Dissertations / Theses on the topic 'Hydrolysats de protéines de pois'
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Irankunda, Rachel. "Nickel Chelating Peptides & Chromatography : From Peptides Separation Simulation up to their Antioxidant Activities - related Applications." Electronic Thesis or Diss., Université de Lorraine, 2023. http://www.theses.fr/2023LORR0213.
Abstract:
Les peptides chélateurs de métaux (PCMs), issus d'hydrolysats de protéines, présentent diverses applications dans les domaines de la nutrition, de la pharmacie, des cosmétiques, etc. Cependant, l'approche empirique généralement utilisée pour découvrir des peptides bioactifs à partir d'hydrolysats est longue et coûteuse en raison de nombreuses étapes de fractionnement, de séparation et d'évaluation des activités biologiques. Cette thèse a donc pour but de développer une nouvelle approche pour la prédiction de la séparation des PCMs en utilisant la modélisation et la simulation chromatographiques basées sur l'analogie entre la chromatographie d'affinité sur ions métalliques immobilisés (IMAC) et la résonance plasmonique de surface (SPR). Pour la première fois, l'analogie SPR-IMAC a été étudiée expérimentalement sur 22 peptides et 70% d'entre eux ont validé cette analogie, puisque les peptides bien retenus en IMAC étaient également dotés d'une bonne affinité pour Ni2+ en SPR. Dans un deuxième temps, des peptides ayant une forte affinité pour Ni2+ (c'est-à-dire une faible constante de dissociation KD en SPR et un temps de rétention élevé en IMAC) ont été utilisés pour étudier la simulation des profils de concentration de peptides à la sortie de la colonne en IMAC. La connaissance des isothermes d'adsorption étant nécessaire pour effectuer la simulation, il a fallu développer une méthodologie pour prédire les paramètres de l'isotherme de Langmuir en IMAC à partir des données SPR. La simulation a été évaluée en comparant les temps de rétention expérimentaux et simulés qui devraient être proches pour une prédiction fiable. Par conséquent, plusieurs approches ont été étudiées pour déterminer les paramètres de sorption de Langmuir. L‘approche la plus intéressante a introduit un facteur correctif sur la capacité d'adsorption maximale qmax seulement. En effet, l'affinité des peptides pour le Ni2+ immobilisé étant supposée constante quelle que soit technologie utilisée (SPR vs. IMAC), la constante d'affinité KA n'a pas été modifiée. Parallèlement, les applications industrielles des PCMs et des hydrolysats peptidiques ont été étudiées. Tout d'abord, des hydrolysats de protéines de pois ont été produits par protéolyse enzymatique soit avec l'Alcalase® suivi de la Flavourzyme® (Alc+Flav≤1kDa), soit par la Protamex® suivi de la Flavourzyme® (Prot+Flav≤1kDa). La technologie SwitchSENSE® a mis en évidence la présence de peptides chélateurs de Ni2+ et les tests antioxydants ont montré que l'hydrolysat Prot+Flav≤1kDa avait une activité antiradicalaire et un pouvoir réducteur plus élevés, liés à son degré d'hydrolyse plus élevé et à la quantité de peptides de petite taille. Les hydrolysats de protéines de pois et les PCMs ont ensuite été étudiés pour leur capacité à inhiber l'oxydation des lipides dans les émulsions. Ils ont ralenti l'oxydation des lipides par chélation des métaux pro-oxydants (tels que Fe2+) en réduisant les produits d'oxydation primaires et secondaires, responsables de la détérioration des produits contenant des lipides. Ainsi, les hydrolysats de pois et les PCMs pourraient être utilisés comme antioxydants dans les produits alimentaires et cosmétiques, comme alternatives aux produits chimiques tels que l'EDTA, le BHT et le TBHQMetal-Chelating Peptides (MCPs), from protein hydrolysates, present various applications in nutrition, pharmacy, cosmetic etc. Yet, the empirical approach generally used to discover bioactive peptides from hydrolysates is time consuming and expensive due to many steps of fractionation, separation and biological activities evaluation. Thus, this PhD aimed to develop a novel approach for MCPs separation prediction using chromatography modelling and simulation based on the analogy between Immobilized Metal ion Affinity Chromatography (IMAC) and Surface Plasmon Resonance (SPR). For the first time, the SPR-IMAC analogy was experimentally investigated on 22 peptides and 70% of them validated this analogy, since peptides well retained in IMAC were also endowed with a good affinity for Ni2+ in SPR. In the second time, peptides with high affinity for Ni2+ (i.e low dissociation constant KD in SPR and a high retention time in IMAC) were used to study the modelling and simulation of peptide concentration profiles at the column outlet in IMAC. Since knowledge of adsorption isotherms was required to perform simulation, it was necessary to develop a methodology for predicting Langmuir isotherm parameters in IMAC from SPR data. The validity of simulation was evaluated by comparing experimental and simulated retention times that should be close for reliable prediction. Therefore, several approaches were evaluated to determine Langmuir sorption parameters, the most interesting one introduces a correction factor on the maximum adsorption capacity qmax alone, assuming that the affinity of peptides for immobilized Ni2+ did not change depending on the technology used (SPR vs. IMAC), thus affinity constant KA was not modified. Meanwhile, industrial application of MCPs and hydrolysates were studied. First, pea protein hydrolysates were produced by either Alcalase® followed by Flavourzyme® (Alc+Flav≤1kDa) or Protamex® followed by Flavourzyme® (Prot+Flav≤1kDa). SwitchSENSE® technology evidences the presence of Ni2+ chelating peptides and antioxidants tests showed that Prot+Flav≤1kDa has higher radical scavenging and reducing power, related to its higher degree of hydrolysis and small-size peptides quantity. Secondly, pea hydrolysates and MCPs were investigated for their ability to inhibit the lipid oxidation in emulsions. They slowed down lipid oxidation through chelation of prooxidant (metals such as Fe2+) reducing primary and secondary oxidation products responsible of deterioration of lipid containing products. Thus, pea hydrolysates and MCPs could be used as antioxidants in food and cosmetic products, as alternative to chemicals such as EDTA, BHT and TBHQ
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Le, Coeur Catherine. "Contribution à l'étude d'un hydrolysat pepsique de myoglobine de muscle squelettique rouge de thon Thunnus Albacares : caractérisation des peptides issus de l'hydrolyse étude de l'association hème-peptide." La Rochelle, 1996. http://www.theses.fr/1996LAROS011.
Abstract:
L’hydrolyse pepsique de la myoglobine de muscle squelettique rouge de thon Thunnus Albacares génère un mélange de peptides et d'heme. En vue de caractériser les peptides de cet hydrolysat, nous les avons purifiés par une méthode de chromatographie liquide haute performance mise au point au laboratoire. Il a ainsi été montré que la chromatographie d'exclusion, associée à la chromatographie en phase inverse permettait de résoudre efficacement ce mélange de peptides, malgré sa complexité. La composition en acides aminés des peptides a été déterminée par la méthode du picotag complétée par la méthode de la dérivée seconde qui est une méthode spectrale permettant de détecter et de quantifier les acides aminés aromatiques. La séquence des peptides a ensuite été déduite de la comparaison de leur composition en acides aminés avec la séquence connue de la myoglobine de thon. Ce travail nous a permis de définir les sites de coupure de la pepsine dans nos conditions expérimentales et de les comparer avec ceux décrits dans la littérature. La recherche de peptides actifs n'a pas permis de mettre en évidence dans notre mélange de peptides opioïdes, ni de peptides activateur ou inhibiteur de la croissance cellulaire. Par contre, certaines fractions peptidiques présentent une activité inhibitrice de l'enzyme de conversion de l'angiotensine et d'autres une activité inhibitrice des contractions de l'iléon de cobaye. Des fractions présentent en outre une capacité de fixation de l'heme supérieure à celle de la molécule native. Le type de liaisons existant entre l'heme et les peptides en mélange n'a pas été clairement défini, mais il semblerait que l'heme se lie aux peptides, non pas par des liaisons fortes de type covalentes mais plutôt par des liaisons faibles, facilement détruites lors des processus de purification ou simplement par variation de PH.
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Ravallec, Rozenn. "Valorisation d'hydrolysats d'origine marine : optimisation de la concentration en peptides apparentés aux facteurs de croissance et aux agents sécrétagogues : essais in vitro et in vivo." Brest, 2000. http://www.theses.fr/2000BRES2041.
Abstract:
L'utilisation d'hydrolysats d'origine marine dans les aliments destinés à l'aquaculture est en pleine expansion face au plafonnement des pêches mondiales. Cependant les besoins des animaux sont encore mal définis orientant les recherches vers la fabrication d'aliments plus spécifiquement adaptés. Les objectifs de ce travail étaient d'identifier et de caractériser des facteurs de croissance et des agents sécrétagogues présents dans des hydrolysats d'origine marine et pouvant avoir un effet in vivo sur la croissance et le développement des larves de la crevette tropicale Litopenaeus vannamei. Cette recherche a été réalisée en trois parties : l'optimisation de la fabrication des hydrolysats, la caractérisation des activités biologiques et l'effet in vivo de l'incorporation des hydrolysats dans l'alimentation des larves de l. Vannamei. L'optimisation de l'hydrolyse du muscle de morue, Gadus morhua, par l'alcalase a défini les conditions opératoires permettant de détecter la présence d'activités biologiques. L'affinité que possèdent les facteurs de croissance et les agents sécrétagogues pour certains récepteurs présents sur les cellules ar4-2j a été exploitée afin de caractériser les activités biologiques détectées dans les hydrolysats de morue et de crevette (litopenaeus aztecus). Des fractions partiellement purifiées ont présenté des caractéristiques d'élution ainsi que des affinités de liaisons comparables à celles retrouvées avec les peptides de la famille des cholecystokinines et les facteurs de croissance. La purification d'une enzyme spécifique du système digestif des crevettes pénaeides, la chymotrypsine, a permis la fabrication d'un hydrolysat de muscle de morue en quelque sorte plus spécifique des larves cultivées. L'influence de ces hydrolysats sur la croissance et le développement des larves de la crevette l. Vannamei a été étudiée. Bien qu'il soit difficile de conclure à l'effet stimulateur de croissance et de digestion des peptides précédemment détectés, l'hydrolysat de morue par la chymotrypsine a un effet bénéfique sur le développement des animaux. Ces différents types d'approches de recherche sont des étapes essentielles afin de caractériser de nouveaux hydrolysats susceptibles de favoriser la croissance, la survie et le développement des larves de poissons et de crustacés.
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BANIEL, ALAIN. "Etude de la variabilite genotypique et phenotypique de la composition proteique du pois (pisum sativum l. )." Nantes, 1993. http://www.theses.fr/1993NANT2011.
Abstract:
L'etude a permis d'evaluer l'influence des facteurs genotypiques et phenotypiques sur la composition proteique des graines de pois (pisum sativum l. ). Apres optimisation des conditions d'analyse, une methode d'etude, associant la chromatographie et un traitement statistique des courbes, a ete developpee. A partir des chromatogrammes d'une collection de varietes cultivees dans trois lieux differents, l'analyse discriminante pas a pas est utilisee pour predire l'origine genotypique ou geographique. La repartition des echantillons sur les cartes discriminantes montre que la variabilite de la composition proteique globale depend principalement du genotype. Cette approche a, en outre, permis d'evaluer la variabilite genetique de la composition proteique de l'espece pisum. Contrairement aux varietes de grande culture, les varietes atypiques et primitives presentent une variabilite genetique importante. Une etude comparative de ces resultats avec ceux obtenus par spectroscopie proche infrarouge, montre que la methode chromatographique developpee est mieux adaptee a l'analyse de la composition proteique des graines. L'analyse des spectres proche infrarouge permet une meilleure discrimination des lieux de culture et des genotypes lisses/rides, sur la base de bandes d'absorption attribuables a l'eau et a l'amidon. Dans une etude de la variabilite phenotypique du rapport viciline/legumine en fonction de la teneur en proteines des graines, une correlation est mise en evidence entre ces variations et l'heterogeneite moleculaire des proteines. L'influence des conditions de culture sur ce rapport varie suivant les genotypes. Le polymorphisme de ces proteines apparait principalement influence par l'origine genetique de l'echantillon. Son incidence sur la qualite nutritionnelle de la graine est differente selon les varietes. La methode d'analyse developpee dans cette etude, associee a l'analyse multidimensionnelle des donnees, montre des potentialites importantes. En particulier, elle permet de definir des perspectives pour l'amelioration varietale du pois
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BEN-HDECH, EL-HASSANE. "Texturation d'une farine de pois par cuisson-extrusion : caracterisation microstructurale, ultrastructurale et physico-chimique." Nantes, 1993. http://www.theses.fr/1993NANT2014.
Abstract:
Le but du present travail est d'apporter une contribution a l'effort deploye par divers groupes de chercheurs afin de mieux comprendre le mode d'action et les effets de la cuisson-extrusion sur les constituants alimentaires. Le pois (pisum sativum l. ) a ete retenu comme substrat en raison de sa composition et de ses potentialites nutritionnelles. Des techniques tres variees faisant appel a la microscopie photonique et electronique, a la spectroscopie et a de nombreuses autres methodes d'etude des proprietes physico-chimiques (solubilite, electrophorese, hydrolyse enzymatique. . . ), ont ete employees afin de caracteriser au mieux les echantillons avant et apres cuisson-extrusion a l'aide d'un extrudeur pilote bi-vis clextral bc-45. Les observations microscopiques ont permis d'expliquer un certain nombre de proprietes des extrudats telles que la densite, la solubilite et la capacite d'absorption d'eau. Par ailleurs, l'etude des effets des variations d'une large gamme de parametres de cuisson-extrusion a permis d'etablir un bareme d'intensite de traitement en relation avec le degre de transformation des constituants (en particulier les proteines) pouvant etre evalue et predit par analyse multidimensionnelle de spectres proche infra-rouge des extrudats. Sous des conditions moderees, les proteines ont ete peu affectees au niveau macromoleculaire malgre leur faible indice de solubilite du a leur agregation. En revanche, sous des conditions severes, toutes les fractions proteiques etaient impliquees dans des pontages covalents et subissaient des degradations chimiques et macromoleculaires notables
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TAMELIKECHT, HINDI FATMA. "Hydrolyse enzymatique de la fraction hydrosoluble des proteines de pois chiche (cicer arietinum) par la bromelaine et l'alpha-chymotrypsine ; caracterisation des hydrolysats et etude de leur immunogenicite." Paris 5, 1996. http://www.theses.fr/1996PA05N125.
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Chabanon, Gérald. "Hydrolyses enzymatiques d'isolats protéiques issus de tourteaux de colza : cinétique, modélisation, caractérisation et fonctionnalité des peptides." Vandoeuvre-les-Nancy, INPL, 2005. http://docnum.univ-lorraine.fr/public/INPL/2005_CHABANON_G.pdf.
Abstract:
Cette thèse a permis d'étudier l'obtention de peptides biologiquement actifs ou à propriétés fonctionnelles à travers la mise en œuvre et le développement de procédés de préparation et d'hydrolyse d'isolats de protéines issus de tourteaux de colza. Tout d'abord, un procédé de préparation de deux isolats protéiques se différenciant par le type de protéines les constituant (Globuline ou Albumine) a été développé. Les deux isolats ne possèdent pas de bonnes propriétés fonctionnelles mais leur hydrolyse partielle par l'Alcalase 2,4L permet d'en améliorer certaines. Puis, l'action hydrolytique de protéases commerciales (Alcalase 2,4L, Pronase SG, Neutrase 0,8L, Prolyve BS, Lypaïne 6500, Orientase 90N, Espérase 7,5L) sur l'isolat de globulines a été comparée. La valorisation des hydrolysats a porté sur leur capacité à promouvoir la croissance de cellules animales cultivées dans un milieu sans sérum de veau fœtal. Il a été montré que les cinétiques d'hydrolyse, la taille des peptides produits et l'activité biologique des hydrolysats sont significativement influencées par la spécificité de l'enzyme et qu'il existe une relation enzyme / degré d'hydrolyse (DH) / activité ciblée. Enfin, nous avons montré pour trois systèmes enzyme/substrat différents (Alcalase/Globuline, Pronase/Globuline et Alcalase/Albumine) qu'à un DH et à un pH donnés, la composition peptidique des hydrolysats est indépendantes des concentrations initiales en enzyme et en substrat et de la température. Ainsi, la prédiction de l'évolution temporelle du DH, quelles que soient les valeurs de ces paramètres, permet de contrôler la génération d'un mélange peptidique aux propriétés ciblées. Un modèle phénoménologique basé sur le schéma réactionnel de Michaelis-Menten a alors été construit afin de simuler les cinétiques d'hydrolyse en réacteur discontinu. Pour cela, les phénomènes limitants impliqués dans l'hydrolyse (inhibition ou inactivation de l'enzyme, modification du substrat) ont été mis en évidenceThis thesis made it possible to study obtaining biologically active peptides or with functional properties through the development of processes for the preparation and the hydrolysis of protein isolates resulting from rapeseed cakes. First, a method of preparation of two protein isolates being different by the type of proteins (Globulin or Albumin) was developed. The two isolates do not have good functional properties but their partial hydrolysis by Alcalase 2. 4L improves some of them. Then, the hydrolytic action of commercial proteases (Alcalase 2. 4L, Pronase SG, Neutrase 0. 8L, Prolyve BS, Lypaïne 6500, Orientase 90N, Espérase 7. 5L) on the isolate of globulins was compared. The valorisation of the hydrolysates related to their capacity to promote the growth of animal cells cultivated in a serum-free medium. It was shown that the kinetics of hydrolysis, the size of produced peptides and the biological activity of the hydrolysates are significantly influenced by the specificity of the enzyme and there is a relation enzyme/ degree of hydrolysis (DH)/ targeted activity. Lastly, we showed for three different enzyme/substrate systems (Alcalase / Globulin, Pronase / Globulin and Alcalase / Albumin) that at given DH and pH, the peptide composition of the hydrolysates is independent of the initial enzyme and substrate concentrations and of the temperature. Thus, the prediction of the temporal evolution of the DH, whatever the values of precedent parameters, allows to control the generation of a peptide mixture with targeted properties. A model based on the reaction pathway of Michaelis-Menten was then built in order to simulate the hydrolysis kinetics in batch reactor. For that, limiting phenomena implied in the hydrolysis (inhibition or inactivation of the enzyme, modification of the substrate) were highlighted
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Gharsallaoui, Adem. "Microencapsulation séquentielle d'un système lipidique par des biopolymères végétaux (protéines de pois et pectine) : influence des interactions à l'interface huile / eau." Dijon, 2009. http://www.theses.fr/2009DIJOS053.
Abstract:
La protection et la vectorisation de certaines molécules actives, alimentaires et pharmaceutiques, nécessitent de les séparer de leur environnement en les piégeant dans des matrices structurées capables de les libérer à un endroit et à un instant bien précis. Lorsqu'il s’agit de systèmes d'encapsulation à base d'émulsions sèchées par le procédé d'atomisation, la maîtrise de ces matrices requiert à la fois la connaissance des propriétés des membranes interfaciales et de celles de la matrice de séchage. La caractérisation, par tensiométrie, des propriétés interfaciales des protéines de pois, en présence et en absence de pectine, polyélectrolyte anionique, permet l’étude des interactions protéines/pectine aux interfaces H/E et leur effet sur la stabilité de l’émulsion lors du séchage par atomisation. L’étude de l’effet des propriétés de la matrice de séchage, à base de maltodextrines, permet de relier leurs interactions vis-à-vis de l’eau aux performances d’encapsulation des émulsions séchées. Les études à l’échelle moléculaire mettent en évidence le rôle de la pectine dans la stabilisation de la structure secondaire des globulines de pois lors du séchage, ce qui se traduit par une meilleure protection de la molécule active encapsulée. Enfin, l’analyse de la cinétique de libération d’une molécule volatile modèle, l’hexanoate d’éthyle, permet d’évaluer les propriétés barrière des couches interfaciales et d’identifier le mécanisme de libération. L’ensemble de ces travaux menés à différentes échelles permet de contribuer à la compréhension des divers mécanismes impliqués dans (i) la stabilisation des émulsions par des interfaces multicouches à base de protéines/polysaccharides, (ii) leur résistance au séchage par atomisation et enfin (iii) leur capacité à protéger et à libérer des composés sensiblesThe protection and the vectorization of active, food and pharmaceutical molecules, require separating them from their environment by entrapping them in structured matrices able to release them at the precise place and the quite time. When these encapsulation systems are based on dry emulsions, the control of the matrices requires the knowledge of both the properties of the interfacial membranes and those of the drying matrix. The characterization, of the interfacial properties of pea proteins, in presence and absence of pectin, an anionic polyelectrolyte, allows the study of the interactions proteins/pectin at O/W interfaces and their effect on the emulsion stability during spray-drying process. The study of the effect of the properties of the dehydration matrix, maltodextrins, makes it possible to link their interactions with water to the encapsulation efficiency of dry emulsions. The molecular investigation highlights the role of pectin in the stabilization of the secondary structure of pea globulins during drying, which results in a better protection of the encapsulated active molecule. Lastly, the analysis of the release kinetics of a volatile molecule makes it possible to evaluate the barrier properties of the interfacial layers and to identify the release mechanism. The whole of this work at various scales makes it possible to contribute to the understanding of the various mechanisms implied in the emulsion stabilization by multi-layered interfaces containing proteins/polysaccharides, their resistance to spray-drying and finally their capacity to protect fragile compounds
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Duval, Frédéric. "Calmodulines et germination chez le pois (Pisum sativum L. ) : aspects biochimiques et moléculaires." Angers, 2002. http://www.theses.fr/2002ANGE0042.
Abstract:
La calmoduline (CaM) est une protéine de transduction du signal calcium (Ca2+), ubiquiste et dont la structure est très conservée parmi les eucaryotes. L'expression de mutiples isoformes de CaM est un signe distinctif de cette protéine chez les végétaux supérieurs. Elles n'ont pas d'activité catalytique propre mais interviennent spécifiquement dans de nombreuses voies métaboliques associées au développement ou aux réponses aux stress. Des analyses menées par spectrométrie de masse ont permis d'identifier trois isoformes protéiques de CaM dans les graines de pois. Elles diffèrent par des substitutions uniques d'acides aminés au sein de la première hélice alpha N-terminale. Les gènes de CaM appartiennent à une petite famille multigénique. Les ADNc pleine longueur codant les trois isoformes (PsCaM1, 2 & 3) ont été clonés et ont permis de déduire des amorces spécifiques dessinées dans les régions 5' et 3' non-traduites les plus divergentes. Les études d'expression, menées par RT-PCR semi-quantitative, ont montré une accumulation différentielle de chaque transcrit au cours de la germination. PsCaM1 & 2 sont détectés en quantités différentes dans les axes embryonnaires et les cotylédons secs, puis s'accumulent au cours de l'imbibition jusqu'à la percée de la radicule, alors que PsCaM3 apparaît au moment de la percée de la radicule et son niveau augmente progressivement dans les axes et les cotylédons. Afin de caractériser les propriétés biochimiques de chaque isoforme, les trois protéines ont été surexprimées dans Escherichia coli sous forme de protéines de fusion avec un Strep-tag (CaM1-ST, CaM2-ST & CaM3-ST). Les expériences de réactivation de la NAD kinase CaM dépendante de pois ont donné les mêmes résultats pour les trois protéines. Par contre, les analyses fonctionnelles utilisant la technique de gel-retard ont montré des différences entre les trois isoformes. CaM1-ST se lie de manière stoechiométrique au peptide synthétique dérivé du site de fixation de la CaM sur la CaM Kinase II, alors que CaM2-ST et CaM3-ST présentent une affinité moindre pour ce peptide. En utilisant un autre peptide synthétique idéal, Trp-3, ces affinités sont encore plus réduites. L'étude ultérieure de la distribution cellulaire de la CaM et l'identification des enzymes cibles de la CaM au cours de la germination permettront d'élucider l'implication des diverses isoformes de CaM dans les voies métaboliques associées à la germination.
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Gauvin, Laurence. "Contribution à l'étude de l'extraction des protéines de pois chiche ("Cicer arietinum") en vue d'une application industrielle." Paris 5, 1994. http://www.theses.fr/1994PA05P057.
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Debrabant, Alain. "Étude de la protéolyse de la protéine P126 de Plasmodium falciparum." Lille 1, 1990. http://www.theses.fr/1990LIL10067.
Abstract:
A la fin du cycle intraérythrocytaire de plasmodium falciparum, agent pathogène du paludisme, l'éclatement des schizontes matures semble être un phénomène actif impliquant des activités enzymatiques. La protéine P126 est protéolysée au moment de l'éclatement des schizontes en 2 fragments de 50 kd (p50) et 73 (p73) qui sont libérés dans le milieu de culture. Nous avons montré que 2 inhibiteurs de protéases, la leupeptine et le E64 inhibent l'éclatement des schizontes et modifient simultanément le processus de protéolyse de la P126: on observe en effet l'accumulation d'un fragment intermédiaire de 56 kd (p56) au détriment de la P50. L'incubation de la P56 avec des schizontes en phase de libération, dans un milieu de culture débarrassé des protéines sériques produit une molécule de 50 kd. Nous avons ainsi caracterisé, par son profil d'inhibition, une protéase de type responsable de la coupure 56/50, dont l'activité paraît très instable dans le milieu de culture. La détermination des séquences n-terminales des fragments de protéolyse a permis de les replacer sur la séquence protéique déduite du gène de la P126, et de déterminer 2 des 3 sites de protéolyse. La localisation du troisième site (56/50) nécessitera la détermination de l'extrémite c-terminale de la P50. La relation éventuelle entre la protéolyse de la P126 et la libération des mérozoïtes reste encore à démontrer. L'analyse de ces activités protéasiques permettra une meilleure compréhension du mécanisme de la libération des mérozoïtes
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Odoux, Eric. "Contribution à l'étude de l'hydrolyse de la glucovanilline en vanilline dans la "gousse" du vanillier (vanilla planifolia G. Jackson)." Montpellier 2, 2004. http://www.theses.fr/2004MON20057.
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Prévôt-d'Alvise, Nathalie. "Mise au point d'un procédé d'hydrolyse enzymatique de protéines de luzerne (Medicago sativa var. Europe) dans un réacteur à membrane et extrapolation à l'échelle pilote." Lille 1, 2000. https://pepite-depot.univ-lille.fr/RESTREINT/Th_Num/2000/50376-2000-47.pdf.
Abstract:
Le reacteur enzymatique a membrane (rem) est couramment utilise pour la preparation et la valorisation d'hydrolysats proteiques. Les matieres proteiques vegetales tels que les extraits foliaires, connaissent un essor considerable depuis quelques annees. L'interet croissant porte au concentre proteique de luzerne (cpl) repose sur son abondance naturelle, mais aussi sa composition equilibree en acides amines et sa teneur elevee en ribulose 1,5-biphosphate carboxylase-oxygenase, proteine hydrophobe dotee d'excellentes proprietes fonctionnelles et nutritionnelles. Afin de valoriser ce potentiel proteique dans des domaines aussi divers que l'alimentation, la pharmacie et la cosmetique, un procede pilote d'hydrolyse du cpl dans un rem a ete realise. A ph 9,5 et a 40\c, l'hydrolyse du cpl a 30gn. L 1 par la delvolase (2,4 g. L 1) avec un temps de sejour de 180 minutes, permet d'atteindre a l'etat stationnaire un taux de conversion de 75,9% mais egalement d'acceder a une capacite et une productivite elevees de 37,9 gn. G d'enzyme 1. Min 1 et 454,4 gn. G d'enzyme 1 respectivement. Le couplage du reacteur a une membrane inorganique d'un seuil de coupure de 10000 daltons permet de produire en continu un permeat peptidique soluble, reproductible et d'une teneur azotee de 23 gn. L 1. Les composes phenoliques, responsables de la coloration brune du permeat, sont extraits avec un rendement de 92% par une resine polystyrenique, l'amberlite ira900cl, a ph 5,0 et a 25\c. Apres electrodialyse et atomisation du permeat decolore, une poudre peptidique de luzerne soluble sur toute la gamme de ph et avec une composition en acides amines equilibree est obtenue. Elle pourra etre utilisee comme supplement proteique en alimentation humaine.
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Gevrey, Jean-Claude. "Mécanismes de réponse de la cellule endocrine intestinale aux hydrolysats protéiques : aspects sécrétoire et transcriptionnel." Lyon 1, 2002. http://www.theses.fr/2002LYO1T170.
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Le, Gall Maud. "Digestion des protéines de pois chez le porcelet et le porc en croissance : carctérisation des peptides résistants à la digestion." Rennes, Agrocampus Ouest, 2004. http://www.theses.fr/2004NSARB161.
Abstract:
L’incorporation du pois dans les aliments pour porcs est souvent restreinte pour limiter la variabilité des performances zootechniques. En particulier, la digestibilité des protéines de pois apparaît variable et en général inférieure à celles de régimes témoins. Notre travail a montré que la fraction protéique majoritaire de la graine, les globulines, est bien digérée. Les polypeptides α de la légumine sont totalement dégradés au niveau gastrique. Par contre, les polypeptides β et la viciline ne sont dégradés qu’au niveau intestinal. La digestion des albumines est très variable. Ainsi, la lectine et la PA1b sont totalement résistantes. La digestion de l’albumine majoritaire PA2 est influencée par plusieurs paramètres. Cette protéine est totalement dégradée par la pepsine mais que partiellement par les enzymes pancréatiques et intestinales. Par conséquent, pour des temps de séjours gastriques inférieurs à 3 heures, un peptide de PA2 de 15kDa est présent à la fin de l’iléon. Le chauffage et le broyage fin des farines de pois favorisent la digestion complète de cette protéineThe incorporation of pea in animal feed is limited by the low nutritional quality of the raw meal. This has long been ascribed to the presence of a limiting amount of essential sulphur amino acids and the poor digestibility of proteins caused by the presence of antinutritional factors in the seed. Our studies showed that the major pea storage proteins, globulins, are well digested in the pig. The α polypeptide of legumin is totally hydrolysed by pepsin while the β polypeptide and vicilin are digested by pancreatic and intestinal enzymes only. Proteins from the albumin fraction are more resistant to digestion. The lectin and the albumin PA1b are totally resistant in the gastrointestinal tract. By contrast, the susceptibility of the major albumin PA2 to digestion is influenced by different factors. It is totally hydrolysed by pepsin while being partly resistant to pancreatic and intestinal enzymes. Consequently, for a gastric retention time below 3 hours, a cleaved PA2 peptide of 15 kDa escapes gastric and small intestinal digestion. Pea particle size reduction and heating enhance susceptibility to digestion by increasing protein accessibility to enzymes
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Djoullah, Attaf. "Réticulation enzymatique des protéines de pois pour la formation de microparticules : application à l'encapsulation de la riboflavine." Thesis, Dijon, 2015. http://www.theses.fr/2015DIJOS072/document.
Abstract:
Dans ce travail, le comportement des protéines de pois vis-à-vis de la gélification enzymatique par la transglutaminase microbienne (MTGase) a été évalué à l’état natif et après dénaturation (réduction chimique ou thermo-dénaturation). L’application finale concernait la formation de microparticules protéiques permettant d’encapsuler la riboflavine, choisie comme molécule active hydrophile modèle. Le procédé d’extraction des fractions protéiques de pois a été optimisé de manière à affecter le moins possible la structure des protéines et de récupérer des fractions natives riches en albumines (Alb) et en globulines (Glob), ou leur mélange. La mise en place des méthodes de suivi de la réaction enzymatique a permis de mettre en évidence leur complémentarité ainsi que leurs limites. Deux nouvelles méthodes de suivi de la réticulation enzymatique ont été développées. L’une basé sur la RMN permet la détermination simultanée de la quantité du fragment glutamine-lysine, produit de la réaction enzymatique, et le degré de réticulation ; l’autre méthode, basée sur les techniques de mesure de taille (SDS-PAGE et DLS), permet de visualiser les liaisons intramoléculaires. L’étude du traitement enzymatique appliqué aux fractions Alb et Glob de pois à l’état natif et dénaturé, ainsi qu’en mélange natif, a montré que la réaction enzymatique est fortement liée à la structure et à la conformation des protéines. Contrairement à la fraction Alb, la fraction Glob constitue un bon substrat pour la MTGase et la réticulation met en jeu des sous-unités constitutives des globulines différentes pour chaque condition de traitement. Néanmoins, la fraction Alb peut être utilisée en tant que booster de réaction enzymatique ce qui peut faire l’objet d’une voie innovante d’amélioration de la susceptibilité des protéines vis-à-vis de la MTGase. Le mécanisme semble basé sur un phénomène d’affinité sélective. Les bonnes propriétés mécaniques et de capacité de rétention d’eau du gel de la fraction protéique de pois totale ont été exploitées pour produire des microparticules à partir de la dispersion de la solution protéique sous forme d’émulsion suivie d’une gélification enzymatique par la MTGase. Les microparticules ont été pratiquement insolubles dans les milieux gastro-intestinaux en absence d’enzymes et lentement dégradable en présence d’enzymes. La libération de la riboflavine est gouvernée par un phénomène de diffusion en absence d’enzyme et de dégradation de support en présence d’enzymes selon des cinétiques compatibles avec des applications nutraceutiquesIn this work, pea proteins behavior toward enzymatic gelation by microbial transglutaminase (MTGase) was studied at native state and after denaturation (chemical reduction or thermal denaturation). The final application was the formation of protein microparticules to encapsulate riboflavin, chosen as hydrophilic active molecule model. The extraction process of the pea protein fractions has been optimized in such a way to minimize as possible protein denaturation and recover native fractions rich in albumin (Alb) and globulin (Glob) or a mixture of both.The setting up of the enzymatic reaction monitoring methods has brought out their complementarity as well as their limits. Two new monitoring methods of enzymatic cross-linking reaction have been developed. The first one, based on the NMR, allows to the simultaneous determination of the glutamine-lysine isopeptide bond, product of the enzymatic reaction, and the degree of crosslinking; the second method, based on size measuring techniques (SDS-PAGE and DLS), permit to view the intramolecular links. The study of enzymatic treatment applied to pea Alb and Glob at the native and denatured states, as well as thier native mixture showed that the enzymatic reaction is strongly related to the structure and conformation of proteins. Unlike Alb, the Glob fraction is a good substrate to transglutaminase and crosslinking reaction involves different subunits constituting globulins for each treatment condition. However, the Alb can be used as a booster of enzyme reaction which can be an innovative way for improving the proteins susceptibility toward transglutaminase treatment. The mechanism seems to be based on a selective affinity phenomenon. The good mechanical properties and water holding capacity of total pea proteins gel have been exploited to produce microparticles from a water-in-oil emulsion followed by enzymatic gelation. The produced microparticles were practically insoluble in gastrointestinal media in the absence of enzymes and slowly degradable in the presence of enzymes. The release mechanisms of riboflavin in digestive environments are governed by a diffusion phenomenon in the absence of enzymes and by support degradation phenomenon in the presence of enzymes according to kinetics compatible with nutraceutical applications
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Moyne, Pascale. "Contribution à l'étude de l'apport azoté en nutrition parentérale par des hydrolysats enzymatiques de protéines du lait de vache." Montpellier 1, 1994. http://www.theses.fr/1994MON13510.
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Vinot-Renaud, Catherine. "Contribution à la connaissance et à la valorisation d'hydrolysats industriels de protéines de poissons." Compiègne, 1989. http://www.theses.fr/1989COMPD208.
Abstract:
Des hydrolysats enzymatiques de protéines de poissons sont produits industriellement par la CTPP (Boulogne sur Mer) à partir des déchets engendrés par l'industrie locale de la pêche. Ils présentent des propriétés intéressantes notamment en alimentation animale comme substituts des protéines laitières ou en microbiologie comme stimulateurs des cultures. Toutefois aucune molécule active n'a pu jusqu'alors être identifiée. Le travail effectué a eu pour but d'approfondir notre connaissance de ces hydrolysats industriels afin d'en améliorer la valorisation. Il présente dans un premier temps une synthèse bibliographique des propriétés mises en évidence, un bref exposé du procédé d'obtention des hydrolysats ainsi que les résultats de la détermination de leur composition. La démarche chromatographique ayant permis la mise au point d'un fractionnement des hydrolysats par échange d'ions est ensuite décrite. Enfin la composition des fractions obtenues est déterminéee et la mise en place de deux tests d'activités est réalisée, d'une part sur des cul¬tures bactériennes, d'autre part sur des cultures de lymphocytes. Ainsi nous avons pu mettre en évidence des propriétés immunostimulantes remarquables pour certaines fractions, ouvrant ainsi la voie à une obtention potentielle de molécules à haute valeur ajoutée à partir d'hydrolysats de protéines de poissons.
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Robert, Marie. "Développement d'hydrolysats pour l'alimentation des animaux d'aquaculture : caractérisation moléculaire et fonctionnelle." Caen, 2014. http://www.theses.fr/2014CAEN2050.
Abstract:
L’aquaculture est un secteur en pleine extension et produit aujourd’hui la moitié des produits aquatiques destinés à la consommation humaine. Elle constitue ainsi un secteur clé pour le maintien et l’amélioration de la sécurité alimentaire dans le monde. Cependant sa croissance rapide a déjà un impact important sur l’environnement, notamment sur les stocks de poissons sauvages dont elle dépend pour la fabrication des aliments aquacoles. Dans ce contexte, l’alimentation destinée aux poissons d’élevage a considérablement évolué et a dû s’adapter aux nombreuses contraintes économiques et environnementales. L’utilisation des farines de poisson pour la formulation des aliments a particulièrement diminué au profit des farines d’origine végétale. Néanmoins, ces dernières sont moins adaptées aux besoins nutritionnels des poissons et engendrent une baisse des performances de croissance des animaux. Les hydrolysats protéiques issus des co-produits de la pêche et de l’aquaculture sont des ingrédients à fort potentiel nutritionnel et bioactif développés pour restaurer les performances de croissance obtenues avec des aliments à haute teneur en farine d’origine végétale. Ces derniers sont des mélanges complexes riches en peptides hydrolytiques et en acides aminés libres mais dont la composition est peu connue. Une approche expérimentale a été développée pour caractériser la fraction peptidique de deux hydrolysats de co-produits. Cette dernière est basée sur une approche transcriptomique permettant d’obtenir des données transcriptomiques ciblées sur les co-produits d’intérêt, associée à une approche peptidomique. En associant l’optimisation des étapes de fractionnement et la complémentarité de deux techniques de spectrométrie, il a été possible d’aboutir à l’identification de plus de 1000 peptides dans chacun de ces mélanges complexes. En parallèle, des expériences de conditionnement alimentaire menées chez le bar commun, Dicentrarchus labrax, ont permis de mettre en évidence des propriétés nutritionnelles au moins équivalentes et souvent supérieures à celles des farines de poisson chez les bars maintenus en élevage. En effet, l’inclusion de 5% de l’un ou l’autre des deux hydrolysats étudiés dans des aliments contenant 95% de farine d’origine végétale permet de maintenir des performances de croissance équivalente à celles obtenues avec des aliments contenant 80% de farine d’origine végétale et 20% de farine de poisson. Les hydrolysats agissent par ailleurs sur la physiologie digestive du bar commun comme le montrent les profils d’expression des biomarqueurs de l’absorption intestinale suivis dans cette étude. Enfin, les deux hydrolysats possèdent une activité antibactérienne in vitro et l’hydrolysat de Tilapia stimule le système immunitaire du bar commun. Ces résultats démontrent l’intérêt de l’utilisation de ces deux hydrolysats en aquaculture en complément ou en remplacement des farines de poissonGlobal production of farmed fish and shrimp has grown dramatically over the past decades and now contributes to half of the aquatic products intended for human consumption. Aquaculture is a key sector for the maintenance and improvement of food security worldwide. However, its rapid growth has a significant impact on the environment, particularly on the stocks of wild fish used to produce aqua feed. In this context, aqua feed has dramatically evolved and has been adapted to many economic and environmental constraints. The use of fishmeal has particularly declined in favor of plant protein sources. But plant proteins are less adapted to the nutritional needs of fish and result in lower growth performances. Protein hydrolysates from fishing and aquaculture by-products are ingredients of high nutritional and bioactive potential developed to restore growth performances in high-level plant protein diets. They are rich in hydrolytic peptides and free amino acids, but they are complex mixtures whose composition is not well known. We developed an experimental approach to characterize the peptide fraction of two by-product hydrolysates based on two complementary approaches: a transcriptomics approach aimed at getting transcriptomics data about the targeted by-products, and a peptidomics approach. The peptidomics approach combined the optimization of fractionation steps and two complementary mass spectrometry techniques. Thus we identified more than 1,000 peptides in the two by-product hydrolysates. Furthermore, diet conditioning experiments conducted in sea bass, Dicentrarchus labrax, highlighted their interesting nutritional properties to maintain growth performances of farmed fish. Indeed, dietary inclusion of 5\% of these hydrolysates in a high-level plant protein diet (95%) maintained growth performances at similar levels to those obtained with diets containing 80% of plant protein. In addition, we demonstrated an influence of these by-product hydrolysates on the digestive physiology of sea bass, as shown by biomarker expression in the intestinal absorption profiles observed in the study. Finally, our work shows that (i) both hydrolysates possess in vitro antibacterial activity and (ii) tilapia hydrolysate stimulates the immune system of sea bass. These results demonstrate the interest of using these two hydrolysates in aquaculture in addition to or instead of fishmeal
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Grelet, Johann. "Identification et caractérisation moléculaire d'une protéine LEA (Late Embryogenesis Abundant) mitochondriale exprimée dans les semences de pois." Angers, 2004. http://www.theses.fr/2004ANGE0020.
Abstract:
Les protéines LEA (Late Embryogenesis Abundant) forment une large famille de protéines hydrophiles et thermorésistantes qui possèdent des motifs répétés. Elles s'accumulent au cours de la maturation de la graine et disparaissent pendant la germination. De nombreuses protéines LEA sont aussi exprimées dans les tissus végétatifs en réponse à l'ABA et à différents stress. Toutes ces caractéristiques suggèrent que les protéines LEA soient impliquées dans la tolérance à la dessiccation. Elles ont été identifiées dans de nombreux compartiments sub-cellulaires: noyau, chloroplaste, cytosol, reticulum endoplasmique, appareil de Golgi. . . Mais aucune n'a encore été décrite dans les mitochondries. Au cours de l'étude du protéome mitochondrial des graines de pois, une protéine avait montré des similarités de séquences avec une protéine LEA-like de soja (Bardel et al. , 2002). L'ADNc codant cette protéine (PsLEAm) a été cloné, révélant la présence d'une pré-séquence d'adressage mitochondrial. Des expériences de fractionnement sub-mitochondrial ainsi que l'expression transitoire d'une protéine de fusion avec la GFP ont permis de démontrer que PsLEAm était localisée dans la matrice mitochondriale. PsLEAm possède toutes les caractéristiques de la famille des LEA: stabilité à la chaleur, forte hydrophilicité, présence de motifs répétés et accumulation en fin de maturation. L'application d'ABA exogène durant l'imbibition de la graine ou un stress hydrique sévère des plantes développées réinduisent l'expression de PsLEAm. Une protéine PsLEAm mature recombinante a été surexprimée chez Escherichia coli puis partiellement purifiée. Dans un test in vitro, cette protéine est apparue capable de protéger deux enzymes de la matrice mitochondriale, la fumarase et la rhodanèse, lors d'une dessiccation totale. L'analyse ultérieure de la structure et de la fonction de PsLEAm permettront d'élucider l'implication de PsLEAm dans la protection des mitochondries au cours de la maturationLEA (Late Embryogenesis Abundant) proteins belong to a large hydrophilic heat-resistant family, and exhibit repeated motifs in their sequence. The LEA proteins accumulate during seed maturation and disappear upon germination. A number of LEA proteins have been shown to also accumulate in plant tissues in response to ABA and numerous stresses. All the above characteristics support the idea that LEA proteins are involved in desiccation tolerance. They were found in many sub-cellular compartments: nucleus, chloroplasts, cytosol, endoplasmique reticulum, Golgi apparatus. . . But no LEA protein has been described in mitochondria so far. In a survey of pea mitochondrial proteome, a putative seed mitochondrial protein exhibited peptide tag sequence similarities with a soybean LEA-like protein (Bardel et al, 2002). The cDNA encoded this protein (PsLEAm) was cloned and revealed a typical amino-terminal transit peptide in the protein sequence. Biochemical evidence and GFP reporter transient expression in protoplast indicated that PsLEAm was localized in mitochondria matrix space. PsLEAm exhibited most of the LEA family features: heat solubility, high hydrophilicity, repeated motives and accumulation during late maturation. Moreover, exogenous ABA application during seed imbibition and severe water stress in mature plants re-induced PsLEAm expression. To explore the function of PsLEAm in mitochondria, a recombinant mature PsLEAm was overexpressed in Escherichia coli and was then partially purified. The recombinant protein was shown to protect two mitochondrial matrix enzymes, fumarase and rhodanese, during drying in an in vitro assay. Our future efforts will be focused on structural and functional analyses of PsLEAm, which will be a step forward to understanding the protective role that PsLEAm during seed maturation
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Kriaa, Habib. "Enrichissement du son en protéines par fermentation." Compiègne, 1989. http://www.theses.fr/1989COMPD282.
Abstract:
Les protéines occupent une place primordiale dans l'alimentation humaine. Cependant, le déficit mondial en cette matière ne fait qu'augmenter en dépit des efforts fait pour améliorer la productivité des sources de protéines végétales. En Tunisie, le son du blé constitue une matière première très abondante. Ce substrat est pauvre en protéines, toutefois, vue sa richesse en amidon (25 à 30%), cette matière première est susceptible d'être enrichi en protéines d'organismes unicellulaires en particulier par culture de levures. Pour parvenir à cet objectif, nous avons utilisé une méthode enzymatique permettant de transformer l'amidon du son en sucres fermentescibles. L'utilisation des enzymes amylolytiques nous a permis de transformer l'amidon en sucres simples avec un rendement égal à 95%. L'hydrolysat ainsi obtenu a été testé comme milieu de culture pour la croissance d'Hansenula anomala en batch et en continu en vue de son enrichissement en protéines. L'emploi de cet hydrolysat enzymatique de l'amidon du son à 20 (g/l) de glucose pour la croissance d'Hansenula anomala en réacteur fermé nous a conduit aux caractéristiques cinétiques suivantes, une vitesse spécifique maximale, max(x)=0,25h-1 et un rendement en protéines Y(P/s)=22%. La culture en continu de cette souche sur l'hydrolysat du son dans les mêmes conditions, nous a amené à déduire les caractéristiques cinétiques suivantes max(x)=0,3h-1 avec un rendement en protéines Y(P/s)=23%Proteins are very important for human food. Nevertheless the world shortage in protein is increasing despite all the efforts made to improve productivity of vegetable protein sources. In Tunisia, the bran of the corn is a very abundant raw material. This substrate is poor in proteins, however because of its richness in starch (25 - 30%), this raw material can be enriched in proteins of unicellular organisms in particular by yeast culture. To reach this objective, we’ve used an enzymatic method transforming the starch of the bran in a fermentiscible sugar. The use of amylotic enzymes has allowed us to transform starch in simple sugar with a yield of 95%. The hydrolysate thus obtained has been tested as a culture medium for the growth of Hansenula anomala in batch and continue culture to its enrichment in proteins. The use of that enzymatic hydrolysate of the starch of the bran at 20 (g/l) of glucose for the growth of Hansenula anomala in a closed reactor has led to the following kinetic characteristics : a specific maximal speed : max(x)=0,25h-1 and a protein yield Y(P/s)=22%. The continue culture of this strain on the bran hydrolysate in the same conditions has led to the deduction of the following kinetic characteristics : max(x)=0,3h-1 with a protein yield Y(P/s)=23%
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Rakotozafy, Randrianasolo Lalatiana Rasata. "Application de réactions enzymatiques énantiosélectives au dédoublement de synthons chiraux utilisables dans l'industrie pharmaceutique ou en chimie fine." Paris 6, 1991. http://www.theses.fr/1991PA066301.
Abstract:
Une étude systématique du dédoublement de deux types d'alcools secondaires a été entreprise en évaluant les coefficients d'énantiosélectivité E de différentes préparations enzymatiques commerciales ou non vis-a-vis de ces molécules. Les poudres ace toniques d'un champignon filamenteux, mucor plumbeus préparées au laboratoire sont particulièrement efficaces pour dédoubler des alcools secondaires acétyléniques ainsi que l'oct-1-en-3-ol et l'octan-3-ol. Les coefficients d'énantiosélectivité sont compris entre 20 et 100. Ces alcools optiquement purs sont des synthons chiraux pour la synthèse de molécules d'un grand intérêt biologique comme les leucotrienes, les prostaglandines, les vitamines, les alcaloi͏̈des ou les phéromones. . . Le (s)-5-hydroxy-hept-6-ynoate de méthyle qui sera utilisé pour la synthèse du leucotriene b4 marqué au tritium est obtenu par hydrolyse par l'alpha-chymotrypsine du mélange racémique correspondant. (E=17,9). La pig liver esterase (ple) et la horse liver esterase (hle) ont permis de dédoubler d'autres alcools secondaires encombrés utilisables comme auxiliaires chiraux et dont certains se sont révèlés de bons substituts de 8-phenylmenthol pour la réaction d'hydrogénation asymétrique d'énamino-esters. Pour le 2,2-diphenylcyclepentanol, le 1,1-diphenyl-2-butanol et le 1,1-diphenyl-2-propanol, le dédoublement par hydrolyse enzymatique des acétates racémiques correspondants en tampon contenant 10% de dmso est une méthode de préparation des deux énantiomères plus facile et plus pratique, sinon plus économique, que les méthodes chimiques actuellement employées
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Tolleter, Dimitri. "Analyse structurale et fonctionnelle d'une protéine LEA (Late Embryogenesis Abundant) mitochondriale exprimée dans les graines de pois." Phd thesis, Université d'Angers, 2007. http://tel.archives-ouvertes.fr/tel-00346312.
Abstract:
A l'exception des graines de plantes supérieures, peu d'organismes sont capables de résister à la dessiccation. La survie à l'état sec est un phénomène multifactoriel impliquant notamment l'accumulation de protéines LEA (Late Embryogenesis Abundant). Nous avons montré que la LEAM, une protéine LEA mitochondriale exprimée dans les graines, est dépliée à l'état natif, mais peut se structurer réversiblement en hélice a sous l'effet de la dessiccation. La LEAM interagit avec les membranes à l'état sec, et plus précisément avec les groupements phosphate des phospholipides. Ces interactions, qui dépendent de la composition lipidique, permettent de protéger les liposomes des effets destructeurs de la dessiccation et de la congélation. L'ensemble de ces résultats indique que la LEAM protège la membrane interne mitochondriale pendant la dessiccation. Des approches de génétique inverse ont été initiées afin de confirmer cet axiome et de préciser le rôle physiologique de la LEAM
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Dion-Poulin, Alexandra. "Étude de la fonctionnalité d’hydrolysats protéiques d’insectes générés par le couplage de l’hydrolyse enzymatique et des hautes pressions hydrostatiques et de l’acceptabilité d’un ingrédient d’insectes auprès de cuisiniers novateurs." Master's thesis, Université Laval, 2021. http://hdl.handle.net/20.500.11794/68780.
Abstract:
L’intérêt pour l’entomophagie est grandissant en raison de ses nombreux avantages tant environnementaux que nutritionnels. L’acceptabilité sociale de cette pratique dans les sociétés occidentales est un obstacle majeur de cette industrie. Il est reconnu que l’incorporation des insectes sous forme d’ingrédients plutôt qu’entiers favorise l’acceptabilité des consommateurs. Toutefois, la farine d’insectes possède une faible fonctionnalité et est davantage utilisée comme agent de remplissage dans des aliments. L’hydrolyse enzymatique est une méthode largement utilisée afin de modifier la fonctionnalité de diverses protéines et son efficacité peut être améliorée par l’utilisation d’un prétraitement aux hautes pressions hydrostatiques (HPH). Dans le cadre de ce projet, la fonctionnalité de farines d’insectes brutes et d’hydrolysats protéiques générés à partir de farines prétraitées ou non par pressurisation avant l’hydrolyse enzymatique a été déterminée. La solubilité et la capacité de rétention d’huile ont été améliorées par ce procédé contrairement à la capacité de rétention d’eau et aux propriétés moussantes et gélifiantes. Laviscosité et les propriétés émulsifiantes ont été peu améliorées. Cependant, leurs fonctionnalités généralement améliorées en comparaison de celles des farines pourraient faciliter leur acceptabilité. Plus spécifiquement, il est reconnu qu’une expérience positive de consommation favorise l’acceptabilité notamment lorsque des chefs sont inclus dans ce type de processus. Pour ce projet, une étude qualitative basée a priori sur la théorie de la diffusion de Rogers a également été effectuée afin de déterminer la perception de cuisiniers novateurs sur l’utilisation d’ingrédients d’insectes. Tous les participants avaient une opinion positive envers l’entomophagie, mais trouvaient que les inconvénients majeurs de la farine étaient sa texture, son odeur et sa faible acceptabilité par les consommateurs. Comprendre ces perceptions permettra d’accroître l’utilisation des ingrédients d’insectes dans la gastronomie et éventuellement l’acceptabilité sociale.Interest in Entomophagy increases due to several environmental and nutritional benefits, but the social acceptability of this practice is a major obstacle in Western societies. Studies have shown that incorporating insect as an ingredient rather than whole insects promotes consumer acceptability. As a result of their poor functionality, insect meals arecommonly used as a filler agent. Enzymatic hydrolysis is a widely used method to modify and improve the functionality of various proteins, but the effectiveness of this method can be enhanced by using high hydrostatic pressures (HHP) as a pre-treatment. In this project, the functionality of insect meals and protein hydrolysates prepared from meals that were pretreated or not prior enzymatic hydrolysis by pressurization has been determined. The solubility and oil binding capacity were enhanced by this process in contrast to water binding capacity as well as foaming and gelling properties. Viscosity and emulsifying property were slightly increased comparatively to insect meal. However, their different functionalities from those of insect meals could facilitate their acceptability. Specifically, it is acknowledged thata positive consumption experience promotes the entomophagy acceptability especially whenchefs are included in the process. For this project a qualitative study based a priori on Roger’sdiffusion of innovation theory was also conducted to explore the perceptions of innovative chefs on the use of insect ingredients. All participants had a positive opinion of entomophagy and the majority was ready to use it. Understanding these perceptions will increase the use of insect ingredients in the gastronomy and eventually social acceptability.
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Dumont, Estelle. "Tolérance au gel après acclimatation au froid chez le pois : identification de protéines et cartographie de PQL et QTL." Thesis, Lille 1, 2008. http://www.theses.fr/2008LIL10037/document.
Abstract:
L'acclimatation au froid est un phénomène qui permet aux plantes exposées à de basses températures positives de pouvoir tolérer ensuite le gel. ElIe est, ici, étudiée chez le pois (Pisum sativum L.) en conditions contrôlées grâce à deux lignées, Champagne tolérante au gel après cette phase d'acclimatation et Térèse sensible même après la phase d'acclimatation. L'analyse du protéome des feuilles, des tiges et des racines de ces lignées a permis l'identification de protéines ayant un rôle potentiel dans l'acclimatation au froid. Pour les feuilles et la base des tiges, la majorité des protéines différentielIement exprimées et identifiées, soit 35% des protéines, participent à la photosynthèse et à la glycolyse (métabolisme primaire). Dans les tiges, 25% des protéines sont des chaperonnes et dans les racines, les protéines de défense représentent 47% des protéines identifiées. Les teneurs en raffinose, saccharose, glucose ainsi qu'en citrate augmentent chez Champagne dans les 3 parties étudiées de la plante lors de l'acclimatation au froid. Ces concentrations restent faibles et à peu près stables chez Champagne non acclimaté et Térèse qu'il ait ou non subi la phase d'acclimatation. Le dosage de ces métabolites a aussi été réalisé chez des lignées recombinantes issues du croisement entre Champagne et Térèse. Ceci a permis la détection de QTL pouvant être explicatifs de l'acclimatation au froid avec, notamment, des QTL de teneur en raffinose qui co-localisent avec des QTL de tolérance au gel présents sur les groupes de liaison 5 et 6. Des PQL ont aussi été recherchés avec l'analyse du protéome des feuilles des lignées recombinantes. Certains co-localisent avec les QTL précédemment détectés. L'ensemble des données fournies par les différentes approches nous permet d'émettre des hypothèses pour expliquer les mécanismes mis en place chez Champagne pour tolérer le gelCoId acclimation is the process whereby plants, previously exposed to low positive temperatures, are sUbsequently able to tolerate frost. This phenomenon was studied under controlled conditions in pea (Pisum sativum L.) in two Iines: Champagne, frost tolerant after cold acclimation and Terese, frost sensitive even if previously submitted to a cold acclimation period. Leaf, stem and root proteomes were analysed. Thirty five per cent of the identified differentially expressed proteins in leaves and stems during the cold acclimation period were involved in photosynthesis and glycolysis. ln stems, 25% were identified as folding proteins and ir roots, 47% were involved in the defense response. The raffinose, sucrose, glucose and citrate contents increased in Champagne leaves, stems and roots during the cold acclimation. ln contrast, the levels of these compounds were low in non-acclimated Champagne as weil as in Terese submitted to the cold acclimation period or not. Metabolite levels were also determined on the recombinant inbred lines (RIL) resulting from the cross between Champagne and Terese. Subsequent analyses permitted the detection of potential cold acclimation explicative OTL. ln particular, raffinose content QTL were colocalized with frost da mage QTL on the linkage groups 5 and 6. POL were also detected with the study of RtL leaf proteome. A number of these PQL colocalized with the previously detected QTL. The data obtained using these different approaches allowed us to propose hypothezises potentially explaining the mechanisms used by Champagne to tolerate frost
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Durand, Rachel. "Valorisation d'hydrolysat de poisson pour la santé humaine : séparation des composés bioactifs par électrodialyse avec membranes d'ultrafiltration et évaluation de leurs activités biologiques impliquées dans le développement du syndrome métabolique." Doctoral thesis, Université Laval, 2019. http://hdl.handle.net/20.500.11794/66672.
Abstract:
La valorisation des co-produits de poisson est un enjeu économique et environnemental. Depuis plusieurs années, des recherches ont montré que les co-produits de poisson contenaient des molécules actives pour la santé humaine comme des acides gras polyinsaturés et des peptides bioactifs. L’objectif principal de cette thèse était d’évaluer l’utilisation potentielle d’hydrolysats de laitance de hareng pour l’amélioration de la santé humaine, spécifiquement en agissant positivement sur certaines fonctions physiologiques associées au syndrome métabolique, et l’effet de leur séparation par électrodialyse avec membranes d’ultrafiltration (EDUF) sur la production de fractions bioactives. Dans un premier temps, il a été démontré qu’une supplémentation avec différents hydrolysats de laitance de hareng d’une diète riche en gras et en sucre chez des souris permettait de moduler certains paramètres physiologiques impliqués dans le développement du syndrome métaboliques (MetS) : amélioration de la tolérance au glucose, augmentation de l’apport énergétique total et protection de la population de Lactobacillus dans le microbiote intestinal. De plus, les hydrolysats ont aussi montré des activités antiinflammatoires in vitro à des concentrations de 1ng/ml et 100pg/ml. Dans un second temps, la faisabilité d’une séparation par EDUF de deux hydrolysats de laitance de hareng différents a été évaluée : le premier plus complexe était un mélange de molécules (lipides, acides nucléiques, peptides, acides aminés libres), alors que le second était principalement composé de peptides et d’acides aminés libres. Une nouvelle configuration utilisant quatre membranes d’ultrafiltrations (deux de 50kDa et deux de 20kDa) a permis un double fractionnement simultané des composés anioniques et cationiques en seulement une étape. Il a d’abord été montré que seuls les peptides chargés ainsi que les acides aminés libres pouvaient être séparés par EDUF alors que les lipides et les acides nucléiques ne migraient pas dans les fractions de récupérations. De plus, l’utilisation de membranes présentant deux tailles de pores distinctes a permis le fractionnement des hydrolysats en différentes classes de poids moléculaires. En effet, l’utilisation de membranes de 20kDa a permis la concentration de peptides de faibles poids moléculaires (< 600Da) et IV d’acides aminés libres, alors que les populations peptidiques des fractions obtenues avec les membranes de 50kDa présentaient des poids moléculaires supérieurs et plus variés. Dans un troisième temps, les bioactivités des fractions de récupérations et des hydrolysats de laitance de hareng ont été évaluées in vitro. Ainsi, la séparation du premier hydrolysat a permis l’obtention d’une fraction finale stimulant la captation du glucose in vitro et d’une fraction anionique antioxydante. Le fractionnement du second hydrolysat a permis quant à lui la production de deux fractions cationiques anti-inflammatoires ainsi que l’identification subséquente de deux séquences peptidiques bioactives. L’ensemble de cette thèse a donc démontré que les hydrolysats de laitance de hareng contenaient des composés actifs, comme des acides gras polyinsaturés et des peptides, modulant positivement certains paramètres physiologiques impliqués dans le MetS et pouvant ainsi permettre la diminution de son occurrence. De plus, la séparation des hydrolysats par EDUF a permis la production de fractions bioactives ainsi que l’identification de deux nouvelles séquences peptidiques anti-inflammatoires (IVPAS et FDKPVSPLL). Ces travaux ont démontré l’effet bénéfique pour la santé humaine des hydrolysats de laitance de hareng et de ses fractions, permettant d’envisager une valorisation plus efficace de ces coproduits de poisson par les industries de transformation dans les secteurs liés à la santé humaine.Fish by-product valorization is an economic and environmental issue. For several years, scientific researches have shown that fish by-products contained active molecules for human health, as polyunsaturated fatty acids and peptides. The aim of this thesis was to evaluate the potential use of herring milt hydrolysates for human health, especially by evaluating their potential actions in physiological parameters involved in the metabolic syndrome and the effect of their separation by electrodialysis with ultrafiltration membrane (EDUF) for the production of bioactive fractions. First, we have demonstrated that the supplementation of three different herring milt hydrolysates in a high fat high sucrose diet in mice was able to modulate some physiological functions involved in the metabolic syndrome: improvement of glucose tolerance, increase of the total energy intake and protection against the Lactobacillus disappearance in the gut microbiota. Moreover, the hydrolysates decreased the inflammation induction in macrophages stimulated with LPS at 1ng/ml and 100pg/ml. Secondly, we have evaluated the separation of two herring milt hydrolysates by EDUF: the first one was more complex with a mix of different molecules (lipids, nucleic acids and peptides) while the second one was mainly composed of peptides. A new configuration using four ultrafiltration membranes (two of 50kDa and two of 20kDa) allowed a simultaneous double separation of anionic and cationic compounds. It has been shown that only charged peptides and free amino acids were fractionated in EDUF, while the lipids and nucleic acids didn’t migrate to the recovery fractions. Moreover, the use of membranes with different cut-off allowed a separation of the hydrolysates in different molecular weight ranges. Indeed, the use of 20kDa membranes allowed the concentration of peptides with small molecular weights (<800Da) and free amino acids, while the recovery fractions obtained with the 50kDa membranes were composed oh peptide with higher molecular weights.Thirdly, the potential bioactivities of the recovery fractions and the herring milthydrolysates were evaluated in vitro. Hence, the separation of the first hydrolysate allowed the production of a final fraction increasing the glucose uptake and an antioxidant anionicfraction. While the separation of the second hydrolysate allowed the production of two antiinflammatory cationic fractions as well as the identification of two bioactive peptides sequences. All these results showed that milt herring hydrolysate contained bioactive compounds such as polyunsaturated fatty acids and peptides, improving some physiological functions involved in the MetS and may decrease its occurrence. More over, the separation of the hydrolysates by EDUF allowed the production of bioactive fractions and the identification of two new anti-inflammatory peptide sequences. This work demonstrated the existence of a beneficial effect of herring milt hydrolysate and its fractions for the human health, allowing a better valorization of this by-product of the food industry for the health sector.
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Guerdam, Embarek. "Isolement d'une protéine possédant une activité lipoxygénase et acides gras lyase à partir d'une variété de pois protéagineux." Limoges, 1993. http://www.theses.fr/1993LIMO301A.
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Silvestre, Marialice Pinto Coelho. "Nouvelles méthodes d'étude de la composition d'hydrolysats de caséine (cuprimétrie, spectrophotométrie, chromatographie d'exclusion stérique) : application à l'estimation de leur teneur en di- et tripeptides." Paris 11, 1993. http://www.theses.fr/1993PA114820.
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Groleau, Paule Émilie. "Étude des interactions peptide-peptide dans un mélange de peptides issu d'un hydrolysat trypsique de ¿-lactoglobuline et de leur influence sur le fractionnement par nanofiltration." Doctoral thesis, Université Laval, 2003. http://hdl.handle.net/20.500.11794/17853.
Abstract:
Les hydrolysats enzymatiques de protéines de lactosérum sont riches en peptides fonctionnels et bioactifs, ce qui justifient l’intérêt de les fractionner afin de concentrer ou purifier ces molécules. Les techniques membranaires présentent un fort potentiel pour la séparation de ces hydrolysats à l’échelle industrielle, mais des interactions peptide-peptide semblent affecter leur efficacité. Cette étude visait donc à caractériser les interactions peptide-peptide dans un mélange de peptides issus d’un hydrolysat trypsique de β-LG, à identifier les conditions physico-chimiques et les peptides responsables de ces interactions, puis à évaluation l’influence de ces interactions sur le fractionnement de cet hydrolysat par nanofiltration. La focalisation isoélectrique a d’abord été utilisée pour fractionner l’hydrolysat et a permis de démontrer la formation d’agrégats peptidiques à pH acide. Une étude de turbidimétrie a par la suite mis en évidence la solubilité de l’hydrolysat en fonction du pH et de certaines conditions physico-chimiques. Les agrégats obtenus à pH 4 ont été centrifugés et séparés, puis les peptides responsables de cette agrégation ont été identifiés. Parmi ces peptides, la présence de fragments chymotrypsiques a justifié une étude subséquente sur l’activité résiduelle chymotrypsique dans la préparation trypsique, et son impact sur le phenomène d’agrégation des peptides à pH acide. La dernière partie de cette étude a permis d’évaluer l’impact des agrégats peptidiques sur le fractionnement par nanofiltration de l’hydrolysat trypsique de β-LG. Il a été démontré que les interactions peptide-peptide ne nuisent pas au fractionnement, mais semblent plutôt être bénéfiques, et ce en modifiant la couche de polarisation créée en cours de filtration.Whey protein enzymatic hydrolysates contain several functional and bioactive peptides which justify their fractionatation to isolate such interesting molecules. Membrane separation technologies have an excellent potential for peptide separation but peptide-peptide interactions seem to reduce their efficiency. The objectives of this study were to demonstrate the occurrence of peptide-peptide interactions in a tryptic hydrolysate of β-LG, to identify the optimal physico-chemical conditions and peptides responsible of such interactions, as well as to evaluate the influence of such interactions on the fractionation of this hydrolysate by nanofiltration. Isoelectric focusing was used to fractionate the hydrolysate and to demonstrate a peptidic aggregation phenomena at acidic pH. Turbidimetry was then used to highlight the solubility of the hydrolysate according to the pH and some physico-chemical conditions. Peptide aggregates formed at pH 4 were centrifuged and separated, and peptides responsible for this aggregation were identified. From these peptides, the presence of chymotryptic peptides has justified a study of the impact of residual chymotryptic activity in the tryptic preparation on the aggregation phenomena. The second part of this work allowed the evaluation of the effect of these aggregates on the fractionation of the tryptic hydrolysate of β-LG by nanofiltration. It was shown that peptide-peptide interactions do not impair the fractionation. On the contrary, these interactions taking place in the polarized layer may have a positive impact on the fractionation.
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Randriamahatody, Zo. "Valorisation biotechnologique des co-produits de crevette : utilisation de la protéolyse enzymatique pour des applications avicoles à Madagascar." Lorient, 2011. http://www.theses.fr/2011LORIS220.
Abstract:
Les co-produits de la mer représentent des ressources biologiques valorisables pouvant générer différentes molécules d’intérêts nutritionnels et biologiques. L’objectif de ce travail est d’étudier les potentiels alimentaires des hydrolysats de têtes de crevette d'élevage et de pêche de Madagascar. Ainsi, 4 enzymes actives à pH extrême ont été testées : Pepsine, Novozym 37020, Protex 6L et Delvolase. La Pepsine s'est avérée être la plus appropriée, conduisant à la production de peptides de petite taille avec un poids moléculaire inférieur à 1 000 Da et l’amélioration du profil en acides aminés, favorisant la qualité nutritionnelle. L’hydrolyse pepsique a été optimisée par la condition de pH libre ou maintenu durant l’hydrolyse, et l’inactivation par la chaleur ou par le pH. L'introduction dans l'alimentation avicole traditionnelle malgache des hydrolysats obtenus a conduit à l'amélioration de la production, avec un gain de poids des poulets pouvant aller jusqu'à 2,3 fois supérieur aux témoins. Des activités antimicrobiennes sur de microorganismes pathogènes aquacoles et alimentaires ont été identifiées. L’hydrolyse pepsique pendant 2 heures à pH maintenu a été la plus efficace dans ces 2 domaines d'application. Elle a été aussi la plus favorable pour l’extraction de la chitine en produisant les résidus de carapaces les moins chargés en matières minérales et en protéines. Ces résultats suggèrent que l’hydrolyse enzymatique constitue une méthode efficace pour l’amélioration de la qualité nutritionnelle des têtes de crevette d’élevage et de pêche de Madagascar et la génération de substance à activité antimicrobienne, tout en favorisant l’extraction de la chitineMarine by-products represent valuable biological resources able to generate molecules with biological and nutritional interests. The objective of the present study is to investigate nutritional potentials of hydrolysates from fished and farmed shrimp heads from Madagascar. Thus, 4 enzymes operational at extreme pH conditions were screened: Pepsin, Novozym 37020, Protex 6L and Delvolase. Pepsine was the most efficient enzyme conducing to the production of small-sized peptides with molecular weight inferior to 1 000 Da and the amelioration of amino acids profile, promoting the nutritional quality. Then, peptic hydrolysis was optimized by using different pH conditions and different enzyme inactivations. Introduction of resulting hydrolysates into traditional malagasy poultry feeding ameliorated the production, with weight gains 2,3 times higher. Some hydrolysates presented also growth inhibition activity again fishes pathogenic and food microorganisms. Two hours peptic hydrolysis at maintained pH seemed to be the most efficient condition in the 2 fields studied. It was also the most effective for chitin extraction by producing the poorest mineral and protein containing exoskeleton resides. Those results suggest the efficiency of enzymatic hydrolysis of shrimp heads from Madagascar to ameliorate their nutritional quality, while allowing partially chitin extraction
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Farges-Haddani, Bérangère. "Les peptides de colza : une alternative aux protéines animales dans les procédés de culture de cellules de mammifères ?" Vandoeuvre-les-Nancy, INPL, 2005. http://docnum.univ-lorraine.fr/public/INPL_T_2005_FARGES_HADDANI_B.pdf.
Abstract:
En vue d'améliorer les performances de procédés de culture en masse de cellules animales pour la production de protéines thérapeutiques, et de limiter les risques de contamination par des molécules d'origine animale, nous avons étudié les effets d'une supplémentation, par des fractions peptidiques de colza, de milieux de culture sans sérum et/ou sans protéine animale. Des fractions peptidiques de diverses compositions ont été générées par hydrolyse enzymatique d'extrait protéique et fractionnement membranaire. Ces fractions, riches en matière azotée, montrent un effet variable sur les cellules CHO, avec un fort effet promoteur de croissance cellulaire d'une fraction composée d'une large gamme de taille de peptides. Des études cinétiques de cultures en masse en bioréacteurs agités ont confirmé l'impact de cette fraction sur : l'accélération de la croissance cellulaire, le prolongement de la survie cellulaire, l'augmentation de la production spécifique de la protéine produite, et le ralentissement du métabolisme central et du décès cellulaire. Nousavons également montré que les peptides présents dans le mélange ajouté au milieu de culture interviennent, non seulement, comme additifs nutritionnels, mais également, comme facteur de croissance et/ou de survie. D'autres atouts supplémentaires de ces peptidesont été mis en évidence, tels que : une adaptation plus facile de diverses lignées cellulaires à ce milieu sans sérum, une bonne cryoconservation des cellules, une bonne filtrabilité. Enfin, nous avons formulé un milieu de culture particulièrement simple, complètement exempt de molécule d'origine animale, et stimulant la croissance de différentes lignées cellulaires utilisées en industrie, soit adhérentes, soit en suspension, à différentes échellles de culture. L'ensemble de nos résultats converge vers un intérêt de cette nouvelle source peptidique comme additif dans les procédés de culture en masse de cellules animalesIn order to improve the performances of animal cell culture processes for the production of therapeutic proteins, and to limit the risks of contamination by animal derived molecules, the effects of a supplementation of serum-free and animal-protein free culture media with rapeseed peptidic fractions were performed. Peptide fractions of various compositions were generated by enzymatic hydrolysis on proteic extract and membrane fractionation. These fractions, rich in nitrogen matter, displayed a variable effect on CHO cells, with a strong cell growth promoting effect of a fraction containing peptides with a broad range of size. In fact, this fraction increased the cell growth, prolonged cell survival, increased the specific production of the recombinant protein, and reduced the whole metabolism of carbohydrates. We also showed that tis peptidic fraction was utilized as nutritioinal additives, but also, as survival and/or growth promoting factors. Other additional advantages ot these peptides were highlighted, such as : an easier adaptation of various cell lines to serum-free conditions, a good cryoprotection of cells during the freezing process au good filterability. Indeed, a very simple culture medium was designed, completely free from animal molecules, and stimulating the growth of adherent or suspension cells from different industrial strains, for various culture scales. These results taken together suggest the use of this new particularly interesting peptidic source as an additive in animal cell culture processes
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Tauzin, Jérôme. "Biofonctionnalités de peptides issus de caséines αs bovines : Cinétique d'hydrolyse trypsique de la caséine αs2 et activité inhibitrice de l'ECA des peptides." Nancy 1, 2003. http://www.theses.fr/2003NAN10224.
Abstract:
La caséine αS2 est la protéine majeure du lait la moins étudiée pour l'obtention de peptides bioactifs. Après sa purification par chromatographie d'échange d'ions puis d'interactions hydrophobes, elle a été hydrolysée par la trypsine et les peptides résultants ont été identifiés. La cinétique de libération des peptides a mis en évidence trois zones d'accessibilité différente à la protéolyse. Ces éléments et la prédiction de structure secondaire ont permis de proposer un modèle d'organisation de la caséine αS2 en solution. Quatre de ces peptides trypsiques inhibent l'enzyme de conversion de l'angiotensine I (IEC) avec des IC50 allant de 4 à 15 micro M. Leurs séquences, comparées à celles d'autres inhibiteurs, ont été discutées afin d'établir des relations séquence-activitéαS2-Casein is the less studied substrate to obtain bioactive peptides among the major milk proteins. After its purification by ion exchange chromatography followed by hydrophobic interactions chromatography, it was hydrolysed by trypsin and resulting peptides were identified. Their release kinetics revealed three areas having different susceptibility to proteolysis. These data and secondary structure prediction helped to define a hypothetical model of protein organisation in solution. Four tryptic peptides inhibited angiotensin-I converting enzyme (CEI) with IC50 values comprised between 4 and 15 micro M. Their sequences were confronted with others inhibitors to discuss sequence-activity relationships
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El, youssef Cynthia. "Sensory benefits provided by selected microorganisms for the fermentation of plant matrices." Electronic Thesis or Diss., université Paris-Saclay, 2020. http://www.theses.fr/2020UPASB027.
Abstract:
La nouvelle tendance alimentaire prônant la consommation accrue de protéines végétales est liée aux effets négatifs sur la santé et l’environnement des produits d’origine animale. Pour répondre aux besoins des consommateurs, les industries agro-alimentaires développent ainsi des produits à base de protéines végétales.Parmi les différentes sources de protéines, le pois (Pitsum sativum) présente des avantages environnementaux, technologiques et nutritionnels. Néanmoins, son utilisation dans la formulation de produits reste fortement freinée par la présence de défauts sensoriels qui sont généralement décrits comme étant de type “beany”, “vert” et “végétal”. La fermentation est un des leviers de choix pour modifier la qualité de ces produits.Ce travail de recherche a donc consisté à étudier l’impact de la fermentation sur la perception sensorielle d’un produit type yaourt à base de protéines de pois. Des méthodes microbiologiques, physico-chimiques et sensorielles ont été mises en œuvre.Les molécules responsables des défauts dans la matrice non fermentée ont été identifiées par chromatographie en phase gazeuse couplée à la spectrométrie de masse. Les aldéhydes, en particulier l’hexanal, les furanes, les alcools et les cétones sont les molécules majeures présentes dans cette matrice initiale.Divers microorganismes sélectionnés préalablement ont été cultivés sur cette matrice et leurs capacités d’acidification et d’aromatisation ont été évaluées. Des consortia de bactéries lactiques et de levures ont ainsi été sélectionnés apportant chacun les fonctionnalités recherchées.La modification de la perception des produits fermentés a été mise en évidence par des analyses sensorielles. L’origine de cette amélioration peut être liée à la production d'arômes fruités par les levures et/ou à la dégradation des défauts beany.Afin de mieux comprendre ce phénomène, des analyses sensorielles sur des solutions modèles de molécules cibles (méthodes de recombinaisons et d’omissions) ont été menées. En parallèle, des empreintes moléculaires par chromatographie en phase gazeuse couplée à l’olfactométrie ont été réalisées sur les produits fermentés.Ainsi, les esters produits par les levures ont un rôle déterminant dans l’amélioration de la perception sensorielle des produits fermentés à base de protéines de pois. Concernant les molécules responsables des défauts, l’impact dominant de certaines molécules dont l’hexanal et le 2-pentylfuran a été mis en évidence. Néanmoins, l’impact d’autres molécules de défauts, encore présentes dans la matrice fermentée, reste à approfondir. En particulier, il faudrait déterminer les seuils de perception dans ces matrices et étudier les effets d’interactions.Pour conclure, ce travail de thèse CIFRE nous a permis de déposer un brevet en vue du développement d’un ingrédient innovant, issu de la combinaison d’un procédé de fermentation et de stabilisation par séchageThe new food trend in favor of the increasing consumption of plant proteins is mainly linked to the negative effects of products of animal origin on health and environment. To meet consumers’ needs, agro-food industries are working on the development of plant protein-based products.Among the different sources of proteins, pea (Pitsum sativum) offers environmental, technological and nutritional advantages. However, its use in the formulation of products remains strongly hampered by the presence of off-flavors, described mainly as “beany”, “green” and “vegetable”. Fermentation is one of the means that could be chosen to modify the quality of these products.Therefore, this research consisted of studying the impact of fermentation on the sensory perception of a pea protein yoghurt-like product. Microbiological, physico-chemical and sensory methods were implemented.The molecules responsible for off flavors in the unfermented matrix were identified by gas chromatography coupled with mass spectrometry. Aldehydes, particularly hexanal, furans, alcohols and ketones are the major molecules present in this initial matrix.A variety of preselected microorganisms were cultured on this matrix, and their acidification and aromatization capacities were evaluated. Consortia of lactic acid bacteria and yeasts were selected, based on the desired functionalities that each provides.The modification of the sensory perception of fermented products was confirmed by sensory analyses. The origin of this improvement might be related to the production of fruity aromas by the yeasts and / or the degradation of off-flavors.In order to get a better understanding of this phenomenon, sensory analyses on model solutions of the targeted molecules (recombination and omission experiments) were performed.In parallel, molecular fingerprinting by gas chromatography coupled with olfactometry were carried out on the fermented products.Hence, the produced esters by yeasts played a decisive role in improving the sensory perception of pea protein fermented products. Regarding the molecules responsible for defects, the dominant impact of certain molecules including hexanal and 2-pentylfuran has been highlighted. Nevertheless, the effect of other off-flavor molecules, remaining in the fermented matrix, still needs further exploration. In particular, the perception threshold in these matrices needs to be determined and the interaction effects require exploration.To conclude, this industrial thesis allowed to file a patent pertaining to the development of an innovative ingredient, resulting from the combination of a fermentation process and stabilization by drying
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Suwal, Shyam, and Shyam Suwal. "Fractionation of Peptides from Protein Hydrolysate by Electrodialysis with Filtration Membrane : process optimization, Fouling characterization and Control mechanisms." Doctoral thesis, Université Laval, 2015. http://hdl.handle.net/20.500.11794/26619.
Abstract:
Des peptides bioactifs ont déjà été fractionnés par électrodialyse avec membrane de filtration (ÉDMF) à partir d’hydrolysats de sous-produits de crabe des neiges. L’optimisation des paramètres apparaît maintenant indispensable pour perfectionner le procédé. Ainsi, le taux de migration des peptides, leur sélectivité et l'évolution des paramètres électrodialytiques ont été étudiés pour différents paramètres (configuration, concentration en KCl et types de champ électrique). La configuration (2) de la cellule d’ÉDMF comprenant deux compartiments d'alimentation et un compartiment de récupération a démontré des valeurs de champ électrique local relativement stables par rapport à la configuration (1) constituée d’un compartiment d’alimentation et de deux compartiments de récupération. Des peptides contenant des glutamates, des aspartates, et des glycines ont été séparés avec la configuration 1 et des peptides composés d’arginines et de lysines avec la configuration 2. Un taux de migration peptidique de 13,76 ± 3,64 g/m2h a été obtenu par le maintien constant de la conductivité des solutions. La sélectivité a été accrue en augmentant la concentration en KCl de 1 à 5 g/L dans le compartiment de récupération. Une augmentation de la force ionique a amplifié la charge de surface, agrandissant ainsi la taille effective des pores et réduisant la couche d'hydratation de la membrane d’ultrafiltration. Toutefois, les membranes échangeuses d’anions et de cations ont été colmatées par des peptides et des acides aminés et détériorées pendant l’ÉDMF. Pour résoudre ces problèmes, l’effet de l’application du champ électrique pulsé (PEF) et de l'inversion de polarité (PR) a été étudié. Le taux de migration des peptides n'a pas été affecté sauf avec PR à 40 V. La sélectivité a été maximale avec PEF à 20 V. La dissociation de l'eau a été réduite tout en conservant les propriétés physico-chimiques des membranes grâce à l’application du PEF et de la PR par rapport au courant continu (DC). En outre, la plus faible quantité d'énergie a été consommée avec le PEF. Par conséquent, il a été possible d’optimiser la technologie d’ÉDMF du point de vue de l’efficacité énergétique, de la sélectivité peptidique et de l’encrassement membranaire grâce à l’application du PEF et tout en maintenant la conductivité électrique des solutions.Des peptides bioactifs ont déjà été fractionnés par électrodialyse avec membrane de filtration (ÉDMF) à partir d’hydrolysats de sous-produits de crabe des neiges. L’optimisation des paramètres apparaît maintenant indispensable pour perfectionner le procédé. Ainsi, le taux de migration des peptides, leur sélectivité et l'évolution des paramètres électrodialytiques ont été étudiés pour différents paramètres (configuration, concentration en KCl et types de champ électrique). La configuration (2) de la cellule d’ÉDMF comprenant deux compartiments d'alimentation et un compartiment de récupération a démontré des valeurs de champ électrique local relativement stables par rapport à la configuration (1) constituée d’un compartiment d’alimentation et de deux compartiments de récupération. Des peptides contenant des glutamates, des aspartates, et des glycines ont été séparés avec la configuration 1 et des peptides composés d’arginines et de lysines avec la configuration 2. Un taux de migration peptidique de 13,76 ± 3,64 g/m2h a été obtenu par le maintien constant de la conductivité des solutions. La sélectivité a été accrue en augmentant la concentration en KCl de 1 à 5 g/L dans le compartiment de récupération. Une augmentation de la force ionique a amplifié la charge de surface, agrandissant ainsi la taille effective des pores et réduisant la couche d'hydratation de la membrane d’ultrafiltration. Toutefois, les membranes échangeuses d’anions et de cations ont été colmatées par des peptides et des acides aminés et détériorées pendant l’ÉDMF. Pour résoudre ces problèmes, l’effet de l’application du champ électrique pulsé (PEF) et de l'inversion de polarité (PR) a été étudié. Le taux de migration des peptides n'a pas été affecté sauf avec PR à 40 V. La sélectivité a été maximale avec PEF à 20 V. La dissociation de l'eau a été réduite tout en conservant les propriétés physico-chimiques des membranes grâce à l’application du PEF et de la PR par rapport au courant continu (DC). En outre, la plus faible quantité d'énergie a été consommée avec le PEF. Par conséquent, il a été possible d’optimiser la technologie d’ÉDMF du point de vue de l’efficacité énergétique, de la sélectivité peptidique et de l’encrassement membranaire grâce à l’application du PEF et tout en maintenant la conductivité électrique des solutions.
Bioactive peptides were efficiently separated by using electrodialysis with filtration membrane (EDFM) from snow crab byproduct hydrolysate. Meanwhile, optimization of parameters is indispensable for scaling-up. The peptide migration rate and selectivity as well as evolution of electrodialytic parameters were studied with different parameters such as EDFM cell configuration, KCl concentration and type of electric field. The EDFM stack with two feed and one recovery compartments (configuration 2) has relatively stable electric field strengths (local) than the configuration with one feed and two recovery compartments (configuration 1). Peptides containing anionic amino acids: glutamic and aspartic acid as well as glycine and cationic amino acids: arginine and lysine were fractionated using configuration 1 and 2, respectively. Maintenance of solution conductivity upheld the local electric field and peptide migration throughout the treatment resulting in a higher peptide migration rate of 13.76±3.64 g/m2.h never observed so far. The selectivity of cationic peptides containing arginine and lysine increased significantly with increase in KCl concentration from 1 to 5 g/L. An increase in ionic strength amplified the surface charge density of filtration membrane subsequently increasing effective pore size and reducing hydration layer. However, both anion- and cation-exchange membranes were fouled by peptides and amino acids and were deteriorated during EDFM treatment. To address these problems, the effect of applying pulsed electric field (PEF) and polarity reversal (PR) was studied. The peptide migration rate was unaffected among PEF, PR and DC modes except with PR at 40 V. The selectivity of cationic peptides was maximum with PEF at 20 V. Fouling and water dissociation were significantly reduced and physicochemical properties of IEMs were better-protected with PEF and PR than DC. Moreover, the least amount of energy was consumed with PEF mode. Therefore, the parameters affecting EDFM process were optimized in terms of energy efficiency, selectivity and lower deterioration of membranes by applying PEF regime with configuration 2 and maintaining the constant electrical conductivity of solutions.
Bioactive peptides were efficiently separated by using electrodialysis with filtration membrane (EDFM) from snow crab byproduct hydrolysate. Meanwhile, optimization of parameters is indispensable for scaling-up. The peptide migration rate and selectivity as well as evolution of electrodialytic parameters were studied with different parameters such as EDFM cell configuration, KCl concentration and type of electric field. The EDFM stack with two feed and one recovery compartments (configuration 2) has relatively stable electric field strengths (local) than the configuration with one feed and two recovery compartments (configuration 1). Peptides containing anionic amino acids: glutamic and aspartic acid as well as glycine and cationic amino acids: arginine and lysine were fractionated using configuration 1 and 2, respectively. Maintenance of solution conductivity upheld the local electric field and peptide migration throughout the treatment resulting in a higher peptide migration rate of 13.76±3.64 g/m2.h never observed so far. The selectivity of cationic peptides containing arginine and lysine increased significantly with increase in KCl concentration from 1 to 5 g/L. An increase in ionic strength amplified the surface charge density of filtration membrane subsequently increasing effective pore size and reducing hydration layer. However, both anion- and cation-exchange membranes were fouled by peptides and amino acids and were deteriorated during EDFM treatment. To address these problems, the effect of applying pulsed electric field (PEF) and polarity reversal (PR) was studied. The peptide migration rate was unaffected among PEF, PR and DC modes except with PR at 40 V. The selectivity of cationic peptides was maximum with PEF at 20 V. Fouling and water dissociation were significantly reduced and physicochemical properties of IEMs were better-protected with PEF and PR than DC. Moreover, the least amount of energy was consumed with PEF mode. Therefore, the parameters affecting EDFM process were optimized in terms of energy efficiency, selectivity and lower deterioration of membranes by applying PEF regime with configuration 2 and maintaining the constant electrical conductivity of solutions.
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Demers, Mathieu Véronique. "Activité antimicrobienne d'un extrait peptidique issus d'un hydrolysat trypsique de protéines de lactosérum." Thesis, Université Laval, 2011. http://www.theses.ulaval.ca/2011/28671/28671.pdf.
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Kapel, Romain. "Amélioration d'un procédé de production d'un concentré de protéines blanches de luzerne semi-industriel et valorisation du concentré protéique dans le domaine des adhésifs et des nutraceutiques." Lille 1, 2005. https://pepite-depot.univ-lille.fr/RESTREINT/Th_Num/2005/50376-2005-186.pdf.
Abstract:
La société VIRIDIS développe un procédé industriel d'extraction de protéines blanches de luzerne. Les objectifs de cette thèse étaient l'amélioration du rendement d'extraction en protéine du procédé, l'augmentation de la solubilité du concentré protéique et sa valorisation dans le domaine des adhésifs et des nutraceutiques. L'étude de l'effet du traitement thermique sur les protéines blanches a permis d'améliorer le rendement d'extraction en protéines de façon satisfaisante. En revanche, l'amélioration de la solubilité du CPBL s'est révélée inapplicable industriellement Une formulation à base d'hydrolysat pepsique de CPBL et d'urée présente une force d'adhésion équivalente à un adhésif protéique du commerce. Enfin, un hydrolysat de CPBL obtenu en REM présente une activité antihypertensive in vivo. Cette activité biologique peut être due à la présence du peptide inhibiteur de l'ECA, VW, ou à la présence de peptides à activité opioïdes, mis en évidences dans l'hydrolysat.
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Linder, Michel. "Optimisation d'un procédé de valorisation de coproduits d'abattage par hydrolyse enzymatique : propriétés fonctionnelles et nutritionnelles des hydrolysats." Vandoeuvre-les-Nancy, INPL, 1996. http://docnum.univ-lorraine.fr/public/INPL_T_1996_LINDER_M.pdf.
Abstract:
La valorisation de coproduits d'abattage représente un enjeu économique, dans les entreprises de transformation de la viande. Le premier objectif de ce travail porte sur le paramétrage et l'optimisation d'un procédé d'obtention de fractions protéiques par hydrolyse enzymatique ménagée. L’utilisation de la méthodologie de la recherche expérimentale permet de quantifier l'influence et les interactions des facteurs (pH, température, concentration en enzymes, concentration en protéines, durée d'hydrolyse), en réacteur discontinu. La modélisation par méthode empirique du procédé d'hydrolyse, utilise une matrice de Doehlert autorisant sept niveaux différents pour les variables les plus sensibles. Le modèle quadratique obtenu conduit à l'optimisation des facteurs par la méthode des surfaces de réponse. Cette première partie du travail, destinée à limiter et quantifier les facteurs influents au stade industriel, montre que la durée d'hydrolyse et la concentration en enzyme sont les paramètres importants à maitriser. L’étude des propriétés fonctionnelles et nutritionnelles représente la deuxième partie de ce travail. Les propriétés d'hydratation et émulsifiantes d'hydrolysats protéiques issus de coproduits de veau ont été étudiées en fonction du degré d'hydrolyse et de la concentration protéique. Les résultats montrent qu'une hydrolyse enzymatique ménagée améliore les qualités fonctionnelles des hydrolysats. Les expérimentations réalisées industriellement en réacteur discontinu de 400 litres permettent, en fonction de la nature et de la spécificité de l'enzyme, d'obtenir des hydrolysats aptes à la gélification, propriété particulièrement recherchée. Un traitement thermique adapté, nécessaire à l'inactivation des protéases et à la solubilisation des tissus collagéniques, augmente la qualité microbiologique, tout en préservant les propriétés nutritionnelles et fonctionnelles des produits. La valeur nutritionnelle des hydrolysats industriels, destines à l'alimentation humaine, a été mesurée in vivo et in vitro
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Koumfieg, Noudou Victoire Yolande. "Impact de la concentration en peptides d'un hydrolysat de crabe des neiges sur leur séparation et leur sélectivité en cours d'electrodyalyse avec membrane d'ultrafiltration (EDUF)." Master's thesis, Université Laval, 2017. http://hdl.handle.net/20.500.11794/27613.
Abstract:
Les produits fonctionnels et nutraceutiques ont pris une grande importance en raison de leur valeur ajoutée. Leur production requiert l’isolation et la concentration des composés tels que les acides aminés et les peptides bioactifs des hydrolysats de protéines. A cette fin, l’EDUF (Électrodialyse combinée à l’ultrafiltration), une nouvelle technique de séparation, a été proposée. Les paramètres importants pour optimiser le procédé tels que la force du champ électrique, le type de membrane, le seuil de coupure, le pH, la configuration du module, le débit de la solution et la surface effective de la membrane ont déjà été étudiés. Cependant, le paramètre concentration de l’hydrolysat n’a encore jamais été étudié. Le projet consistait à évaluer l’impact de l’augmentation de la concentration d’un hydrolysat de crabe des neiges sur la sélectivité et le taux de séparation des peptides anioniques et cationiques, ainsi que sur leur activité antimicrobienne. Pour évaluer l’impact de la concentration de l’hydrolysat, quatre valeurs de concentration en protéines (0.5%, 1%, 2% et 4%) ont été étudiées et les autres paramètres (pH, conductivité, différence de potentiel) du système ont été constants. Les résultats ont montré que l’augmentation de la concentration a un effet sur le taux de séparation des peptides et que le plus haut taux de concentration peptidique a été observé à 4% pour le compartiment anionique à 291.9 µg/mL et pour le compartiment cationique à 431.87 µg/mL. Par contre, l’augmentation de la concentration n’a pas d’effet sur la sélectivité qui reste sans changement. Le taux de migration a augmenté avec l’augmentation de la concentration alors qu’en parallèle l’énergie relative consommée baissait. Le plus haut taux de migration a ainsi été observé à 4% (16.2 g/m2.h et 7.8 g/m2.h respectivement, pour les compartiments cationique et anionique) avec une énergie relative consommée de 3.53 Wh/g. Les résultats ont aussi montré que l’augmentation de la concentration en peptides n’a eu aucun impact sur le colmatage et l’intégrité des membranes. Les différentes fractions (anionique et cationique) obtenues et l’hydrolysat initial testés et n’ont pas montré d’activité antimicrobienne contre Micrococcus luteus.The importance of functional and nutraceutical products has grown tremendously due to their added value. Their production requires the isolation and concentration of compounds, such as amino acids and bioactive peptides from protein hydrolysates. Therefore, a new separation technique EDUF (electrodialysis with ultrafiltration) was used. To optimize the process, important parameters such as electric field strength, membrane material and molecular weight cut-off, pH, ionic strength and flow rate of the solutions as well as cell configuration have already been studied, except for the initial peptide concentration in the feed solution. The objective of this study was to determine the impact of peptides concentration of snow crab by-product hydrolysate on selectivity and separation rate of anionic and cationic peptides, and on their antimicrobial activity. To assess the impact of peptides concentration, four values of protein concentrations (0.5%; 1%; 2% and 4%) were studied with other parameters (pH, conductivity, potential difference) of the system kept constant. The results showed that increasing the peptides concentration has an effect on separation rate of the peptides. The highest rate was observed at 4% with 291.9 mg/mL and 431.87 mg/mL peptide concentration, respectively for the anionic and cationic compartment. Other results also showed that increasing the initial concentration has no effect on selectivity. The migration rate increased linearly with increasing feed solution concentration while the relative energy consumption decreased with increasing feed solution concentration. The highest migration rates of 16.2 g/m2.h and 7.8 g/m2.h for the cationic and anionic compartments respectively were observed at 4%, with relative energy consumption of 3.53 Wh/g. However, increasing the concentration had no effect on the fouling and membrane integrity. In terms of antimicrobial activity, different fractions (anionic and cationic) and the initial hydrolysate were tested and did not showed antimicrobial activity on Micrococcus luteus.
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Perreault, Véronique. "Prétraitement d'un isolat de protéines de lin par haute pression hydrostatique : impacts sur la structure protéique, l'hydrolyse enzymatique et les capacités antioxydantes des hydrolysats finaux." Master's thesis, Université Laval, 2016. http://hdl.handle.net/20.500.11794/26804.
Abstract:
Les graines de lin sont des oléagineux largement cultivés au Canada. Cependant, les résidus générés suite au processus d’extraction de l’huile contiennent une importante quantité de protéines et peuvent être valorisées dans l’alimentation humaine en raison, principalement, de certaines fractions peptidiques possédant des propriétés bioactives. Dans le cadre de ce travail, l’influence des hautes pressions hydrostatiques (HPH) sur un isolat de protéines de lin a été étudiée concernant les modifications de la structure protéique, l’hydrolyse enzymatique ainsi que l’activité antioxydante des hydrolysats. Ainsi, des solutions protéiques de lin (1% m/v) ont été soumises à un traitement de HPH à 600 MPa pendant 5 et 20 minutes, à 20°C et comparés à des échantillons non-pressurisés. Deux traitements subséquents d’hydrolyse ont été effectués suite au traitement ou non de pressurisation : une première hydrolyse trypsique suivie d’une deuxième par la pronase. Dans un premier temps, la caractérisation de l’isolat protéique de lin pressurisé et non pressurisé a été réalisée par spectrofluorimétrie et par une analyse de la taille des particules afin d’étudier l’effet de la pressurisation sur les HPH la matrice protéique végétale. Par la suite, les hydrolysats protéiques ont été caractérisés par HPLC-MS et leur capacité antioxydante a été déterminée par ORAC. Les résultats ont démontré que le niveau de pressurisation et la durée du traitement ont un impact sur la structure protéique en induisant la dissociation des protéines, et la formation d’agrégats. Ceux-ci seraient occasionnés par la décompression ou créés durant l’entreposage des isolats. Suite à l’hydrolyse enzymatique des solutions protéiques pressurisées ou non par la trypsine seule et par la trypsine-pronase, les analyses chromatographiques ont révélé que la concentration de certains peptides a été modifiée lorsque la trypsine seule était utilisée après un traitement à HPH. Enfin, les HPH ont amélioré la capacité antioxydante des hydrolysats obtenus lors de l’hydrolyse trypsine-pronase comparativement au contrôle non-pressurisé.Flaxseed is an oilseed widely cultivated in Canada. However, residues generated after oil extraction contains large amount of proteins and then can be much-valued in human diet due to its bioactive peptide fractions. The influence of high hydrostatic pressure (HHP) on flaxseed protein isolate was studied especially in terms of protein structures, enzymatic hydrolysis and final hydrolysate antioxidant activity. Flaxseed protein solutions (1% w/v) were subjected first to 600 MPa HHP treatments during 5 and 20 minutes at 20°C and were compared to non-pressurized samples. Two subsequent hydrolysis treatments were performed on pressure or non-pressure treated samples: tryptic hydrolysis was carried out and another hydrolysis was performed using pronase on tryptic hydrolysates. Firstly, the characterization of treated and untreated flaxseed protein isolates was done by spectrofluorometric and particle size analyses. Thereafter, flaxseed hydrolysates were analyzed by HPLC-MS and antioxidant capacity by ORAC. These results demonstrated that the pressurizing level and duration had an impact on proteins structure, inducing the dissociation of protein leading subsequently to aggregates. These aggregates were formed by decompression or during further storage. After enzymatic hydrolysis of pressurized or non-pressurized samples by trypsin and trypsin-pronase, chromatographic analyses showed that HHP treatments modified the concentration of certain peptides of the tryptic hydrolysates only. Finally, HHP increases antioxidant capacity (ORAC) of final trysin-pronase hydrolysates when compared to a control.
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Roblet, Cyril Roland. "Fractionnement d'un hydrolysat de protéines de soya : Comparaison des technologies baro-membranaire (UF) et électro-membranaire (ÉDUF) pour la collecte de fractions bioactives." Thesis, Université Laval, 2012. http://www.theses.ulaval.ca/2012/29016/29016.pdf.
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Samra, Assem. "Recherche de protéines reliées a la symbiose endomycorhizienne chez des pois (Pisum sativum L. ) compatibles (myc#+) et résistant (myc#-) et cinétique d'induction des endomycorhizines." Dijon, 1996. http://www.theses.fr/1996DIJOS064.
Abstract:
Les recherches présentées dans ce mémoire s'inscrivent dans le cadre des études visant à mettre en évidence les produits des gènes reliés à la symbiose endomycorhizienne de Pisum Sativum l. L'utilisation de deux génotypes de compatibles a l'endomycorhization cv. Frisson (myc#+,nod#+) et P56 (myc#+,nod#-) et d'un génotype résistant (myc#-,nod#-) nous a permis de démontrer que la colonisation des racines des deux génotypes compatibles, par le endomycorhizogène Glomus Mosseae, s'accompagne de profondes modifications des profils polypeptidiques caractérisées par la sur-expression et la répression de certains polypeptides et par l'induction de nouveaux. Ces nouveaux polypeptides représentent par définition les endomycorhizines, c'est-à-dire les polypeptides qui apparaissent en réponse a l'inoculation des génotypes compatibles par le champignon endomycorhizogène. En revanche, l'inoculation des racines du génotype resistant (myc#-,nod#-) par G. Mosseae se traduit principalement par une importante répression de l'expression de nombreux polypeptides. Une étape majeure de notre travail a été d'étudier la cinétique d'évolution des modifications polypeptidiques dès les stades précoces de l'association symbiotique. Les premières modifications des polypeptides sont décelables chez les trois génotypes après 5 jours d'inoculation. Des polypeptides reliés à la symbiose, et dont l'expression augmente au cours de la colonisation, ont été caracterisés, chez les deux génotypes par leur masse moléculaire et leur point isoélectrique. Les polypeptides additionnels identifiés chez le génotype résistant pourraient être reliés à l'expression de certaines protéines de défense. Les études de la synthèse des polypeptides in vivo et in vitro confirment les modifications polypeptidiques (stimulation, répression et induction) consécutives a l'inoculation par G. Mosseae. La synthèse in vivo nous a de plus permis de montrer que les endomycorhizines sont vraisemblablement synthétisées lentement et s'accumulent au cours de la symbiose. Des inducteurs fongiques, susceptibles d'éliciter des modifications des profils polypeptidiques des racines, à partir d'extraits protéiques solubles de spores germées n'ont pas été mis en évidence. D'importantes modifications polypeptidiques sont associées a la germination des spores de G. Mosseae, mais nous n'avons pas détecté de différences dans les profils polypeptidiques de spores germées en présence d'eau ou d'exsudats de racines des génotypes myc#+ et myc#-. En revanche, nos travaux sur l'analyse des profils polypeptidiques de spores de champignons endomycorhizogènes, appartenant à différents genres, ont montré l'existence d'une variabilité interspécifique
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Henaux, Loïc. "Fractionnement d’un hydrolysat de protéines de saumon par électrodialyse avec empilement de membranes d’ultrafiltration afin de concentrer, isoler et identifier des peptides glucorégulateurs." Doctoral thesis, Université Laval, 2019. http://hdl.handle.net/20.500.11794/66671.
Abstract:
Le diabète de type 2 (DT2) est un trouble multifactoriel complexe de l’homéostasie du glucose. Cette maladie, bien qu’elle possède une composante génétique, est principalement induite par des causes socio-environnementales comme de mauvaises habitudes alimentaires. En dépit des mesures hygiéno-diététiques et des traitements médicaux utilisés pour prévenir et traiter la maladie, le DT2 ne cesse de progresser. L’identification et la production de peptides bioactifs à partir de sources naturelles offrent une alternative intéressante aux médicaments de synthèse, dont les préoccupations concernant les effets secondaires ne cessent d’augmenter. Ainsi, en raison de leur abondance et leur richesse en molécule bioactive, les coproduits de la transformation du poisson offrent une source presque inépuisable de peptides bioactifs. En effet, lors d’études précédentes, il a été démontré que des protéines de morue et de saumon permettaient d’améliorer la santé cardio-métabolique in vivo, et d’améliorer la captation du glucose musculaire, de diminuer la production du glucose hépatique et l’inflammation. De plus, avec un nombre de plus en plus important d’individus à nourrir, l’industrie de la transformation doit augmenter sa production, et les déchets ne cessent de s’accumuler. Néanmoins, afin d’exercer leur effet bioactif, il est nécessaire de libérer ces peptides bioactifs des structures protéiques au sein desquelles ils sont imbriqués et sous forme inactive générant ainsi des hydrolysats complexes. Par la suite, une ou plusieurs étapes de séparation sont utilisées afin de concentrer ces peptides dans des fractions plus actives, par exemple en fractionnant ces hydrolysats complexes par électrodialyse avec membranes d’ultrafiltration. En effet, Il a été démontré l’efficacité de l’électrodialyse avec membranes d’ultrafiltration pour la génération de fractions améliorant, in vitro, la captation du glucose à partir d’hydrolysats de protéines de soya et de saumon. Ainsi, l’objectif principal de cette thèse était de concentrer et d’identifier des peptides bioactifs par le fractionnement d’un hydrolysat de protéines issu d’un coproduit de saumon iv par l’électrodialyse avec membranes d’ultrafiltration, et d’étudier l’impact de ces fractions et peptides sur le DT2. Lors de la première étude, il a été démontré qu’un empilement judicieux de membranes permettait de fractionner les peptides issus d’un hydrolysat de coproduit de saumon, en générant des fractions possédant des peptides avec des propriétés physico-chimiques (charge et masse) différentes. De plus, cet empilement de trois membranes d’ultrafiltration de seuils de coupure différents a permis de moduler la réponse in vitro de la captation du glucose. En effet, des peptides cationiques de plus haut poids moléculaire ont amélioré la captation du glucose dans une étude in vitro, alors que les peptides cationiques de plus faible poids moléculaire ont démontré un effet inhibiteur de la bioactivité. Finalement, l’analyse par spectrométrie de masse des fractions a permis de caractériser (temps de rétention et charge) 17 peptides cationiques et 21 peptides anioniques, potentiellement responsables de l’effet bioactif des fractions. Lors de la deuxième étude, le fractionnement par EDUF des fractions finales récupérées lors de la précédente séparation et l’étude in vitro de la bioactivité de ces fractions (captation du glucose, production du glucose hépatique et inflammation) ont permis d’identifier deux fractions très prometteuses, démontrant un effet sur ces trois bioactivités. De plus, l’analyse par spectrométrie de masse en tandem de ces fractions a permis d’identifier, à l’aide de base de données, la séquence peptidique de 24 peptides anioniques, potentiellement responsables de ces effets bioactifs. Finalement, lors de la troisième étude, basées sur l’analyse des spectres obtenus par spectrométrie de masse en tandem, 13 peptides ont été sélectionnés et synthétisés, puis testés individuellement pour leurs capacités à augmenter l’absorption du glucose au niveau de cellules musculaires, à diminuer la production de glucose hépatique et finalement à diminuer la réponse inflammatoire de macrophages. Ainsi, pour la première fois, quatre nouveaux peptides ont été identifiés à partir de coproduits de saumon, et leurs propriétés glucorégulatrices in vitro ont été démontrées.Type 2 diabetes (T2DM) is a complex multifactorial disorder of glucose homeostasis. This disease has a genetic basis but is mainly caused by socio-environmental behaviours, such as overeating and a lack of physical activity. Despite dietary measures and medical treatments used to prevent and treat the disease, T2D continues to progress. The identification and production of bioactive peptides from natural sources offer an interesting alternative to synthetic drugs, whose concerns about side effects are constantly increasing. Thus, because of their abundance and richness in bioactive molecules, fish processing co-products offer an almost inexhaustible source of bioactive peptides. Indeed, in previous studies, cod and salmon proteins have been shown to improve cardio-metabolic health in in vivo studies, and to improve muscle glucose uptake, decrease hepatic glucose production, and inflammation. In addition, with a growing number of people to feed, the processing industry is at its height, and waste continues to accumulate. Nevertheless, in order to exert their bioactive effect, it is necessary to release these bioactive peptides from native proteins. Subsequently, one or more separation, using for example electrodialysis with ultrafiltration membranes, are needed to concentrate these peptides and generate bioactive fractions. Indeed, it was previously demonstrated the effectiveness of electrodialysis with ultrafiltration membranes to generate bioactive fractions, from complex matrices, able to improve the glucose uptake in vitro, from soy and salmon protein hydrolysates. In this context, the main objective of this thesis was to concentrate and identify bioactive peptides, by fractionating a protein hydrolysate from a salmon co-product, by electrodialysis with ultrafiltration membranes, and to study the impact of these fractions and peptides on T2D. In the first study, results demonstrated that a triple size selective separation by EDUF allowed to generate peptide fractions with different physicochemical properties (charge and mass). Moreover, it was demonstrated that such a separation allowed to modulate the in vitro response of the fractions for glucose metabolism. Indeed, from a single EDUF separation, cationic peptides with higher molecular weights were concentrated and demonstrated to enhance their glucose uptake capacity. Whereas, cationic peptides with lower molecular weights have decreased the glucose uptake capacity. In addition, analyses by mass spectrometry of the vi fractions allowed to characterize (retention time and charge) 17 cationic peptides and 21 anionic peptides, potentially responsible for the bioactive effect of the fractions. In a second study, a second EDUF fractionation, using as feed solution the final fractions recovered during the previous separation was performed. The selectivity of the process was confirmed by liquid chromatography-mass spectrometry analyses. Moreover, in vitro study of the bioactivities (glucose uptake, hepatic glucose production and inflammation) effect of these fractions, led to the identification of two very promising fractions, demonstrating a simultaneous effect on all three bioactivities tested. In addition, the tandem mass spectrometry analysis of these fractions allowed the sequence identification of 24 anionic peptides, potentially responsible for these bioactive effects. Finally, in a third study, based on the analysis of the spectra obtained by tandem mass spectrometry, 13 peptides were selected and synthesized, then individually tested for their ability to increase glucose uptake in muscle cells, to reduce glucose production by hepatic cells, and to decrease the inflammatory response of macrophages. Thus, for the first time, four new peptides identified from salmon by-products, demonstrated in vitro glucoregulatory properties.
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Kobbi, Sabrine. "Purification de la RuBisCO à partir de la Luzerne, hydrolyse enzymatique, identification, structure-fonction des peptides bioactifs et leur valorisation dans des produits alimentaires." Thesis, Lille 1, 2017. http://www.theses.fr/2017LIL10201.
Abstract:
La luzerne est la plante la plus cultivée dans le monde et est une excellente source de protéines. Cependant, la RuBisCO a montré le plus d'intérêt. Cette protéine a été étiquetée comme la protéine la plus abondante sur terre, elle constitue environ 65% (p/p) des protéines solubles de la luzerne. Dans ce travail une nouvelle méthode a été mise en place pour la purification de la RuBisCO à partir de la poudre de luzerne 10% (p/v) en utilisant deux solvants différents et l’effet du pH. Premièrement, des méthodes d’analyse qualitative et quantitative ont été utilisées pour confirmer l’efficacité de la méthode de purification qui pourrait remplacer certains procédés industriels classiques. Puis, une hydrolyse pepsique a été réalisée sur la RuBisCO purifiée qui aboutit à une forte population peptidique bioactive. Les peptides finaux de 24h d’hydrolyse ont montré une meilleure activité antibactérienne ou antioxydante par rapport aux autres hydrolysats. 9 nouveaux peptides antibactériens ont été identifiés et caractérisés par SM et qui ont un CMI entre 2-6mM contre quatre espèces de bactéries: B subtilis, E coli, L innocua et M luteus. En plus, des fractions peptidiques antioxydantes ont également été identifiées dans ce travail. Et leur activité antioxydante a été évaluée par différents tests in vitro et in vivo sur l’huile de Colza. Enfin, l’addition du peptide RDRFL issu de l’hydrolyse pepsique de la RuBisCO a montré un effet positif sur la prolongation de la durée de conservation de la viande hachée et de la purée de tomateAlfalfa is an excellent source of protein. However, RuBisCO proteins showed most interest. Indeed, this protein has been labelled the most abundant on earth; it constitutes about 65% (w/w) of soluble leaf protein of Alfalfa. In this work, a new method was introduced for the purification of RuBisCO from alfalfa powder 10% (w /v), using two different solvents and pH effect. In a first step, the performance of the proposed RuBisCO recovery method was evaluated through qualitative and quantitative analysis and the results obtained showed that this new method could replace some conventional industrial processes. In a second step, enzymatic hydrolysis was carried out on the purified RuBisCO, which resulted in a large bioactive peptide population. The final peptides after 24h of hydrolysis showed better antibacterial or antioxidant activity compared to the other peptide hydrolysates. Nine new antibacterial peptides have been identified and characterized by MS and have a MIC of 2-6 mM against four species of bacteria: B subtilis, E coli, L innocua and M luteus. In addition, antioxidants peptide fractions were identified in this work, their antioxidant activity was evaluated by various in vitro and in vivo tests on oil of Colza. Finally, the addition of peptide RDRFL derived from the peptic hydrolysis of RuBisCO has a positive effect on the prolongation of the shelf life of minced meat and of tomato puree
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Leke, Lokombé. "Valorisation d'un hydrolysat de protéine obtenu à partir de l'hémoglobine bovine : Etudes expérimentales, immunochimiques et essais cliniques." Compiègne, 1994. http://www.theses.fr/1994COMP775S.
Abstract:
L'objectif de ce travail est d'évaluer la valeur biologique et l'efficacité nutritionnelle de l'hydrolysat pepsique d'hémoglobine bovine produit à l'échelle pilote. Les études biochimiques révèlent un déficit en isoleucine et cystéine nécessitant un enrichissement préalable avant tout usage à visé&e nutritionnelle, un rapport en acide aminés essentiels à 49,7 %) et un taux d'acides aminés libres inférieur à 1%. La spectrométrie de masse situe le poids moléculaire des peptides entre 600 et 1650 daltons. La détermination de l'immunogénicité et de l'antigénicité de l'hémoglobine bovine native et de son hydrolysat a été réalisé par la méthode ELISA et le test d'inhibition ELISA chez la souris. Cette capacité est retrouvée uniquement pour l'hémoglobine bovine native. L'hydrolyse enzymatique semble diminuer ou détruire les propriétés immunogènes et antigéniques de l'hémoglobine. Les Coefficients d'Utilisation Digestives (C. U. D. ) et d'efficacité protéique étudiés chez le rat montrent des valeurs similaires à celles observées avec la caséine. Chez le prématuré, on obtient une rétention azotée et une croissance identiques lorsque les enfants sont alimentés au lait humain enrichi avec l'hydrolysat d'hémoglobine ou avec un lait conçu spécialement pour les prématurésThe aim of the present study was to evaluate the biological value and the nutritive efficiency of a peptic haemoglobin hydrolyse produced at a pilot –plant scale. The analysis revealed a deficiency in isoleucine and cysteine demanding an enrichment before utilisation, a ratio of essential amino acids : total nitrogen of 3,16 (amount of essential amino acids mg/g protein 49,7 %) and less than 1 % of free amino acids. Mass Spectrometry estimated the mass molecular of peptides between 600 – 1650 dalton. The evaluation of immunogenicity and antigenicity of native haemoglobin and its hydrolysate was done by ELISA and inhibition ELISA in mice : enzymatic hydrolysis seems to decrease or destroy the immogenic and antigenic activities of haemoglobin. The true digestibility and the protein efficiency studied in rats showed similar values as those observed with casein hydrolysate. Feeding of the premature child with breast milk enriched by haemoglobin hydrolysate allow to maintain an adequate growth and a better nitrogen tetention
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Raveschot, Cyril. "Recherche d’ingrédients actifs, issus de Lactobacilles, utilisables pour la prévention de l’ostéoporose." Thesis, Lille, 2018. http://www.theses.fr/2018LIL1R064.
Abstract:
Que ce soit par la production de biomolécules actives ou encore via une action probiotique, les Lactobacilles peuvent être utilisés pour le traitement de plusieurs affections. Dans ce contexte, l’objectif de cette thèse est la recherche d’applications santé, applicables à la prévention de l’ostéoporose, à partir de Lactobacilles. Dans ce but, deux approches ont été définies, la première consiste en l’utilisation des souches en tant que probiotiques, la seconde approche concerne la production de peptides bioactifs issus de l’hydrolyse des protéines laitières par ces Lactobacilles. Après criblage et sélection de souches potentiellement probiotiques, la capacité des souches à moduler l’absorption du calcium au niveau intestinal a été étudiée. Pour l’approche peptides, différents criblages ont également été réalisés comprenant une stratégie de criblage originale basée sur l’analyse multiparamétrique de la protéolyse en lait. Ces travaux ont permis de sélectionner 3 souches pour la suite du projet, et différents hydrolysats peptidiques ont été produits par fermentation du lait en bioréacteur. Les hydrolysats produits ont été testés pour différentes activités en lien avec la prévention de l’ostéoporose comme l’inhibition de l’enzyme de conversion de l’angiotensine ou la modulation de l’absorption intestinale du calcium. Différentes activités ont ainsi été mises en évidence pour les différents hydrolysats. De ces résultats, un procédé en continu utilisant un bioréacteur à membrane, a été développé afin de produire un hydrolysat peptidique d’intérêt. Ces travaux ont permis de mettre en évidence différentes applications santé à partir d’une collection de souches de LactobacillesLactobacilli are bacteria of major interest for health applications. These species are able to produce different active biomolecules by fermentation or exert a probiotic action. Thus, Lactobacilli represent a source of different ingredients which could be used for various health purposes. The objective of the present research is to study the potential of different lactobacilli to be use as ingredients dedicated to osteoporosis prevention. This work is based on a collection of 170 Lactobacillus strains isolated from dairy products in Mongolia. Two different strategies were undertaken: the use of lactobacilli as probiotics or the production of bioactive peptides by fermentation of milk proteins. A screening based on some probiotic characteristics allowed to select Lactobacillus strains which were studied for their capacity to modulate the intestinal calcium absorption. In the same way, screenings were used to select strains with important proteolytic abilities. Particularly, an original screening strategy, based on a multiparametric analysis of proteolysis occurring in milk was developed in this study. Milk protein hydrolysates were produced using the selected strains by batch fermentation of milk in bioreactor. The resulting products were then studied for different biological activity linked to bone health like angiotensin-converting enzyme inhibition or modulation of intestinal calcium absorption. By these results, an integrated continuous process, using a membrane bioreactor, was developed to produce an active ingredient by fermentation. This work highlights the potential health applications of some lactobacilli
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Leconte, Danielle. "Contribution à l'étude de la valorisation du cruor des abattoirs : application de l'ultrafiltration à la préparation d'hydrolysats peptidiques à partir de l'hémoglobine bovine." Compiègne, 1989. http://www.theses.fr/1989COMPD159.
Abstract:
L'hydrolyse enzymatique d'un hémolysat de cruor, coproduit d’abattage actuellement mal valorisé est réalisée dons un réacteur à ultrafiltration pour une production en continu et à l’échelle pilote d'hydrolysats peptidiques à haute valeur ajoutée. L'état actuel de la valorisation du sang total, du plasma et du cruor, est développé dans la partie bibliographique de cette thèse. Le procédé d'obtention des hydrolisats d'hémoglobine, qui a été mis au point et optimisé au niveau pilote, met en œuvre des techniques de purification performantes, extrapolables au stade industriel, telles que : - La réaction ultrafiltration. 390 litres d'hémolysat sont hydrolysés en continu par la pepsine, à pH=2 et à 40°C dans un réacteur de 90 litres couplé à un appareil d’ultrafiltration. Des membranes minérales de seuils de coupure différents (10 000 et 20 000 daltons) ont été utilisées pour étudier l’influence du film ultrafiltrant sur les hydrolysats peptidiques produits. Cette technique, appliquée pendant plus de 24 heures à l’échelle pilote, permet d'obtenir des hydrolysats peptidiques d'hémoglobine peu colorés avec un rendement peptidique compris entre 70 et 80 %. - La décoloration des hydrolysats, dans une cuve agitée et thermostatée à 40°C, par adsorption des peptides héminiques sur la magnésie lourde. Le rendement de cette étape, après optimisation par une étude cinétique au laboratoire est de 90 %. - Le dessalement des hydrolysats peptidiques par électrodyalyse avec un rendement peptidique de 90 %. Les hydrolysats sont conditionnés sous forme de poudre après avoir concentrés sur évaporateurs à flot tombant ou à film mince agité et séchés par atomisation. Le rendement global du procédé est de 50 % (7-6 kg de poudre peptidique). La caractérisation des hydrolysats peptidiques obtenus prouve les parfaites définitions et reproductibilité de leur composition en acides aminés permettant leur expérimentation dans des domaines d'application exigeants tels que la nutrition entérale des prématurés, la thérapeutique vétérinaire et les milieux de culture.
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Ligné, Thierry. "Production par voie enzymatique et caractérisation d'oligopeptides : application à l'hydrolyse de protéines végétales pour l'obtention d'un produit d'intérêt nutritionnel pour l'alimentation animale." Compiègne, 1998. http://www.theses.fr/1998COMP1119.
Abstract:
Nombre de publications décrivent que les oligopeptides (di- et tripeptides) sont absorbés par l'appareil gastro-intestinal des animaux (monogastriques et ruminants) plus rapidement et plus uniformément que les acides aminés libres. Un aliment comprenant une quantité substantielle de ces oligopeptides devrait en conséquence avoir une valeur nutritionnelle accrue. Notre travail a consisté, dans cette optique, à obtenir des oligopeptides au stade du laboratoire. Les oligopeptides, en tant que molécules azotées de faible masse molaire, font partie de l'azote non protéique (NPN). Dans un premier temps, nous avons donc cherché à quantifier NPN dans diverses farines végétales couramment utilisées en alimentation animale (farine de soja délipidée, pois, tourteau de colza, farines de germes de blé et de maïs). Pour ce faire, nous avons mis en œuvre une méthode classique à l'acide trichloracétique (TCA). Nous avons par ailleurs développé une méthode alternative, basée sur la gel filtration, qui évite certaines limitations propres à la méthode au TCA et qui a l'avantage spécifique d'être quantitative, mais également qualitative et préparative. Les deux méthodes sont concordantes. Elles montrent que les composés NPN, et a fortiori les oligopeptides, ne représentent qu'une faible part de l'azote total (environ 2%). Les peptides ont donc été produits par protéolyse. Grâce à un modèle cinétique que nous avons développé, nous avons pu rapidement sélectionner un substrat (pois) ainsi que deux protéases Finnfeeds. La réaction protéolytique, après optimisation, utilise les deux enzymes séquentiellement. Le rôle de chaque enzyme (endo- puis exopeptidase) a été caractérisé. De nombreux produits de la réaction ont été identifiés par spectrométrie de masse (ES-MS) et chromatographie sur couche mince. Les résultats cinétiques s'accordent avec les résultats d'ES-MS pour conclure que des dipeptides sont en moyenne obtenus au niveau du laboratoire.
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Bodin, Alice. "Stratégie de modélisation et d’optimisation des performances de l’ultrafiltration pour le fractionnement d’hydrolysats protéiques." Thesis, Université de Lorraine, 2016. http://www.theses.fr/2016LORR0298/document.
Abstract:
Les hydrolysats protéiques ont une haute valeur ajoutée pour des secteurs industriels variés, de par leurs propriétés nutritives, fonctionnelles et / ou nutraceutiques. Pour améliorer les propriétés des hydrolysats, l’ultrafiltration est utilisée. Cependant, le manque d’outils de modélisation lié à la complexité des mélanges est un verrou pour une mise en œuvre rationnelle du procédé. Ces travaux ont permis de valider une stratégie de prédiction basée sur des caractéristiques classiques des hydrolysats et un étalonnage expérimental de la membrane d’ultrafiltration. Cette méthode permet de prédire les rendements et enrichissements en fraction(s) ou peptide(s) cible(s), ainsi que la productivité du procédé. Le modèle global de prédiction de l’ultrafiltration obtenu est alors utilisé afin d’optimiser la mise en œuvre de ce procédé. La démarche d’optimisation consiste à maximiser l’enrichissement de fractions ou de peptides cibles en minimisant la consommation d’eau et la durée du procédéProtein hydrolysates are high added value mixtures for various industrial areas, thanks to their nutritive, functional or nutraceutical properties. To enhance hydrolysates performances, fractionation processes such as ultrafiltration are used. However, the lack of tools to predict ultrafiltration performances is a major bottleneck for a rational implementation of the process. This research thesis work enables to validate a prediction strategy based on classical characteristics of hydrolysates and an experimental calibration of the membrane. Yields and enrichment factors in targeted peptides or fractions during ultrafiltration as well as the productivity of the process can be predicted. This global methodology of performances prediction is then used to optimize the implementation modes of ultrafiltration. The multiobjective optimization approach consists in maximizing the enrichment in targeted peptides or fractions while water consumption and / or process duration is minimized
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Sylla, Khalifa Serigne Babacar. "Valorisation de co-produits de la sole tropicale (Cynoglossus senegalensis) par hydrolyse enzymatique : application en nutrition animale." Lorient, 2011. http://www.theses.fr/2011LORIS242.
Abstract:
Ce travail s’inscrit dans le cadre de la valorisation des coproduits issus de la chaîne de transformation de la sole tropicale (Cynoglossus senegalensis) au Sénégal par la mise en œuvre d’hydrolyse enzymatique afin d’obtenir des protéines à haute valeur alimentaire. Des coproduits (viscères, têtes) de la sole tropicale, ont été hydrolysés avec une protéase à large spectre (Protamex®). Dans cette étude il ressort que le degré d’hydrolyse (DH) est influencé par la température de l’hydrolyse. Un DH de 19% est obtenu à 50°C alors qu’il atteint 25% à 40°C après 3 heures d’hydrolyse. Les hydrolysats correspondants apparaissent riches en protéines (jusqu’à 61%) avec une teneur de près de 10% en sels minéraux. L’étude de la distribution de taille moléculaire des peptides de l’hydrolysat fait ressortir une taille inférieurs à 1760 Daltons L’optimisation des conditions d’hydrolyse, nous a amené à faire varier la quantité d’eau utilisée au cours des hydrolyses dans le but d’avoir un procédé industrialisable plus économe (en eau et en énergie) Pour ce faire, les effets de la variation du volume d’eau (10%, 25%, 50% et 100% p/p) au cours de l’hydrolyse enzymatique de coproduits de la sole tropicale ont été comparés. Il ressort qu’une proportion de 50% d’eau est suffisante dans nos conditions pour solubiliser près de 60% des protéines. Les hydrolysats ainsi obtenus ont une valeur nutritionnelle élevée pour les poulets de chairs car ils possèdent en quantité suffisante neuf acides aminés essentiels pour l’alimentation animale. Des tests de nutrition animale ont été réalisés chez des poulets de chairs. A cet effet, deux essais ont été réalisés sur 1200 poulets de souche cobb 500 non sexés à partir de 14 jours d’âge. Les résultats ont montré que les hydrolysats de coproduits favorisent la croissance des poulets. Les poids vifs à 6 semaines sont de 2369,60 g (lot 1), 2189,60 g (lot 2), 2298,05 g (lot 3) contre 2158,20 g (lot témoin), avec des GMQ moyens respectifs de 78,20 g, 66,72 g, 69,89 g et 68,30 g. Les poids de carcasse sont de 2112,43 g (lot 1), 1994,67 g (lot 2), 2081,75 g (lot 3) et 1989,22 g (lot témoin). La consommation alimentaire est influencée par le niveau et la nature des protéines en phase de finition. Toutefois, leur présence provoque une détérioration de l’indice de consommation pendant la finition ; il est de 2,30 (lot 1), 2,07 (lot 2), 2,05 (lot 3) et 2,0 (lot témoin). La recherche d’éventuelles pistes de valorisation en nutrition humaine, nous a amené à effectuer une analyse sensorielle préliminaire. Le profil sensoriel a été établi par un jury expert de 14 personnes. Onze (11) profils ont été identifiés par ce panel de dégustation. Par ailleurs, la caractérisation aromatique a révélé que cinquante sept (57) molécules sont responsables de ces odeurs décrites en analyse sensorielle dont trente sept (37) ont été identifiéesThis scope of work relates to the valorization of the tongue sole (Cynoglossus senegalensis) by-products resulting from the processing chain in Senegal by the implementation of enzymatic hydrolysis in order to obtain high value proteins. The by-products (viscera and heads) of tongue sole, were hydrolized with a large spectra protease (Protamex®). It appears that the hydrolysis degree (DH) was influenced by the temperature of the proteolysis. Indeed a DH=19% is obtained at 50°C while it reaches up to 25% at 40°C after 3 hours of enzymatic action. Resulting hydrolysates appears to be rich in protein (up to 61%° with around 10% of minerals. The study of the molecular distribution size of the peptides reveals that they are below 1760Da. The effect of the water proportion to conduce hydrolsis was studied. It appears that 50% of water is enough in our conditions to solubilize of four different water ratio to hydrolyze sole by-products by using Protamex® were compared. It was found t60% of the initial proteins. Resulting hydrolysates have a great nutritional value for seting up table fowls because they have in big quantity nine essential amino acids for the animal feed. Feed trials were then carried out on 1200 chickens (cobb 500) with 14 days of age. The results showed that high nutritional value by-products proteins increase the growth of the birds. Indeed, the live weights at 6 weeks are 2369. 60 G (batch 1), 2189. 60 G (batch 2), 2298. 05 G (batch 3) against 2158. 20 G (witness batch), with respective average GMQ of 78. 20 G, 66. 72 G, 69. 89 G and 68. 30 G. The carcass weights are 2112. 43 G (batch 1), 1994. 67 G (batch 2), 2081. 75 G (batch 3) and 1989. 22 G (witness batch). Food consumption seems little influenced by the level and the nature of proteins. However, their presence decreased the consumption index during the end of the study; it is 2. 30 (batch 1), 2. 07 (batch 2), 2. 05 (batch 3) and 20. 8 (witness batch). To identify the future application of hydrolysates in human food, a preliminary sensory analysis was carried out. The sensory profile was established with a jury of 14 expert judges. 11 profiles were found by this panel. In addition, the aromatic characterization revealed that 57 molecules are responsible for these odours described in sensory analysis. The description of these aromatic compounds opens potential way of valorization of these hydrolysates in human consumption
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Monceaux, Philippe. "Valorisation des productions amylacées en Picardie : étude d'un nouveau procédé de fractionnement du blé tendre." Compiègne, 1986. http://www.theses.fr/1986COMPD252.
Abstract:
Grâce à un climat et à un sol appropriés, la Picardie est une région de grande culture végétale. Le blé tendre est un produit bien maîtrisé par l’agriculteur picard présente un bilan économique et énergétique favorable incitant celui-ci à développer encore cette culture. Toutefois, ses débouchés à l'exportation (54,5 % de la production picarde de blé tendre est exportée en 1982/83) sont très importants et une recherche de transformation locale apparaît comme nécessaire. Après une analyse de la composition chimique et de la structure de la matière première de base et de ses constituants, l'étude des principaux procédés de fractionnement du blé a été réalisée. Ils sont de deux types - Procédés utilisant la farine comme matière première de départ ; - Procédés utilisant le grain de blé comme matière première de départ. Seuls, les premiers sont appliqués industriellement, mais I’utilisation totale du grain de blé entier présente l’avantage de n’avoir aucune perte des constituants principaux de l’ amande (amidon et gluten). A partir de cette analyse, un nouveau procédé de fractionnement du blé tendre a été proposé puis vérifié expérimentalement. Ce procédé conduit à trois produits finis : Gluten vital, Hydrolysat d’amidon (ou dans une variante possible, l’alcool) , Sons protéinés. Le gluten vital obtenu par un procédé direct de fractionnement du grain de blé entier nécessite une suspension de départ épaisse (40 % MS) qui a été centrifugée puis lavée. Le gluten, d’après les tests réalisés, est vital et contient de 0,8 à 1 % de cellulose (0,2 à 0,4 % cellulose dans le cas d'un gluten issu d'une farine blanche). L’hydrolysat d'amidon issu de ce procédé après liquéfaction, centrifugation et saccharification, peut être obtenu à différents niveaux de pureté. Des sirops impurs à 90 % de glucose (sur sec) ont fait l'objet d’essais industriels et pourraient être utilisés dans les industries de fermentation. Les sons protéinés sont constitués d'un mélange de sons de blé et de levures (Candida tropicalis) issu d’une fermentation. Cet aliment destiné à l’alimentation animale contient 25 à 28 % de matières azotées totales. Un essai sur porcelets n’a révelé aucun effet négatif des sons protéinés sur leur croissance. Les essais expérimentaux réalisés étape par étape nous ont conduit à proposer un bilan matière de ce nouveau procédé de fractionnement du blé (en sachant que les problèmes de recyclage d’eau n’ont pu être travaillé) puis une étude économique a montré qu’une unité industrielle de 84 000 t de blé (par an) suivant ce procédé possédait une bonne rentabilité. Ce nouveau procédé de valorisation de blé tendre est différent des procédés existants à la fois par l’enchaînement d'opérations unitaires proposé et par les caractéristiques et spécifications des produits de sortie. Un pilote industriel est aujourd’hui, I’étape intermédiaire nécessaire avant tout développement industriel pour préciser les recyclages d’effluents, affiner le bilan matière du, procédé et tester, en grande quantité, les produits de sortie auprès des industriels.