Dissertations / Theses on the topic 'NF-E2'
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Bogeska, Ruzhica [Verfasser], and Heike L. [Akademischer Betreuer] Pahl. "Biological effects of NF-E2 overexpression in hematopoietic stem cells = Biologische Effekte der NF-E2 Überexpression in hämatopoietischen Stammzellen." Freiburg : Universität, 2012. http://d-nb.info/1114669725/34.
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2
Gothwal, Monika [Verfasser], and Heike L. [Akademischer Betreuer] Pahl. "Characterization of a mouse model overexpressing transcription factor NF-E2 = Characterisierung eines Maus Modell mit einer Überexpression von NF-E2." Freiburg : Universität, 2012. http://d-nb.info/1123471118/34.
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3
Fock, Ee-Ling Clinical School St George Hospital Faculty of Medicine UNSW. "Molecular regulation and enhancement of megakaryopoiesis and thrombopoiesis by the p45 subunit of NF-E2." Publisher:University of New South Wales. Clinical School - St George Hospital, 2008. http://handle.unsw.edu.au/1959.4/42885.
Full textAbstract:
Megakaryocytes (MKs) are a rare population of haematopoietic cells, which produce platelets. Platelet production is a complex process that is tightly regulated at the transcriptional level by lineage specific transcription factors such as p45 NF-E2. Understanding how transcriptional regulators operate is imperative to advance our knowledge of disease pathophysiology and to propose novel treatment options. Therefore, the aims of this study were to: i) study the effects of p45 NF-E2 overexpression on various stages of megakaryopoiesis; (ii) elucidate the nuclear transport mechanisms of p45 NF-E2; and iii) determine the impact of a p45 NF-E2 modification called SUMOylation on thrombopoiesis. Exogenous p45 NF-E2 was overexpressed in haematopoietic cells in culture and various aspects of megakaryopoiesis were examined. Overexpression of p45 NF-E2 enhanced multiple stages of MK differentiation such as colony forming unit (CFU)-MK formation and terminal MK maturation. Most importantly, p45 NF-E2 overexpression resulted in significant increases in proplatelet and functional platelet production in vitro. This latter result was confirmed in vivo using lethally irradiated mice transplanted with cells that overexpressed p45 NF-E2. Unexpectedly, the enhancement of MK differentiation was at the expense of myeloid development and, for the first time, identified p45 NF-E2 as a negative regulator of myeloid differentiation. Secondly, we determined the nuclear localisation signal of p45-NF-E2 and the pathway responsible for nuclear import. We also investigated the importance of p45 NF-E2 nuclear import in thrombopoiesis. Finally, we showed that p45 NF-E2 is modified mainly by SUMO-2/3 in bone marrow cells and this process is involved in the transcriptional activation of MK-specific genes and platelet release. Taken together, these results suggest that enforced expression of p45 NF-E2 selectively enhances many aspects of MK differentiation including early and terminal MK maturation, proplatelet formation and platelet release. Equally important, this thesis also indicates that white blood cell differentiation may be inhibited by p45 overexpression, while molecular processes such as the nuclear import and SUMOylation of p45 NF-E2 are vital for thrombopoiesis. These observations will facilitate subsequent studies into the feasibility of manipulating p45 NF-E2 protein levels for the treatment of conditions such as thrombocytopaenia and other platelet disorders.
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Devidal, Audrey. "Mécanismes et fonctions du ciblage centrométrique de NF-E2p18/MafK, sous-unité du facteur transcriptionnel érythroide NF-E2." Paris 7, 2005. http://www.theses.fr/2005PA077133.
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5
Jutzi, Jonas Samuel [Verfasser], and Heike L. [Akademischer Betreuer] Pahl. "Mutationen im Transkriptionsfaktor NF-E2 und deren Rolle in der Entwicklung myeloproliferativer Neoplasien." Freiburg : Universität, 2013. http://d-nb.info/1123478228/34.
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6
Hadlich, Tobias [Verfasser], and Heike L. [Akademischer Betreuer] Pahl. "Der Transkriptionsfaktor NF-E2 und seine Rolle in der Pathogenese myeloproliferativer Erkrankungen in vivo." Freiburg : Universität, 2012. http://d-nb.info/1123473684/34.
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7
Chan, Kaimin, and 陳繼明. "Isolation and characterization of NRF2: a member of the NF-E2 family of transcription factors." Thesis, The University of Hong Kong (Pokfulam, Hong Kong), 1997. http://hub.hku.hk/bib/B31235566.
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Chan, Kaimin. "Isolation and characterization of NRF2 : a member of the NF-E2 family of transcription factors /." Hong Kong : University of Hong Kong, 1997. http://sunzi.lib.hku.hk/hkuto/record.jsp?B19739989.
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DEVEAUX, SOPHIE. "Regulation des genes specifiques des megacaryocytes : role des facteurs de transcription gata, ets et nf-e2." Paris 6, 1998. http://www.theses.fr/1998PA066462.
Full textAbstract:
Notre equipe travaille sur la regulation de genes exprimes dans la lignee hematopoietique qui produit les megacaryocytes, precurseurs des plaquettes sanguines. Nous nous sommes attaches a l'etude de l'expression specifique du gene mpl dans la lignee megacaryocytaire. Ce gene code le recepteur a la thrombopoietine, qui intervient dans la proliferation et dans la differenciation des megacaryocytes, et qui est egalement capable de stimuler la proliferation des progeniteurs precoces hematopoietiques. Nous avons montre qu'il est regule par le facteur de transcription gata-1 et des membres de la famille ets. D'autres facteurs pourraient intervenir dans l'expression du gene mpl et notamment des facteurs qui se fixent sur une region intronique qui est une region activatrice quand elle est integree dans la chromatine. Nous nous sommes egalement interesses au facteur de transcription nf-e2 qui agit dans les dernieres etapes de la megacaryopoiese. En effet, des souris depourvues de cette proteine presentent une absence totale de plaquettes. Aucun gene megacaryocytaire cible de cette proteine n'etant connu, nous avons utilise une technique d'immunoprecipitation in vivo, et identifie l'un de ces genes. Il code pour la thromboxane synthetase (txs), qui intervient dans le processus d'agregation des plaquettes. Nous avons montre que le facteur nf-e2 est crucial pour l'expression du gene de la txs dans les megacaryocytes in vivo. La mutation d'un site de fixation pour le facteur nf-e2 dans le promoteur diminue fortement l'activite de ce gene, ce qui confirme que son expression est directement regulee par nf-e2. Notre travail a donc permis d'identifier le premier gene cible du facteur de transcription nf-e2 dans les megacaryocytes.
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Kaufmann, Kai Björn [Verfasser], and Heike L. [Akademischer Betreuer] Pahl. "Überexpression des Transkriptionsfaktors NF-E2 in vivo, Etablierung eines neuen Modells zur Untersuchung und Therapie myeloproliferativer Neoplasien." Freiburg : Universität, 2012. http://d-nb.info/112346992X/34.
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Poindessous-Jazat, Virginie. "Différenciation et apoptose des cellules érythroleucémiques de Friend : implication des facteurs transcriptionnels NF-E2 et C-JUN." Paris 5, 2000. http://www.theses.fr/2000PA055019.
Full textAbstract:
Les leucémies se caractérisent par un défaut de différenciation et d'apoptose. Le but de mes travaux a été d'étudier certains facteurs contrôlant ces deux processus dans les cellules leucémiques en prenant comme modèle les cellules de Friend. Les cellules érythroleucémiques de Friend (MEL) sont capables de se différencier lorsqu'elles sont traitées par divers inducteurs dont le DMSO. L'induction de la différenciation terminale des cellules MEL conduit à la formation de cellules produisant de l'hémoglobine et ayant perdu leur capacité de prolifération. Dans la première partie de mon travail, j'ai étudié l'implication du facteur transcriptionnel NF-E2/p18 dans la différenciation érythroide des cellules MEL. Des transfections stables des cellules MEL par des vecteurs d'expression de p18 en configuration sens et antisens ont été réalisés et ont permis de montrer que ce facteur était nécessaire a l'expression des globine. Par ailleurs des analyses de l'activité de fixation à l'ADN (gel retard) et ainsi que des études de transcription transitoire nous ont permis de montrer que p18 participe à la différenciation des MEL en augmentant l'activité de fixation et l'activité transactivatrice de NF-E2 nécessaire a la transcription des gènes globine. La 2ème partie de mon travail a consisté à rechercher si le proto-oncogène C-JUN régule le processus de maturation terminale des MEL ainsi que leur apoptose. Il avait été montré dans le laboratoire que le facteur C-JUN inhibait la synthèse d'hémoglobine en interagissant avec le complexe NF-E2. Nous avons recherché si C-JUN pouvait réguler l'arrêt de prolifération au cours de l'induction de la différenciation des MEL par le DMSO. Nous avons montré que C-JUN ne bloquait pas le programme de maturation terminale car les cellules surexprimant C-JUN sont toujours capables d'être bloquées en g 0/g 1 après traitement par le DMSO. Ainsi C-JUN découple le programme de synthèse d'hémoglobine de celui de la maturation terminale. L'analyse des clones de cellules MEL exprimant ou non C-JUN a permis de montrer que C-JUN augmentait la sensibilité a l'apoptose spontanée ou induite par différentes drogues (etoposide, anisomycine et daunorubicine). De plus, bien que les cellules différenciées par le DMSO présentent un retard à l'apoptose par rapport aux cellules non différenciées, C-JUN accélère aussi l'apoptose des cellules induites à se différencier. Par contre l'apoptose provoquée par la privation en sérum est retardée dans les cellules exprimant C-JUN. L'ensemble des résultats indiquent que le proto-oncogène C-JUN, facteur transcriptionnel ubiquitaire, peut réguler les processus de différenciation et d'apoptose des cellules érythroleucémiques de Friend.
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Marx, Jan Philipp [Verfasser], and Heike L. [Akademischer Betreuer] Pahl. "Der Transkriptionsfaktor NF-E2 und seine Rolle in der Pathogenese eines Phänotyps in der Milz im myeloproliferativen Mausmodell in vivo." Freiburg : Universität, 2013. http://d-nb.info/1119805317/34.
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Cartel, Maëlle. "Fonctions et régulations de la kinase CHK1 dans l'hématopoïèse normale et leucémique." Thesis, Toulouse 3, 2019. http://www.theses.fr/2019TOU30150.
Full textAbstract:
La protéine Checkpoint kinase 1 (CHK1) est un acteur clé du cycle cellulaire qui agit comme un agent double, à la fois dans un contexte cellulaire normal mais également en condition de stress tel que l'apparition de dommages à l'ADN. Ma thèse a consisté à évaluer les fonctions et la régulation de cette protéine dans ces deux contextes, en m'intéressant à l'hématopoïèse normale et leucémique. Plusieurs études mettent déjà en avant un rôle de CHK1 dans l'hématopoïèse normale, mais une meilleure compréhension de l'importance de CHK1 dans la différenciation, notamment dans la voie mégacaryocytaire, est nécessaire. De plus, CHK1 se révèle importante dans les Leucémies Aiguës Myéloïdes (LAM), notamment dans la résistance à la chimiothérapie. Pour permettre une meilleure compréhension de la biologie des LAM et déterminer comment cibler CHK1, il est aujourd'hui nécessaire de définir comment cette kinase est régulée dans cette pathologie. Ces deux axes, ont constitué mon travail de thèse, dont les objectifs ont été de mieux définir les fonctions de la kinase CHK1 dans ces deux contextes cellulaires. Ainsi, ce travail met en lumière le rôle de CHK1 dans la différenciation mégacaryocytaire normale, possiblement en régulant l'activité du facteur de transcription NF-E2. De plus, dans le contexte des Leucémies Aiguës Myéloïdes, ce travail implique la déubiquitinase USP7 comme régulateur majeur du niveau protéique de CHK1 dans les LAM, et comme nouvelle cible thérapeutique d'intérêt dans cette pathologieThe protein Checkpoint kinase 1 (CHK1) acts as a double agent. Indeed, CHK1 is a key player in the cell cycle, both in a normal cellular context and stress conditions such as DNA damage. The goal of my PhD project was to evaluate the functions and regulation of this protein in these two contexts, working on normal and leukemic hematopoiesis. Several studies have already described a role of CHK1 in normal hematopoiesis, but the mechanisms behind the importance of CHK1 in differentiation, particularly in megakaryopoiesis, remain to be elucidated. In addition, CHK1 has proven to be important in Acute Myeloid Leukemia (AML), particularly in the context of resistance to chemotherapy. To better understand the biology of AML, and identify ways to target CHK1, it is necessary to decipher how this kinase is regulated in this context. These two axes have been the backbone of my thesis work, which aims to better define the CHK1 kinase role in these two cellular contexts. It highlights a role for CHK1 in normal megakaryopoiesis, possibly by regulating the activity of the NF-E2 transcription factor. In addition, in the context of Acute Myeloid Leukemia, this work identifies the USP7 deubiquitynase as a major regulator of CHK1 protein levels in AML, and as a new interesting therapeutic target in this pathology
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Hariton, Florence A. G. "Anti-stress gene response in cell and tissue ageing : role of transcription factor NF-E2-related factor-2 and effect of dietary activators." Thesis, University of Warwick, 2014. http://wrap.warwick.ac.uk/66553/.
Full textAbstract:
The concept of cellular senescence is based on the notion that proliferation of normal diploid cells can only occur for a limited period of time after which cells slowly cease to divide and die. This limitation of lifespan for in vitro cell cultures was first described by Leonard Hayflick in 1961, going against the theory formulated by Alexis Carrel claiming that cells kept in culture have an unlimited potential for division (Carrel and Ebeling, 1921). Evidence from cell senescence studies have been used to explain the basis of healthy ageing as well as develop food supplements promoting the delay of ageing. Since these discoveries, there has been marked expansion of anti-stress gene response research with relation to the role of the transcription factor NF-E2-related factor-2 as well as healthy ageing with regards to dietary activators intake. This study examined the effects of sulforaphane (SFN) and hesperetin (HESP) on MRC-5 cell senescence in vitro as well as characterized gene expression and cell metabolism in cells escaping senescence by treatment with SFN and HESP and the mechanism of decrease glucose metabolism by SFN and HESP action linked to delay of fibroblast senescence. The effects of treatment of MRC-5 with the dietary bioactivators SFN and HESP was studied and shown to delay cellular senescence in these cells in vitro. Similar findings for SFN treatment of BJ cells were found previously by studies of the host team. Caloric restriction mimetic mechanisms by treatment with 1 μM SFN and 5 μM HESP was shown due to the decrease in culture glucose consumption increase with senescence in these treatment groups and this CR restriction mimetic effect and decrease in the flux of formation of D- and L-lactate in the SFN-treated group was consistent with previous studies done in CR and ageing in mice models (Hargopan, Ramsey and Weindruch, 2003). Moreover, in this study, SFN was shown to act as a CRM dietary bioactive through cellular contents of glycolytic intermediates with SFN-treatment (Bensaad et al., 2006). Finally, the mechanism by which SFN induces delay of senescence through CR was shown to be due to the extraction of Mondo A from the cell nucleus to the cytoplasm.
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Muller, Mandy. "Comparative mapping of E2-host interactions unravels new roles of E2 in human papillomavirus-induced pathogenesis." Paris 7, 2013. http://www.theses.fr/2013PA077137.
Full textAbstract:
Les HPV sont les agents d'infections latentes, d'hyperplasies bénignes ou encore de cancer. Afin de mieux comprendre leur pathogenèse, nous avons cartographié les réseaux d'interactions de protéines de régulation virale E2 pour 12 génotypes HPV. Par double hybride, nous avons procédé à l'identification des interacteurs des protéines E2 suivi par une validation en cellule de mammifère par une méthode basée sur la reconstitution d'une luciferase. Le regroupement des profils d'interaction montre une corrélation avec la phylogénie, étabissant ainsi la contribution de E2 dans la pathogénie associée aux HPV. L'étude des réseaux d'interaction a révélé le ciblage préférentiel de protéines cellulaires hautement conncectées, impliquées dans 5 catégories fonctionnelles récapitulant les principales fonctions de E2 mais aussi ouvrant de nouvelles perspectives quant au rôle de E2 de cette protéine virale dans les mécanismes d'infection. Dans un deuxième temps, ce travail s'est focalisé sur l'étude d'une interaction impliquant spécifiquement la protéine E2 d'HPV16, le virus le plus représenté dans les cancers cervicaux, et une protéine cellulaire, CCHCR1. En identifiant la surface d'interaction de CCHCR1 sur E2, il s'est avéré qu'elle induisait une compétition avec BRD4, un interacteur majeur de E2, se traduisant par une diminution des capacités transcriptionnelles de E2. De même, nous avons montré que CCHCR1 induisait la délocalisation de E2 du noyau vers le cytoplasme. Enfin, nos résultats indiquent qu'en présence de CCHCR1, HPV16 E2 est moins apte à induire la différentiation précoce des kératinocytes, ce qui pourrait potentiellement avoir un effet important sur le cycle viralHPV are associated with latent infections, benign hyperplasia or even cancer. To better understand HPV pathogenesis, we comparatively mapped the interaction networks of the regulatory protein E2 from 12 HPV genotypes. By yeast two-hybrid, we identified E2's potential interactors. This was followed by a validation sep in mammalian cells by a method based on luciferase complementation. Clustering of interaction profiles showed a correlation with HPV phylogeny, demonstrating E2's contribution to the HPV-associated pathogenesis. Analysis of E2's interaction network revealed a preferential targeting of cellular hub proteins involved in 5 main functional families, reflecting E2's primary functions but also unraveling potential new roles of E2 in viral infection. The second part of this work was dedicated to the study of a specific interaction between E2 from HPV16, the most represented HPV in cervical cancer, and a cellular protein, CCHCR1. We showed that CCHCR1 interferes with the binding of BRD4 to E2, resulting in a decrease in E2-dependent transcription. CCHCR1 also induces a relocalization of E2 into the cytoplasm instead of the nucleus. Finally, our results indicate that in presence of CCHR1, E2 is a less potent activator of keratinocyte differentiation, which could potentially impact the HPV life cycle
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Frias, Daniela Perroni. "Participação do Nrf2 no processo de autofagia de células de brônquios humanos expostas ao material particulado de diesel." Universidade de São Paulo, 2018. http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/5/5160/tde-20032019-101342/.
Full textAbstract:
As partículas eliminadas na exaustão do diesel (DEP) são importantes fontes diárias de partículas inaladas, responsáveis por gerar espécies reativas de oxigênio no sistema respiratório, fazendo com que as células ativem mecanismos de defesa, como o sistema Keap1-Nrf2 e a autofagia. Para investigar o papel do Nrf2 no processo de autofagia induzida pelas DEPs, BEAS-2B foram expostas às DEP, coletadas diretamente de um motor a diesel. BEAS-2B foram tratadas com sulforafano, bafilomicina e EBSS para testar a relação entre as vias autofágica e antioxidante. A quantidade relativa de mRNA foi verificada por RT-PCR para os seguintes genes: Nrf2, NQO1, HO-1, p62, Atg5 e LCB3. A seguir, BEAS-2B foram transfectadas com RNA silenciador (siRNA) para Nrf2, expostas ou não às DEPs (10 e 50 micro g/mL por 1h e 2 h), e mRNA detectado por RT-PCR e Western blot para proteínas. Bafilomicina (inibidor de autofagia) mostrou uma diminuição significativa nos marcadores antioxidantes Nrf2 (p = 0,024), HO-1 (p = 0,002) e NQO1 (p = 0,003), enquanto sulforafano (ativador de Nrf2) aumentou os marcadores autofágicos LC3B (p = 0,004) e Atg5 (p = 0,007). BEAS-2B expostas às DEP na concentração de 50 micro g/mL por 2hs mostraram um aumento significativo nos genes autofágicos LC3B (p = 0,018) e p62 (p = 0,007) e nos genes da via antioxidante Nrf2 (p = 0,007) e NQO1 (p = 0,025). Houve uma diminuição significativa no mRNA de LC3B (p < 0,001), p62 (p = 0,001) e Atg5 (p = 0,024) nas células transfectadas com siRNA, expostas ou não à DEP. Western blotting mostrou uma redução das proteínas Nrf2, p62 e LC3II nas BEAS-2B siRNA, indicando que a exposição ao silenciamento de Nrf2 modificou a expressão de marcadores de autofagia (R < 1). Os resultados deste estudo mostram que, em células brônquicas expostas às DEP, o sistema Nrf2 e a autofagia trabalham em conjunto para tentar manter a homeostase celularDiesel Exhaust Particles (DEPs) are main sources of daily inhaled particles, responsible for generating reactive oxygen species in the respiratory system, and causing the cells to activate defense mechanisms, such as the Keap1-Nrf2 system and autophagy. In order to investigate the role of Nrf2 in Dep-induced autophagy, BEAS-2B cells collected directly from a diesel engine were exposed to DEP and treated with sulforaphane, bafilomycin and BESS to test the relationship between autophagic and antioxidant pathways. The relative amount of mRNA was verified by RT-PCR for the following genes: Nrf2, NQO1, HO-1, p62, Atg5 and LCB3. Next, BEAS-2B cells were transfected with silencer RNA (siRNA) specific to Nrf2, exposed or not to DEPs (10 and 50 micro g/mL 1h and 2hs), and mRNA detected by RT-PCR and Western blotting for protein. Bafilomycin ( autophagy inhibitor) showed a significant decrease in the antioxidant markers Nrf2 (p=0.024), HO-1 (p = 0.002) and NQO1 (p = 0.003), whereas sulforaphane (Nrf2 activator) increased the expression levels of autophagic markers LC3B (p=0.004) and Atg5 (p=0.007). BEAS-2B exposed to DEP at a concentration of 50 micro g/mL for 2hs showed a significant increase in autophagic genes LC3B (p=0.018) and p62 (p=0.007),and in the antioxidant pathway markers Nrf2 (p=0.007) and NQO1 (p=0.025). There was a significant decrease in mRNA of the LC3B (p < 0.001), p62 (p=0.001) and Atg5 (p=0.024) in cells transfected with siRNA, exposed or not to DEP. Western blotting showed a reduction of Nrf2, p62 and LC3II proteins in BEAS-2B transfected with siRNA, indicating that Nrf2 silencedexposed to DEP modulated the expression of autophagy markers (R < 1). The results of this study show that, in bronchial cells exposed to DEP, the Nrf2 system and autophagy work together in order to try to maintain cellular homeostasis
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Lee, Jinju. "IL-23 generates pathogenic Th17 cells by triggering T cell-intrinsic prostaglandin E2-EP2/4 signaling." Kyoto University, 2018. http://hdl.handle.net/2433/235123.
Full text
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Francastel, Claire. "Etude du blocage de la differenciation erythroide des cellules leucemiques de friend. Role du protooncogene c-jun et de son interaction avec le facteur transcriptionnel nf-e2." Paris 6, 1995. http://www.theses.fr/1995PA066324.
Full textAbstract:
Les cellules erythroleucemiques de friend (f-melc) constituent le modele de differenciation erythroide inductible le plus utilise, conduisant a une augmentation de la transcription des genes - et -globines adultes. La transcription des genes globine au cours de la differenciation erythroide depend de la presence de motifs nf-e2/ap-1 dans leur region regulatrice (lcr), capables de fixer 2 types de facteurs transcriptionnels, ap-1 (fos/jun) ubiquitaire et nf-e2 (p18/p45) exprime dans les lignees erythroide et megacaryocytaire. Cependant le role de ces 2 complexes sur la transcription des genes globine au cours de la differenciation des f-melc etait encore inconnu. Nos etudes d'expression et de transfections stables des genes de la famille jun, dans une configuration sens ou antisens, nous ont permis de conclure que junb en association avec c-fos semble etre implique dans l'engagement des f-melc dans la differenciation terminale erythroide, et que l'expression de c-jun est associee avec la resistance des f-melc a la differenciation par le dmso. En particulier, l'inhibition specifique de l'expression de c-jun par des transcrits antisens dans des f-melc resistantes a la differenciation erythroide permet de restaurer a ces cellules une capacite de se differencier sous l'action du dmso. Ces resultats nous ont permis de montrer un role nouveau pour c-jun, comme inhibiteur d'un processus tres specialise, la differenciation erythroide des f-melc. Nos etudes de transcription transitoire nous ont permis de montrer que le facteur nf-e2p18 agit comme un regulateur negatif de l'activite de sites ap-1 et de l'activite de sites nf-e2/ap-1 dans les cellules non-erythroides (nih/3t3), mais comme un regulateur positif dans les f-melc en augmentant probablement la quantite de complexe nf-e2p45/p18 qui est la forme active du complexe nf-e2. Alors que c-jun seul agit comme un regulateur positif de l'activite transcriptionnelle des sites ap-1 et nf-e2/ap-1, sa cotransfection avec nf-e2p18 est incapable d'activer la transcription a partir de ces sites, aussi bien dans les cellules erythroides que non-erythroides. De plus l'inhibition de l'expression de c-jun endogene par des transcrits antisens conduit a une augmentation de l'activite transcriptionnelle des sites nf-e2/ap-1 dans les f-melc, alors qu'elle conduit a une inhibition pratiquement totale de l'activite des sites ap-1 dans ces cellules. L'ensemble des resultats presentes dans ce memoire montre que, la transcription a partir de sites nf-e2/ap-1 du locus globine peut dependre du type de complexe present dans les cellules, nf-e2p45/p18 transcriptionnellement actif, ou c-jun/p18 inactif sur ces sites. L'inhibition par c-jun de l'induction de la transcription des genes globine au cours du processus de differenciation des f-melc, pourrait donc resulter du deplacement de complexes nf-e2p45/p18 vers des complexes c-jun/p18. Les sites nf-e2/ap-1 etant necessaires a la transcription des genes globine au cours de la differenciation erythroide, ces resultats expliqueraient pourquoi le blocage de la differenciation des f-melc serait lie a leur taux d'expression de c-jun
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Li, Xuchu. "Crystal structure of the kelch domain of human keap1." Diss., Columbia, Mo. : University of Missouri-Columbia, 2005. http://hdl.handle.net/10355/5828.
Full textAbstract:
Thesis (Ph. D.)--University of Missouri-Columbia, 2005.The entire dissertation/thesis text is included in the research.pdf file; the official abstract appears in the short.pdf file (which also appears in the research.pdf); a non-technical general description, or public abstract, appears in the public.pdf file. Vita. Includes bibliographical references.
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Berthe, Julie. "Rôle de la protéine immuno-régulatrice PD-L1 sur le métabolisme des cellules tumorales." Thesis, Lille, 2018. http://www.theses.fr/2018LIL2S006.
Full textAbstract:
Lorsque les cellules normales évoluent vers un état néoplasique, elles acquièrent de nombreuses caractéristiques. Par exemple, ces cellules exhibent des voies métaboliques anormales et possèdent la capacité d’échapper à la destruction par les cellules de l’immunité, notamment en exploitant des points de contrôles immunitaires ou « immune checkpoints ». La molécule PD-L1 (Programmed Death-Ligand 1) appartient à la famille de protéines immuno-régulatrices B7 et a tout d’abord été décrite comme impliquée dans l’immuno-échappement tumoral suite à son interaction avec PD-1, récepteur exprimé à la surface des lymphocytes T. Associée à un mauvais pronostic, une expression aberrante de PD-L1 est retrouvée dans les hémopathies malignes ainsi que dans de multiples tumeurs solides. De manière intéressante, il a été montré que PD-L1 possède également des fonctions pro-tumorales intrinsèques. En effet, cette protéine joue un rôle dans la prolifération des cellules cancéreuses et leur résistance aux chimiothérapies, sans interagir avec PD-1. Toutefois, les mécanismes moléculaires modulés par PD-L1 et impliqués dans ces fonctions sont encore inconnus. Des voies métaboliques anormales ont été décrites comme pouvant contribuer à la croissance tumorale et la résistance aux thérapies. Ainsi, les objectifs de ma thèse ont été d’explorer le potentiel rôle de la protéine PD-L1 dans le métabolisme des cellules tumorales. En utilisant la méthode d’édition du génome avec les Zinc Finger Nucleases, nous avons invalidé le gène CD274 codant la protéine PD-L1 dans les cellules cancéreuses de sein MDA-MB-231 et investigué les fonctions métaboliques de cette molécule après surexpression dans ces mêmes cellules. Nous avons observé que PD-L1 induit un shift de la phosphorylation oxydative vers la glycolyse, correspondant à l’effet Warburg. Afin de valider cette reprogrammation métabolique, nous avons analysé le profil métabolique de ces cellules et mis en évidence une élévation des niveaux des intermédiaires de la glycolyse tels que le F-6-P, le F-1,6-P, le GAP, le DHAP, le PEP et le pyruvate dans la lignée surexprimant PD-L1, confirmant nos précédents résultats. D’autre part, et en accord avec nos observations quant à une augmentation de la production de ROS (Reactive Oxygen Species), nos données transcriptomiques suggèrent une répression de la voie de réponse au stress oxydatif NRF2 suite à l’expression de PD-L1 et notamment de ses gènes cibles tels que NQO2, GSTM3 et ABCC2. En outre, l’analyse in silico de bases de données de cohortes de patients atteints de cancer du sein a révélé une corrélation entre l’expression du gène PD-L1/CD274 et l’expression des gènes de la voie du stress oxydant (GSTM3 ; CYBB) ou des gènes codant les transporteurs de glucose (SLC2A1/GLUT1 ; SLC2A3/GLUT3), ces données supportant nos résultats obtenus in vitro. Par ailleurs, le glucose étant principalement utilisé par les cellules cancéreuses pour favoriser la biosynthèse de diverses biomolécules nécessaires à la prolifération cellulaire, ces résultats pourraient expliquer la tumorigénicité augmentée dans la lignée surexprimant PD-L1 lors des expériences de xénogreffe de cellules de cancer du sein humain chez des souris Nude. Ainsi, les travaux présentés dans cette thèse mettent en évidence de nouvelles fonctions intrinsèques de PD-L1 promouvant le développement tumoral, suggérant l’utilisation d’agents thérapeutiques inhibant ces mécanismes seraient prometteurs pour le traitement du cancer du seinEvolving to a neoplastic state, normal cells acquire many characteristics; indeed, tumor cells follow abnormal metabolic pathways and exhibit the ability to avoid immune destruction, partly by exploiting immune checkpoints. Many of these are currently under clinical investigation for new cancer treatments, notably the PD-1/PD-L1 axis.Programmed Death-Ligand 1 (PD-L1) molecule belongs to the B7 immunoregulatory proteins family and was originally described as mediating tumor immuno-escape through interaction with its receptor PD-1 on T cells. Associated with poor cancer outcome, aberrant PD-L1 expression has been observed in hematologic malignancies and in multiple solid tumor types. Actually, this protein has been shown to regulate tumor cell proliferation and resistance to chemotherapy through apoptosis inhibition, without interacting with PD-1. However, cellular mechanisms modulated by PD-L1 and involved in these functions are still unclear. Abnormal metabolic pathways are known for contributing to tumor growth and therapy resistance; therefore, the objective of my PhD thesis was to investigate the impact of PD-L1 in breast cancer cell metabolic reprogramming.Using genome editing, we knocked-out the CD274 gene encoding PD-L1 in breast cancer cell line MDA-MB-231 and investigated metabolic functions after PD-L1 overexpression in the same cells. We observed that PD-L1 induces a shift from oxidative phosphorylation to glycolysis, indicating this molecule promotes the Warburg effect in these tumor cells. To validate PD-L1 metabolic reprogramming, we performed metabolomic profiling that highlighted significantly increased levels of glycolysis intermediated such as F6P, F1,6P, GAP, DHAP, PEP and pyruvate in PD-L1-expressing cells, confirming our latter results. Moreover, in agreement with an increasing mitochondrial reactive oxygen species (ROS) production, transcriptomic study suggested that PD-L1 represses NRF2-mediated oxidative stress response pathway, especially NQO2, GSTM3 and ABCC2 genes. Furthermore, in silico analysis of breast cancer patients databases highlighted a correlation between PD-L1/CD274 gene and oxidative stress gene signature (GSTM3; CYBB) or glucose transporters genes (SLC2A1; SLC2A3) expressions, supporting our results. Besides, glucose is mostly used by cancer cells to favor biosynthesis of diverse biomolecules required for cellular proliferation; the above results could explain our human breast cancer cells xenograft experiments in Nude mice demonstrating that PD-L1 increases tumoreginicity.Thus, the work presented in this thesis evidences novel PD-L1 intrinsic tumor-promoting functions, suggesting that therapeutic agents inhibiting these mechanisms would be promising for breast cancer treatment
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Lahlil, Rachid. "Facteurs de transcription et differenciation erythroide de la lignee leucemique humaine k562 : modulation de gata-1, gata-2 et nf-e2 par un inhibiteur (azt) ou par une strategie sens et antisens." Reims, 1997. http://www.theses.fr/1997REIMP206.
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Ali, Malika. "Effets des activateurs pharmacologiques de Nrf2 sur la réponse antioxydante et anti-inflammatoire dans le macrophage humain Comparative effectiveness of 5 natural and chemical activators of Nrf2 on inflammation, oxidative stress, macrophage polarization, and bactericidal activity in an in vitro macrophage infection model Sulforaphane reduces intracellular survival of Staphylococcus aureus in macrophages through inhibition of JNK and p38 MAPK-induced inflammation." Thesis, Université Paris-Saclay (ComUE), 2019. http://www.theses.fr/2019SACLV100.
Full textAbstract:
Etat de la question : Les infections respiratoires jouent un rôle important dans les exacerbations au cours des pathologies respiratoires chroniques (bronchopneumopathie chronique obstructive, asthme, insuffisance respiratoire des maladies neuromusculaires). Ces exacerbations entraînent une augmentation de la morbidité et de la mortalité, une dégradation de la qualité de vie et une majoration des dépenses de santé. En contact direct avec l’environnement extérieur, les voies respiratoires et le poumon sont la première cible des aérocontaminants tels que les oxydants issus de polluants atmosphériques et les agents microbiens. Les cellules inflammatoires (macrophages et polynucléaires neutrophiles) réagissent à l’agression microbienne en augmentant leur production d’oxydants. L’excès d’oxydants a un effet bactéricide bien connu mais peut conduire à la mort des cellules du système respiratoire, notamment par apoptose. Pour faire face à ce stress oxydant, les cellules de l’hôte activent de nombreuses défenses antioxydantes dont l’une est la cascade signalétique contrôlée par le facteur de transcription Nrf2 (Nuclear factor Erythroid 2-related factor 2). Nrf2 joue un rôle crucial dans l’induction de l’expression de nombreux gènes codant pour les enzymes de phase II telles que : hème oxygénase 1, glutathion-S-transférases, catalase, superoxyde dismutase, NADPH quinone oxydoréductase et époxyde hydrolase. Ces enzymes peuvent être impliquées dans les réponses anti-inflammatoires, antioxydantes et cytoprotectrices. En conditions normales, Nrf2 est séquestré dans le cytoplasme par son inhibiteur Keap1 (Kelch-like Ech-associated protein 1) où il est rapidement dégradé par le protéasome. En présence d’un stress oxydant, Nrf2 est libéré et transloque dans le noyau, où il hétérodimérise avec ses co-facteurs et se fixe sur les séquences régulatrices ARE (pour antioxidant responsive element) situées dans les promoteurs de plus d’une centaine de gènes dont ceux codant pour les enzymes de phase II. Nous avons démontré un lien entre la diminution de Nrf2 activée et la diminution de l’expression des enzymes de phase II dans les macrophages alvéolaires de patients atteints d'emphysème pulmonaire post-tabagique. Ce déficit pourrait être associé à une plus grande sensibilité des cellules aux infections microbiennes. Cependant, plusieurs études ont montré que la voie de signalisation Nrf2 pouvait jouer un rôle aussi bien bénéfique que délétère au cours des infections. Récemment, nous avons mis en évidence une augmentation de la bactéricidie des macrophages dérivés de la lignée THP1 après traitement par un activateur de Nrf2. Dans ces conditions, une activation des voies signalétiques contrôlées par Nrf2 et p38 MAPK conduisait à une apoptose cellulaire et une diminution de la prolifération bactérienne dans les macrophages. L’objectif principal de ce projet de thèse est de déterminer l’intérêt thérapeutique de la modulation de la voie de signalisation Nrf2 en pathologie respiratoire, en utilisant des activateurs pharmacologiques et non pharmacologiques. Objectifs du projet : - Caractériser in vitro et in vivo des effets moléculaires, cellulaires et physiologiques de la modulation de Nrf2 par des traitements pharmacologiques et non pharmacologiques ; - Comprendre les mécanismes impliqués dans la réponse immunitaire des macrophages après activation de la voie de signalisation Nrf2. Stratégies : 1. Utilisation de modèles cellulaires et murins (souris Nrf2-/-) après infection bactérienne 2. Utilisation de techniques moléculaires, cellulaires et physiologiquesState of the question: Respiratory infections are important in exacerbations in chronic respiratory diseases (COPD, asthma, respiratory failure of neuromuscular diseases). These exacerbations lead to increased morbidity and mortality, a deterioration in the quality of life and an increase in health spending. In direct contact with the external environment, the respiratory tract and lungs are the primary target of airborne contaminants such as oxidants from air pollutants and microbial agents. Inflammatory cells (macrophages and neutrophils) react to microbial attack by increasing their production of oxidants. Excess oxidants well known bactericidal effect but can lead to cell death of the respiratory system, including apoptosis. To address this oxidative stress, the host cells activate many antioxidant defenses of which is the signaling cascade controlled by the Nrf2 transcription factor (Nuclear factor Erythroid 2-related factor 2). Nrf2 plays a crucial role in the induction of the expression of numerous genes encoding phase II enzymes such as heme oxygenase 1, glutathione S-transferase, catalase, superoxide dismutase, NADPH quinone oxidoreductase and epoxide hydrolase. These enzymes may be involved in anti-inflammatory responses, antioxidant and cytoprotective. Under normal conditions, Nrf2 is sequestered in the cytoplasm by the inhibitor Keap1 (Kelch-like Ech-associated protein 1) where it is rapidly degraded by the proteasome. In the presence of oxidative stress, Nrf2 is released and translocates into the nucleus, where it heterodimerizes with its co-factors and binds to the regulatory sequences ARE (for antioxidant responsive element) located in the promoters of more than one hundred genes including those coding for the phase II enzymes. We have shown a link between the activated reduction of Nrf2 and the decrease in the expression of phase II enzymes in alveolar macrophages from patients with post-smoking pulmonary emphysema. This deficit may be associated with a greater cell sensitivity to microbial infections. However, several studies have shown that Nrf2 signaling pathway may play a beneficial role as well as deleterious during infections. Recently, we have demonstrated an increase in macrophage bactericidal derivatives THP1 line after processing by Nrf2 activator. Under these conditions, activation of the signaling pathways controlled by Nrf2 and p38 resulted in cellular apoptosis and a decrease in bacterial growth in macrophages. The main objective of this thesis project is to determine the therapeutic value of the modulation of Nrf2 signaling pathway in respiratory diseases, using pharmacological and non-pharmacological activators. The project's objectives : - Characterize in vitro and in vivo effects of molecular, cellular and physiological modulation of Nrf2 by pharmacological and non-pharmacological treatments; - Understanding the mechanisms involved in the immune response of macrophages after activation of the Nrf2 signaling pathway. strategies: 1. Use of cell and mouse models (mouse Nrf2 - / -) after bacterial infection 2. Using molecular techniques, cellular and physiological
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Apopa, Patrick L. "Molecular mechanisms of nuclear factor-erythroid-2 related factor 2 (Nrf2) regulation phosphorylation by casein kinase 2 (CK2) and interaction with proto-oncogene N-Myc in neuroblastoma cells /." Morgantown, W. Va. : [West Virginia University Libraries], 2007. https://eidr.wvu.edu/etd/documentdata.eTD?documentid=5146.
Full textAbstract:
Thesis (Ph. D.)--West Virginia University, 2007.Title from document title page. Document formatted into pages; contains vi, 130 p. : ill. (some col.). Includes abstract. Includes bibliographical references.
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Corssac, Giana Blume. "Efeitos do sulforafano em parâmetros de estresse oxidativo em cultura de cardiomiócitos adultos." reponame:Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da UFRGS, 2017. http://hdl.handle.net/10183/165287.
Full textAbstract:
O sulforafano (SFN) é um composto natural que possui propriedades antioxidantes, estimulando, principalmente, o sistema antioxidante endógeno celular. Este composto está associado a uma via clássica de ativação, a via do fator eritroide nuclear tipo 2 (Nrf2). Entretanto, estudos mais recentes têm demonstrado que a ação do SFN também pode se dar pela via do coativador 1-alfa do receptor ativado por proliferador do peroxissoma (PGC-1α). A diferença da via de ativação pelo SFN parece ter relação com o tempo de exposição das células a este composto. Visto que o SFN é uma importante estratégia terapêutica no combate ao estresse oxidativo, que está relacionado ao desenvolvimento de diversas doenças cardiovasculares, a investigação do seu mecanismo de ação é necessária. A análise in vitro é uma ferramenta importante para a investigação das vias e tempos de incubação envolvidos na ação antioxidante do SFN. Sendo assim, a cultura primária de cardiomiócitos de ratos adultos é um dos modelos que pode ser utilizado, sendo a sua principal vantagem, o fato da fisiologia destas células se aproximar mais das condições fisiológicas in vivo. O objetivo deste estudo, então, foi analisar a estimulação de defesas antioxidantes feita pelo SFN, através das vias do Nrf2 e do PGC-1α, em tempos diferentes, utilizando a técnica de cultura de cardiomiócitos adultos. Ratos Wistar machos foram eutanasiados, para que seus corações fossem retirados e submetidos ao processo de isolamento de células cardíacas, em aparelho de Langendorff modificado. As células foram isoladas através da perfusão do coração com solução de Krebs e colagenase tipo II, por um período de 30 minutos. Após isso, as células isoladas foram plaqueadas e mantidas em incubadora a 37°C e 5% de CO2. Foi realizado o tratamento com 5 μM de SFN e/ou 5 μM de peróxido de hidrogênio (H2O2). As células foram divididas nos seguintes grupos experimentais: Controle, SFN, H2O2 e SFN+H2O2. Os grupos foram subdivididos em dois tempos de incubação: 1 e 24 horas. Foram realizadas as análises dos níveis totais de espécies reativas de oxigênio (ROS) e de lipoperoxidação (LPO); atividade das enzimas antioxidantes superóxido dismutase (SOD), catalase (CAT) e glutationa s-transferase (GST); expressão proteica das isoformas citosólica (SOD-1) e mitocondrial (SOD-2) da SOD, e dos fatores Nrf2 e PGC-1α. Os resultados do trabalho mostram que, em relação ao tempo de 1 hora, o SFN incubado por 24 horas aumentou em 59% a atividade da SOD, 55% a expressão proteica da SOD-1, 24% a expressão proteica da SOD-2 e 69% a expressão proteica do PGC-1α. A expressão do Nrf2 foi 17% maior no tempo de 1 hora, em relação a 24 horas. Em relação à atividade da catalase e aos níveis de ROS e de LPO, houve diferença somente nos grupos incubados por 1 hora, nos quais a atividade da CAT foi menor no grupo H2O2, os níveis de ROS estavam diminuídos no grupo SFN, e os níveis de LPO estavam maiores no grupo H2O2. Não foram encontradas diferenças em relação à atividade da GST. Como conclusão, o SFN demonstrou um papel protetor nos grupos 1 hora, impedindo a geração de ROS e de dano a lipídeos, apesar de não apresentar um efeito expressivo sobre as enzimas antioxidantes. O efeito dos tempos de incubação na expressão do Nrf2 (aumentada em 1 hora) e do PGC-1α (aumentada em 24 horas) mostrou que realmente há uma relação temporal entre a sinalização destas duas vias, ativadas pelo SFN. Este resultado é instigante para que futuras análises dessa relação temporal das vias do SFN sejam realizadas.Sulforaphane (SFN) is a natural compound that has antioxidant properties, mainly stimulating the endogenous cellular antioxidant system. This compound is associated with a classical pathway of activation, the nuclear erythroid factor 2 (Nrf2) pathway. However, more recent studies have shown that the action of SFN can also occur through the peroxisome proliferator-activated receptor coactivator 1-alpha (PGC-1α). The difference in the pathway of activation by SFN seems to be related to the time of exposure of the cells to this compound. Since SFN is an important therapeutic strategy in the fight against oxidative stress, which is related to the development of various cardiovascular diseases, the investigation of its mechanism of action is necessary. In vitro analysis is an important tool for investigating the pathways and incubation times involved in the antioxidant action of SFN. Thus, a primary culture of adult mouse cardiomyocytes is one of the models that can be used, the main advantage being that the physiology of these cells are closer to the physiological conditions in vivo. The objective of this study was to use adult cardiomyocyte culture technique to analyze the stimulation of antioxidant defenses by SFN through Nrf2 and PGC-1α pathways at different times. Male Wistar rats were euthanized, so that their hearts were removed and submitted to the process of isolation of cardiac cells, in modified Langendorff apparatus. Cells were isolated by perfusion of the heart with Krebs solution and type II collagenase for a period of 30 minutes. After that, the isolated cells were plated and incubated at 37°C and 5% CO2. Treatment was performed with 5μM SFN and/or 5μM hydrogen peroxide (H2O2). Cells were divided into the following experimental groups: Control, SFN, H2O2 and SFN+H2O2. The groups were subdivided into two incubation times: 1 and 24 hours. Analyzes of total oxygen reactive species (ROS) and lipoperoxidation (LPO) levels were performed; activity of antioxidant enzymes superoxide dismutase (SOD), catalase (CAT) and glutathione s-transferase (GST); protein expression of citosolic (SOD-1) and mitochondrial (SOD-2) isoforms of SOD, as well as Nrf2 and PGC-1α factors. The results of this work show that, compared to 1 hour time, SFN incubated for 24 hours increased SOD activity by 59%, SOD-1 protein expression by 55%, SOD-2 protein expression by 24%, and 69% PGC-1α protein expression. Expression of Nrf2 was 17% higher at 1 hour, over 24 hours of incubation. Regarding catalase activity and ROS and LPO levels, there were differences only in the groups incubated for 1 hour, in which the CAT activity was lower in H2O2 group, the ROS levels were decreased in SFN group, and levels of LPO were higher in H2O2 group. No differences were found in relation to GST activity. In summary, SFN demonstrated a protective role in 1 hour groups, preventing generation of ROS and lipid damage, although it does not present an expressive effect on the expression of antioxidant enzymes. The effect of incubation times on expression of Nrf2 (increased by 1 hour) and PGC-1α (increased by 24 hours) showed that there is actually a temporal relationship between the signaling of these two pathways, activated by SFN. This result is instigating for future analyzes of this temporal relationship of SFN pathways to be performed.
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Cabrié, Aimeric. "Coopération entre les isoformes TAp73 et la signalisation TGF-β dans la régulation de l'expression de la NO Synthase inductible." Thesis, Université Paris-Saclay (ComUE), 2017. http://www.theses.fr/2017SACLS397/document.
Full textAbstract:
Le monoxyde d’azote (NO) est une molécule gazeuse synthétisée par les NO Synthases à partir de L-arginine. NO est une puissante molécule de signalisation dans de nombreux processus physiologiques comme la vasodilatation et la neurotransmission. Il module l’activité de multiples protéines (ex : guanylate cyclase soluble et ribonucléotide réductase) grâce à la nitrosylation de groupements thiol ou de métaux de transition. En tant que radical libre, NO peut réagir avec de nombreuses espèces comme l’oxygène moléculaire, et ainsi former des dérivés réactifs. Grâce à ces propriétés, NO est un acteur majeur de l’immunité innée et de l’inflammation. Les phagocytes produisent de grandes quantités de NO en réponse à des stimuli proinflammatoires, via l’activité NO Synthase inductible (iNOS). En raison des effets délétères des dérivés de NO, l’activité iNOS doit être finement régulée. Le suppresseur de tumeur p53 est capable de réprimer l’expression du gène Nos2 après avoir été lui-même activé en réponse à une accumulation de NO. La protéine p73 est un homologue de p53 encodé par un gène qui génère à la fois des isoformes actives (TAp73) et des isoformes qui sont dépourvues du domaine de transactivation N-terminal et exercent un effet dominant négatif (ΔNp73). Cette étude se focalise sur le rôle des isoformes TAp73 dans la régulation de l’expression de la iNOS. Nous démontrons que les isoformes TAp73 régulent négativement l’expression de la iNOS aux niveaux transcriptionnel et post-traductionnel en potentialisant l’effet répresseur du TGF-β, ce qui résulte en une forte surexpression de la iNOS dans les cellules TAp73-/-. Ces résultats confortent le rôle de la famille p53 comme un réseau essentiel de protéines régulatrices des fonctions du TGF-βNitric oxide (NO) is a gaseous molecule synthesized from L-arginine by Nitric Oxide Synthases. NO acts as a potent signaling molecule in various physiological processes like vasorelaxation and neurotransmission. It modulates the activity of many proteins (e.g. soluble guanylate cyclase and ribonucleotide reductase) through nitrosylation of thiol moieties or transition metal ions. As a free radical, NO can also react with a number of cellular species, notably molecular oxygen, to form reactive oxygen species and reactive nitrogen species. Thanks to these properties, NO appears as a major component of innate immune response and inflammation. Phagocytes produce large amounts of NO in response to proinflammatory through inducible Nitric Oxide Synthase (iNOS) activity. Because of the harmful effects of NO derivatives on cellular components, iNOS activity needs to be tightly regulated. The p53 tumor suppressor has been shown to repress Nos2 after being activated by NO itself. The p73 protein is an homologous encoded by the TP73 gene that generate transcriptionally active TAp73 isoforms and ΔNp73 isoforms that lack the transactivation domain and exert a dominant negative effect. This study focuses on the role of TAp73 isoforms in regulation of iNOS expression. We demonstrate that TAp73 isoforms potentiate the repressive effect of TGF-β on iNOS expression at transcriptional and post-traductional levels, resulting in a substantial iNOS overexpression in TAp73-/- cells. These results emphasize the emerging role of p53 family as a master regulator of TGF-β functions
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El, ali Zeina. "Rôle du facteur de transcription Nrf2 dans le contrôle de l'allergie cutanée en réponse aux molécules allergisantes." Thesis, Paris 11, 2013. http://www.theses.fr/2013PA114847/document.
Full textAbstract:
Les réactions allergiques telles que les réactions d’hypersensibilité de contact (HSC) sont un problème de santé publique. Il s’agit d’une réaction inflammatoire aiguë qui survient suite à des expositions répétées d’une molécule allergisante avec la peau et dans laquelle les cellules dendritiques (DC) jouent un rôle essentiel. Les composés chimiques tels que le dinitrochlorobenzène (DNCB) ou le cinnamaldéhyde (CinA), responsables d'HSC, sont capables d’induire un stress chimique et de produire des espèces réactives de l’oxygène (ERO). Parmi les voies de détoxication en réponse aux xénobiotiques, la voie Nrf2/Keap1 est une voie centrale connue pour la détection de composés électrophiles. A l’état basal et en absence de stress, Nrf2 est couplé à son répresseur cytosolique Keap1 qui assure sa dégradation via le protéasome. En présence d’un stress chimique, Nrf2 transloque dans le noyau et induit l’expression des gènes antioxydants [hème-oxygénase 1 (ho-1), NADPH quinone oxydoréductase (nqo1), glutathione-s-transférase (gst)]. En absence de Nrf2, nous avons montré que le DNCB et le CinA induisent la mort cellulaire des DC via l'activation des caspases impliquées dans la voie mitochondriale ou intrinsèque de l'apoptose. Cette mort cellulaire induite par le DNCB est ERO dépendante tandis que celle induite par le CinA est moins sensible à la production des ERO. En présence de Nrf2, la survie des DC est régulée par l'expression de bcl-2, un gène antiapoptotique, et des gènes antioxydants. Nrf2 semblerait activer ou réprimer la transcription des gènes et ce en fonction de la molécule testée, du temps de traitement. Par ailleurs, nous avons également montré que Nrf2 joue un rôle clef dans les phases de sensibilisation et d'élicitation de la réaction d'HSC mais également au cours de l'irritation. Des transferts adoptifs de DC ont permis de montrer le rôle clef de Nrf2 dans la DC au cours de l'HSC. Enfin, notre étude montre que Nrf2 régule les Treg au niveau du tissu cutané et participe à la tolérance cutanéeAllergic reactions such as contact hypersensitivity (CHS) are a problem of public health occurring after repeated exposures to contact sensitizers. CHS is a common skin disease involving dendritic cells (DC) playing a key role in this pathology. Contact sensitizers, like dinitrochlorobenzene (DNCB) or cinnamaldehyde (CinA) are known to induce reactive oxygen species (ROS) production. The Nrf2/Keap1 pathway is central for detoxification. In the absence of a chemical stress, Keap1 associates with Nrf2 and leading to its degradation. In the presence of an electrophilic compound like contact sensitizers, Keap1’s conformation is modified leading to Nrf2 translocation to the nucleus and transcription of its target genes [heme-oxygénase 1 (ho-1), NADPH quinone oxydoreductase (nqo1), glutathione-s-transferase (gst)]. We showed, for the first time, that Nrf2 controls the loss of mitochondrial membrane potential and caspase-3/7 activity in DC activated by contact sensitizers. In the absence of Nrf2, DNCB and CinA induced DC apoptosis via caspase activation involved in intrinsic pathway of apoptosis also called ‘mitochondrial pathway’. This apoptosis was mainly mediated by the production of ROS in response to DNCB. However, ROS faintly control CinA-induced cell death. We also showed that Nrf2 controls the transcription of the anti-apoptotic gene bcl-2 in response to DNCB or CinA and also the transcription of immune related and antioxidant genes that could be implicated in DC apoptosis.Otherwise, we also showed that Nrf2 plays a key role in sensitization and elicitation phases of CHS and even in the irritation phase. Adoptive transfer experiments showed that Nrf2 plays a crucial role in DC during CHS.Finally, we showed that Nrf2 regulates skin Treg and participates to skin tolerance
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Page, Audrey. "Etude de la modulation de la réponse cellulaire au stress oxydatif par les protéines VP24 des virus Marburg et Ebola." Phd thesis, Ecole normale supérieure de lyon - ENS LYON, 2012. http://tel.archives-ouvertes.fr/tel-00671994.
Full textAbstract:
Les virus Ebola (EBOV) et Marburg (MARV) causent des fièvres hémorragiques chez les primates, y compris l'homme. Le taux de létalité peut atteindre 90% et il n'existe ni vaccin ni traitement contre ces virus. En raison de leurs caractéristiques moléculaires communes, EBOV et MARV sont regroupés au sein de la famille des Filoviridae. Le virion est composé de 7 protéines, dont la VP24, qui joue un rôle important dans l'assemblage et la condensation des nucléocapsides, et pour EBOV, elle est également responsable de l'inhibition de la réponse à l'IFN. Des mutations dans la séquence protéique de VP24 sont impliquées dans le processus d'adaptation chez un nouvel hôte. La protéine VP24 d'EBOV est donc multifonctionnelle. Pour MARV, cette protéine ne semble pas porter les fonctions décrites pour la VP24 d'EBOV. Afin de comprendre le rôle de la VP24 de MARV, nous avons identifié ses partenaires cellulaires par un crible double-hybride en levures. Nous avons mis en évidence l'interaction entre Keap1 et la VP24 de MARV, et confirmé ce résultat en cellules mammifères. Keap1 est une protéine impliquée dans le contrôle de la réponse au stress oxydatif, car elle inhibe le facteur de transcription Nrf2, qui régule l'expression d'enzymes impliquées dans la réduction des ERO. Nos résultats montrent que le domaine de Keap1 liant la VP24 est le même que celui liant Nrf2, et que la VP24 de MARV active Nrf2 pour la synthèse de molécules anti-oxydantes. Nous avons enfin évalué l'impact de la VP24 de MARV sur ERR, une autre cible de Keap1, et mesuré l'activité Nrf2 au cours de l'infection par EBOV. Nos résultats montrent des effets opposés des VP24 d' EBOV et de MARV sur l'activité de Nrf2.
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Lee, Tung-Liang, and 李棟樑. "Regulation of Transcription Activator NF-E2." Thesis, 2008. http://ndltd.ncl.edu.tw/handle/00934891716230702552.
Full textAbstract:
博士國防醫學院
生命科學研究所
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Precise regulation of the cellular amount and relative activity is important for a group of specific transcription factors to coordinate cell proliferation and differentiation in erythroid and megakaryocytic lineages. In this study, I have characterized the role of ubiquitination of p45, the large subunit of mammalian NF-E2, in its catabolism and activity regulation. I demonstrated that the active JNK interacted with p45 and phosphorylated p45 at Ser 157 for promote p45 degradation via ubiquitin-proteasome pathway. Six lysine residues of p45 are found to be potential in vivo ubiquitination sites for proteasomal degradation. Interestingly, one of these ubiquitination sites, the Lys368, also can be modified by SUMO that is important for the increase of the p45 activity after MEL cells differentiation. Significantly, the active JNK-induced degradation of p45 exists only in undifferentiation MEL cells, but not in differentiated MEL cells in which JNK is inactivated upon DMSO induction. Based on the above and ChIP analysis of chromatin-binding, I suggest a homeostatic model in which the post-translational modifications and turn-over of p45/NF-E2, as mediated by P-JNK, contribute to the control of the homeostatic concentrations of different transcription factors including p45, for erythroid gene regulation and the progression of erythroid differentiation.
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Shyu, Yu-Chiau, and 徐于喬. "Regulation of Transcription Activator NF-E2 by Sumoylation." Thesis, 2005. http://ndltd.ncl.edu.tw/handle/51902785480833816892.
Full textAbstract:
博士國立陽明大學
遺傳學研究所
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NF-E2 is a transcription activator for the regulation of a number of erythroid- and megakaryocytic lineage-specific genes. Here I present evidence that the large subunit of mammalian NF-E2, p45, is sumoylated in vivo, in human erythroid K562 cells and in mouse fetal liver. By in vitro sumoylation reaction and DNA transfection experiments, I show that the sumoylation occurs at lysine 368 (K368) of human p45/NF-E2. Furthermore, p45 sumoylation enhances the transactivation capability of NF-E2, and this is accompanied by an increase of the NF-E2 DNA-binding affinity. More interestingly, I have found that in K562 cells, the β-globin gene loci in the euchromatin regions are predominantly colocalized with the nuclear bodies promyelocytic leukemia protein (PML) oncogenic domains (PODs) that are enriched with the PML, SUMO-1, RNA polymerase II and sumoylatable p45/NF-E2. Chromatin immunoprecipitation assay (ChIP) further showed that intact sumoylation site of p45/NF-E2 is required for its binding to the DNase I hypersensitive sites (HS) of the β�n-globin locus-control-region (β-LCR). Finally, I demonstrated by stable transfection assay that only the wild type p45, but not its mutant form p45 (K368R), could efficiently rescue the β-�nglobin gene expression in the p45-null, erythroid cell line CB3. These data together point to a model of mammalian β-like globin gene activation by sumoylated p45/NF-E2 in erythroid cells.
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Rölz, Roland [Verfasser]. "Silencing NF-E2 - Silencing Polycythämia Vera? / vorgelegt von Roland Rölz." 2010. http://d-nb.info/1010874942/34.
Full text
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Hsu, Ting-Yin, and 徐亭茵. "ITCH dependent ubiquitination of P45, a NF-E2 tissue-restricted subunit." Thesis, 2005. http://ndltd.ncl.edu.tw/handle/94889696555879990337.
Full textAbstract:
碩士國立陽明大學
遺傳學研究所
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The human α-like and β-like globin loci are located on chromosomes 16 and 11, respectively. During development, individual globin genes expressed at unique time to produce developmental stage-specific hemoglobin molecules. Hemoglobinopathies are a group of inherited disorders characterized by the deficiency of functional α-like or β-like globin chains. Sickle-cell anemia and β-thalassemias are two of the most common hemoglobinopathies. These diseases cause major health problems which are associated with severe morbidity, lower-than-average life expectancy, and serious, long-term disability. In this regard, understanding the regulatory mechanism of globin expression can pave the way to discover the suitable therapies for these disorders. NF-E2 (nuclear factor-erythroid 2) is one of the transcription factors that bind the globin gene promoter and regulatory element (Jane and Cunningham, 1996; Ney et al., 1990; Talbot et al., 1990), and it may also be a general globin gene expression initiator with a role in LCR and globin promoter chromatin activation. NF-E2 is a heterodimer composed of two subunits: p45 and p18 (Andrews et al., 1993). The larger subunit, p45 NF-E2, which is tissue-restricted and is expressed primarily in hematopoietic cells (Andrews et al., 1993), has a transactivation domain at its N terminus. The purpose of this study is to determine whether p45, a tissue-restricted and the activity subunit of NF-E2, can be modified by ubiquitination through a HECT type E3 ligase, ITCH. ITCH is characterized by its HECT domain, and its ubiquitin E3 ligase activity. Our results indicated that ITCH may interact with p45 NF-E2 and mediate p45 ubiquitination. Ubiquitination attenuates the p45 transactivation activity, resulting in down regulation of globin gene expression.
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Wang, Wei [Verfasser]. "Molecular etiology of NF-E2 overexpression in myeloproliferative neoplasms (MPNs) / vorgelegt von Wei Wang." 2010. http://d-nb.info/1008283592/34.
Full text
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Imbeault, Sophie. "Overexpression of NF-E2 related factor 2 via viral-mediated gene transfer in vivo." Thesis, 2005. http://hdl.handle.net/2429/16531.
Full textAbstract:
The transcription factor NF-E2 related factor 2 (Nrf2) is responsible for the upregulation of the cellular anti-oxidant defence system. Upon stimulation by free radicals or reactive oxygen species (ROS), the cytoplasmic-bound Nrf2 translocates to the nucleus and initiates transcription of genes containing anti-oxidant response elements (AREs) within their promoter region. Many ARE-containing genes contribute to the maintenance of redox homeostasis within the cell thus promoting cell survival. To date, limited work has been done looking at Nrf2-mediated neuroprotection in vivo. Here, we use viral-mediated gene delivery via stereotaxic injection into the adult Wistar rat brain in order to overexpress Nrf2. We exploit the capacity of 3-nitropropionic acid (3-NP) to produce ROS in order to provide an oxidative challenge to our animals. Histological analyses show reduced lesion size (lesions are ∼55 % smaller than controls, p<0.05) and increased cell number (125% and 155% for ipsi- and contralateral hemispheres, respectively, p<0.001) in Nrf2 infected animals versus green fluorescent protein infected controls. Using the same viral-gene transfer technique, we also show a significant accumulation of the Nrf2 target xCT, a cystine/glutamate antiporter, on the apical membrane of ependymal cells (200% mean pixel intensity of the basolateral membrane, p<0.001). This supports the hypothesis xCT is important in maintaining cerebrospinal fluid and extracellular fluid redox state. The inability to properly process free radicals is present in many neuropathological processes (i.e. stroke). Targeting the Nrf2 pathway or its downstream gene targets may help treat and provide prophylaxis for some of these conditions.Medicine, Faculty of
Graduate
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Bürge, Martina [Verfasser]. "Die Rolle des Transkriptionsfaktors NF-E2 in der Entstehung der Erythrozytose und Thrombozytose myeloproliferativer Erkrankungen / vorgelegt von Martina Bürge." 2009. http://d-nb.info/1011094355/34.
Full text
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Hajj, Hassan Houssein. "Établissement d'une lignée cellulaire pro-érythroïde de souris : outil d'étude de la régulation transcriptionnelle des gènes de globine." Thèse, 2004. http://hdl.handle.net/1866/14663.
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Mutschler, Manuel [Verfasser]. "Untersuchung der modulierten Expression des Transkriptionsfaktors NF-E2 in humanen und murinen hämatopoetischen Stamm- und Progenitorzellen sowie seiner pathophysiologischen Rolle in der Entstehung der Polyzythämia vera / vorgelegt von Manuel Mutschler." 2009. http://d-nb.info/998933848/34.
Full text
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Ross, Julie. "Étude de la collaboration entre les facteurs de transcription hématopoïétiques lors du développement et de la différenciation des cellules érythroïdes." Thèse, 2011. http://hdl.handle.net/1866/6174.
Full textAbstract:
La régulation transcriptionnelle des gènes est cruciale pour permettre le bon fonctionnement des cellules. Afin que les cellules puissent accomplir leurs fonctions, les gènes doivent être exprimés adéquatement dans le bon type cellulaire et au stade de développement et de différenciation approprié. Un dérèglement dans l’expression de un ou plusieurs gènes peut entraîner de graves conséquences sur le destin de la cellule. Divers éléments en cis (ex : promoteurs et enhancers) et en trans (machinerie transcriptionnelle et facteurs de transcription) sont impliqués dans la régulation de la transcription.
Les gènes du locus humain beta-globine (hub) sont exprimés dans les cellules érythroïdes et sont finenement régulés lors du développement et de la différenciation. Des mutations dans différentes régions du locus causent entre autres les beta-thalassémies. Nous avons utilisé ce modèle bien caractérisé afin d’étudier différents mécanismes de régulation favorisés par les facteurs de transcription qui sont exprimés dans les cellules érythroïdes. Nous nous sommes intéressés à l’importance de l’élément en cis HS2 du Locus control region. Cet élément possède plusieurs sites de liaison pour des facteurs de transcription impliqués dans la régulation des gènes du locus hub. Nos résultats montrent que HS2 possède un rôle dans l’organisation de la chromatine du locus qui peut être dissocié de son rôle d’enhancer. De plus, HS2 n’est pas essentiel pour l’expression à haut niveau du gène beta alors qu’il est important pour l’expression des gènes gamma. Ceci suggère que le recrutement des différents facteurs au site HS2 lors du développement influence différement les gènes du locus.
Dans un deuxième temps, nous avons investigué l’importance de HS2 lors de la différenciation des cellules érythroïdes. Il avait été rapporté que l’absence de HS2 influence grandement la potentialisation de la chromatine du gène beta. La potentialisation dans les cellules progénitrices favorise l’activation transcriptionnelle du gène dans les cellules matures. Nous avons caractérisé le recrutement de différents facteurs de transcription au site HS2 et au promoteur beta dans les cellules progénitrices hématopoïétiques (CPH) ainsi que dans les cellules érythroïdes matures. Nos résultats montrent que le facteur EKLF est impliqué dans la potentialisation de la chromatine et favorise le recrutement des facteurs BRG1, p45 et CBP dans les CPH. L’expression de GATA-1 dans les cellules érythroïdes matures permet le recrutement de GATA-1 au locus hub dans ces cellules. Ces données suggèrent que la combinaison de EKLF et GATA-1 est requise pour permettre une activation maximale du gène beta dans les cellules érythroïdes matures.
Un autre facteur impliqué dans la régulation du locus hub est Ikaros. Nous avons étudié son recrutement au locus hub et avons observé que Ikaros est impliqué dans la répression des gènes gamma. Nos résultats montrent aussi que GATA-1 est impliqué dans la répression de ces gènes et qu’il interagit avec Ikaros. Ensemble, Ikaros et GATA-1 favorisent la formation d’un complexe de répression aux promoteurs gamma. Cette étude nous a aussi permis d’observer que Ikaros et GATA-1 sont impliqués dans la répression du gène Gata2. De façon intéressante, nous avons caractérisé le mécanisme de répression du gène Hes1 (un gène cible de la voie Notch) lors de la différenciation érythroïde. Similairement à ce qui a été observé pour les gènes gamma, Hes1 est aussi réprimé par Ikaros et GATA-1. Ces résultats suggèrent donc que la combinaison de Ikaros et GATA-1 est associée à la répression de plusieurs de gènes dans les cellules érythroïdes.
Globalement cette thèse rapporte de nouveaux mécanismes d’action de différents facteurs de transcription dans les cellules érythroïdes. Particulièrement, nos travaux ont permis de proposer un modèle pour la régulation des gènes du locus hub lors du développement et de la différenciation. De plus, nous rapportons pour la première fois l’importance de la collaboration entre les facteurs Ikaros et GATA-1 dans la régulation transcriptionnelle de gènes dans les cellules érythroïdes. Des mutations associées à certains des facteurs étudiés ont été rapportées dans des cas de beta-thalassémies ainsi que de leucémies. Nos travaux serviront donc à avoir une meilleure compréhension des mécanismes d’action de ces facteurs afin de potentiellement pouvoir les utiliser comme cibles thérapeutiques.Gene transcriptional regulation is crucial for appropriate cell functioning. Genes must be properly expressed in the right cell type as well as at the right developmental and differenciation stage in order to allow the cells to accomplish their functions. Abnormal expression of one or many genes can dramatically influence cell fate. Diverse cis (ex : promoters and enhancers) and trans (transcriptional machinery and transcription factors) elements are involved in transcriptional regulation. Genes of the human beta-globin (hub) locus are expressed in erythroid cells and are thightly regulated during development and differentiation. Mutations in several regions of the locus are involved in beta-thalassemia. We used this well characterized model in order to study different regulation mechanisms that are mediated by transcription factors expressed in erythroid cells. We were interested in the important role of the cis element HS2 from the Locus control region. This region contains several binding sites for transcription factors that are involved in hub locus gene regulation. Our results show that HS2 has a role in chromatin organization of the locus which is distinct from its enhancer function. Moreover, HS2 is not essential for high level beta gene expression while it is important for gamma gene expression. This suggest that the influence of transcription factors recruited to HS2 varies during development. Secondly, we investigated HS2 importance during erythroid differentiation. It was reported the HS2 deletion strongly influences chromatin potentiation of beta gene. Potentiation in progenitor cells favors gene transcriptional activation in mature cells. We characterized transcription factor recruitment to HS2 and b promoter in hematopoietic progenitor cells (HPC). Our results show that EKLF is involved in chromatin potentiation and favors the recruitment of BRG1, p45 and CBP in HPC. GATA-1 expression in mature erythroid cells allows GATA-1 recruitment to hub locus in these cells. These data suggest that EKLF and GATA-1 combination is required to allow maximal beta gene activation in mature erythroid cells. Another factor involved in hub locus regulation is Ikaros. We studied its recruitment to hub locus and found that Ikaros is involved in gamma gene repression. Our data also shows that GATA-1 is involved in the repression of these genes and that it interacts with Ikaros. Together, Ikaros and GATA-1 favors the formation of a repressive complex to gamma promoters. In this study, we also observed that Ikaros and GATA-1 are involved in Gata2 gene repression. Interestingly, we have also characterized the repression mechanism of Hes1 gene (a Notch target gene) during erythroid differentiation. Similar to what is observed for gamma genes, Hes1 is also repressed by Ikaros and GATA-1. Collectivelly, our data suggest that Ikaros and GATA-1 combination is associated with the repression of several genes in erythroid cells. Globally, this thesis reports new mechanisms of action for different transcription factors in erythroid cells. Particularly, our work allows us to propose a model for hub locus gene regulation during development and differentiation. Moreover, we show for the first time that the combination of Ikaros and GATA-1 is relevant for gene regulation in erythroid cells. Several mutations in the transcription factors that we studied were associated with beta-thalassemia or leukemia. Our work will thus help to better understand mechanisms of action of these transcription factors in order to potentially use them as therapeutical targets.
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Bahia, P. K., Marcus Rattray, and R. J. Williams. "Dietary flavonoid (-)epicatechin stimulates phosphatidylinositol 3-kinase-dependent anti-oxidant response element activity and up-regulates glutathione in cortical astrocytes." 2008. http://hdl.handle.net/10454/9035.
Full textAbstract:
NoFlavonoids are plant-derived polyphenolic compounds with neuroprotective properties. Recent work suggests that, in addition to acting as hydrogen donors, they activate protective signalling pathways. The anti-oxidant response element (ARE) promotes the expression of protective proteins including those required for glutathione synthesis (xCT cystine antiporter, gamma-glutamylcysteine synthetase and glutathione synthase). The use of a luciferase reporter (ARE-luc) assay showed that the dietary flavan-3-ol (-)epicatechin activates this pathway in primary cortical astrocytes but not neurones. We also examined the distribution of NF-E2-related factor-2 (Nrf2), a key transcription factor in ARE-mediated gene expression. We found, using immunocytochemistry, that Nrf2 accumulated in the nuclei of astrocytes following exposure to tert-butylhydroquinone (100 microM) and (-)epicatechin (100 nM). (-)Epicatechin signalling via Nrf2 was inhibited by wortmannin implicating a phosphatidylinositol 3-kinase-dependent pathway. Finally, (-)epicatechin increased glutathione levels in astrocytes consistent with an up-regulation of ARE-mediated gene expression. Together, this suggests that flavonoids may be cytoprotective by increasing anti-oxidant gene expression.