Dissertations / Theses on the topic 'Maladies de la vessie – thérapie'
To see the other types of publications on this topic, follow the link: Maladies de la vessie – thérapie.
Create a spot-on reference in APA, MLA, Chicago, Harvard, and other styles
Consult the top 50 dissertations / theses for your research on the topic 'Maladies de la vessie – thérapie.'
Next to every source in the list of references, there is an 'Add to bibliography' button. Press on it, and we will generate automatically the bibliographic reference to the chosen work in the citation style you need: APA, MLA, Harvard, Chicago, Vancouver, etc.
You can also download the full text of the academic publication as pdf and read online its abstract whenever available in the metadata.
Browse dissertations / theses on a wide variety of disciplines and organise your bibliography correctly.
1
Biardeau, Xavier. "Optimisation des thérapies de stimulation/modulation électrique dans le traitement des troubles vésico-sphinctériens neurogènes et non-neurogènes." Electronic Thesis or Diss., Université de Lille (2022-....), 2024. http://www.theses.fr/2024ULILS014.
Abstract:
Même s'il correspond à l'alternance entre une phase de remplissage et une phase de vidange de la vessie, le cycle mictionnel ne peut se résumer à une opération binaire mais implique bien la prise en compte constante de multiples facteurs : le niveau de remplissage du réservoir vésical, la sécurité de l'environnement dans lequel nous vivons, le contexte émotionnel dans lequel nous évoluons et les contraintes sociales auxquelles nous sommes soumis.On sait aujourd'hui qu'il existe des altérations et/ou des modifications de l'activité et de la connectivité cérébrales, ainsi que des changements dans la régulation du système nerveux autonome (SNA), dans certains types de troubles vésico-sphinctériens- notamment dans l'hyperactivité vésicale ou l'incontinence urinaire par urgenturie et dans certains types de troubles de la vidange vésicale.Parmi les thérapies disponibles aujourd'hui, les thérapies de modulation/stimulation électrique (neurostimulation tibiale et neuromodulation sacrée) semblent capables de normaliser et/ou de modifier l'activité et la connectivité cérébrales,ainsi que l'équilibre du SNA. Elles pourraient donc apporter, au moins, une réponse partielle à certaines des étiopathogénies sous-jacentes à ces troubles vésico-sphinctériens.Cependant, le déploiement et le positionnement de ces thérapies de modulation/stimulation électrique sont encore limités par une compréhension incomplète de leurs mécanismes d'action, une identification imparfaite des indications et des populations les plus susceptibles de bénéficier de ces thérapies, un manque de consensus sur le réglage du courant électrique délivré, et un manque d'évaluation à moyen et long terme.Dans la première partie, nous nous sommes interrogés sur les indications de ces thérapies, et notamment sur leur place dans l'approche préventive des dysfonctionnements vésico-sphinctériens secondaires à une lésion médullaire. Nous nous sommes également interrogés sur la relation, en termes d'efficacité, entre la neurostimulation tibiale transcutanée et la neuromodulation sacrée, afin de mieux soutenir les patients dans le processus de décision médicale partagée. Enfin, nousavons mis au point le premier outil permettant de prédire le succès de la neuromodulation sacrée en tant que traitement du trouble de la vidange vésicale.Dans la deuxième partie, nous nous sommes interrogés sur les mécanismes d'action, et plus particulièrement sur les changements dans l'équilibre du SNA en réponse à une stimulation aiguë de la racine sacrée.Dans la troisième partie, nous nous sommes interrogés sur le suivi à moyen terme (5 ans) après l'implantation définitive de la neuromodulation sacrée dans un bassin de population géographique, en recherchant les facteurs de risque d'abandon du suivi. Ces données, bien que devant encore être complétées par de futurs projets de recherche, nous permettront d'optimiser davantage les thérapies de modulation/stimulation électrique dans la prise en charge des troubles vésico-sphinctériens neurogènes et non neurogènesEven if it involves alternating between a filling phase and an emptying phase, the normal micturition cycle cannot be summed up as a binary operation but involves the constant consideration of multiple factors: the filling level of the bladder reservoir, the safety of the environment in which we live, the emotional context in which we evolve and the social constraints to which we are subjected.We now know that there are alterations and/or modifications in brain activity and connectivity, as well as changes in the regulation of the autonomic nervous system, in certain types of lower urinary tract dysfunction - notably in overactive bladder or urge urinary incontinence and in certain types of voiding dysfunctions. Among the therapies available today, electrical modulation/stimulation therapies (tibial neurostimulation and sacral neuromodulation) appear able to normalize and/or modify brain activity and connectivity, as well as ANS balance. They could thus provide at least a partial response to some of the etiopathogenies underlying these lower urinary tract dysfunctions. However, the deployment and positioning of these electrical modulation/stimulation therapies are still limited by an incomplete understanding of their mechanisms of action, imperfect identification of the indications and populations most likely to benefit from these therapies, a lack of consensus on the setting of the electrical current delivered, and a lack of medium and long-term evaluation. In the first part, we questioned the indications for these therapies, and particularly their place as a preventive approach for lower urinary tract dysfunctions due to spinal cord injury. We also questioned the relation, in terms of efficacy, between transcutaneous tibial neurostimulation and sacral neuromodulation, to better support patients in shared medical decision-making processe. Finally, we developed the first tool to predict the success of sacral neuromodulation as a treatment for voiding dysfunction. In the second part, we questioned the mechanisms of action, and more specifically the changes in the balance of the autonomic nervous system in response to an acute S3 sacral root stimulation.In the third part, we questioned the mid-term follow-up (5 years) after definitive implantation of sacral neuromodulation in a geographic population pool, looking for risk factors for discontinuation of follow-up. These data, although still to be supplemented by future research projects, will enable us to further optimize electrical modulation/stimulation therapies in the management of neurogenic and non-neurogenic lower urinary tract dysfunctions
2
Berrahmoune, Saoussen. "Étude des mécanismes régissant l’efficacité photodynamique sélective de l’Héxylaminolévulinate-Protoporphyrine IX dans le traitement du cancer de la vessie : Application dans le cadre de la prévention de ses récidives." Thesis, Nancy 1, 2009. http://www.theses.fr/2009NAN10012/document.
Abstract:
La thérapie photodynamique (PDT) est basée sur l’action d’un photosensibilisateur qui en présence de la lumière et de l’oxygène induit la synthèse d’espèces réactives de l’oxygène, toxiques pour les cellules. La PDT a été utilisée pour le traitement et la prévention du cancer de la vessie. Les études ont été réalisées in vivo. La PDT a été développé en utilisant l’Hexvix® précurseur de la protoporphyrine IX (PpIX). Les paramètres biologiques liés à la PpIX et qui régissent l’efficacité du traitement photodynamique des tumeurs vésicales ont été déterminés en fonction de deux concentrations d’Hexvix® (8 et 16 mM) induisant des effets photodynamiques diamétralement opposés. L’efficacité du traitement photodynamique obtenue pour 8 mM d’Hexvix® est liée à la localisation mitochondriale de la PpIX induisant des dommages pro-apoptotiques. La PDT entraîne la diminution significative du pourcentage de l’implantation tumorale après la TUR et permet ainsi de prévenir les récidives du cancer de la vessiePhotodynamic therapy (PDT) is a treatment modality based on the cytotoxic effect occurring on target tissues by interaction of a photosensitizer with light in the presence of oxygen. The aim of this study was to optimise PDT for treatment and prevention of recurrence of bladder cancer. The study was performed in vivo. PDT was performed with Hexvix® a precursor of the photosentitizer protoporphyrin IX (PpIX). First, we executed a mechanistic analysis of differential PDT effects according to Hexvix® concentration. 8 or 16 mM induced diametrically opposed photodynamic effects. PDT efficacy is depends on the mitochondrial localization of PpIX and its concentration and leads to pro-apoptotic damages. Second, PDT was performed in a rat model mimicking post fluorescence guided TUR. The amount of viable tumor cell within the bladder lumen significantly decreased with PDT and resulted in a significant reduction of tumor implantation
3
Latourette, Solange. "La thérapie génique." Paris 5, 1994. http://www.theses.fr/1994PA05P100.
4
Cosserat-Gérardin, Isabelle. "Evaluation expérimentale de la Protoporphyrine IX (PpIX) induite par l'hexylester d'acide 5-aminolévulinique(hALA), et de l'hypéricine pour le traitement photodynamique de tumeurs de vessie." Nancy 1, 2001. http://www.theses.fr/2001NAN11308.
5
Philippe, Catherine. "Le lavage vésical : un exemple d'application de pharmacie clinique." Paris 5, 1991. http://www.theses.fr/1991PA05P124.
6
Le, Bacquer Anne-Véronique. "Les complications de la BCG-thérapie endovésicale dans le traitement des cancers superficiels de "la vessie" : revue générale à propos d'un cas." Montpellier 1, 1995. http://www.theses.fr/1995MON11047.
7
Le, Souder Cosette. "Maladies à prions : vers le développement d'une thérapie génique et cellulaire." Thesis, Montpellier, 2017. http://www.theses.fr/2017MONTT051.
Abstract:
Les encéphalopathies spongiformes transmissibles sont des maladies neurodégénératives caractérisées par une vacuolisation intense et une perte neuronale associées à l’accumulation d’une protéine prion pathologique : la PrPSc. A cause de la longue période d’incubation silencieuse de ces maladies, les individus souffrant d’une maladie à prions peuvent exposer des patients qui recevraient leur sang ou un de leurs organes à un risque de contamination iatrogène. De plus, lorsque le diagnostic survient, les dommages cérébraux sont souvent massifs, et l’issue toujours fatale. A ce jour, aucun traitement n’est disponible, et l’ensemble des stratégies testées a échoué.L’alternative développée par le laboratoire est celle de la thérapie cellulaire couplée à la thérapie génique, en utilisant des cellules souches embryonnaires (ES) délivrant des molécules anti-prions. Concernant le choix des molécules anti-prions, nous avons choisi les mutants PrP-DN. Notre hypothèse repose sur des études montrant qu’une lysine au codon 219 de la PrP chez l’Homme ou une arginine au codon 171 de la PrP ovine, protègent du développement d’une ESST. L’étude de ces mutants, en cellules infectées ou dans des souris transgéniques, a permis de montrer que les PrP mutées n’étaient pas converties en PrPSc et qu’elles exerçaient un effet protecteur dit « dominant négatif » sur la conversion de la PrPC sauvage en PrPSc.Un des projets du laboratoire avait donc pour objectif d’utiliser les cellules souches exprimant les mutants PrP-DN pour développer une stratégie de thérapie génique et cellulaire des maladies à prions : l’hypothèse étant que les cellules greffées pourraient non seulement réparer le tissu lésé mais que ce dernier serait également protégé de l’infection par les prions.Une première approche de thérapie génique et cellulaire avait été initiée au laboratoire et montrait des résultats plutôt encourageants. En effet, la greffe de cellules souches neurales murines exprimant des PrP-DN et produites à partir de cellules souches embryonnaires murines, conduisait, pour une partie des souris, à un allongement du temps d’incubation de la maladie, ainsi qu’à une diminution de l’astrogliose et de la vacuolisation.Dans ce contexte, le premier objectif de ma thèse a été de valider l’approche thérapeutique en montrant que les cellules greffées délivraient des mutants PrP-DN capables d’inhiber la réplication du prion. Nous avons opté pour un modèle de culture organotypique infectée par des prions murins. En plus de répondre aux exigences éthiques de la directive 2010/63/UE, ce modèle offre l’avantage de pouvoir réaliser plus d’essais, des cinétiques d’accumulation de PrPSc et de visualiser le devenir des cellules greffées. Enfin, opter pour cette stratégie permettait de transposer dans un modèle humanisé des travaux précédemment réalisés et ayant montré des résultats encourageants. Pour cela, il a été nécessaire de mettre en place un modèle prion ex vivo de culture organotypique de tranches de cerveau, dans lequel il était possible de réaliser des greffes et permettant d’évaluer l’effet inhibiteur des mutant-PrP-DN sur la réplication du prion. Par ailleurs, notre groupe fait partie, avec d’autres groupes travaillant avec des cellules souches mésenchymateuses, de l’équipe « Biologie des cellules souches et médecine régénératrice », il nous est apparu pertinent d’évaluer l’effet des MSC sur la pathologie prions dans des modèles prions en culture organotypique et en particulier d’évaluer l’impact de greffes de MSC concomitantes aux greffes de NSC-PrP-DN. En effet, ces cellules sont décrites comme pouvant induire un microenvironnement neuroprotecteur en limitant la prolifération des cellules de la microglie et des astrocytes, et peuvent favoriser la différenciation des NSC. Enfin notre dernier objectif visait à transposer les outils murins vers des outils « humains » en produisant des NSC humaines issues d’ES et exprimant une PrP humaine portant les mutations DNTransmissible spongiform encephalopathies are neurodegenerative diseases characterized by a strong vacuolization, a neuronal lost and deposits of prion pathologic protein: PrPSc. This PrPSc accumulation is the result of the conformational conversion of the host encoded endogenous PrPC protein. Although the incidence of these diseases in humans remains low (about one to two cases per million inhabitants per year), these diseases remain a public health problem. Indeed, because of their long and silent incubation period, patients with prion disease may expose people through blood transfusion or organ transplantation with a risk of iatrogenic contamination. In addition, when the diagnosis occurs, brain damage is often massive, and the outcome is always fatal and rapidly occurs. Until now, there is no treatment that could be proposed to patients.The alternative developed by our laboratory for several years, is a strategy of cell therapy coupled with gene therapy. The general objective is to use pluripotent embryonic stem cells (ESC) and graft them as a “medicine” not only to orchestrate a functional recovery of the damaged zones and protect the grafted cells from prion propagation but also to deliver anti-prion molecules.For the anti-prion molecules, we have chosen dominant negative PrP mutants (PrP-DN). Our choice is based on studies showing that a lysine at codon 219 of the human PrP or an arginine at codon 171 of the ovine PrP protect against the development of a TSE. Study of these mutants in infected cells or in transgenic mice showed that the mutated PrPC were not converted into PrPSc. Moreover, they exibit a so-called "dominant negative" protective effect on the conformational conversion of their wild-type PrPC counterparts. A first approach of gene and cell therapy was initiated in the laboratory and has shown encouraging results. Indeed, the graft of murine neural stem cells (NSC) derived from murine embryonic stem cells and expressing anti-prion molecules, has allowed, for some of the mice, to an increase the incubation time of the diseaseas well as to a decrease of astrogliosis and vacuolization.In this context, the first objective of my thesis was to validate the therapeutic approach by showing that the grafted cells were able to inhibit prion replication trough the dominant negative effect of the PrP-DN. To address this point, we have chosen to use an organotypic culture model infected with murine prions (22L strain). In addition to fill the ethical requirements under the European Directive 2010/63 and the 3Rs, organotypic culture models offer the advantage to perform and repeat experiments, kinetic tests, and PrPres analysis. This model also allows to visualize the fate of the grafted cells. Finally, by choosing this strategy, it will be possible to transpose into a humanized model the work previously performed on mouse organotypic cultures.To achieve this task, it was necessary to establish an ex vivo prion model of organotypic culture brain slices, in which it was possible to perform grafts and to evaluate the inhibitory effect of PrP-DN mutants on the prion replication.In addition, as our group is included in the team "Stem cell biology and regenerative medicine" (led by Pr Jorgensen) in which several stem cells are studied (liver stem cells and mesenchymal stem cells (MSC)) and because MSC have been shown to provide protective effects when grafted in the brain of mice with neurological diseases, it was therefore relevant to evaluate the effect of MSC on prion pathology in our prion models and in particular to evaluate the impact of concomitant MSC grafts on NSC-PrP-DN.In a last step, our goal was to transpose the mouse tools (NSC from ES and expressing the PrP-DN mutants) to "human" tools by producing human NSCs derived from human ESC and expressing human PrP-DN, and to characterized the resulted cells
8
Delmouly, Karine. "Cellules Souches Neurales : modélisation et thérapie cellulaire des maladies à prions." Thesis, Montpellier 2, 2010. http://www.theses.fr/2010MON20134/document.
Abstract:
Les Encéphalopathies Spongiformes Subaigües Transmissibles (ESST) sont des maladies neurodégénératives caractérisées par une longue période d'incubation asymptomatique à l'issue fatale. Elles sont induites par l'accumulation, au niveau du système nerveux central (SNC), de l'isoforme pathogène de la protéine du prion (PrPSc) entraînant une dégénération des cellules neuronales ainsi qu'une astrogliogénèse. La PrPSc, qui joue un rôle central dans la transmission de la maladie, est produite par conversion de la forme physiologique de la protéine du prion (PrPC). Les mécanismes de conversion de la PrPC et de propagation de la PrPSc sont incertains ainsi que les mécanismes moléculaires à la base des maladies à prions. Dans le cadre de la création et l'amélioration de modèles de culture cellulaire, il a été montré que les Cellules Souches Neurales (CSN) issues du SNC permettent la conversion in vitro de la PrPC en PrPSc. Dans cette étude, nous avons utilisé les CSN pour optimiser et caractériser les conditions d'infection des cellules et émis l'hypothèse que la modification des conditions de culture pouvait moduler la production de PrPSc dans les CSN. Pour cela, nous avons ajouté des facteurs influençant l'identité cellulaire dans nos cultures et avons montré qu'ils étaient capables d'augmenter la propagation du prion. Ces modèles nous permettent l'étude des mécanismes moléculaires pouvant être à l'origine de l'infection. En parallèle, nous avons montré que l'ajout d'HEPES dans nos cultures inhibe la production de PrPSc dans les CSN de façon dose-dépendante. Par ailleurs, à ce jour il n'existe aucune thérapie capable de stopper la progression de la maladie chez l'homme. Ainsi, nous avons utilisé les CSN dans le but d'élaborer une approche thérapeutique permettant de distribuer des anticorps au sein du SNC pour stopper la réplication du prion. Ces cellules permettront, de plus, de réparer les zones endommagées du cerveau combinant ainsi thérapie cellulaire et géniqueTransmissible Spongiform Encephalopathies (TSE) are neurodegenerative disorders with long asymptomatic incubation periods and fatal issue. They are induced by accumulation of the pathogen isoform of the prion protein (PrPSc) in the central nervous system (CNS) resulting in neuronal degeneration and astrogliosis. PrPSc, produced by the conversion of the physiological form of the prion protein (PrPC), plays a key role in the disease transmission. The mechanisms underlying the conversion of PrPC and the propagation of PrPSc are uncertain just as the molecular mechanisms giving rise to prion diseases. In the aim of creating or improving cell culture models, it has been shown that CNS Neural Stem Cells (NSC) could support PrPC conversion into PrPSc in vitro. In this project, we used NSC to improve and characterize cellular infection and hypothesized that modification of culture conditions could modulate PrPSc production in NSC. Hence, we used factors known to influence cellular identity in our culture model and showed that higher amount of prions were produced. These models also allow molecular mechanisms studies that could be at infection origin. During the course of this study, we also demonstrated that HEPES added to our culture medium could stop prion propagation in a dose-dependant manner. Moreover, to date no therapy aimed at stopping disease progression has been established in humans. We therefore used NSC with the ultimate goal to elaborate a therapeutic strategy based on the delivery of antibodies into the CNS to block prion replication. These cells will also able to repair damaged brain area thus combining cell and gene therapy
9
Guttin, Audrey. "Développement d’une bithérapie antitumorale basée sur une approche théranostique : applications aux cancers du cerveau et de la vessie." Thesis, Paris, EPHE, 2016. http://www.theses.fr/2016EPHE3018/document.
Abstract:
Le projet a consisté à développer une nouvelle stratégie thérapeutique basée sur les spécificités moléculaires intrinsèques des tumeurs solides afin de personnaliser le traitement en le reliant directement au diagnostic de la tumeur (theranostic). Les tumeurs cérébrales et les tumeurs de vessies sont deux exemples de tumeurs solides particulièrement agressives. Ces deux types de tumeurs sont classés en plusieurs sous-groupes ayant leur propre profil moléculaire. Les microARN (ou miR) sont des molécules synthétisées naturellement par les cellules. Ces molécules peuvent avoir un rôle d’oncogène ou de suppresseur de tumeurs et leur expression est fortement dérégulée dans les tumeurs. Ainsi la mesure des taux d’expression de quelques microARN dans un échantillon de tissu tumoral permet de réaliser la distinction des gliomes de haut grade par rapport à ceux de bas grade. Dans le cadre du traitement, la thérapie envisagée consiste à moduler l’expression des microARN dérégulés dans les tumeurs. L’approche évaluée consiste à contrer l’expression de microARN oncogènes surexprimés à l’aide d’un antimicroARN (antimiR). Ce type de molécule est chimiquement semblable aux molécules d’ARN naturellement présentes dans la cellule. Pour une meilleure efficacité de cette stratégie thérapeutique, l’autre partie du projet a consisté à optimiser le transport de l’antimiR et l’effet de la thérapie. Pour introduire l’antimicroARN au plus près du coeur de la tumeur, il a été prévu de réaliser un couplage entre un antimiR et un dérivé de chalcones pénétrant facilement dans les cellules et doué de propriétés antitumorales, cette combinaison paraît prometteuseSolid malignant tumors have molecular characteristics that clearly distinguish them from healthy tissue. The project is to develop a new therapeutic strategy based on these molecular characteristics. We set up a new therapeutic approach so as to customize treatment by connecting it directly to the diagnosis of the tumor (theranostic approach).Brain tumours and bladder tumours are two examples of particularly aggressive solid tumours. These two types of tumors are classified into several subgroups that have their own molecular profiles. The microRNAs (miR) are molecules naturally synthesized by cells. These molecules may have a role of oncogene or tumour suppressors whose expression is strongly deregulated in tumours. So the assessment of the expression levels of few microRNA allows the distinction of gliomas of high grade compared to low grade.To set up the new therapy we needed to modulate the expression of microRNAs deregulated in tumors. The proposed approach was to counter the expression of oncogenic microRNAs overexpressed using an antimicroARN (antimiR). This type of molecule is chemically similar to the naturally occurring RNA molecules in the cells. For a better efficiency of this new therapeutic strategy, we tried to optimize the transport of the antimiR to increase the therapeutic effect. To vectorize the therapeitic antimiR to the heart of the tumor, we envisioned to chemically combine the antimiR to a cell-penetrating antitumoral compound. Chalcones derivatives which are hydrophobic have this capability. A combination of the two molecules (antimicroARN and chalcone) was evaluated and the results appeared promising
10
Toupet, Karine. "Stratégies thérapeutiques des maladies à prions." Montpellier 2, 2009. http://www.theses.fr/2009MON20128.
Abstract:
Les maladies à prions sont des maladies neurodégénératives qui touchent l'homme et l'animal, et dont l'issue est fatale. Ces maladies sont provoquées par l'accumulation dans le cerveau de la PrPSc, l'isoforme mal repliée de la protéine prion cellulaire. L'apparition de nouveaux risques de transmission de ces maladies et l'absence de traitement efficace, nous ont incité à explorer de nouvelles stratégies et cibles thérapeutiques. Nous avons développé deux approches thérapeutiques innovantes. La première à consister à rechercher des molécules capables de piéger les formes préamyloïdes de la PrPSc (dimères et trimères), décrites comme éléments essentiels du cycle de réplication des prions. Une technique de criblage de drogues in silico et in cellulo nous a permis de mettre en évidence des composés thiényl pyrimidiques et thiényl azines capables d'oligomériser spécifiquement la PrPSc. Ces oligomères de PrPSc réduisent l'infectiosité des prions in vivo, soulignant le potentiel thérapeutique de ces composés. Notre deuxième stratégie est une stratégie de thérapie génique utilisant les propriétés dominantes négatives de certains polymorphismes de la protéine prion, comme les mutants Q218K et Q167R. Notre objectif a été d'évaluer le potentiel thérapeutique de vecteurs lentiviraux portant les mutants PrPQ218K et PrPQ167R, chez des souris au stade tardif de la maladie. Nous avons réussi à prolonger significativement la durée de vie des souris de 20% grâce à 2 injections chroniques de vecteurs lentiviraux portant le mutant PrPQ167R. Nos résultats ouvre la voie sur de nouvelles perspespectives thérapeutiques pour les maladies à prions et autres maladies neurodégénérativesPrion diseases are fatal neurodegenerative disorders that affect both humans and animals. These diseases are induced by the accumulation in the brain of the misfolded isoform of the normal cellular prion protein: PrPSc. The emergence of new risks of transmission for these diseases and the lack of efficient treatments, prompt us to search for new therapeutic strategies and targets. We developed two innovative therapeutic approaches. The first one consisted in searching for molecules able to trap preamyloid forms of PrPSc (dimers and trimers), known as key elements in the replication cycle of prions. A drugs screening approach, in silico and in cellulo, allowed us to discover thienyl pyrimidine and thienyl azine compounds able to specifically oligomerize PrPSc molecules. These PrPSc oligomers decrease prions infectivity in vivo, highlighting the therapeutic potential of these compounds. Our second strategie is a gene therapy approach using the dominant negative properties of certain polymorphisms of the prion protein, such as the Q218K and Q167R mutants. Our objective was to evaluate the therapeutic potential of lentiviral vectors carrying the PrPQ218K and PrPQ167R mutants, in mice, at the terminal stage of the disease. We succeeded in significantly prolonging the survival time of mice of 20%, with two intracerebrally chronic injections of lentiviral vectors carrying the PrPQ167R mutant. All our results not only open the way for new therapeutic strategies against prion diseases but also will benefit for therapies of other neurodegenerative disorders
11
Bisson, Jean-François. "Application de la thérapie photodynamique sur des tumeurs de vessie induites chez le rat femelle Fischer 344." Nancy 1, 2000. http://www.theses.fr/2000NAN11304.
Abstract:
Thèse de doctorat en génie biologique et médicale. Le cancer de la vessie est un des cancers les plus fréquents chez l'Homme et son incidence ne cesse d'augmenter. C'est la raison pour laquelle il est nécessaire de disposer de modèles tumoraux vésicaux fiables et représentatifs de la pathologie humaine, pour tester la validité de nouvelles voies thérapeutiques, comme la photochimiothérapie. La création d'un nouveau modèle de tumeur vésicale orthotopique chez le rat femelle Fischer 344 correspond à ce besoin. Il a été obtenu par un processus associant l'abrasion mécanique locale de l'urothélium et l'administration d'une suspension de cellules de tumeur de vessie syngéniques (lignée AY-27) par voie urétrale. Le développement de ces tumeurs induites a été suivi par échographie et leur nature a été déterminée par anatomopathologie. Ce sont des carcinomes à cellules transitionnelles de type infiltrant, avec une localisation unique et constante dans le fond de la vessie et dans l'axe de l'urètre. La spectroscopie de fluorescence in situ, réalisée à l'aide d'un capteur à fibres optiques miniaturisé, n'a pas permis de différencier formellement les spectres spécifiques des tissus vésicaux sain et tumoral à la longueur d'onde d'excitation utilisée. En revanche, elle nous a permis de suivre la biodistribution d'un photosensibilisant (Pp IX) après administration de son précurseur (5-ALA) par voie générale (intrapéritonéale) et locale (instillation vésicale) et de déterminer les ratios tumeur/vessie saine pour chaque mode d'administration. Ces ratios maximums sont de 2,85 ± 1,2 3h30 après injection intrapéritonéale et de 3,96 ± 1,04 après instillation vésicale pendant 4h. Ces études ont été confirmées par microscopie de fluorescence, technique qui a également permis de préciser la localisation de la PpIX en fonction du temps et du mode d'administration du 5-ALA utilisés. Enfin, le traitement par thérapie photodynamique a été réalisé in situ, à l'aide d'un diffuseur frontal miniaturisé, sur des rats porteur de tumeurs vésicales aux temps pour lesquels les ratios tumeurs/vessie saine sont maximums. L'efficacité thérapeutique, déterminée par analyse histopathologique, est variable en fonction du degré d'infiltration des tumeurs mais semble indépendante du mode d'administration du 5-ALA choisiThe number of bladder cancers being in constant progression during the last few years, it is necessary to develop a representative bladder tumor model of human pathology in order to test the validity of new therapeutic methods as photochemotherapy. That's why we created a new bladder tumor model in the female Fischer 344 rat. After performing a local mechanical urothelial denudation, syngenic bladder tumor cells were instilled by uretral way. Development of induced tumors was followed by echography and their nature determined by histopathology. These are infiltrating transitional cell carcinomas with a constant and single localization at the bottom of the bladder and in the axis of uretra. In situ fluorescence spectroscopy, with a miniaturized optic fibers captor, has not allowed to distinguish strictly autofluorescence spectra of the normal bladder and the tumors at the wavelenght used. This non-invasive method has also been used to follow the biodistribution of a photosensitizer (PpIX) after administration by general (intraperitoneal) or local (instillation) route of its precursor (5-ALA) and to determine the maximal tumor/normal bladder ratios. These maximal ratios have been estimated : 2. 85 ± 1. 2 3h30 after intraperitoneal administration and 3. 96 ± 1. 04 after bladder instillation during 4h. These studies were confirmed by fluorescence microscopy, method which also allowed to specify the localization of PpIX according to the time and the 5-ALA administration route used. Finally, we carried out in situ photodynamic treatment of rat bladder tumors with a miniaturized frontal light distributor for the time tumor/normal bladder ratios were maximal. Therapeutic efficacy was defined by histopathological analysis. It was variable according to the infiltrating grade of the tumors but seemed to be independent with the 5-ALA administration route used
12
Compérat, Eva. "Les évènements moléculaires dans la cancerogènese vesicale." Paris 7, 2006. http://www.theses.fr/2006PA077080.
Abstract:
L'incidence annuelle du carcinome urothélial est de 7800 cas en France. Ces tumeurs sont le plus souvent multi focales bien que dans 80% des cas superficielles, limitées à la muqueuse vésicale (pTa) ou au chorion (pT1). L'envahissement de la musculeuse (pT2) constitue un élément pronostic péjoratif. La cancérogenèse des carcinomes de vessie est un processus séquentiel multi-étapes, de la dysplasie épithéliale au carcinome in situ puis au cancer invasif. Des anomalies génétiques caractérisent chacune de ces étapes. L'analyse de l'expression des gènes (transcriptome) montre des résultats encore trop disparates, pour permettre une caractérisation moléculaire des différents stades de la progression tumorale. Les travaux exposés analysent et comparent l'expression par RT-PCR en temps réel, dans des échantillons de tissu vésical normal et de différents stades de carcinomes urothéliaux, de 11 gènes sélectionnés. L'expression d'Aurora-A, impliqué dans le contrôle de la mitose, est augmentée dès les stades précoces de carcinomes urothéliaux (pTa) et cette augmentation d'expression est significativement corrélée au stade tumoral. Cinq gènes possèdent un profil inverse avec une expression diminuant alors que le stade devient plus important. Il s'agit notamment de gènes "impliqués dans la lymphangiogenèse (VEGF-D, LYVE-1, PROK-1), l'adhésion intercellulaire (connexine 43) et d'un marqueur de différentiation urothéliale (TATp63). Ces travaux ont été complétés par des études immunohistochimiques (p63, Aurora-A) afin de déterminer s'il existait une corrélation entre expression du gène et expression protéique, en fonction des stades tumoraux et/ou des rechutesUrothelial carcinoma (UC) is a frequent cancer, with an incidence of 7800 new cases diagnosed annually in France. These tumors display multifocality and are heterogeneous. Eighty percent are superficial non-invasive neoplasms (pTa) or chorion invasive neoplasms (pTl). Patients with muscle-invasive cancers (pT2) have poor clinical outcome. Bladder carcinogenesis follows a multistep process from dysplasia to carcinoma in situ and bladder wall infiltration. Global analysis of transcriptom is not completely understood. The following studies wanted to gain better insight into the early molecular mechanisms of bladder carcinogenesis, using the real-time quantitative reverse transcriptase-polymerase chain reaction (RT-PCR). We analysed the expression levels of 11 selected genes in bladder spécimen from normal tissue and from different stages in cancer development. Aurora-A involved in mitosis increased in a linear way and was correlated to tumor stage. Five genes showed decreasing levels in cancer: Genes concerning lymphangiogenesis, intercellular adhesion and urothelial differentiation. This study bas been completed by immunohistochemical studies to determine whether expression of these molecules showed correlation to stage and relapse
13
Volpilière, Marc. "Dysfonctionnement vésico-sphinctérien chez l'hémiplégique vasculaire adulte : à propos de 312 cas." Montpellier 1, 1990. http://www.theses.fr/1990MON11042.
14
Lesbordes, Jeanne-Claire. "Thérapie génique des maladies motoneuronales par les facteurs neurotrophiques : approches virale et non-virale." Paris 5, 2002. http://www.theses.fr/2002PA05CD06.
Abstract:
Perte sélective des nerfs moteurs, atrophie consécutive des muscles squelettiques, mécanismes pathologiques inexpliqués et abscence de pharmacopée efficace : telles sont les caractéristiques communes de la Sclérose Latérale Amyotrophique (SLA) et de l'Amyotrophie Spinale (SMA), maladies progressives systématiquement mortelles. Les facteurs neurotrophiques, substrats naturels des motoneurones pendant leur phase de croissance, ont été proposés comme candidats thérapeutiques pour ces deux maladies. Malheureusement, les premiers essais cliniques ont révélé une toxicité importante des injections répétées de protéines racombinantes. Nous avons alors démontré l'intérêt d'injecter directement le gène codant pour la protéine choisie dans le muscle, le transformant alors en " usine de production " délivrant physiologiquement, de façon stable et continue, les molécules thérapeutiques. Nous avons cherché dans ce travail à comparer l'efficacité de cette approche de thérapie génique, à l'aide de vecteurs viraux, dans trois modèles murins : le modèle spontané pmn (pour progressive motor neuronopathy), ainsi que les souris transgéniques NSE-CRE-SMN(delta)7 et SOD1G93A, respectivement modèles de la SMA et de la SLA. Nous avons montré que l'injection intramusculaire d'un vecteur adénoviral codant la cardiotrophine-1 (CT-1) permettait de préserver les nerfs moteurs, d'améliorer les performances motrices, de retarder l'apparition de troubles fonctionnels dans les deux modèles transgéniques, ainsi que d'améliorer nettement la survie des souris SMA. Afin d'envisager une thérapie humaine plus sure et moins coûteuse, nous avons également évalué le potentiel thérapeutique de vecteurs plasmidiques " nus " combinés à l'électroporation, méthode basée sur l'application d'impulsions électriques contrôlées. Nous avons démontré dans le modèle pmn que l'électroporation de plasmide codant CT-1 était tout aussi efficace que la méthode virale en termes de protection neuro-musculaire et de survie. Nous avons également démontré qu'-à l'inverse de la précédente méthode, l'éléctroporation pouvait être répétée, augmentant ainsi les effets neuro-protecteurs des facteurs neurotrophiques produits.
15
Tonnel-Ferroul, Julie. "Complications pulmonaires, hépatiques et ostéoarticulaires consécutives à l'instillation intra-vésicale de B. C. G : à propos de 3 observations." Bordeaux 2, 2001. http://www.theses.fr/2001BOR2M054.
16
Kowalczuk, Laura. "Applications de l'électrotransfert à l'étude des maladies oculaires inflammatoires et angiogéniques." AgroParisTech, 2010. http://www.theses.fr/2010AGPT0032.
17
Robert, Florian. "Vers une thérapie pour deux maladies vasculaires rares : criblage de chimiothèques de médicaments pour les maladies Rendu-Osler et Hypertension Artérielle Pulmonaire." Thesis, Université Grenoble Alpes (ComUE), 2019. http://www.theses.fr/2019GREAV039.
Abstract:
BMP9 est un ligand de la famille TGF-β et considéré comme un facteur de quiescence vasculaire. Différents acteurs de la voie de signalisation de BMP9 comme les récepteurs ALK1, et BMPR2 sont mutés dans deux pathologies vasculaires rares, la maladie de Rendu-Osler ou Télangiectasie Hémorragique Héréditaire et l’Hypertension Artérielle Pulmonaire, qui sont liées à une dysfonction endothéliale. Les traitements actuels visent à améliorer les symptômes des patients, sans apporter de réelle guérison de la maladie. Aussi, il est primordial aujourd'hui de trouver de nouveaux traitements étiologiques rétablissant cette voie de signalisation. Pour ce faire, j'ai utilisé le criblage à haut débit afin de repositionner de potentiels candidats-médicaments venant des chimiothèques Prestwick et TargetMol, comprenant au total 2133 molécules approuvées par FDA et EMA. Ces criblages ont été effectués sur des modèles de cellules endothéliales rapportant la voie BMP9 grâce à un promoteur sensible aux BMPs (BRE, BMP Response Element). J’ai développé et minaturisé un premier modèle de cellules endothéliales HMEC-1 secrétant une Metridia Luciférase sous le contrôle de BRE, puis un deuxième modèle utilisant une double transfection permettant l’expression de la Firefly Luciférase sous le contrôle de BRE et de la Renilla Luciférase comme contrôle de transfection. Le premier modèle n’a révelé que des faux positifs. Par contre, le deuxième modèle m’a permis d’identifier plusieurs molécules qui ont la particularité d’activer la voie de l’AMPc mais dont l’action n’a pas pu être confirmée au niveau moléculaire. Un dernier crible utilisant des cellules non endothéliales (myoblastes C2C12BRA) a permis d’identifier deux autres molécules qui sont en cours de caractérisationBMP9 is a ligand of the TGF-β family and is considered as a vascular quiescence factor. Different actors within BMP9 signaling pathway such as receptors ALK1 and BMPR2 are found to be mutated in two rare vascular diseases, Rendu-Osler disease also called Hereditary Hemorrhagic Telangiectasia and Pulmonary Arterial Hypertension, which are due to endothelial dysfunction. Current treatments aim to improve symptoms in patients, whitout providing a real cure. Thus, it is essential today to find new etiological treatments restoring this signaling pathway. To do this, I used high-throughput screening to reposition potential drug candidates from the Prestwick and TargetMol libraries, a total of 2133 molecules approved by FDA and EMA. These screens were realized on endothelial cells models reporting the BMP9 pathway using a BMP sensitive promoter (BRE, BMP Response Element). I developed and miniaturized a first endothelial model HMEC-1 secreting a BRE-controlled Metridia Luciferase, then a second one using double transfection of Firefly luciferase under BRE control and Renilla Luciferase as a transfection control. The first model revealed only false positives hits. However, the second one allowed us to identify several molecules activating the cAMP pathway but which action hasn’t been confirmed at molecular levels. A last screen was performed on non-endothelial cells (Myoblasts C2C12BRA), allowing us to identify two other molecules which are currently undergoing characterisations
18
Biot, Claire. "BCG immunotherapy for bladder cancer : characterization and modeling of the bladder immune response to BCG identify strategies for improving anti-tumor activity." Paris 6, 2012. http://www.theses.fr/2012PA066009.
Abstract:
L’instillation intravésicale de BCG comme traitement adjuvant du cancer de la vessie est l’un des seuls exemples efficaces d’immunothérapie utilisée en clinique, mais ses mécanismes d’action ne sont pas précisément définis. J’ai établi un modèle de souris pour étudier la dynamique de la réponse immune induite par l’administration intravésicale de BCG. Si une seule instillation est suffisante pour induire la dissémination du BCG dans les ganglions lymphatiques drainant la vessie et l’activation de lymphocytes T, des instillations répétées de BCG vivant sont nécessaires pour obtenir une robuste infiltration de lymphocytes T dans la vessie. Toutefois, l’immunisation préalable des souris par voie sous-cutanée conduit à un processus inflammatoire aigu accentué dès la première instillation, suggérant une réaction d’hypersensibilité de type retardé, et accélère le recrutement des lymphocytes T. Cela se traduit par l’amélioration considérable de la réponse anti-tumorale, et l’analyse de données cliniques révèle un avantage pour les patients ayant la signature d’une réponse immune au BCG avant traitement. Ainsi je suggère que l’immunisation parentérale par le BCG des patients négatifs pour le test tuberculinique, avant la thérapie intravésicale, pourrait améliorer la réponse au traitement. Par ailleurs, j’ai contribué à la construction et au paramétrage d’un modèle mathématique décrivant les interactions entre le BCG, le système immunitaire, la vessie et les cellules tumorales. Notre modèle souligne l’importance de la réponse immune adaptative pour l’extinction tumorale et contribue à prédire des paramètres cliniques optimaux pour la BCG thérapieIntravesical instillation of bacillus Calmette-Guérin (BCG) for bladder cancer is one of the few examples of successful immunotherapy in the clinic, though its precise mechanisms of action remain unclear. I established a mouse model to study the dynamics of the immune response following intravesical BCG. I demonstrated that BCG dissemination to bladder draining lymph nodes and T cell priming could occur following a single instillation; yet, repeated instillations with live BCG were necessary for a robust T cell infiltration in the bladder. Subcutaneous immunization with BCG prior to intravesical instillation overcame this requirement, triggering enhanced inflammation, suggestive of a delayed-type hypersensitivity reaction, and accelerating T cell entry into the bladder. Such findings translated into an improved anti-tumor response in mice that were subcutaneously immunized with BCG prior to intravesical treatment of an orthotopic tumor, while analysis of clinical data showed that patients with pre-existing immunity to BCG had significantly longer recurrence-free survival. I also contributed to construct and parameterize a mathematical model describing the interactions between BCG, the immune system, bladder mucosa and tumor cells. The model suggested a requirement for the adaptive immune response to achieve tumor extinction rates similar to the clinic, and helped predict optimal clinical parameters for BCG therapy. Together these data provide new insights into a long-standing clinically effective immunotherapy and predict strategies that may improve patient management, such as the parenteral exposure of patients without immune signature to BCG prior to intravesical therapy
19
Podevin, Guillaume. "Approche chirurgicale de la thérapie génique in vivo des maladies héréditaires du foie." Nantes, 2006. http://archive.bu.univ-nantes.fr/pollux/show.action?id=51f552e2-17c0-447d-ba36-77190321cf3b.
Abstract:
Idéalement, la thérapie génique des hépatopathies héréditaires doit permettre une synthèse continue d’une protéine thérapeutique active. Néanmoins, les transferts de gène hautement efficaces obtenus dans les hépatocytes in vivo se traduisent par une expression transitoire du transgène, du fait de l’induction d’une réponse immunitaire dirigée contre le produit de celui-ci. Afin d’éviter cet inconvénient, nous avons développé chez le rat une approche chirurgicale dans laquelle l’administration des vecteurs a été effectuée grâce à une perfusion du foie après exclusion vasculaire complète. En vue d’un essai clinique, nous avons aussi appliqué des techniques chirurgicales de perfusion hépatique sur deux modèles de grands animaux, l’agneau et le macaque. Nos travaux ont montré que : (1) le foie isolé-perfusé et la purification du surnageant viral afin d’enlever la protéine soluble transgénique sont tous deux nécessaires pour diminuer de manière significative la réponse immunitaire, (2) les interventions chirurgicales ont été bien tolérées dans les deux espèces de grands animaux, (3) les hépatocytes du foie des agneaux n’ont pas étés facilement accessibles aux vecteurs viraux, probablement à cause d’une membrane basale épaisse. En conclusion, la technique de perfusion avec exclusion vasculaire pour le transfert de gène in vivo dans le foie est un bon moyen d’obtenir une expression durable de la protéine thérapeutique. Le primate non-humain est le seul modèle qui peut permettre de clairement définir le potentiel de la thérapie génique du foie en pratique cliniqueIdeally, gene therapy for inherited diseases should result in indefinite synthesis of fully active therapeutic protein. Nevertheless, highly efficient gene transfer into hepatocytes in vivo resulted in transient expression of the transgene, due to induction of an immune response against the transgene product. To circumvent this drawback, we developed in rats a surgical approach in which vectors administration was performed through asanguineous perfusion of the liver after complete vascular exclusion. In sight of clinical trial, we also applied surgical techniques of liver perfusion on two large animal models, the lamb and the macaque. Our works demonstrated that: (1) both asanguineous perfusion of the liver together with purification of the viral surpernatant in order to remove soluble transgenic protein were required to decrease significantly immune response, (2) surgical procedures were well tolerated in the two large animal species, and (3) hepatocytes in lamb liver were not easily accessible to viral vectors probably because of thick basal lamina. In conclusion, asanguineous perfusion for in vivo liver gene transfer is a good way to obtain sustained expression of the transgenic protein. Non-human primate is the only relevant model to clearly define the potential of liver gene therapy in clinics
20
Duque, Sandra. "Thérapie génique des maladies du motoneurone à l'aide de vecteurs dérivés des AAV." Paris 7, 2009. http://www.theses.fr/2009PA077101.
Abstract:
Les maladies du motoneurone (MN) telles que la sclérose latérale amyotrophique (SLA) sont des affections qui se traduisent par une perte progressive des MNs au niveau du cortex moteur, du bulbe rachidien et/ou de la moelle épinière. A ce jour, il n'existe aucun traitement efficace pour ces maladies. Le développement de stratégies de transfert de gène ciblant efficacement les MNs reste donc une démarche cruciale pour le traitement de ces maladies. Ce travail de thèse a consisté à améliorer le transfert de gènes véhiculés par des vecteurs AAV au sein des MNs. Dans une première approche, nous avons injecté des vecteurs AAV dans certains noyaux cérébraux connectés à la moelle épinière. Notre hypothèse était que les protéines produites au niveau des neurones de ces noyaux cérébraux seraient transportées le long des axones connectés à la moelle épinière par transport axonal antérograde et sécrétées dans la région des MNs spinaux. Dans une seconde étude, nous avons analysé le potentiel d'une injection systémique d'un nouveau sérotype d'AAV (l'AAV9) arborant un génome non conventionnel double brin pour transduire les cellules du système nerveux central (SNC) dont les MNs. Nous avons démontré qu'il était possible d'obtenir une transduction efficace et à long terme des MNs chez la souris adulte à la suite d'une seule injection intraveineuse de vecteur. Cette stratégie non-invasive de transfert de gène dans le SNC représente une avancée significative pour le traitement par thérapie génique des maladies du MN et ouvre de nouvelles perspectives pour de nombreuses autres maladies touchant le SNCMotor neuron diseases (MND) such as amyotrophic lateral sclerosis (ALS), are incurable degenerative disorders characterised by the selective loss of motor neurons (MNs) localised in the motor cortex, the brainstem and/or the spinal cord. To date, there is no treatment for these disorders because of the blood brain barrier (BBB) which hindered the crossing of the therapeutic molecules from the circulation flow to the central nervous System (CNS) parenchyma. New therapeutic strategies, based on gene transfer using viral vectors have thus been developed. This study aimed to evaluate new strategies for increasing the efficiency of MNs transduction using AAV vectors. The fîrst approach bypasses the problem of the BBB by injecting the viral vectors directly into brain areas at the origin of the descending spinal pathways. The injection of AAV vectors expressing therapeutic transgenes into these specific brain structures could indeed lead to the production and traffîcking of therapeutic proteins through descending pathways to the spinal cord by anterograde axonal transport mechanisms. The subsequent secretion of these proteins could thus influence the survival and the activity of the spinal cord MNs. The second approach is based on the systemic administration of a new serotype and genome AAV vectors, the self-complementary AAV9 vector. We identifîed the remarkable ability of AAV9 vectors to transduce cells of the CNS, including MNs, after a single intravenous injection in adult mice. This gene transfer strategy represents an efficient and non-invasive procedure to reach the CNS. This result raises thus great hopes for the treatment of MN disease and other neurological disorders
21
Ribault, Sébastien. "Thérapie génique des maladies cardiovasculaires Ciblage transcriptionnel des vecteurs de transfert de gènes." Université Louis Pasteur (Strasbourg) (1971-2008), 2001. http://www.theses.fr/2001STR13206.
22
Coyat, Carolanne. "Mécanismes moléculaires responsables de neuropathies auditives et thérapie." Thesis, Montpellier, 2019. http://www.theses.fr/2019MONTT080.
Abstract:
L’objectif de ma thèse a reposé sur l’identification des mécanismes cellulaire et moléculaires à l’origine de la surdité associée à l'AOD. Pour ce faire j’ai utilisé un modèle murin porteur d’une mutation couramment identifiée chez les patients AOD (OPA1delTTAG). J’ai combiné des approches fonctionnelles, morphologiques et moléculaires pour identifier les liens existants entre la mutation OPA1delTTAG et la dysfonction mitochondriale, le stress oxydant et les dommages de l'ADN et la perte de l'audition. Élucider ces mécanismes permettrait d'envisager de nouvelles cibles thérapeutiques pour prévenir la dégénérescence des cellules cochléaires liée aux mutations du gène OPA1The objective of my thesis was based on the identification of the cellular and molecular mechanisms that cause deafness associated with ODA. To do this I used a mouse model carrying a mutation commonly identified in OOD patients (OPA1 of delTTAG). I combined functional, morphological and molecular approaches to identify the links between the OPA1 mutation of the TTAG and mitochondrial dysfunction, oxidative stress and DNA damage and hearing loss. Elucidating these mechanisms would make it possible to consider new therapeutic targets to prevent the degeneration of cochlear cells linked to mutations in the OPA1 gene
23
Gurram, Venu. "Preuve de principe pour la thérapie de l'atrophie optique dominante de type1." Thesis, Toulouse 3, 2020. http://www.theses.fr/2020TOU30215.
Abstract:
L'impact des handicaps visuels a considérablement augmenté avec les moyens contemporains de communication visuelle. Les atrophies du nerf optique, souvent provoquées par des défauts des mitochondries, constituent une des causes majeures de déficience visuelle. Elles résultent de la dégénérescence des cellules ganglionnaires de la rétine (CGR), dont les axones forment le nerf optique. Les mutations du gène codant la protéine mitochondriale OPA1 sont responsables de la principale forme d'atrophie optique dominante (AOD). OPA1 est impliquée dans la fusion des mitochondries, qui de concert avec la fission, détermine la morphologie des mitochondries, permet leur adaptation immédiate aux besoins énergétiques et contrôle leur qualité en restaurant ou en éliminant les organites endommagés. De plus, OPA1 est impliquée dans d'autres fonctions, notamment le maintien de l'ADN mitochondrial et la protection contre l'apoptose. À ce jour, il n'existe pas de thérapie pour l'AOD. Ma thèse visait à développer deux types de stratégies thérapeutiques, l'une génétique et l'autre pharmacologique, pour cette maladie. La stratégie génétique impliquait l'expression d'une protéine du Borna virus nommée X, dont les propriétés neuroprotectrices ont été démontrées in vitro et sur des souris modèles de la maladie de Parkinson par l'équipe du Dr D. Dunia. D'autre part, l'équipe de P. Belenguer a montré que la protéine X permettait de remédier aux défauts de morphologie mitochondriale, d'arborisation dendritique et de synapses induits par l'inactivation d'OPA1 dans des neurones en culture primaire. Dans la continuité, j'ai montré que X permettait également de remédier aux défauts de morphologie mitochondriale de fibroblastes de patients porteurs de mutations d'OPA1 et atteints d'AOD. D'autre part, dans le cadre d'une thérapie pharmacologique, l'équipe de P. Belenguer a récemment montré que deux médicaments en repositionnement, le Clomifène et l'Hexestrol, ont permis de remédier à divers désordres mitochondriaux chez des levures mutées pour l'orthologue d'OPA1. J'ai étendu cette étude au système mammifère, en analysant l'effet des deux médicaments sur la morphologie mitochondriale de fibroblastes de patients atteints d'AOD. J'ai montré que les deux médicaments permettaient de remédier aux défauts de morphologie mitochondriale en inhibant le processus de fission. Alors que mon projet visait également à analyser l'effet de la protéine X, ainsi que celle de l'Hexestrol et du Clomiphene in vivo, je n'ai malheureusement pas pu mettre en évidence les défauts de la rétine et du nerf optique décrits précédemment dans un modèle de souris AOD, ce qui a empêché son utilisation pour tester l'effet neuroprotecteur de X et des deux drogues. En conclusion, bien que ces études précliniques doivent être consolidées par des études in vivo, les résultats in vitro indiquent que les stratégies génétiques et pharmacologiques testées pourraient être efficaces pour traiter l'AOD. À ma connaissance, ce travail est le premier du genre, où la dynamique mitochondriale, c'est-à-dire l'équilibre entre la fusion et la fission mitochondriale, a été ciblée pour traiter l'AOD. En outre, ces travaux donnent également l'espoir de développer ces thérapies pour d'autres maladies mitochondriales associées aux CGR, comme la neuropathie optique héréditaire de Leber ou le glaucomeThe impact of visual handicaps has dramatically risen with the contemporary means of visual communication. A major cause of visual impairment lies in optic nerve atrophies often due to defects in mitochondria. Mutations in the gene coding for the mitochondrial protein OPA1 lead to the main form of Dominant Optic Atrophy (DOA), due to degeneration of the Retinal Ganglionic Cells (RGCs), which axons form the optic nerve. OPA1 is involved in the fusion of mitochondria, which together with mitochondrial fission determines the morphology of mitochondria, allows their immediate adaptation to energetic needs and controls their quality by restoring or removing damaged organelles. In addition, OPA1 has other functions including mitochondrial DNA maintenance and protection from apoptosis. To date, there is no therapy available for DOA. My thesis aimed at developing both genetic and pharmacological therapeutic strategies for this disease. Genetic strategy involved the expression of a protein called X from the Borna Disease Virus, which was shown to have neuroprotective properties in in vitro and mouse model of Parkinson Disease by D. Dunia's team. Work in P. Belenguer 's team has shown that X rescued the defects in mitochondrial morphology, dendritic arborisation and synapses induced by downregulation of OPA1 in primarily cultured neurons. In continuation, I showed that X rescued the defects in mitochondrial morphology of fibroblasts of DOA patients harbouring OPA1 mutations by inducing mitochondrial elongation. On the other hand, as part of pharmacological therapy, P. Belenguer's team recently showed that two repurposed drugs, clomiphene and hexestrol, rescued mitochondrial defects in yeast mutated for the orthologue of OPA1. I extended the study to the mammalian system, by analysing the effect of the two drugs on mitochondrial morphology in DOA fibroblasts bearing OPA1 mutations. I showed that the two the drugs rescued defects in mitochondrial morphology by inhibiting the fission process. Although, this project aimed to extend the analysis of the effect of X protein as well as of hexestrol and clomiphene, in vivo, unfortunately, I was not able to evidence the previously described retina and optic nerve defects in a DOA mouse model, impairing its use to test the protective effect of X and the two drugs. In conclusion, although, these pre-clinical studies need to be extended in vivo, the results in vitro indicated that the two genetic and pharmacological strategies could be effective to treat DOA. To my knowledge, this work is first of its kind, where mitochondrial dynamics, i.e. the equilibrium between mitochondrial fusion and fission, was targeted to treat DOA disease. Furthermore, this work is also giving the hope to develop therapies for other RGCs associated mitochondrial diseases like Leber Hereditary Optic Neuropathy and glaucoma
24
Amsellem-Ouazana, Delphine. "Implications de la voie de signalisation ERBB dans la carcinogénèse urothéliale." Paris 5, 2006. http://www.theses.fr/2006PA05N13S.
Abstract:
Le cancer de la vessie, 5è cause de mortalité par cancer en France et 4è aux Etats-Unis, voit son incidence croître depuis 30 ans 1-3. Le carcinome à cellules transitionnelles, forme la plus fréquente des cancers de vessie, prédomine nettement chez l’homme. Les tumeurs vésicales se répartissent en tumeurs superficielles (60 à 70 % des cas lors du diagnostic) et en tumeurs infiltrantes. Les tumeurs superficielles posent deux problèmes évolutifs différents mais pouvant s’associer : le risque de récidive et/ou de progression. Les tumeurs superficielles sont cependant, dans l’immense majorité des cas, accessibles à un traitement conservant la vessie 4, 5. Aux tumeurs superficielles on peut opposer les tumeurs infiltrantes de vessie. Celles-ci sont soit infiltrantes au moment du diagnostic (20 à 30 % des cas), soit résultent de l’évolution vers l’infiltration d’une tumeurERBB-driven growth pathway has been implicated in most human epithelial malignancies including transitional cell carcinoma (TCC) of the bladder. Using quantitative real-time RTPCR we showed the interest of simultaneously quantifying the mRNA expression levels of the four ERBB and their eleven ligand genes in a series of bladder TCC. We were able to show an excellent correlation between TT-PCR results and immunohistochemistry for the evaluation of ErbB2 overexpression. We also confirmed that in bladderTCC,ERBB2 gene amplification only accounts for a small number of protein
25
Detante, Olivier. "Thérapie cellulaire par cellules souches mésenchymateuses humaines après ischémie cérébrale." Grenoble, 2010. http://www.theses.fr/2010GRENV008.
Abstract:
Les accidents vasculaires cérébraux (A VC) sont la première cause de handicap de l'adulte. Favoriser la plasticité cérébrale post-lésionnelle représente un objectif thérapeutique majeur. Dans ce contexte, la thérapie cellulaire a récemment émergé. Son action, fondée sur la « réparation» du tissu cérébral, a montré un bénéfice sur la récupération fonctionnelle dans des modèles d'ischémie cérébrale. La transposition de ce traitement à l'homme reste à ce jour limitée à des études pilotes. Dans nos travaux précliniques, nous avons montré, après un infarctus cérébral chez le rat, une bonne tolérance et un bénéfice fonctionnel de l'administration intracérébrale (à la phase aiguë) et intraveineuse (à la phase subaiguë) de cellules souches mésenchymateuses humaines (CSMh) de grade clinique. La survie des CSMh greffées (possible durant plusieurs semaines) et leur différenciation en cellules d'intérêt (neurones, astrocytes) sont très faibles et ne peuvent expliquer à elles seules le bénéfice observé. Parmi les mécanismes d'action possibles des CSM (effet neurotrophique, pro-angiogénique, immunomodulation. . . ), nous avons mis en évidence par IRM un effet microvasculaire précoce. Nous avons également montré l'innocuité du marquage des CSMh par microparticules ferriques pour l'IRM cellulaire et la microscopie. Ce marquage cellulaire est utile pour détecter et suivre par IRM des cellules greffées au sein du cerveau (durant au moins 15 jours), mais nous a paru insuffisant dans le cadre d'une injection IV. Pour évaluer la biodistribution des CSMh injectées par voie IV à la phase subaiguë, nous avons effectué une étude par imagerie nucléaire qui a permis d'identifier l'attraction rapide de CSMh vers l'infarctus cérébral. En parallèle, la mise en place d'un essai clinique de phase 2 a été effectuée. Le délai, la voie optimale d'administration ainsi que la source cellulaire à utiliser restent encore controversés. L'optimisation de la thérapie cellulaire nécessite encore le développement de projets de recherche translationnelle associant les études expérimentales et les essais cliniques. C'est dans ces conditions que la thérapie cellulaire pourrait devenir un traitement efficace après un A VCStroke is the leading cause of acquired adult disability. Improving brain plasticity after stroke represents an important therapeutic strategy. Cell therapy favours functional recovery after cerebral ischemia in rodent models. The pioneer clinical studies did not reproduce this benefit for patients due to a limited number of studied patients. Ln our preclinical studies, we observed a good tolerance and a functional benefit of the intracerebral (at the acute phase) and intravenous (IV) (at the subacute phase) administration of clinical-grade human mesenchymal stem cells (hMSC). The hMSC survival (during several weeks) and their differentiation into neurons or astrocytes are very limited and can not explain alone the functional benefit. Among different mechanisms of action of hMSC (neurotrophic and/or proangiogenic effects, immunomodulation. . . ), we showed by MRI an early microvascular effect. We also showed that hMSC can be labeled for MRI and microscopy by iron microparticles without altering cell properties. This cell labeling is useful to detect and follow hMSC grafted into the brain but is insufficient to follow the IV injected hMSC. To assess the biodistribution ofIV injected hMSC, we conducted a nuclear imaging study. This experiment showed that the hMSC are attracted to cerebral ischemic lesion in the first hours following their injection. Ln paraIlel, we developed a phase 2 clinical trial. We do not know yet the best route of administration, the best dose and the optimal delay of the graft. The cell therapy optimization needs the development of translational projects with experimental studies linked to clinical trials. Thus cell therapy could become an efficient treatment for stroke
26
Delesse, Labe Marie-Dominique. "Les complications pulmonaires et générales de l'immunothérapie intravésicale par le BCG dans les tumeurs superficielles de la vessie : à propos d'un cas." Nancy 1, 1990. http://www.theses.fr/1990NAN11038.
27
Magy, Laurent. "FGF2 et myelinisation : vers une stratégie de thérapie génique ex vivo des maladies demyelinisantes." Paris 6, 2003. http://www.theses.fr/2003PA066201.
28
Salgues, Frédéric. "Ciblage des lysosomes pour la thérapie enzymatique substitutive ou pour la thérapie photodynamique." Thesis, Montpellier 2, 2011. http://www.theses.fr/2011MON20148.
Abstract:
Le récepteur du mannose-6-phosphate cation indépendant (RM6P-CI) permet l'endocytose puis le transfert de molécules porteuses du marqueur M6P vers les lysosomes. Pour améliorer à la fois l'affinité pour le RM6P-CI et la stabilité du résidu M6P, nous avons procédé à la synthèse d'analogues isostères stables et fonctionnalisés en position anomère pour permettre un couplage efficace à des molécules d'intérêt thérapeutique. Tout d'abord un couplage à des enzymes recombinantes humaines a été réalisé. Le remodelage de la partie oligosaccharidique de l'enzyme lysosomale GAA, dont la déficience est responsable de la maladie de Pompe, a permis de mettre en évidence que la néoglycoGAA est reconnue efficacement par les RM6P-CI et que son activité enzymatique est totalement conservée. Deuxièmement, le couplage de ces analogues du M6P à des porphyrines en vue de la thérapie photodynamique des cancers est envisagé. Le modèle mis au point en série du mannose a permis de valider notre approche de ligation de saccharides à des photosensibilisateurs par des méthodes évitant après couplage les étapes classiques de déprotection des saccharides. L'étude biologique menée sur les porphyrines glycosylées préparées a démontré leur cytotoxicité photoinduiteThe cation independent mannose-6-phosphate receptor (CI-M6PR) allows the endocytosis and the transfer of molecules bearing the M6P marker to lysosomes. To improve both the affinity for the CI-M6PR and stability of the M6P residue, we carried out the synthesis of isosteric M6P analogues functionalized at the anomeric position to allow efficient coupling to molecules of therapeutic interest. First, the coupling on human recombinant enzymes was performed. The remodelling of the oligosaccharide part of the lysosomal enzyme GAA, whose deficiency is responsible for Pompe disease, helped to highlight the neoglycoGAA is recognized efficiently by CI-M6PR and its enzymatic activity is completely preserved. Second, the coupling of these analogues of M6P to porphyrins for photodynamic therapy of cancer was considered. The model developed in the mannose series has validated our strategy of ligation of saccharides to photosensitizers. The employed methods avoid the conventional steps of deprotection of saccharides after coupling. The biological study with the prepared glycosylporphyrins demonstrated the photoinduced cytotoxicity
29
Leclercq, Sabrina. "Régulation du gène Abcd2 de rat dans le cadre d’une thérapie pharmacologique de l’Adrénoleucodystrophie liée au chromosome X." Dijon, 2007. http://www.theses.fr/2007DIJOS018.
Abstract:
L’X-ALD est une maladie neurodégénérative progressive due à des mutations du gène ABCD1 qui code l’hémi-transporteur ABC peroxysomal ALDP. L’ALDRP, codé par le gène ABCD2, est son plus proche homologue et présente une redondance fonctionnelle partielle qui permet d’envisager une thérapie pharmacologique ciblée de l’X-ALD. Nous avons montré que le niveau basal d’Abcd2 est plus important dans le foie de rats femelles que dans celui des rats mâles. Sa régulation semble impliquer un demi-site PRE présent dans la partie 5’UTR du promoteur Abcd2, en présence de progestérone et de son récepteur. Par ailleurs, le niveau d’expression relatif d’Abcd2, d’Abcd3 et d’Abcd4 est plus important dans le foie de rats mâles soumis à un régime carencé en acide α-linolénique en comparaison au régime contenant cet acide. C’est l’inverse pour le niveau relatif d’expression d’Abcd1 dans le foie de ces ratsX-ALD is a neurodegenerative disorder caused by mutations in the ABCD1 gene which encodes a peroxisomal ABC half-transporter called ALDP. ALDRP, encoded by ABCD2, is the closest homolog of ALDP and displays a partial functional redundancy, when overexpressed, and is considered as a potential therapeutic target for X-ALD. In this work, we show that the Abcd2 basal expression is more important in female rat liver than in male. This regulation may involve the PRE half-site present in the Abcd2 5’UTR promoter, progesterone and its receptor. Moreover, the Abcd2, Abcd3 and Abcd4 relative expression is more important in male rat liver fed a diet without α-linolenic acid than in male rat liver fed a diet containing this fatty acid. On the contrary, Abcd1 relative expression is more important in the liver of male rat fed a diet containing α-linolenic acid than a diet without α-linolenic acid
30
Baldeschi, Christine. "Epidermolyse bulleuse dystrophique : étude préclinique de thérapie génique et implication du collagène VII dans la tumorigénèse." Nice, 2004. http://www.theses.fr/2004NICE4050.
Abstract:
L'épidermolyse bulleuse dystrophique est une maladie génétique de la peau associée à des mutations dans le gène codant pour le collagène VII. Cette génodermatose est caractérisée par des décollements de la peau, des cicatrices mutilantes, et la survenue très fréquentes de carcinomes squameux invasifs. Cette maladie constitue un système très intéressant pour la mise en place d'une approche de thérapie génique cutanée et pour comprendre le rôle des composants de la membrane basale dans la cancérisation épithéliale. Nos résultats ont montrés que -1) des vecteurs rétroviraux contenant l'ADNc de 9kb du collagène VII transduisent efficacement des kératinocytes primaires de patients déficients en collagène VII. -2) les kératinocytes génétiquement modifiés sont utilisables pour générer des peaux reconstituées transplantables présentant in vivo toutes les caractéristiques histologiques et fonctionnelles d'une peau normale. L'identification et la caractérisation d'une famille de chiens EBDR exprimant un collagène VII muté nous a permis de valider l'approche de thérapie génique ex vivo des EBD dans un modèle animal immunocompétent. Grâce à la possibilité de réverser le phénotype EBD par transfert de l'ADNc du collagène VII nous avons lié le caractère invasif caractéristique des kératinocytes EBDR à une augmentation de l'expression des métalloprotéases MMP1 et MMP3 dans ces cellules. L'expression d'un collagène VII recombinant suffit à bloquer le pouvoir invasif des kératinocytes EBDR. Ces résultats prouvent pour la première fois que le collagène VII joue un rôle majeur de suppresseur d'invasion tumorale en régulant négativement l'expression des métalloprotéases MMP1 et MMP3Recessive dystrophic epidermolysis bullosa (RDEB) is an inherited skin disorder caused by mutations in collagen VII. RDEB is characterized by skin blistering, abnormal healing, contractures and cancers. No conventional therapy is available for this disease, which justifies the perfection of treatments based on gene therapy. Our challenge was the isolation of highly clonogenic RDEB keratinocytes, the successful and efficient transfer of the large-size collagen VII cDNA (9kb) and the reconstruction of transplantable skin equivalents made with genetically modified cells from human and dog RDEB patients. This research is currently in progress and it implies preclinical assays on the RDEB dogs to validate the gene therapy approach for the treatment of the condition. In RDEB, absence or abnormal expression of collagen VII results in aggressive squamous cell carcinomas. Primary RDEB keratinocytes display altered migration and invasion properties ex vivo, which indicates a possible proneness to tumor progression. These properties have been associated to an increased of the expression of the metalloproteinases MMP1 and MMP3. Interestingly, expression of collagen VII in transduced RDEB keratinocytes strongly down regulated the expression of MMP1 and MMP3. All together, our result shows that collagen VII plays a major role of invasive suppressor by down regulating MMP1 and MMP3 expression in keratinocytes
31
Bouaita, Aïcha. "Essais de thérapie génique contre la dégénérescence rétinienne chez la souris Harlequin déficiente pour la protéine mitochondriale AIF." Paris 6, 2012. http://www.theses.fr/2012PA066566.
Abstract:
La rétine est souvent affectée par des pathologies liées à la dysfonction mitochondriale. Ces pathologies peuvent être liées à une anomalie génétique dans l’ADN mitochondrial, par exemple la NOHL et la NARP. Elles peuvent être liées à une anomalie dans l’ADN nucléaire, par exemple l’AOD. La dysfonction mitochondriale serait également impliquée dans d’autres pathologies comme le glaucome et la DMLA. Le déséquilibre entre la production et l’élimination des ROS serait un des mécanismes moléculaires dans ces dégénérescences rétiniennes. L’œil, par sa petite taille et son confinement représente un organe de choix pour tester une thérapie, et suivre son effet in vivo par des méthodes non invasives. Les travaux du Dr. M. Corral-Debrinski ont permis de mettre en place une thérapie génique pour prévenir des effets délétères d’une mutation de l’ADN mitochondrial chez le rat. Cette approche fondée sur la localisation des ARN messagers sur la surface de l’organite a ouvert la voie pour tester la même stratégie chez la souris Harlequin afin d’entraver la dégénérescence rétinienne et l’atrophie optique dues à la mutation du gène AIF. Après avoir caractérisé la dystrophie rétinienne chez la souris Harlequin, une thérapie par le vecteur AAV2/2-AIFm1 a été réalisée. En fonction des cellules rétiniennes ciblées, la voie d’injection des particules virales était intravitréenne ou sous rétinienne. Le bénéfice de ce traitement sur la préservation de la viabilité des cellules ganglionnaires de la rétine et leurs axones a été vérifié. En conclusion, la stratégie thérapeutique dans le cadre de l’atrophie optique chez la souris Harlequin utilisant un vecteur de type AAV2/2 fut un succès.
32
Biot, Claire. "BCG-THERAPIE ET CANCER DE LA VESSIE : LA CARACTERISATION ET LA MODELISATION DE LA REPONSE IMMUNE AU BCG DANS LA VESSIE REVELENT DES STRATEGIES POUR L'AMELIORATION DE LA REPONSE ANTI-TUMORALE." Phd thesis, Université Pierre et Marie Curie - Paris VI, 2012. http://tel.archives-ouvertes.fr/tel-00827698.
Abstract:
L'instillation intravésicale de bacilles de Calmette et Guérin (BCG) comme traitement adjuvant du cancer de la vessie non invasif du muscle est l'un des seuls exemples de réussite d'une immunothérapie à la clinique, avec des taux de réponse de 50-70 %. S'il est établi que le succès de la thérapie repose sur des injections répétées de BCG vivant, administré peu après la résection chirurgicale de la tumeur, ses mécanismes d'action n'ont pas été définis précisément. Au cours de ma thèse, j'ai établi un modèle expérimental de souris pour étudier la dynamique de la réponse immune induite par l'administration intravésicale de BCG. Au vu d'un certain nombre de travaux chez l'homme, j'ai concentré mon attention sur l'établissement du processus inflammatoire aigu, ainsi que sur l'activation et le recrutement des lymphocytes T. Je démontre qu'une seule instillation de BCG est suffisante pour induire la dissémination du BCG dans les ganglions lymphatiques drainant la vessie et l'activation de lymphocytes T produisant de l'interféron gamma. Cependant, des instillations répétées de BCG vivant sont nécessaires pour obtenir une robuste infiltration de lymphocytes T dans la vessie. Toutefois, je montre qu'une immunisation préalable des souris par voie sous-cutanée conduit à un processus inflammatoire aigu accentué dès la première instillation et accélère le recrutement des lymphocytes T dans la vessie, par rapport au protocole standard. En outre, l'immunisation préalable des souris par voie sous-cutanée améliore de façon substantielle leur réponse à la BCG-thérapie, dans un modèle d'implantation orthotopique de cellules tumorales. Enfin, l'analyse de données cliniques révèle un avantage statistiquement significatif pour les patients qui ont la signature d'une réponse immune au BCG préalablement à la thérapie intravésicale. Par ailleurs, utilisant des données cliniques et expérimentales, j'ai contribué à la construction et au paramétrage d'un modèle mathématique stochastique décrivant les interactions entre le BCG, le système immunitaire, la vessie et les cellules tumorales. Nous avons tout d'abord montré qu'il était très improbable que l'extinction tumorale puisse être médiée seulement par l'immunité innée, car cela exigerait une capacité de tuer par effet bystander bien plus élevée que celle observée expérimentalement chez les cellules effectrices de l'immunité innée. Nous avons ensuite raffiné notre modèle pour qu'il prenne aussi en compte l'immunité adaptative. Nous avons alors utilisé ce deuxième modèle pour évaluer les paramètres cliniques optimaux pour la BCG thérapie, et parmi eux (i) le délai entre la résection chirurgicale et la première instillation, (ii) la dose de BCG, (iii) le temps de contact du BCG avec la vessie et (iv) l'intervalle de temps entre deux injections répétées de BCG. Tous ces paramètres ont un impact sur la probabilité d'extinction tumorale, et, notablement, la multiplication par deux du délai entre deux instillations améliorerait très favorablement le taux de réponse au traitement. L'ensemble de ces données contribue à éclairer sous un jour nouveau une immunothérapie utilisée en clinique depuis longtemps et prédit des stratégies qui pourraient contribuer à améliorer le soin des patients. Notamment, je suggère que la pratique d'un test tuberculinique sur les patients préalablement à la thérapie intravésicale, suivie de l'immunisation parentérale par le BCG des patients négatifs pour le test, pourrait être une méthode sûre et efficace pour améliorer la réponse clinique induite par les instillations intravésicales de BCG.
33
Moulay, Gilles. "APPROCHES DE THÉRAPIES GÉNIQUES POUR DES MALADIES NEUROMUSCULAIRES." Phd thesis, Université d'Evry-Val d'Essonne, 2010. http://tel.archives-ouvertes.fr/tel-00507450.
Abstract:
La thérapie génique de myopathies telles que la dystrophie musculaire de Duchenne nécessite une approche systémique afin de traiter l'ensemble de la musculature. Le vecteur AAV est actuellement le plus efficace pour transduire le muscle. Nous montrons que la biodistribution du vecteur AAV administré par voie veineuse peut être modifiée en utilisant diverses stratégies adjuvantes chez la souris saine. La pré-injection de polymères permet ainsi d'améliorer la transduction des muscles par le vecteur AAV, ou encore de baisser la réponse immune neutralisante induite par l'injection intraveineuse du vecteur. Nous abordons également l'impact de facteurs modulateurs exogènes ou endogènes – tels que la procédure d'administration ou certains facteurs sanguins – sur la transduction systémique de l'AAV. Dans une seconde approche, nous avons évalué le transfert de gènes dans le muscle dystrophique afin de sécréter dans la circulation sanguine une protéine transgénique fusionnant le récepteur soluble I du TNF-α avec le fragment constant d'une immunoglobuline (TNFR-Is/mIgG1). La comparaison des cinétiques de sécrétion obtenu après le transfert de gène dans le muscle de souris saines ou de souris dystrophiques mdx indique que le contexte inflammatoire du muscle dystrophique favorise une réponse immune contre le transgène. Nous montrons que l'expression et la sécrétion d'un variant murin peu immunogène du TNFR-Is/mIgG1 améliore la fonction musculaire de la souris mdx sans toutefois conférer un avantage sélectif aux fibres musculaires dystrophiques qui continuent leur cycle de nécrose et de régénération.
34
Lavallée, Alexandre. "La philosophie de Nietzsche comme thérapie." Thesis, Université Laval, 2012. http://www.theses.ulaval.ca/2012/29442/29442.pdf.
35
Couet, Lydia. "Soigner la folie et collectionner 'l'art des fous' : l'art asilaire au XIXème siècle : archéologie de l'art brut." Thesis, Bourgogne Franche-Comté, 2019. http://www.theses.fr/2019UBFCH030.
Abstract:
Ce travail s'intéresse aux artefacts réalisés en milieu asilaire au XIXe siècle et début XXe : de leur apparition au sein de collections et publications à caractère majoritairement scientifique jusqu'aux premières expositions dans les galeries d'art à partir des années vingt. Nous tenterons de montrer comment, grâce à l'initiative de quelques grandes figures de la médecine, de la littérature et de l'art, ces réalisations ont pu sortir des murs de l'asile et dépasser leur statut d'objet médical pour commencer à investir la scène artistiqueTreating madness and collecting the "art of the insane". Asylum art during the nineteenth century : an archeology of Art Brut.This work is about artifacts made by patients in asylums during the XIXth and the beginning of the XXth century: from their entrance into scientific collections and publications, until the first exhibitions into art galleries during the 1920's. We will try to show how, thanks to the role of some personalities of medical, litterary and artistic areas, the medical status of those creations will be overtaken and they will begin to invest artistic scene
36
Haase, Georg. "Thérapie génique de maladies dégénératives des motoneurones et transfert de gènes dans le nerf lésé." Paris 5, 1999. http://www.theses.fr/1999PA05CD05.
Abstract:
Les maladies dégénératives des motoneurones de l'homme, les amyotrophies spinales infantiles et la sclérose latérale amyotrophique (SLA), ont en commun une perte progressive de motoneurones spinaux conduisant à une atrophie et paralysie musculaires. Les facteurs neurotrophiques ont été considérés comme molécules candidatez pour le traitement de ces maladies mais leur administration a été compliquée par la biodisponibilité limitée ou la toxicité des protéines recombinantes. Nous avons développé le transfert adénoviral de gènes de facteurs neurotrophiques afin de produire ces protéines in vivo à des taux constants et/ou de mieux cibler leur action vers les motoneurones. Des vecteurs adénoviraux codant pour NT-3 (neurotrophine-3), BDNF (brain-derived neurotrophic factor) et CNTF (ciliary neurotrophic factor) ont été mis au point et leur fonctionnalité a été démontrée ex-vivo. Leur potentiel thérapeutique a été testé dans le modèle pmn (progressive motor neuronopathy). Les souris pmn non-traitées développent une atrophie et parésie musculaire progressives et meurent prématurément. La survie moyenne des souris pmn injectées en intramusculaire avec le vecteur NT-3 était augmentée de plus de 50%. Nos analyses histologiques et électrophysiologiques chez ces souris ont démontré une amélioration des fonctions neuromusculaires, une réduction de la dégénérescence axonale ainsi qu'une réinnervation des fibres musculaires par induction de la repousse axonale. L'étude de la biodistribution des ARNs et de la protéine NT-3 a révélé que ces effets étainet dûs à la libération de NT-3 dans la circulation générale. La coadministration des vecteurs NT-3 et CNTF a amélioré l'ensemble des paramètres thérapeutiques tandis que l'injection du vecteur BDNF restait sans effet bénéfique. En comparant les effets d'injections intramusculaires, intraveineuses et intracérébroventriculaires du vecteur CNTF, nous avons déterminé la meilleure voie d'administration pour cette cytokine. Nos résultats représentent le premier exemple d'une amélioration de la survie dans une affection neurodégénérative par thérapie génique avec adénovirus et ouvrent de nouvelles perspectives thérapeutiques dans la SLA. L'utilisation de facteurs neurotrophiques a été suggéré pour accélérer ou guider la repousse axonale après lesion nerveuse. Nous avons évalué la capacité des cellules de Schwann du rat à exprimer le transgène lacZ après injection intranerveuse de différents vecteurs de transfert de gène. Jusqu'à 18% des cellules de Schwann des nerfs lésés étaient infectés par un vecteur adénoviral mais l'expression de lacZ diminuait progressivement au cours du temps. Une immunosupression par Cyclosporine A ou l'induction d'une tolérance immunitaire ont permis de réduire la réponse inflammatoire et d'augmenter l'expression du transgène. Le transfert de gène dans le nerf périphérique représente une stratégie originale pour administrer des facteurs neurotrophiques dans le compartiment clos de la périnèvre et pourrait à l'avenir constituer un complément au traitement chirurgical des lésions nerveuses.
37
Leblond, Anne-Laure. "Thérapie cellulaire des maladies respiratoires : utilisation de la voie aérienne pour l'implantation de cellules souches." Nantes, 2008. https://archive.bu.univ-nantes.fr/pollux/show/show?id=94d92b74-c5e4-4ca9-8688-0e2e42a8e3e2.
Abstract:
Une destruction progressive et irréversible de l'épithélium des voies aériennes est observée chez les patients atteints de maladies respiratoires. Une stratégie de thérapie cellulaire consisterait à utiliser des cellules souches pour coloniser les zones épithéliales lésées et réparer l'épithélium. Les premiers travaux de thérapie cellulaire respiratoire ont porté sur l'administration systémique de cellules souches adultes chez des souris irradiées. Ces études ont conduit à des résultats modestes et controversés à cause des méthodes de détection par fluorescence. L’objectif de ce projet était de développer une stratégie de thérapie cellulaire visant l’épithélium, tout en évitant l’irradiation des souris et l’utilisation de la fluorescence. Des cellules souches embryonnaires et des cellules souches mésenchymateuses ont été injectées en intratrachéal chez des souris présentant des lésions épithéliales dans les voies aériennes. Ces lésions étaient induites par l’injection préalable d’un détergent, le polidocanol. Des méthodes quantitatives ont montré que 0. 4 à 5,5 % des cellules souches survivent dans les voies aériennes lésées. Cette survie s’avère dépendante de l’état de différenciation des cellules et de la présence de lésions. Une méthode biochimique a permis de détecter des cellules souches dans la lumière de la trachée et des bronches. 7 jours après l'injection de détergent, lorsque l'épithélium est spontanément régénéré, des cellules souches administrées ont été localisées dans les voies aériennes. Ces résultats confortent l'utilisation de la voie aérienne dans le développement d'une stratégie de thérapie cellulaire pour les pathologies respiratoires avec des lésions épithéliales telles que la mucoviscidoseOver the past decade, interest has increased in the use of stem cells from bone marrow to optimize lung repair after systemic administration in irradiated mice. These studies lead to limited and controversial results because of fluorescent detection methods. The objective of our work was to develop a stem cell based strategy while avoiding animal irradiation and controversial detection methods. Embryonic and mesenchymal stem cells were intratracheally injected in a murine model with acute epithelial airway injury. Epithelial injury was induced by intratracheal detergent administration. Quantitative methods showed that 0. 4 to 5. 5% stem cells survived specifically in the injured airway, whereas no differentiated cells survived in injured airway. Importantly, stem cells did not survive in healthy airway. With biochemical staining, mesenchymal stem cells were detected in injured trachea lumen and bronchi. 7 days after detergent administration while airway epithelium was totally repared, stem cells were located in regenerated bronchia. With this experimental design, we demonstrated the feasibility of intratracheal cell delivery for airway diseases with acute epithelial airway injury
38
Labrande, Christelle. "Neuroprotection et thérapie cellulaire : deux approches expérimentales dans le traitement des accidents vasculaires cérébraux ischémiques." Aix-Marseille 2, 2007. http://www.theses.fr/2007AIX22959.
39
Lostal, William. "Approches thérapeutiques pour le traitement des dysferlinopathies." Thesis, Evry-Val d'Essonne, 2010. http://www.theses.fr/2010EVRY0009/document.
Abstract:
Ce travail de thèse a porté sur le développement d'approches thérapeutiques pour les dysferlinopathies, pathologies dues à un déficit en dysferline, pour lesquelle sil n'existe pas de traitement à l'heure actuelle. Nous avons généré et caractérisé un modèle murin déficient en dysferline, B6.A/J-Dysfprmd, pouvant être comparé avec une souche contrôle. Ce modèle présente une atteinte dystrophique dès deux mois et une diminution de l'activité locomotrice est mise en évidence. Dans une approche par transfert de gène dans le muscle, compte-tenu de la taille de l’ADNc de la dysferline, nous avons utilisé la capacité à se concatémériser des vecteurs AAV. Les résultats ont montré une expression stable d’une protéine entière, jusqu’ à au moins un an. Cette expression est associée à une amélioration fonctionnelle et phénotypique des animaux traités. Une autre étude a porté sur l’évaluation du potentiel thérapeutique d’une forme courte de dysferline. Les résultats ont montré qu’une protéine tronquée était exprimée et permet une restauration partielle de la fonction de réparation membranaire, mais aucune amélioration phénotypique n’est détectée. Ces résultats suggèrent pour la première fois, une modularité de la dysferline. Finalement, nous avons testé si un déficit en dysferline pouvait être compensé par la surexpression de myoferline. Un modèle murin surexprimant la myoferline a été créé. Celui-ci ne montre pas de signes délétères dus à cette surexpression. Ces souris transgéniques ont ensuite été croisées avec les souris déficientes en dysferline. Une amélioration de la fonction de réparation membranaire est observée, mais le phénotype dystrophique du muscle n’est pas amélioréIn this work, I developed and studied therapeutical strategies for dysferlinopathies, neuromuscular disorders due to dysferlin deficiency. To date, no treatment is available for these diseases. We generated and characterized a dysferlin deficient mouse model, B6.A/J-Dysfprmd. The onset begins at 2-month old with an associated decrease of locomotor activity. For gene transfer approach into muscle, dysferlin coding sequence is too large to enter into a single rAAV. We used properties of rAAV to concatemerize by ITR sequences interaction. Results, obtained with this strategy, showed expression of entire dysferline protein until at least one year. We showed also that this expression is associated to an improvement of phenotype and functional activity of tretaed mice. We also studied therapeutical potential of a truncated dysferlin protein. Results showed the expression of a short protein cassociated to a partial functional membrane repair activity, but none in locomotor activity. Nonetheless, these results showed for the first time a partial modularity of dysferlin. Finally, we also studied compensation of dysferlin by myoferlin overexpression in muscle. A myoferlin-overexpressing transgenic mouse model was generated; a significant level of myoferlin is detected but no deleterious effect was observed. These transgenic mice were crossed with dysferlin deficient mice. An improvement of membrane repair capacity is observed, nevertheless, dystrophic features into muscle were still present
40
Junges, Martine. "P. U. V. A. Thérapie : de la photobiologie cutanée aux applications en dermatologie." Nancy 1, 1996. http://www.theses.fr/1996NAN10085.
41
Jacobin-Valat, Marie-Josée. "Nouvelles perspectives pour le diagnostic et la thérapie des pathologies myocardiques et thrombotiques : obtention d'anticorps monoclonaux humains recombinants." Bordeaux 2, 2001. http://www.theses.fr/2001BOR28853.
Abstract:
Le suivi immunoscintigraphique des pathologies myocardiques et le traitement des pathologies coronariennes nécessitent le développement de nouvelles sondes injectables à l'homme sans danger. D'où notre intérêt pour les AcM. Ainsi l'IgM humaine B7 anti-myosine obtenue par l'équipe de recherche, présente un potentiel dans la détection des nécroses myocardiques et le diagnostic précoce d'éventuels rejets de greffe. Les applications cliniques nécessitant une clairance et une pénétration tissulaire optimum, des fragments scFv ont été élaborés par ingénierie moléculaire. Dans le cadre des pathologies coronariennes, les antagonistes de l'intégrine αIIbβ3 ont suscité l'intérêt en tant qu'outil de diagnostic et de thérapie des thromboses. L'AcM murin XIIF9 spécifique de la conformation de l'αIIbβ3 exprimée sur les plaquettes activées, présente une bonne fixation ex vivo des thrombi sur un modèle animal de l'athérosclérose. Les antagonistes, en inhibant la formation du complexe αIIbβ3 /fibrinogène, réduisent les épisodes thrombotiques chez les patients à risque. Trois banques combinatoires humaines d'anticorps ont été développées à partir des cellules B de patients immunisés contre l'intégrine αIIbβ3 lors de pathologies telles la Thrombasthénie de Glanzmann (EB) ou le Purpura Thrombopénique AutoImmun (TE et BO). Des phages-anticorps recombinants spécifiques de l'intégrine sous sa conformation activée, ont été isolés selon la méthode d'expression de fragments d'anticorps à la surface de phages filamenteux. Notre étude a montré la nature polyclonale de la réponse immunitaire développée, la pathogénicité des auto-anticorps déterminée par l'accumulation de mutations au niveau des régions CDRS et l'émergence de motifs récurrents au niveau des CDR3H. De plus, le potentiel d'inhibition de l'agrégation plaquettaire des formes solubles scFv de certains clones a été clairement démontré lors d'études d'affinité et d'inhibition par le fibrinogèneScintigraphic studies of myocardial pathologies and the treament of Acute Coronary Syndrome (ACS) show the necessity to obtain a new class of agents that could be injected in humans without provoking the immune system. It's the reason why we chose to study the diagnostic and therapeutic potential of human mAbs. The ability of a monospecific human IgM Mab (B7) obtained by the research team, to bind to human heart myosin suggests that this mAb may be useful in the imaging of mycordial necrosis after myocarditis of graft rejection. Owing to the fact that the parent molecule is an IgM, the scFv fragment were constructed by molecular ingineering to alleviate problems such as a poor diffusion and a slow penetration inside necrotic myocytes. For a purpose of detection of newly formed thrombi, we determined the feasibility of imaging thrombi using a 123-I labeled murine Mab XIIF9 in an atherosclerotic rabbit model of acute arterial thrombosis. This Mab presented with high affinity and specificity for αIIbβ3 expressed on activated platelets holds promise for ACS imaging. Moreover, we have made a great deal of efforts towards developping αIIbβ3 inhibitors that block fibrinogen inducing platelet aggregation and have a more significant impact for therapeutic management of patients with ACS than currently used αIIbβ3 antagonists. We have succeeded in generating three libraries of single-chain antibodies (TE, EB and BO) from the B cells of patients with Glanzmann's Thrombasthenia or AutoimmuneThrombocytopenic Purpura developing in their sera antibodies against the αIIbβ3 integrin. We obtained several specific recombinant phage-antibodies stemmed from studied patients by phage display of single-chain antibodies on the surface of filamentous phage, some of them recognising the activated form of the integrin. A first important conclusion issuing from our results is that the immune reaction occurring during these diseases consists of a polyclonal hypermutations displayed in the complementarity-determining regions by anti-αIIbβ3 fragments supports the hypothesis of the pathogenesis of developing antibodies. Thirdly, CDR3H analysis of phage-antibodies points out recurrent patterns. Affinity studies and assays for inhibition of platelet aggregation clearly show the therapeutic potential of some of these recombinant antibodies
42
Masse, Florence, and Florence Masse. "Développement de nouveaux vecteurs de médicaments à base de nanoparticules d'or pour la thérapie oculaire." Master's thesis, Université Laval, 2019. http://hdl.handle.net/20.500.11794/37628.
Abstract:
Le traitement de maladies oculaires par voie topique est simple pour le patient. Il est préconisé dans plus de 90% des cas puisqu’il est généralement moins invasif que les traitements alternatifs. Cependant, l’efficacité des médicaments administrés par voie topique demeure limitée en raison de processus physiologiques qui entraînent une faible absorption. Les travaux réalisés au cours de cette maîtrise visent l’amélioration de la biodisponibilité des médicaments pour la thérapie oculaire grâce à un vecteur à base de nanoparticules d’or. L’intérêt de l’utilisation des nanoparticules d’or comme vecteur consiste à utiliser leurs propriétés mucoadhésives afin d’augmenter le temps de rétention des médicaments à la cornée, et ainsi, d’en permettre une plus grande absorption. Ce projet se divise en cinq volets. Le premier volet vise l’étude des connaissances actuelles sur les nanoparticules d’or en ophtalmologie, et souligne les caractéristiques qui mènent à la synthèse de nanoparticules non-toxiques. Le deuxième volet présente l’évaluation des propriétés mucoadhésives des nanoparticules d’or. Cela implique d’évaluer leur affinité pour les mucines, soit des protéines du film pré-cornéen. Afin d’obtenir des nanoparticules pouvant supporter les conditions nécessaires à leur usage in vivo, la synthèse et la caractérisation de nanoparticules d’or ultrastables ont été réalisées. L’optimisation de l’encapsulation de médicaments dans la couronne périphérique de la nanoparticule constitue le quatrième volet. Finalement, l’étude de la cytotoxicité des nanoparticules d’or représente le cinquième volet. Les expériences ont démontré que nos nanoparticules d’or mucoadhésives et ultrastables supportent des conditions drastiques, dont l’autoclave, permettant leur stérilisation pour des usages in vivo. Des molécules actives utilisées en thérapie oculaire peuvent y être encapsulées. De plus, les nanoparticules ne semblent pas affecter les mécanismes biologiques. Ces données suggèrent l’amélioration potentielle de la thérapie oculaire grâce aux nanoparticules d’or.Le traitement de maladies oculaires par voie topique est simple pour le patient. Il est préconisé dans plus de 90% des cas puisqu’il est généralement moins invasif que les traitements alternatifs. Cependant, l’efficacité des médicaments administrés par voie topique demeure limitée en raison de processus physiologiques qui entraînent une faible absorption. Les travaux réalisés au cours de cette maîtrise visent l’amélioration de la biodisponibilité des médicaments pour la thérapie oculaire grâce à un vecteur à base de nanoparticules d’or. L’intérêt de l’utilisation des nanoparticules d’or comme vecteur consiste à utiliser leurs propriétés mucoadhésives afin d’augmenter le temps de rétention des médicaments à la cornée, et ainsi, d’en permettre une plus grande absorption. Ce projet se divise en cinq volets. Le premier volet vise l’étude des connaissances actuelles sur les nanoparticules d’or en ophtalmologie, et souligne les caractéristiques qui mènent à la synthèse de nanoparticules non-toxiques. Le deuxième volet présente l’évaluation des propriétés mucoadhésives des nanoparticules d’or. Cela implique d’évaluer leur affinité pour les mucines, soit des protéines du film pré-cornéen. Afin d’obtenir des nanoparticules pouvant supporter les conditions nécessaires à leur usage in vivo, la synthèse et la caractérisation de nanoparticules d’or ultrastables ont été réalisées. L’optimisation de l’encapsulation de médicaments dans la couronne périphérique de la nanoparticule constitue le quatrième volet. Finalement, l’étude de la cytotoxicité des nanoparticules d’or représente le cinquième volet. Les expériences ont démontré que nos nanoparticules d’or mucoadhésives et ultrastables supportent des conditions drastiques, dont l’autoclave, permettant leur stérilisation pour des usages in vivo. Des molécules actives utilisées en thérapie oculaire peuvent y être encapsulées. De plus, les nanoparticules ne semblent pas affecter les mécanismes biologiques. Ces données suggèrent l’amélioration potentielle de la thérapie oculaire grâce aux nanoparticules d’or.
Topical ocular therapy is a simple administration route used in more than 90% of cases when a patient need ocular treatment. It is generally less invasive than other available treatments which often involve intraocular injections and puncture wounds. However, efficiency of active molecules administered topically is limited considering that less than 0.02 % is successfully absorbed by the cornea. This master’s project aims the amelioration of ocular therapy by enhancing biodisponibility of active molecules thanks to a drug vector based on gold nanoparticles. Gold nanoparticles present mucoadhesive properties, leading to the increase of the retention time of drugs at the cornea, thus enhancing their absorption. This project is divided in 5 aspects. The first aspect aims to overview the actual knowledge on gold nanoparticles in ophthalmology and to highlight synthesis parameters leading to non-toxic nanoparticles. Second part presents the evaluation of gold nanoparticles’ mucoadhesive properties, which imply the evaluation of their affinity for pre-corneal film proteins, as mucins. To be used in vivo , gold nanoparticles must support sterilization, formulation treatments as well as physiological media. Third aspect presents the synthesis and characterization of ultrastable gold nanoparticles. Their capacity to encapsulate active molecules within their polymeric crown is evaluated as the fourth aspect. Finally, as the fifth aspect, the cytotoxicity of the nanoparticles was evaluated. The mucoadhesive ultrastable gold nanoparticles support drastic conditions, as autoclave sterilization predicting their use in vivo. Active molecules were successfully encapsulated within their ligands. Furthermore, they do not seem to cause any alteration of biological mechanism in cells. These results suggest potential improvement of ocular therapy thanks to gold nanoparticles.
Topical ocular therapy is a simple administration route used in more than 90% of cases when a patient need ocular treatment. It is generally less invasive than other available treatments which often involve intraocular injections and puncture wounds. However, efficiency of active molecules administered topically is limited considering that less than 0.02 % is successfully absorbed by the cornea. This master’s project aims the amelioration of ocular therapy by enhancing biodisponibility of active molecules thanks to a drug vector based on gold nanoparticles. Gold nanoparticles present mucoadhesive properties, leading to the increase of the retention time of drugs at the cornea, thus enhancing their absorption. This project is divided in 5 aspects. The first aspect aims to overview the actual knowledge on gold nanoparticles in ophthalmology and to highlight synthesis parameters leading to non-toxic nanoparticles. Second part presents the evaluation of gold nanoparticles’ mucoadhesive properties, which imply the evaluation of their affinity for pre-corneal film proteins, as mucins. To be used in vivo , gold nanoparticles must support sterilization, formulation treatments as well as physiological media. Third aspect presents the synthesis and characterization of ultrastable gold nanoparticles. Their capacity to encapsulate active molecules within their polymeric crown is evaluated as the fourth aspect. Finally, as the fifth aspect, the cytotoxicity of the nanoparticles was evaluated. The mucoadhesive ultrastable gold nanoparticles support drastic conditions, as autoclave sterilization predicting their use in vivo. Active molecules were successfully encapsulated within their ligands. Furthermore, they do not seem to cause any alteration of biological mechanism in cells. These results suggest potential improvement of ocular therapy thanks to gold nanoparticles.
43
Lemarchand, Patricia. "Thérapie génique des maladies respiratoires : Transfert de gènes par voie vasculaire à l'aide de vecteurs adénoviraux." Paris 5, 1995. http://www.theses.fr/1995PA05CD01.
Abstract:
L'endothélium vasculaire représente une cible privilégiée pour la thérapie génique, par ses capacités de sécrétion de protéines directement dans la circulation sanguine. Nous avons étudié l'efficacité , les spécificités, et les limites potentielles du transfert de gènes par vecteur adénoviral dans l'endothélium vasculaire. La première approche a consisté à évaluer le transfert du gène ß-galactosidase (ßgal) et de l'ADNc de α1-antitrypsine humaine in vitro dans des cellules endothéliales humaines, puis in vivo dans des segments d'artère carotide et de veine jugulaire de moutons. Les vecteurs adénoviraux sont efficaces pour le transfert de gènes dans les cellules endothéliales en culture, et in vivo dans l'endothélium vasculaire ; l'expression génique est limitée à l'endothélium, et le transitoire, disparaissant en quelques semaines. La seconde approche a évalué le transfert de gènes par voie vasculaire destiné au traitement de maladies respiratoires. Chez le mouton, le transfert et l'expression du gène ßgal ont été obtenus dans l'endothélium des circulations pulmonaire et bronchique, et dans les cellules épithéliales au voisinage des vaisseaux exprimant la ßgal. A partir de ces résultats, nous avons élargi le champ d'application des vecteurs adénoviraux à la pathologie cardiovasculaire. Le transfert du gène ßgal par vecteur adénoviral, est efficace dans la néointima artérielle (modèle de resténose après angioplastie), et dans les fibres musculaires cardiaques (modèle du rat) ; l'expression y est également transitoire. La dernière approche a porté sur une application potentielle du transfert de gènes par voie vasculaire avec les vecteurs adénoviraux : la protection contre le stress oxydant. La construction d'un vecteur adénoviral contenant de l'ADNc de la catalase humaine, nous a permis d'augmenter la protection conférée à des cellules en culture par le transfert du gène de la catalase, contre le stress oxydant. En conclusion, les vecteurs adénoviraux représentent un moyen efficace encore limité de transfert de gènes dans les vaisseaux, dont les applications potentielles sont multiples.
44
Cano, Jean-Pierre. "Dysfonctionnement vésico-sphinctérien et hémiplégie vasculaire de l'adulte : à propos de l'analyse de 245 hémiplégies." Montpellier 1, 1989. http://www.theses.fr/1989MON11232.
45
Harnafi, Hicham. "Etude de l'effet des composés bioactifs du basilic sur le métabolisme lipidique et la péroxydation des lipoprotéines de basse densité." Lille 2, 2008. http://www.theses.fr/2008LIL2S016.
Abstract:
Dans ce travail, nous avons montré l'effet des composés bioactifs extraits à partir du Basilic (Ocimum basilicum) sur les facteurs de risque de l'athérosclérose. Ainsi, l'extrait aqueux du basilic (EAB), les fractions préparées par extraction liquide-liquide et les fractions obtenues par HPLC préparative ont montré une amélioration significative du métabolisme des lipoprotéines chez des rats et des souris hyperlipidémiques. Cet effet implique des mécanismes liés, d'une part, à l'activation des récepteurs nucléaires (PPARs, LXRs et FXR) et d'autre part, à l'activation de l'expression des gènes impliqués dans le métabolisme des lipoprotéines circulantes (gènes de l'apo C-III et A-V). Par ailleurs, nous avons montré que l'effet bénéfique de ces composés sur le métabolisme lipoprotéique est en partie médié par l'inhibition de la biosynthèse du cholestérol. D'autre part, ces substances naturelles ont montré une action protectrice des LDL humaines et du plasma de la souris hyperlipidémique contre l'oxydation induite par le cuivre. Cette action se manifeste par une augmentation de la phase de latence du processus oxydatif et par la diminution du taux des TBARS dans le milieu réactionnel. Cet effet est fortement lié au potentiel anti-radicalaire des composés étudiés vis-à-vis du radical DPPH. En outre, dans une étude en ex vivo, nous avons mis en évidence l'effet bénéfique de l'EAB sur la réactivité vasculaire de l'artère abdominale chez le rat hyperlipidémique qui se traduit par une augmentation de la vasorelaxation en réponse au Carbachol et une diminution de la vasoconstriction en réponse à la phényléphrine. D'autre part, l'étude histologique de l'artère aorte chez les animaux hyperlipidémiques traités à l'EAB pendant 10 semaines montre une amélioration de la structure de leur paroi vasculaire. Nous avons démontré que cet effet anti-athérogène peut, d'une part, être étroitement lié aux activités hypolipémiante et antioxydante des composés actifs du basilic et d'autre part, à la diminution de l'activité des récepteurs Scavenger des macrophages humains et l'activation des récepteurs RORα chez les hépatocytes HepG2 in vitro. Par ailleurs, l'EAB inhibe l'agrégation des plaquettes sanguines induite par l'ADP et la thrombine, séparément. L'analyse chromatographique des composés bioactifs du basilic montre que la fraction hypolipémiante semble contenir du lutéolol-7-glucoside, deux dérivés caféiques et une quantité assez faible de la rutine. Par contre, la fraction anti-oxydante contient de l'acide rosmarinique, un dérivé caféique et du lutéolol-7-glucoside. L'étude de la toxicité de l'EAB, des polyphénols totaux et des saponines du basilic chez la souris montre que ces substances sont faiblement toxiques et leurs DL50 sont respectivement de 17, 17. 5 et 13. 8 g/kg V. O. D'autre part, nous avons montré que l'EAB et les fractions organiques bioactives ne présentent aucune cytotoxicité (fuite de l'adenylate kinase, de la lactate deshydrogenase et de la succinate deshydogenase cytosolic) vis-à-vis des lignées cellulaires hépatiques (HepG2), rénales (COS-7) et de macrophages (RAW 264. 7). Les substances extraites du basilic possèdent donc un potentiel bioactif bénéfique à la prévention et au traitement des maladies cardiovasculaires liées aux désordres du métabolisme lipoprotéique et à la peroxydation des lipoprotéines de basse densité.
46
Nguyen-Khac, Eric. "Maladie alcoolique du foie : génétique, diagnostic, et thérapeutique." Amiens, 2008. http://www.theses.fr/2008AMIED006.
47
Mahieu-Caputo, Dominique. "Les hépatocytes foetaux, vecteurs potentiels de thérapie cellulaire des maladies hépatiques. Transplantation chez l'adulte et in utero." Paris 5, 2004. http://www.theses.fr/2004PA05N048.
Abstract:
L'utilisation d'hépatocytes foetaux pourrait permettre de surmonter les difficultés rencontrées avec les hépatocytes adultes dans les programmes de thérapie cellulaire hépatique. La transplantation prénatale vise à optimiser la prise de greffe, tout en proposant une alternative à l'IMG en cas de diagnostic prénatal. Nous avons isolés, transduits et congelés des hépatocytes foetaux de primatenon humain (Macaque cynomolgus) Après allo-transplantation in utero à 2/3 de gestation, les cellules sont retrouvées à court terme. Nous avons isolé, caractérisé, transduits et congelés des hépatocytes humains foetaux (HHF) précoces (10-13 SA). Après transplantation dans le foie de souris athymiques, les HHF s'intègrent à long terme (12 sem), prolifèrent (chimérisme jusqu'à 7-10%). . .Transplantation of hepatocytes is a promising approche for the treatment of severe liver disease. The hurdles faced with adult hepatocytes could be surmounted with the use of human fetal hepatoblasts. Intra-uterine transplantation could improve chimerism and avoid termination of pregnancy in case of prenatal diagnosis. Primate fetal hepatocytes can be isolated, cryopreserved and immortalized. In utero allo-transplantation is feasible, allowing for short-term detection of donor hepatocytes. We have isolated, characterized,transduced and cryopreserved hepatoblasts from human livers at an early stage of development (11-13 weeks of gestation). After transplantation, cryopreserved cells engrafted into the liver of athymic mice for long term (12 sem), proliferated(up to 10% repopulation) and matured expressing Alb, Alpha-1-Antitrypsin, Cytochrome P450.
48
Cheikh, Khaled El. "Synthèse et évaluation biologique d’analogues du mannose 6-Phosphate fonctionnalisés pour la thérapie enzymatique substitutive." Montpellier 2, 2009. http://www.theses.fr/2009MON20089.
Abstract:
Les maladies de stockage lysosomales sont des affections génétiques rares et graves caractérisées par un déficit d'une ou plusieurs enzymes spécifiques conduisant à l'accumulation des substrats dans le lysosome. Le traitement de ces maladies, par l'enzymothérapie substitutive utilisant des enzymes lysosomales recombinantes, cible le récepteur du mannose 6-phosphate cation-indépendant (RM6P-CI). Le RM6P-CI permet le transport des enzymes porteuses du marqueur M6P vers les lysosomes. Ce marqueur de reconnaissance M6P est cependant sensible à l'hydrolyse par les phosphatases. Nous avons donc entrepris la synthèse d'analogues du M6P fonctionnalisés en position anomère par différents bras espaceurs en vue de leur couplage aux enzymes lysosomales. L'évaluation biologique de ces analogues, appelés AMFA, a montré qu'ils sont très affins pour le RM6P-CI et ne sont pas cytotoxiques. L'affinité pour le RM6P-CI de la cathepsine D-KDEL mutée est augmentée 10 fois par le couplage de l'un de ces analogues. D'autre part, l'activité enzymatique est conservée pour l'enzyme modifiée chimiquementLysosomal storage diseases are a group of 50 genetically inherited disorders that are characterized by a deficiency of one or more specific lysosomal enzymes which causes an accumulation of substrates inside the lysosome. Enzyme replacement therapy consists in the targeting of recombinant enzymes through the cation-independent mannose 6-phosphate receptor (CI-M6PR) transport. CI-M6PR allows the transport of enzymes carrying the M6P marker towards the lysosomes. The main drawback with the M6P recognition marker is its sensitivity to hydrolysis by phosphatases. Therefore, isosteric analogues of M6P functionalized at the anomeric position by different spacer arms were synthesized. The biological evaluation of these analogues revealed that they are stable in human serum and are recognized by CI-M6PR as well as the M6P itself. Additional studies on living cells showed that none of the prepared analogues is cytotoxic. The conjugation of AMFA-1 to the cathepsin D-KDEL low affinity mutant induced a 10-fold increase of its affinity for the CI-M6PR. The enzymatic activity of chemically modified cathepsin D-KDEL was found fully maintained
49
Pryadkina, Marina. "Développement d’approches thérapeutiques pour le traitement des dysferlinopathies." Thesis, Evry-Val d'Essonne, 2014. http://www.theses.fr/2014EVRY0039.
Abstract:
Les dysferlinopathies sont un groupe de dystrophies musculaires progressives, dues à l’absence ou la déficience de la protéine sarcolemmale Dysferline, codée par le gène DYSF. Il n’existe pas de traitement disponible à l’heure actuelle.Le virus recombinant adeno-associé (AAVr) est actuellement le vecteur le plus approprié pour le transfert de gène dans le muscle squelettique. Cependant, les capacités d’encapsidation du vecteur AAVr sont limitées à ~5kb, ce qui empêche l'encapsidation des gènes de grande taille, comme la Dysferline. Pour contourner cette limitation, d’une part, plusieurs Dysferlines modulaires de taille ⩽ à 4,7kb (minigène) ont été créées et testées, dans le but de rechercher le rôle de domaines spécifiques dans la toxicité, la fonction et les interactions avec les partenaires ainsi que leur intérêt thérapeutique potentiel. Il a été montré que : la restauration de la capacité de réparation membranaire n’est pas suffisante pour améliorer l’histologie musculaire, que le domaine DYSF peut être responsable de la toxicité et que le domaine FER interagit avec la protéine OPTN. D’autre part, une étude comparative de plusieurs techniques de transfert de gène entier de la Dysferline (concatémérisation-épissage, recombinaison homologue dirigée (RDH), stratégie hybride ou assemblage) a montré que la stratégie par RHD est la méthode la plus efficace. L'administration systémique de vecteurs RHD chez des souris Dysferline déficientes est suffisamment efficace pour corriger la pathologie musculaire et augmenter la résistance du sarcolemme aux contraintes mécaniques. Le transfert de vecteurs RHD pourra devenir une approche thérapeutique potentielle pour le traitement de dysferlinopathiesThe dysferlinopathies are a group of untreatable progressive muscular dystrophies, caused by absence or deficiency of the sarcolemmal protein, dysferlin, as a consequence of mutations in DYSF gene. Recombinant adeno-associated virus (rAAV) is currently the most appropriate vector for gene delivery into the skeletal muscle. However, the ~5kb packaging size of this virus is a major obstacle for large gene transfer like dysferlin. To overcome this limitation, several strategies were developed. Firstly, several modular dysferlins (minigene) having a size of about 4.7kb were created and tested, in order to look for: role of specific domains in the toxicity and the function, the interactions with the partners and the therapeutical potential. It was demonstrated, that the restoration of the membrane repair deficit is not sufficient to improve the muscle histology; that the DYSF domain can be responsible for the toxicity and that the domain FER interacts with the protein OPTN. Secondly, several large gene transfer techniques: concatemerization-splicing, overlapping vectors, hybrid dual or fragmented AAV, were compared to deliver the DYSF gene into the skeletal muscle by two rAAV vectors. The rAAVs intramuscular injections into dysferlin deficient mice showed that the overlap strategy is the most effective approach to reconstitute a full-length messenger. The systemic administration of overlapping vectors was efficient to correct the histopathology and resistance to eccentric contractions of muscular fibers in the dysferlin deficient mice. These data indicate that using overlapping vectors could be a promising approach for a potential clinical treatment of dysferlinopathies
50
Kopf, Heidrun. "Application à la gestion du stress d'une pychothérapie cognitive et comportementale : mise au point d'un programme spécifique destiné aux patients cardio-vasculaires." Besançon, 2000. http://www.theses.fr/2000BESA1024.
Abstract:
Les modifications physiologiques liées au stress et leur impact sur la santé de l'individu ont engendré des recherches considérables : la compréhension les relations complexes entre stress, maladies cardiovasculaires et caractéristiques de la personnalité ont permis des progrès dans la prise en charge des coronariens. Notre travail s'inscrit dans la perspective d'une atténuation du risque cardiovasculaire et en particulier de la menace du risque coronarien. Depuis quelques années, nous proposons un programme d'aide à la gestion du stress (PAGS) en ambulatoire et en prévention primaire et secondaire, à des patients suivis parallèlement sur le plan cardiovaculaire en hôpital général. Il s'agit d'une thérapie de groupe hebdomadaire sur 12 séances, orientée vers une modification des réactions de l'environnement. . .