatiques graves. Le mode de transmission original de cette maladie repose sur la cotransmission d’une mutation FECH délétère et de l’allèle FECH hypomorphe IVS3-48C, présent dans la population générale. Quatre familles atypiques sans atteinte FECH ont été identifiées, suggérant l’existence d’un variant de PPE. Les objectifs de cette thèse ont donc été d’affiner la description clinique du phénotype de ces patients, d’identifier l’anomalie moléculaire et de comprendre le mécanisme physiopathologique responsable de l’accumulation de PP. Cette thèse a permis : -1) d’identifier des mutations activatrices de l’acide δ-aminolévulinique synthase isoforme érythroïde spécifique (ALAS2), responsables d’une surproduction d’acide δ-aminolévulinique (ALA). La FECH, bien que fonctionnelle, devient limitante, entraînant l’accumulation de PP libre et PP complexée au zinc. Les mutations responsables de protoporphyrie érythropoïétique dominante liée à l’X (XLDPP) sont limitées à un domaine défini du domaine C-terminal de l’ALAS2 causant sa délétion ou son remplacement, ce qui permet une libération plus rapide de l’ALA. - 2) de démontrer l’existence d’un troisième variant de PPE/XLDPP. Une analyse de liaison pan génomique couplée à un séquençage exomique du cas index a permis de restreindre la liste des gènes candidats

La dermatite actinique chronique, ou photosensibilité chronique, est une photodermatose observée chez des patients présentant souvent un long passé d'allergie aux lactones sesquiterpéniques. Ces substances naturelles chirales peuvent avoir des structures très différentes. Elles ont en commun la présence d'une lactone à cinq chaînons, majoritairement un motif a-méthylène-?-butyrolactone. Reconnues depuis longtemps pour leur allergénicité, leur aptitude à photoréagir avec les biomolécules a été peu étudiée. Notre objectif était donc de déterminer une éventuelle photoréactivité des lactones sesquiterpéniques. L'ADN semblant être atteint dans la photosensibilité chronique, nous avons utilisé des modèles capables de représenter l'ensemble des lactones sesquiterpéniques, d'une part, et un modèle représentant l'ADN, d'autre part. Ainsi, nous avons synthétisé les 4 stéréomères d'une méthylène hexahydrobenzufuranone. Deux des modèles énantiomères ont une jonction de cycle cis. Les deux autres modèles ont une jonction de cycle trans, et ont été préparés à partir d'un intermédiaire optiquement pur obtenu lors de la synthèse des modèles à jonction de cycle cis. Notre approche divergente permet d'obtenir les quatre modèles avec la même pureté optique élevée. Nous avons ensuite étudié la photoréactivité des quatre modèles avec la thymidine, servant de modèle de l'ADN. Chacun des modèles présente une photoréactivité importante dans les conditions utilisées, formant entre 5 et 6 photoadduits pour chaque modèle, sur 8 théoriquement possibles. Globalement, 21 photoadduits ont été isolés par HPLC et entièrement caractérisés par RMN bidimensionnelle
Chronic actinic dermatitis is a chronic photosensitivity often affecting patients suffering from allergic contact dermatitis to sesquiterpene lactones. The a-methylene-?-butyrolactone ring is the common moiety of these chiral natural products, which can have a wide structural diversity. Although it has been identified as the main function responsible for allergic dermatitis, its photoreactivity towards biomolecules has been poorly studied. Our goal was therefore to determine a potential photoreactivity of the sesquiterpene lactones. Because DNA seems to be involved in the chronic photosensitivity, we studied the photoreactivity of lactone models towards thymidine, which was used as a DNA model. Thus, four stereomers of a methylene hexahydrobenzofuranone were synthesized, two cis-enantiomers and two trans-enantiomers. The trans targets were obtained from enantiomeric intermediates of the cis targets. This divergent approach allowed the preparation of the four stereomers with an equally high optical purity. The photoreactivity of each model towards thymidine gives several photoadducts, attesting for the high photoreactivity of the a-methylene-?-butyrolactone ring. Between 5 to 6 photoadducts were formed for each model among the 8 theoretically possible. Overall, twenty-one photoproducts were isolated with preparative reversed-phase HPLC and identified by NMR bidimensional techniques

La photochimiothérapie (PDT), est un traitement des cancers associant un photosensibilisant non toxique et la lumière d'un laser activant le médicament dans le tissu tumoral. La majorité des photosensibilisants dérive d'un noyau tétrapyrrole. Identifier de nouvelles structures photoréactives peut permettre de diminuer les temps d'hospitalisation et la photosensibilisation cutanée, d'augmenter l'efficacité des traitements existants, et de traiter des cancers encore incurables (glioblastomes). Cela stimule également les investissements de l'industrie pharmaceutique, seule capable de défendre de nouvelles indications, d'organiser des essais cliniques et de mettre sur le marché de nouveaux médicaments. Dans ce travail nous avons identifié et étudié de nouveaux photosensibilisants, depuis leur présélection à partir de critères physico-chimiques jusqu'à la démonstration de leur efficacité thérapeutique sur des tumeurs greffées chez l'animal. Les nouvelles structures photoréactives proviennent de synthèses ou sont extraites de microalgues marines. Nous avons démontré la possibilité d'avoir avec des composés innovants une double action sur les cellules cancéreuses passant à la fois par une inhibition de croissance et une destruction directe, et nous avons enfin essayé de démontrer l'intérêt pour le traitement des cancers du cerveau (gliomes) d'une diphénylchlorine (SIM01), proche du photosensibilisant le plus efficace actuellement commercialisé, mais avec moins d'effets secondaires (distribution et élimination plus rapide). 193 composés ont été testés in vitro, 6 in vivo, et 4 font l'objet d'un dépôt de brevet et seront bientôt testés sur des modèles de cancers orthotopiques
Photodynamic therapy (PDT), a treatment for cancers, is based on the combined action of a non toxic drug (photosensitizer) and a laser light that activates the drug only in tumoral tissue. Most of the photosensitizers on market share a tetrapyrrolic nucleus. The identification of new photoreactive compounds could lead to a higher efficacy of treatments, shorter hospitalisations, shorter skin photosensitivity, and could enable the treatment of uncurable cancers such as glioblastomas. New drugs development can also stimulate new investments from pharmaceuticals companies, which can develop new indications, set up clinical trials and put new drugs on market. This thesis consisted in identifying new photosensitizers, from a pre-screening based on physico-chemical properties to the demonstration of therapeutic efficacy on grafted tumors on animals. We searched for new photoreactive structures, from new synthesis or from marine micro-algae, we demonstrated the possibility of using innovating compounds to have a double action on cancerous cells, through growth inhibition and direct destruction, and we finally tried to demonstrate the interest of a diphenylchlorin (SIM01) in brain tumors (gliomas) treatment. SIM01 is chemically related to the best photosensitizer on market, but has a faster resorption and elimination. Altogether 193 compounds were tested in vitro, 6 in vivo, 4 are patented and will be soon tested on orthotopic cancer models

Les fluoroquinolones sont des antibiotiques très utilisés mais phototoxiques. Pour élucider les mécanismes de cette phototoxicité, nous avons mené une étude microspectrofluorimétrique de leur localisation intracellulaire dans des fibroblastes humains en culture, afin d'identifier les sites cellulaires de cette photosensibilisation, ainsi que les dommages causés au niveau de ces sites. Les expériences de co-localisation réalisées avec le jaune de Lucifer ou le rouge neutre (des marqueurs lysosomiaux fluorescents), ont permis d'identifier les lysosomes comme site préférentiel de localisation des fluoroquinolones, bien qu'on les retrouve dans tout le cytoplasme. Une altération de la perméabilité de la membrane lysosomiale a été démontrée en suivant la re-localisation du jaune de Lucifer ou du rouge neutre dans des fibroblastes photosensibilisés par ces antibiotiques. Des dommages ont aussi été détectés au niveau des mitochondries en utilisant la rhodamine 123 comme sonde fluorescente, bien que l'on n'observe pas de localisation très importante des fluoroquinolones dans ces organites. La perturbation des mécanismes de l'endocytose dans les fibroblastes traités avec les fluoroquinolones a été démontrée en utilisant les LDL comme ligand modèle. La fixation et l'internalisation plus la dégradation des LDL furent suivies au moyen du phénomène de F. R. E. T. (transfert d'énergie de fluorescence de type Forster), grâce à deux carbocyanines incorporées dans le cœur lipidique des LDL et formant un couple accepteur-donneur. Une dépolymerisation des filaments d'actine marqués au alexa 568< T. M> phalloidine a aussi été révélée par microscopie de fluorescence. La phototoxicité des fluoroquinolones induite par l'UVA, résulte donc de l'altération de cibles biologiques multiples

L’épilepsie réflexe photosensible est provoquée par l’association de la sensibilité génétique ou idiopathique des individus, appelée photosensibilité, et de stimuli lumineux (télévision, jeux vidéo…). A ce jour, aucun gène n’a été identifié chez l’homme comme étant responsable de la photosensibilité génétique. La lignée Fepi, un modèle génétique poulet qui présente une prédisposition à ce type d’épilepsie, a été utilisée dans un pedigree expérimental dédié de type backcross, qui a permis de localiser la mutation epi sur le microchromosome GGA25. L’objectif de ma thèse était d'identifier, puis de caractériser la mutation responsable de l’épilepsie photosensible du modèle poulet. Pour cela, j’ai d’abord construit la carte génétique de GGA25 et participé à la construction de la carte d’hybrides irradiés près de la mutation epi. En parallèle, j’ai participé à la construction de la carte génétique à haute résolution qui a permis de restreindre la localisation de la mutation dans un intervalle de 6,6 cM, comportant un gène candidat : SV2A (Synaptic Vesicle glycoprotein 2A), puis dans un intervalle final de 0,5 cM à l’intérieur du gène. J’ai également pu montrer que le phénotype épileptique était associé à une diminution significative de l’expression du gène SV2A chez les poulets épileptiques. Le séquençage de la région codante du gène m’a ensuite permis de mettre en évidence un épissage aberrant de l’exon 3 survenant spécifiquement chez les individus épileptiques. Enfin, j’ai pu identifier une mutation survenant dans le site accepteur de l’intron 2 pouvant expliquer l’épissage aberrant
Photosensitive reflex epilepsy is caused by the combination of individual sensitivity, either genetic or idiopathic, with light stimuli (television, video games. . . ). To date, no gene responsible for the genetic photosensitivity has been identified in human. The chicken strain Fepi, with genetic predisposition to photosensitive epilepsy, was used in a dedicated experimental backcross pedigree, allowing the mapping of the epi mutation on microchromosome GGA25. The objective of my thesis was to identify and characterize the mutation causing photosensitive epilepsy in chicken. To this end, I first built a genetic map of GGA25 and participated in the construction of the radiation hybrid map surrounding the epi mutation. In parallel, I participated in the construction of a high resolution genetic map, restricting the location of the mutation to a first 6. 6 cM interval containing a candidate gene: SV2A (Synaptic vesicle glycoprotein 2A), and thereafter to a final interval of 0. 5 cM within the gene. I was also able to show that the epileptic phenotype was associated with a significant decrease in the expression level of SV2A in epileptic chicken. Sequencing the coding region of the gene allowed me to identify an aberrant splicing of exon 3, occuring specifically in epileptic individuals. Finally, I identified a mutation in the acceptor site of intron 2 that could be responsible for the aberrant splicing

Le XXe siècle a été marqué par une recrudescence des cancers cutanés. L'objectif de ce travail était de développer une nouvelle photochimiothérapie agissant localement par l'association d'un topique photosensibilisé par les UVA et sélective vis-à-vis des tumeurs cutanées. Il s'agissait ainsi d'élaborer de nouveaux agents présentant une activité antiproliférative importante et dépourvus d'effets seconfaires liés à une phototoxicité cutanée après irradiation. La synthèse totale de trois molécules bifonctionnelles, comportant un motif a-méthylène-g-butyrolactone relié à un noyau psoralène par une chaîne polyamide ou polyméthylènique, a été réalisée. L'étude de l'activité photobiologique de ces composés a montré que ces derniers sont non phototoxiques (tests animaux - MEST) et qu'ils peuvent être considérés comme des agents antitumoraux efficaces (test sur des cellules cancéreuses K1, HL-60 et A375). Les résultats des études préliminaires de dénaturation thermique, de fluorescence et de photochimie ont apporté des informations très intéressantes quant au type d'interactions pouvant exister entre ces dérivés et l'ADN. En effet, nous pouvons émettre l'hypothèse d'un complexe d'intercalation qui pourrait stabiliser la double hélice en absence de lumière. La formation de photoadduits entre ces molécules et les bases pyrimidiques pourrait expliquer la déstabilisation observée à l'issue d'une irradiation à 313 nm. Enfin les expériences de photochimie ont confirmé l'existence de trois sites photoréactifs potentiels : les deux doubles liaisons 3,4 et 4',5' du noyau psoralène et la double liaison exocyclique de l'unité a-méthylène-g-butyrolactone
The 20 th century has seen an increase in skin cancers. The object of this work was the development of a new photochemotherapy based on UVA photolability and selective for skin tumor. New agents, with antiproliferative activity and without any secondary effects due to skin phototoxicity after irradiation, were required. The total synthesis of three bifunctionnal molecules, containing an a-methylene-g-butyrolactone unit linked to a psoralen by a polyamide or polymethylene chain, was carried out. Study of the photobiological activity of these compounds has showed that the latter were non-phototoxic (MEST animals tests) and were effective antitumor agents (Tests on cancer cells). Results of the preliminary studies of the thermal stability, fluorescence and photochemistry gave interesting results about the interactions that exists in complexes with DNA. We hypothezised that there is a stable intercalation complex with the double helix in the absence of light. The formation of photoadducts between the molecules and pyrimidic bases would explain the destabilization observed upon irradiation at 313 nm. Finally photochemical results have confirmed the presence of three potential photoreactive sites : the double bonds of psoralen 3, 4 and 4', 5', and the exocyclic double bond of the a-methylene-g-butyrolactone unit

La dermatite actinite chronique (DAC) est une affection très invalidante se caractérisant par une sensibilité anormalement élevée de la peau au soleil, pouvant se traduire dans les cas graves de la maladie par une atteinte de l’ADN cutané. Si la plupart des patients présentent un long passé d’allergie de contact aux lactones sesquiterpéniques, aucun mécanisme moléculaire ne permet de relier l’exposition de la peau aux lactones et l’intolérance solaire constatée chez les patients atteints de DAC. Toutefois, une forte photoréactivité du groupement α-méthylène-γ-butyrolactone a été mise en évidence vis-à-vis de modèle de l’ADN, de type 2’-désoxythymidine, conduisant à des adduits cyclobutane [2+2] stables entre la liaison exométhylénique et la liaison C5-C6 de la thymidine. A ce stade, il était donc important de démontrer si une telle réactivité des lactones était envisageable vis-à-vis d’une imposante biomolécule telle que l’ADN. En ce sens, la synthèse de lactones modèles, α-méthylène-hexahydrobenzofuranone, a été réalisée avec succès. Les résultats obtenus en spectrométrie de masse (MALDI et LC-MS/MS) mettent en évidence et ce pour la première fois la capacité des lactones sesquiterpéniques à photoréagir avec des fragments d’ADN de type poly(dA-dT)24. Si la configuration exacte des adduits reste à être déterminée, ces études suggèrent la formation de deux types de photoadduits [2+2]-(thymidine-lactone), correspondant à des stabilités différentes au niveau du cyclobutane. L’aptitude des ces molécules à endommager photochimiquement l’ADN apparait comme un début d’explication quant à l’association existante entre l’allergie de contact et la dermatite actinite chronique
Chronic actinic dermatitis (CAD), one of the most extreme form of photosensitivity, is highly associated to a heavy sensitization background to sesquiterpene lactones. Even if histological analysis suggest that endogenous chromophore such as DNA or RNA may be involved, the pathway from allergic contact dermatitis to chronic actinic dermatitis remains unknown. However, it has been shown that the -methylene--butyrolactone group, which is responsible for the sensitizing potential of sesquiterpene lactones, can also photoreact with thymidine to form several [2+2] photoadducts. The aim of this work was to study the photoreactivity of sesquiterpene lactones towards DNA fragments. A simple model of -methylene--butyrolactone with cis or trans ring junction have been synthesized. Irradiation of these lactones with a duplex ploy(dA-dT)24 was followed by MALDI mass spectroscopy, then after enzymatic digestion the nature of the photoadducts was determined by LC-MS/MS analysis. Mass spectroscopy results revealed the formation of several photoadducts [2+2]-thymidine-lactones corresponding to different stabilities at the cyclobutane ring. The -methylene--butyrolactone group, which is responsible for allergic contact dermatitis, could play also an important role in the chronic actinic dermatitis mechanism by its ability to photoreact with biomolecules

Les hydrocarbures aromatiques polycycliques (HAP) sont des polluants organiques persistants potentiellement mutagènes et cancérigènes. Leur transfert de l'atmosphère vers les écosystèmes, notamment vers les plantes, conditionne leur entrée dans les chaines alimentaires mais les modalités de ce transfert restent encore mal connues. L'objectif de ce travail était donc de caractériser le transfert et d'identifier les effets biologiques des HAP atmosphériques sur un système sol-plante-microorganismes symbiotiques.Un dispositif expérimental a été conçu afin de recréer en laboratoire une pollution atmosphérique par les HAP avec comme HAP modèle le phénanthrène (PHE). Le dispositif a fait l'objet d'une validation et d'une calibration élaborée de manière originale par une double approche mêlant l'expérimental à la simulation mathématique. Les niveaux d'exposition en polluant (150 µg m-3), contrôlés par des échantillonneurs passifs, se sont avérés pertinents par rapport aux conditions in situ. Ce dispositif a donc été utilisé pour exposer durant un mois des microsystèmes sol-plante-microorganismes au PHE par voie atmosphérique.Les différentes études ont mis en évidence un transfert du PHE depuis l'atmosphère vers tous les compartiments du microsystème, avec une accumulation majeure vers les feuilles de trèfle ou de ray-grass (respectivement 170 et 70 µg g־ ¹MS) et un transfert phloémien vers les racines est suggéré. Chez le trèfle, la mycorhization n'a pas été affectée, tandis que le nombre de nodules actifs a diminué de manière significative. Contrairement aux racines, la biomasse aérienne du trèfle a été significativement affectée (environ - 25%) par l'exposition au PHE atmosphérique, suggérant un impact sur le métabolisme carboné de la plante. Une expérience de marquage des trèfles au ¹³C-CO2 a effectivement montré un impact négatif du PHE atmosphérique sur la croissance, l'allocation de biomasse et l'allocation carbonée. Pour conclure, ces études ont permis non seulement de caractériser les effets biologiques et physiologiques des HAP atmosphériques sur les végétaux mais également de proposer l'utilisation du potentiel mycorhizien comme indicateur de pollution atmosphérique par les HAP.