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Dissertations / Theses on the topic 'Enterococcus faecalis'
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1
Roberts, Gretta. "Glycoprotein utilisation by enterococcus faecalis." Thesis, King's College London (University of London), 2004. http://ethos.bl.uk/OrderDetails.do?uin=uk.bl.ethos.412446.
Full text
2
Barros, Mariana Vilhena. "Infeções nosocomiais por enterococcus faecalis." Master's thesis, [s.n.], 2014. http://hdl.handle.net/10284/4512.
Full textAbstract:
Projeto de Pós-Graduação/Dissertação apresentado à Universidade Fernando Pessoa como parte dos requisitos para obtenção do grau de Mestre em Ciências FarmacêuticasAs infeções nosocomiais são consideradas um problema mundial de saúde pública. A sua disseminação tem contribuído para aumento das taxas de mortalidade e morbilidade, a maioria das vezes devido às limitadas ou mesmo inexistentes opções terapêuticas. Enterococcus faecalis é uma bactéria Gram-positiva, anaeróbia facultativa, presente na flora comensal do trato gastrintestinal de humanos e animais. Apesar da sua suposta inocuidade, nas últimas décadas E.faecalis tem-se revelado um patogénio oportunista, representando a segunda e a terceira maior causa de infeções hospitalares a nível mundial. Esta bactéria é apontada como uma das principais causas de endocardites, bacteremias, infeções do trato urinário, intra-abdominais e de feridas contraídas em hospitais. As suas caraterísticas fisiológicas permitem-lhe sobreviver a altas temperaturas, a elevados valores de pH e concentrações salinas. Esta bactéria resiste também em ambientes hostis, em situações de subnutrição, de stress oxidativo e às técnicas tradicionais de limpeza. Apresenta inúmeros fatores de virulência nomeadamente proteínas de superfície, enzimas hidrolíticas e capacidade de formação de biofilmes, o que auxilia esta bactéria a invadir, colonizar e infetar tecidos hospedeiros. Enterococcus faecalis exibe uma resistência intrínseca a algumas classes de antibióticos como β-lactâmicos, lincosamidas, trimetropim-sulfametoxazol, fluoroquinolonas e baixas concentrações de aminoglícosídeos. Devido à sua capacidade mutagénica e adaptativa, este microrganismo desenvolve e adquire novas resistências, através de mutações cromossomais ou por transferência de genes. Como é o caso do gene vanA e vanB, que lhe conferem resistência à vancomicina (VRE). E.faecalis tem-se revelado uma constante ameaça de vida em todo o mundo, por isso é urgente controlar a disseminação desta bactéria. É importante desenvolver novos métodos terapêuticos, tendo em conta a ineficácia dos atuais e aplicar estratégias, a nível hospitalar, que diminuam ao máximo a transmissão do microrganismo. The nosocomial infections are nowadays a worldwide issue in terms of health. Its dissemination has been the cause of the rising of mortality and disease rates, most of the time due to limited or even nonexistent therapeutic options. Enterococcus faecalis is a Gram-positive anaerobic facultative bacterium witch is found in the flora of the gastrointestinal tract of humans and animals. Despite its alleged harmlessness, lately E.faecalis has been proved to be an opportunistic pathogen, representing the second and the third leading cause of hospital-acquired infections worldwide. This bacterium is being pointed as a mainly cause of endocarditis, fast progressing bacteremia may present, urinary tract infections, intra-abdominal and wounds contracted in hospitals. Its physiological characteristics allows this bacterium to survive at high temperatures, high PH values and highly concentration salts. It can also resist in hostiles environments such as malnutrition, oxidative stress and traditional cleaning technics. It feature numerous virulence factors including surface proteins, hydrolytic enzymes and ability of biofilm formation, which helps the bacterium to invade, colonize and infect the host tissue. Enterococcus faecalis displays an intrinsic resistance to some classes of antibiotics such as β-lactam, lincosamides, trimetropim-sulfamethoxazole, fluoroquinolones and low concentration of aminoglycosides. Due to its mutagenic capacity and adaptive skills, this micro-organism develops and acquires new resistances, through chromosome mutations or by genetic transferences e.g. gene vanA e vanB, witch confers resistance to Vancomycin (VRE). E. faecalis has proved a constant threat of life throughout the world, so there is an urgent need to control the spread of this bacteria by developing new therapeutic methods, having regard to the ineffectiveness of current ones and looking for new strategies inside hospitals that will reduce as much as possible the transmission of the micro-organism.
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Sumi, Jáuregui Ada Elizabeth. "Transferencia de plásmidos con resistencia a antibióticos en especies de Enterococcus provenientes del mar de Lima." Universidad Nacional Mayor de San Marcos. Programa Cybertesis PERÚ, 2008. http://www.cybertesis.edu.pe/sisbib/2008/sumi_ja/html/index-frames.html.
Full textAbstract:
El género Enterococcus es conocido por ser de origen fecal o intestinal, pero tiene una amplia distribución en la naturaleza y se le puede encontrar en suelos, aguas, plantas y en productos alimenticios, siendo capaz de sobrevivir en medios poco enriquecidos. Los estudios reportados sobre estos microorganismos generalmente inciden en su aspecto clínico y su resistencia a antibióticos, y algunos se ubican en un contexto ambiental evaluando métodos para su detección o enumeración para uso en aguas recreacionales. Está aumentando la importancia de este microorganismo como agente causal de infecciones adquiridas en hospitales, pero el interés de estudio en este género radica en su alta resistencia natural a múltiples antimicrobianos y a su capacidad de adquirir y transferir dicha resistencia. Se sabe que Enterococcus es un microorganismo introducido al ecosistema marino debido a la contaminación de éste ambiente con desechos orgánicos, pero son pocos los reportes sobre estudios de resistencia antimicrobiana de éste género provenientes de muestras de agua de mar, siendo necesario este tipo de investigación que nos permita conocer la importancia de estos microorganismos en estos ambientesThe genus Enterococcus is recognized as being of fecal origin but have a wide distribution in nature, they can be found in soil, water, plants and food products, being able to survive in low-enriched media. Studies on these microorganisms usually affect their appearance and clinical resistance to antibiotics, and there are some who are placed in an environmental context, evaluating methods of detection or enumeration in waters for recreational use. It is increasing the importance of this microorganism as a causative agent of infections acquired in hospitals, but the interest in this kind of study lies in its high natural resistance to multiple antimicrobials and their ability to acquire and transfer the resistance. Despite that Enterococcus is a microorganism introduced to the marine ecosystem by contamination with organic wastes, there are few reports on studies of antimicrobial resistance of the Enterococcus genus water samples from the sea, being necessary to this type of research that allows us to know the importance of these microorganisms in these environments
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Böttcher, Daiana Elisabeth. "Avaliação do efeito da presença do biofilme de Enterococcus faecalis no canal radicular sobre a manutenção da substantividade da clorexidina a 2% : estudo in vitro." reponame:Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da UFRGS, 2014. http://hdl.handle.net/10183/110768.
Full textAbstract:
Introdução: O objetivo do presente estudo foi correlacionar o efeito antimicrobiano residual e a substantividade da solução de clorexidina a 2%, em dentina humana de dentes extraídos e contaminada com E. faecalis, por 48 horas, 7 e 30 dias. Metodologia: Cento e vinte e três dentes humanos extraídos foram utilizados para esse estudo. As amostras foram divididas em quatro grupos conforme a solução irrigadora utilizada (CHX 2% ou soro fisiológico) e na presença ou ausência do biofilme de Enterococcus faecalis. As amostras foram mantidas em contato com a respectiva solução durante 5 minutos. Cada grupo foi distribuído aleatoriamente em 3 subgrupos de acordo com o período de avaliação (n=10). A quantidade de CHX presente foi avaliada através de cromatografia líquida de alta eficiência (HPLC) e a viabilidade bacteriana foi analisada através de microscópio confocal a laser (CLSM). A análise estatistica foi feita através dos testes de Kruskal-Wallis e Mann-Whitney U (P<.05) e teste de correlação de Spearman (P<.01). Resultados: Houve uma correlação negativa entre o percentual de células viáveis e a quantidade de CHX remanescente (P = .000). A CHX reduziu significativamente o percentual de células viáveis em relação ao soro após 48 horas (P = .007). A diferença foi mantida no período de 7 dias (P = .001). Após 30 dias, o grupo CHX apresentou um aumento da viabilidade bacteriana tornando-se semelhante ao soro (P = .623). Simultaneamente, a quantidade de CHX reduziu significativamente após 30 dias (P = .000). Conclusão: Os resultados do presente estudo indicam que a CHX a 2% foi detectada nos periodos de 48 horas e 7 dias, mantendo reduzido o percentual de células viáveis. A presença de microrganismos na dentina humana não alterou a quantidade de CHX residual.Introduction: The aim of this study was to correlate the bacterial viability and the presence of 2% chlorhexidine (CHX) on dentin by means of confocal laser scanning microscope (CLSM) and high-performance liquid chromatography (HPLC) for 48 hours, 7 and 30 days. Methods: One hundred twenty three extracted human teeth were used. Samples were divided into 4 groups according to the solution (CHX or saline) and the presence of Enterococus faecalis biofilm. Samples were kept in contact with 5mL of the solution for 5 minutes. Each group was divided into 3 subgroups according to the evaluation period (n = 10). Statistical analysis was performed by using the Kruskal- Wallis, Mann-Whitney U tests (P < .05) and Spearman’s Rank Correlation Coefficient (P < .01). Results: There was a negative correlation between the percentage of live cells and the amount of remaining CHX (P = .000). CHX significantly reduced the percentage of viable cells compared to saline after 48 hours (P = .007). Differences were maintained in the 7-day evaluation (P = .001). After 30 days, CHX group presented an increase of viable cells, thereby becoming similar to saline (P = .623). Simultaneously, remaining CHX significantly reduced in the 30-day specimens (P = .000). Conclusion: The results of this study indicate that 2% CHX solution was detected for 48 hours and 7 days, keeping a low percentage of viable cells. The presence of microorganisms on human dentin did not affect 2% chlorhexidine maintenance.
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Tse, Chee-choong Micheal, and 謝志聰. "Effect of ultrasonic agitation on enterococcus faecalis biofilm." Thesis, The University of Hong Kong (Pokfulam, Hong Kong), 2010. http://hub.hku.hk/bib/B45165993.
Full text
6
Abadía, Patiño Lorena. "Caractérisation de l'opéron vanE chez Enterococcus faecalis BM4405." Paris 7, 2003. http://www.theses.fr/2003PA077001.
Full text
7
Diederich, Ann-Kristin [Verfasser], and Johannes [Akademischer Betreuer] Hübner. "Membrane lipids of Enterococcus faecalis as microbial pathogens." Freiburg : Universität, 2016. http://d-nb.info/1119452708/34.
Full text
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Sumi, Jáuregui Ada Lizbeth. "Transferencia de plásmidos con resistencia a antibióticos en especies de Enterococcus provenientes del mar de Lima." Bachelor's thesis, Universidad Nacional Mayor de San Marcos, 2008. https://hdl.handle.net/20.500.12672/907.
Full textAbstract:
El género Enterococcus es conocido por ser de origen fecal o intestinal, pero tiene una amplia distribución en la naturaleza y se le puede encontrar en suelos, aguas, plantas y en productos alimenticios, siendo capaz de sobrevivir en medios poco enriquecidos. Los estudios reportados sobre estos microorganismos generalmente inciden en su aspecto clínico y su resistencia a antibióticos, y algunos se ubican en un contexto ambiental evaluando métodos para su detección o enumeración para uso en aguas recreacionales. Está aumentando la importancia de este microorganismo como agente causal de infecciones adquiridas en hospitales, pero el interés de estudio en este género radica en su alta resistencia natural a múltiples antimicrobianos y a su capacidad de adquirir y transferir dicha resistencia.
Se sabe que Enterococcus es un microorganismo introducido al ecosistema marino debido a la contaminación de éste ambiente con desechos orgánicos, pero son pocos los reportes sobre estudios de resistencia antimicrobiana de éste género provenientes de muestras de agua de mar, siendo necesario este tipo de investigación que nos permita conocer la importancia de estos microorganismos en estos ambientes.The genus Enterococcus is recognized as being of fecal origin but have a wide distribution in nature, they can be found in soil, water, plants and food products, being able to survive in low-enriched media. Studies on these microorganisms usually affect their appearance and clinical resistance to antibiotics, and there are some who are placed in an environmental context, evaluating methods of detection or enumeration in waters for recreational use. It is increasing the importance of this microorganism as a causative agent of infections acquired in hospitals, but the interest in this kind of study lies in its high natural resistance to multiple antimicrobials and their ability to acquire and transfer the resistance. Despite that Enterococcus is a microorganism introduced to the marine ecosystem by contamination with organic wastes, there are few reports on studies of antimicrobial resistance of the Enterococcus genus water samples from the sea, being necessary to this type of research that allows us to know the importance of these microorganisms in these environments.
Tesis
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Neto, Manoel Matos. "Avaliação in vitro da eficácia de técnicas endodônticas de preparo mecânico na redução de Enterococcus faecalis." Universidade de Taubaté, 2007. http://www.bdtd.unitau.br/tedesimplificado/tde_busca/arquivo.php?codArquivo=483.
Full textAbstract:
O preparo mecânico tem por objetivo a modelagem dos canais radiculares e redução de microrganismos nele presentes. Para sua execução foram utilizados instrumentos endodônticos confeccionados em aço inoxidável ou ligas de níquel-titânio. Esse
estudo tem como objetivo avaliar a eficácia de três sistemas de preparo mecânico na redução da contagem de Enterococcus faecalis no interior de canais radiculares. Para isso foram utilizados 24 dentes humanos unirradiculares, divididos em três grupos: G1 - instrumentação com o sistema ProTaper rotatório, G2 - com sistema ProTaper manual e G3 - com limas tipo Kerr manuais. Os canais radiculares foram contaminados com Enterococcus faecalis, e após formação de biofilme, submetidas ao preparo mecânico. As unidades formadoras de colônia foram contadas antes e depois da instrumentação e a porcentagem de redução calculada. Os resultados demonstraram que todos os sistemas reduziram significantemente a quantidade de microrganismos dentro do canal radicular. Contudo, quando se comparou a redução promovida pelos sistemas entre si não houve diferença significativa. O estudo confirmou a eficácia do preparo mecânico, entretanto nenhum dos sistemas avaliados foi superior ao outro na redução do número de Enterococcus faecalis no interior dos canais radiculares.The objects of mechanical preparation are to model root canals and reduce the number of microorganisms present in them. For this purpose, endodontic instruments made of stainless steel or nickel-titanium alloys are used. The aim of this study was to assess the efficacy of three systems of mechanical preparation for reducing the counting of Enterococcus faecalis inside root canals. To do this, 24 single rooted human teeth were used, divided into three groups: G1 instrumentation with the ProTaper rotary system, G2 with the manual ProTaper system and G3 manual Kerr type files. The root canals were contaminated with Enterococcus faecalis, and after biofilm had formed, they were submitted to mechanical preparation. The colony forming units were counted before and after instrumentation and the percentage of reduction was calculated. The results demonstrated that all the systems significantly reduced the number of microorganisms inside the root canal. However, when the reduction promoted by the systems was compared among them, there was no significant difference. The study confirmed the efficacy of mechanical preparation, however, none of the assessed systems was superior to the other for reducing the number of microorganisms inside root canals.
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Arruda, Theodora Thays Prado. "Perfil de sensibilidade de cepas planctÃnicas e biofilmes de enterococcus faecalis frente a desafios antimicrobianos." Universidade Federal do CearÃ, 2007. http://www.teses.ufc.br/tde_busca/arquivo.php?codArquivo=441.
Full textAbstract:
CoordenaÃÃo de AperfeiÃoamento de Pessoal de NÃvel SuperiorEnterococcus faecalis foi sugerido como sendo um importante agente etiolÃgico do insucesso endodÃntico. Foi encontrado no sistema de canais radiculares em um percentual de 22% a 77% e foi associado com a formaÃÃo de estruturas chamadas biofilmes. O objetivo do presente estudo foi avaliar, in vitro, a efetividade de cimentos endodÃnticos, hipoclorito de sÃdio a 2,5% e soluÃÃo do Ãleo essencial da Lippia sidoides a 0,5% na eliminaÃÃo de biofilmes de E. faecalis. Material clÃnico foi coletado de 37 pacientes com infecÃÃes crÃnicas do canal radicular e 14 cepas de Enterococcus faecalis foram isoladas (37,8%). Biofilmes de uma cepa de coleÃÃo de cultura (ATCC) e de uma cepa clÃnica multiresistente (Isolado 12) foram incubados por 8 dias. Esse perÃodo foi selecionado baseado em estudo cronolÃgico do desenvolvimento de biofilmes de Enterococcus faecalis atravÃs de Microscopia de ForÃa AtÃmica. Foi verificado que houve uma reduÃÃo significativa no nÃmero de bactÃrias quando os biofilmes foram expostos aos cimentos endodÃnticos em relaÃÃo ao controle para as duas cepas testadas (p<0.001). Analisando a cepa ATCC, foi verificado que o cimento endodÃntico Epiphany apresentou aÃÃo similar ao cimento Endofill (p>0.05); resultado semelhante foi encontrado para o isolado 12. Quando a susceptibilidade das cepas frente aos cimentos endodÃnticos foi comparada verificou-se que o Isolado 12 foi menos susceptÃvel comparado à cepa ATCC (p<0.001). Observou-se que a soluÃÃo do Ãleo essencial de Lippia siodides a 0,5% apresentou aÃÃo similar ao hipoclorito de sÃdio a 2,5% quando os biofilmes das duas cepas foram expostos por 10 minutos a essas substÃncias (p<0.001). Comparando a susceptibilidade das duas cepas Ãs soluÃÃes testadas, nÃo houve diferenÃa entre elas (p>0.05)
Enterococcus faecalis has been suggested to be an important etiological agent in endodontic failure. It has been found in the root canal system in a perceptual ranging from 22% to 77% and it has been associated to organisms structured in biofilms. The aim of the present study was to evaluate, in vitro, the effectiveness of endodontic sealers, 2.5% sodium hypochlorite, and 0.5% Lippia sidoides essential oil in eliminating E. faecalis biofilms. Clinical material was collected from 37 patients with root canal chronic infections and 14 Enterococcus faecalis strains were isolated (37.8%). Biofilms from a reference (ATCC) and a clinical multirresistant strain (isolate 12 ) were grown for 8 days. This period was selected based on a chronological study of the Enterococcus faecalis biofilm development through Atomic Force Microscopy. It was verified that there was a significant reduction of the bacteria number when the biofilms were exposed to the endodontic sealers related to the control for the two tested strains (p<0.001). Analyzing the ATCC strain, it was seen that the Epiphany endodontic sealer presented similar action compared to Endofill (p>0.05), similar result was found for Isolate 12. When the strains susceptibilities against the sealers was compared it was verified that the isolate 12 was less susceptible than the ATCC strain (p<0.001). It was verified that the 0.5% essential oil solution of Lippia siodides presented a similar action to 2.5% sodium hypochlorite when the biofilm of ATCC strain and isolate 12 were exposed for 10 minutes to this substances (p<0.001). Comparing the susceptibility of the two strains to the solutions tested, there was no difference between them (p>0.05)
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Andrade, Aurimar de Oliveira. "Enterococcus faecalis: fatores de virulência relacionados aos processos de natureza endodôntica." Universidade do Estado do Rio de Janeiro, 2014. http://www.bdtd.uerj.br/tde_busca/arquivo.php?codArquivo=8888.
Full textAbstract:
Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado do Rio de JaneiroO objetivo principal deste estudo foi investigar a interação de 24 cepas de E. faecalis isoladas de infecções endodônticas primárias às proteínas de matriz dentinária, como também a moléculas de matriz presentes em lesões de endocardites. A análise desta interação foi feita através de técnica enzimática, com confirmação pela técnica de fluorescência. Além disto, foi realizada a confirmação do isolamento da espécie E. faecalis, através da técnica de PCR para o gene 16SrRNA e a análise da presença de genes de virulência da referida espécie microbiana para aderência às supostas proteínas de matriz incluindo às de ligação ao colágeno (ace, gelE, esp, agg e efaA). O maior padrão de interação das cepas ocorreu com a fibronectina (83,4%), seguido pelo fibrinogênio (62,5%) e colágeno humano tipo I (52%). Curiosamente, a aderência observada para o colágeno do tipo I, foi de pequena magnitude, quando comparado com a amostra padrão da ATCC 29212. As cepas ATCC 29212, A1, A43 e A68 interagiram com todas as proteínas de matriz utilizadas neste estudo. Um percentual expressivo das cepas testadas apresentou amplificação para efaA (86,9%) e para ace (73,9%). Paralelamente, todas as cepas apresentaram amplificação para gelE e foram negativas para os genes agg e esp. Adicionalmente, não houve correlação entre a detecção dos genes de virulência e a interação às proteínas de matriz, evidenciando que, mesmo com a detecção dos genes nas amostras, se faz necessário avaliar a expressão gênica por qPCR.
The main objective of this study was to investigate the interaction of 24 E. faecalis strains isolated from primary endodontic infections with dentin matrix proteins, as well as to the matrix molecules present in endocarditis lesions. The analysis of this interaction was made by enzyme assay, with confirmation by the fluorescence technique. In addition, confirmation of the isolation of the species E. faecalis was performed by PCR for 16S rRNA gene and the analysis of the presence of virulence genes for matrix proteins including type I collagen (ace, gelE, esp , agg and efA). The strains interacted mostly with fibronectin (83.4%), followed by fibrinogen (62.5%) and human collagen type I (52%). Interestingly, the adhesion to type I collagen occurred in small magnitude, when compared with the E. faecalis type strain ATCC 29212. The strains ATCC 29212, A1, A43 and A68 interacted with all matrix proteins investigated in this study. A significant percentage of the tested strains showed amplification for efaA (86.9%) and ace (73.9%). In parallel, all strains showed amplification for gelE and were negative for the genes esp and agg. Additionally, there was no correlation between the detection of virulence genes and the interaction with matrix proteins, showing that even with the detection of genes in a particular strain, it is necessary to evaluate the gene expression by qPCR.
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Yerena, Huescas Cristopher Gerardo. "Detecção de CRISPRs em Enterococcus faecalis e Enterococcus faecium e bacteriófagos PHI2AB, PHI3AB e PHI4A de Enterococcus faecalis isolados a partir de amostras alimentares, animais e clínicas." reponame:Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da UFRGS, 2017. http://hdl.handle.net/10183/157987.
Full textAbstract:
Introdução. As Repetições Palindrômicas Curtas Agrupadas e Regularmente Interespaçadas (CRISPRs) são DNAs que consistem de repetições de nucleotídeos. Existem 3 tipos: CRISPR1-CAS, CRISPR3-CAS e CRISPR2. Os bacteriófagos são partículas virais que infectam bactérias. Os bacteriófagos SAP6, IME-EF1, BC-611, VD-13 e F4 são encontrados em E. faecalis assim como FL1ABC, FL2AB, FL3AB e FL4A. Objetivo. Identificar e caracterizar as classes de CRISPRs e bacteriófagos de E. faecalis e E. faecium isoaldos de amostras alimentares, clínicas e fezes de animais. Materiais e métodos. Foram usadas DNA de 153 isolados, sendo 98 de E. faecalis e 55 de E. faecium. A técnica de detecção foi a PCR utilizando iniciadores para os genes CRISPR1-Cas, CRISPR2, CRISPR3-cas e bacteriófagos, seguido por electroforese em gel de agarose. Resultados. Para E. faecalis foram detectadas 58 isolados que amplifacaram para o gene CRISPR1-Cas; 87 para CRISPR2 e 13 para CRISPR3-Cas. Para E. faecium foram detectadas 4 isolados positivos para o gene CRISPR1-Cas; 18 para CRISPR2 e 1 para CRISPR3-CAS. O bacteriófago FL2ABfoi detectado em 13 isolados de E. faecalis; o bacteriófago FL3AB em 13 isolados de E. faecalis e o FL4A em 28 isolados de E. faecalis. Conclusão. Neste estudo nos encontramos diferentes proporções e distribuições dos genes CRISPRs em E. faecalis e E. faecium. O bacteriófago FL4A apresentou-se como o mais frequente entre os bacteriófagos avalados.Introduction. The CRISPR are small portions of DNA consisting of nucleotide repeats. There are three types of CRISPRs recognized: CRISPR-associated genes cas: CRISPR1-CAS and CRISPR3-CAS and a orphan locus lacking cas genes: CRISPR2. Bacteriophages are viral particles that infect bacterial. The bacteriophages SAP6, IME-EF1, BC-611 and F4 are found in E. faecalis as well as FL1ABC, FL2AB, FL3AB, FL4A. Objectivy: To Identify and to characterize CRISPRs genes and bacteriophage genes in E. faecalis and E. faecium isolated from food, clinical and animal fecal samples. Materials and methods. A total of 153 DNA samples were used, 98 from E. faecalis and 55 from E. faecium. The PCR technique using primers was used to detect the genes CRISPR1-Cas, CRISPR2, CRISPR3-cas and bacteriophages, followed the agarose gel electrophoresis. Results. To E. faecalis was detected 58 isolates that amplified the CRISPR1-Cas genes, 87 to CRISPR2 and 13 to CRISPR3-Cas. To E. faecium was detected 4 isolates positive to CRISPR1-Cas gene, 18 to CRISPR2 e 1 to CRISPR3-CAS. The FL2AB bacteriophage was detected in 13 isolates of E. faecalis; the FL3AB bacteriophage in 13 isolates of E. faecalis and the FL4A in 28 isolates of E. faecalis. Conclusion. In this work, we found out different proportions and distributions of CRISPRs genes in E. faecalis e E. faecium. The FL4A bacteriophage showed a high frequency among the bacteriophages tested.
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Conde, Estévez David. "Factores de riesgo para la adquisición de Bacteriemia por Enterococcus faecalis y Enterococcus faecium." Doctoral thesis, Universitat Autònoma de Barcelona, 2012. http://hdl.handle.net/10803/284486.
Full textAbstract:
Las infecciones nosocomiales son una causa frecuente de incremento de estancia hospitalaria, costos sanitarios y mortalidad. En la actualidad, el enterococo es uno de los microorganismos implicados con mayor frecuencia en infecciones nosocomiales. Con frecuencia estas infecciones son difíciles de tratar debido la resistencia múltiple de estos microorganismos frente a los antibióticos convencionales. La literatura disponible sobre las infecciones producidas por este microorganismo es limitada. Este problema está más acentuado cuando se trata de conocer las características de infecciones producidas en localizaciones concretas, como es el caso de las bacteriemias.
Es ampliamente conocido que E. faecalis tiene una mayor susceptibilidad a la ampicilina que E. faecium. Debido a que la diferencia en la susceptibilidad a los antimicrobianos entre las diferentes especies del género Enterococcus puede tener un impacto en la práctica asistencial, se ha realizado un estudio comparativo entre las características clínicas y microbiológicas y el pronóstico de los pacientes con bacteriemias por E. faecalis frente a E. faecium ya que se desconoce si estas características son coincidentes con lo reportado en la literatura médica. Se realizó así mismo un estudio similar centrado en los pacientes con cáncer con aislamiento de enterococos sensibles a vancomicina. Éste último es el único estudio que se ha realizado hasta la fecha en esta población analizando específicamente bacteriemias por Enterococcus sensibles a vancomicina, los más predominantes en España y Europa. El conocimiento de estos factores puede ser utilizado como mecanismo de alerta para la sospecha de bacteriemia por este microorganismo y así poder iniciar un tratamiento empírico adecuado temprano. El tratamiento empírico adecuado está directamente relacionado con el aumento de supervivencia en este tipo de infecciones.
Para responder a estos objetivos se realizó un estudio retrospectivo observacional de cohortes realizado en el Hospital del Mar entre el 1 de enero del 2000 y el 31 de diciembre de 2006. Se incluyeron todos los episodios de bacteriemia con aislamiento de E.faecalis o E.faecium en hemocultivo. De cada paciente se recogieron datos demográficos, clínicos y bioquímicos al ingreso y en la fecha de realización del hemocultivo, historia de ingresos previos, unidad de hospitalización (médica, quirúrgica, UCI), posibles factores desencadenantes, enfermedades de base, exposición previa a antibióticos durante el ingreso actual, características microbiológicas y mortalidad. Al ingreso se clasificó la gravedad de los pacientes mediante la puntuación del Simplified Acute Physiology Score (SAPS II)
Se estudiaron un total de 228 episodios de bacteriemia: 168 de E.faecalis y 60 de E.faecium. Todos los aislamientos de E.faecalis fueron sensibles a ampicilina y sólo el 25% lo fue en el grupo de E.faecium. Hubo un único caso anecdótico de resistencia a vancomicina que se trataba de una cepa de E.faecium. Las variables que se asociaron de manera independiente a la adquisición de bacteriemia por E.faecium cuando se compararon con aquéllas producidas por E.faecalis fueron el ingreso en una unidad quirúrgica (OR: 4,223; p=0,001), más de cinco días de tratamiento con cefalosporinas o carbapenémicos (OR: 2,564; p=0,013 y OR: 2,652; p=0,027 respectivamente), la administración previa de penicilinas (OR: 2,008; p=0,044); SAPS II >30 al ingreso (OR=3,530; p=0,001) y enfermedad hepática de base (OR: 3,754; p<0,001).
En el caso de pacientes onco-hematológicos, se analizaron un total de 73 pacientes: 54 causados por E.faecalis y 19 causados por E.faecium. En el estudio univariado, el mayor SAPS, diabetes mellitus y exposición previa a penicilinas fueron factores diferenciales en el grupo de E.faecium. Los factores independientes relacionados con el aislamiento de E.faecium fueron la exposición previa a penicilinas (OR: 6,479; p=0,003) y SAPS II>34 (OR:6,896; p=0,009).
Los resultados de ambos estudios son de vital importancia a la hora de elegir que antibiótico utilizar en primera línea y de manera empírica en pacientes ingresados en nuestro hospital y han dado lugar a la modificación de los protocolos actuales de tratamiento empírico de pacientes con infección nosocomial en nuestro hospital. Además, se trata de una línea de investigación que está abierta a la inclusión de futuros estudios que se complementen con los efectuados en este proyecto de tesis doctoral.Nosocomial infections are a common cause of increased hospital stay, health care costs and mortality. Currently, the Enterococcus spp. is one of the most common microorganisms involved in nosocomial infections. Often these infections are difficult to treat because of the multiple resistances of these microorganisms to conventional antibiotics. The literature on infections caused by this microorganism is limited. This problem is more pronounced when it comes to know the characteristics of infections in specific locations, as is the case of bacteraemia. It is widely known that E. faecalis have an increased susceptibility to ampicillin compared to E. faecium. Because the difference in antimicrobial susceptibility among different species of the genus Enterococcus can have an impact on clinical practice, it was performed a comparative study of clinical and microbiological characteristics and prognosis of patients with bacteraemia due to E. faecalis against E. faecium and it is unknown whether these features are consistent with those reported in the literature. A similar study focused on cancer patients with bacteraemia of vancomycin-susceptible enterococci was also carried out. To our knowledge, this is the first study evaluating this population with enterococcal bacteraemia susceptible to vancomycin, the most prevalent susceptible pattern in Spain and Europe. Previous knowledge of these factors can be employed as a warning mechanism for suspected bacteraemia in order to initiate early appropriate empiric therapy. Appropriate empirical treatment is directly related to increased survival in these infections. It was performed a retrospective observational cohort study conducted at the Hospital del Mar between 1 January 2000 and December 31, 2006. We included all episodes of bacteraemia with E.faecalis or E.faecium isolation in blood culture. It was collected demographic, clinical and biochemical data at admission date and the date of positive blood culture for Enterococcus spp., history of previous admissions, hospital ward (medical, surgical, ICU), other possible risk factors, underlying diseases, previous antibiotic treatment, microbiological characteristics, and mortality. On admission, severity of illness of each patient was classified by the Simplified Acute Physiology Score (SAPS II) It was assessed a total of 228 episodes of bacteraemia, 168 corresponding to E.faecalis and 60 to E.faecium. All isolates of E.faecalis were susceptible to ampicillin and only 25% was in the group E.faecium. There was one anecdotal isolated of E.faecium resistant to vancomycin. The independent factors associated with the acquisition of bacteriaemia of E.faecium when compared to those produced by E.faecalis were the surgical ward admission (OR: 4.223, p = 0.001), more than five days of previous treatment with cephalosporin or with carbapenem (OR: 2.564, P = 0.013 and OR: 2.652, p = 0.027 respectively), prior administration of penicillin (OR: 2.008, p = 0.044), SAPS II> 30 at admission (OR = 3.530, p = 0.001) and liver disease at baseline(OR: 3.754, p <0.001). In the case of onco-haematological patients, we analyzed a total of 73 patients: 54 caused by E.faecalis and 19 caused by E.faecium. In the univariate analysis, higher SAPS, comorbidity of diabetes mellitus and prior exposure to penicillins were distinctive factors in the group of E.faecium. The independent factors associated with the isolation of E.faecium were previous exposure to penicillin (OR: 6.479, p = 0.003) and SAPS II> 34 (OR: 6.896, p = 0.009). The results of both studies are of upmost importance to decide empirical antibiotic treatment in patients admitted to our hospital. In addition, these conclusions led to the modification of current protocols for empirical treatment of patients with nosocomial infections in our hospital. Furthermore, this line of research is open to the inclusion of future studies that complement those performed in this PhD project.
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Colonna, Giulia. "Attivita tirosina decarbossilasica di enterococcus faecalis in terreno sintetico." Bachelor's thesis, Alma Mater Studiorum - Università di Bologna, 2015. http://amslaurea.unibo.it/9476/.
Full textAbstract:
Le ammine biogene sono composti azotati a basso peso molecolare che vengono prodotti in seguito alla decarbossilazione degli aminoacidi da parte di specifici enzimi microbici della famiglia delle decarbossilasi. Questi composti sono presenti in diversi alimenti e, in particolare, in quelli fermentati. Nonostante la capacità dell’organismo di metabolizzare tali molecole tramite appositi sistemi di detossificazione una loro eccessiva assunzione provoca sintomatologie deleterie per la salute umana.
La tiramina, in particolare, è una delle ammine biogene attualmente più studiate in ragione della diffusa presenza dell’enzima tirosina decarbossilasi (tyrDC) nel pool enzimatico di diversi batteri lattici, specialmente quelli appartenenti al genere Enterococcus. Seppure in letteratura vi siano numerosi studi riguardanti il rapporto fra contenuto di tiramina e l’attività degli enterococchi in molti alimenti, ad oggi sono ridotte le informazioni inerenti la regolazione e il ruolo fisiologico di tale molecola per la cellula microbica.
Alla luce di tali considerazioni questa tesi mi sono occupata di approfondire le conoscenze relative l’attività dell’enzima tyrDC in un terreno di coltura a composizione nota da parte dei due ceppi di Enterococcus faecalis EF37 e ATCC29212. A tal fine i ceppi sono stati inoculati in cinque diversi terreni e incubati a tre diverse temperature (20°C, 30°C e 40°C), dopo averli pre-coltivati in terreni contenenti o meno tirosina, allo scopo di valutare se la fase di pre-adattamento fosse in grado di influenzare le performance dei ceppi considerati.
Dai risultati ottenuti è emerso che è presente un’estrema eterogeneità nell’attività dell’enzima tyrDC anche all’interno della medesima specie, infatti se il ceppo EF37 ha performance migliori in termini di decarbossilazione quando pre-adattato, il ceppo ATCC29212 non sembra essere influenzato da questo fattore, seppur entrambi presentino una crescita cellulare più accentuata quando pre-adattati. È stata inoltre confermata, alle condizioni adattate, la capacità di produrre 2-feniletilamina da parte del solo ceppo EF37.
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Hébert, Laurent. "Etude de la résistance au lysozyme chez Enterococcus faecalis." Phd thesis, Université de Caen, 2008. http://tel.archives-ouvertes.fr/tel-00787051.
Full textAbstract:
Lors des deux dernières décennies, Enterococcus faecalis a émergé comme une cause majeure d'infections nosocomiales. E. faecalis est une des rares bactéries presque complètement résistante à l'un des composés les plus importants et les plus répandus du système immunitaire inné : le lysozyme. C'est donc l'étude des causes de cette résistance qui nous a intéressé au cours de ce travail de thèse. Nous avons identifié deux gènes nommés EF0783 et EF1843, potentiellement impliqués dans la résistance au lysozyme. Les protéines codées par ces gènes partagent respectivement des homologies avec une O-acétyltransférase du peptidoglycane (OatA) de Staphylococcus aureus et une N-acétylglucosamine déacétylase (PgdA) de Streptococcus pneumoniae. Nous avons construit les mutants correspondants (DEF0783 et DEF1843) et le double mutant DEF0783-DEF1843. Nous avons montré que la mutation de EF0783 entraînait la perte des groupements O-acétyles du peptidoglycane ainsi qu'une diminution de la résistance au lysozyme. Par contre, aucun effet sur la résistance au lysozyme n'a été associé au gène EF1843. De plus, la délétion de EF0783 et/ou de EF1843 affecte significativement la capacité d'E. faecalis à survivre dans des macrophages murins. Bien que EF0783 soit effectivement impliqué dans la résistance au lysozyme, la Oacétylation et la dé-N-acétylation ne sont pas les principaux mécanismes conférant les hauts niveaux de résistance au lysozyme à E. faecalis. Des expériences pour identifier d'autres facteurs expliquant cette résistance au lysozyme sont à envisager.
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Moura, Tiane Martin de. "Análise transcricional dos fatores de virulência de Enterococcus faecalis." reponame:Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da UFRGS, 2014. http://hdl.handle.net/10183/109722.
Full textAbstract:
Enterococcus faecalis estão entre as principais causas de infecções hospitalares em todo o mundo e é uma das mais importantes na área clínica devido à presença de inúmeros fatores de virulência que reforçam sua patogenicidade. Estudos mostram que concentrações subinibitórias de antimicrobianos podem alterar a resposta transcricional e fenotípica de bactérias, porém pouco se sabe sobre como a vancomicina pode afetar a expressão gênica nos microrganismos portadores de seus genes de resistência (genes van). Portanto, este trabalho objetivou avaliar presença e expressão de genes vanC em E. faecalis vancomicina-susceptíveis e avaliar o comportamento de isolados Enterococos Vancomicina-Resistentes (EVR) na ausência e presença de concentrações subinibitórias de vancomicina por PCR quantitativa. Identificamos a presença e a expressão de genes vanC em E. faecalis vancomicina-susceptíveis, sendo estes genes específicos para as espécies Enterococcus gallinarum e Enterococcus casseliflavus, sugere-se que o E. faecalis possa tê-los adquirido por transferência horizontal. Verificamos que a presença de vancomicina in vitro é capaz de interferir na modulação de genes de virulência em isolados EVR, porém não interfere na formação de biofilme destes isolados. Embora os dados aqui apresentados refiram-se a testes in vitro, podemos inferir que os genes vanC estão sendo transferidos para outras espécies e que a vancomicina pode estar contribuindo para o aumento na expressão de fatores de virulência in vivo, levando ao agravamento de quadros clínicos.Enterococcus faecalis are among the leading causes of nosocomial infections worldwide and is one of the most important in the clinical area due to the presence of numerous virulence factors that enhance the pathogenicity. Studies show that sub-inhibitory concentrations of antibiotics can alter the transcriptional and phenotypic response of bacteria, but little is known about the effect of vancomycin in gene expression in microorganism bearers of their resistance genes (genes van). Therefore, this study aimed to evaluate the presence and expression of vanC genes in E. faecalis vancomycin susceptible and evaluate the behavior of vancomycin resistant enterococci (VRE) strains in the absence and presence of sub-inhibitory concentrations of vancomycin for Quantitative-PCR. We have identified the presence and expression of vanC genes in E. faecalis which are specific to Enterococcus gallinarum and Enterococcus casseliflavus species, it is suggested that the E. faecalis may have acquired these genes by horizontal gene transfer. We found that the presence of vancomycin in vitro is able of interfering with modulation of expression of virulence genes in VRE strains but does not interfere in the biofilm formation of these isolates. Although the data presented here were obtained from in vitro tests, we can infer that the vanC genes are being transferred to other species and that vancomycin may be contributing to the increase in the expression of virulence factors in vivo, leading to worseres clinical outcomes.
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Hébert, Laurent. "Étude de la résistance au lysozyme chez Enterococcus faecalis." Caen, 2008. http://www.theses.fr/2008CAEN2010.
Full textAbstract:
Lors des deux dernières décennies, Enterococcus faecalis a émergé comme une cause majeure d'infections nosocomiales. E. Faecalis est une des rares bactéries presque complètement résistante à l'un des composés les plus importants et les plus répandus du système immunitaire inné : le lysozyme. C'est donc l'étude des causes de cette résistance qui nous a intéressé au cours de ce travail de thèse. Nous avons identifié deux gènes nommés EF0783 et EF1843, potentiellement impliqués dans la résistance au lysozyme. Les protéines codées par ces gènes partagent respectivement des homologies avec une O-acétyltransférase du peptidoglycane (OatA) de Staphylococcus aureus et une N-acétylglucosamine déacétylase (PgdA) de Streptococcus pneumoniae. Nous avons construit les mutants correspondants (DeltaEF0783 et DeltaEF1843) et le double mutant DeltaEF0783-DeltaEF1843. Nous avons montré que la mutation de EF0783 entraînait la perte des groupements O-acétyles du peptidoglycane ainsi qu'une diminution de la résistance au lysozyme. Par contre, aucun effet sur la résistance au lysozyme n'a été associé au gène EF1843. De plus, la délétion de EF0783 et/ou de EF1843 affecte significativement la capacité d'E. Faecalis à survivre dans des macrophages murins. Bien que EF0783 soit effectivement impliqué dans la résistance au lysozyme, la O-acétylation et la dé-N-acétylation ne sont pas les principaux mécanismes conférant les hauts niveaux de résistance au lysozyme à E. Faecalis. Des expériences pour identifier d'autres facteurs expliquant cette résistance au lysozyme sont à envisagerOver the two last decades, Enterococcus faecalis has emerged as major cause of nosocomial infections. E. Faecalis is also a member of the few bacteria that are almost completely resistant to one of the most important and widespread compounds of the constitutive defence system: the lysozyme. Therefore, the bases of this high resistance to lysozyme were investigated within this thesis work. We identified two genes referred as EF0783 and EF1843, potentially involved in lysozyme resistance. Proteins encoded by these genes share homology with Staphylococcus aureus peptidoglycan O-acetyltransferase (OatA) and Streptococcus pneumoniae N-acetylglucosamine deacetylase (PgdA), respectively. We constructed the corresponding mutants (DeltaEF0783 and DeltaEF1843) and the double mutant DeltaEF0783-DeltaEF1843. We showed that EF0783 mutation leads to the loss of O-acetyl groups from the peptidoglycan and to a decrease of the lysozyme resistance. On the other hand, no effect on lysozyme sensitivity could be associated to the EF1843 gene. Moreover, the EF0783 and/or EF1843 deletions significantly affect the ability of E. Faecalis to survive within murine macrophages. While EF0783 is involved in the lysozyme resistance, the peptidoglycan O-acetylation and de-N-acetylation are not the main mechanisms conferring high levels of lysozyme resistance to E. Faecalis. Experiments aiming to identify additional factors explaining this lysozyme resistance have to be considered
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Spiess, Meike [Verfasser], Johannes [Akademischer Betreuer] Hübner, and Türkân [Akademischer Betreuer] Sakinç-Güler. "Die Rolle der Glykolipide bei Enterococcus faecalis-assoziierten Harnwegsinfektionen." Freiburg : Universität, 2017. http://d-nb.info/1238517129/34.
Full text
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Chávez, Andrade Gisselle Moraima [UNESP]. "Eficácia da irrigação ultrassônica passiva na limpeza e eliminação de Enterococcus faecalis dos canais radiculares." Universidade Estadual Paulista (UNESP), 2012. http://hdl.handle.net/11449/90409.
Full textAbstract:
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Previous issue date: 2012-03-21Bitstream added on 2014-06-13T19:11:10Z : No. of bitstreams: 1
chavezandrade_gm_me_arafo.pdf: 525015 bytes, checksum: e3ea9f8a7b0458b73d6f8fccb2f04314 (MD5)Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES)
O objetivo deste estudo foi avaliar a eficácia da Irrigação Ultrassônica Passiva (IUP) na limpeza e eliminação Enterococcus faecalis de canais radiculares, em comparação à Irrigação Manual Convencional (IMC). O estudo foi dividido em dois capítulos. No capítulo I, foram utilizadas raízes de 75 dentes unirradiculados humanos extraídos. Após o preparo biomecânico, os espécimes foram divididos em cinco microplacas de cultura e esterilizados em óxido de etileno. Os canais radiculares foram contaminados com Enterococcus faecalis (ATCC 29212) e incubados a 37ºC durante 21 dias. As microplacas com os espécimes foram divididas em cinco grupos de acordo com o protocolo de irrigação utilizado (n=15): G1- IUP com solução salina; G2- IUP com NaOCl 1%; G3- IMC com solução salina; G4- IMC com NaOCl 1%; G5- controle (sem irrigação). Foram realizadas três coletas microbiológicas: inicial (após 21 dias de contaminação do canal), imediatamente após irrigação e final (após 7 dias dos tratamentos realizados). Após diluições decimais seriadas e semeadura, foi determinado o número de unidades formadoras de colônia por mililitro de solução (UFC/mL). No capítulo II, foram utilizadas raízes de dentes artificiais unirradiculados. Após o preparo dos canais radiculares, foram realizados quatro canais laterais nos terços apical e médio da raiz, nas superfícies vestibular e lingual. Posteriormente, os canais foram preenchidos com uma solução de contraste radiológico. Os espécimes foram divididos aleatoriamente em três grupos de acordo com o protocolo de irrigação (n=08): GI- IMC com agulha 30G, GII- IUP1 com fluxo intermitente, GIII- IUP2 com fluxo contínuo. Antes e após irrigação, os dentes foram radiografados no sentido proximal utilizando...
The aim of this study was to evaluate the cleaning efficacy and elimination of Enterococcus faecalis from the root canal provided by passive ultrasonic irrigation (PUI) compared with conventional needle irrigation (CNI). The study was divided into two chapters. In chapter I, seventy-five extracted human single-rooted teeth were used. After root canal instrumentation, specimens were randomly divided into cell culture microplates. The microplates containing the specimens were wrapped and sterilized by ethylene oxide. Root canals were inoculated with Enterococcus faecalis (ATCC 29212) and incubated at 37ºC for 21 days. The microplates containing the roots were randomly divided in five groups, according to the irrigation method: G1- PUI with saline solution, G2- PUI with 1% NaOCl, G3- CNI with saline solution, G4- CNI with 1% NaOCl, G5- control (no irrigation). Microbiological samples were collected at three time points: initial (21 days after inoculation), post-irrigation (immediately after irrigation), and final (7 days after irrigation). After serial decimal dilutions, the inocula were seeded and was determined the number of CFU/mL. In chapter II, single-rooted artificial teeth were used. After root canal instrumentation, four lateral canals were performed in the middle and apical thirds. After, the root canals were filled with a contrast solution. The roots were randomly divided into three groups, according to the irrigation technique (n=8): GI- IMC with 30-gauge needle, GII- IUP1 with intermittent flow and GIII- IUP2 with continuous flow. Before and after irrigation, the roots were radiographed using a digital radiographic system. The areas of the... (Complete abstract click electronic access below)
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Gauntlett, Jonathan C., and n/a. "Biochemical and molecular characterisation of bacitracin resistance in Enterococcus faecalis." University of Otago. Department of Microbiology & Immunology, 2008. http://adt.otago.ac.nz./public/adt-NZDU20080404.143509.
Full textAbstract:
Resistance to the antibiotic bacitracin in Enterococcus faecalis strain AR01/DGVS is conferred by the genes bcrABD that are under the control of the regulatory protein BcrR. The N-terminal domain of BcrR has similarity to the helix-turn-helix motif of DNA-binding proteins and topological modelling predicts that the C-terminal domain contains four transmembrane α-helices. These data have led to the hypothesis that BcrR is a novel transmembrane transcriptional regulator which acts to both sense bacitracin and initiate transcription of bcrABD. The transcription of bcrABD in the presence of bacitracin results in the expression of a putative ABC transporter, BcrAB, that may function by the efflux of bacitracin from the cell membrane.
The aim of this study was to further characterise the mechanism of bacitracin resistance in E. faecalis and to conduct structural and functional studies with BcrR. A series of bcrA-lacZ transcriptional fusions were created to investigate the regulation of bcrABD transcription by BcrR and map the bcrABD promoter. We determined that BcrR activates bcrA-lacZ expression in response to bacitracin directly and not indirectly via the build-up of cell wall stress or cell wall precursors. A 69-bp region of the bcrABD promoter was required for activation of bcrA-lacZ expression. The introduction of mutations into this sequence demonstrated that two inverted repeat regions (viz. 5�-CTGACA(N)₆GTGTC-3�) were required for bcrA-lacZ expression. Furthermore, the creation of a bcrR::kan insertion mutant and a bcrR-lacZ transcriptional fusion revealed that bcrR is required for high-level bacitracin resistance in AR01/DGVS and that BcrR does not act to auto-regulate bcrR-lacZ expression.
To study BcrR function, we overproduced BcrR with a C-terminal hexa-histidine tag in Escherichia coli membranes, extracted the protein with n-dodecyl-β-D-maltoside, and subsequently purified it via Ni�⁺-NTA affinity and gel filtration chromatography to apparent homogeneity. Purified BcrR was reconstituted into liposomes and BcrR binding to bcrABD promoter DNA was analysed using gel-shift assays. We demonstrated that BcrR binds the bcrABD promoter in both the absence and presence of Zn�⁺-bacitracin and that the presence of the inverted repeat regions is necessary for binding. Purification of BcrR has also enabled us to commence structural studies toward obtaining the three dimensional structure of BcrR. We obtained crystals of BcrR that diffracted poorly to a resolution of 19 Å.
To characterise the function of the putative ABC type transporter (exporter) of bacitracin, BcrAB, we conducted transport assays with purified bacitracin A, fluorescently labelled FITC-bacitracin A, and radioactive ⁶�Ni�⁺-bacitracin. Transport assays conducted with radioactive ⁶�Ni�⁺-bacitracin and inverted membrane vesicles of E. coli, in which BcrABD had been recombinantly overproduced, displayed uptake of ⁶�Ni�⁺-bacitracin, suggesting that BcrAB functions as a transporter of bacitracin.
We conclude that BcrR is a transmembrane DNA-binding protein that functions as both a bacitracin sensor and regulator of bcrABD expression. We propose that BcrR binds to inverted repeat regions in bcrABD promoter to regulate bcrABD expression. Expression of bcrABD results in the production of BcrAB, which appears to be capable of bacitracin efflux (i.e. uptake in inverted membrane vesicles), conferring high-level bacitracin resistance to E. faecalis.
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Armijo, Pérez Jacqueline Andrea. "Presencia de Entorococcus faecalis en dientes con diagnóstico de periodontitis apical asintomática." Tesis, Universidad de Chile, 2012. http://repositorio.uchile.cl/handle/2250/133451.
Full textAbstract:
Trabajo de Investigación Requisito para optar al Título de Cirujano DentistaIntroducción: E. faecalis es un microorganismo anaerobio facultativo, Gram positivo, que forma parte de la microbiota normal de la cavidad oral y del tracto gastrointestinal, forma biofilm, presenta resistencia a factores del sistema inmune y antimicrobianos. Se aísla con mayor frecuencia en fracasos endodónticos y ocasionalmente en infecciones endodónticas primarias como la Periodontitis Apical Asintomática (PAA). Su característica principal es la sobrevivencia en ecosistemas empobrecidos. Objetivo: El objetivo de este estudio fue determinar la presencia de E.faecalis en dientes con diagnóstico de PAA. Material y Método: La muestra en estudio se conformó por 30 pacientes con un diente unirradicular con diagnóstico de PAA. De cada uno de ellos se obtuvo una muestra microbiológica con el método de Schimauchi H en condiciones de aislamiento absoluto. La muestra fue depositada en un vial con 1ml de RTF a 4°C y fue llevada al laboratorio para su procesamiento antes de dos horas. La identificación de E. faecalis se realizó mediante cultivo microbiológico clásico y biología molecular mediante la Reacción en Cadena de la Polimerasa. Resultados: E.faecalis se identificó en el 63,33% (19 individuos) de las muestras microbiológicas obtenidas de dientes diagnosticados con PAA. Conclusión: El alto porcentaje de aislamiento de E. faecalis en la población estudiada, confirma que este patógeno forma parte de la microbiota habitual en la PAA.
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Chávez-Andrade, Gisselle Moraima. "Eficácia da irrigação ultrassônica passiva na limpeza e eliminação de Enterococcus faecalis dos canais radiculares /." Araraquara : [s.n.], 2012. http://hdl.handle.net/11449/90409.
Full textAbstract:
Orientador: Juliane Maria Guerreiro TanomaruBanca: Idomeo Bonetti Filho
Banca: Celso Luiz Caldeira
Resumo: O objetivo deste estudo foi avaliar a eficácia da Irrigação Ultrassônica Passiva (IUP) na limpeza e eliminação Enterococcus faecalis de canais radiculares, em comparação à Irrigação Manual Convencional (IMC). O estudo foi dividido em dois capítulos. No capítulo I, foram utilizadas raízes de 75 dentes unirradiculados humanos extraídos. Após o preparo biomecânico, os espécimes foram divididos em cinco microplacas de cultura e esterilizados em óxido de etileno. Os canais radiculares foram contaminados com Enterococcus faecalis (ATCC 29212) e incubados a 37ºC durante 21 dias. As microplacas com os espécimes foram divididas em cinco grupos de acordo com o protocolo de irrigação utilizado (n=15): G1- IUP com solução salina; G2- IUP com NaOCl 1%; G3- IMC com solução salina; G4- IMC com NaOCl 1%; G5- controle (sem irrigação). Foram realizadas três coletas microbiológicas: inicial (após 21 dias de contaminação do canal), imediatamente após irrigação e final (após 7 dias dos tratamentos realizados). Após diluições decimais seriadas e semeadura, foi determinado o número de unidades formadoras de colônia por mililitro de solução (UFC/mL). No capítulo II, foram utilizadas raízes de dentes artificiais unirradiculados. Após o preparo dos canais radiculares, foram realizados quatro canais laterais nos terços apical e médio da raiz, nas superfícies vestibular e lingual. Posteriormente, os canais foram preenchidos com uma solução de contraste radiológico. Os espécimes foram divididos aleatoriamente em três grupos de acordo com o protocolo de irrigação (n=08): GI- IMC com agulha 30G, GII- IUP1 com fluxo intermitente, GIII- IUP2 com fluxo contínuo. Antes e após irrigação, os dentes foram radiografados no sentido proximal utilizando ... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo)
Abstract: The aim of this study was to evaluate the cleaning efficacy and elimination of Enterococcus faecalis from the root canal provided by passive ultrasonic irrigation (PUI) compared with conventional needle irrigation (CNI). The study was divided into two chapters. In chapter I, seventy-five extracted human single-rooted teeth were used. After root canal instrumentation, specimens were randomly divided into cell culture microplates. The microplates containing the specimens were wrapped and sterilized by ethylene oxide. Root canals were inoculated with Enterococcus faecalis (ATCC 29212) and incubated at 37ºC for 21 days. The microplates containing the roots were randomly divided in five groups, according to the irrigation method: G1- PUI with saline solution, G2- PUI with 1% NaOCl, G3- CNI with saline solution, G4- CNI with 1% NaOCl, G5- control (no irrigation). Microbiological samples were collected at three time points: initial (21 days after inoculation), post-irrigation (immediately after irrigation), and final (7 days after irrigation). After serial decimal dilutions, the inocula were seeded and was determined the number of CFU/mL. In chapter II, single-rooted artificial teeth were used. After root canal instrumentation, four lateral canals were performed in the middle and apical thirds. After, the root canals were filled with a contrast solution. The roots were randomly divided into three groups, according to the irrigation technique (n=8): GI- IMC with 30-gauge needle, GII- IUP1 with intermittent flow and GIII- IUP2 with continuous flow. Before and after irrigation, the roots were radiographed using a digital radiographic system. The areas of the... (Complete abstract click electronic access below)
Mestre
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Santiago, Adriana Kelly de Sousa. "Avaliação in vitro da efetividade de diferentes pastas antibióticas utilizadas para curativos endodônticos sobre o E. faecalis." reponame:Repositório Institucional da UFC, 2013. http://www.repositorio.ufc.br/handle/riufc/6256.
Full textAbstract:
SANTIAGO, Adriana Kelly de Sousa. Avaliação in vitro da efetividade de diferentes pas antibióticas utilizadas para curativos endodônticos sobre o E. faecalis. 2013. 48 f. Dissertação (Mestrado em Odontologia) - Universidade Federal do Ceará. Faculdade de Farmácia, Odontologia e Enfermagem, Fortaleza, 2013.Submitted by denise santos (denise.santos@ufc.br) on 2013-10-21T11:31:49Z No. of bitstreams: 1 2013_dis_akssantiago.pdf: 897004 bytes, checksum: 12ecc6e8524770b8355227a887a95a45 (MD5)
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There is an agreement that in dental treatments with incomplete rizogenese it is necessary an intracanal medication with high antibacterial effect because the use of files and standard protocol based on instrumentation must be avoided to protect the fragile dental element from extra hazard. Several endodontic dressings have been used with this purpose, alone or associated to a copious irrigation procedure. However, it is not yet standardized in the literature a unique medication with protracted and excellent antimicrobial effect, associated to a feasible handling and insertion into the duct. The purpose of this study was to evaluate the in vitro effectiveness of different antimicrobial pastes currently used as intracanal medication against the pathogen Enterococcus faecalis by means of agar disk diffusion method. Accordingly, it was created a polypropylene device to simulate the release characteristics of the main root canal. The efficacy tests were performed over a period of 30 days. The formulations studied were distributed in triplicate just as follows: Triantibiotic Paste (metronidazole, ciprofloxacin and minocycline); Biantibiotic Paste (metronidazole and ciprofloxacin); Ciprofloxacin Paste; Amoxilin Paste; Calcium hydroxide paste; 0.9% saline (control group). All pastes were still allotted into 2 categories: open and closed apex. The devices remained in the medium at 37ºC over 30 days (static). Samples used for the measurement of biologic response were collected in pre-fixed times: H1(1st hour), H6(6th hour), H24(24th hour), D3(3rd day), D7(7th day), D14(14th day) and D30(30th day) in the course of thirty days. At every settled time, 20μL of solution was removed from each device and embedded on sterile paper discs with 6mm of diameter, being the equivalent volume replaced with fresh release medium. After, the discs were transferred with sterile tweezersg to the surface of agar-BHI medium previously inoculated with bacteria over petri plaques. From the devices with closed apex, it was removed 20μL of solution from above the paste surface, avoiding any directly touch on it. This collect aimed to evaluate the antimicrobial effect of different preparations inside the root canal. From the devices with open apex it was removed 20μL of the solution in which the plastic device was submerged, in order to measure the action of the diffused antibiotic to the periapical region through the apex. From the inhibition halos obtained in each case it was possible to rank the formulations in order of effectiveness. The Amoxicillin paste presented an initial antimicrobial effect more robust, keeping it throughout the experiment. However from the second week there was no more significant difference between this and the other antibiotic pastes (triantibiotic and biantibiotic). These pastes had an initial effect less representative than amoxicillin, however the effect became similar from the second week. Nevertheless, calcium hydroxide paste had a discreet effect initially and it was completely ceased already after the 3rd day. Even if Amoxicillin paste presented a superior result among the studied pastes, it was noticed color changes associated to degradation signs after two weeks. The findings show that these antibiotics pastes posed an excellent pharmacological effect, apart from calcium hydroxide. It can be concluded that all the antibiotics pastes, among them the pastes of amoxicillin, triantibiotic and biantibiotic were effective against E. faecalis. As a result its use as dressing for teeth with incomplete risogenesis in may be a good alternative. Among the advantages it is the microbial effectiveness, as well as the feasible manipulation during the clinical procedure. When comparing biantibiotic and triantibiotic pastes, the first showed to be almost equally effective, being a great choice for the clinical treatments of anterior teeth, where the pigmentation caused by minocycline antibiotic could present a drawback in the final result of the treatment.
Existe um consenso de que no tratamento de dentes com rizogênese incompleta é necessária uma medicação intracanal com máximo efeito antibacteriano, pois o uso de limas e o protocolo convencional de instrumentação devem ser evitados para que não torne o elemento dental ainda mais frágil. Diversos curativos endodônticos têm sido utilizados com este objetivo, bem como o uso de uma irrigação mais copiosa e com irrigante mais efetivo. No entanto, ainda não está padronizada na literatura uma medicação com efeito antibiótico prolongado e efetivo, além de fácil manipulação e inserção no conduto. O objetivo deste trabalho foi avaliar in vitro a eficácia de diferentes pastas antimicrobianas utilizadas como medicação intracanal sobre o patógeno Enterococcus faecalis utilizando o método de disco - difusão em Ágar. Para isso, foi confeccionado um dispositivo de polipropileno que possui características semelhantes ao canal radicular principal. Os testes de eficácia foram realizados por um período de 30 dias. Foram analisadas as seguintes formulações: Pasta triantibiótica (metronidazol, ciprofloxacino e minociclina); Pasta biantibiótica (metronidazol e ciprofloxacino); Pasta de Ciprofloxacino; Pasta de Amoxicilina; Pasta de hidróxido de cálcio; Solução fisiológica 0,9% (grupo controle). Todas as pastas foram ainda alocadas em duas categorias: ápice aberto e ápice fechado e ensaiadas em triplicata. Os dispositivos permaneceram em estufa a 37ºC durante 30 dias (sem agitação), sendo as coletas para aferição da resposta biológica realizadas em períodos preestabelecidos: H1(1ª hora), H6(6ª hora), H24(24ª hora), D3(3º dia), D7(7º dia), D14(14º dia) e D30(30º dia) no decorrer de 30 dias. A cada coleta foram retirados de cada dispositivo 20µL de solução e depositados sobre discos de papel de filtro estéreis com 6 mm de diâmetro. Em seguida, os discos de papel embebidos foram transferidos com pinça estéril para a superfície das placas de petri previamente semeadas com a bactéria. Dos dispositivos com ápice fechado foram removidos 20µL da solução que estava sobre a superfície da pasta, tendo o cuidado para não tocá-la. Este procedimento teve o intuito de medir a ação antimicrobiana direta dos diferentes preparados no interior do conduto radicular. A partir dos dispositivos com ápice aberto foram retirados 20µL da solução na qual o dispositivo plástico encontrava-se imerso, com o intuito de medir a ação do preparado difundido à região periapical. A partir dos halos de inibição obtidos, foi possível observar quais preparados foram mais eficazes com respeito ao seu efeito antibacteriano. A pasta de amoxicilina apresentou o maior efeito antimicrobiano inicial, mantendo-o durante todo o experimento, no entanto, a partir da segunda semana não houve mais diferença estatística entre as pastas antibióticas e o efeito tornou-se semelhante. As pastas triantibiótica e biantibiótica tiveram efeito inicial menor do que o da Amoxicilina, porém o efeito foi igualado a partir da segunda semana. Por outro lado, a pasta de hidróxido de cálcio teve um efeito discreto inicialmente, o qual foi totalmente cessado já após o 3° dia. Ainda que a pasta de Amoxicilina tenha apresentado os melhores resultados dentre as pastas estudadas, foi evidenciado o aparecimento de cor escurecida associada a sinais de degradação após duas semanas. Este estudo mostrou que as pastas antibióticas tiveram um excelente efeito farmacológico, ao contrário da pasta de hidróxido de cálcio. Pode-se concluir que as pastas antibióticas, dentre elas as pastas de Amoxicilina, triantibiótica e biantibiótica apresentaram um excelente efeito sobre o micro-organismo E. faecalis. Portanto, seu uso como medicação intracanal nos casos de dentes com rizogênese incompleta pode ser uma ótima alternativa, estando ainda a facilidade de manipulação durante o procedimento clínico atrelada à eficácia microbicida. Quando comparadas, a pasta biantibiótica mostrou-se quase que igualmente efetiva a triantibiótica, podendo ser uma ótima escolha em casos clínicos de tratamento de dentes anteriores, sempre e quando a pigmentação causada pelo fármaco Minociclina possa comprometer o resultado final do tratamento. Pôde-se concluir que as pastas antibióticas, dentre elas as pastas de amoxicilina, triantibiótica e biantibiótica apresentaram excelente efeito inibitório sobre o micro-organismo E. faecalis. Portanto, o seu uso como medicação intracanal nos casos de dentes com rizogênese incompleta pode ser uma excelente alternativa.
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Brum, Cimara Barroso Braga 1975. "Comparação entre técnicas de instrumentação e protocolos de irrigação na redução de Enterococcus faecalis no canal radicular : estudo ex vivo." [s.n.], 2013. http://repositorio.unicamp.br/jspui/handle/REPOSIP/290431.
Full textAbstract:
Orientador: Brenda Paula Figueiredo de Almeida GomesDissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba
Made available in DSpace on 2018-08-22T12:50:39Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Brum_CimaraBarrosoBraga_M.pdf: 2334153 bytes, checksum: 49e166f146a6c9e8ce963d4b8955dd40 (MD5) Previous issue date: 2013
Resumo: Este estudo teve por objetivo avaliar ex vivo a capacidade de desinfecção de diferentes técnicas de instrumentação utilizando os sistemas ProTaper, ProTaper + Gates, EndoEze, Mtwo e limas manuais em canais contaminados com Enterococcus faecalis, utilizando hipoclorito de sódio 1%, clorexidina gel 2% e soro fisiológico associados a diferentes protocolos de irrigação. Para este fim, 150 molares superiores humanos extraídos, previamente acessados, tiveram as entradas dos canais palatino e mésio-vestibular seladas com resina composta, para que somente o canal disto-vestbular fosse utilizado. O mesmo foi instrumentado até uma lima K #20 para estabelecer o diâmetro da lima anatômica inicial. Após estes procedimentos, os dentes foram autoclavados e posteriormente contaminados por 21 dias com Enterococcus faecalis. Em seguida os dentes foram divididos aleatoriamente em 15 grupos de 10 espécimes cada, de acordo com a técnica de instrumentação e o protocolo de irrigação utilizado. Amostras microbianas do canal radicular foram coletadas e cultivadas antes (coleta inicial - C1) e após a instrumentação (coleta da luz do canal - C2 e coleta de raspas de dentina - C3), para a determinação das unidades formadoras de colônia (UFC). A análise estatística foi realizada através dos testes de Kruskal Wallis/ Dunn para as comparações intergrupo, e Friedman ou Wilcoxon para as comparações intragrupo considerando o nível de significância de 0,05. Verificou-se que na luz do canal radicular não houve diferença entre as técnicas de instrumentação empregadas, independente da substância química auxiliar utilizada. Quanto às substâncias testadas, tanto a clorexidina gel 2% quanto o hipoclorito 1% foram igualmente efetivos na redução de Enterococcus faecalis, enquanto que o soro fisiológico obteve resultados inferiores. Concluiu-se que as técnicas de instrumentação testadas, independente do sistema utilizado, foram eficazes em reduzir os níveis de Enterococcus faecalis na luz do canal radicular associadas ao hipoclorito de sódio 1% ou a clorexidina gel 2%
Abstract: The aim of this study was to evaluate ex vivo the disinfection ability of different instrumentation techniques using the ProTaper System, ProTaper + Gates, EndoEze System, Mtwo System and stainless still K- files, in root canals infected with Enterococcus faecalis using 1% sodium hypochlorite, 2% chlorhexidine gel and sterile saline associated with different irrigation protocols. For this purpose, 150 extracted upper human molar teeth were previously accessed and had the palatal and mesiobuccal canals sealed with composite and only the distobuccal canal was used. The DB canal was instrumented to a #20 K file to establish the diameter of the initial anatomical file. After these procedures, the teeth were autoclaved and subsequently infected during 21 days with Enterococcus faecalis. Then, the teeth were randomly divided into 15 groups of 10 specimens each, according to the instrumentation technique and irrigation protocol used. Root canal microbial samples were collected and cultured before (initial - C1) and after instrumentation (canal - C2 and dentine ships - C3) in order to count the colony forming units (CFU). Statistical analyses were performed using the Kruskal Wallis/ Dunn tests for intergroup comparisons, and Friedman or Wilcoxon for intragroup comparisons, considering the significance level of 0.05. It was found that there was no difference between the instrumentation techniques employed, independent of auxiliary chemical substance used. Regarding the substances tested, both 2% chlorhexidine gel and 1% sodium hypochlorite were equally effective in reducing Enterococcus faecalis, while the saline obtained inferior results. It was concluded that the tested instrumentation techniques, regardless of the system used, have been effective in reducing the levels of Enterococcus faecalis in the root canal associated with sodium hypochlorite 1% or 2% chlorhexidine gel
Mestrado
Endodontia
Mestra em Clínica Odontológica
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Maliza, Amanda Garcia Alves. "Desinfecção intratubular de dentes bovinos por soluções de hipoclorito de sódio acidificadas." Universidade de São Paulo, 2013. http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/25/25147/tde-14102013-154811/.
Full textAbstract:
A total descontaminação do sistema de canais radiculares e da massa dentinária é uma constante preocupação clínica. Diante disso, esta pesquisa teve o objetivo de avaliar o nível de descontaminação dentinária alcançada após irrigação com soluções de hipoclorito de sódio em diferentes concentrações valores de pH. Oitenta dentes bovinos unirradiculados foram divididos em 9 grupos experimentais diferentes. As coroas foram seccionadas e despregadas das raízes. Foram obtidos segmentos de 12mm e os canais instrumentados até a lima K120, preenchidos com EDTA 17%, durante 10 minutos. As raízes foram impermeabilizadas externamente com duas camadas de esmalte. Suspensões de Enterococcus faecalis (ATCC 29212) foram padronizadas em espectrofotômetro (3x108 UFC/mL) e depositadas em microtubos com caldo BHI e um espécime. O protocolo de contaminação seguiu a metodologia de MA et al. (2011) com adaptações. Após 5 dias, os espécimes foram fixados em um dispositivo de apoio esterilizado e irrigados durante 5 minutos com as soluções-teste estabilizadas com tampões: (G1) NaOCl 1% - pH5; (G2) NaOCl 1% - pH7; (G3) NaOCl 1% - pH10; (G4) NaOCl 2,5% - pH5; (G5) NaOCl 2,5% - pH 7; (G6) NaOCl 2,5% - pH10; (G7) NaOCl 5% - pH5; (G8) NaOCl 5% - pH7; (G9) NaOCl 5% - pH10, contendo 8 espécimes cada, além dos grupos controles. Após o tratamento com as soluções irrigadoras, metade dos espécimes é avaliada por cultura microbiológica (contagem de unidades formadoras de colônias UFC/mL das raspas de dentina retiradas das paredes dos canais) e a outra metade do mesmo grupo avaliada por microscopia confocal de varredura a laser (MCVL) e corante Live & Dead. Houve diferença estatística entre diversos grupos, analisados pelos testes de Kruskal-Wallis e Dunn. (p<0,05) Concluiu-se que a solução de hipoclorito de sódio acidificada provocou uma redução significante no número de bactérias. Essa redução foi ainda maior quando a concentração da solução era elevada.The complete decontamination of root canal system and dentinal mass is a constant clinical concern. Therefore, this study aimed to evaluate the level of dentin decontamination achieved after irrigation with sodium hypochlorite solutions at different concentrations and pH values. Eighty single rooted bovine teeth were divided into 9 different groups. The crowns were sectioned and separated from the roots. Then, there was obtained segments of 12mm and the root canals were instrumented until size #120 K-file and filled with 17% EDTA during 10 minutes. The roots were externally sealed with two layers of nail polish. Suspensions of Enteroccus faecalis (ATCC 29212) were standardized using a spectrophotometer (3x108 CFU/mL) and placed in microtubes containing BHI broth and one sample. The protocol of contamination followed the methodology of MA et al. (2011) with some adjustments. After five days, the samples were fixed in a sterilized device and irrigated during 5 minutes with the tested solutions stabilized by buffers substances: (G1) 1% NaOCl - pH5; (G2) 1% NaOCl - pH7; (G3) NaOCl 1% - pH10; (G4) 2.5% NaOCl - pH5, (G5) 2.5% NaOCl - pH 7, (G6) 2.5% NaOCl - pH10; (G7) 5% NaOCl - pH5; (G8 ) NaOCl 5% - pH 7 (G9) 5% NaOCl - pH10, containing 8 specimens each, and the control groups. After the treatment with the irrigating solutions, half of the specimens were evaluated by microbiological cultures (counting colony forming units CFU/mL of dentine chips removed from the wall of root canals) and the other half of the same group were evaluated by confocal laser scanning microscopy (CLSM) with fluorescent Live & Dead stain. There was statistical difference among various groups (p<0.05) by Kruskal-Wallis and Dunns test. It was concluded that the acidified sodium hypochlorite solution resulted in a significant reduction in the number of bacteria.
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Blessie, Victor. "Characterisation of the VicK-VicR signalling pathway in Enterococcus faecalis." Thesis, University of Leeds, 2009. http://ethos.bl.uk/OrderDetails.do?uin=uk.bl.ethos.502778.
Full text
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Silva, Ana Rita Marques da. "Ação antibacteriana de diferentes medicações intracanais frente a Enterococcus faecalis." UNIVERSIDADE ESTADUAL DE PONTA GROSSA, 2015. http://tede2.uepg.br/jspui/handle/prefix/1702.
Full textAbstract:
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Previous issue date: 2015-07-30The present study aimed to introduce new intracanal medications and evaluate their antimicrobial effect against endodontic microorganisms involved in most of the cases of endodontic failure. The composition of the new formulations included 3% doxycycline hydrochloride (DX) or 3% nitrofurantoin (NIT), and a 2% chlorhexidine gel (CHX) was used as a positive control.This study was divided into three phases. The first phase evaluated the antimicrobial effect of the formulations DX and NIT against Gram-positive bacteria, Enterococcus faecalis and Staphylococcus aureus, Gram-negative bacteria, Escherichia coli and Pseudomonas aeruginosa, and fungus Candida albicans. The formulations were tested using the traditional agar diffusion test and the determination of the minimum inhibitory concentration (MIC) test. Based on the descriptive analysis of the agar diffusion test, DX presented a better antibacterial effect for most bacteria in the study. NIT values were lower than the CHX’s for all bacteria, with the exception of E. coli. DX and NIT were found ineffective for C. albicans. The descriptive analysis of MIC showed that DX was more effective than NIT, but when compared with CHX, it presented a lower antimicrobial effect. The second phase evaluated the antimicrobial effect against E. faecalis on the external root surface and the ability of diffusion through dentinal tubules of the new intracanal medications. Fifty human canine teeth were instrumented, sterilized and randomly divided into 5 groups of 10 teeth each, according to the formulation used as intracanal dressing: teeth sealed without medication (SM), negative control; CHX, positive control; placebo gel (PC); NIT and DX. After filling the root canals with the formulations, the teeth were incubated in the agar plates seeded with E. faecalis. The analysis of the halos revealed that DX had a larger inhibitory zone than CHX, while PC and NIT showed no antibacterial effect on the external root surface. The last phase evaluated the antimicrobial activity on infected root canals with E.faecalis. The chosen formulation was DX, as it obtained the best results on previous phases. Microbial samples were collected during three different time periods. The first sample (S1) was collected 21 days after contamination with E. faecalis; the second sample (S2) was collected 14 days under the effect of the intracanal medication, and the third sample (S3) 7 days after replacing the medication by BHI (Brain Heart Infusion) broth. The count of Colony Forming Units (CFU/mL) was statistically analyzed by repeated measures test (ANOVA) (p<0,05). All intracanal dressings significantly reduced the number of bacterial cells in the root canal after 14 days with medication (S2). After a period of 7 days with BHI broth (S3), the CFU counts of E. faecalis remained at low values in DX and CHX groups. The SM group, however, showed a significant increase of CFU in this period, to values similar to those of the initial contamination. These results show that DX was effective in eliminating E. faecalis from the root canal system, significantly decreasing the number of microorganisms after 14 days with medication and suggesting some substantivity after 7 days.Conclusion: From the two formulations suggested in this study, DX presented better antimicrobial effect against the microorganisms in the study (agar diffusion and MIC),supported by the effect on the external root surface and inside the root canal system. This new formulation containing DX can be considered as a possible intracanal dressing, namely in cases of endodontic failure.
Este estudo teve como objetivo investigar novas formulações de medicações intracanal e verificar a ação antimicrobiana destas em microrganismos frequentemente implicados em casos de insucesso endodôntico. As formulações estudadas continham doxiciclina a 3% (DX) ou nitrofurantoína a 3% (NIT), tendo sido usado como controlo positivo um gel de clorohexidina a 2% (CHX).O estudo foi dividido em três fases experimentais. Na primeira fase, foi analisado o efeito antimicrobiano das formulações DX e NIT, na presença das bactérias de Gram positivo, Enterococcus faecalis e Staphylococcus aureus, das bactérias de Gram negativo, Escherichia coli e Pseudomonas aeruginosa, e do fungo Candida albicans através de testes de difusão em agar e da determinação da concentração inibitória mínima (CIM). Com base na análise descritiva dos resultados da difusão em agar, a DX foi a que apresentou maior efeito antimicrobiano, na generalidade das bactérias estudadas. Os resultados da NITforam inferiores aos da CHX em todas as bactérias do estudo, à exceção de E. coli.Tanto a DX como a NIT evidenciaram-se inativas para C. albicans. A análise descritiva da determinação da CIM revelou que a DX apresentou maior eficácia comparativamente com a NIT, mas resultados inferiores quando comparada com a CHX.Na segunda fase, as novas formulações foram avaliadas pela sua ação antimicrobiana, na superfície externa radicular, contra E. faecalis e eventual capacidade de difusão através dos canalículos dentinários. Foram usados 50 dentes humanos (caninos), previamente instrumentados e esterilizados, distribuídos aleatoriamente em cinco grupos (n=10), e atribuída uma formulação diferente a cada grupo: sem medicação (SM), controlo negativo; gel de clorohexidina a 2% (CHX), controlo positivo; gel placebo (PC); gel de nitrofurantoína a 3% (NIT); e gel de doxiciclina a 3% (DX). Preencheu-se o interior dos canais com as respetivas formulações e fez-se a incubação dos dentes em placas de agar com E. faecalis. A análise dos halos dos grupos em estudo demonstrou que a DX tem maior atividade na face externa da raiz do que a CHX, e que a NIT e o PC não evidenciaram ação antibacteriana no exterior da raiz. Na terceira e última fase, avaliou-se a ação antimicrobiana, em canais radiculares contaminados com E. faecalis. A formulação usada nesta fase foi a DX, uma vez que foi a que obteve melhores resultados nas duas fases anteriores. Efetuaram-se colheitas bacterianas em três períodos de tempo distintos. A primeira colheita (S1) realizou-se 21 dias depois da contaminação com E. faecalis; a segunda colheita (S2) foi efetuada 14 dias após a aplicação das formulações e a terceira colheita (S3), 7 dias depois da substituição das formulações por caldo de BHI (“Brain Heart Infusion”). A contagem das Unidades Formadoras de Colónias (UFC/mL) foi analisada através do teste de medidas repetidas (ANOVA) (p<0,05). Todas as novas formulações diminuíram significativamente o número de células bacterianas no interior dos canais após os 14 dias (S2) sob a ação da medicação intracanal. Depois do período de 7 dias com o caldo de BHI (S3), os valores de UFC de E. faecalis mantiveram-se em valores baixos nos grupos DX e CHX. No grupo SM verificou-se um aumento significativo para valores similares aos da contaminação inicial.Verificou-se, assim, que a DX foi eficaz na desinfeção dos canais, reduzindo significativamente o número de microrganismos após 14 dias e demonstrando alguma substantividade após 7 dias.Conclusão: Das duas formulações sugeridas neste estudo, o gel DX apresentou uma eficácia maior sobre os microrganismos estudados (difusão em agar e CIM), corroborado pela ação na superfície externa da raiz e no interior dos canais radiculares. Na formulação apresentada, o gel DX pode ser considerado como uma medicação intracanal alternativa, nomeadamente nos casos de insucesso endodôntico.
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Santos, Sofia Alexandra Muchacho. "Tolerância à vancomicina em Enterococcus faecalis: papel de proteínas hipotéticas." Master's thesis, FCT - UNL, 2009. http://hdl.handle.net/10362/2527.
Full textAbstract:
Dissertação apresentada para a obtenção do Grau de Mestre em Genética Molecular e Biomedicina, pela Universidade Nova de Lisboa, Faculdade de Ciências e TecnologiaEnterococcus faecalis é um agente patogénico oportunista e um dos principais responsáveis por infecções nosocomiais. A sua virulência é multifactorial e ainda pouco compreendida. 36 % do genoma de E. faecalis V583 está anotado como genes que codificam proteínas hipotéticas ou de função desconhecida (PHFD). Estudos de transcriptómica têm sugerido a implicação destes genes na resposta a vários stresses em E. faecalis. No entanto, não têm existido muitas tentativas para atribuir uma função a estes genes. Num estudo efectuado anteriormente com V583 submetido a uma dose terapêutica de vancomicina (10 μg.mL-1) observou-se que 50 % dos genes cuja transcrição foi afectada codificam para PHFD. No presente estudo, seleccionaram-se alguns destes genes (EF0802, EF1231, EF1813, EF2292 e EF2896) que apresentaram um aumento mais marcante nos níveis de expressão. Os resultados dos microarrays para os genes referidos foram confirmados por RT-PCR semi-quantitativo, mais uma vez sugerindo um papel para estes genes na resposta de E. faecalis à vancomicina. Procedeu-se à expressão das proteínas hipotéticas codificadas por aqueles genes em E. coli e à construção de mutantes. Estes mutantes encontram-se em fases diferentes de construção e até ao momento foi possível obter o mutante do EF2292. Este não revelou alterações no fenótipo de resistência à vancomicina, comportando-se de forma idêntica à estirpe selvagem. Quanto à expressão das proteínas hipotéticas EF1231 e EF2292, está em curso a optimização das condições para purificação e obtenção da sua estrutura. Este trabalho constitui um passo no sentido de tornar conhecido o que é ainda desconhecido no genoma e comportamento de E. faecalis.
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Silva, Ana Rita Marques da. "Ação antibacteriana de diferentes medicações intracanais frente a Enterococcus faecalis." Doctoral thesis, UNIVERSIDADE ESTADUAL DE PONTA GROSSA, 2015. https://repositorio-aberto.up.pt/handle/10216/79992.
Full textAbstract:
Made available in DSpace on 2017-07-24T19:21:58Z (GMT). No. of bitstreams: 1
Ana Rita.pdf: 19490568 bytes, checksum: 013237cc37f3177397fb7ac6f745899e (MD5)
Previous issue date: 2015-07-30The present study aimed to introduce new intracanal medications and evaluate their antimicrobial effect against endodontic microorganisms involved in most of the cases of endodontic failure. The composition of the new formulations included 3% doxycycline hydrochloride (DX) or 3% nitrofurantoin (NIT), and a 2% chlorhexidine gel (CHX) was used as a positive control.This study was divided into three phases. The first phase evaluated the antimicrobial effect of the formulations DX and NIT against Gram-positive bacteria, Enterococcus faecalis and Staphylococcus aureus, Gram-negative bacteria, Escherichia coli and Pseudomonas aeruginosa, and fungus Candida albicans. The formulations were tested using the traditional agar diffusion test and the determination of the minimum inhibitory concentration (MIC) test. Based on the descriptive analysis of the agar diffusion test, DX presented a better antibacterial effect for most bacteria in the study. NIT values were lower than the CHX’s for all bacteria, with the exception of E. coli. DX and NIT were found ineffective for C. albicans. The descriptive analysis of MIC showed that DX was more effective than NIT, but when compared with CHX, it presented a lower antimicrobial effect. The second phase evaluated the antimicrobial effect against E. faecalis on the external root surface and the ability of diffusion through dentinal tubules of the new intracanal medications. Fifty human canine teeth were instrumented, sterilized and randomly divided into 5 groups of 10 teeth each, according to the formulation used as intracanal dressing: teeth sealed without medication (SM), negative control; CHX, positive control; placebo gel (PC); NIT and DX. After filling the root canals with the formulations, the teeth were incubated in the agar plates seeded with E. faecalis. The analysis of the halos revealed that DX had a larger inhibitory zone than CHX, while PC and NIT showed no antibacterial effect on the external root surface. The last phase evaluated the antimicrobial activity on infected root canals with E.faecalis. The chosen formulation was DX, as it obtained the best results on previous phases. Microbial samples were collected during three different time periods. The first sample (S1) was collected 21 days after contamination with E. faecalis; the second sample (S2) was collected 14 days under the effect of the intracanal medication, and the third sample (S3) 7 days after replacing the medication by BHI (Brain Heart Infusion) broth. The count of Colony Forming Units (CFU/mL) was statistically analyzed by repeated measures test (ANOVA) (p<0,05). All intracanal dressings significantly reduced the number of bacterial cells in the root canal after 14 days with medication (S2). After a period of 7 days with BHI broth (S3), the CFU counts of E. faecalis remained at low values in DX and CHX groups. The SM group, however, showed a significant increase of CFU in this period, to values similar to those of the initial contamination. These results show that DX was effective in eliminating E. faecalis from the root canal system, significantly decreasing the number of microorganisms after 14 days with medication and suggesting some substantivity after 7 days.Conclusion: From the two formulations suggested in this study, DX presented better antimicrobial effect against the microorganisms in the study (agar diffusion and MIC),supported by the effect on the external root surface and inside the root canal system. This new formulation containing DX can be considered as a possible intracanal dressing, namely in cases of endodontic failure.
Este estudo teve como objetivo investigar novas formulações de medicações intracanal e verificar a ação antimicrobiana destas em microrganismos frequentemente implicados em casos de insucesso endodôntico. As formulações estudadas continham doxiciclina a 3% (DX) ou nitrofurantoína a 3% (NIT), tendo sido usado como controlo positivo um gel de clorohexidina a 2% (CHX).O estudo foi dividido em três fases experimentais. Na primeira fase, foi analisado o efeito antimicrobiano das formulações DX e NIT, na presença das bactérias de Gram positivo, Enterococcus faecalis e Staphylococcus aureus, das bactérias de Gram negativo, Escherichia coli e Pseudomonas aeruginosa, e do fungo Candida albicans através de testes de difusão em agar e da determinação da concentração inibitória mínima (CIM). Com base na análise descritiva dos resultados da difusão em agar, a DX foi a que apresentou maior efeito antimicrobiano, na generalidade das bactérias estudadas. Os resultados da NITforam inferiores aos da CHX em todas as bactérias do estudo, à exceção de E. coli.Tanto a DX como a NIT evidenciaram-se inativas para C. albicans. A análise descritiva da determinação da CIM revelou que a DX apresentou maior eficácia comparativamente com a NIT, mas resultados inferiores quando comparada com a CHX.Na segunda fase, as novas formulações foram avaliadas pela sua ação antimicrobiana, na superfície externa radicular, contra E. faecalis e eventual capacidade de difusão através dos canalículos dentinários. Foram usados 50 dentes humanos (caninos), previamente instrumentados e esterilizados, distribuídos aleatoriamente em cinco grupos (n=10), e atribuída uma formulação diferente a cada grupo: sem medicação (SM), controlo negativo; gel de clorohexidina a 2% (CHX), controlo positivo; gel placebo (PC); gel de nitrofurantoína a 3% (NIT); e gel de doxiciclina a 3% (DX). Preencheu-se o interior dos canais com as respetivas formulações e fez-se a incubação dos dentes em placas de agar com E. faecalis. A análise dos halos dos grupos em estudo demonstrou que a DX tem maior atividade na face externa da raiz do que a CHX, e que a NIT e o PC não evidenciaram ação antibacteriana no exterior da raiz. Na terceira e última fase, avaliou-se a ação antimicrobiana, em canais radiculares contaminados com E. faecalis. A formulação usada nesta fase foi a DX, uma vez que foi a que obteve melhores resultados nas duas fases anteriores. Efetuaram-se colheitas bacterianas em três períodos de tempo distintos. A primeira colheita (S1) realizou-se 21 dias depois da contaminação com E. faecalis; a segunda colheita (S2) foi efetuada 14 dias após a aplicação das formulações e a terceira colheita (S3), 7 dias depois da substituição das formulações por caldo de BHI (“Brain Heart Infusion”). A contagem das Unidades Formadoras de Colónias (UFC/mL) foi analisada através do teste de medidas repetidas (ANOVA) (p<0,05). Todas as novas formulações diminuíram significativamente o número de células bacterianas no interior dos canais após os 14 dias (S2) sob a ação da medicação intracanal. Depois do período de 7 dias com o caldo de BHI (S3), os valores de UFC de E. faecalis mantiveram-se em valores baixos nos grupos DX e CHX. No grupo SM verificou-se um aumento significativo para valores similares aos da contaminação inicial.Verificou-se, assim, que a DX foi eficaz na desinfeção dos canais, reduzindo significativamente o número de microrganismos após 14 dias e demonstrando alguma substantividade após 7 dias.Conclusão: Das duas formulações sugeridas neste estudo, o gel DX apresentou uma eficácia maior sobre os microrganismos estudados (difusão em agar e CIM), corroborado pela ação na superfície externa da raiz e no interior dos canais radiculares. Na formulação apresentada, o gel DX pode ser considerado como uma medicação intracanal alternativa, nomeadamente nos casos de insucesso endodôntico.
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Martini, Cecilia. "Identification and characterization of new virulence factors in Enterococcus faecalis." Caen, 2014. http://www.theses.fr/2014CAEN2064.
Full textAbstract:
Dans cette étude, nous nous sommes focalisés sur l'identification et la caractérisation de nouveaux facteurs de virulence chez Enterococcus faecalis. SlyA est un régulateur transcriptionnel impliqué dans la virulence, la persistance dans les reins et le foie, ainsi que dans la survie à l'intérieur des macrophages. Nous avons recherché les conditions de stress susceptibles d’affecter la transcription du gène slyA. Parmi plusieurs contraintes testées, nous avons montré que les sels biliaires induisaient l'expression de slyA. Des études transcriptomiques avaient suggéré que SlyA pouvait être un répresseur de l'expression de facteurs de virulence. Ainsi, parmi les gènes surexprimés dans le mutant ΔslyA, un ou plusieurs pourraient être impliqués dans le phénotype «d’hyper-virulence» observé pour le mutant. Ainsi, EF_3001 (renommé pmvE) apparaît comme un candidat intéressant. Nous avons en effet montré qu’il joue un rôle dans la virulence, ainsi que sa persistance dans l'intérieur de l'hôte. De plus, il apparait que PmvE est important pour la croissance d’E. Faecalis en présence de polyamines et qu‘elle est capable d’interagir avec la putrescine. Nous avons également mis en évidence deux nouvelles protéines de surface impliquées dans l'adhésion et la colonisation. La première, EfbA, contribuant probablement à un tropisme accru pour les cellules de rein et qui joue un rôle dans les infections urinaires. La seconde, CspR, est une protéine de choc froid capable de se lier à l’ARN et qui peut être localisée à la surface des cellules. Outre son implication dans la réponse à de basses températures, CspR est également impliquée dans la survie à long terme et la virulenceIn this study, we focused on the identification and characterization of new virulence factor in E. Faecalis. SlyA is a transcriptional regulator, involved in the virulence, persistence in mouse kidneys and liver, and survival inside peritoneal macrophages. We attempt to find stress conditions that affect the transcription of slyA. Among several stresses tested we found that bile salts induced expression of slyA. In addition, transcriptomic results performed to identify SlyA-regulated genes suggested that SlyA could be a repressor for the expression of virulence factors. It is then tempting to speculate that among genes overexpressed in the ΔslyA mutant, one or more could play a role in the more virulent phenotype observed for the mutant. Then, EF_3001 (renamed pmvE) may be an interesting candidate. We found that PmvE plays a role in the virulence of E. Faecalis as well as in its persistence inside the host. In addition, PmvE was important for growth in presence of polyamines and that it was able to interact with putrescine. Bacterial adherence is an important step in the process of disease that facilitates colonization in the host. We characterized two new surface proteins, involved in the adherence and colonization. The first one, EfbA, localized on the enterococcal cell surface, probably contributing to an increased tropism for the kidney for the bacteria, and which has a role in UTIs. The second, CspR, is cold shock RNA binding protein located in both the cytoplasm and the surface of E. Faecalis. In addition to its involvement in the cold-shock response and in the long-term survival, CspR plays a role in the virulence of E. Faecalis
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Montravers, Philippe. "Role pathogene de enterococcus faecalis dans les infections intra-abdominales." Paris 7, 1997. http://www.theses.fr/1997PA077332.
Full textAbstract:
Le pouvoir pathogene de enterococcus faecalis au cours des infections intraabdominales et la necessite de son traitement restent des sujets controverses. Le but de ce travail a ete de preciser le role pathogene de e. Faecalis en utilisant a un modele de peritonite experimentale plurimicrobienne realisee par implantation d'inocula calibres de escherichia coli, bacteroides fragilis et e. Faecalis. Dans une infection plurimicrobienne, l'administration de concentrations croissantes d'e. Faecalis se traduit par une aggravation de la maladie et une augmentation de la frequence des bacteriemies et des concentrations peritoneales des autres germes. La presence de e. Faecalis est associee a une augmentation de la reponse inflammatoire et des modifications de la bactericidie intracellulaire des autres germes. L'eradication de e. Faecalis n'est pas possible par un traitement antibiotique classique. Les traitements antibiotiques ne prenant pas en compte les enterocoques ne provoquent pas d'aggravation clinique, microbiologique ou inflammatoire de la peritonite. Les enterocoques joueraient donc un role aggravant du stade initial de l'infection mais leur traitement ne serait pas indispensable. L'effet des facteurs de virulence des enterocoques a ete evalue. Le pouvoir pathogene de souches isogeniques d'e. Faecalis porteuses de trois facteurs de virulence (hemolysine, facteur aggregant, gelatinase) a ete evalue chez la souris et chez le rat. Les resultats obtenus lors de l'infection chez la souris ne sont pas superposables aux resultats obtenus chez le rat. Une augmentation de la reaction inflammatoire est observee avec certaines souches chez le rat. De meme, la conjonction de plusieurs facteurs de virulence dans une meme souche n'est pas synonyme d'augmentation du pouvoir pathogene. Les facteurs de virulence bien qu'aggravant la maladie n'expliquent pas a eux seuls le pouvoir pathogene des enterocoques.
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Shorrock, Patricia J. "Surface properties of enterococcus faecalis in relation to infective endocarditis." Thesis, Aston University, 1990. http://publications.aston.ac.uk/12534/.
Full textAbstract:
The effect of growth conditions on both the appearance and the antigenic profile of cells of Enterococcus faecalis was investigated using electron micrographs of ruthenium red stained and sectioned cells and SDS-PAGE and blotting techniques respectively. Three specific antigens of molecular weights 73, 40 and 37 kdaltons were of particular interest being expressed most strongly after growth in serum. This medium was deemed to most closely mimic jn vjvo growth conditions reflecting an environment similar to that which the microorganisms would encounter during bacteraemia, preceding the colonisation of the endocardium and the development of infective endocarditis. The 40 and 37 kdalton antigens were shown by immunoqold labelling to be exposed on the surface of the cells although they did not appear to be connected with the fimbriae shown to exist on some of the E. faecalis cells examined by negative staining. The 73, 40 and 37 kdalton antigens were crudely purified using sarkosyl and ammonium sulphate precipitation, and used as the basis of a serodiagnostic test for E. faecalis endocarditis using an ELISA system. This was tested in a blind trial and the success rates were 94% for positives, 90% for negatives with endocarditis caused by other organisms and 80% for E. faecalis infections other than endocarditis. The binding of E.faecalis cells to the serum proteins fibronectin and albumin was investigated using 125I labelled proteins, followed by Scatchard analysis. This showed that· E.faecalis cells do loosely bind large amounts of both of these proteins, thus surely affecting the way in which the host's immune system perceives the cells. The E.faecalis receptor for fibronectin was partially characterised and appeared to involve protein and/or carbohydrate containing components. but did not involve LTA or the 40 and 37 kdalton species specific antigens.
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Bouças, Patrícia Domingues Pires. "Estudo da atividade gelatinolítica em amostras clínicas de Enterococcus faecalis." Universidade Estadual de Londrina. Centro de Ciências Biológicas. Programa de Pós-Graduação em Microbiologia, 2005. http://www.bibliotecadigital.uel.br/document/?code=vtls000110060.
Full textAbstract:
Gelatinase é um possível fator de virulência em Enterococcus sp., que são patógenos oportunistas causadores de várias infecções em humanos. A produção de gelatinase foi estudada em 95 amostras clínicas de E. faecalis isoladas de diversas origens. Parâmetros ambientais incluindo meio de cultura, temperatura, pH, cátions divalentes, e vários carboidratos foram testados para averiguar se os mesmos influenciam a produção de gelatinase. A atividade enzimática foi averiguada pela degradação da gelatina pelas células bacterianas impregnadas em discos de papel de filtro, e a atividade foi determinada pela presença de um halo opaco ao redor do disco. A produção de gelatinase foi sensível ao aumento da temperatura a partir de 50ºC, mostrando a associação com o tempo de tratamento. Houve maior freqüência de amostras produtoras de gelatinase em agar contendo extrato de carne e peptona suplementado com gelatina. A atividade gelatinolítica foi otimizada em meio de cultura ajustado em pH 8,0. A produção de gelatinase não foi influenciada pelo Mg2+, mas foi reduzida na presença de Ca2+ e Zn2+ e inibida totalmente pelos cátions Fe2+ e Cu2+. A atividade gelatinolítica variou grandemente quando ao cultivo celular foram adicionados carboidratos como fonte de carbono, aumentando a atividade na presença de arabinose, xilose, glicose, maltose e manose, enquanto outros não influenciaram ou diminuíram a atividade da enzima. Os resultados mostraram que a produção de gelatinase é fortemente influenciada por diferentes fatores ambientais. Estudos futuros serão necessários para determinar os mecanismos que controlam a produção deste possível fator de virulência em Enterococcus sp.Gelatinase is a potential virulence factor in Enterococci which are opportunistic pathogens that cause various types of infections in humans. The production of gelatinase was studied in 95 Enterococcus faecalis strains isolated from different types of clinical sources. Various environmental parameters including culture medium, temperature, pH, divalent cations, and carbon sources were examined for their effect on production of gelatinase. Enzyme activity was determined based on gelatin degradation in agar plates by filter-paper disks impregnated with bacterial cells, as evidenced by the formation of an opaque halo. Gelatinase production was sensitive to heat at a temperature greater than 50 °C, showing to associate with time of heat treatment. A greater number of enterococcal strains produced gelatinase when grown in medium containing beef extract and peptone as nutrient agar. Gelatinase activity was detected over wide pH range with an optimum at pH 8. Ca2+ and Zn2+ caused a reduction in gelatinase production while other common divalent cations (Fe2+ and Cu2+) inhibited it or had no effect (Mg2+). Gelatinolytic activity varied greatly when bacterial cells were supplemented with different carbohydrates as the carbon source, increasing with arabinose, xylose, glucose, maltose and mannose, while unchanged or decreasing with various other sugars. The results show that gelatinase production is strongly influenced by different environmental factors. Further studies are warranted to determine the mechanisms controlling the production of this potential virulence factor in Enterococci.
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Ríos, Wilson Martín Alonso Facundo. "Modelo matemático de la homeostasis de cobre en enterococcus faecalis." Tesis, Universidad de Chile, 2017. http://repositorio.uchile.cl/handle/2250/148470.
Full textAbstract:
Magíster en Ciencias de la Ingeniería, Mención Matemáticas Aplicadas.
Ingeniero Civil MatemáticoLa homeostasis es un estado de equilibrio sobre las distintas condiciones internas que pre- servan los organismos vivos [17]. Como tales condiciones son afectadas por los estímulos del medio externo, los organismos vivos desarrollan complejos mecanismos de adaptación que les permiten mantener este estado de armonía interna. Casi la mitad de las enzimas, piezas claves en la maquinaria metabólica de los sistemas biológicos, necesitan de ciertos metales como el cobre, el hierro o el zinc para cumplir sus funciones [73]. Sin embargo, altas concentraciones de estos metales pueden producir la muerte del organismo [71]. Como resultado de esta di- námica, las bacterias han evolucionado complejos mecanismos homeostáticos para equilibrar la presencia de estos metales [71]. Basándose en evidencia experimental [51, 57, 39] y en trabajos de modelamiento previos [49], en el transcurso de esta memoria se busca describir matemáticamente la dinámica de la homeostasis del cobre en E. faecalis, haciendo uso de la teoría clásica de sistemas de ecuaciones diferenciales ordinarias y, recurriendo a herramientas recientes, provenientes de la teoría de sistemas dinámicos monótonos [22, 21, 6, 28]. Para enfrentar la complejidad y la no-linealidad de las ecuaciones que aparecen en los sistemas, provenientes de los formalismos de modelamiento de reacciones químicas, se divide el análisis en el estudio de dos modelos: a) un modelo que incluye solo ecuaciones polinomiales y b) un modelo más realista que incluye la descripción de fenómenos como la cooperatividad y saturación, usando funciones de regulación. Como resultados derivados de este análisis, se describe la homeostasis en términos cualitativos, concluyendo con la demostración de que este estado es un atractor global al cual el sistema tiende, a partir de una dinámica transiente. Además, se presentan simulaciones numéricas en las que se constata este tipo de comportamiento. Los hallazgos planteandos en este trabajo constituyen un primer paso para el estudio de estas propiedades en sistemas homeostáticos más generales. Esto último tiene una importan- cia crítica para el desarrollo de aplicaciones biotecnológicas en la industria como lo son, por ejemplo, los procesos de bioloxividación en la minería del cobre [1, 2].
Este trabajo ha sido parcialmente financiado por el proyecto Fondecyt de Iniciación 11150679 y el proyecto Fondap CRG 15090007
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Nunez, Natalia. "Insights into the interaction of Enterococcus faecalis with host cells." Thesis, Université Paris-Saclay (ComUE), 2017. http://www.theses.fr/2017SACLS381/document.
Full textAbstract:
Enterococcus faecalis est une bactérie commensale du microbiote intestinal humain. Inoffensive chez l'homme sain, E. faecalis est aussi un pathogène opportuniste. En conditions de dysbiose post-antibiotique, E. faecalis peut devenir une espèce dominante, traverser la barrière intestinale avant de disséminer. E. faecalis se classe désormais comme la troisième cause d'infections nosocomiales dans le monde. La pathogénie de E. faecalis est un processus multifactoriel dont les mécanismes cellulaires de son interaction avec l'hôte sont encore mal compris. À l'aide de modèles cellulaires d'infection et de modèles in vivo, nous avons entrepris de caractériser le rôle du facteur de virulence ElrA pendant l'infection cellulaire.Notre objectif était également de déterminer si FHL2, un partenaire eucaryote de ElrA, était impliqué dans l'infection par E. faecalis et de determiner l'impact de l'interaction ElrA-FHL2. Nous avons démontré que ElrA agit comme une cape d'invisibilité permettant à E. faecalis de ne pas être détecté par des macrophages. Nous avons également montré que FHL2 est impliqué dans la défense de l’hôte contre l'infection par E. faecalis, mais ce rôle implique partiellement ElrA. Parallèlement, nous avons montré pour la première fois que E. faecalis est capable de se multiplier dans les hepatocytes. En conclusion, ce travail apporte de nouvelles perspectives sur les interactions de E. faecalis avec son hôteEnterococcus faecalis is a core member of the human gut microbiota. Harmless for healthy humans, it is able to cause disease in susceptible patients under antibiotic-induced microbiota alteration. Nowadays, E. faecalis ranks as the third cause of nosocomial infections worldwide. E. faecalis pathogenicity is a multifactorial process but the cellular mechanisms of its interaction with the host remain poorly understood. Using cellular models of infection and in vivo models, we aimed to characterize the role of the virulence factor ElrA during cellular infection. Our goal was also to determine if FHL2, an ElrA eukaryotic partner, was implicated in E. faecalis infection and the impact of ElrA-FHL2 interaction. We have demonstrated that ElrA acts as an invisibility cloak allowing E. faecalis to avoid macrophage recognition. Also, we have shown that FHL2 is implicated in the defense against E. faecalis infection, involving partially ElrA. In parallel, we showed that intracellular replication of E. faecalis in hepatic cells. Altogether, our work provides new insights in E. faecalis interactions with the host cell
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Fernandes, Meg da Silva 1984. "Avaliação de riscos e de pontos críticos de contaminação por Enterococcus spp. e Bacillus cereus no processamento de ricota." [s.n.], 2010. http://repositorio.unicamp.br/jspui/handle/REPOSIP/255455.
Full textAbstract:
Orientador: Arnaldo Yoshiteru KuayeDissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia de Alimentos
Made available in DSpace on 2018-08-16T12:29:08Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Fernandes_MegdaSilva_M.pdf: 3935080 bytes, checksum: 25bc1e5988870cf168c5403b4c8d2aba (MD5) Previous issue date: 2010
Resumo: A ricota é um tipo de queijo fresco de origem italiana, obtido pela precipitação das proteínas do soro do queijo por acidificação associada ao calor. Por suas características nutricionais, físico-químicas e bioquímicas apresenta-se propícia ao desenvolvimento microbiano. No processamento deste produto destacam-se o Bacillus cereus, pela sua capacidade de esporular e ser um contaminante potencial do leite e do ambiente e as bactérias do gênero Enterococcus, pela característica ubíqua, habilidade de sobrevivência à condições diversas de pH, temperatura e salinidade e ocorrência em casos de infecções hospitalares. Os objetivos deste trabalho foram: a) verificar as possíveis fontes de contaminação de ricota por B. cereus e Enterococcus spp. ao longo do processamento; b) identificar as espécies de enterococos, avaliar o potencial de patogenicidade e o perfil de resistência destas espécies a antibióticos de uso clínico; e, c) avaliar a conformidade das amostras de ricota aos padrões microbiológicos legais. Amostras de leite cru e pasteurizado, soro de queijo, ricotas antes e após embalagem, superfícies diversas do ambiente e do ar obtidas em três coletas de laticínio da região Sul de Minas Gerais foram submetidas à determinação de B. cereus e Enterococcus spp. As contagens de B. cereus em leite cru, pasteurizado e soro de queijo, foram de 1,4 x104, 1,2 x103 e 1,0 x103 UFC/ml, respectivamente, e, apenas uma amostra de ricota final apresentou valor maior que 102 UFC/g. Dentre as 60 amostras ambientais, destaca-se a forma de moldagem da ricota, que apresentou contaminação persistente e contagem de até 1,7x107 UFC/unidade de B. cereus. Enterococcus spp. foram encontradas em todas as amostras de ricota, com contagens entre 103 e 107 UFC/g, e em todas de leite cru, com contagens de até 1,9 x106 UFC/ml. Nas superfícies de forma e tela, vassoura, parede e ralo foram encontrados valores superiores a 105 UFC/unidade; já para tanques, bancada da área de embalagem e caixa de recolhimento do soro os números foram superiores a 102 UFC/unidade. De um total de 136 isolados, confirmados para o gênero Enterococcus, 71,3% (97/136) foram confirmados para a espécie E. faecium e 20,6% (28/136) para E. faecalis, pela técnica de PCR. Os isolados (66) de E. faecium e E. faecalis das amostras de produto final submetidas aos testes fenotípicos resultaram em 89,4% (59/66) positivos para hemólise, nenhum para gelatinase (0/66) e 98,5% (65/66) positivos para termonuclease. A maioria dos isolados de E. faecium e E. faecalis mostrou resistência a pelo menos três dos 5 antimicrobianos testados, destacando-se que 100% deles apresentaram resistência à vancomicina. De 15 amostras de ricota avaliadas após 21 dias de armazenamento sob refrigeração, 13,3% (2/15) estavam em desacordo com o padrão legal para estafilococos coagulase positiva e em nenhuma delas foi detectada a presença de Salmonella, Listeria monocytogenes e coliformes termotolerantes. A natural e inevitável contaminação da matéria-prima e do ambiente de processamento de ricota por B. cereus e Enterococcus spp., bactérias estas potencialmente patogênicas, tem na eficiência dos programas de higienização um fator indispensável para o seu controle
Abstract: The ricotta is a type of fresh cheese of Italian origin, obtained by precipitation of proteins from cheese whey by acidification associated with the heat. Because of its nutritional, physicochemical and biochemical characteristics it is conducive to microbial growth. On the processing of this product it can be emphasized the Bacillus cereus, due to its ability to sporulate and be a potential contaminant of milk and the environment, and the bacteria of the genus Enterococcus, due its ubiquitous characteristic, ability to survive the various conditions of pH, temperature and salinity and appearance in cases of hospital infections. The objectives of the present work were: (a) to verify the possible sources of ricotta contamination by B. cereus and Enterococcus spp. during processing; (b) to identify the species of enterococci, evaluate the pathogenic potential and the resistance profile of these species to antibiotics of clinical use; and (c) to assess the conformity of samples of ricotta under legal microbiological standards. Samples of raw and pasteurized milk, cheese whey, ricotta before and after packaging, various surfaces of the environment and of air obtained from three collections on a dairy industry located in southern Minas Gerais were subjected to the determination of B. cereus and Enterococcus spp. The counts of B. cereus in raw and pasteurized milk and in cheese whey were 1,4 x104, 1,2 x103 and 1,0 x103 CFU/ml, respectively, and only one sample of final ricotta had levels of B. cereus higher than 1,7x107 CFU/unity. Among the 60 environmental samples, it can be highlighted the mold where the ricotta is shaped, which showed persistent contamination and count up to 1,7x107 CFU/unity for B. cereus. All the samples of ricotta and raw milk showed the presence of Enterococcus spp. with counts between 103 and 107 CFU/g and up to 1,9 x106 CFU/ml, respectively. On the surfaces of the mold, mesh, broom, wall and drain it were found counts higher than 105 CFU/unity; for the tank, stand in the area of packaging and box for the collection of serum the counts were higher than 102 CFU/unity. Over 136 isolated of the genus Enterococcus, 71,3% (97/136) were confirmed for the species E. faecium and 20,6% (28/136) for E. faecalis by PCR technique. The isolates (66) of E. faecium and E. faecalis taken from the samples of the final product submitted to phenotypic tests resulted in 89,4% (59/66) positive for hemolysis, none for gelatinase (0 / 66) and 98,5% (65/66) positive for thermonuclease. Most of the isolates of E. faecium and E. faecalis showed resistance to at least three of the 5 antimicrobials, highlighting that 100% of them were resistant to vancomycin. From 15 samples of ricotta evaluated after 21 days of refrigerated storage, 13,3% (2/15) were in disagreement with the legal standard for coagulase-positive staphylococci and none were detected the presence of Salmonella, Listeria monocytogenes and thermotolerant coliforms. The natural and inevitable contamination of raw-materials and of the processing environment of ricotta by B. cereus and Enterococcus spp., which are potentially pathogenic bacteria, have in the efficiency of the hygiene programs a essential factor for its control
Mestrado
Mestre em Tecnologia de Alimentos
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Merlo, Thaís Panhan. "Comparação genotípica e fenotípica de Enterococcus faecalis resistentes à vancomicina isolados nos anos de 2009 e 2011 em um hospital de Minas Gerais." Universidade de São Paulo, 2013. http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/76/76132/tde-19122013-171502/.
Full textAbstract:
Enterococcus são cocos gram-positivos que ocorrem isolados, aos pares (diplococos) ou em cadeias e pertencem à microbiota intestinal de uma grande variedade de hospedeiros, de mamíferos a insetos. Enterococcus foram originalmente considerados organismos de pouca importância clínica, mas têm se revelado importantes patógenos nosocomiais. O fato dos Enterococcus possuírem formas de resistência intrínseca e adquirida a vários antibióticos dificulta o tratamento de infecções causadas por eles. Enterococcus faecalis é geralmente a espécie predominante entre os enterococos isolados, sendo de 80% a 90% das amostras clínicas. O surgimento de Enterococcus resistentes à vancomicina (VRE- do inglês vancomycin resistant enterococci) reduziu significativamente as opções de tratamento. O objetivo deste estudo foi identificar e comparar amostras de E. faecalis resistentes à vancomicina (VREfs) isolados em pacientes nos anos de 2009 e 2011, durante um programa de vigilância no Hospital Risoleta Tolentino Neves, em Belo Horizonte, MG. A identificação das espécies foi feita por multiplex-PCR com primers espécie-específicos e os E. faecalis foram selecionados para estudo. Foram realizadas a pesquisa da presença dos genes elrA, cylLL, esp e gelE, a determinação do genótipo responsável pela resistência e a caracterização do transposon que contém o gene de resistência, todos por meio de PCR. Foi também realizada a determinação da concentração inibitória mínima (CIM) de acordo com o CLSI (2013) para vancomicina, linezolida, tigeciclina e daptomicina e testes para resistência a altas concentrações de aminoglicosídeos. Por fim, a tipagem das amostras foi feita através de eletroforese em campo pulsado (PFGE- do inglês Pulsed Field Gel Eletroforesis) e MLST (Multilocus sequence typing). Foi encontrado que 22,2% dos VRE isolados em 2009 e 61,7% dos isolados em 2011 pertencem à espécie E. faecalis e estes foram utilizados no estudo. Houve surgimento de resistência à tigeciclina nos isolados de 2011, sendo 10 isolados resistentes, logo após o início do uso deste antimicrobiano no hospital. Foi encontrado um isolado de 2011 com resistência intermediária à linezolida. Todos os isolados foram sensíveis à daptomicina e altamente resistentes à vancomicina, com CIM maior que 256 μg/mL. Essa alta resistência à vancomicina é condizente com o genótipo Vana, encontrado em todas as amostras. O perfil de virulência prevalente nos VREfs em 2009 era elrA+gelE+, sendo dos pulsotipos A1 e A4 e ST103. Apenas um isolado de 2009, com pulsotipo A1 apresentou o perfil de virulência cyl+elrA+gelE+. Em 2011, o perfil de virulência prevalente foi cyl+esp+elrA+gelE+, sendo que os 12 isolados com esse perfil pertenciam aos pulsotipos B e C e ST6, que ocorreram somente em isolados de 2011. Onze amostras de 2011 apresentaram o perfil elrA+gelE+ e foram classificadas no pulsotipo A e seis amostras tem perfil cyl+elrA+gelE+ e são dos pulsotipos B e D. Resultados de PFGE mostram a inserção no hospital da linhagem ST6, um clone multirresistente amplamente disseminado em hospitais da Itália, Portugal, Espanha e Estados Unidos. Concluiu-se que houve mudanças no perfil de E. faecalis resistentes à vancomicina no hospital, ao longo dos dois anos, com aumento de resistência e linhagens mais virulentas, sendo estes motivos de preocupação.Enterococci are Gram-positive cocci occurring isolated, in pairs (diplococci) or chains and belong to the intestinal tract of a wide variety of hosts, from mammalian to insect. Enterococcus organisms were originally considered of little clinical importance, but have proved important nosocomial pathogens. The fact that Enterococcus possess intrinsic and acquired resistance to multiple antibiotics complicates the treatment of infections caused by them. Enterococcus faecalis is usually the predominant species among enterococci isolates, with 80% to 90% of the clinical samples. The emergence of vancomycin-resistant Enterococcus (VRE) significantly reduced the treatment options. The aim of this study was to identify and compare samples of vancomycin- resistant E. faecalis (VREfs) in patients in the years 2009 and 2011, during a surveillance program in Hospital Risoleta Tolentino Neves, Belo Horizonte, MG. Species identification was done by multiplex-PCR with primers species-specific and E. faecalis were selected for this study. Tests were conducted for the presence of genes elrA, cylLL, esp and gelE, the determination of the genotype responsible for the resistance and characterization of transposon containing the resistance gene, all by PCR. The minimum inhibitory concentration (MIC) was determined according to the CLSI (2013) to vancomycin, linezolid, daptomycin and tigecycline and tests for resistance to high concentrations of aminoglycosides. Finally, the samples typing was performed by pulsed field gel electrophoresis (PFGE) and multilocus sequence typing (MLST). It was found that 22.2 % of VRE isolates in 2009 and 61.7 % of isolates in 2011 belong to the species E. faecalis and these were used in the study. There was emergence of tigecycline resistance in 2011, with 10 resistant isolates, after the introduction of this drug in the hospital. One isolate from 2011 showed intermediate resistance to linezolid. All isolates were sensitive to daptomycin and highly vancomycin resistant, with MICs greater than 256 mg / mL. This high resistance to vancomycin is consistent with the vanA genotype found in all samples. The virulence profile prevalent in VREfs in 2009 was elrA+gelE+, belonging to the pulsotypes A1 and A4 and ST103. Only one isolate from 2009, presented pulsotype A1 and the virulence profile cyl+elrA+gelE+. In 2011, the prevalent virulence profile was cyl+esp+elrA+gelE+, and the 12 isolates with this profile belonged to pulsotypes B and C and ST6, which occurred only in 2011 isolates. Eleven isolates from 2011 have the profile elrA+gelE+ and were classified as pulsotype A, six isolates have profile cyl+elrA+gelE+ and are of pulsotypes B and D. PFGE results show the insertion of ST6 lineage in the hospital, a multiresistant clone widely disseminated in hospitals in Italy, Portugal, Spain and the United States. It was concluded that there were changes in the profile of E. faecalis resistant to vancomycin in the hospital over the two years, with increased resistance and more virulent strains, which are of concern.
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Arruda, Theodora Thays Prado. "Perfil de sensibilidade de cepas planctônicas e biofilmes de enterococcus faecalis frente a desafios antimicrobianos." reponame:Repositório Institucional da UFC, 2007. http://www.repositorio.ufc.br/handle/riufc/1783.
Full textAbstract:
ARRUDA, Theodora Thays Prado. Perfil de sensibilidade de cepas planctônicas e biofilmes de enterococcus faecalis frente a desafios antimicrobianos. 2007. 141 f. Dissertação (Mestrado em Microbiologia Médica)- Universidade Federal do Ceará. Faculdade de Medicina, Fortaleza, 2007.Submitted by denise santos (denise.santos@ufc.br) on 2012-01-05T16:48:36Z No. of bitstreams: 1 2007_dis_ttparruda.pdf: 3211660 bytes, checksum: 8202e4aa912c156153c5126023e376da (MD5)
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Enterococcus faecalis has been suggested to be an important etiological agent in endodontic failure. It has been found in the root canal system in a perceptual ranging from 22% to 77% and it has been associated to organisms structured in biofilms. The aim of the present study was to evaluate, in vitro, the effectiveness of endodontic sealers, 2.5% sodium hypochlorite, and 0.5% Lippia sidoides essential oil in eliminating E. faecalis biofilms. Clinical material was collected from 37 patients with root canal chronic infections and 14 Enterococcus faecalis strains were isolated (37.8%). Biofilms from a reference (ATCC) and a clinical multirresistant strain (isolate 12 ) were grown for 8 days. This period was selected based on a chronological study of the Enterococcus faecalis biofilm development through Atomic Force Microscopy. It was verified that there was a significant reduction of the bacteria number when the biofilms were exposed to the endodontic sealers related to the control for the two tested strains (p<0.001). Analyzing the ATCC strain, it was seen that the Epiphany® endodontic sealer presented similar action compared to Endofill® (p>0.05), similar result was found for Isolate 12. When the strains susceptibilities against the sealers was compared it was verified that the isolate 12 was less susceptible than the ATCC strain (p<0.001). It was verified that the 0.5% essential oil solution of Lippia siodides presented a similar action to 2.5% sodium hypochlorite when the biofilm of ATCC strain and isolate 12 were exposed for 10 minutes to this substances (p<0.001). Comparing the susceptibility of the two strains to the solutions tested, there was no difference between them (p>0.05)
Enterococcus faecalis foi sugerido como sendo um importante agente etiológico do insucesso endodôntico. Foi encontrado no sistema de canais radiculares em um percentual de 22% a 77% e foi associado com a formação de estruturas chamadas biofilmes. O objetivo do presente estudo foi avaliar, in vitro, a efetividade de cimentos endodônticos, hipoclorito de sódio a 2,5% e solução do óleo essencial da Lippia sidoides a 0,5% na eliminação de biofilmes de E. faecalis. Material clínico foi coletado de 37 pacientes com infecções crônicas do canal radicular e 14 cepas de Enterococcus faecalis foram isoladas (37,8%). Biofilmes de uma cepa de coleção de cultura (ATCC) e de uma cepa clínica multiresistente (Isolado 12) foram incubados por 8 dias. Esse período foi selecionado baseado em estudo cronológico do desenvolvimento de biofilmes de Enterococcus faecalis através de Microscopia de Força Atômica. Foi verificado que houve uma redução significativa no número de bactérias quando os biofilmes foram expostos aos cimentos endodônticos em relação ao controle para as duas cepas testadas (p<0.001). Analisando a cepa ATCC, foi verificado que o cimento endodôntico Epiphany® apresentou ação similar ao cimento Endofill® (p>0.05); resultado semelhante foi encontrado para o isolado 12. Quando a susceptibilidade das cepas frente aos cimentos endodônticos foi comparada verificou-se que o Isolado 12 foi menos susceptível comparado à cepa ATCC (p<0.001). Observou-se que a solução do óleo essencial de Lippia siodides a 0,5% apresentou ação similar ao hipoclorito de sódio a 2,5% quando os biofilmes das duas cepas foram expostos por 10 minutos a essas substâncias (p<0.001). Comparando a susceptibilidade das duas cepas às soluções testadas, não houve diferença entre elas (p>0.05)
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Dantas, Thereza Cristina Farias Botelho. "Terapia fotodinâmica e plasma de baixa temperatura e pressão como tratamentos alternativos contra biofilmes endodônticos patogênicos." reponame:Repositório Institucional da UFC, 2015. http://www.repositorio.ufc.br/handle/riufc/15302.
Full textAbstract:
DANTAS, Thereza Cristina Farias Botelho. Terapia fotodinâmica e plasma de baixa temperatura e pressão como tratamentos alternativos contra biofilmes endodônticos patogênicos. 2015. 116 f. Tese (Doutorado em Enfermagem) - Faculdade de Farmácia, Odontologia e Enfermagem, Universidade Federal do Ceará, Fortaleza, 2015.Submitted by denise santos (denise.santos@ufc.br) on 2016-03-01T15:37:55Z No. of bitstreams: 1 2015_tese_tcfbdantas.pdf: 3995317 bytes, checksum: fba97baf6756229d3df0bdc25b16145f (MD5)
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Photodynamic Antimicrobial Therapy (PACT) and Low Pressure Cold Plasma emerged as an effective adjunctive procedure to conventional endodontic treatment, especially in case of persistent infection. This study was divided into four chapters, which objectives were: Chapter 1) investigate the antibacterial effects of photodynamic antimicrobial chemotherapy (PACT), with different concentrations of toluidine blue-O (TBO), at three different exposure times, over suspensions of Enterococcus faecalis, using a fluorescence probe – Dihydrorhodamine 1, 2,3 for detecting the release of ROS. Chapter 2) study the antimicrobial effect of PACT mediated by Toluidine blue-O activated by red light (LumaCare® LC122) on Enterococcus faecalis and Candida albicans biofilms. Chapter 3) a tissue-tolerable-plasma (TTP) was tested for its antimicrobial activity against mature biofilm of a key endodontic bacterium Enterococcus faecalis. Chapter 4) evaluate the anti-biofilm efficacy of PACT and TTP applied on saliva-coated-teeth with 2-week E. faecalis (ATCC 29212) biofilm, treated with PACT and TTP for 3 different exposure times (1, 2 and 5 minutes) and compared with 2.5% NaOCl irrigation for 5 minutes. In chapters 2 and 3 biofilms were formed on saliva-coated hydroxyapatite discs using batch culture method at 37°C, 5% CO2. BHI broth was changed daily. In chapter 2, mature E. faecalis and C. albicans biofilms were subjected to PACT using TBO (100 μg/mL), using a non-coherent red light source (LumaCare®, 630 nm, 2 mm distance) and energy density of 118.9 J/cm2, 237.8 J/cm2 and 594.5 J/cm2 (chapter 2). Using the same growth conditions, mature E. faecalis biofilms were subject to TTP on chapter 3. The results were expressed by counting colony forming units (cfu) and group means were compared using 1-way ANOVA. The anti-biofilm effect of PACT and TTP improved as exposure time was increased, reaching the maximum effect after 5 minutes of treatment for both therapies. After 5 min of exposure, there is a significant reduction in cfu numbers in PACT and TTP treatments (p<0.05), but neither treatment was as effective as 2.5% NaOCl irrigation. Using root canals in vitro model (chapter 4) TTP was better than PACT, at 5 minutes of exposure. Bacterial killing was confirmed by CLSM/COMSTAT and SEM analysis
A terapia fotodinâmica antimicrobiana (TFDA) e o plasma de baixa temperatura e pressão (PBTP) surgem como tratamentos coadjuvantes à terapia endodôntica convencional, diante do surgimento de cepas resistentes e complexidades anatômicas do canal radicular. Esse estudo foi dividido em 4 capítulos, cujos objetivos foram: Capítulo 1) avaliar o efeito da TFDA mediada pelo TBO em diferentes concentrações e tempos de exposição à luz na produção de EROS e a viabilidade celular em culturas planctônicas de E. faecalis. Capítulo 2) avaliar os efeitos da TFDA realizada com AOT e fonte de luz vermelha, em três diferentes tempos de exposição na viabilidade de biofilmes maduros de E. faecalis e C. albicans. Capítulo 3) avaliar os efeitos do PBTP, em três diferentes tempos de exposição, na viabilidade de biofilmes maduros de E. faecalis. Capítulo 4) comparar o efeito da TFDA e do PBTP em canais radiculares infectados com biofilmes maduros de E. Faecalis, nos mesmos tempos de exposição para as duas terapias. Nos capítulos 2 e 3, os biofilmes foram crescidos em discos de hidroxiapatita, imersos em Brain-heart infusion broth (E. faecalis por 15 dias) ou RPMI 1640 medium (C. albicans por 72 horas). Os biofilmes maduros foram submetidos à TFDA mediada pelo fotossentitizador AOT (100 μg/mL) e fonte de luz vermelha (LumaCare®, 630 nm, 2 mm de distância), com densidades de energia de 118,9 J/cm2, (1 min) 237,8 J/cm2 (2 min) e 594,5 J/cm2 (5 min) (capítulo 2). Nas mesmas condições, biofilmes maduros de E. faecalis foram também submetidos à ação do PBTP (capítulo 3). Tanto a TFDA como PBTP apresentaram-se eficazes como agentes antimicrobianos em um efeito dose- dependente. No capítulo 4, 96 dentes unirradiculares foram preparados com instrumentação mecanizada. Os espécimes foram divididos em 8 grupos: 1-3 – dentes submetidos à TFDA; 4-6 dentes submetidos ao PBTP e dois grupos-controle – hipoclorito de sódio a 2,5% (positivo) e dentes sem tratamento (negativo). Os dados foram tabulados e tratados estatisticamente pelo método ANOVA (p<0,05). Houve uma redução da microbiota em todos os grupos de tratamento, com diferença estatisticamente significante entre os grupos tratados pelo PBTP e TFDA, no tempo de exposição de 5 minutos. Conclui-se então que a TFDA e o PBTP, nos parâmetros testados, apresentaram atividade antimicrobiana eficaz contra os biofilmes estudados, nos dois modelos in vitro apresentados.
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Geiss-Liebisch, Stefan Thomas [Verfasser], and Andreas [Akademischer Betreuer] Bechthold. "Accessory cell wall polymers in Enterococcus faecalis V583 and their contribution to complement resistance = Sekundäre Zellwandpolysaccharide in Enterococcus faecalis V583 und ihre Rolle in der Komplementresistenz." Freiburg : Universität, 2012. http://d-nb.info/1123469865/34.
Full text
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Fritzenwanker, Moritz [Verfasser]. "Genomsequenz des probiotischen Enterococcus faecalis Symbioflor 1 (DSM 16431) und vergleichende Genomanalyse mit den Stämmen E. faecalis V583, E. faecalis OG1RF und E. faecalis 62 / Moritz Fritzenwanker." Gießen : Universitätsbibliothek, 2013. http://d-nb.info/1065320566/34.
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Sava, Georgeta Irina. "Investigations on Enterococcus faecalis glycolipids and their role in bacterial virulence." Lübeck Zentrale Hochschulbibliothek Lübeck, 2010. http://d-nb.info/1002133866/34.
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Nascimento, Camila Almeida [UNESP]. "Ação antibacteriana da cetramida associada às solucões irrigadoras sobre Enterococcus Faecalis." Universidade Estadual Paulista (UNESP), 2013. http://hdl.handle.net/11449/108397.
Full textAbstract:
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Previous issue date: 2013-03-11Bitstream added on 2014-08-13T18:01:16Z : No. of bitstreams: 1
000731950_20150311.pdf: 325288 bytes, checksum: 324db53ef4e3d775e299c6c4c92a035e (MD5) Bitstreams deleted on 2015-03-12T12:02:42Z: 000731950_20150311.pdf,Bitstream added on 2015-03-12T12:03:13Z : No. of bitstreams: 1
000731950.pdf: 1695739 bytes, checksum: 36607b7a254d4ab1aee0e89e07392e36 (MD5)O objetivo do estudo foi avaliar a ação das soluções de hipoclorito de sódio e clorexidina associadas à cetramida e do QMiX, produto comercial que combina clorexidina, EDTA e cetramida, sobre Enterococcus faecalis (ATCC 29212) em fase planctônica e biofilme. As soluções avaliadas foram: G1: Hipoclorito de sódio (NaOCl) a 2,5%; G2: NaOCl a 2,5% + cetramida (CTR) a 0,2%; G3: Clorexidina (CLX) a 2%; G4: CLX a 2% + CTR a 0,2%; G5: CTR a 0,2%; G6: QMiX. Como controle negativo foi utilizada solução salina. O estudo foi dividido em dois capítulos. No capítulo 1, foi realizada a avaliação da atividade antibacteriana sobre os micro-organismos em fase planctônica e biofilme. Para o contato direto com E. faecalis em fase planctônica, 50 μl da suspensão bacteriana foram colocados em tubos contendo 1,45 mL de cada solução irrigadora ou associações e, após os períodos de 1 e 3 minutos foram utilizadas soluções neutralizantes da ação antimicrobiana dos irrigantes. Em seguida, foi realizada diluição decimal seriada e plaqueamento em meio Tryptic Soy agar (TSa). Para a indução dos biofilmes foram utilizados blocos de dentina bovina como substrato no período de 14 dias. Os biofilmes foram colocados em contato com as soluções avaliadas, e transferidos para tubos de ensaio contendo soluções neutralizantes. Após agitação por 60 segundos para a suspensão das células remanescentes, foi realizada diluição decimal seriada e plaqueamento em TSa em triplicata. A incubação foi realizada em microaerofilia a 37°C por 24 horas e a análise efetuada por meio da contagem de UFC mL-1. Os resultados foram submetidos aos testes ANOVA e Tukey, com nível de significância de 5%. Todas as soluções irrigadoras e associações avaliadas eliminaram completamente os micro-organismos em fase planctônica. Sobre biofilme, somente NaOCl e NaOCl+CTR apresentaram 100% de eliminação bacteriana...
The aim of this study was to evaluate the action of conventional endodontic solutions such as sodium hypochlorite and chlorhexidine associated with cetrimide and QMiX, a commercial product composed by chlorhexidine, EDTA and cetrimide, on biofilm and planktonic phase of Enterococcus faecalis (ATCC 29212). The evaluated solutions were: G1: 2.5% Sodium Hypochlorite (NaOCl); G2: 2.5% NaOCl + 0.2% cetrimide (CTR); G3: 2% Chlorhexidine (CLX) 2%; G4: 2% CLX + 0.2% CTR; G5: 0.2% CTR; G6: QMiX. Saline solution was used as negative control. The study was divided into two chapters. In Chapter 1, the antibacterial activity of the solutions on microorganisms in planktonic phase and biofilm was evaluated. For direct contact with E. faecalis in planktonic phase, 50 μL of bacterial suspension were placed in tubes containing 1.45 mL of each irrigation solution or associations and after 1 and 3 minutes, neutralizing solutions were used to stop of the antimicrobial action of endodontic solutions. Decimal serial dilutions were performed and the suspensions were plated in Tryptic Soy agar medium (TSa). Dentin bovine blocks were used as substrate for induction of biofilms for 14 days. The biofilms were placed in contact with the solutions evaluated and transferred to test tubes containing neutralizing solution. After agitation for 60 seconds to suspend the remaining cells, decimal serial dilutions were performed and the suspensions were cultivated in triplicate on TSA plates. The incubation was held in microaerophilic at 37 ° C for 24 hours and the analysis was performed by counting CFU mL-1. The results were submitted to ANOVA and Tukey test, with significance level of 5%. All irrigating solutions and associations evaluated completely eradicated the microorganisms in planktonic phase. On biofilm, only NaOCl and NaOCl+CTR showed 100%- of bacterial elimination. CLX showed similar activity to CLX+CTR, CTR and QMiX after...
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Shankar, Jayendra. "The role and regulation of exprotein expression in Enterococcus faecalis 0G1RF." Thesis, University of Liverpool, 2010. http://ethos.bl.uk/OrderDetails.do?uin=uk.bl.ethos.539589.
Full text
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Nelson, Samantha. "Purification and Characterization of a Novel Selenocysteine Lyase from Enterococcus faecalis." Master's thesis, University of Central Florida, 2014. http://digital.library.ucf.edu/cdm/ref/collection/ETD/id/6329.
Full textAbstract:
A previous study identified Enterococcus faecalis as one of two bacteria known to have the selD gene and other selenium related genes without having the genes necessary to make selenocysteine or selenouridine. EF2570, a gene in the cluster, was later shown to be upregulated during biofilm formation and also responsible for a selenite- and molybdate-dependent increase in biofilm formation in vitro. The protein encoded was identified as a selenium dependent molybdenum hydroxylase (SDMH), enzymes that contain a labile selenium atom required for activity. While the process of inserting selenocysteine into a protein is well known, the process by which a SDMH acquires a labile selenium atom has not yet been described. To begin unraveling this pathway, the nifS-like EF2568 from the gene cluster will be characterized. Some NifS-like proteins have been shown to have selenocysteine lyase activity, providing a source of selenium for selenophosphate synthetase, the selD gene product. Study of EF2568 has shown that it specifically reacts with L-selenocysteine to form selenide and alanine with L-cysteine inhibiting the reaction. Guided by homology to the well-characterized human and E. coli NifS-like proteins, mutants of the active site and substrate discerning residues were also characterized for activity with L-selenocysteine and L-cysteine. While mutation of the residue at position 112 thought to be responsible for substrate specificity did not affect reactivity of the enzyme with L-cysteine, it did affect reactivity with L-selenocysteine. Studying the characteristics of this novel group II selenocysteine lyase will provide a foundation for studying the remaining pathway.M.S.
Masters
Molecular Biology and Microbiology
Medicine
Biotechnology
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Barros, Diana Sofia Gonçalves. "Limitações das substâncias desinfectantes endodônticas convencionais na erradicação do Enterococcus faecalis." Master's thesis, [s.n.], 2011. http://hdl.handle.net/10284/2635.
Full textAbstract:
Trabalho apresentado à Universidade Fernando Pessoa como parte dos requisitos para obtenção do grau de Mestre em Medicina DentáriaIntrodução e objectivos: O tratamento endodôntico consiste na preparação químico-mecânica, nomeadamente a instrumentação do sistema tridimensional de canais, irrigação e medicação intracanalar, que visam à desinfecção do sistema de canais radiculares. Posteriormente o sistema de canais radiculares é obturado, ou seja, selado, impedindo a re-infecção do dente. O seu sucesso é significativamente influenciado pela presença de bactérias nos canais radiculares no momento da obturação. (Fabricius et alii. 2006, Siqueira e Rôças 2008, Stuart et alii. 2006, Waltimo et alii. 2005) Não obstante o facto de a infecção endodôntica ser polimicrobiana, neste trabalho será dado ênfase ao Enterococcus faecalis, que é uma bactéria com elevada patogenicidade e com elevada prevalência na patologia Endodôntica. (Kayaoglu e Ørstavik 2004, Sedgley et alii. 20062, Siqueira e Rôças 2008, Stuart et alii. 2006, Ozbek et alii. 2009) Convencionalmente, a irrigação é realizada com NaOCl ou CHX e a medicação intracanalar, se o tratamento for multi-sessões, é feita habitualmente com Ca(OH)2. O objectivo deste trabalho é verificar as limitações dos princípios activos supracitados ao E.faecalis. Materiais e métodos: Foi realizada uma pesquisa bibliográfica nas bases de dados PubMed e Embase usando as seguintes palavras-chave: “endodontic infection”, “endodontic microbiology”, “endodontic disinfection”, Enterococcus faecalis”, “virulence”, “culture”, “topic disinfection in endodontics”, “endodontic treatment”, “root canal disinfection”, “irrigating solutions”, “Enterorococcus faecalis erradication in endodontics” publicados entre 2003 e 2011, da qual resultaram 73 artigos que continham informação relevante para este estudo e cumpriam os critérios estabelecidos. Resultados: Verificou-se que tanto a CHX, como o NaOCl e o Ca(OH)2 possuem limitações na erradicação do Enterococcus faecalis, sendo que não há consenso quanto ao protocolo de desinfecção ideal. RESUMO vi Conclusões: Um método eficaz proposto para a erradicação do E.faecalis consiste em boa técnica asséptica, aumento do calibre apical até #30, irrigação alternada com NaOCl a 2,5%, uma solução quelante como EDTA a 17% e CHX a 2%, e como medicação intracanalar, se tratamento for multi-sessão, com CHX em gel a 2%. Introduction and objectives: Root canal therapy consists in chemo-mechanical preparation, particularly with the instrumentation of the three-dimensional system of canals, irrigation and dressing, aimed at disinfecting the root canal system which is then sealed, preventing the re-infection of the tooth. Its success is significantly influenced by the presence of bacteria in root canals at the time of filling. (Fabricius et alii. 2006, Siqueira e Rôças 2008, Stuart et alii. 2006, Waltimo et alii. 2005) Even though the endodontic infection is polymicrobial, this work will be given emphasis to Enterococcus faecalis, a bacterium that is highly pathogenic and high prevalent in Endodontic pathology. (Kayaoglu e Ørstavik 2004, Sedgley et alii. 20062, Siqueira e Rôças 2008, Stuart et alii. 2006, Ozbek et alii. 2009) Conventionally, irrigation canal is performed with NaOCl or CHX and intracanal medication if treatment is multi-session, is usually made with Ca(OH)2.The aim of this study is to observe the limitations of the above active substances against E.faecalis. Materials and methods: It was performed a literature search in the databases PubMed and Embase with the following keywords: “endodontic infection”, “endodontic microbiology”, “endodontic disinfection”, Enterococcus faecalis”, “virulence”, “culture”, “topic disinfection in endodontics”, “endodontic treatment”, “root canal disinfection”, “irrigating solutions”, “Enterorococcus faecalis erradication in endodontics” published between 2003 and 2011, of which resulted in 73 articles that contained information relevant to this study and met the established criteria. Results: It was found that both CHX, such as NaOCl and Ca(OH)2 have limitations in eradicating Enterococcus faecalis, and there is no consensus on the ideal protocol disinfection. Conclusions: An effective method proposed for the eradication of E.faecalis consists of good aseptic technique, increasing the apical size # 30, alternating irrigation ABSTRACT viii with 2.5% NaOCl, 17% EDTA as a chelating solution and 2% CHX and as intracanal medication, if treatment is multi-session, with 2% gel CHX.
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Teixeira, Neuza dos Prazeres Lima. "FSR Quorum Sensing: Role in Enterococcus faecalis Biology & Host Infection." Doctoral thesis, Universidade Nova de Lisboa. Instituto de Tecnologia Química e Biológica, 2014. http://hdl.handle.net/10362/12075.
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Dissertation presented to obtain the Ph.D degree in Biology.When Quorum Sensing (QS) was discovered it was realized that bacteria have a kind of "social life" and they cooperate and coordinate their activities on the bodies/environments the infect/live.(...)
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Nascimento, Camila Almeida. "Ação antibacteriana da cetramida associada às solucões irrigadoras sobre Enterococcus Faecalis /." Araraquara : [s.n.], 2013. http://hdl.handle.net/11449/108397.
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Orientador: Juliane Maria Guerreiro TanomaruBanca: Idomeo Bonetti Filho
Banca: Flaviana Bombarda de Andrade
Resumo: O objetivo do estudo foi avaliar a ação das soluções de hipoclorito de sódio e clorexidina associadas à cetramida e do QMiX, produto comercial que combina clorexidina, EDTA e cetramida, sobre Enterococcus faecalis (ATCC 29212) em fase planctônica e biofilme. As soluções avaliadas foram: G1: Hipoclorito de sódio (NaOCl) a 2,5%; G2: NaOCl a 2,5% + cetramida (CTR) a 0,2%; G3: Clorexidina (CLX) a 2%; G4: CLX a 2% + CTR a 0,2%; G5: CTR a 0,2%; G6: QMiX. Como controle negativo foi utilizada solução salina. O estudo foi dividido em dois capítulos. No capítulo 1, foi realizada a avaliação da atividade antibacteriana sobre os micro-organismos em fase planctônica e biofilme. Para o contato direto com E. faecalis em fase planctônica, 50 μl da suspensão bacteriana foram colocados em tubos contendo 1,45 mL de cada solução irrigadora ou associações e, após os períodos de 1 e 3 minutos foram utilizadas soluções neutralizantes da ação antimicrobiana dos irrigantes. Em seguida, foi realizada diluição decimal seriada e plaqueamento em meio Tryptic Soy agar (TSa). Para a indução dos biofilmes foram utilizados blocos de dentina bovina como substrato no período de 14 dias. Os biofilmes foram colocados em contato com as soluções avaliadas, e transferidos para tubos de ensaio contendo soluções neutralizantes. Após agitação por 60 segundos para a suspensão das células remanescentes, foi realizada diluição decimal seriada e plaqueamento em TSa em triplicata. A incubação foi realizada em microaerofilia a 37°C por 24 horas e a análise efetuada por meio da contagem de UFC mL-1. Os resultados foram submetidos aos testes ANOVA e Tukey, com nível de significância de 5%. Todas as soluções irrigadoras e associações avaliadas eliminaram completamente os micro-organismos em fase planctônica. Sobre biofilme, somente NaOCl e NaOCl+CTR apresentaram 100% de eliminação bacteriana...
Abstract: The aim of this study was to evaluate the action of conventional endodontic solutions such as sodium hypochlorite and chlorhexidine associated with cetrimide and QMiX, a commercial product composed by chlorhexidine, EDTA and cetrimide, on biofilm and planktonic phase of Enterococcus faecalis (ATCC 29212). The evaluated solutions were: G1: 2.5% Sodium Hypochlorite (NaOCl); G2: 2.5% NaOCl + 0.2% cetrimide (CTR); G3: 2% Chlorhexidine (CLX) 2%; G4: 2% CLX + 0.2% CTR; G5: 0.2% CTR; G6: QMiX. Saline solution was used as negative control. The study was divided into two chapters. In Chapter 1, the antibacterial activity of the solutions on microorganisms in planktonic phase and biofilm was evaluated. For direct contact with E. faecalis in planktonic phase, 50 μL of bacterial suspension were placed in tubes containing 1.45 mL of each irrigation solution or associations and after 1 and 3 minutes, neutralizing solutions were used to stop of the antimicrobial action of endodontic solutions. Decimal serial dilutions were performed and the suspensions were plated in Tryptic Soy agar medium (TSa). Dentin bovine blocks were used as substrate for induction of biofilms for 14 days. The biofilms were placed in contact with the solutions evaluated and transferred to test tubes containing neutralizing solution. After agitation for 60 seconds to suspend the remaining cells, decimal serial dilutions were performed and the suspensions were cultivated in triplicate on TSA plates. The incubation was held in microaerophilic at 37 ° C for 24 hours and the analysis was performed by counting CFU mL-1. The results were submitted to ANOVA and Tukey test, with significance level of 5%. All irrigating solutions and associations evaluated completely eradicated the microorganisms in planktonic phase. On biofilm, only NaOCl and NaOCl+CTR showed 100%- of bacterial elimination. CLX showed similar activity to CLX+CTR, CTR and QMiX after...
Mestre
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Dupont, Hervé. "Evaluation de la virulence de enterococcus faecalis dans les infections intraabdominales." Paris 7, 2003. http://www.theses.fr/2003PA077039.
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Alves, Eliana Sousa Cruz Ferreira. "Fotoinactivação de Escherichia coli e Enterococcus faecalis porfirinas livres e suportadas." Master's thesis, Universidade de Aveiro, 2007. http://hdl.handle.net/10773/751.
Full textAbstract:
Mestrado em MicrobiologiaA terapia fotodinâmica antimicrobiana refere-se à combinação de uma fonte de luz, oxigénio molecular e um fotossensibilizador para inactivar células microbianas. Esta terapia tem sido considerada como uma alternativa aos métodos convencionais de desinfecção da água e recentemente demonstrado eficácia na eliminação de bactérias Gram (+) e Gram (-), usando porfirinas catiónicas como fotossensibilizadores. Tendo em conta que a introdução de resíduos porfirínicos no ambiente não é aceitável, têm sido feitos alguns estudos, com resultados promissores, para avaliar a possibilidade de imobilização dos fotossensibilizadores em matrizes sólidas. Para a monitorização do processo de fotoinactivação tornam-se necessários métodos mais rápidos de detecção microbiológica em detrimento dos métodos convencionais laboriosos de plaqueamento, incubação e contagem de colónias. Foi objectivo deste trabalho estudar o efeito fotodinâmico sobre bactérias fecais, Enterococcus faecalis [Gram (+) e Escherichia coli Gram (-)], usando como fotossensibilizadores porfirinas catiónicas meso-substituídas na forma livre e imobilizadas em suportes sólidos. Foi também objectivo deste trabalho transformar E. coli numa estirpe indicadora bioluminescente para avaliar a eficácia de porfirinas utilizando um método rápido, sensível e rentável. Nos ensaios com porfirinas livres, a suspensões bacterianas de 107 CFU mL-1 foram adicionadas três concentrações de porfirinas: 0.5, 1.0 e 5.0 μM. Nos ensaios com porfirinas suportadas, a suspensões bacterianas de 105 CFU mL-1 foram adicionadas duas concentrações de porfirinas: 20 μM e 200 μM. As amostras foram expostas à luz branca artificial (40 W m-2) durante 270 minutos. Uma estirpe de E. coli foi transformada com os genes luxCDABE da bactéria marinha bioluminescente Vibrio fischeri. A estirpe recombinante resultante foi usada para avaliar, em tempo real, o efeito de três porfirinas catiónicas meso-substituídas na actividade metabólica das bactérias, usando luz branca artificial (40 W m-2) e luz solar PAR ( 620 W m-2). As duas porfirinas tricatiónicas (Tri-Py+-Me-PF e Tri-Py+-Me-CO2Me) foram as mais eficientes sobre as duas estirpes, originando um decréscimo na sobrevivência superior a 99,999% ( 7.0 log) após 270 minutos de irradiação para a concentração de 5 μM. A porfirina tetracatiónica também foi eficiente para ambas as estirpes (decréscimo na sobrevivência de 7 log com 5.0 μM após 270 minutos). As duas porfirinas dicatiónicas e a monocatiónica foram as x | menos eficazes nas duas estirpes. Os híbridos Tri-Py+-Me-PF-CS (fotossensibilizador catiónico imobilizado em material de suporte catiónico) e Tri-Py-Me-PF-CS (fotossensibilizador neutro imobilizado em material de suporte catiónico) foram igualmente eficientes contra as duas estirpes (decréscimo de 5 log com 20 e 200 μM na sobrevivência de E. faecalis após 90 minutos e decréscimo de 5 log de E. coli após 180 minutos de irradiação). Com o híbrido Tri-Py+-Me-PF-NS (fotosensibilizador catiónico imobilizado em material de suporte neutro), praticamente não se verificou redução na viabilidade de E. coli, mesmo com 200 μM, mas E. faecalis foi inactivada após 90 minutos. A fotoinactivação da E. coli bioluminescente foi eficiente (> 4 log de decréscimo da bioluminescência) com as três porfirinas, sendo a porfirina tricatiónica Tri-Py+-Me-PF a mais eficiente. Com a luz solar PAR, o processo de fotoinactivação é mais rápido e mais eficiente do que com a luz artificial, para as três porfirinas. O número de cargas positivas, a distribuição das cargas na estrutura da porfirina e o carácter lipofílico dos grupos meso-substituintes são factores que parecem exercer efeitos diferentes na inactivação das duas estirpes. A carga no fotossensibilizador imobilizado não é um factor essencial à fotoinactivação da célula Gram (-), desde que os grupos amino do material de suporte estejam cationizados. A presença de carga positiva no material de suporte é necessária para conseguir a fotoinactivação de E. coli. O uso de bactérias bioluminescentes permite avaliar de forma simples e rápida a eficiência da actividade anti-metabólica destas porfirinas. As vantagens económicas que a terapia fotodinâmica representa em termos de fonte de luz utilizada, síntese e produção de fotossensibilizadores imobilizados, possibilidade de remoção do meio após fotoinactivação e posterior reutilização, além do decréscimo significativo de sobrevivência observado, demonstram que esta metodologia poderá ser uma opção no processo de desinfecção de águas. ABSTRACT: Photodynamic antimicrobial therapy means the combination of a light source, molecular oxygen and a photosensitizer to inactivate microbial cells. It has been considered to be a possible alternative to conventional methods of water disinfection and has recently been used to efficiently destroy Gram (+) and Gram (-) bacteria using cationic porphyrins as photosensitizers. Since the environmental contamination with porphyrinic residuals is not acceptable and in a way to overcome this water output contamination issue, some pilot studies have immobilized the photosensitizers on solid matrices, with promising results. To monitor the photoinactivation process, faster methods for microbial detection are required instead of laborious conventional plating, overnight incubation and colony count methods. The aims of this work were to investigate the photodynamic effect on faecal bacteria, the Gram (+) Enterococcus faecalis and the Gram (-) Escherichia coli, using free and immobilized meso-substituted cationic porphyrins as photosensitizers. It was also an aim of this work to transform E. coli into an indicator bioluminescent strain in order to evaluate the efficiency of porphyrins in photoinactivation by a rapid, sensitive and cost-effective bioluminescent method. In the experiments with porphyrins in the free form, bacterial suspensions of 107 CFU mL-1 were added with 0.5, 1.0 and 5.0 μM of porphyrin. In the experiments with immobilized porphyrins, bacterial suspensions of 105 CFU mL-1 were added with 20 μM e 200 μM of porphyrins. The samples were exposed to artificial white light (40 W m-2) for 270 minutes. Then, E. coli cells were cloned with luxCDABE genes from the marine bioluminescent bacterium Vibrio fischeri and the recombinant bioluminescent indicator strain was used to assess, in real time, the effect of three cationic meso-substituted porphyrin derivatives on their metabolic activity, under artificial (40 W m-2) and solar irradiation ( 620 W m-2). The most effective photosensitizers against both tested bacteria were the two tricationic porphyrins (Tri-Py+-Me-PF and Tri-Py+-Me-CO2Me) when a 5.0 μM was used, leading to > 99,999% ( 7.0 log) photoinactivation after 270 minutes of irradiation. The tetracationic porphyrin was also a good PS against both bacteria (7 log drop with 5.0 μM after 270 minutes). Both dicationic and the monocationic were the least effective against the two strains. The Tri-Py+-Me-PF-CS (cationic photosensitizer on cationic material) and Tri-Py-Me-PF-CS (neutral photosensitizer on cationic material) hybrids were almost equally xii | effective for both Gram types (5 log decrease with 20 and 200 μM on E. faecalis after 90 minutes and 5 log decrease on E. coli after 180 minutes of irradiation). With Tri-Py+-Me-PF-NS (cationic photosensitizer on neutral material), almost none reduction on E. coli viability was observed, even with 200 μM. However, E. faecalis was completely inactivated after 90 minutes. The photoinactivation of bioluminescent E. coli was effective (> 4 log bioluminescence decrease) with the three porphyrins used, being the tricationic porphyrin Tri-Py+-Me-PF the most effective. With solar irradiation, the photoinactivation process was faster and more efficient than with artificial light, for the three porphyrins. The number of positive charges, the charge distribution in the porphyrins’ structure, and the lipophilic character of the meso-substituent groups, seem to have different effects on the photoinactivation of both bacteria. The charge in the photosensitizer is not essential to Gram (-) cell photoinactivation, as long as the amino groups of the support material are cationized. The presence of positive charge in the support material is needed to achieve photoinactivation of E. coli. The use of bioluminescent bacteria allows the assessment of the efficiency of anti-metabolic action of these porphyrins. The economical advantages this approach represents in terms of light source used, synthesis and production of the immobilized photosensitizers, possibility of removal after photoinactivation and further reuse, besides the significant photoinactivation observed, makes photodynamic antimicrobial therapy an interesting option to water disinfection.