Academic literature on the topic 'Hépatite alcoolique – physiopathologie'

Contexte : Les options thérapeutiques disponibles en cas d’hépatite alcoolique (HA) restent limitées et reposent principalement sur la corticothérapie. Malheureusement, elle améliore uniquement le pronostic à court terme des patients et près de 40% des patients sont corticorésistants. En cas de corticorésistance, seule la transplantation hépatique précoce,proposée chez des patients sélectionnés permet d’améliorer la survie des patients. Cependant,dans le contexte de pénurie persistante de greffons, le développement de nouveaux médicaments est urgent, et cela passe par une meilleure compréhension de la physiopathologie de l’HA. Notre équipe a identifié chez les patients ayant une HA sévère l’existence d’un défaut de régénération hépatique en partie lié à une suractivation de YAP dans les hépatocytes de ces patients. Notre équipe a également observé une composition différente de la matrice extracellulaire (MEC) dans les foies des patients ayant une HA (en comparaison à celle des patients ayant une cirrhose liée à l’alcool), avec un enrichissement de cette dernière en laminine.L’axe thérapeutique se focalisant sur la fibrose semble être une option intéressante, le degré de fibrose étant un facteur pronostique clé chez ces patients. De plus, l’altération des immunités innée et acquise chez les patients ayant une HA est associée à une augmentation du risque infectieux chez ces derniers, ce qui impacte leur survie.Objectifs : Les objectifs de ce travail de thèse étaient d’identifier des pistes permettant d’améliorer la prise en charge des patients ayant une HA. Par une approche fondamentale, nous avions pour but d’identifier de nouvelles pistes thérapeutiques en s’intéressant notamment à la fibrogenèse dans l’HA et son potentiel lien avec le défaut du compartiment hépatocytaire. Par une approche clinique, nous avions pour but d’améliorer la détection et la prise en charge des infections (pneumopathies) chez les patients ayant une HA sévère.Méthodes : Sur le plan fondamental, à l’aide d’explants de patients transplantés pour HA sévère corticorésistante (n=22) ou pour cirrhose liée à l’alcool décompensée sans HA(Cirrh, n=24),nous avons évalué la distribution de la fibrose et de YAP par immunomarquage. Nous avons également évalué la composition de la matrice extracellulaire (MEC) par analyse protéomique(bulk et spatial proteomics) et RT-PCR. Nous avons également développé des organoïdes hépatiques (qui ont la capacité de garder les caractéristiques phénotypiques des foies natifs) à partir des foies des patients ayant une HA ou une Cirrh. Ces derniers ont été cocultivés avec des myofibroblastes hépatiques primaires humains afin d’évaluer leur profil d’activation(expression d’α-SMA, de COL1A1, de PDGFRα…) et de prolifération (expression de la cyclineD1, BrDU). Afin d’évaluer l’impact la suractivation de YAP dans les hépatocytes sur l’activation des myofibroblastes primaires hépatiques, nous avons cultivé ces derniers avec des organoïdes de Cirrh transduits ou avec un YAP constitutivement actif (afin de mimer les organoïdes issus de foies d’HA) ou avec des milieux conditionnés provenant de puits contenant des hépatocytes transduits (milieu YAP) ou non (milieu CTRL) avec un YAP activé.Sur le plan clinique, nous avons utilisé notre base de patients ayant une HA sévère confirmée sur le plan histologique afin de définir la prévalence et l’incidence des infections et plus spécifiquement des pneumopathies à l’entrée à l’hôpital et au cours de l’hospitalisation et ce avant et après corticothérapie. Nous avons également identifié les facteurs associés à la survenue de ces infections et ceux impactant la survie des patients.Résultats : Sur le plan fondamental, il était observé dans les foies des patients ayant une HA,une distribution spatiale spécifique de la fibrose qui était à la fois périlobulaire (comme dans les foies Cirrh) et plus précisément intralobulaire [...]
Background and Aims: Therapeutic options available in alcohol-related hepatitis (AH) remain limited and are mainly based on steroids. Unfortunately, steroids only improve short-term survival and almost 40% of patients do not respond to steroids. In the latter case, only early liver transplantation, offered in selected patients, can improve patient survival. However, in the context of graft shortage, the development of new drugs is urgent, and this requires a better understanding of the pathophysiology of AH. Our team identified in patients with severe AH a profound defect in liver regeneration partly related to an overactivation of YAP in the hepatocytes of these patients. Furthermore, our team also observed a different composition of the extracellular matrix (ECM) in the livers of patients with AH (compared to that of patients with alcohol-related cirrhosis), with an enrichment of the latter in laminin. The therapeutic axis focusing on fibrosis seems to be an interesting option since the degree of fibrosis is a key prognostic factor in these patients. In addition, the alteration of innate and acquired immunityin patients with AH is associated with an increased risk of infection, which impacts their survival. The objectives of this thesis were to identify new strategies to improve the outcome of patients with AH. Using a fundamental approach, we aimed to identify new therapeutic targets by focusing in particular on fibrogenesis in AH and its potential link with altered hepatocytes. Using a clinical approach, we aimed to improve the detection and management of infections (pneumopathy) in patients with severe AH. Method: Using livers from patients transplanted for severe AH not responding to steroids (n=22) or for decompensated alcohol-related cirrhosis without AH (Cirrh, n=24), we evaluated the distribution of fibrosis and YAP by immunostaining. We also assessed the composition of the extracellular matrix (ECM) by proteomic analysis (bulk and spatial proteomics) and RTPCR. We also developed liver organoids (which preserve the phenotypic characteristics of native livers) from the livers of patients with AH or Cirrh. The latter were cocultured with human primary hepatic myofibroblasts in order to evaluate their activation (expression of α-SMA, COL1A1, PDGFRα, etc.) and proliferation (expression of cyclin D1, BrDU). In order to evaluate the impact of YAP overactivation in hepatocytes on the activation of myofibroblasts, we cultured the latter with transduced Cirrh organoids with an active YAP (in order to mimicorganoids derived from AH livers) or with conditioned media collected from wells containing transduced (YAP medium) or not transduced hepatocytes (CTRL medium) with activated YAP. Results: AH livers presented with both perilobular (as in Cirrh livers) and specifically intralobular fibrosis. Bulk proteomics and PCR showed a specific ECM protein signature (e.g.laminin A2 was increased while vitronectin was decreased in AH). Spatial proteomics showed that the ECM composition between intralobular and perilobular areas was different in AH than in Cirrh livers. AH organoids overexpressed YAP. In the 3D model, AH organoids induced greater activation and proliferation of cocultured myofibroblasts. YAP-transduced Cirrh organoids induced changes in myofibroblasts similar to those observed in AH. YAP medium also induced increased myofibroblast activation and proliferation. Lung infections were the most frequently observed infections on patient admission. History of tobacco (active or passive), the presence of grade ≥2 hepatic encephalopathy and the severity of liver disease (MELD score > 21) were associated with the presence of lung infectionat admission. Lung infection was associated with a reduced access to steroids and a worst prognosis 30 days after admission. Furthermore, after the beginning of steroids, lung infections were more frequent in patients not responding to steroids and were associated with poorer survival [...]

L’athérosclérose est un problème de santé publique majeur puisque elle représente aujourd’hui la principale cause de décès dans les pays occidentalisés. Il est donc important de comprendre les mécanismes participant à la progression et aux complications de cette entité anatomoclinique. Nous nous sommes attachés dans ce travail de thèse à démontrer la place et l’apport potentiel de l’imagerie non invasive non expérimentale dans la mise en exergue des particularités de l’athérosclérose carotidienne et/ou coronarienne, et dans la stratégie de dépistage de ses complications chez le sujet non diabétique et diabétique de type 2, en fonction de l’existence ou non d’une stéatose hépatique non alcoolique. Nous présentons notamment dans ce travail, issu en partie de l’exploitation des données cliniques, biologiques et radiologiques de trois protocoles hospitaliers de recherche clinique, les différentes publications scientifiques internationales auxquelles il a donné lieu
Atherosclerosis is a major public health problem and is one of the major causes of death in the developed western world today. It is therefore of utmost importance that we understand the mechanisms involved in the evolution and progression of this disease and its associated complications. With the work done for this thesis, we tried to bring forth the importance of non invasive clinical imaging to study the pattern of evolution of atherosclerosis involving the carotid and/or coronary arteries. We also present the role played by imaging in prevention and early diagnosis of associated complications in non diabetic and type 2 diabetic patients, presenting with or without non alcoholic hepatic steatosis. In this study, we evaluated three different clinical research protocols used involving the clinical findings, biochemical as well as radiological examination results. The results of these protocols have been the basis for several peer reviewed international publications till date

La stéatohépatite non alcoolique (NASH) est une maladie du foie à évolution clinique grave, dont la prévalence est en constante progression. La stéatohépatite non alcoolique est caractérisée par un dépôt excessif de lipides dans les hépatocytes (stéatose) associé à une inflammation chronique, au contraire de la stéatose hépatique (NAFLD), manifestation initiale mais bénigne d'un dérèglement métabolique. Le NASH augmente le risque de progression vers la fibrose, la cirrhose et le carcinome hépatocellulaire et ne peut être soigné que par une greffe hépatique. Le risque de développer un diabète de type est aussi significativement augmenté chez les patients atteints de NASH. PPAR⍺ est un récepteur nucléaire connu pour réguler l'utilisation des acides gras dans le foie et réprimer les voies de signalisation pro-inflammatoires. [...]Nous avons conçu mutant de PPAR⍺ dont l'activité de liaison à l'ADN est abolie. La comparaison de ses activités transcriptionnelles in vitro avec le PPAR⍺ non muté démontre que les activités de contrôle du métabolisme sont abolies pour ce mutant, alors que les activités anti-inflammatoires restent intactes. [...] Dans cette étude, nous montrons donc pour la première fois que PPAR⍺ inhibe la progression de la stéatose vers le NASH et la fibrose par un mécanisme anti-inflammatoire direct, indépendant de son effet sur le métabolisme lipidique hépatique
Non-alcoholic fatty liver disease (NAFLD) is an increasingly prevalent liver condition characterized by excessive lipid deposition in the hepatocytes steatohepatitis (NASH) is hallamarked by chronic inflammation. NASH markedly increases the risk of progression towards liver fibrosis, cirrhosis ans hepatocellular carcinoma. The nuclear peroxisome proliferator-activated receptor alpha (PPAR⍺) regulates hepatic fatty acid utilization and represses pro-inflammatory signaling pathways. [...]Liver-specific expression of wild type or DNA binding-deficient PPAR⍺ in acute and chronic models of inflammation demonstrated that PPAR's anti-inflammatory, but not metabolic activities, result from DNA binding-independent mechanisms in vivo. We futher show that PPAR⍺ inhits the transition from steatosis toward NASH and fibrosis through a direct, anti-inflammatory mechanism independent of its effetc on hepatic lipid metabolism

L'athérosclérose est un problème de santé publique majeur puisque elle représente aujourd'hui la principale cause de décès dans les pays occidentalisés. Il est donc important de comprendre les mécanismes participant à la progression et aux complications de cette entité anatomoclinique. Nous nous sommes attachés dans ce travail de thèse à démontrer la place et l'apport potentiel de l'imagerie non invasive non expérimentale dans la mise en exergue des particularités de l'athérosclérose carotidienne et/ou coronarienne, et dans la stratégie de dépistage de ses complications chez le sujet non diabétique et diabétique de type 2, en fonction de l'existence ou non d'une stéatose hépatique non alcoolique. Nous présentons notamment dans ce travail, issu en partie de l'exploitation des données cliniques, biologiques et radiologiques de trois protocoles hospitaliers de recherche clinique, les différentes publications scientifiques internationales auxquelles il a donné lieu.

L’homéostasie énergétique est le résultat d’un dialogue constant entre les différents organes métaboliques, notamment entre l’intestin et le foie. L’intestin est une interface entre l'organisme et le milieu extérieur. Son rôle de barrière est possible grâce aux jonctions entre ses cellules et à un système immunitaire complexe. Dans les maladies métaboliques comme le diabète de type 2 et la stéatohépatite non alcoolique (NASH), on observe une augmentation de l'inflammation à bas bruit systémique et en particulier intestinale ainsi qu’une augmentation de la perméabilité intestinale. Le récepteur nucléaire aux acides biliaires, Farnesoid X Receptor (FXR), est exprimé dans les organes métaboliques. Les souris FXR Knock-Out (KO) soumises à un régime standard présentent une augmentation de la perméabilité intestinale par rapport à leurs contrôles de portée, bien qu'elles soient protégées contre l'obésité et l'insulinorésistance induites par un régime riche en graisse. Le rôle de FXR dans l’intestin est rapporté de façon plus contradictoire car selon les études son inactivation dans l’épithélium diminuerait la synthèse de céramides protégeant alors le foie de la stéatose, et son activation induirait le browning du tissu adipeux réduisant l’obésité et l’insulinorésistance. Dans ce contexte, nous avons voulu comprendre si les fonctions immunitaires de l'intestin sont sous le contrôle de FXR intestinal dans un contexte nutritionnel induisant la NASH.Au début de ma thèse, j’ai participé à la mise en place au laboratoire de l’élevage des souris déficientes en FXR uniquement au niveau de l’intestin (intFXR KO) par un système cré-lox. Le modèle a été validé et l’état métabolique des souris sous un régime standard a été vérifié. Bien que les souris intFXR KO semblent présenter des caractéristiques histologiques hépatiques équivalentes aux souris contrôles, l’expression des gènes liés à l’immunité innée nous a laissé penser que la déficience intestinale en FXR pouvait modifier l’état inflammatoire hépatique et global. L’immunophénotypage intestinal nous a permis de montrer que les souris intFXR KO présentaient une augmentation des lymphocytes cytotoxiques (LT CD8+) intestinaux. Nous avons identifié que cette modification proviendrait d’une augmentation de LT CD8 + circulants ciblés vers l’intestin. Cette perturbation de l’immunité intestinale peut être due à la diminution d’expression des protéines des jonctions serrées qui faciliterait le passage des produits microbiens. L’étude du microbiote intestinal des souris intFXR KO montre une augmentation d’une population bactérienne rapportée comme impliquée dans les colites.L’objectif suivant a été d’étudier les conséquences de la déficience en FXR intestinal dans un contexte nutritionnel induisant la NASH en 24 semaines. Nous avons constaté que les souris intFXR KO étaient bien protégées contre la stéatose hépatique, l’analyse transcriptomique de l’intestin nous permettant d’émettre l’hypothèse d’une modulation du métabolisme lipidique intestinal. Elles ne sont cependant pas protégées contre le développement de la NASH et la déficience en FXR au niveau de l’intestin amplifierait même l’expression dans le foie des gènes liés à l’inflammation par rapport aux souris contrôles. Chez les souris intFXR KO, nous observons une augmentation des LT CD8+, une augmentation de marqueurs de perméabilité intestinale et des populations bactériennes intestinales décrites dans les maladies inflammatoires de l’intestin.Ainsi, bien que protégeant contre la prise en poids et la stéatose hépatique, la déficience intestinale en FXR semble amplifier l’inflammation hépatique dans des conditions nutritionnelles standards mais également induisant la NASH. La modulation de l’immunité intestinale par des agonistes de FXR semble donc une approche intéressante pour moduler le dialogue intestin-foie dans le traitement de la NASH
Energy homeostasis is the result of a dialogue between metabolic organs, especially gut and liver. The intestine is an interface between the organism and the external environment. Its role as a barrier is possible thanks to a complex immune system and intercellular junctions. In metabolic diseases such as type 2 diabetes and non-alcoholic steatohepatitis (NASH), there is an increase in systemic low-grade inflammation, particularly in intestine, and an increase in intestinal permeability. The nuclear bile acid receptor, Farnesoid X Receptor (FXR), is expressed in metabolic organs. FXR Knock-Out (KO) mice fed a standard diet show increased intestinal permeability compared to their littermate controls, although they are protected against high-fat diet-induced obesity and insulin resistance. The role of FXR in the intestine is reported in a more contradictory way in the literature because according to the studies its inactivation in the epithelium decreases the synthesis of ceramides which would then contribute to protect the liver from steatosis, and its activation induces the browning of adipose tissue, reducing obesity and insulin resistance. In this context, we wanted to understand whether gut immune functions are under the control of intestinal FXR in a nutritional context inducing NASH.At the beginning of my thesis, I participated in the establishment in the laboratory of the breeding of mice deficient in FXR only in the intestine (intFXR KO) by a cre-lox system. The model was validated and the metabolic status of the mice on a standard diet was checked. Although intFXR KO mice appeared to have similar hepatic histological characteristics to control mice, the expression of genes related to innate immunity is perturbed suggesting that intestinal FXR deficiency may alter the hepatic and global inflammatory state. By immunophenotyping, we showed that cytotoxic lymphocytes (CD8+ TL) are increased in the intestine of intFXR KO mice. This change may be due to an increase in circulating CD8+ TL targeting the intestine. This disruption of intestinal immunity may be due to a decrease in the expression of tight junction proteins that would facilitate the passage of microbial products. The study of the gut microbiota of intFXR KO mice shows an increase in a bacterial population reported to be involved in colitis.Our next objective was to study the consequences of intestinal FXR deficiency in a nutritional context inducing NASH in 24 weeks. We found that were well protected against hepatic steatosis, gut transcriptomic analysis suggesting a modulation of intestinal lipid metabolism. However, intFXR KO mice are not protected against the development of NASH and FXR deficiency in the gut would even amplify the expression of inflammation-related genes in the liver compared to control mice. In intFXR KO mice, we observed an increase in CD8+ TLs, an increase in intestinal permeability markers and intestinal bacterial populations described in inflammatory bowel disease.Thus, while protecting against weight gain and hepatic steatosis, intestinal FXR deficiency appears to amplify hepatic inflammation under standard and also NASH nutritional conditions. Modulation of intestinal immunity by FXR agonists therefore appears to be an interesting approach to modulate the gut-liver dialogue in the treatment of NASH

Le spectre de la NAFLD (Non Alcoholic Fatty Liver Disease) est caractérisé par des atteintes hépatiques allant de la simple stéatose à la cirrhose. Dans ce contexte, nous montrons que la sérine/thréonine kinase SIK2 (Salt inducible kinase 2) inhibe l'activité histone acétyltransférase (HAT) de p300 par phosphorylation sur sa sérine 89, ce qui abolit en contrepartie l'activité transcriptionnelle du facteur de transcription ChREBP (Carbohydrate Responsive Element Binding Protein), en diminuant son acétylation. ChREBP est le médiateur des effets transcriptionnels du glucose, en contrôlant l'expression des gènes de la glycolyse et de la lipogenèse, nos résultats montrent que cette boucle de régulation permet de limiter la synthèse des acides gras et le développement de la NAFLD dans le foie. Nous montrons également que l'activation de Phf2 (Plant Homeodomain Finger 2) favorise le captage, la synthèse, l'estérification et le stockage des acides gras dans les gouttelettes lipidiques. Phf2 agit comme un co-activateur de ChREBP qui, en déméthylant spécifiquement la lysine 9 diméthylée de l'histone H3 sur le promoteur des gènes cibles de ChREBP, favorise le recrutement de la machinerie transcriptionnelle et l'induction de la transcription en réponse au glucose. Ainsi Phf2 et ChREBP augmentent la synthèse d'acides gras mono-insaturés (MUFA) insulino-sensibilisateurs et les défenses anti-oxydantes du foie, en stimulant l'expression et l'activité du facteur de transcription Nrf2 (Nuclear Factor E2-related factor 2). Cette régulation épigénétique de ChREBP permet le développement d'une stéatose hépatique bénigne dissociée d'une résistance à l'action de l'insuline et de la fibrose
The spectrum of NAFLD (Non Alcoholic Fatty Liver Disease) is characterized by liver damage ranging from simple steatosis to cirrhosis. The understanding of the mechanisms responsible for this ectopic lipid storage is essential in the search for therapeutic approaches. In this context, we show that the serine / threonine kinase SIK2 (Salt inducible kinase 2) inhibits the histone acetyltransferase (HAT) p300 by a phosphorylation on its serine 89, which in turn, abolishes the activity of the transcription factor ChREBP (Carbohydrate Responsive Element Binding Protein), decreasing its acetylation. ChREBP mediates the transcriptional effects of glucose, controling the expression of glycolitics and Iipogenics genes. We show that this control loop limits the synthesis of fatty acids and the development of NAFLD in the liver. We also show that the histone demethylase PHF2 (Plant homeodomain Finger 2) activation promotes the uptake, the synthesis, the esterification and the storage of fatty acids into the lipid droplets. PHF2 acts as a co - activator for ChREBP which, specifically demethylates the dimethylated lysine 9 of the histone H3 in the promoter of its targets genes to induce the recruitment of the transcriptional machinery, to induce transcription in response to glucose. Thus PHF2 and ChREBP increase the synthesis of monounsaturated fatty acids insulin-sensitizing and anti- oxidant defenses of the liver by stimulating the expression and actiyity of the transcription factor Nrf2 (nuclear factor E2 -related factor 2). This epigenetic regulation of ChREBP allows the development of a benign hepatic steatosis dissociated from resistance to the action of insulin and fibrosis

En plus de leur rôle dans la solubilisation des lipides alimentaires, les acides biliaires sont des molécules de signalisation régulant leur propre métabolisme, l'homéostasie du glucose et des lipides, la dépense énergétique, la fonction cardiovasculaire et l’inflammation, en modulant le Farnesoid X Receptor (FXR) et le Takeda G protein coupled Receptor 5 (TGR5). En effet, des modifications dans les concentrations des acides biliaires sont associées aux maladies métaboliques et ce sont des candidats pour participer à la pathophysiologie de ces maladies ou prédire leur progression.Dans la première partie de cette thèse nous avons étudié les modifications des acides biliaires dans le contexte de l'obésité, l'insulinorésistance, le diabète de type 2 et la stéatohépatite non alcoolique. Nous avons montré que les acides biliaires sont corrélés avec l’homéostasie du glucose chez l’Homme, mais qu’ils ne sont pas des prédicteurs de la bascule du prédiabète en diabète de type 2 dans un étude de cohorte.La deuxième partie de cette thèse est dédiée à l’étude des acides biliaires dans la chirurgie bariatrique. Nos résultats ont montré que la chirurgie bariatrique réduit la recapture hépatique des acides biliaires, provoquant leur augmentation dans la circulation systémique, et que ce n’est pas l’anse biliaire mais l’anse commune qui est responsable des modifications métaboliques après la chirurgie bariatrique chez le minipig. Ensuite, nous avons montré chez l’Homme que les acides biliaires liés aux lipoprotéines de haute densité (HDL) augmentent après la chirurgie bariatrique, et que cette augmentation est corrélée avec la restauration de leurs fonctions vaso-protectrices
In addition to their role in the solubilization of dietary lipids, bile acids are signaling molecules regulating their own metabolism, glucose and lipid homeostasis, energy expenditure, cardiovascular function and inflammation via the activation of the Farnesoid X Receptor (FXR) and the Takeda G protein coupled Receptor 5 (TGR5). Indeed, changes in bile acid concentrations are associated with metabolic diseases and therefore they are candidates to participate in the pathophysiology of these diseases or predict their progression.In the first part of this thesis, we studied bile acid changes in the context of obesity, insulin resistance, type 2 diabetes and non-alcoholic steatohepatitis. We demonstrated that bile acids are correlated with glucose homeostasis in humans, but that they are not predictors for the progression from prediabetes to type 2 diabetes in a longitudinal cohort study.In the second part of this thesis, we studied the bile acids in the context of bariatric surgery. Our results showed that bariatric surgery reduces the hepatic recapture of certain bile acids, causing them to increase in the systemic circulation. Additionally, we showed that it is not the bile limb but the common limb the one responsible for metabolic changes after bariatric surgery in the minipig. Finally, we showed in humans that bile acids linked to high-density lipoproteins (HDL) increase after bariatric surgery, and that this increase is correlated with the restoration of their vasoprotective functions