Academic literature on the topic 'Glomérulonéphrite à croissant'

Introduction : La glomérulonéphrite à croissant (cGN) est une forme avancée de glomérulopathie commune à plusieurs maladies rénales d'origine immunitaire. La cGN se caractérise par une prolifération des cellules épithéliales pariétales glomérulaires (PEC), formant des croissants dans la chambre urinaire et conduisant en l'absence de traitement à l'insuffisance rénale terminale. Dans le cadre de ma thèse, j'ai particulièrement étudié la claudine-1 (CLDN1), une protéine transmembranaire impliquée dans les jonctions serrées, qui peut être exposée en dehors de ces jonctions serrées et activer des voies profibrotiques. Nous savons que la CLDN1 est exprimée spécifiquement par les PEC dans le glomérule, étant donné l'importance de l'activation des PEC dans les lésions glomérulaires, un anticorps monoclonal ciblant la CLDN1 pourrait être une cible thérapeutique pertinente et innovante. Par ailleurs, des biomarqueurs spécifiques des PEC activées, tels que CD44 et CD9, ont été mis en évidence dans les cGN. Les souris déficientes en CD44 n'étant pas capables d'induire de cGN et la délétion spécifique de CD9 dans les PEC prévenant les lésions tissulaires de la cGN. Malgré leurs rôles primordiaux dans la physiopathologie des cGN, leur expression dans la pathologie glomérulaire humaine n'est pas connue, tout comme leur corrélation avec le pronostic rénal. Le premier objectif de cette thèse est donc d'étudier l'expression des biomarqueurs des PEC (CLDN1, CD9 et CD44) en fonction des lésions histologiques glomérulaires les cGN humaines (néphropathie à IgA (IgAN) et vascularite à ANCA (vANCA)), leur rapport avec la perte et la dédifférenciation podocytaire et avec le pronostic néphrologique des patients. Le deuxième objectif de cette thèse est d'étudier le potentiel bénéfice de cibler la CLDN1 avec l'anticorps anti-CLDN1 dans un modèle murin de cGN. Méthode : L'expression de CLDN1, CD9 et CD44 dans les tissus rénaux de patients atteints de IgAN et vANCA a été analysée grâce à une technique d'immunofluorescence multiplex (méthode OPAL). La corrélation entre l'expression de CLDN1, CD9 et CD44 et les critères cliniques (DFGe, protéinurie), les lésions histologiques, les biomarqueurs de dédifférenciation podocytaire (p57 et WT1) et le pronostic néphrologique a été étudiée. Une analyse en transcriptomique spatiale des croissants glomérulaires exprimant CLDN1 et CD44 dans les reins de patients atteints de cGN a été réalisée. Des études de preuve de concept utilisant des anticorps anti-CLDN1 ont été effectuées dans un modèle préclinique de cGN. Résultats : Dans les tissus (n=131) de patients atteints de vANCA et IgAN, l'immunofluorescence en multiplex a révélé une surexpression de CLDN1 dans les croissants glomérulaires ainsi que dans les lésions fibreuses. Au moment de la biopsie rénale diagnostique, l'expression de CLDN1 dans les glomérules était corrélée à la perte de podocytes (mesurée par l'expression de P57). L'augmentation de l'expression des cellules doubles positives (CLDN1+ et CD44+) était statistiquement significativement associée à un mauvais pronostic rénal chez les patients atteints de vANCA et d'IgAN avec un suivi médian de 2,5 et 6.9 ans respectivement. L'analyse en transcriptomique spatiale a mis en évidence l'association entre la présence de PEC « activées » (CLDN1+/CD44+) et l'augmentation de l'expression des gènes de la matrice extracellulaire. Dans le modèle murin de cGN, nous avons mis en évidence qu'un anticorps anti-CLDN1 avait la capacité de se lier aux PEC activés, sa cible thérapeutique, et de réduire significativement de l'albuminurie chez les souris traitées. Conclusion : Nos résultats suggèrent un rôle fonctionnel de CLDN1 dans la pathogenèse de la cGN, fournissant une preuve de concept préclinique pour les anticorps anti-CLDN1. Ces données suscitent des questions mécanistiques et suggèrent que des anticorps anti CLDN1 pourrait représente une approche thérapeutique novatrice chez les patients atteints de cGN
Introduction: Crescentic glomerulonephritis (cGN) is the final mode of kidney injury common to several immune-mediated kidney diseases. cGN is characterized by extensive glomerular parietal epithelial cells (PEC) proliferation, forming crescents in urinary space and leading, if untreated, to end-stage kidney disease (ESKD). In a pathological context, claudin-1 (CLDN1), a transmembrane protein involved in epithelial tight junctions, can be exposed outside the tight junctions and mediate pro-fibrotic pathways and extracellular matrix (ECM) remodeling as described in other cell types. CLDN1 is expressed explicitly by PEC in the glomerulus and given the importance of PEC activation in glomerular injury, we evaluated whether a monoclonal antibody targeting CLDN1 could represent a relevant and innovative therapeutic tool. Additionally, specific biomarkers of PEC activation, such as CD44 and CD9, have been studied in cGN. CD44-deficient mice display attenuated experimental cGN, and specific deletion of CD9 in PEC prevents tissue damage in experimental cGN. However, CD9 and CD44 expression in human glomerular cGN (IgA nephropathy (IgAN) and ANCA vasculitis (AAV)) is unknown, as is their correlation with podocyte loss, histological lesions, and renal outcome. The first objective of this study was to evaluate PEC biomarkers (CLDN1, CD9, and CD44) expression in human cGN, their association with glomerular histological lesions, podocyte loss and dedifferentiation, and renal outcome. The second objective is to evaluate the potential benefit of targeting CLDN1 with an anti-CLDN1 Ab in a cGN mouse model. Method: CLDN1, CD9, and CD44 expression in renal tissues of cGN patients was analyzed using kidney multichannel immunofluorescence staining and spatial transcriptomics. Correlation between CLDN1, CD9, and CD44 expression and clinical endpoints (eGFR, proteinuria), histological lesions, biomarkers of podocyte dedifferentiation (p57 and WT1), and renal outcome were studied. A spatially resolved molecular roadmap from CLDN1+/CD44+ crescentic glomeruli was conducted. Proof-of-concept studies using anti-CLDN1 monoclonal antibody were performed in the Matsugi model of cGN. Results: In tissues of 131 patients with IgAN and AAV, multichannel immunofluorescence revealed up-regulated CLDN1 expression by crescents and fibrous lesions. At the time of diagnostic kidney biopsy, glomerular CLDN1 expression was correlated with podocyte loss (measured by p57 expression) and glomerular fibronectin area. The increase of proportion of double-positive (CLDN1+ and CD44+) cells was statistically significantly associated with poor renal outcome (50% decline in estimated glomerular filtration rate (eGFR) or ESKD) in patients with ANCA vasculitis and IgA nephropathy, with a median follow-up of 2.5 and 6.9 years, respectively. Spatial transcriptomics analysis highlighted the association between CLDN1+/CD44+ crescentic glomeruli and extracellular matrix genes. In the cGN murine model, we demonstrated that anti-CLDN1 antibody could bind to activated PEC, its therapeutic target and significantly reduced albuminuria in treated mice. Conclusion: Our results suggest a functional role of CLDN1 in the pathogenesis of cGN providing a preclinical proof-of-concept for the use of anti-CLDN1 antibodies as a novel therapeutic approach in patients with cGN

Parmi les maladies rénales initiales, les glomérulonéphrites (GN) représentent en France la troisième cause d’insuffisance rénale terminale. L’objectif de ces travaux est d’étudier le rôle du récepteur Notch3 dans la physiopathologie de la glomérulonéphrite à prolifération extracapillaire (GNEC) induite par un sérum néphrotoxique (SNT). L’expression rénale de Notch3 étant induite dans ce modèle expérimentale, trois approches permettant de l’inhiber ont été privilégiées : une approche pharmacologique, pharmacogénétique et l’invalidation du gène Notch3. Nous avons tout d’abord identifié une de novo expression du récepteur Notch3 au niveau podocytaire neuf jours après l’induction de la GNEC. Les souris invalidées pour le gène Notch3 et ayant reçues des injections de SNT présentent une meilleure fonction rénale, une réduction de la prolifération cellulaire extracapillaire, une réduction des dépôts de fibrine glomérulaires, une diminution des infiltrats macrophagiques interstitiels par rapport aux souris de type sauvage. Parmi l’ensemble des gènes cibles de la voie Notch, seul HeyL est surexprimé avec la maladie. Les approches in vitro nous on permit d’identifier le rôle clé du récepteur Notch3 dans l’induction de la voie du NFB et dans la promotion d’un phénotype migratoire des podocytes. Ces travaux mettent en lumière un rôle pro-inflammatoire et pro-migratoire du récepteur Notch3 dans la GNEC, initialement identifiée comme une protéine exclusivement vasculaire. Le développement d’une stratégie d’inhibition de cette protéine permettrai de réduire les atteintes glomérulaires et notamment la prolifération extracapillaire des GNEC
Chronic kidney disease (CKD) is highly prevalent in the general population and glomerulopathies represent the third cause of end stage renal disease. Notch3 belongs to the well known family of Notch receptors. It is involved in the development of resistant arteries but also in the development of glomeruli. Our work aimed to study the involvement of Notch3 receptor in the mechanisms of progression of experimental crescentic glomerulonephritis (GN). GN was induced by nephrotoxic serum (NTS) administration in mice lacking Notch3 expression and their wild-type littermates. First, we found that Notch3 mRNA and protein expressions were induced by several-fold in podocytes concurrently with disease progression. Notch3 null mice were protected from glomerulonephritis, as they exhibited less proteinuria, uremia and inflammatory infiltration compared to wild-type mice. Moreover, the expression of markers typical of podocyte integrity decreased in NTS/WT mice whereas it remained preserved in NTS/KO mice. In separate experiments, podocyte outgrowth from glomeruli freshly isolated from NTS/WT mice was higher compared to NTS/KO mice. In vitro approaches highlighted the involvement of Notch3 in promoting NFB pathway and a pro-migratory phenotype in cultured podocytes. These results demonstrate that abnormal activation of Notch3 is involved in the progression of renal disease by promoting migratory and pro-inflammatory pathways in glomeruli. Inhibiting Notch3 activation could be a novel, promising approach to treat glomerulonephritis, an incurable, severe form of chronic kidney diseases

De nombreux travaux ont montré que la réaction inflammatoire chronique était favorisée par la liaison du collagène aux récepteurs à domaine discoïdine de type 1 (DDR1). L'objectif de cette étude était d'étudier le rôle de DDR1 dans le modèle dit passif de glomérulonéphrite à anticorps anti-membrane basale glomérulaire (GN). La GN a été induite chez la souris n'exprimant pas DDR1 (DDR1-/-) et les souris témoins par l’administration de sérum de lapin néphrotoxique. Chez les souris témoins, l’induction de la GN s’accompagne d’une surexpression glomérulaire de DDR1. La délétion du gène DDR1 protège la fonction rénale avec une réduction de la protéinurie (5,82 ± 1,07 g / vs. 14,40 ± 2,04 mmol g / mmol creat à J17) et de l’urée plasmatique et une survie très améliorée à plus de 70% de la cohorte initiale à J43 vs. 10% chez les témoins. L’histologie à différentes périodes de progression de la maladie (J4, J8 et J17) est très altérée chez les souris témoins avec une diminution d’expression de la néphrine, des dépôts vasculaires de fibrine, la présence de croissants glomérulaires et de dilatations tubulaires, une réaction inflammatoire à prédominance macrophagique et des dépôts interstitiels de collagène. Chez les souris DDR1 -/-, l’ensemble de ces paramètres est amélioré et les protéines d’adhésion (ICAM, VCAM), cytokines (IL-1 Bêta), chémokines (MCP-1), facteurs pro-fibrosants (TGF Bêta, PAI-1) sont moins exprimés. La mise en évidence in vitro d’une stimulation de la synthèse de DDR1 par des podocytes en culture en présence d’IL-1 bêta suggère l’existence d’une boucle amplificatrice de la réaction inflammatoire par l’interaction entre les cellules inflammatoires produisant l’IL-1 bêta et les podocytes exprimant DDR1. La surexpression glomérulaire de DDR1 dans des biopsies rénales de patients présentant une glomérulonéphrite extra-capillaire alors que ce récepteur est physiologiquement présent dans la paroi des artériolaires, valide le modèle animal tandis que la reproduction de la protection contre la GN des souris DDR1 -/- par l’utilisation d’oligonucléotides antisens bloquant la synthèse de DDR-1 est un argument supplémentaire en faveur de l’utilisation thérapeutique d’antagonistes de ce récepteur dans les néphropathies chroniques comportant une phase inflammatoire initiale

Les glomérulonéphrites extracapillaires (GNEC) ou glomérulonéphrites rapidement progressives (GNRP) représentent la forme la plus sévère d'atteinte glomérulaire. Les lésions se manifestent par une prolifération extracapillaire ("croissants") impliquant les lymphocytes T les macrophages, ainsi que la prolifération des podocytes et des cellules épithéliales pariétales, menant à la destruction rapide du glomérule et l'insuffisance rénale. Nous montrons l'induction de l'expression de l'Heparin Binding-Epidermal Growth Factor (HB-EGF) dans les cellules épithéliales glomérulaires au cours de la GNEC induite chez la souris par un sérum néphrotoxique, et également dans les GNEC humaines. L'induction de l'HB-EGF entraîne la phosphorylation du récepteur EGFR au cours de la GNEC murine. Chez les souris déficientes en HB-EGF, l'activation de l'EGFR est absente et la sévérité de la GNEC est atténuée. In vitro, l'HB-EGF stimule la prolifération et la migration des podocytes par un mécanisme autocrine. La délétion spécifique du gène Egfr dans les podocytes diminue également la sévérité de la GNEC. L'administration à la souris d'un inhibiteur pharmacologique de l'EGFR au cours de la GNEC entraine une diminution de l'albuminurie, une préservation de la fonction rénale et une amélioration de la survie. Ce traitement est efficace même administré 4 jours après l'induction de la GNEC. Les effets délétères de l'activation de l'EGFR pourraient être médiés par l'activation de STAT3 et l'administration à la souris d'un inhibiteur de STAT3 réduit la sévérité de la GNEC. Nos résultats suggèrent que des traitements ciblant la voie HB-EGF/EGFR pourraient s'avérer bénéfique dans les GNEC humaines
Crescentic glomerulonephritis or rapidly progressive glomerulonephritis (RPGN) is the most severe form of glomerular disease. Glomerular injury manifests as a proliferative histological pattern, accumulation of T cells and macrophages, proliferation of intrinsic glomerular cells, accumulation of cells in Bowman's space ("crescents"), and rapid deterioration of renal function. Here we show de novo induction of heparin-binding epidermal growth factor-like growth factor (HB-EGF) in intrinsic glomerular epithelial cells (podocytes) from mice with RPGN induced by nephrotoxic serum and also in human RPGN. HB-EGF induction increases phosphorylation of the EGFR/ErbB 1 receptor in mice with RPGN. In HB-EGF-deficient mice, EGFR activation in glomeruli is absent and the course of RPGN is markedly improved. Autocrine HB-EGF induces a phenotypic switch in podocytes in vitro. Conditional deletion of the Egfr gene from podocytes of mice alleviates crescentic glomerulonephritis and the clinical features that accompany RPGN. Pharmacological blockade of EGFR also prevents nephrotic syndrome, infiltration of T cells and macrophages, necrotizing crescentic glomerulonephritis, acute renal failure and death in mice. This approach is effective even when started 4 days after the induction of experimental RPGN. The deleterious effects of EGFR activation may be mediated by activation of STAT3 and the severity of RPGN in mice is reduced by the administration of a STAT3 inhibitor. Our results suggest that targeting the HB-EGF/EGFR pathway could be clinically beneficial for treatment of human RPGN

La réaction inflammatoire au cours des glomérulonéphrites est régulée par de nombreux médiateurs. Parmi eux, le transforming growth factor-beta1 (TGF-β1) peut jouer un rôle anti-inflammatoire, tandis que les calpaïnes, cystéines proteases activées par le calcium, favorisent la réaction inflammatoire. Nous montrons d'abord que le TGF-β1 augmente la synthèse du récepteur des glucocorticoïdes, par le biais des protéines Srnad 2/3 et AP-1. Et qu'il contribue à l'inhibition de la réaction macrophagique. Ensuite, nous montrons que l'activité calpaïne est augmentée dans le cortex rénal au cours des glomérulonéphrites aiguës, et que des calpaïnes actives apparaissent dans les urines. Ces calpaïnes, principalement d'oriqine plasmatique sont la conséquence de l'altération de la membrane basale glomérulaire mais proviennent aussi d'une sécrétion tubulaire. Les calpaïnes activées dans le cortex rénal favorisent le développement des lésions glomérulaires inflammatoires en activant NF-KB. Les calpaïnes urinaires contribuent à l'apparition de la protéinurie en clivant la néphrine, et majorent ainsi probablement l'inflammation péri-tubulaire
Inflammatory process in qlomerulonephritis is regulated by many mediators. Of them, transforming qrowth factor-beta1 (TGF-β1) may act as an anti-inflammatory agent. In contrary, calpain, a calcium-activated neutral cysteine protease, participates in the development of inflammation. We first demonstrate that TGF-β1 increase glucocorticoid receptor (GR) synthesis by macrophages after activation of Smad 2/3 and AP-1. And increase the ability of GR to deactivate macrophages. Second, we show that in glomerulonephritis, calpain activity is increased in the kidney cortex, and that in parallel. Active calpains appear in the urines. These calpains oriqinate mainly from abnormal transglomerular passage of plasma proteins and from tubular secretion. Active calpains in the renal cortex promote glomerular injury through activation of NF-KB. While urinary calpains are responsible for the shedding of nephrin from the surface of podocytes. Thereby worsening proteinura

La glomérulonéphrite mésangioproliférative (GNMP) se caractérise par une inflammation locale et la prolifération et l'apoptose des cellules mésangiales (CM). La protéine apparentée à l'hormone parathyroïdienne (PTHrP) a été impliquée dans ces processus dans divers types cellulaires. Nous avons analysé les effets de la PTHrP sur ces processus dans les CM. Nous montrons que la PTHrP majore la prolifération des CM par voie intracrine et diminue leur apoptose par voie paracrine. La PTHrP stimule les voies de l'AMPc/PKA et PI3-K/Akt conduisant à l'activation du NFkB et à la majoration de la cyclooxygénase-2 (Cox-2). La Cox-2 était responsable de la survie des CM par la PTHrP. Par ailleurs, l'IL-1beta et le TNF-alpha majorent l'expression de la PTHrP dans les CM, et la PTHrP elle-même induisait l'expression de cytokines et chimiokines. L'expression des cytokines (IL-17, IL-16), était brève (pic à 2h). L'expression des chimiokine (RANTES, MIP-2, TARC et I-TAC) était plus prolongée (4h). Dans un modèle murin de GNMP, la PTHrP était surexprimée à J1 dans les glomérules malades. Elle pourrait contribuer à l'inflammation locale, à la prolifération et à la survie des CM.