Academic literature on the topic 'Marqueurs salivaires'

Les carcinomes épidermoïdes de la cavité orale sont le 17e cancer le plus fréquent dans le monde. Les facteurs de risque principaux sont l’alcool et le tabac mais des facteurs alimentaires, familiaux, génétiques ou certaines maladies orales peuvent intervenir dans la genèse de ces cancers. Le diagnostic est tardif, entraînant un pronostic sombre. De nouvelles approches, comme l’utilisation de l’intelligence artificielle ou de marqueurs biologiques salivaires pourraient réduire ces délais. La prise en charge actuelle de ces cancers repose sur la chirurgie, la chimiothérapie et la radiothérapie, mais avec une iatrogénie importante. Les immunothérapies pourraient devenir une alternative à ces traitements et certaines caractéristiques du microenvironnement immunitaire pourraient constituer un/des marqueurs pronostiques.

Des tissus post mortem (du cortex cérébral, de l’hippocampe, du cervelet, des ganglions trigéminaux et des glandes salivaires), fixés dans du formaldéhyde et inclus dans de la paraffine, de 25 chiens ont été obtenus dans un laboratoire de diagnostic vétérinaire du Nigeria et soumis à des tests de recherche de l’ARN et de l’antigène du virus de la rage. L’ARN génomique et l’ARN messager (ARNm) du virus de la rage codant pour la glycoprotéine ont été détectés dans les tissus par la technique d’hybridation in situ (HIS) en utilisant des sondes d’ARN à simple brin marquées au 3H. L’antigène du virus de la rage a été mis en évidence par immuno-marquage avec de la peroxydase et le complexe avidine-biotine. L’ARNm viral a été détecté dans les tissus en utilisant des sondes d’ARN marquées à la digoxigénine. Le diagnostic histopathologique par coloration à l’hématoxyline-éosine a révélé des corps de Negri dans les tissus de 8 (32 p. 100) chiens ; 5 (20 p. 100) autres chiens ont présenté des modifications inflammatoires dues à des encéphalites virales sans corps de Negri. L’antigène a été détecté chez 11 (44 p. 100) des chiens examinés, soit dans les tissus des 8 chiens chez lesquels des corps de Negri ont été observés, de 2 des 5 chiens ayant présenté des modifications inflammatoires et d’un chien sur les 12 dont l’histopathologie était négative. L’ARN génomique et l’ARNm ont été détectés dans les tissus de tous les chiens où se trouvait l’antigène, et la distribution des signaux colorant pour les deux méthodes dans les neurones et dans les acini des glandes salivaires a été similaire. L’ARNm était plus abondant que l’ARN génomique et les signaux radioactifs étaient distribués de manière diffuse dans les périkaryons et les processus dendritiques des neurones, et dans les acini et les canaux salivaires. L’ARNm a également été trouvé en abondance dans les neurones et dans les acini avec des sondes marquées à la digoxigénine ; la méthode était plus simple. Par ordre décroissant de quantités, les marqueurs de l’antigène et de l’ARNm étaient les plus nombreux, venaient ensuite ceux de l’ARN génomique et enfin ceux des corps de Negri et d’histopathologie. La méthode de coloration par immunoperoxydase et la technique HIS utilisant des sondes marquées à la digoxigénine peuvent permettre d’effectuer des recherches sur la rage et d’en établir le diagnostic, en particulier dans les pays en développement où cette maladie continue de poser un problème de santé publique de grande importance.

La salive est un formidable fluide biologique dont le prélèvement est non invasif et les potentialités avérées pour le diagnostic de pathologies systémiques sont très importantes. L'objectif de ce travail est double : mettre au point la technique de protéomique à partir de protéines extraites de salive humaine, puis réaliser une analyse différentielle des profils électrophorétiques de protéines salivaires de sujets sains et ceux de patients atteints de diabète de type 1. D'une part, l'analyse du protéome salivaire a montré que sur l'identification des 100 spots les plus abondants, plus de 50% étaient de l'alpha-amylase. L'étude approfondie des spectres de masses des spots identifiant l'alpha-amylase a montré la présence de nouvelles formes qui possèdent la partie C-terminale et N-terminale de la séquence de la protéine mais exhibent une masse moléculaire jusqu'à 50% inférieure à la masse moléculaire attendue sur un gel bidimensionnel. Cette forme alternative pourrait être la conséquence d'un épissage peptidique interne, probablement produit avant la sécrétion. D'autre part, l'utilisation de la protéomique pour la recherche préliminaire de marqueurs salivaires potentiels du diabète de type 1 nous a permis de mettre en évidence 4 protéines significativement sous-exprimées, toutes impliquées dans la défense non immune au niveau de la cavité buccale : salivary acidic protein-1, cystatine salivaire SA-1, alpha-amylase et prolactin induced protein.

Eviter la piqûre de moustiques vecteurs en utilisant des mesures antivectorielles reste le meilleur moyen de se protéger des maladies vectorielles. La salive de moustique peut induire une réponse anticorps (Acs) spécifique chez l’hôte qui pourrait être utilisé pour définir l'efficacité de ces mesures de protection antivectorielle. L’objectif de notre projet était d’évaluer la possibilité d’utiliser cette réponse Acs anti-salive de moustiques pour mesurer l’exposition à des espèces spécifiques de moustiques ainsi que d’identifier des marqueurs d’exposition. Nous nous sommes tout d’abord assurés de l’absence de différences intraspécifiques entre différentes colonies de moustiques, une condition indispensable pour pouvoir observer des différences au niveau de l’espèce. Par ailleurs, nous avons mis au point un protocole pour préserver les échantillons salivaires dans des conditions de terrains non optimales. A partir de ces expérimentations préliminaires, nous avons évalué la diversité du répertoire protéique salivaire de quatre espèces d’Anopheles par des différentes approches, et montré une spécificité de genre et d’espèce aussi bien au niveau protéique qu’antigénique. Enfin, nous avons montré une évolution spatio-temporelle de l’intensité de la réponse Acs anti-salive ainsi que sa spécificité de genre et d’espèce, chez des individus exposés à différents niveaux à Ae. caspius. Ces résultats souligne la possibilité de caractériser des antigènes salivaires spécifiques de genre et d’espèces qui peuvent avoir un intérêt pour mesurer le contact hôte/vecteur au niveau individuel, le risque de transmission de maladies vectorielles ou l’efficacité des mesures antivectorielles
The primary mean to protect individuals from arthropod-borne diseases is the prevention of bites from infected arthropods which could be achieved by vector control strategies. Mosquito saliva could induce a specific antibody response in exposed individuals that could be used to assess the effectiveness of anti-vector measures. The aim of this study is to assess the possibility to use anti-mosquito saliva antibody responses in order to evaluate the exposure to specific species of vectors and to identify salivary protein candidates that can be used as immunological markers of exposure. We first verify the lack of intraspecific differences among several mosquito colonies which is essential to further observe potential differences at the species level. Moreover, a convenient storage method was developed to preserve salivary samples in non optimal condition on the field. Based on these preliminary results, we evaluated the salivary gland protein repertory diversity among four Anopheles species using complementary approaches and we shown a genus and species specificity at the protein and antigen level. At least, a spatio-temporal evolution of anti-saliva antibody responses was shown according to the Aedes caspius density using sera of differentially exposed individuals. The specificity of this response was also reported at the genus and species level. All together, these results suggest the feasibility to characterize genus and species specific salivary antigens which could be used as immunological markers of exposure to evaluate host/vector contacts, the risk of vector-borne disease transmission or the effectiveness of anti-vector strategies

Les arbovirus transmis par les moustiques Aedes représentent un problème majeur de santé publique dans les pays du Sud et certains comme la dengue et le chikungunya risquent d'émerger dans les pays du Nord. La lutte contre ces maladies repose essentiellement sur le contrôle des populations de vecteurs. Pour un meilleur contrôle de ces arbovirus, beaucoup d'efforts sont déployés pour développer de nouveaux outils. La mesure de la réponse anticorps (Ac) de l'homme contre les protéines salivaires des arthropodes a été utilisée pour évaluer son exposition aux piqûres des vecteurs et estimer le risque de transmission des pathogènes. L'objectif de notre travail a été de valider par une approche immuno-épidémiologique le concept « réponse Ac anti salive comme bio-marqueur d'exposition aux Aedes ». Nous avons également évalué la spécificité de cette réponse par rapport aux populations exposées uniquement à Ae. aegypti ou Ae. albopictus. Dans un second volet, nous avons identifié les protéines salivaires d'Ae. albopictus impliquées dans cette réponse. Et enfin, nous avons évalué la potentialité d'utiliser ce bio-marqueur comme critère d'efficacité de la lutte anti vectorielle contre Ae. albopictus. Nos résultats montrent une corrélation entre la réponse Ac anti salive et l'intensité d'exposition aux vecteurs indiquant ainsi la pertinence de son utilisation comme bio-marqueur d'exposition aux piqûres des Aedes. Nous notons une faible réaction croisée de cette réponse Ac entre la salive d'Ae. aegypti et d'Ae. albopictus. Les protéines salivaires antigéniques d'Ae. albopictus identifiées sont essentiellement impliquées dans la prise du repas sanguin. L'utilisation de ce bio-marqueur a permis de détecter la baisse de la densité vectorielle après les mesures de lutte contre Ae. albopictus, suggérant son utilité pour mesurer l'efficacité des stratégies de contrôle. L'ensemble de ces travaux contribuent à une meilleure connaissance de l'interaction de l'homme avec les Aedes. L'identification de protéines/peptides spécifiques d'espèce permettrait d'améliorer l'utilisation de ce bio-marqueur
Aedes borne virus are considered to be public health problems in Southern countries while several such diseases like dengue and chikungunya threaten to emerge in the developed world. The control of these diseases is currently based on vector population control. Much effort is being devoted to develop new tools to control such arbovirus. Recent findings suggest that the evaluation of human antibody (Ab) response to arthropod salivary proteins is relevant to measure the level of human exposure to mosquito bites and to evaluate the risk of pathogen transmission. Using an immuno-epidemiological approach, the present study aimed to validate the concept “anti saliva Ab response, biomarker of Aedes exposure”. We evaluated the specificity of this Ab response according to populations only exposed to Ae. aegypti and Ae. albopictus, respectively. Ae. albopictus salivary proteins involved in this Ab response were also identified. We evaluated the usefulness of this biomarker for measuring the efficacy of Ae. albopictus control strategies. Our results showed a significant correlation between anti saliva Ab response and exposure level to vectors bites, thus indicating its usefulness as biomarker of Aedes exposure. We observed low Ab cross reactivity between Ae. aegypti and Ae. albopictus salivary gland extracts. The Ae. albopictus antigenic salivary proteins which were identified are mostly involved in blood feeding. The decrease of Ae. albopictus density after control measures has been detected by this biomarker, suggesting its usefulness for evaluating control strategies.This work contributes significantly to the study of human antibody response to Aedes salivary proteins which remains so far poorly documented. The identification of species specific salivary proteins/peptides should improve the use of this biomarker

La restriction des apports alimentaires est une méthode couramment utilisée pour perdre du poids dans les sports à catégories de poids. La réduction des apports caloriques se traduit par une activation des systèmes physiologiques du stress, au niveau central et périphérique, visant à préserver l’homéostasie énergétique. Néanmoins, l’influence sur les paramètres physiologiques, psychologiques et physiques reste controversée et ne permet pas de définir clairement un impact négatif de la restriction alimentaire sur la santé et le niveau de performance. L’objectif de ce travail était d’évaluer l’influence d’une restriction alimentaire sur les indicateurs psychophysiologiques du stress, ainsi que le niveau de performance chez des haltérophiles de haut niveau. Nos résultats ont montré que la restriction alimentaire ne modifiait pas le niveau de performance en haltérophilie, mais induisait une altération des paramètres psychologiques. La période de restriction alimentaire se traduisait par une dissociation de l’activité des systèmes physiologiques du stress, ainsi qu’une modification des réponses hormonales à une compétition simulée d’haltérophilie. Il reste à définir les répercussions à long terme de l’altération des paramètres psychophysiologiques sur la santé et la capacité de performance du sportif. Il serait également intéressant d'étudier l'influence de la restriction alimentaire sur le microbiote intestinal et les répercussions éventuelles sur l'axe intestin-cerveau
Restricting dietary intake is a widespread method for losing weight in weight categories sports. Reduction of calorie intake results in an activation of the physiological stress systems, both at central and peripheral levels, aiming at preserving energy homeostasis. Nevertheless, the influence on physiological, psychological and physical parameters remains controversial and do not allows to clearly defining a negative impact of dietary restriction on health and performance level. The objective of this study was to evaluate the influence of a dietary restriction period on the psychophysiological indicators of stress, as well as the level of performance in high-level weightlifters. Our results showed that dietary restriction did not modify weightlifting performance level, but resulted in an alteration of the psychological parameters. The dietary restriction period resulted in a dissociation of the activity of the physiological stress systems, as well as a modification of the hormonal responses to a simulated weightlifting competition. It remains to define the long-term impacts of the alteration of psychophysiological parameters on the athlete’s health and performance capacity. It would also be interesting to evaluate the influence of dietary restriction on intestinal microbiota and the possible influence on the gut-brain axis

Le virus West Nile,WNV est responsable de milliers de cas de morbidité et de mortalité chez les oiseaux, les chevaux et l’homme. Le WNV se transmet par des moustiques du genre Culex. Les méthodes entomologiques ne permettent pas l’évaluation individuelle directe du contact hôte/vecteur. 5 protéines salivaires de Culex ont été sélectionnées, produites, et évaluées comme des candidats antigéniques de l'exposition aux piqûres de Culex. Des sérums humains du sud de France exposés à des densités de Culex distinctes et des sérums de chevaux exposés à l'infection par le WNV ont été testés. Une protéine 30kD est reconnue par les chevaux exposés à Culex. Cependant, pas de différence de réponse d’anticorps n’a été observée entre les animaux faiblement et fortement exposés. Concernant les processus physiopathologiques de la maladie causée par le WNV, la cinétique des profils d'expression de protéines de l’hôte dans le cerveau de souris infectées par le WNV, a été étudiée sur des échantillons prélevés avant et après l’apparition des signes cliniques, en utilisant 2D-DIGE et iTRAQ. 148 protéines différentiellement exprimées. Les voies de signalisation altérées au cours de l'infection précoce et tardive ont été identifiées. Les profils protéiques de LCR de patients atteints de WNND et des individus témoins ont été comparés, en utilisant l’approche iTRAQ. 47 protéines ont été trouvées différemment exprimées chez les patients WNND. Un candidat potentiel biomarqueur, la Defensine-alpha1, a été évalué par ELISA sur des échantillons humains de LCR/sérum. Les biomarqueurs putatifs identifiés dans cette étude peuvent être un outil précieux d’évaluation de la mesure de la gravité du WNV
West Nile Virus,WNV is responsible for thousands of cases of morbidity and mortality in birds, horses and humans. WNV is transmitted mainly by mosquitoes by Culex species, to avian hosts. Entomological methods did not give direct individual evaluation of the host/vector contact. 5 salivary proteins from the Culex genus were selected for a production under recombinant forms for further evaluation as potential antigenic candidates of exposure to Culex bites. Sera from individuals living in south of France exposed to distinct Culex density and sera from horses exposed to WNV infection were tested. The recombinant protein30 kDa was recognized only by horses exposed to Culex. However, no difference of antibody response between low and high exposed to Culex. Concerning the pathophysiological processes of WNV disease, a kinetics host brain protein expression profiles of WNV-infected mice using samples collected prior and after clinical signs apparition was performed using proteomic approaches 2D-DIGE and iTRAQ. 148 distinct proteins was found altered following WNV infections. The functional signaling networks in samples collected during early and late infection have been identified. Un examination of CSF protein profiles between patients with neuroinvasive disease (WNND) and control individuals was performed using iTRAQ approach. 47 proteins were found differentially expressed in WNND patients compared to controls. A potential biomarker candidates, defensin-alpha1 was assessed by ELISA using other human paired CSF/serum samples. The putative biomarker identified in this study may potentially be a valuable tool in the assessment of the extent of WNV severity

Le paludisme et la trypanosomiase humaine africaine sont des problèmes majeurs de santé publique en Afrique sub-saharienne. La mesure de l'exposition des populations humaines aux piqûres des insectes vecteurs est un paramètre épidémiologique essentiel à définir dans le cadre de la lutte contre la transmission des maladies vectorielles. Dans ce contexte, par une approche immuno-épidémiologique et en exploitant les propriétés immunogéniques des protéines salivaires des insectes vecteurs, notre objectif était d'identifier et de valider des candidats salivaires permettant d'évaluer le risque d'exposition des populations humaines aux piqûres d'Anopheles spp. Et Glossina spp. Dans le cadre de la trypanosomiase humaine africaine, nous avons montré que la réponse IgG spécifique aux extraits salivaires totaux de glossines représente un marqueur d'exposition permettant de discriminer une personne exposée ou non aux piqûres des glossines. Par ailleurs, la composition en protéines salivaires immunogéniques des glossines semble dépendante de l'espère glossinienne (vectrice ou non) et leur immunogénicité chez les populations humaines semble dépendante du statut d'exposition (exposé ou non) et infectieux (infecté ou non) de ces individus. Dans le cadre du paludisme, nous avons identifié et validé le peptide gSG6-P1 spécifique d'Anopheles spp. Comme marqueur d'exposition à An. Gambiae par une approche originale basée sur des outils de bio-informatique et immuno-épidémiologiques. En complément, ce marqueur semble particulièrement adapté pour évaluer l'exposition des populations dans des contextes de faible densité anophélienne (paludisme urbain, paludisme d'altitude) et une première étape validant son utilité dans l'évaluation de l'efficacité des stratégies de lutte anti-vectorielle a été ainsi initiée. Cette thèse contribue à une meilleure connaissance des relations immunes homme-vecteur au cours de deux pathologies majeures. Cette approche pourrait être développée à d'autres maladies à transmission vectorielle émergentes ou ré-émergentes (arboviroses) tant dans les pays du Sud que du Nord.

Le paludisme constitue un problème majeur de santé publique en zone tropicale et subtropicale. La morbidité ainsi que la mortalité sont principalement dues au parasite Plasmodium falciparum transmis à l'homme par la piqûre de moustiques femelles du genre Anopheles. Dans le but d'orienter au mieux les stratégies d'élimination du paludisme et d'une meilleure évaluation de l'efficacité des méthodes de lutte, les indicateurs mesurant le risque de transmission doivent être plus sensibles. Il a été montré que la réponse anticorps humaine contre des protéines/peptides salivaires d'Anopheles représente un bio-marqueur d'exposition aux piqûres de moustiques et pouvait être un indicateur de la transmission du paludisme. Toutefois cet outil doit être optimisé. Ce travail a ainsi un double objectif : i) valider la protéine salivaire CE5 comme bio-marqueur d'exposition aux piqûres d'Anopheles et comme indicateur évaluant l'efficacité de stratégie de lutte anti-vectorielle, et 2) identifier de nouvelles protéines salivaires comme candidat bio-marqueur spécifique à l'exposition de l'homme aux seules piqûres infectantes d'Anopheles. Tout d'abord, nous avons démontré que la réponse anticorps IgG contre la protéine CE5 pourrait être un indicateur du contact homme-vecteur, complémentaire et très sensible, en mesurant l'exposition de l'homme aux piqûres d'Anopheles et un outil évaluant l'efficacité, à court terme, des moustiquaires imprégnées d'insecticide. Par la suite, les méthodes de protéomique 2D-DIGE et de spectrométrie de masse ont permis d'identifier cinq protéines salivaires (gSG6 , gSG1b , TRIO , SG5 et la forme longue D7) qui sont surexprimées dans les glandes salivaires d'An. gambiae infectées par P. falciparum. Des peptides de chaque protéine, définis in silico, apparaissent antigéniques chez des individus exposés aux piqûres d'Anopheles, après évaluation par la technique d'épitope mapping. L'ensemble de ces travaux est non seulement une première étape pour optimiser cet outil immuno-épidémiologique évaluant le contact homme-vecteur mais démontre également la possibilité de définir un nouveau bio-marqueur qui serait spécifique des piqûres infectantes d'Anopheles
Malaria is a major public health problem in tropical and subtropical areas. Morbidity and mortality are mainly due to Plasmodium falciparum transmitted to human individuals by the bite of female Anopheles mosquitoes. In order to orientate appropriate strategies for malaria elimination and for a better evaluation of the efficacy of control methods, the indicators measuring the risk of transmission should be more sensitive. It has been shown that the human antibody response against Anopheles salivary proteins/peptides represents a biomarker of exposure to mosquito bites and could be an indicator of malaria transmission. However, this tool must be optimized. This work has thus two objectives: i) to validate the salivary protein cE5 as biomarker of exposure to Anopheles bites and as an indicator for evaluating the efficacy of vector control strategy, and 2) to identify new salivary proteins as a candidate biomarker only specific to human exposure to infective bites of Anopheles.First, we demonstrated that the IgG antibody response to cE5 protein could be an indicator of human-vector contact, complementary and very sensitive, measuring the human exposure to Anopheles bites and a tool evaluating the short-term efficacy of insecticide treated nets. Subsequently, the proteomic methods, 2D - DIGE and mass spectrometry, allowed to identify five salivary proteins (gSG6, gSG1b, TRIO, SG5 and the long form D7) which are overexpressed in the salivary glands of An . gambiae infected by wild P. falciparum. Peptides for each protein, identified in silico, appear antigenic in individuals exposed to Anopheles bites, after the evaluation by the epitope mapping technique.Altogether, this work is not only the first step to optimize this immuno-epidemiological tool assessing the human-vector contact, but also demonstrates the possibility to define a new biomarker specific to the infective bites of Anopheles

Contexte : Le SEIPA est une allergie alimentaire non IgE-médiée particulière, répondant à des critères diagnostiques précis. Le traitement est l'éviction des aliments en cause. Il n'existe pas de biomarqueur sérique confirmant le diagnostic, ou prédisant l'acquisition de la tolérance. Seul le test de provocation par voie orale (TPO) permet d'évaluer régulièrement la tolérance à l'allergène en cause. L'évolution est le plus souvent favorable chez l'enfant vers l'âge scolaire. Cependant, la sévérité des symptômes et l'absence d'IgE spécifiques justifient une recherche sur le SEIPA pour mieux comprendre la physiopathologie. Hypothèses : Le SEIPA serait associé à une dysbiose digestive, une dysimmunité locale au niveau digestif, une inflammation intestinale chronique, et une augmentation de la perméabilité intestinale. L'inflammation et la perméabilité seraient majorées lors d'une réaction allergique aiguë. Après acquisition de la tolérance, tous ces paramètres reviendraient à la normale. Objectifs : Décrire de manière longitudinale les microbiotes fécaux et salivaires des patients pédiatriques avec un SEIPA, pendant l'allergie et après la tolérance, ainsi que des biomarqueurs d'intérêt évaluant l'inflammation, la perméabilité et la dysimmunité digestive, comparativement à une cohorte de référence. Matériels et méthodes : Des prélèvements fécaux et salivaires ont été collectés chez les enfants avec un SEIPA suivi dans plusieurs hôpitaux de l'AP-HP, après le diagnostic sous régime d'éviction, et après acquisition de la tolérance, ainsi que chez des témoins appariés aux mêmes âges (ratio 1:1). Des prélèvements de selles supplémentaires ont également été récoltés avant et après les TPO. La composition du microbiote a été analysée par séquençage du gène de l'ARN r16s (V3-V4). La fonction du microbiote fécal a été estimée par dosage des acides gras à chaine courte (AGCC) (chromatographie en phase gazeuse). La calprotectine fécale, la neurotoxine dérivée des éosinophiles (EDN), les IgA sécrétoires fécales, et la zonuline fécale ont évalué l'inflammation, l'immunité et la perméabilité intestinale (ELISA).Résultats principaux : De décembre 2019 à mai 2023, 38 patients ont été inclus (âge moyen : 1,3 ans). A l'inclusion, les patients allergiques avaient une dysbiose fécale et salivaire, s'exprimant par une diminution de l'alpha-diversité, une béta-diversité différente, plusieurs genres bactériens différents, et une augmentation de l'abondance relative de l'acétate par rapport aux témoins appariés. Les patients allergiques n'avaient pas d'inflammation intestinale sous régime d'éviction (calprotectine, EDN), mais seulement de manière aiguë et transitoire après une réaction allergique. Les taux d'IgA sécrétoires fécales étaient plus élevés chez les patients allergiques que chez les témoins ou chez les patients tolérants. La zonuline était similaire entre les patients et les témoins. Après acquisition de la tolérance, chez les 22 patients devenus tolérants, les microbiotes fécal et salivaire se sont rapprochés partiellement de ceux des témoins. Les AGCC et les IgA sécrétoires se sont normalisés (augmentation de l'abondance relative du butyrate, baisse du taux d'IgA). Conclusions : D'après les résultats de cette cohorte, et selon les données antérieures de la littérature scientifique, les enfants avec un SEIPA ont une dysbiose intestinale avant le début de l'allergie, une dysbiose intestinale et salivaire pendant l'allergie jusqu'à l'acquisition de la tolérance, puis un retour du microbiote proche de celui d'enfants sains. La réponse immunitaire adaptative locale est exagérée au cours de la pathologie, avec une augmentation des IgA sécrétoires fécales chez les individus allergiques par rapport aux témoins, et une normalisation après la tolérance. Le rôle exact de ces IgA n'est pas clairement identifié
Background: FPIES is a non-IgE-mediated food allergy, meeting precise diagnostic criteria. Treatment involves avoiding the offending food. There is no serum biomarker confirming the diagnosis or predicting the development of tolerance. Only the oral food challenge (OFC) regularly assesses allergenic tolerance. In most cases, children acquire spontaneous tolerance at school age. However, the severity of symptoms and the absence of specific IgE justify research into FPIES to gain a better understanding of the pathophysiology.Hypothesis: FPIES is associated with digestive dysbiosis, local digestive dysimmunity, chronic intestinal inflammation and increased intestinal permeability. Inflammation and permeability are exacerbated during an acute allergic reaction. Once tolerance is acquired, all these parameters return to normal. Objectives: To provide a longitudinal description of the faecal and salivary microbiota of paediatric patients with SEIPA, at the times of allergy and tolerance, as well as biomarkers of interest assessing inflammation, permeability and digestive dysimmunity, compared with a reference cohort. Materials and methods: Faecal and salivary samples were collected from children with FPIES followed in several AP-HP hospitals, after diagnosis on an elimination diet, and after acquiring tolerance, as well as from matched controls at the same ages (1:1 ratio). Additional stool samples were also collected before and after OFC. The composition of the microbiota was analysed by r16s RNA gene sequencing (V3-V4). The function of the faecal microbiota was estimated by measuring short-chain fatty acids (SCFA) (gas chromatography). Faecal calprotectin, eosinophil-derived neurotoxin (EDN), faecal secretory IgA, and faecal zonulin assessed inflammation, immunity and intestinal permeability (ELISA).Main results: From December 2019 to May 2023, 38 patients were included (mean age: 1.3 years). At inclusion, allergic patients had faecal and salivary dysbiosis, expressed as decreased alpha-diversity, different beta-diversity, several different bacterial genera, and increased relative abundance of acetate compared with matched controls. Allergic patients did not have intestinal inflammation on elimination diet (calprotectin, EDN), but only acutely and transiently after an allergic reaction. Levels of faecal secretory IgA were higher in allergic patients than in controls or tolerant patients. Zonulin was similar between patients and controls. After acquiring tolerance, in the 22 patients becoming tolerant, faecal and salivary microbiota partially approximated those of controls. Secretory AGCC and IgA levels normalised (increase in relative butyrate, decrease in IgA). Conclusions: According to the results of this cohort, and to previous data in the scientific literature, children with FPIES have a gut dysbiosis before the onset of allergy, gut and salivary dysbiosis during allergy until the acquisition of tolerance, and then a return of a microbiota close to that of healthy children. The local adaptive immune response is exaggerated during the disease, with an increase in faecal secretory IgA in allergic individuals compared with controls, and normalisation after tolerance. The exact role of this IgA is not clearly identified

Le long de la frontière entre la Thaïlande et le Myanmar (TMB), le paludisme se caractérise par une forte hétérogénéité de la transmission, une forte prévalence en porteurs sub-microscopiques et par l’émergence de la résistance à l’artémisinine chez Plasmodium falciparum. L'identification précoce des « foyers » infectieux et leurs éliminations sont nécessaires pour contenir la résistance à l'artémisinine. L'objectif de cette thèse était de démontrer l’intérêt d’utiliser des biomarqueurs sérologiques de l'exposition humaine aux piqûres d'anophèles (gSG6-P1) et au Plasmodium (CSP & MSP1-19) pour quantifier le contact homme-vecteur et identifier les foyers résiduels de transmission. Des papiers filtres contenant du sang ont été prélevés sur une cohorte de 2600 personnes suivie tous les 3 mois jusqu'à 18 mois et analysés par dosage immuno-enzymatique (ELISA). Nos résultats ont montré que les niveaux de réponse IgG à l'antigène gSG6-P1 variaient selon le village, la saison et l'âge et étaient positivement corrélés à l'abondance des espèces anophèles et des vecteurs primaires de paludisme. Une association significative et positive a été observée entre la réponse de l'anticorps au gSG6-P1 et le taux d'inoculation entomologique (EIR), démontrant ainsi que l'hétérogénéité de la transmission du paludisme était directement associée à un comportement de piqûre hétérogène. Des études complémentaires ont montré que le biomarqueur salivaire était pertinent pour détecter des variations micro géographiques dans la transmission à P. falciparum. Cela s’est traduit par des chevauchements significatifs entre les foyers infectieux à P. falciparum et ceux à forts répondeurs en anticorps anti-salive d’anopheles (gSG6-P1). Dans l'ensemble, ces résultats indiquent que le biomarqueur salivaire d'Anopheles est prometteur pour les études épidémiologiques et pourrait guider la mise en œuvre d’interventions de lutte antivectorielle « ciblées » afin d'éliminer les foyers résiduels de paludisme
Malaria along the Thailand-Myanmar border (TMB) displays geographical heterogeneity and is characterized by high prevalence of submicroscopic carriage and the emergence artemisinin resistance in P. falciparum. Timely identification and elimination of remaining P. falciparum transmission “hotspots” is essential to contain artemisinine resistance. The aim of this study was to address the relevance of using serological biomarkers of human exposure to anopheles bites (gSG6-P1) and Plasmodium antigens to identify remaining sources of transmission and to measure spatial and temporal changes in human vector contact along the TMB. Blood spots were collected in filter papers among a cohort of 2600 people followed every 3 months up to 18 months, and used for analysis by enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA). Our findings showed that the levels of IgG responses to gSG6-P1 antigen varied according to village, season, and age and were positively associated with the abundance of total Anopheles species and primary malaria vectors. A significant and positive association was noted between the Antibody response to gSG6-P1 and the entomological inoculation rate (EIR) hence demonstrating that heterogeneity in malaria transmission was directly associated with heterogeneous biting behavior. Further investigations showed that salivary biomarker was relevant to detect small scale variations in P. falciparum malaria. This was supported by scan statistics showing that P. falciparum clusters partially overlap the gSG6-P1 clusters. Altogether, these findings indicates Anopheles salivary biomarker as great potential for epidemiological studies and could be useful to guide the implementation of hotspot–targeted vector control interventions with the aim to achieve malaria elimination

Les athlètes de haut-niveau français, spécialistes des sprints longs en athlétisme, rencontrent des difficultés à maintenir des performances optimales lors des compétitions internationales. Dans ce contexte, l'objectif général de ce travail de thèse a été, à travers une approche holistique, de chercher àoptimiser la réitération d'exercices de haute-intensité et d'améliorer la récupération des athlètes lors des compétitions internationales. Pour ce faire, deux axes relatifs au stress ont été explorés : tout d'abord, nous avons analysé l'impact du stress psychophysiologique en compétition sur la régulation du système nerveux autonome et du système nerveux neuro-endocrinien, ainsi que l'évaluation de stratégies innovantes de gestion du stress telles que la cohérence cardiaque pour améliorer la régulation neuroendocrinienne et la qualité du sommeil des athlètes au cours des compétitions. Par ailleurs, aucours des exercices de haut-intensité, la production énergétique entraîne d'importantes perturbations métaboliques, telles qu'une acidose métabolique marquée (avec un pH sanguin inférieur à 7, relevé à l'issue des épreuves de 400 m), pouvant constituer un frein à la performance. Pour y remédier, nousavons appréhendé un second axe de recherche sur la régulation de l'équilibre acido-basique au cours de l'exercice et la récupération, à travers la mise en place de stratégies nutritionnelles et hydriques, incluant une alimentation spécifique et une hydratation à base d'eau riche en bicarbonates.Les premières études ont révélé des perturbations psychophysiologiques liées au stress compétitif, avec une diminution significative de l'activité du système parasympathique et une augmentation des biomarqueurs salivaires du stress (cortisol et alpha-amylase). Ces perturbations, observées lors desphases qualificatives et en finales, sont corrélées à une anxiété accrue associée à une capacité de récupération réduite des athlètes (études n°1 et n°2). Une variabilité interindividuelle a été constatée, certains athlètes se montrant particulièrement sensibles au stress compétitif, ce qui souligne l'importanced'approches individualisées pour mieux gérer ces réponses. Par ailleurs, l'introduction de la cohérence cardiaque comme méthode de gestion du stress a permis d'améliorer la régulation du système nerveux autonome, de réduire l'inflammation (IL1-β) et de favoriser une meilleure qualité du sommeil, essentielle pour récupérer entre les épreuves. Les athlètes pratiquant cette technique ont montré une meilleure régulation hormonale et inflammatoire, même si aucun impact direct sur les performances en compétition n'a été observé (étude n°3). Puis, les études suivantes de ce travail de thèse, relatives à la régulation du stress métabolique, ont démontré que la consommation d'eau riche en bicarbonates, associée à un régime alimentaire alcalinisant (à la différence d'une régime acidifiant), augmente significativement le pH sanguin et urinaire des athlètes, améliore la clairance du lactate après desexercices répétés et optimise la capacité tampon (études n°4 et n°5). Ces ajustements métaboliques ont permis aux athlètes de maintenir ou d'améliorer leurs performances, notamment lors du troisième jour de compétition à haute-intensité (études n°5).En conclusion, les résultats de ce travail de thèse soulignent l'importance d'intégrer des stratégies combinant la gestion du stress précompétitif, notamment à travers la pratique de la cohérence cardiaque, ainsi que d'avoir une approche nutritionnelle et hydrique adaptée au moment des compétitions internationales. Ces stratégies favorisent en effet une meilleure régulation du système nerveux autonome et du système nerveux neuro-endocrinien, améliorent la qualité du sommeil, et contribuent à une gestion optimisée de l'acidose métabolique induite au cours de la compétition afin d'améliorer à la fois les performances et la récupération des athlètes de haut niveau
French elite athletes specializing in long sprints in track and field face challenges in maintaining optimal performance during international competitions. In this context, the overarching goal of this doctoral research was to adopt a holistic approach to optimize the repetition of high-intensity exercises andenhance athlete recovery during international events. To achieve this, two aspects related to stress were explored: first, the study examined the impact of psychophysiological stress during competition on the regulation of the autonomic and neuroendocrine nervous systems, as well as the evaluation of innovative stress management strategies such as cardiac coherence to improve neuroendocrine regulation and sleep quality during competitions.Additionally, during high-intensity exercises, energy production induces significant metabolic disruptions, such as marked metabolic acidosis (with blood pH below 7 observed after 400 m events), which may hinder performance. To address this, nutritional and hydration strategies, including specific diets and hydration with bicarbonate-rich water, were tested to better regulate metabolic stress.Initial studies revealed psychophysiological disruptions related to competitive stress, with a significant decrease in parasympathetic activity and increased salivary stress biomarkers (cortisol and alpha-amylase). These disruptions, observed during both qualifying phases and finals, correlated withheightened anxiety and reduced recovery capacity (Studies 1 and 2). Interindividual variability highlighted some athletes' heightened sensitivity to competitive stress, emphasizing the need for individualized approaches to better manage these responses.The introduction of coherente breathing as a stress management technique improved autonomic nervous system regulation, reduced inflammation (IL-1β), and enhanced sleep quality, essential for recovery between events. Athletes practicing this technique demonstrated improved hormonal and inflammatory regulation, although no direct impact on competition performance was observed (Study 3).Subsequent studies addressing metabolic stress regulation demonstrated that consuming bicarbonate-rich water combined with an alkalizing diet (as opposed to an acidifying diet) significantly increased blood and urinary pH, improved lactate clearance after repeated exercises, and optimized bufferingcapacity (Studies 4 and 5). These metabolic adjustments enabled athletes to maintain or improve performance, particularly on the third day of high-intensity competition (Studies 5).In conclusion, this research highlights the importance of integrating strategies that combine pre-competitive stress management, particularly through coherent breathing, with tailored nutritional and hydration approaches during international competitions. These strategies promote better regulation ofthe autonomic and neuroendocrine nervous systems, enhance sleep quality, and help manage competition-induced metabolic acidosis. Together, these approaches can improve both performance and recovery for high-level athletes in demanding competitive contexts

Introduction : des exercices calibrés de haute intensité associés au port d’une charge sont répétés et servent d’évaluation chez les militaires. L’objectif de cette étude est d’évaluer l’influence du port d’une charge lourde sur la réponse physiologique de l’organisme lors d’un effort soutenu. Matériels et méthodes : dans cette étude prospective, les sujets effectuaient leur première marche course de 8 km avec ou sans sac de 11 kg. Les taux salivaires de cortisol, d'a-amylase salivaire, la fréquence cardiaque, l’anxiété et l’estime de soi ont été évaluées avant et/ou pendant et/ou après l’effort. Résultats : quatre-vingt-un sujets ont été inclus sur 4 sessions : 1 session sans sac et 3 sessions avec sac. Le taux d’a-amylase augmentait avec l’effort mais de façon plus marquée dans le groupe avec sac (p = 0,02). Dans le groupe avec sac à dos, la performance était meilleure pour un taux salivaire de cortisol et d’a-amylase bas. En analyse multivariée, seul un taux d’a-amylase bas avant l’effort était associé à une meilleure performance. Discussion : les modifications de l’a-amylase pourraient avoir deux origines : à contrainte inégale l’a-amylase serait un marqueur de contrainte physiologique ; à contrainte égale un taux d’a-amylase bas pourrait traduire une inhibition du système nerveux sympathique lié à l’entraînement.

L’analyse criminalistique de morsure fait appel à des techniques variées et complémentaires. Celle-ci débute par un examen macroscopique lésionnel validant les possibilités d’exploitation des marques complété par un bilan photographique numérique régional et rapproché au rapport 1/1. Un prélèvement salivaire sur morsure est indiqué en l’absence de souillure (habits ou désinfection le plus souvent) dès le début de la prise en charge. La conservation tissulaire peut être prolongée par prélèvement et fixation sur cadre, la transillumination aidant à l’objectivation de la trace et l’histopathologie à sa datation. L’étude de rapprochement d’une morsure avec une denture pouvant y correspondre est réalisée par un examen clinique de suspect jaugeant la faisabilité de l’acte complété par une analyse de superposition photographique à grandeur réelle de son calque de contours dentaires avec l’image lésionnelle supposée pouvoir être en rapport. La contribution récente de techniques d’acquisition en 3D (scanner et dispositifs photographiques stéréophotogrammétriques) permet d’affiner les comparaisons trace-denture, plus particulièrement sur surfaces cutanées courbes ou peu fixées.