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Dissertations / Theses on the topic 'Comma 1'
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Fröhlich, Kristin, Christoph Jacobi, and P. Preusse. "Implementation of the Warner-McIntyre scheme of gravity wave parametrization into COMMA-LIM - part 1, code transfer." Universität Leipzig, 2006. https://ul.qucosa.de/id/qucosa%3A15485.
Full textAbstract:
Ein neues Schema für die Parametrisierung der Schwerewellen und ihres Einflusses auf die mittlere Atmosphäre ist für COMMA-LIM (COlogne Model of the Middle Atmosphere - Leipzig Institute for Meteorology) übernommen worden. Während das bisher in COMMA-LIM genutzte aktualisierte Lindzen-Schema (Lindzen, 1981) die Ausbreitung und das Brechen einzelner Wellen berechnet, geht das Warner und McIntyre-Schema von einem Spektrum der Schwerewellen aus. Beide Schemata gehen von Schwerewellen im mittleren Frequenzbereich zwischen Brunt-Väisäla Frequenz und Rotationsrate der Erde aus (N >> ω >> f). Erste Ergebnisse werden vorgestellt.A new scheme for the parametrizing of the gravity waves and their impact on the mean circulation of the middle atmosphere has been adapted to COMMA-LIM (COlogne Model of the Middle Atmosphere - Leipzig Institute for Meteorology). The current version based on the Lindzen-scheme (Lindzen, 1981) calculates the propagation and breaking of 48 single waves while the new Warner and McIntyre - scheme uses a spectral approach of gravity waves. Both schemes are based on the medium frequency approach locating the gravity waves between the Brunt-Väisälä-frequency and the rotation rate of the earth ((N >> ω >> f). First results are presented.
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Fröhlich, Kristin, Christoph Jacobi, and P. Preusse. "Implementation of the Warner-McIntyre scheme of gravity wave parametrization into COMMA-LIM - part 1, code transfer." Universitätsbibliothek Leipzig, 2017. http://nbn-resolving.de/urn:nbn:de:bsz:15-qucosa-221743.
Full textAbstract:
Ein neues Schema für die Parametrisierung der Schwerewellen und ihres Einflusses auf die mittlere Atmosphäre ist für COMMA-LIM (COlogne Model of the Middle Atmosphere - Leipzig Institute for Meteorology) übernommen worden. Während das bisher in COMMA-LIM genutzte aktualisierte Lindzen-Schema (Lindzen, 1981) die Ausbreitung und das Brechen einzelner Wellen berechnet, geht das Warner und McIntyre-Schema von einem Spektrum der Schwerewellen aus. Beide Schemata gehen von Schwerewellen im mittleren Frequenzbereich zwischen Brunt-Väisäla Frequenz und Rotationsrate der Erde aus (N >> ω >> f). Erste Ergebnisse werden vorgestelltA new scheme for the parametrizing of the gravity waves and their impact on the mean circulation of the middle atmosphere has been adapted to COMMA-LIM (COlogne Model of the Middle Atmosphere - Leipzig Institute for Meteorology). The current version based on the Lindzen-scheme (Lindzen, 1981) calculates the propagation and breaking of 48 single waves while the new Warner and McIntyre - scheme uses a spectral approach of gravity waves. Both schemes are based on the medium frequency approach locating the gravity waves between the Brunt-Väisälä-frequency and the rotation rate of the earth ((N >> ω >> f). First results are presented
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FUSARO, PAOLO. "CORTE COSTITUZIONALE E CONVENZIONE EUROPEA DEI DIRITTI DELL'UOMO: RILIEVI CRITICI E ASPETTI PROBLEMATICI DI UN NUOVO INQUADRAMENTO FONDATO SULL'ART. 117, COMMA 1, COST." Doctoral thesis, Università degli Studi di Milano, 2010. http://hdl.handle.net/2434/150166.
Full textAbstract:
The present research analyzes the jurisprudence of the italian Constitutional Court regarding the Convention for the Protection of Human Rights and Fundamental Freedoms. Since the decisions n° 348 and 349 of 2007 the Constitutional Court assures a stronger incidence of the international treaties on the italian law system, this study aims to underline the critical points and the possible consequences of this situation, suggesting alternatives and correctives.
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RONCO, STEFANO MARIA. "La nozione di imprenditore nel diritto tributario tra forma societaria e reddito d'impresa." Doctoral thesis, Università degli Studi di Milano-Bicocca, 2015. http://hdl.handle.net/10281/87602.
Full textAbstract:
La presente ricerca intende soffermarsi sulla portata della presunzione di cui agli artt. 6, comma 3 e 73, comma 1, T.U.I.R., che – come noto- prevede un meccanismo di automatica riconduzione ex lege di ogni entrata economica prodotta dagli enti collettivi societari commerciali nell’alveo del reddito d’impresa.
Si tratta, in particolare, di valutare la ragionevolezza di tale modulo impositivo alla luce del formante normativo e giurisprudenziale. La ricerca si muoverà su due versanti paralleli. In primo luogo – dopo un breve excursus di diritto commerciale - si cercherà di evidenziare come la presunzione di cui agli artt. 6, comma 3 e 73, comma 1 del T.U.I.R., presenti alcuni elementi di incoerenza tali da giustificare l’opportunità di un processo di riconsiderazione in una prospettiva de jure condendo. Ci si interrogherà, quindi, in merito alla possibilità di individuare un modulo impositivo alternativo che permetta di rappresentare con più pienezza - rispetto al criterio del collegamento in forza della forma giuridica - il profilo distintivo che caratterizza gli enti collettivi commerciali rispetto alle altre figure di enti collettivi nonché, più in generale, che possa coordinarsi meglio al complessivo modello del reddito d’impresa. In secondo luogo, si indagherà in merito alla sufficienza della forma giuridica commerciale per la collocazione di ogni entrata economica nell’alveo del reddito d’impresa. Ci si soffermerà, a tale riguardo, sulla tematica dell’abuso della forma giuridica, valutando quali possano essere le conseguenze di tale patologia. Tali profili saranno analizzati alla luce del prisma offerto dall’istituto dell’interposizione, differenziando il fenomeno dell’abuso della forma giuridica a seconda che vengano in considerazione situazione di interposizione reale e di interposizione fittizia. Si formuleranno, in ultimo, alcune riflessioni tese ad approfondire i risvolti in sede di diritto punitivo connessi all’abuso della forma giuridica, prendendo in esame, in particolare, la giurisprudenza formatasi in materia di sanzioni tributarie amministrative ed in materia di confisca in sede di diritto penale.
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Ameqrane, Ilhame. "Dégénérescence rétinienne chez la souris rd10 Implication de SIRT 1 et PGC-1 alpha ?" Paris 5, 2011. http://www.theses.fr/2011PA05T041.
Full textAbstract:
Les rétinopathies pigmentaires constituent un groupe d’affections rétiniennes héréditaires touchant 1/4000ème de la population dans les pays occidentaux et présentant une dégénérescence progressive des photorécepteurs conduisant, à plus ou moins longue échéance, à la cécité. Malgré les nombreux travaux portant sur ces pathologies, il n’existe à ce jour aucun traitement efficace pour prévenir la perte des photorécepteurs. Il est donc nécessaire de mieux connaître les voies de signalisations impliquées dans l’évolution des dégénérescences rétiniennes. Parmi les modèles d’étude de ces pathologies, nous avons choisi de travailler avec la souris rd10 qui présente un avantage certain car la dégénérescence rétinienne débute au stade post natal 18 jours, soit après la mise en place des différentes couches rétinienne. SIRT 1 est une protéine déacétylase étudiée notamment dans le cadre du fonctionnement cérébral basal et des dégénérescences affectant le système nerveux central. Cette protéine joue un rôle essentiel dans la survie cellulaire, l’homéostasie énergétique et la réparation de l’ADN. Une de ces cibles est la protéine PGC-1 alpha, qui a surtout été étudiée pour son rôle dans le métabolisme cellulaire et mitochondrial. Des études récentes ont montré que la désacétylation de PGC-1 alpha par SIRT 1 permettait de réduire la mort neuronale inhérente à des pathologies telles la maladie d’Alzheimer et de Huntington. La rétine est un tissu nerveux appartenant au système nerveux central. Nous nous sommes donc intéressés à l’implication possible de SIRT 1 et de PGC-1 alpha lors d’une dégénérescence rétinienne, notamment la rétinopathie pigmentaire. Cependant, aucune étude de ces protéines n’a été menée dans la rétine, normale ou dégénérative. Dans un premier temps, nos travaux ont porté sur la caractérisation de SIRT 1 et PGC-1 alpha dans la rétine de souris normale. Chez la souris rd10, nous avons montré une altération de l’expression de SIRT 1 au cours de la dégénérescence. Celle-ci est corrélée à l’apoptose des photorécepteurs. Enfin, l’étude de PGC-1 alpha dans la rétine de souris rd10 a montré une diminution de son acétylation dès les stades précoces de la dégénérescence rétinienne, supposant que l’activation de la protéine est augmentée pendant le processus dégénératif. La désacétylation de PGC-1 alpha étant effectuée par SIRT 1, ce résultat suggère que la régulation de la voie SIRT 1/ PGC-1 alpha pourrait être importante au cours des dégénérescences rétiniennes. Cette étude est la première à caractériser SIRT 1 et PGC-1 alpha dans les différentes couches rétiniennes de même que la première à mettre en évidence l’implication probable de ces protéines au cours de la dégénérescence rétinienneRetinopathies are characterized by a progressive degeneration of photoreceptors, leading to blindness. Until now, there are no treatments to prevent the loss of photoreceptors, that’s why it’s important to study the mechanisms involved in the degenerative processes. Rd10 mouse is a good model for retinopathy because the first steps of degeneration occur after the development of the different retinal layers. SIRT 1 is a desacetylase protein involved in DNA repair and in survival cell. PGC-1 alpha is a target of SIRT1, has particularly been studied for its roles in mitochondrial metabolism. PGC-1 alpha desacetylation by SIRT1 has been shown to reduce neuronal death in several neurodegenerative diseases. Retina is part of the central neuronal system, that’s why we studied the involvement of SIRT1 and POGC-1 alpha in a model in retinitis pigmentosa. First, we characterized SIRT1 and PGC-1 alpha expression in normal mouse retina. In rd10 retina, we observed an alteration of SIRT1 expression correlated with photoreceptor apoptosis. Then, we showed a decrease in PGC-1 alpha acetylation since early stages of degeneration, supposing that the activation of the protein increases during the degenerative process. PGC-1 alpha is known to be desacetylated only by SIRT1 which suggest that SIRT1/PGC-1 alpha axis could be important in the development of retinal degeneration. This study is the first to characterize SIRT1 and PGC-1 alpha in retina and to highlight their potential involvement during retinal degeneration
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Wipff, Julien. "Implication de la fibrilline-1 et bases génétiques de la sclérodermie systémique." Paris 5, 2009. http://www.theses.fr/2009PA05T037.
Full textAbstract:
Des donnees recentes montrant des anomalies de la Fibrilline-1 (FBN-1) et du TGFbeta font penser que la sclerodermie systemique (ScS) cette maladie pourrait appartenir au groupe des fibrillinopathies. L'etude cas-temoins du gene FBN1 a partir d'une cohorte de patients ScS Caucasiens Europeens n'a pas montre d'association. Par ailleurs, on a observe une diminution, in vivo, du reseau microfibrillaire dermique des patients ScS sans anomalie des fibroblastes dermiques. Les resultats de 1'etude de 1'Endogline (ENG), un recepteur du TGFbeta, ont souligne son interet dans la ScS. Le sequencage de ce gene ainsi que des recepteurs ALK1, TGFBR2 et BMPR2 n'a pas permis de detecter de mutations mais de suggerer 1'interet de tester certains variants. Les principaux resultats d'une strategic gene candidat (HIFJA, ACE, SLC6A4, TPH1, KCNA5, PTPN22, IRF5, STAT4) ont montre une association forte entre IRF5, STAT4 et la ScS, en particulier avec son phenotype fibrotiqueRecent evidences suggested that Systemic sclerosis (SSc) could belong to fibrillinopathies because of Fibrillin-1 (FBN-1) and TGFbeta abnormalities inECM. First FBN-1 assessment, performed with a case-control study, did not detect association between FBN1 gene polymorphic markers and SSc. Then, we show a decrease of tissular FBN-1 microfibrillar network observed in the dermis of SSc patients but absence of in vitro alteration of synthesis, secretion and organization of microfibril network by fibroblasts. For TGFbeta pathway, subsequent analyses evaluate TGFbeta receptors with i) the study of Endoglin by case-control study and biochemical dosages it) sequencing of four TGFbeta receptors (ENG, ALK1, TGFBR2 and BMPR2). The most interesting results of the candidate gene strategy (HIFJA, ACE, SLC6A4, TPH1, KCNA5, PTPN22, IRF5, STAT4) were found for IRF5 and STAT4 genes which are associated with SSc and in particular with its fibrotic phenotype
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Travagli-Gross, Julia. "Régulation transcriptionnelle du gène codant pour la protéine SOCS-1." Paris 11, 2005. http://www.theses.fr/2005PA114821.
Full textAbstract:
L'Interleukine-4 est une cytokine pléiotropique qui joue de nombreux rôles biologiques après fixation sur son récepteur. L'activation des tyrosines kinases JAK a un rôle clef dans l'activation des voies de signalisation, incluant le recrutement et la tyrosine phosphorylation du facteur de transcription STAT6. Les protéines STATs peuvent dimériser, transloquer dans le noyau et réguler de nombreux gènes en réponse à l'IL-4. Afin de contre réguler l'effet des cytokines, il existe des régulateurs négatifs. Parmi ces régulateurs, les protéines SOCS ont été décrites pour réguler négativement la voie JAK-STAT. Notre travail a consisté à caractériser le promoteur du gène Socs-1 et à étudier les régions promotrices ainsi que les voies de signalisation mises en jeu après une stimulation des cellules HaCaT (kératinocytes) par l'IL-4. Nous avons également étudié la régulation du promoteur du gène Socs-1 après une stimulation des kératinocytes par l'Interféron-γ qui est connu pour être un très bon inducteur du gène Socs-1. Nous avons mis en évidence l'implication du facteur de transcription IRF-1 dans la régulation de l'expression du gène codant pour la protéine SOCS-1 dans des kératinocytes stimulés par l'IFN-γInterleukin (IL)-4 is a pleotropic cytokine, which displays a variety of biological responses by binding to high affinity receptor complexes. The Jak-STAT pathway has been shown to be activated by IL-4. Activation of JAK, is pivotal for the activation of downstream signaling events including the recruitment and rapid tyrosine phosphorylation of STAT6. STAT6 can dimerize and translocate into the nucleus, where it regulates IL-4 target genes. Responsiveness to cytokines depends upon a balance of positive and negative regulators. Among these regulators SOCS proteins have been described to negatively regulate the JAK/STAT pathway. IL-4 upregulates Socs-1 in the keratinocyte HaCaT cell line, we investigated which sequence of the 5' Socs-1 gene are responsive to IL-4. Collectively, our data demonstrate the involvement of STAT6 and Ets, via a composite DNA element, in IL-4 regulation of Socs-1 gene expression in keratinocytes. We also studied the regulation of the promoter of the Socs-1 gene after stimulation by the IFN-g which is known to be very good inductive Socs-1 gene. We therefore examined the IFN-g activated transcription factors implicated in regulation of Socs-1 gene
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Duron, Emmanuelle. "Système IGF-1, maladie d’Alzheimer et maladies cardio-vasculaires." Paris 5, 2011. http://www.theses.fr/2011PA05T030.
Full textAbstract:
La recherche de marqueurs de risque et de bio marqueurs précoces de la maladie d’Alzheimer (MA) représente un enjeu important. L’hypertension artérielle est un facteur de risque de MA mais l’impact d’un traitement antihypertenseur sur le déclin cognitif dans la MA déjà déclarée, était inconnu. Nous avons réalisé une étude prospective incluant 321 patients (âge moyen: 78 ans) suivis 3 ans, évalués annuellement par le Mini-Mental State Examination (MMSE/30). Le déclin cognitif des patients sous traitement antihypertenseur était moins important que ceux qui n’avaient pas de traitement antihypertenseur (p <0,001), après ajustement sur l’âge, le sexe, le niveau de pression artérielle à l’entrée, le niveau d’éducation et le MMSE à l’entrée. Par ailleurs, l’Insulin-Like Growth Factor (IGF-1) et l’Insulin-Like Growth Factor Binding Protein -3 (IGFBP-3), sont impliquées dans la physiopathologie de l’athérosclérose et de la MA. Nous avons conduit une étude visant évaluer l’association entre concentrations sériques d’IGF-1/IGFBP-3 (ELISA) et les fonctions cognitives chez des sujets âgés. Six cent quatre vingt quatorze sujets (âge moyen: 78 ans) ont été inclus dans 4 centres mémoire: 224 atteints de MA, 257 de Mild Cognitive Impairment (MCI) et 213, témoins cognitivement normaux (conjoints des patients). Les concentrations sériques d’IGFBP-3 étaient significativement plus élevées chez les témoins que chez les MCI et les MA après ajustement sur l’âge, le sexe, le niveau d’éducation et le statut ApoEε4 (p<0,005). Les concentrations sériques d’IGF-1 étaient les mêmes dans les 3 groupes. Les déterminants principaux de la MA étaient l’âge ((OR (95%CI)= 1,11 (1,07-1,15)), le sexe féminin ((OR (95%CI)= 0,53 (0,31 -0,90)), le statut ApoE ε4 (OR (95%CI)= 2,76 (1,68-4,54), un bas niveau d’éducation ((OR (95%CI)= 4,73 (2,17 -12,3)) et des concentrations sériques d’IGFBP-3 basses (OR (95%CI)= 0,83 (0,70 -0,98)). Nous conduisons une étude prospective pour établir si les concentrations sériques d’IGF-1/ IGFBP-3 sont des déterminants de la conversion MCI-MASince no curative treatments are available for Alzheimer’s disease (AD), focus of early risk factors and markers is of major interest. Hypertension is a risk factor for AD but the impact of antihypertensive therapy on the cognitive function in patients already diagnosed with AD is unknown. We conducted an observational study, including 321 AD outpatients (mean age: 78 years), followed-up three years with a yearly cognitive evaluation by Mini-Mental State Examination (MMSE/30). MMSE means were significantly higher among patients using antihypertensive therapy compared to those without antihypertensive therapy, after adjustment for age, gender, education level, blood pressure and MMSE at baseline (p< 0. 001)). Insulin-like Growth Factor-1 (IGF-1) and Insulin-like Growth Factor Binding Protein-3 (IGFBP-3) are involved in atherosclerosis and may be involved in MA pathogenesis. We assessed the relationship between IGF-1, and IGFBP-3 (ELISA) serum levels and cognitive impairment. In this cross-sectional study, 694 elderly subjects (mean age: 78. 6 years) were included in four memory centers: 224 subjects were diagnosed with AD, 257 with Mild Cognitive Impairment (MCI) and 213 cognitively normal subjects (recruited among patients caregivers) constituted the control group. IGFBP-3 serum levels were higher in the controls as compared to the MCI and AD patients after adjusting for age, gender, educational level, and ApoE ε4 status (p<0. 05). The IGF-1 serum levels were similar between the 3 groups. The main determinants of AD were age (OR (95%CI) = 1. 11 (1. 07-1. 15)), female gender (OR (95%CI)=0. 53 (0. 31 ? 0. 90)), ApoE ε4 status (OR (95%CI)= 2. 76 (1. 68 - 4. 54)), low educational level ((OR (95%CI)= 4,73 (2. 17 - 12. 3)) and low IGFBP-3 level (OR (95%CI)= 0. 83 (0. 70 -0. 98)). These results justify a prospective study to evaluate whether IGF-1/ IGFBP-3 serum levels are determinants of progression from MCI to AD
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Nora, Tamara. "La diversité génétique et phénotypique des populations virales issues de patients infectés par VIH - 1." Paris 7, 2007. http://www.theses.fr/2007PA077187.
Full textAbstract:
Au cours de mon travail de thèse, nous avons développé une méthode originale d'étude de la diversité génétique du VIH. Cette méthode est fondée sur l'isolement de virus clonaux issus d'événements d'infection uniques à partir du plasma de patients infectés. L'analyse des séquences génomiques issues des virus clonaux nous a permis de quantifier in vivo un taux de recombinaison élevé chez les six patients étudiés, de démontrer le rôle de la recombinaison dans l'échappement du VIH aux traitements antirétroviraux, via un rôle dans la génération et la préservation de la diversité génétique du VIH. Nous avons aussi étudié les propriétés fonctionnelles des protéines Env provenant de virus clonaux isolés chez cinq patients. L'étude d'Env distinctes issues d'un même patient a révélée une extraordinaire diversité fonctionnelle, même parmi les virus utilisant le même co-récepteur. Cette diversité fonctionnelle se traduit par un large spectre d'infectivités sur un type cellulaire donné, des différences dans leur capacité relative à infecter différentes cellules cibles et des différences de sensibilités à certains inhibiteurs d'entrée. Aucune corrélation entre l'infectivité de ces virus clonaux et la sensibilité aux inhibiteurs d'entrée n'est observée, ce qui indique que ces propriétés fonctionnelles peuvent être, dans une certaine mesure, dissociéesDuring my thesis, we developed a new technique for study the genetic diversity of HIV. This method is based on the isolation of infectious clonal viruses directly resulting from single plasma-derived infections events. A comparison of the genomic sequences of clonal viruses from six patients demonstrated strong evidence for extensive recombinaison in vivo, showed that recombination could increase the diversity of drug resistant genotypes and reveals that recombination contributes to the generation and preservation of the HIV-1 diversity. The isolation of clonal viral populations from five different patients permits to evaluate the phenotypic properties of Env proteins exprimed by clonal viruses. Even when comparaisons were restricted to viruses from a same patient with similar tropism, genetically diverses Env proteins exhibited a remarkable fonctionnal diversity, included a wide range of infectivities for a given target cell, differences in their relative ability to infect different target cells and differences in sensibility to inhibition by some entry inhibitors. No correlation was observed between viral infectivity and inhibition by entry inhibitors, indicating that theses properties can be dissociated
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Heinis, Mylène. "Etude des effets de l'oxygène dans le développement pancréatique : implication de HIF-1 alpha." Paris 5, 2010. http://www.theses.fr/2010PA05T040.
Full textAbstract:
Le dysfonctionnement du tissu endocrine du pancréas peut aboutir au diabète. La thérapie cellulaire du diabète constitue un axe de recherche important, afin de produire en masse des cellules 3 fonctionnelles. Ainsi la compréhension des mécanismes cellulaires et moléculaires qui gouvernent la différenciation des cellules 3 est primordiale. L'objectif de ma thèse a été de caractériser le rôle de l'oxygène. Nous avons montré que la différenciation des cellules p dépend de la pression d'oxygène (pO2) et que la pO2 contrôle. L'expression de Ngn3 en modulant la stabilité de la protéine HIF-la. L'hypoxie régule également l'expression de Hesl, une cible du récepteur Notch activé, via HIF-la. Ainsi, une voie Notch intacte est nécessaire pour que l'hypoxie puisse réprimer la différenciation des cellules β. Nous avons également montré qu'au cours du développement, HIF-la était exprimé dans les cellules précurseurs puis diminuait, suggérant que HIF-la pourrait avoir un rôle physiologiqueThe dysfunction of the endocrine tissue of pancreas can lead to diabetes. Up to date, diabetes can be treated but not cured. Cell therapy of diabetes is a important area of research to produce an important functional β cell mass. Thus, understanding the molecular and cellular mechanisms that govern the differentiation of β cells is paramount. The objective of my thesis was to characterize the role of the tension of oxygen (pO2). We have shown that differentiation of ft-cells depends on the pO2. Notably, pO2 controls the expression of Ngn3 by modulating the stability of HIF-1a protein. Hypoxia also regulates the expression of Hes 1, a target of the activated Notch receptor via HIF-1 alpha. Furthermore, our data indicate that integrity of the Notch pathway is essential for hypoxia to repress β cells differentiation. We have also shown that during pancreas development, HIF-1 alpha was expressed in the precursor cells and next decreased, suggesting that HIF-1 alpha have a physiological role
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Auffret, Alexandra. "Caractérisation des dysfonctionnements synaptiques précoces sur des modèles animaux de maladies d'Alzheimer exprimant une mutation de la présénilile 1." Paris 5, 2009. http://www.theses.fr/2009PA05T016.
Full textAbstract:
Les maladies d'Alzheimer (MA) sont des maladies neurodégénératives caractérisées par la présence de plaques neurotoxiques. Une faible proportion des MA sont des formes familiales qui peuvent avoir pour origine des mutations des gènes de deux acteurs majeurs, la protéine précurseur du peptide p-amyloïde ou les présénilines. Ces formes génétiques sont rares mais elles ont l'intérêt de susciter la création de modèles animaux définis. Les mutations de la PSI sont responsables de la majorité des MA familiales. Mon projet de thèse est d'étudier, sur des souris transgéniques porteuses de mutation, la mutation L286V ou la mutation M146V de la PSI, les dysfonctionnements précoces de la transmission synaptique qui pourraient conduire à une désorganisation progressive des circuits neuronaux au cours du vieillissement. L'ensemble des résultats obtenus suggère que les mutations de la PSI altèrent différentes formes de plasticité synaptique de manière dépendante de l'âge, mettant en évidence les rôles multiples de la PSI dans la plasticité synaptique et montrant que la PSI jouerait un rôle important dans la pathologie et dans le vieillissement normalAlzheimer's disease (AD) is the most common cause of dementia in the elderly characterized by amyloid plaques. Mutations in Presenilin or Amyloid Precursor Protein genes cause early-onset familial forms of AD. Familial mutations led to the creation of several transgenic mice. PS1 mutations cause the most agressive forms of Familial Alzheimer's disease. My PhD project was to study age-dependent synaptic dysfunctions on transgenic mice expressing human Presenilin 1 familial Alzheimer's disease mutations L286V or M146V. Taken together, these results support the view that PS1 mutations promote synaptic dysfunctions and underline the crucial role of PS1 during both normal and pathological aging
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Novak, Jan. "Rôle des lymphocytes TNK dans le développement du diabète de type 1." Paris 5, 2005. http://www.theses.fr/2005PA05D008.
Full textAbstract:
Les lymphocytes TNK, qui sont restreints par la molécule CD1d, possèdent des fonctions immunorégulatrices. En effet, la reconstitution de cette population ainsi que leur stimulation inhibe le développement du diabète de type 1. Nous avons étudié le mécanisme de protection du diabète par les lymphocytes TNK. Notre étude a montré que les lymphocytes TNK inhibent la différenciation des lymphocytes T anti-îlots en cellules effectrices ainsi que leur capacité de détruire les cellules β pancréatiques. La protection est indépendante de la production de cytokines comme l' IL-4, IL-10, IL-13 et le TGF-β, alors que les contacts cellulaires sont indispensables pour la fonction inhibitrice des lymphocytes TNK. La molécule CD1d qui est reconnu par le récepteur T des cellules TNK n'est pas impliquée dans ces contacts cellulaires et donc dans leur fonction inhibtriceNKT cells, unconventional T cells restricted by theCD1d, molecule,have regulatory functions. Teir failures were implicated in the pathogenesis of several autoimmune diseases including TIDM. The experimental strategies based on the reconstitution or stimulation ofNKT cells have beneficial effect on the disease course. We investigated the mechanism of the protection from T1DM by NKT cells. Our data reveal that NKT cells block the differentiation of naïve anti-islet Tcells into effectors and their capacity to kill pancreatic β cells. The inhibitory action of NKT cells is independent of cytokines produced by NKT cells. Instead, cell contacts are required for the inhibition by NKT cell. The inhibition by NKT cells does not require their interaction with CD1d, contrarily to the involvement of this interaction in NKT cell development and several other functions
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Schnekenburger, Michael. "Régulation de l'expression de la glutathion S-transférase P1-1 au cours de la différencification de la lignée leucémique humaine K562." Reims, 2004. http://theses.univ-reims.fr/exl-doc/GED00000075.pdf.
Full textAbstract:
La @glutathion S-transférase (GST) P1-1 est une enzyme associée à la carcinogenèse et au développement de résistance aux médicaments anticancéreux. Notre hypothèse de travail repose sur le fait que la différenciation cellulaire peut-être une approche thérapeutique dans le traitement des leucémies. Notre objectif est de savoir si l'expression du gène codant pour la GSTP1-1 est modulée au cours de la différenciation. Nos résultats montrent que l'expression de la GSTP1-1 est augmentée par des inducteurs de la différenciation érythroi͏̈de (anthracyclines, hémine) de la leucémie humaine K562, alors qu'elle est diminuée par le TPA qui induit la voie mégacaryocytaire dans ces cellules. L'induction de différenciation par le butyrate vers ces voies myéloi͏̈des s'accompagne d'une diminution de l'expression de l'ARNm de GSTP1-1. L'étude de la séquence promotrice du gène de la GSTP1-1 nous a permis de découvrir deux séquences GATA. La caractérisation des sites met en évidence un complexe résultant de l'interaction entre le site situé à -1208 et le facteur de transcription GATA-1, impliqué dans les processus de différenciation hématopoi͏̈étique. Avec les anthracyclines (aclarubicine et doxorubicine), le TPA et le butyrate, l'intensité de ce complexe est corrélée à l'expression de l'ARNm de GSTP1-1 et à la voie de différenciation induite. Dans le cas de l'hémine, c'est une stabilisation de l'ARNm de GSTP1-1 qui est à l'origine de l'accumulation d'ARNm observée. En conclusion, nous montrons que la GSTP1-1 est régulée au cours de la différenciation érythroi͏̈de et mégacaryocytaire de cellules leucémiques avec la participation probable de GATA-1@Glutathione S-transferase (GST) P1-1 is an enzyme implicated in carcinogenesis and closely associated with the development of resistance to anti-cancer drugs. Our working hypothesis is based on the fact that the cellular differentiation can be used as a therapeutic approach in the treatment of leukaemias. We wanted to know if the GSTP1-1 expression is modulated during erythroid and megakaryocytic differentiation. Results show that its expression is increased during aclarubicine (acla), doxorubicin (dox) and hemin-induced erythroid differentiation of the human K562 cells (a pluripotent chronic myelogenous leukaemia). In contrast, GSTP1-1 expression is down-regulated during phorbol ester TPA-induced megakaryocytic differentiation of these cells. Moreover, time- and concentration-dependent activation of both erythroid and megakaryocytic differentiation pathways by butyric acid progressively inhibited GSTP1-1 expression. An analysis of the GSTP1-1 promoter sequence enabled us to discover two GATA sequences. By electrophoretic mobility shift assay, we determine the specificity of a GATA-1 binding on the site located at -1208. GATA-1 is known to be implicated in the process of hematopoietic differentiation and we show that GATA-1 promoter binding activity is correlated with the GSTP1-1 mRNA expression depending on the differentiation pathway induced by acla, dox, TPA and butyrate. A post-transcriptional stabilization of mRNA is involved in GSTP1-1 increase during hemin-induced erythroid differentiation. In conclusion, these results demonstrate the implication of GATA-1 transcription factor in differentiation-specific variations of GSTP1-1 expression
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Frisan, Emilie. "Etude de la différenciation érythroïde des syndromes myélodysplasiques de faible risque : rôle des protéines GATA-1 et Hsp70." Paris 5, 2010. http://www.theses.fr/2010PA05T007.
Full textAbstract:
L'engagement des progéniteurs hématopoïétiques normaux vers la lignée érythroïde est contrôlé par le stem cell factor (SCF) et) l'érythropoïétine (Epo) alors que la différenciation érythroïde terminale dépend de l'Epo. La dysérythropoïèse des syndromes! myélodysplasiques (SMP), maladies clonales de la cellule souche hématopoïétique, associe un défaut de différenciation des| progéniteurs et un excès d'apoptose des précurseurs. Ce travail montre : (1) l'implication du réticulum endoplasmique dans l'apoptose en aval du récepteur à domaine de mort Pas, (2) le défaut d'activation des MAPK par le récepteur de l'Epo chez les patients résistants au traitement par l'Epo, et (3) le clivage du facteur de transcription érythroïde GATA-1 par la caspase-3 par défaut de localisation nucléaire de la protéine chaperon Hsp70. L'export nucléaire d'Hsp70 dépend de sa phosphorylation en réponse au| SCF et serait augmenté par une expression ectopique du récepteur au SCF dans les érythroblastes matures de SMDNormal hematopoietic progenitors commitment into erythroid lineage is controlled by stem cell factor (SCF) and erythropoietin (Epo) while erythroid terminal differentiation is only Epo-dependent. DyserythropoYesis of myelodysplastic syndromes (MDS) which clonal disorders of the hematopoietic stem cell, combines a defective differentiation of the progenitors and an increased apoptosis of the precursors. This work shows (1) the implication of endoplasmic reticulum in MDS apoptosis downstream of death domain) receptor Fas, (2) defective Epo-dependent activation of the MAPK in patients resistant to Epo treatment, and (3) a caspase-3-mediated Cleavage of the erythroid transcription factor GATA-1 due to a defective nuclear localization of the chaperone protein Hsp70 in MDS. Nuclear export of HspVO is regulated by AKT phosphorylation in response to SCF and would be increased by an ectopic expression) of SCF receptor in MDS mature erythroblasts
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Zammattio, Françoise. "Voie d'accès et activités anti-tumorales : -2-styryl-4h-1-benzopyran-4-ones." Nantes, 1990. http://www.theses.fr/1990NANT03VS.
Full text
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Griseri, Thibault. "Rôle immunorégulateur des lymphocytes TNK dans le diabète de type 1 et les infections virales." Paris 5, 2006. http://www.theses.fr/2006PA05N24S.
Full textAbstract:
Les lymphocytes TNK sont des lymphocytes T non conventionnels. Ils expriment un TCR avec une chaîne α invariante Vα14 et des marqueurs associés aux cellules NK. Ils reconnaissent la molécule de classe I non-classique CD1d qui présente des glycolipides endogènes et exogènes. Fonctionnellement, ils sont capables de sécréter rapidement de grandes quantités de cytokines comme l’IL-4 et l’IFNγ et possèdent des capacités immunostimulatrices et immunosuppressives. Les lymphocytes TNK sont impliqués dans les réponses anti-infectieuses et anti-tumorales. Ils jouent également un rôle protecteur dans plusieurs maladies autoimmunes. Le diabète de type 1 est une maladie autoimmune qui est associée à la destruction des cellules pancréatiques productrices d’insuline par des lymphocytes T autoréactifs. Plusieurs travaux ont rapporté un effet protecteur des lymphocytes TNK dans le diabète de type 1, dans le cadre de modèles polyclonaux ou d’un modèle monoclonal CD4. Dans la première partie de cette thèse, nous avons étudié l’influence des lymphocytes TNK dans le cadre d’un transfert monoclonal de lymphocytes T CD8 anti-îlots. Les lymphocytes TNK dans ce modèle ne sont pas capables d’inhiber la réaction autoimmune, mais au contraire ils aggravent la maladie en stimulant la réponse destructrice des lymphocytes T CD8 anti-îlotsInvariant natural killer T (iNKT) cells can prevent type 1 diabetes by impairing T cell responses to pancreatic β cells. As iNKT cells can also promote T cell responses to pathogens, and as viruses can trigger autoimmune diabetes, we investigated the effect of iNKT cells on virus-induced diabetes. Mice expressing the lymphochoriomeningitis virus (LCMV) nucleoprotein (NP) in their pancreatic β cells develop diabetes after LCMV infection. Here, we show that although iNKT cells promote systemic anti-LCMV CD8 T cell responses, theyn also completely abolish LCMV-induced diabetes. Locally in the pancreas, iNKT cells induced the production of large amount of antiviral cytokines inhibiting LCMV replication
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Ntayi, Carole. "Implication des metalloprotéinases matricielles-1 et -2 dans l'invasion du mélanome : régulation par le collagène de type I et les peptides d'élastine." Reims, 2003. http://www.theses.fr/2003REIMM204.
Full textAbstract:
L'objectif de notre travail a été d'étudier (i) l'implication des MMP-1 et MMP-2 dans le potentiel invasif de cellules de mélanome au sein d'une matrice tridimensionnelle de collagène de type I, et (ii) l'influence des peptides d'élastine dans ce processus. Nos résultats montrent que l'invasion in vitro d'une matrice tridimensionnelle de collagène de type I par des cellules de mélanome est corrélée à l'activation des MMP-1 et MMP-2, et à une diminution concomitante des TIMP-1 et TIMP-2. L'ajout de peptides d'élastine à la matrice collagénique a pour effet de potentialiser les capacités invasives de la lignée de mélanome la plus invasive, en augmentant préférentiellement l'activation de la MMP-2 via le récepteur de l'élastine@In this study, we investigated the role of MMP-1 and MMP-2 in melanoma cells invasion through a three-dimensional type I collagen matrix, and regulation by elastin peptides in vitro. We showed that melanoma cells invasion through a three-dimensional type I collagen matrix was correlated with MMP-1 and MMP-2 activation, and a concomitant decrease of TIMP-1 and TIMP-2. Adding elastin-derived peptides to the collagen matrix, enhanced invasive potential of the highly metastatic melanoma cells via elastin binding protein by up-regulating MMP-2 activation
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Vallois, David. "Analyse de facteurs génétiques impliqués dans le développement du diabète de type 1 chez la souris NOD." Paris 5, 2007. http://www.theses.fr/2007PA05T026.
Full textAbstract:
Le diabète de type 1 (DT1) est une maladie multifactorielle pour laquelle des facteurs environnementaux associés à un terrain génétique de prédisposition sont responsables de la destruction auto-immune des cellules |3 insulino-sécrétrices par des lymphocytes T. Au locus Iddô du chromosome 6 murin, les allèles NOD confèrent à la lignée témoin NOD (CO) une susceptibilité au DT1 alors que les allèles C3H/HeJ confèrent une protection contre la maladie à la lignée congénique NOD. C3H 6. VHI (lignée 6. YIII). Mes résultats suggèrent que plusieurs facteurs concourent à une meilleure régulation de la réaction auto-immune chez la lignée 6. VTH : (i) une activité suppressive in vivo accrue des cellules T régulatrices, (ii) une diminution de la voie de signalisation TLR1 conduisant à l'altération des signaux de costimulation au niveau des cellules T et à la diminution de l'expression de cytokines pro-inflammatoires par les macrophages, (iii) une altération du développement des cellules iNKT CD4+Type 1 diabetes (T1D) is a multifactotial disease: some environmental factors in association with susceptible genetic background lead to the destruction of insuline-producing {J cells by autoreactive T cells. NOD alleles at the Idd6 locus (murine chromosome 6) confer susceptibility to T1D whereas C3H/HeJ alleles in NOD genetic background confer resistance to the disease. Our studies of the congenic mouse strain NOD. C3H 6. VTH (strain 6. VHI) showed that some factors are responsible of its diabetes resistance : (i) a higher suppressive function of regulatory T cells, (ii) the downregulation of Tlrl gene expression leads to reduced costimulatory signals on T cells and to the downregulation of pro-inflammatory cytokines genes expression by macrophages. Genetic(s) factor(s) involved in this phenotype localize at the Idd6. 3 locus (iii) a two fold reduction of iNKT CD4+ cells subset, restricted to the Idd6. 2 locus
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Grela, Françoise-Irène. "Modulation de la réponse immunitaire par TLR7 : rôle dans le diabète de type 1 et l'asthme allergique." Paris 5, 2008. http://www.theses.fr/2008PA05T016.
Full textAbstract:
Conformément à l'hypothèse de l'hygiène, les infections peuvent protéger des désordres immunologiques. Nous montrons que la stimulation des TLR2, 3, 4 et 7 qui détectent les infections, peut protéger les souris Non obese-diabetic (NOD), développant un diabète de type 1 spontané. Cet effet serait porté par des populations de cellules régulatrices et des cytokines immunorégulatrices. Nous avons observé que la protection induite par des agonistes de TLR2 et 3 est dépendante des cellules iNKT avec une implication de l'IL-4 pour TLR3. Par ailleurs, nous avons décrit dans un modèle d'asthme allergique que la protection induite par un agoniste de TLR7 était portée par les lymphocytes iNKT et l'IFN-y. Nous montrons in vitro que ce produit cible directement les iNKT et que la réponse ne nécessite pas la présence de cellules présentatrices de l'antigène. En conclusion, nos travaux soulignent que le ciblage des TLR module les réponses immunitaires, notamment celles dues à une perte de toléranceAccording to hygiene hypothesis, infections can protect from immune disorders. We demonstrate that stimulation of TLR2, 3, 4 and 7 that are implicated in sensing infections, can protect Non obese-diabetic (NOD) mice, which develop a spontaneous type 1 diabetes. This effect would depend on the activation of regulatory cells and immunoregulatory cytokines. We have further demonstrated that TLR2- and TLR3-induced protection were dependent on iNKT cells with an implication of IL-4 for TLR3. In an allergic asthma model, we have shown that TLR7-induced protection was dependent on iNKT cells and IFN-y. We show in vitro that this product directly target iNKT cells without requirement of antigen presenting cells. Taken together, our work emphasize the modulatory role of TLR in immune responses, and especially those due to a rupture of tolerance
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Césaire, Raymond. "Quantification par PCR en temps réel de la charge provirale HRLV-1 et application à l'étude des malaldies associées." Paris 7, 2004. http://www.theses.fr/2004PA077239.
Full textAbstract:
Nous avons mis au point une méthode de quantification de la charge provirale HTLV-1 par PCR en temps réel et appliqué cette analyse à l'étude de la paraparésie spastique tropicale associée à ce rétrovirus. La charge provirale sanguine est plus élevée dans la TSP/HAM que dans l'infection asymptomatique,rmais cette analyse n'est pas suffisamment discriminante pour contribuer au diagnostic. Par contre, la charge provirale est encore majorée dans le LCR de TSP/HAM et présente une valeur prédictive permettant de proposer l'ajout de ce paramètre aux critères de diagnostic de la maladie. La TSP/HAM est le syndrome prédominant d'une maladie inflammatoire de système pouvant atteindre le tissu oculaire, salivaire ou alvéolaire. Dans les arthropathies associées à l'HTLV-1, l'augmentation de la charge provirale dans le sang périphérique et davantage encore dans le compartiment synovial plaide en faveur d'une participation d'HTLV-1 au processus arthritique. La charge provirale sanguine est corrélée au profil évolutif de la TSP/HAM, les valeurs étant plus élevées dans les formes d'aggravation rapide. La coinfectipn par le HIV augmenterait le risque de survenue d'une TSP/HAM. Dans notre étude, la charge pro virale HTLV-1 sanguine n'est pas modifiée par la coinfection par l'HIV, mais la proportion de lymphocytes T CD4+ infectés par l'HTLV-1 parait augmentée. La charge provirale serait contrôlée par la réponse CTL avec une efficacité dictée par le polymorphisme HLA. Contrairement aux études dans la population japonaise, nous n'avons pas retrouvé d'association entre allèles HLA et charge provirale ou statut clinique. Une autre application a porté sur l'efficacité de la filtration dans la réduction du contenu pro viral de produits sanguins labiles, les résultats soulignant l'importance de la qualité de la déleucocytation. Enfin, la charge pro virale HTLV-1 est corrélée au pourcentage de lymphocytes atypiques dans l'ATL et pourrait être appliquée au suivi de la maladie résiduelleWe have developed a method for HTLV-1 pro viral load quantification by real time PCR, and applied this assay to the study of the tropical spastic paraparesis associated to this retrovirus. The proviral load in the peripheral blood is higher in TSP/HAM than in asymptomatic infection, but this analysis is unable to discriminate for disease diagnosis. However, proviral load is majored in the CSF from TSP/HAM and presents a predictive value allowing the addition of this parameter to the diagnostic criteria of the disease. TSP/HAM is the predominant manifestation of a systemic inflammatory disease reaching also ocular, salivatory _or alveplar tissues. In HTLV- 1-associated arthropathies, the increase in pro viral loads in the peripheral blood and moreover in the synovial compartment is in favour of an implication of HTLV-1 in the arthritic process. Pro viral load in the peripheral blood is correlated to the evolutive profile of TSP/HAM, the values being increased in the rapid evolving forais. HIV coinfection is suspected to increase the risk of TSP/HAM occurrence. In our study, thé peripheral blood proviral load was not modified by HIV coinfection, but the proportion of CD4+ lymphocytes mfected by HTLV- 1 appears increased. HTLV-1 proviral load may be controlled by the CTL response with an. Efficiency influenced by HLA polymorphism. In contrast with studies in the Japanese population, we did not find any association between HLA alleles and proviral load or clinical status. Another application has been the efficiency of filtration in the reduction of proviral load in blood cell components, the results confirming the importance of the quality of the white blood cells removal procedure. Finally, HTLV-1 proviral load is correlated to the percent of atypical lymphocytes in ATL and may be applied to the follow up of residual disease
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Ben, Lagha-Merkhi Nadia. "Implication de l'IGFBP-1 dans la minéralisation osseuse. Etude à l'aide d'une lignée de souris transgéniques surexprimant l'hIGFBP-1." Paris 7, 2003. http://www.theses.fr/2003PA07A001.
Full textAbstract:
Les Insulin-like growth factors (IGF-I et -IL), dont les effets sont modulés par leurs protéines de liaisons (IGFBP), jouent un rôle important dans le développement du squelette. L'expression foetale de l'IGFBP-l et la mise en place des centres d'ossification étant concomitants, la surexpression de l'hIGFBP-l de manière hépato-spécifique pourrait donc moduler l'action systémique des 10F au niveau des tissus minéralisés dans notre modèle. Ces souris transgéniques présentent un retard de croissance dès le stade foetal (E175 de Theiler), retard qui ne se compense pas à l'âge adulte. La coloration des squelettes au rouge altzarine/bleu alcian, permettant de différencier les tissus osseux et cartilagineux, montre un retard de la formation osseuse chez les souris homozygotes au niveau postérieur de la sphère cranio-faciale mais aussi au niveau de l'ensemble du squelette. Ce retard de la formation osseuse est détecté au stade anténatal (dès le stade E16,5) et n'est toujours pas compensé à neuf mois de vie postnatale. Au niveau cranio-facial, un retard de fermeture des sutures osseuses est visible au niveau des sutures lambdoi͏̈de, sagittale et de l'astérion ainsi qu'une dysmorphose postérieure. De plus, les souris homozygotes présentent une diminution de la taille des os du squelette axial et appendiculaire comparée a celle des souris non transgéniques, qui ne se compensent pas dans les stades postnataux tardifs étudiés. Ce retard de la formation osseuse, visualisé par la coloration squelettique, est confirmé, d'une part, par étude en microradiographie qui laisse apparaître une diminution de la densité osseuse au niveau des zones concernées, et d'autre part par une étude histologique, qui montre une diminution des dépôts calciques au niveau osseux au stade antenatal (E16,5 et E18,5). Une étude comparée des ARN de septum nasal de foetus F18,5 chez les souris homozygotes et non transgéniques a montré la persistance d'un marqueur cartilagineux précoce, Sox9 et de l'agrécane chez la souris homozygote, ce qui préciserait l'implication des 10F dans la différenciation précoce cartilagineuse. L'étude des ARNm de calvaria de foetus de souris F18,5 montre une diminution de Runx2 et de l'ostéocalcine chez la souris homozygotes par rapport à la souris non-transgéniques. L'ensemble de ces éléments confirme le retard de minéralisation dans la lignée de souris transgéniques. L'étude de ce modèle de souris transgéniques surexprimant l'hIGFEP-I montre un retard de la croissance dès le stade intra-utérin, un retard de la formation osseuse accompagnée de certaines dysmorphoses. Cette lignée pourrait donc par rapprochement servir de modèle.
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Yatouji, Sonia. "Structure de la chromatine et régulation transcriptionnelle du géne mdr 1 dans des cellules tumorales humaines à la chimiothérapie." Reims, 2000. http://www.theses.fr/2000REIMP203.
Full text
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Lopez, Sandra. "Rôle du cofacteur cellulaire TIP47 dans l'incorporation de la glycoprotéine d'enveloppe dans les particules virales du VIH-1." Paris 7, 2007. http://www.theses.fr/2007PA077170.
Full textAbstract:
La formation de nouveaux virus VIH-1 infectieux requiert la rencontre de trois composants majeurs viraux : la glycoprotéine d'enveloppe (Env), le précurseur Gag et l'ARN génomique. L'incorporation de Env dans la particule virale Gag est une étape cruciale puisqu'elle confère aux virions néoformés la capacité d'infecter de nouvelles cellules cibles. Pourtant les mécanismes qui la président sont largement méconnus. La première partie de mon travail de thèse a permis d'identifier le premier cofacteur cellulaire, TIP47, requis pour l'incorporation de Env. TIP47 permet l'association entre Gag et Env en interagissant simultanément avec le domaine matrice de Gag et avec le domaine cytoplasmique de la sous-unité transmembranaire TMgp41 de Env. L'incorporation de Env VIH-1 est régulée par un mécanisme actif, dans lequel l'interaction entre Gag, TIP47 et Env joue un rôle central. TIP47 est essentiel pour l'incorporation de Env dans des virions produits par divers types cellulaires cibles du VIH-1 comme les lymphocytaires T CD4+ ou les macrophages primaires. La seconde partie de ma thèse a permis la caractérisation d'un nouveau groupe de partenaires du domaine cytoplasmique de la TMgp41 de Env VIH-1 : des facteurs de transcription ancrés dans le réticulum endoplasmique. Env peut ainsi participer à la régulation de diverses voies cellulaires. L'interaction de Env avec l'un de ces facteurs, Luman, inhibe son activation. Luman inhibe l'activité de transactivation des gènes du VIH-1 et Env semble contrecarrer cette inhibition. A l'inverse, ATF6 et SREBP, les deux autres facteurs, qui sont nécessaires pour la replication du virus, seraient quan à eux activés lors de l'infection du VIH-1The formation of new infectious HIV-1 viruses requires the encounter between three major viral components: the envelope glycoprotein (Env), the Gag precursor and the genomic RNA. Env incorporation into the viral Gag particles is a crucial step since it confers to the newly formed virions the capacity to infect new target cells. Yet the mechanisms of Env incorporation are not well known. The first part of my thesis allowed us to identify the first cellular cofactor, TIP47, required for Env incorporation. TIP47 permits the association between Gag and Env by interacting simultaneously with the matrix domain of Gag and with the cytoplasmic domain of the transmembrane subunit TMgp41 of Env. HIV-1 Env incorporation is an active mechanism, in which the interaction between Gag, TIP47 and Env plays a central role. TIP47 is essential for Env incorporation into virions produced by différent target cells of HIV-1, as T CD4+ lymphocytes and primary macrophages. The second part of my thesis allowed the characterization of a new group of partners of the cytoplasmic domain of TMgp41 of HIV-1 Env: transcription factors anchored in the endoplasmic reticulum. Thus, Env can participate in the regulation of different cellular pathways. The interaction between Env and one of these factors, Luman, inhibits its activation. Luman inhibits the transcriptional activity of HIV-1 genes, and Env seems to counteract this inhibition. On the other hand, ATF6 and SREBP, the other factors we identified, are necessary for viral replication and might be activated during HIV-1 infection
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Jobard-Rouppert, Fabienne. "Deux-(thiazol-5-yloxy)éthylamines et 3-(4-arylpipérazin-yl)-1-(thiazol-5-yloxy)propan-2-ols : synthèse et évaluation pharmacologique." Nantes, 1993. http://www.theses.fr/1993NANT07VS.
Full text
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Pélerin, Hélène. "Les inhibiteurs de la protéase du VIH-1, les analogues non nucléosidiques de la transcriptase inverse du VIH-1 et la barrière hémato-encéphalique au cours de l'infection à VIH-1 : impact des protéines de détoxification dans la biodisponibilité cérabrale des antirétroviraux." Paris 11, 2005. http://www.theses.fr/2005PA114825.
Full textAbstract:
La polychimiothérapie semble diminuer l'incidence du complexe de démence associée au SIDA, laissant à penser que les antirétroviraux (ARV) pénètrent dans le parenchyme cérébral. Cependant, les données de la littérature tendent à montrer que la biodisponibilité cérébrale des ARV est limitée par des propriétés intrinsèques de la barrière hémato-encéphalique (BHE). Nous avons voulu démontrer la part de la BHE et plus particulièrement des protéines de détoxification dans l'entrée des ARV dans le système nerveux central (SNC). Après avoir développé une méthode analytique pour quantifier les ARV et mis en évidence les protéines de détoxification au niveau de notre modèle de BHE, nous avons étudié le passage de l'amprénavir (APV) de l'efavirenz (EFV) du nelfinavir (NFV) au niveau de la BHE. Nos résultats montrent que la P-gp et la BCRP, limitent l'entrée de l'EFV et de l'APV, respectivement. La P-gp ainsi que les CYP3A4 participent conjointement à une pénétration faible du NFV dans le SNCThe use of protease inhibitors (PIs) or non-nucleoside inhibitors (NNRTIs), appeared to protect specifically against acquired immunodeficiency disease syndrome dementia complex, suggesting that, in this condition, therapy might have a direct, additive effect in the central nervous system (CNS). However, several evidences suggest that these drugs and more particularly PIs are limited CNS or cerebrospinal fluid penetration due to the presence of efflux proteins like ABC multidrug transporters (P-gp, MRPs, BCRP) at level of the BBB and epithelial plexus choroïde. Evidence from in vitro and in vivo experiments has failed to resolve whether ARV CNS penetration and cerebrospinal fluid virologic suppression are clinically important. Using a new analytical method and a new in vitro human BBB model, we demonstrated the involvement of P-gp, BCRP and CYP3A4 in a limited passage of APV, EFV and NFV through the BBB
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Mazzolini, Julie Emilie. "Etude des mécanismes moléculaires de la phagocytose dans les macrophages et de sa perturbation par le VIH-1." Paris 5, 2011. http://www.theses.fr/2011PA05T001.
Full textAbstract:
La phagocytose est un mode d'internalisation de microorganismes et de débris qui conduit à la formation d'une vacuole intracellulaire de taille supérieure à 0,5 microns. Ce mécanisme est initié par l'activation de récepteurs présents à la surface des phagocytes professionnels comme les macrophages et dépend d'une intense polymérisation d'actine et d'une réorganisation de la membrane plasmique faisant intervenir une exocytose à partir de compartiments intracellulaires. Les endosomes de recyclages marqués par AP1, VAMPS et le TNFa, ainsi qu'une sous-population d'endosomes tardifs marqués par VAMP7, participent à cette exocytose. Nous avons étudié les localisations respectives de l'actine polymérisée et des ompartiments vésiculaires, par microscopie à onde évanescente. Nous avons utilisé un système de phagocytose frustrée où la cellule « phagocyte à l'infini » et s'étale sur des ligands des récepteurs phagocytaires, ainsi qu'un nouveau système que nous avons développé pour étudier la fermeture des phagosomes. D'après nos observations, l'actine-F s'accumule en périphérie de la cellule et dans les extrémités des pseudopodes alors que l'actine se dépolymérise au centre et dans la coupe phagocytaire, lieu où le trafic vésiculaire est plus actif. Ce modèle est à compléter pour préciser les acteurs moléculaires impliqués dans les étapes de progression et de fermeture des phagosomes. Le virus de l'immunodéficience humaine de type 1 (VIH-1) infecte les macrophages, ce qui provoque une déficience de phagocytose de ces cellules. Un des facteurs de virulence majeur du VIH-1 est la protéine Nef (Facteur négatif) connue pour perturber l'organisation du cytosquelette d'actine ainsi que le trafic subcellulaire. Nous avons observé que l'infection par le VIH-1 et l'expression de Nef en particulier inhibe la phagocytose par divers récepteurs des macrophages. La protéine Nef altère fortement le recrutement à la coupe phagocytaire des endosomes de recyclage porteurs d'AP1, de VAMPS et du TNFa. À contrario, Nef ne perturbe pas l'accumulation de VAMP7 ni celui de l'actine-F. Pour inhiber la phagocytose Nef requiert son site de myristylation et ses motifs LL, DD et PXXP. Enfin, nous avons constaté que Nef interagit avec AP1 via son motif LL, ce qui conduit sans doute à la perturbation des réorganisations membranaires nécessaires pour une phagocytose efficace, alors que l'actine n'est pas altérée. Mon travail de thèse a permis d'apporter des éléments nouveaux sur les mécanismes cellulaires et moléculaires de la phagocytose et de mieux comprendre les dysfonctionnements observés chez les macrophages de patients infectés par le VIHPhagocytosis is a mechanism of internalization of microorganisms and debris that leads to the formation of an intracellular vacuole larger than 0. 5 microns. This mechanism is initiated by the activation of receptors on the surface of professional phagocytes such as macrophages and depends on an intense actin polymerization and reorganization of the plasma membrane involving exocytosis from intracellular compartments. Recycling endosomes bearing AP1, VAMPS and TNFa, and a subpopulation of late endosomes bearing VAMP7, participate in the exocytosis. We investigated the respective locations of the polymerized actin and vesicular compartments, by evanescent wave microscopy. We used the "frustrated phagocytosis" system where cells try to "phagocyte to infinity" and spread on the ligands of phagocytic receptors, as well as a new system that we developed to study the step of phagosome closure. According to our observations, F-actin accumulates in the cell periphery and in the tips of pseudopodia while actin depolymerizes in the center of the phagocytic cup, where vesicular trafficking is more active. This model is to be completed to clarify the molecular players involved in the different stages of progression and closure of phagosomes. The human immunodeficiency virus type 1 (HIV-1) infects macrophages, which causes a déficience of phagocytosis of thèse cells. One of thé major virulence factors of HIV-1 is thé Nef (négative factor) protein, known to disrupt thé organization of thé actin cytoskeleton and subcellular trafficking. We observed that infection with HIV-1, and expression of Nef in particular, inhibits phagocytosis by différent receptors in macrophages. Nef protein significantly alters thé recruitment at thé phagocytic cup of recycling endosomes bearing AP1, VAMPS and TNFa. In contrast, Nef does not interfère with thé accumulation of VAMP7 nor that of F-actin. To inhibit phagocytosis Nef requires its myristoylation site and thé LL, DD and PXXP motifs. Finally, we found that Nef interacts with thé AP1 motif via thé LL motif, probably leading to thé disruption of membrane reorganization required for efficient phagocytosis, whereas actin is not altered. My thesis work helped bring new éléments on thé cellular and molecular mechanisms of phagocytosis and to better understand thé dysfunctions observed in macrophages of HIV-1-infected patients
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Jacquot, Guillaume. "Propriétés moléculaires et fonctionnelles de la protéine virale Vpr et de la sous-unité p50/dynamitine du complexe dynactine : rôles dans les étapes précoces du cycle réplicatif du VIH-1." Paris 5, 2008. http://www.theses.fr/2008PA05T014.
Full textAbstract:
De nombreux travaux suggèrent que la protéine Vpr du VIH-1 participe à l'établissement des étapes précoces du cycle de réplication virale. Les observations faites dans la littérature suggèrent qu'elle exercerait ce rôle en interagissant avec certains éléments du complexe du pore nucléaire, dont la nucléoporine hCG1. Les résultats obtenus durant ma Thèse révèlent que cette dernière propriété de Vpr est fonctionnellement liée aux autres fonctions connues de la protéine, et notamment à ses activités cytostatiques et pro-apoptotiques, et pourrait contribuer à la réplication du VIH-1 dans des cellules non prolifératives, de type macrophages. Nous avons également caractérisé une nouvelle interaction entre la nucléoporine hCG1 et la p50/dynamitine, élément central du complexe moteur microtubulaire dynéine/dynactine. Alors qu'il n'existait jusqu'à présent aucune information concernant les déterminants moléculaires de la p50/dynamitine impliqués dans son rôle structural au sein du complexe dynactine, nos travaux ont permis d'apporter les éléments nécessaires à la compréhension de ces aspects fonctionnels de la protéineNumerous studies showed that HIV-1 Vpr plays a crucial role during establishment of the early steps of the viral life cycle. Previous results obtained in our laboratory suggest that Vpr would act by interacting with the nucleoporine hCG1, a component of the nuclear pore complex. The results obtained during my PhD revealed a functional link between this property of Vpr and other known functions of the protein, among which, its cytostatic and pro-apoptotic activities. Moreover, our results suggest that Vpr accumulation at the nuclear envelope could contribute to optimization of viral replication in nondividing cells, such as macrophages. We also characterized a new interaction between the nucleoporin hCG1 and the p50/dynamitin, a central subunit of the dynein/dynactin microtubular complex. Although no information exist in the literature concerning molecular determinants of the p50/dynamitin responsible for its structural role in the dynactin complex, our work revealed the molecular and functional basis of this property
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Bouziane, Ouartini Mohammed. "Inhibition de l'integration de l'adn du vih1 par des oligonucleotides intercalants formant des triples helices." Paris 5, 1996. http://www.theses.fr/1996PA05S009.
Full textAbstract:
L'integration de l'adn viral dans le genome cellulaire est une etape cle du cycle replicatif des retrovirus. Elle est strictement necessaire a l'expression des genes viraux. Dans le cas du vih1 0 l'extremite ltr u5 on observe une courte sequence polypurine polypyrimidine de 11 bases, capable de former des triple helices avec des oligonucleotides appropries. Pour accroitre cette stabilite. Nous avons fonctionnalises ces oligonucleotides avec un agent intercalant de type oxasolopyridocarbasole. Nous montron que ces oligonucleotides pardes experiences d'empreinte a la dnasei forme des complexes stable. Par ailleur on utilisant un test d'integration in vitro, nous avons etudies leur aptitude a bloquer ce processus. L'oligonucleopide / opc inhibe specifiquement le processus d'integration. Les premieres experiences realises sur les cellules avec un oligonucleotide/ opc protege en 3' par une tige boucle montrent une inhibition du cycle replicatif avec une ci 50 de 60 nm. La specificite de reconnaissanse, l'efficacite de fixation d4un oligonucleotide triple helice couple a un agent activable ou intercalant permet d'envisager une degradation irreversible du virus integre.
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Montandon, Ruddy. "Caractérisation et évaluation thérapeutique d’une nouvelle population de progéniteurs B régulateurs dans le diabète de type 1." Paris 5, 2011. http://www.theses.fr/2011PA05T050.
Full textAbstract:
Le rôle pathogène des lymphocytes B dans les maladies auto-immunes est bien établi. Cependant, leur déplétion n’est pas toujours bénéfique, suggérant qu’ils peuvent aussi exercer un rôle protecteur. Il existe en effet plusieurs sous-populations de cellules B régulatrices (Breg) dont on connaît encore mal le développement. On ignore si elles dérivent d’un précurseur unique ou de précurseurs divers et si de tels précurseurs présentent déjà eux-mêmes des propriétés tolérogènes. Le présent travail a permis de caractériser une nouvelle population de progéniteurs hématopoïétiques immunorégulateurs émergeant sous l’influence de signaux moléculaires infectieux. Nous montrons qu’au sein d’une moelle osseuse de souris, l’activation des Toll-like récepteurs par la voie de signalisation impliquant l’adaptateur MyD88 entraîne in vitro comme in vivo l’émergence de progéniteurs pro-B tolérogènes. Après transfert adoptif, ces progéniteurs se différencient exclusivement en précurseurs transitionnels de type 2 des cellules B de la zone marginale de la rate (T2-MZP-B), l’un des sous-types de Breg les plus efficaces. Nous avons nommé ces progéniteurs induits, innés, inflammatoires, les « iproBs ». L’interféron gamma produit par les lymphocytes T effecteurs activés induit l’expression de la molécule de mort Fas-L sur les i-proBs, les rendant capables de tuer par apoptose ces mêmes effecteurs T. De plus les iproBs orientent vers un profil Th1 les effecteurs T épargnés, y augmentent les niveaux d’expression du facteur de transcription éomésodermine et réduisent l’expression d’ICOS, ce qui conduit à une diminution très importante de la production d’interleukine-21 (IL-21). Chez la souris Non Obese Diabetic qui développe un diabète spontané pour lequel l’IL-21 constitue un facteur de prédisposition, le transfert de moins de cent mille iproBs syngéniques suffit à protéger durablement de l’émergence de la maladie. Ces résultats montrent pour la première fois qu’à côté et en amont des Breg matures peuvent émerger en conditions infectieuses des sous-populations de progéniteurs hématopoïétiques tels que les iproBs, à la fois tueurs et immunorégulateurs, donnant ensuite par différenciation des Breg plus matures, ici les T2-MZP-B, également tueurs. En produisant de telles populations de progéniteurs hématopoïétiques tolérogènes, l’hématopoïèse adaptative constitue une des réponses les plus précoces de l’organisme pour le contrôle de la transition entre immunité innée et immunité adaptative, permettant de réguler l’inflammation et l’autoimmunitéB lymphocytes play both pathogenetic and protective role in autoimmune diseases. Several regulatory B cell (Breg) populations exist whose development remains so far elusive. What are their progenitors and whether they exhibit themselves tolerogenic properties remains to be investigated. We herein describe a novel tolerogenic population of pro-B cell progenitors, emerging in vitro as well as in vivo within the bone marrow upon activation of Toll-like receptors. We named those induced, innate, inflammatory progenitors "iproBs". Interferon-gamma released by activated effector T cells (Teff) induced the expression of the death molecule FasL at the surface of iproBs; enabling them to kill by apoptosis the Teff. In addition, iproBs dramatically reduced interleukin-21 (IL-21) production by Teff. When adoptively transferred into the Non Obese Diabetic mouse that develops spontaneous type 1 diabetes, less than one hundred thousand iproBs were sufficient to prevent durably disease onset. Our results describe for the first time the emergence in infectious settings of a sub-population of hematopoietic progenitors such as iproBs with both killer and immunoregulatory properties. Their regulatory potential is further prolonged by their in vivo differenciation into more mature, still killer Bregs, in this case splenic transitional type 2 marginal zone precursor B cells that represent one of the most efficient Breg subtypes
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Guili, Vincent. "Modulation de la signalisation du Nerve Growth Factor par les Cavéolines 1 et 2." Lyon, École normale supérieure (sciences), 2003. http://www.theses.fr/2003ENSL0247.
Full textAbstract:
Le Nerve Growth Factor (NGF) est une neurotrophine qui conditionne la survie et la différenciation de certaines populations de neurones. La transduction du signal du NGF repose sur deux récepteurs transmenbranaires : le récepteur p75NTR, qui fixe toutes les neutrophines et le récepteur tyrosine kinase TrkA, spécifique du NGF. L'étude de la localisation précise de ces récepteurs montre qu'ils sont localisés dans des spécialisations structurales et biochimiques de la membrane plasmique enrichies en cholestérol et en glycosphingolipides, les microdomaines membranaires (rafts et cavéoles). Les cavéolines 1 et 2 sont des constituants des cavéoles, impliquées dans la régulation du trafic membranaire et dans la transduction du signal. Les cavéolines 1 et 2 exercent une modulation différentielle sur la signalisation du NGF. L'expression de cavéoline 1 inhibe l'arrêt de prolifération et la différenciation des cellules PC12 exposées au NGF. A l'inverse, l'expression de cavéoline 2 exerce un effet potentiateur sur la différenciation induite par le NGF et sur la survie cellulaire en présence de NGF. La cavéoline 1 est co-localisée avec TrkA à la surface cellulaire et dans l'endosome. Son effet inhibiteur sur la signalisation du NGF semble reposer d'une part sur une modification des paramètres de trafic cellulaire de TrkA, vraisemblablement en interférant avec la sortie des microdomaines membranaires et avec l'internalisation et, d'autre part, sur l'inhibition intracellulaire des effecteurs de TrkA, se traduisant par l'inhibition de la phosphorylation du facteur de transcription CREB et la non-induction de l'inhibiteur de cycle cellulaire p21wafI/CIPI. Les mécanismes de l'effet potentiateur de la cavéoline 2 sont en revanche moins évidents puisque la cavéoline 2 est restreinte à l'appareil de Golgi et ne se co-localise pas avec TrkA. Son effet potentiateur suggère l'existence d'un mécanisme de régulation négative de TrkA qui serait lui-m^eme inhibé par la cavéoline 2.
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Patey, Martine. "Recherche de nouveaux marqueurs protéiniques impliqués dans le remodelage de la matrice extracellulaire en pathologie thyroi͏̈dienne." Reims, 2002. http://www.theses.fr/2002REIMM205.
Full textAbstract:
Nous avons étudié et caractérisé la thrombospondine-1 (TSP1) et ses récepteurs intégrine anb3 et CD36 dans le tissu thyroi͏̈dien humain, les tumeurs bénignes et malignes, en collaboration avec les travaux " in vitro " effectués par le Laboratoire de Biochimie de la Faculté des Sciences et de médecine utilisant un modèle de culture de cellules thyroi͏̈diennes de porc. Les résultats montrent le rôle joué par la TSP1et ses récepteurs intégrine anb3 dans le remodelage de la matrice extracellulaire des goitres et dans le stroma desmoplasique des cancers papillaires de bon pronostic, alors qu'elle est peu exprimée dans les carcinomes vésiculaires et anaplasiques. Dans notre travail, la caractérisation des métalloprotéinases (MMP2-MMP9) dans les tumeurs thyroi͏̈diennes humaines montrent une augmentation de l'expression de la MMP2 (forme latente et active) dans les carcinomes papillaires et anaplasiques. Le rôle pronostic de ces marqueurs est discuté@We have studied and described the pattern of distribution of thrombospondin (TSP1)and its receptors anb3 integrin and CD36, in human thyroid tissue and in benignand malignant conditions. This study was realised in collaboration with the Department of Biochemistry of the Faculty of Sciences and Medicine on an in vitro model of porcine thyroid culture. The results show the importance of the interaction between anb3 integrin and TSP1 during the remodeling of the matrix in fibrous goiters and in the desmoplasic stroma of papillary carcinomas of good prognosis, compared to follicular and anaplastic carcinoma. We have also characterized the matrix metalloproteinases MMP2 and MMP9 and its enzymatic activity by gel zymography, which has demonstrated an increased expression of MMP2 in papillary and anaplastic carcinoma. The pronostic impact of these markers in thyroid neoplasms is discussed
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Moulin, Claudie. "Trois,quatre-dihydro-2h-1-benzo(b)pyrane-2-carboxamides analogues du trolox et derives a potentialites anti-allergique ou antidiabetique." Nantes, 1996. http://www.theses.fr/1996NANT12VS.
Full text
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Casse, Céline. "Etude de l'activation paradoxale de la transcription a partir du promoteur du ltr-vih-1 par les inhibiteurs de la transcription." Paris 5, 2001. http://www.theses.fr/2001PA05S001.
Full textAbstract:
L'actinomycine d (actd) et -amanitine sont des inhibiteurs frequemment utilises pour inhiber la transcription. De facon inattendue, la transcription a partir du promoteur ltr du virus de l'immunodeficience humaine acquise de type 1 (vih-1) est activee au niveau de l'elongation dans des cellules humaines et murines traitees avec ces drogues, alors que les promoteurs du cytomegalovirus humain et du gene de choc thermique hsp70 sont reprimes. L'activation du ltr-vih-1 ne fait pas intervenir les sequences b et tar presentes dans le promoteur et coincide avec une phosphorylation du domaine c-terminal (ctd) de la plus grande sous-unite de l'arn polymerase ii, rpb1. L'activation du ltr-vih-1 et la phosphorylation du ctd sont toutes deux inhibees par des inhibiteurs de ctd-kinases et en particulier par le 5,6-dichloro-1--d-ribofuranosyl-benzimidazole. L'efficacite avec laquelle ces composes bloquent la phosphorylation du ctd et la transcription in vivo est correlee avec leur capacite d'inhiber la kinase cdk9/pitalre in vitro. Ainsi le facteur positif de l'elongation de la transcription p-tefb contribuerait-il a la phosphorylation du ctd in vivo et a l'activation du ltr-vih-1 induite par l'actinomycine d.
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Sin, Soraya. "Identification de gènes impliqués dans le développement de métastases pulmonaires dans le cancer du sein : Etude fonctionnelle de la kindline-1." Paris 5, 2010. http://www.theses.fr/2010PA05T048.
Full textAbstract:
Les cellules tumorales mammaires disséminent fréquemment au niveau des poumons, mais les mécanismes sous-jacents sont mal connus. Les analyses transcriptomiques de tumeurs du sein par puces à ADN ont permis d’identifier des signatures d’expression génique associées à la survenue de métastases tous sites confondus, mais ne tenant pas compte de leur organo-spécificité. Nous avons comparé les profils d’expression génique de métastases pulmonaires à ceux de métastases non pulmonaires, issues de cancer du sein, et développé une signature de 6 gènes identifiant les tumeurs ayant une plus forte propension à métastaser au poumon. L’un des gènes de notre signature code la kindline-1, régulant les fonctions des intégrines. Nous avons montré qu’elle constitue un marqueur indépendant prédictif des métastases pulmonaires du cancer du sein et pronostique des adénocarcinomes pulmonaires. En accord avec ces résultats, la déplétion de la kindline-1 dans un modèle murin syngénique de cancer du sein inhibe la croissance tumorale mammaire et la formation de métastases pulmonaires. La surexpression de la kindline-1 induit l’activation de la voie de signalisation TGF-β et des changements caractéristiques de la transition épithélio-mésenchymateuse (TEM), incluant une surexpression de marqueurs mésenchymateux et une perte d’expression de marqueurs épithéliaux. La surexpression de la kindline-1 augmente aussi la prolifération, la migration et l’invasion cellulaires. Nos résultats soulignent le rôle clé de la kindline-1 dans la progression tumorale mammaire, et dans celle d’autres cancers, suggérant une nouvelle cible thérapeutique dans le contrôle du développement tumoral dans les cancers humainsBreast cancer cells frequently disseminate to lungs, however the underlying mechanisms are unclear. Microarray-based transcriptome analysis allowed the identification of gene expression signature associated with metastasic outcome, but without taking account of the organ-specificity of breast cancer metastasis. We compared gene expression profiles of lung metastases with those of non lung metastases, all from breast cancer patients, and we developped a 6-gene signature that discriminates breast primary tumors with a higher risk of lung metastasis. Among the 6 genes of the signature, one encodes kindlin-1 protein, a regulator of integrin functions. We identified kindlin-1 as an independant predictor of breast cancer lung metastasis and as a pronostic marker of lung adenocarcinoma. Consistent with these results, kindlin-1 depletion inhibits primary mammary growth and lung metastasis in a syngeneic mouse model of breast cancer. Kindlin-1 overexpression induces activation of the TGF-β signaling pathway and changes characteristic of epithelial-mesenchymal transition (EMT), including a gain of mesenchymal markers and a loss of epithelial markers. Kindlin-1 overexpression increases cell proliferation, migration and invasion. Our results underline the key role of kindlin-1 in mammary tumor progression and eventually in other cancer types, suggesting a novel therapeutic target in the control of tumor development in human cancers
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Smadja, David. "Rôle du récepteur de la thrombine PAR-1 dans l'expansion des progéniteurs endothéliaux." Paris 5, 2006. http://www.theses.fr/2006PA05P625.
Full textAbstract:
La transplantation des progéniteurs endothéliaux circulants (PEC) améliore la néovascularisation dans des modèles pré-cliniques d’ischémie. Leur faible nombre dans la circulation sanguine est un handicap pour leur utilisation en thérapie cellulaire, et la mise au point d'un procédé d’expansion des PEC à partir du sang circulant est une étape indispensable. La caractérisation des PEC en culture durant une expansion in vitro de 5 semaines nous a permis de mettre en évidence la présence à un niveau stable du récepteur à la thrombine PAR-1 en surface cellulaire, ainsi qu’une augmentation significative de l’expression du récepteur au VEGF, VEGFR2/KDR. Des anomalies vasculaires chez la souris invalidée pour le gène du PAR-1 ont été récemment décrites, suggérant un rôle de ce dernier dans le développement embryonnaire de l’arbre vasculaire. Etant donné le rôle émergent des PEC dans la néo-vasculogenèse, nous avons étudié le rôle du PAR-1 sur ces cellules via son activation par le peptide agoniste SFLLRN. L’activation des PEC ne modifie ni le nombre, ni la cinétique d’apparition des colonies de PEC issus de sang de cordon. L’activation du PAR-1 induit en revanche un effet prolifératif sur les PEC, dépendant de la synthèse d’angiopoïétine 2. Cet effet s’accompagne de la réorganisation du cytosquelette d'actine, favorisant la migration spontanée des PEC en chambre de Boyden et leur migration dirigée vers le SDF-1 grâce à l’augmentation de CXCR-4. Le traitement des PEC par le peptide SFLLRN induit également une augmentation de la formation des pseudo tubes vasculaires en Matrigel, sous la dépendance du système SDF-1/CXCR-4. Nos résultats confirment le rôle du PAR-1 dans l’angiogenèse et ouvrent des perspectives dans le cadre de la mise au point d’un procédé d’expansion in vitro des PEC. Toutefois, les effets de l’activation du PAR-1 des PEC de sang de cordon ne sont que peu ou pas retrouvés sur les PEC isolés à partir de sang périphérique, ce qui souligne l’intérêt de mobiliser une population de cellules plus immatures d’origine médullaireThe injection of endothelial progenitor cells (EPCs) in preclinical models of ischemia has been shown to enhance neovascularization. However, the scarcity of EPCs in human peripheral blood is a limitation for of its use as a cell therapy product, and the development of an expansion procedure is a crucial issue. In this work, we have characterized EPCs during in vitro expansion, using EPCs derived from cord blood CD34+ cells. An increased expression of KDR/VEGFR2 along expansion was observed, together with an increase of in vitro angiogenic properties. We also show the presence of the thrombin receptor PAR-1 on expanded EPCs. The importance of PAR-1 in blood vessel development has been demonstrated in knockout mice. As EPCs are thought to be involved in postnatal vasculogenesis, we examined the effect of PAR-1 activation on EPCs. PAR-1 activation induced EPCs proliferation, resulting of an angiopoietin 2 upregulation. PAR-1 activation also enhanced actin reorganization, promoting both spontaneous migration in a Boyden chamber assay and migration toward SDF-1. Finally, PAR-1 stimulation by SFLLRN increased the formation of capillary-like structures formed by EPCs in Matrigel, and this effect was abrogated by anti-CXCR-4 and anti-SDF-1 antibodies. All together, PAR-1 activation on cord blood derived EPCs led to a proangiogenic effect. In vivo, enhancement of angiogenic properties of EPCs by thrombin generated at the target site might promote vasculogenesis and thrombus resorption. Our data suggest that SFLLRN peptide could be used to expand cord blood derived-EPCs ex vivo. However, this effect was not found on EPCs isolated from adult blood, underlining the usefulness of a procedure designed to mobilize immature endothelial cells from bone marrow to peripheral blood
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Cohen-Solal, Martine. "Cytokines monocytaires et resorption au cours des pertes osseuses." Paris 5, 1994. http://www.theses.fr/1994PA05S008.
Full textAbstract:
La perte osseuse qui caracterise l'osteoporose est un facteur determinant de la fragilite osseuse. L'hyperresorption contribue a la perte osseuse par l'augmentation du nombre et de l'activite des osteoclastes. Des etudes experimentales suggerent que les cytokines jouent un role dans la regulation locale de la differenciation osteoclastique. Le but de ce travail est de preciser le role des cytokines de la resorption dans diverses situations cliniques. Grace a une nouvelle methode histomorphometrique, nous avons montre que la resorption osseuse est un phenomene majeur de la perte osseuse de patientes osteoporotiques, et que le nombre de cellules osteoclastiques est lie a l'importance de la resorption dans l'osteoporose commune. Afin d'en etudier les determinants, les modifications de production de cytokines par les monocytes circulants de femmes menopausees ont ete etudiees. L'activite de resorption osseuse in vitro de surnageant de culture de monocytes est augmentee chez des femmes menopausees, est liee a l'augmentation des taux d'il1, d'il6 et de tnf et peut etre inhibee par l'addition d'inhibiteurs. Chez des femmes plus agees non osteoporotiques, la production des 3 cytokines par des monocytes circulants en culture etait correlee a celle des monocytes medullaires prelevee au femur. Le nombre de cellules osteoclast-like (ocl) obtenu a la fin de culture des monocytes medullaires etait positivement correle au nombre d'osteoclastes presents sur les biopsies osseuses du col femoral, indiquant ainsi que la differenciation osteoclastique observee in vitro refletait l'activite osteoclastique in vivo. Enfin, nous avons etudie des patients atteints de syndrome d'hyper ige, syndrome rare d'immuno-deficience lors duquel survient des fractures. L'hyperresorption osseuse induite in vitro par les surnageants monocytaires est inhibee par l'indomethacine et s'associe a un defaut de production d'ifn.
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Culina, Slobodan. "Nouveaux éléments dans l'apprêtement des antigènes présentés par les molécules de classe 1 du Complexe Majeur d'Histocompatibilité." Paris 5, 2007. http://www.theses.fr/2007PA05T007.
Full textAbstract:
La présentation de peptides antigéniques par les molécules du CMH-I est la base de la surveillance de l'organisme, de la détection et de l'élimination de cellules infectées ou transformées, par les cellules T CD8+. Les composants de la machinerie complexe d'apprêtement des Ags et de leur présentation par les molécules du CMH-I, ont été identifiés par plusieurs groupes de recherche. Cependant, même si la séquence des événements de l'apprêtement des Ags pour la présentation par les molécules du CMH-I est actuellement bien définie, il subsiste des parties non résolues. Le sujet de ma thèse vise à élucider certains aspects peu compris de la voie d'apprêtement et de présentation des Ags par des molécules du CMH-I. La description complète des étapes d'apprêtement des Ags dans le cytoplasme ou dans d'autres compartiments cellulaires, du transport des peptides vers les molécules du CMH-I par le système complexe de chargement, de l'expression des complexe CMH I/peptide à la surface cellulaire et de l'induction d'une réponse par les cellules T CD8+, permettrait d'améliorer nos connaissances fondamentales de cette voie et de développer de nouvelles stratégies pour la lutte contre les maladies infectieuses, tumorales et auto-immunes. L'introduction de cette thèse traite trois aspects fondamentaux de la voie d'apprêtement et de présentation des Ags par les molécules du CMH-I: le rôle du protéasome, qui constitue l'un des éléments majeurs impliqués dans la génération des épitopes de classe I (sa structure, ses fonctions et son rôle dans l'apprêtement); la présentation croisée qui représente la voie de présentation des Ags exogènes par les molécules du CMH-I; l'enzyme de dégradation de l'insuline ou IDE (son rôle dans la dégradation de l'insuline). La partie expérimentale est illustrée par l'article publié ainsi que la discussion concernant l'article soumis et des résultats non publiés. Il y est exposé comment la calreticuline favorise la formation des molécules du CMH-I à basse température, capables de fixer un peptide ; les résultats que nous avons obtenus sur le rôle dans la dégradation cytoplasmique de l'insuline / proinsuline par l'enzyme de la dégradation de l'insuline ; et finalement, une stratégie de double queue TAP/Tag que nous avons développée dans le but de comprendre l'interaction entre les différents éléments de la voie de présentation.
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Clément, Thomas. "Recherche de liens entre expression d'ARN non codants et physiopathologies articulaires, utilisation des microARN comme biomarqueurs du phénotype chondrocytaire." Thesis, Université de Lorraine, 2014. http://www.theses.fr/2014LORR0113/document.
Full textAbstract:
L’arthrose est la pathologie articulaire la plus répandue et, avec l’allongement de l’espérance de vie, sa prévalence ne cesse d’augmenter. Elle se caractérise par une dégénérescence du cartilage articulaire associée à une inflammation synoviale et un remodelage anormal de l’os sous-chondral, qui résultent en une perte progressive de mobilité et des douleurs très handicapantes. Dans le cartilage, le chondrocyte est le seul type cellulaire et il est responsable de la synthèse des composants de la matrice extracellulaire (collagènes, protéoglycanes). Au cours de l’arthrose, le phénotype du chondrocyte est altéré et la balance synthèse/dégradation des composants matriciels est déséquilibrée en faveur de la dégradation du cartilage. Il n’existe actuellement aucun traitement permettant de ralentir efficacement l’évolution du processus arthrosique, de sorte que la recherche de biomarqueurs pertinents et de cibles thérapeutiques potentielles est en pleine effervescence depuis l’explosion de l’étude des microARNs. Les microARNs sont des petits ARNs non codants régulant négativement l’expression des gènes. On estime que 50% des gènes sont potentiellement régulés par les miARNs. Les miARNs semblent impliqués dans tous les processus biologiques majeurs tels que la différenciation cellulaire, l’apoptose ou encore la cancérisation. Ces petits ARN non codants sont donc des biomarqueurs potentiels très intéressants. Au cours de ces travaux de thèse l’implication des miARN dans la régulation du phénotype chondrocytaire a été étudiée. A partir d’un modèle de perte du phénotype chondrocytaire différencié, provoquée par des repiquages successifs ou une stimulation par l’IL-1β les variations du profil d’expression des miARNs ont été analysées par l’utilisation de puces dédiées. Ces données ont permis de mettre en évidence 43 miARNs candidats dont le cluster miR-23~27b~24-1 et miR-29b. L’étude de la régulation de la production différentielle des miARNs de ce cluster a été entreprise, sans que nous parvenions toutefois à apporter une réponse formelle sur les mécanismes impliqués. Néanmoins, nous avons identifié miR-29b comme un régulateur négatif de l’expression du gène codant Col-IIa1 au cours de la perte du phénotype différencié, ainsi que chez les chondrocytes « arthrosiques ». Enfin, comme il a été montré au laboratoire que l’équilibre entre les concentrations extracellulaires de pyrophosphate/phosphate inorganique (ePi/ePPi) était essentiel au maintien du phénotype chondrocytaire différencié, nous nous sommes intéressés à la régulation des gènes codant les acteurs protéiques impliqués dans cette balance (ANK, PC1, Pit-1 et TNAP). A partir de prédictions de cibles par analyse in silico, un panel de 4 miARNs candidats a été établi : let7e, miR-9, miR-188 et miR-219. Nos travaux avec des systèmes rapporteurs ont démontré l’implication de miR-9 en tant que régulateur négatif de l’expression des gènes PC-1, Pit-1 et TNAP, de façon cohérente ou non avec les prédictions bio-informatiquesOsteoarthritis (OA) is the most frequent joint disease and its prevalence still grows with the increase in lifespan. OA is characterized by articular cartilage degeneration, together with synovitis and abnormal subchondral bone remodeling, leading to progressive loss of mobility and pain. Chondrocyte is the unique cell type in cartilage which accounts for the synthesis of extracellular matrix (ECM) components (collagens, proteoglycans). During OA, chondrocyte phenotype is altered and the balance between ECM synthesis and degradation is impaired towards cartilage degradation. To date no treatment can efficiently reduce OA progression so that the search for reliable biomarkers and potential therapeutic targets is very active, particularly since the discovery of microRNAs. miRNAs are estimated to regulate 50% of cellular genes. They contribute to major cellular processes such as cell differentiation, apoptosis or tumorigenesis. Therefore, miRNAs are interesting putative biomarkers. During this PhD thesis, we studied the contribution of miARNs to the control of chondrocyte phenotype. Using a model of chondrocyte differentiated phenotype loss induced by extensive subculturing or IL-1β challenge we studied changes in miRNAs profile with microarrays. We determined a panel of 43 varying miRNA including the miR-23~27b~24-1 cluster and miR-29b. The differential production of miRNAs from this cluster has been investigated, but we didn’t succeed in identifying the underlying mechanisms. However, we identified miR-29b as a negative post-transcriptional regulator of Col-IIa1 during differentiated phenotype loss and OA. Finally, as equilibrium between extracellular levels of inorganic phosphate and pyrophosphate (ePi/ePPi) was previously shown in the laboratory to be crucial for the maintenance of a differentiated chondrocyte phenotype, we studied the regulation of the genes encoding the 4 proteins regulating this balance (ANK, PC1, Pit-1 and TNAP). From in silico analysis, we selected a panel of 4 miRNAs: let7e, miR-9, miR-188 and miR-219. Using reporter assays, we showed that miR-9 was a negative regulator of PC-1, Pit-1 and TNAP, according or not to bioinformatics prediction
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Kahhak, Larbi. "Rôle du PAF-Acéther dans les phénomènes allergiques : 1/ activation du basophile par l'intermédiaire du sérum humain, 2/ effets sur la fonction mucociliaire." Paris 5, 1994. http://www.theses.fr/1994PA05CD02.
Full textAbstract:
Le paf-acéther (paf) est un médiateur proinflammatoire dérivé du métabolisme des lipides constitutifs des membranes cellulaires, synthétisé et libéré par de nombreux types cellulaires. Nous avons étudié : 1) l'effet du sérum humain activé par le paf sur l'activation du basophile et 2) l'effet du paf sur la fonction mucociliaire. Le paf par lui-même, ainsi que le lysopaf n'induisent pas l'activation du basophile humain. Cependant le sérum humain activé par le paf, et non par le lysopaf, est capable d'induire une activation du basophile humain. Cet effet est supprimé par l'antagoniste du récepteur du paf le WEB 2086 lorsque ce dernier est mis en présence du sérum avant son activation par le paf. Par contre, le WEB 2086 reste sans effet sur l'action du sérum activé sur les basophiles. Le sérum en présence d'EGTA-Mg²+, inactivateur de la voie classique du complément, est activé par le paf et induit une diminution des BT+, la déplétion du facteur B par chauffage pendant 30 min à 56° C du sérum activé rend celui-ci inactif sur les basophiles. En absence de Ca²+, l'incubation du sérum activé avec les leucocytes est également sans effet sur les basophiles. Le paf ainsi que son métabolite/précurseur le lysopaf inhibent in vitro la fréquence des battements ciliaires (FBC) de la trachée de cobaye. Cet effet est plus marqué avec le paf C16. Le kétotifène et l'antagoniste du récepteur du paf le WEB 2086 protègent contre l'activité inhibitrice du paf sur la FBC. Dans des conditions pathologiques, la libération de paf dans les voies aériennes peut contribuer aux dommages et aux altérations de la fonction mucociliaire et par conséquent participer à long terme à la pathogenèse de la maladie pulmonaire.
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Laguette, Nadine. "Impact de la protéine Nef du VIH-1 sur le trafic intracellulaire de CD4 et le pouvoir infectieux des particules virales." Paris 5, 2008. http://www.theses.fr/2008PA05T034.
Full textAbstract:
Les multiples propriétés de la protéine Nef du VIH-1 sont responsables de sa capacité à accélérer la progression vers l'immunodéficience in vivo. Dans ce travail de thèse, nous avons choisi d'explorer les mécanismes qui régissent deux des fonctions les plus conservées dans les isolats primaires de nef: (i) la diminution de l'expression de surface de CD4 dans les cellules cibles du VIH et (ii) l'augmentation du pouvoir infectieux des particules virales néoformées. C'est en interférant avec les éléments de la machinerie de l'endocytose que Nef provoque la diminution de l'expression de surface de CD4, à la fois dans les lignées lymphoïdes et myéloïdes. Cependant, le trafic intracellulaire de CD4 est régit par des règles différentes dans ces cellules: dans les cellules myéloïdes, CD4 est rapidement internalisé, alors que dans les cellules lymphoïdes, CD4 est stabilisé à la surface, notamment grâce à son interaction avec la tyrosine kinase p56lck. Dans cette étude, nous montrons que Nef augmente le taux d'internalisation de CD4 uniquement dans les cellules qui expriment p56lck. Nef utilise donc des mécanismes distincts pour réduire l'expression de surface de CD4 dans les cellules lymphoïdes et myéloïdes. A ce jour il n'y a pas de consensus quant aux contributions respectives des fonctions remplies par Nef pendant la biogénèse virale ou lorsque le virus atteint les cellules cibles, à l'augmentation du pouvoir infectieux. Des protéines de fusion de Nef ont été construites, nous permettant de manipuler les quantités de Nef incorporées dans les particules virales. Cette étude nous a permis d'établir que l'incorporation de Nef dans les particules virales n'est pas suffisante pour induire une augmentation du pouvoir infectieux des particules virales ; le corolaire en est que Nef exerce probablement des fonctions pendant la biogénèse virale, qui sont déterminantes pour les propriétés infectieuses des particules viralesHIV-1 Nef accelerates progression towards immunodeficiency in vivo. During my thesis we explored two of the most conserved functions of Nef: (i) CD4 downregulation in HIV-1 target cells and (ii) viral infectivity enhancement. Interference of Nef with the endocytic machinery causes CD4 cell surface downregulation. However, CD4 trafficking is governed by different rules in the target cells of the infection: in myeloid cells CD4 is rapidly internalized from the cell surface whilst in lymphoid cells, CD4 is stabilized at the cell surface through interaction with the tyrosine kinase p56lck. In this study, we show that Nef increases CD4 internalization rate only in cells that express p56lck. Therefore Nef uses different mechanisms to downregulate CD4 from the cell surface of myeloid and lymphoid cells. To date, the relative contribution of the functions of Nef during viral biogenesis and upon arrival in the target cells to the Nef dependent increase of viral infectivity, have not been deciphered yet. We designed fusion proteins that allowed the manipulation of the amount of Nef in producer cells and incorporated into viral particles. This study allowed us to determine that the incorporation of Nef into viral particles is not sufficient to cause an increase of viral infectivity. Nef must therefore exert functions, during viral biogenesis, that are crucial for the infectivity of nascent viral particles
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Feugeas, Jean-Paul. "Importance fonctionnelle et structure de la partie glycannique du transporteur du glucose des erythrocytes humains." Paris 5, 1990. http://www.theses.fr/1990PA05S004.
Full textAbstract:
Au cours de ce travail, nous nous sommes attaches a mettre en evidence le role biologique de la partie glycannique du transporteur du glucose des erythrocytes humains. Nous avons donc purifie le transporteur du glucose des erythrocytes humains et etudie la structure de sa partie glycannique, constituee d'oligosaccharides n-lies. Les structures majoritaires sont des polylactosaminoglycannes bi- ou pluri-antennes, et presentant une grande heterogeneite. Nous avons realise des etudes cinetiques de transport du glucose sur le globule rouge entier et observe une grande variabilite de l'activite biologique du transporteur. Afin de disposer d'un modele plus reproductible, nous avons isole et integre le transporteur du glucose des erythrocytes humains dans la bicouche lipidique de liposomes. Disposant de ce modele, nous avons pu realiser des etudes cinetiques comparatives entre les proteoliposomes natifs et les proteoliposomes apres leur deglycosylation complete et partielle. Les resultats obtenus montrent qu'une structure glycosidique minimum est necessaire au transport du glucose. La microheterogeneite de la partie glycannique pourrait, de plus, etre responsable d'une modulation de l'activite biologique du transporteur.
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Korwin-Zmijowski, Carla. "Effets des rayonnements ultraviolets A sur la prolifération cellulaire, l'activité mitochondriale, les synthèses de collagène et des metalloprotéinases matricielles de fifroblaste dermiques humains en culture : étapes préliminaires à l'étude de fobroblastes issus de donneurs jeunes et âgés." Paris 5, 1996. http://www.theses.fr/1996PA05S016.
Full textAbstract:
La peau est l'un des premiers organes protégeant le corps des agressions extérieures. Les rayonnements solaires sont une des principales agressions physiques auxquelles elle peut être soumise. Parmi ces rayonnements, les radiations UV, de part leurs courtes longueurs d'onde, ont une énergie qui les rend particulièrement actives biologiquement. Aussi, il est intéressant de comprendre les différents processus impliqués dans les réponses cellulaires. D'autre part, la peau comme tout organe d'un être vivant est soumise à un vieillessement cellulaire entraînant des désordres majeurs et empêchant ainsi son bon fonctionnement. Du fait de l'importance de la pénétration des UVA dans le derme, il nous est apparu intéressant de comparer certaines conséquences de ces rayonnements sur les caractéristiques cellulaires des fibroblastes dermiques humains, en culture monocouche, au cours du vieillissement in vivo. Nous avons donc procédé à la comparaison des effets des rayonnements UVA sur deux populations de souches fibroblastiques, l'une constituée de souches de fibroblastes provenant de donneurs jeunes et l'autre de fibroblastes issus de donneurs âgés. Notre étude a porté d'une part, sur la prolifération cellulaire, le cycle cellulaire et l'activité mitochondriale, et d'autre part, sur les molécules impliquées majoritairement dans la formation et la dégradation de la matrice extracellulaire, à savoir, le collagène et les métalloprotéinases matricielles. Enfin, nous avons étudié l'effet de quelques matières premières cosmétiques sur ces mêmes souches fibroblastiques exposées ou non aux UVA, au niveau de la prolifération cellulaire et de l'activité mitochondriale. La première étude réalisée a porté sur la prolifération cellulaire, par numération des cellules quarante huit heures après l'irradiation. Une diminution de la prolifération, avec un effet dose-dépendant des UVA, a été mise en évidence pour l'ensemble des populations. Un effet âge-dépendant a été également démontré. En effet, la sensibilité aux UVA de la population de fibroblastes issus des donneurs âgés était plus grande. La comparaison entre les autres paramètres d'étude a été construite en imposant aux deux populations cellulaires des irradiations entraînant une inhibition de la prolifération de 50%, quarante huit heures après l'exposition. En conséquence, les fibroblastes issus de la population âgée ont été irradiés avec une dose d'UVA moins importante que ceux provenant de la population jeune. Afin de comprendre l'origine de l'inhibition de la prolifération observée, une étude du cycle cellulaire a été entreprise. Aucune différence dans la répartition des différentes phases du cycle n'a pu être révélée dans nos conditions expérimentales pour les deux populations. L'activité mitochondriale a alors été examinée à l'aide d'une nouvelle technologie. Une diminution très significative de cette activité a été observée pour les deux populations lors de l'irradiation aux UVA. Cette diminution était, là encore, âge-dépendante. Les travaux portant sur les molécules de la matrice extracellulaire ont été conduits à la fois au niveau de l'expression des trascrits des différents gènes, de la sécrétion des protéines et enfin de l'activité des enzymes étudiées. L'expression des transcrits du gène codant pour le collagène de type I ainsi que la sécrétion des protéines de collagène n'ont pas montré de différence notable entre les fibroblastes exposés et ceux non exposés, et ceci quelle que soit la population observée. En revanche, lorsque les cellules étaient irradiées, l'expression des transcrits des gènes codant pour les métalloprotéinases matricielles de type 1 (collagénase interstitielle) et de type 3 (stromelysine) était supérieure, et ce pour les deux populations cellulaires. Mais, aucun effet âge n'a pu être mis en évidence. L'activité enzymatique de ces enzymes a révélé, par zymographie, une augmentation de l'activité de la stromélysine et une inhibition de celle de la métalloprotéinase de type 2 (gélatinase A), pour tous les fibroblastes exposés, mais sans effet âge. Les effets des UVA sur les fibroblastes sont multiples et les réponses cellulaires très variées à la fois dans leur vitesse et leur complexité. Au vu de nos résultats, les UVA ont un effet néfaste sur la prolifération cellulaire et l'activité mitochondriale. Par ailleurs, ils ne semblent pas entraîner de modification de la synthèse du collagène bien que les protéines qui le dégradent ne soient plus régulées de la même façon. De plus, il semble que le vieillissement intrinsèque des fibroblastes dermiques les rendent plus sensibles aux effets des UVA au niveau de la prolifération cellulaire et de l'activite mitochondriale.
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Hammoud, Laika Taghrid. "Immunogénicité de la préproinsuline dans le diabète de type 1 humain chez un modèle murin humanisé HLA." Paris 5, 2008. http://www.theses.fr/2008PA05T022.
Full textAbstract:
Le diabète de type 1 est une maladie auto-immune résultant de la destruction spécifique des cellules bêta insulino-sécrétrices des îlots+de Langerhans et survenant sur un terrain génétique de prédisposition. Les principales cellules impliquées sont les lymphocytes T CD4 et TCD8+. Une lignée de souris transgéniques pour la molécule de classe I HLA A2. 1 et la molécule de classe II DQ8 d'une part et invalidées pour les molécules endogènes du CMH murin, d'autre part, a été créée au laboratoire. Ce modèle permet l'étude pré-clinique des réponses T CD8 et CD4 restreintes par les molécules du CMH humain impliquées dans le diabète de type 1 contre la préproinsuline humaine. Dans un premier temps, la validation phénotypique et fonctionnelle de ces souris transgéniques a été réalisée, ce qui m'a permis de prendre ce modèle pour cette étude. Les premiers résultats ont permis de caractériser quatre épitopes restreints à HLA-A2. 1 dans la séquence signal de la préproinsuline humaine, par immunisation individuelle contre une banque de peptides couvrant cette région. La réponse T-CD8 ex vivo a ensuite été étudiée par un test de cytotoxicité sur des cellules RMA-S transfectées par HLA-A201, ainsi que sur des cellules P815 transfectées par HLA-A201 et le gène de la préproinsuline humaine. Des clones et des lignées T CD8 ont ainsi été obtenus pour chaque peptide caractérisé, lesquels ont été validés par un test de cytotoxicité. La seconde partie de ce travail repose sur l'immunisation individuelle de ces souris par des peptides synthétiques couvrant toute la séquence de la préproinsuline humaine pour l'étude de la réponse T CD4 ex vivo par un test de prolifération. Cela a permis de définir quatre épitopes de la préproinsuline humaine présentés par la molécule HLA-DQ8. Ces résultats ont été confirmés par immunisation avec un pool de 4 épitopes caractérisés et donnant des résultats identiques à ceux obtenus par l'immunisation contre les peptides individuels. Afin de confirmer l'apprêtage et la présentation naturelle de ces épitopes par la molécule HLA-DQ8. La protéine recombinante de la préproinsuline a été produite par le système bacculovirus. L'immunisation par cette protéine a permis de montrer que le peptide 20-35 peut être comme l'épitope le plus immunogène caractérisé et que cette souris transgénique HLA-A2. 1/HLA-DQ8 a la capacité de développer une réponse T CD4 HLA-DQ8 restreinte contre cet épitope, qu'il soit administré sous forme synthétique ou native. L'ensemble de ces données permet donc de valider l'utilisation de ce modèle de souris humanisée comme modèle préclinique pour le développement d'approche visant la définition des autoantigènes humains associés au diabète de type 1Type 1 diabetes involves the activation of lymphocytes against p cell autoantigens. In animal models, the predominant role of T lymphocytes is supported by experiments in which diabetes is transferred into naive recipients by diabetogenic T cells, is prevented by antibodies that interfere with T lymphocyte activation or fails to develop in diabetes-prone mice in which key genes in T lymphocyte differentiation or activation are non functional. In man, T lymphocytes are predominant within insulitis at early stages of diabetes. Occurrence of diabetes in an immuno-deficient patient deprived of B lymphocytes further underscores the role of T lymphocytes in human diabetes. MHC class II-restricted CD4+ T cells are central in the autoimmune diabetes process but CDS* T cells play a pivotal role in its initiation in NOD mice. In the human, CD8+ T cells are predominant in the islet cell infiltrate of acutely diabetic patients in most observations. Recurrent diabetes in recipients of isografts from a discordant twin is accompanied by predominant CD8+ T cell infiltration. Among p cell autoantigens, proinsulin has been ascribed a key role in diabetes. In man, insulin and proinsulin are common targets of autoantibodies and T cells in diabetic and prediabetic individuals. Anti-insulin antibodies (IAA) are the first to be detected in children at risk for diabetes and carry a high positive predictive value for diabetes in siblings of type 1 diabetic patients. In NOD mice, injection of insulin-specific T cell clones accelerate diabetes. Protection from diabetes is obtained by injecting insulin in prediabetic mice. In addition, proinsulin 1"'" or 2"'" NOD mice show delayed or accelerated diabetes, respectively. We and others have obtained evidence that a restricted region of human proinsulin located in the B chain and adjacent C-peptide clusters proteasotne cleavage sites generating correct C-termini of putative MHC class 1 peptides and a high number of epitopes that are recognized by diabetic CDS* T cells. Other epitopes have been located within the A chain. Recognition of epitopes that are located within the C peptide and C peptide-B chain junction including residues that are excised during the insulin secretion process makes a strong case for proinsulin as an autoantigen in diabetes. However, there has been no study of epitopes located within the preproinsulin leader sequence despite strong evidence that leader sequence peptides can be presented by class I HLA molecules, especially HLA-A2. 1. To characterize class I-restricted epitopes within the preproinsulin leader sequence, we selected 8- to 11-mer peptides carrying anchoring residues for class I molecules. These peptides were studied for binding to common class I molecules and for carrying C-terminal residues generated by proteasome digestion. HLA-A2-restricted peptides were further tested for immunogenicity in HLA-A*0201 transgenic mice. Peptides were studied for recognition by PBMCs from diabetic patients. To study the natural processing of preproinsulin leader peptide, mouse CD8+ T cell clones specific to HLA-A*0201 -restricted peptides were tested for cytotoxicity against PS 15 cells transfected with the HHD and preproinsulin genes
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Vessière, Aurélia. "Caractérisation virologique des doubles infections et des formes recombinantes par les VIH-1 du groupe M et du groupe O au Cameroun : conséquences épidémiologiques, diagnostics et thérapeutiques." Paris 5, 2009. http://www.theses.fr/2009PA05T062.
Full textAbstract:
Le VIH-1 est divisé en 4 groupes : M (major), O (outlier), N (non-M non-O) et P. Au sein de ces groupes, la recombinaison est un phénomène extrêmement fréquent qui joue un rôle majeur dans la diversification de l’épidémie du VIH. La recombinaison résulte de phénomènes de sauts de matrice entre les 2 molécules d’ARN du virus pendant l’étape de reverse transcription. Ainsi les infections multiples, en générant des virions hétérodiploïdes, sont le pré-requis indispensable à la recombinaison. En Afrique Centrale et au Cameroun en particulier, tous les groupes du VIH-1 circulent et des cas de doubles infections VIH-1 M+O ont été rapportés. Malgré la grande divergence génétique entre les deux groupes, 3 cas de recombinaison M/O ont été mis en évidence chez des patients camerounais sans lien épidémiologique. Pour deux d’entre eux, la recombinaison impliquait le gène vpr, qui pourrait représenter une région privilégiée pour la recombinaison inter-groupe M/O. La capacité de transmission et de circulation de telles formes, qui apparaissent extrêmement rares, n’est pas connue. L’objectif de ce travail était de mettre au point et de valider des outils sérologiques et moléculaires pour la détection des recombinants M/O dans le gène vpr chez les patients doublement infectés par un VIH-1 de groupe M (VIH-M) et de groupe O (VIH-O) au Cameroun. Le dépistage des doubles infections reposait sur une stratégie de sérotypage utilisant deux antigènes gp120/V3 représentatifs des groupes M et O. Pour les échantillons doublement réactifs, un test de compétition (GSEIA) a été mis au point afin d’éliminer les réactivités croisées non spécifiques. La présence des génomes VIH-M et VIH-O a été confirmée à l’aide de PCR spécifiques de groupe ciblant les régions pol et env. Enfin, une PCR spécifique de groupe encadrant le gène vpr a été développée pour la recherche des recombinants. Cet algorithme mis en place au Centre Pasteur du Cameroun nous a permis d’identifier 5 recombinants M/O, avec un point de recombinaison dans vpr pour 4 d’entre eux. Trois recombinants vpr étaient associés à une double infection VIH-M+O ou à une infection par un VIH-M. Des recombinants M/O ont été détectés sans double infection associée, dont un chez une patiente Camerounaise vivant en France, suggérant des cas de recombinants transmis. Ce travail souligne la complexité du dépistage des formes recombinantes M/O qui nécessite la combinaison d’outils sérologiques et moléculaires ciblant différentes régions du génome, notamment dans le cas des recombinants transmis. Les résultats confirment l’importance du gène vpr dans les phénomènes de recombinaison M/O. La grande variabilité génétique des souches du groupe O pourrait avoir des conséquences en termes de prise en charge thérapeutique des patients infectés par un recombinant M/O. Enfin, le risque d’émergence de formes recombinantes circulantes M/O doit être évalué à travers une surveillance épidémiologique au Cameroun mais également dans les pays ayant un lien avec cette régionHIV-1 is divided into 4 groups: M (major), O (outlier), N (non-M non-O) and P. Among these groups, recombination is an extremely frequent phenomenon, playing a major role in the diversification of the HIV epidemic. Recombination results from strand switching between the two viral RNA molecules during the reverse transcription step. Thus, multiple infections, by generating heterodiploïd virions, are the prerequisite to recombination. In Central Africa and in Cameroon in particular, all HIV-1 groups circulate and M+O dual infections have been reported. Despite the great genetic divergence between the two groups, three cases of M/O recombinants were described in Cameroonian patients with no epidemiological link. For two of them, recombination involved the vpr gene that could represent a preferential site for M/O intergroup recombination. The transmission and circulation capacities of such forms, that appear to be extremely rare, are unknown. The objective of this work was to develop and validate serological and molecular tools for the detection of M/O recombinants in the vpr gene in patients dually infected by HIV-1 group M (HIV-M) and HIV-1 group O (HIV-O) in Cameroon. Dual infections were screened using a serotyping strategy bases on two gp120/V3 antigens representative of groups M and O. For dually reactive samples, a competitive assay (GSEIA) was developed to eliminate non specific cross-reactivities. Presence of HIV-M and O genomes was confirmed with group specific PCRs targeting the pol and env regions. Finally, a group specific PCR flanking the vpr gene was developed to detect recombinants. This algorithm implemented at Centre Pasteur du Cameroun allowed us to identify 5 M/O recombinants, with a vpr breakpoint for 4 of them. Three vpr recombinants were associated with a HIV-M+O dual infection or a HIV-M infection. Some M/O recombinants were detected in the absence of associated dual infections, of which one in a Cameroonian patient living in France, suggesting transmitted cases. This work underlines the complexity of the detection of M/O recombinants that requires the combination of serological and molecular tools targeting different regions of the genome, in particular for transmitted recombinants. Our results confirm the importance of the vpr gene in M/O recombination phenomena. The great genetic variability of HIV-O strains could have consequences on therapeutic management of patients infected with a M/O recombinant. The risk for emergence of M/O circulating recombinant forms has to be evaluated through an epidemiological surveillance in Cameroon but also in countries having a link with this region
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Leblanc, David. "Les monocytes CCR7+ comme outil de transport des nanoantirétroviraux vers le système nerveux central." Mémoire, Université de Sherbrooke, 2015. http://hdl.handle.net/11143/6774.
Full textAbstract:
Actuellement, l'infection au virus de l'immunodéficience humaine de type 1 (VIH-1) est considérée comme une infection chronique contrôlable à moyen et long terme. En effet, l'utilisation appropriée de combinaisons d'antirétroviraux ainsi qu'un suivi du développement de la résistance chez le virus peut diminuer la charge virale pendant des décennies et retarder l'apparition du syndrome d'immunodéficience acquise (SIDA). Cependant, certains de ces médicaments, et tout particulièrement les inhibiteurs de protéase du VIH-1 pénètrent difficilement dans certains organes pouvant servir de réservoirs viraux comme c'est le cas pour le cerveau. Cette limitation favorise la persistance du virus permettant la réapparition rapide d'une forte virémie si les traitements sont interrompus. La réplication du VIH-1 dans le cerveau favorise le développement de déficits cognitifs, comportementaux et moteurs à long terme chez les personnes qui en sont atteintes. L'objectif principal de ce mémoire est de vérifier la possibilité d'utiliser les monocytes comme outil de transport des antirétroviraux sous forme de nanoparticules vers le réservoir du VIH-1 dans le système nerveux central (SNC). Cet objectif est vérifié à l'aide d'une reconstitution de la barrière hématoencéphalique (BHE), où la migration des monocytes chargés de nanoantirétroviraux est évaluée avec une lignée cellulaire monocytoïde, soit les Mono-Mac-1 (MM-1).
Des particules de tailles nanométriques dans lesquelles la ritonavir est encapsulée (nanoRTV) ont été développées afin de faciliter leur chargement à l'intérieur des cellules. Des essais de cytotoxicité ont montré que la ritonavir encapsulée n'était pas plus toxique que la ritonavir seule. Par la suite, la capacité de chargement, de rétention ainsi que de relâchement de nanoRTV ont été mesurés dans le temps avec les cellules MM-1. Les résultats démontrent que les cellules MM-1 sont tout à fait capables de stocker des quantités importantes de ritonavir et de garder près de 40 % de la quantité initialement chargée sur une période de sept jours.
Les essais de migration à travers la BHE reconstituée indiquent que les MM-1 chargées avec la nanoRTV perdent plus de la moitié de leur capacité de migration à travers la BHE en présence de chimiokines. Cependant, la pré-stimulation des cellules à la PGE[indice inférieur 2] avant le chargement des nanoRTV semble rétablir la capacité de la migration à travers cette barrière.
Cette étude est complémentaire à d'autres travaux de recherche visant l'utilisation de cellules comme outil de transport pour la livraison de médicaments à des sites anatomiques ciblés. De plus, nos résultats suggèrent que les monocytes pourraient être des acteurs importants dans ce type de thérapie, étant des cellules avec une forte capacité de migration à travers la BHE.
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Bouchet, Jérôme. "Inhibition de la protéine nef du VIH-1 par un fragment d'anticorps simple-chaîne de lama." Paris 5, 2011. http://www.theses.fr/2011PA05T011.
Full textAbstract:
La protéine Nef du Virus de l’Immunodéficience Humaine de type 1 joue un rôle essentiel pour la réplication virale et la pathogénèse du SIDA. Cependant cette protéine n’est actuellement la cible d’aucun traitement antirétroviral. Dans cette étude, nous décrivons un fragment d’anticorps simple-chaine, le sdAb19 et ses dérivés, les Neffins, qui lient Nef avec une forte affinité, et permettent l’inhibition de toutes ses fonctions in vitro, comme in vivo. La caractérisation du sdAb19 anti-Nef nous a permis de montrer son efficacité pour inhiber les effets d’un large panel de Nef sur la modulation du trafic de CD4. Ce fragment d’anticorps est capable d’interférer dans l’association de Nef avec la kinase cellulaire Pak2 et ainsi d’inhiber les effets de Nef sur le remodelage de l’actine. Nous sommes également parvenus à inhiber les effets positifs de Nef sur le pouvoir infectieux des particules virales et la réplication virale. Nous avons enfin pu observer que le sdAb19 rétablit les défauts de maturation des cellules T CD4+ thymiques et l’activation des cellules T CD4+ périphériques dans un modèle de souris transgéniques CD4C/HIV-1Nef. Alors que le sdAb19 n’inhibait pas les effets de Nef sur la modulation du trafic des molécules du CMH-I, la fusion de l’anti-Nef avec des domaines SH3 artificiels a permis d’inhiber des activités majeures de Nef, dont ses effets sur la diminution de l’expression de surface de CD4 et des molécules du CMH-I, et l’effet positif de Nef sur l’augmentation du pouvoir infectieux des particules virales. L’expression des Neffins dans des cellules myéloïdes a également permis l’inhibition de la formation de cellules géantes multinucléées induite par Nef mais aussi de restaurer de la phagocytose inhibée par Nef. Nous avons montré dans cette étude que ces effets de Nef dans les macrophages sont dépendants des deux motifs poly-proline et di-leucine, et nous avons vérifié que les Neffins sont capables de perturber les interactions de Nef avec les complexe AP-1 et Hck in vitro. Tous ces résultats montrent qu’il est possible d’inhiber toutes les fonctions de Nef, dans les lymphocytes, comme dans les macrophages, avec un simple ligand qui pourrait représenter un outil efficace pour développer de nouvelles stratégies pour le contrôle du SIDA en ciblant la protéine NefWhile it is established that HIV-1 Nef is essential for virus replication and AIDS pathogenesis, this viral protein is not targeted by antiviral strategies. The functions of Nef are largely related to perturbations of intracellular trafficking and signaling pathways, through leucine-based and poly-proline motifs required for interactions with clathrin-associated adaptor protein complexes and the phagocyte-specific kinase Hck, respectively. Here, we describe the full inhibitory activity of artificial Nef ligands, Neffins, comprised of modified SH3 domains fused to an anti-Nef single-domain antibody. The Neffins inhibited key activities of Nef, including Nef-mediated CD4 and MHC-I cell surface down-regulation and enhancement of virus infectivity. When expressed in macrophages, Neffins inhibited Nefinduced formation of multinucleated giant cells and podosome rosettes, and counteracted the inhibitory activity of Nef on phagocytosis. Since we show here that these effects of Nef on macrophage functions were both dependent of the leucine-based and poly-proline motifs, we confirmed that the Neffins were able to disrupt interactions of Nef with both AP complexes and Hck. These results demonstrate that it is possible to inhibit all functions of Nef, both in T lymphocytes and macrophages, with a single ligand that represents an efficient tool to develop new antiviral strategies targeting Nef
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Nagy, Héléna Juliana. "Traitement des tumeurs hépatiques et ovariennes expérimentales par transfert de gène codant pour la thymidine kinase du virus herpès simplex de type 1." Paris 5, 1999. http://www.theses.fr/1999PA05CD03.
Full textAbstract:
Les progrès réalisés au cours de la dernière décennie en biologie moléculaire permettant aujourd'hui, grâce à la thérapie génique, d'envisager une nouvelle approche dans le traitement des cancers. Dans cette étude nous nous proposons d'etudier l'effet de la thérapie génique par le transfert rétroviral du gène suicide codant pour la thymidine kinase du virus herpès simplex de type 1 (TK-HSV1) dans deux modèles expérimentaux de cancer, l'hépatocarcinome (HC) et l'adénocarcinome de l'ovaire. Le principe général de la thérapie génique est d'introduire un gène étranger dans une cellule cible à l'aide de vecteurs, notamment rétroviraux. Nous avons utilisé dans notre étude le transfert rétroviral du gène de la TK-HSV1. Il agit indirectement en transformant un analogue nucléosidique comme le ganciclovir (GCV) en forme monophosphate, qui est transformée ensuite en forme triphosphate toxique pour la cellule tumorale. La destruction de tumeurs contenant le gène de la TK-HSV1, après traitement par le GCV, peut déclencher un effet amplificateur (" effet bystander ") par transfert de métabolites toxiques et par une stimulation de l'immunité antitumorale. Dans cette étude, nous avons développé deux modèles expérimentaux syngéniques et orthotopiques, un d'HC (MCA-RH8994) et un autre d'adénocarcinome de l'ovaire chez le rat (DMBA-OC-1). Avec ces deux modèles, nous avons étudié le potentiel de l'utilisation du gène de la TK-HSV1 dans le traitement de ces tumeurs, ainsi que l'effet immunitaire à distance observé lors du traitement. Nous avons aussi développé des protocoles plus proches de la clinique comme la transduction in vivo des tumeurs ovariennes et le traitement adjuvant post-opératoires du cancer de l'ovaire pour la prévention de récidives et des métastases. L'étude in vitro de différentes lignées cancéreuses (cancers coliques, hépatocarcinomes de rat et adénocarcinomes de l'ovaire de rat et humainses) a montré que toutes étaient efficacement transduites par le vecteur rétroviral, avec des variations selon la lignée et le surnageant utilisé. Les lignées tumorales TK+ produites ont été de 300 à 7000 fois plus sensibles au GCV que leur lignée mère respective. Avec les deux modèles de tumeurs exprimant le gène de la TK, l'étude a permis d'observer une réduction significative du volume tumoral dans le groupe traité par le GCV (à la dose de 75mg/kg ;2x par jour) par rapport au groupe témoin (HC : p<0. 02 ; cancer de l'ovaire : p<0. 001), avec une toxicité minimale. L'étude de la survie prolongée des rats, avec le modèle d'HC, a montré une augmentation significative de la survie des rats traités par GCV (p<0. 001). Néanmoins, une repousse tumorale après arrêt du GCV, à partir de tumeurs résiduelles, a été observée dans 60% des cas, soulignant l'importance probable d'un traitement répété. Une regression quasi complète des tumeurs TK+ a été aussi observée dans le modèle bifocal ovarien (TK- dans un ovaire/TK+ dans l'autre) traité par GCV (p<0. 0001). Simultanément, nous avons aussi observé une réduction tumorale significative des tumeurs TK- localisées sur l'ovaire controlatéral (p<0. 014), avec augmentation de la nécrose (p<0. 01), des polynucléaires (p<0. 004) et des lymphocytes (p<0. 03) infiltrant la tumeur. L'étude immunohistochimiques de ces tumeurs a montré une augmentation des lymphocytes T (LT) CD4+ (p<0. 01), LT CD8+ (p<0. 006), " natural killer " (NK) (p<0. 006) et macrophages (NS). Nous avons aussi observé, dans les tumeurs de l'ovaire, une transduction in vivo du gène marqueur LacZ faible après injection de cellules productrices décongelées, indiquant l'importance de la récupération post-décongélation sur l'efficacité de la transduction in vivo. Finalement, nous avons développé un modèle de survie post-opératoire des tumeurs ovariennes plus proche de la clinique. L'étude préliminaire des traitements post-chirurgicaux, basés sur l'injection des cellules productrices de rétrovirus TK-HSV1 (M11) ou de lignées tumorales TK+ décongelées, n'a pas montré cependant un effet significatif sur la survie. Dans cette étude nous avons montré la faisabilité du traitement des hépatocarcinomes et des cancers de l'ovaire expérimentaux par l'approche TK-HSV1/GCV. Nous avons aussi montré que l'effet bystander, amplifiant l'effet antitumoral du système TK/GCV, peut exister à distance dans la cavité péritonéale, avec la participation de l'immunité T dépendante et de l'immunité naturelle. Dans une perspective clinique, cette observation d'un effet antitumoral significatif locale et à distance est très encourageant
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Robinet, Arnaud. "Régulation de l'expression et/ou de l'activation de la Gélatinase A par deux peptides issus de la thrombospodine et de l'élastine : Implication dans l'invasion tumorale et angiogénèse." Reims, 2003. http://www.theses.fr/2003REIMM208.
Full textAbstract:
La @protéolyse de la matrice extracellulaire est une étape importante dans l'invasion tumorale et l'angiogénèse. Cette protéolyse matricielle est effectuée par de nombreuses enzymes. Sont particulièrement impliquées les métalloprotéinases matricielles et notamment les gélatinases (MMP-2 et MMP-9). Cette dégradation aboutit à la fragmentation des protéines matricielles pouvant donner de petits peptides possédant certaines activités biologiques (Matrikines). Ce travail s'est intéressé à la régulation de la gélatinase A ou MMP-2 par deux peptides issus de la thrombospondine-1 (GGWSHW) et de l'élastine (VGVAPG) dans l'invasion tumorale et l'angiogénèse. Un système de régulation par interaction avec la TSP-1 impliquant le récepteur LRP dans les cellules HT1080 issues de fibrosarcomes a été mis en évidence. En effet, il a été observé par résonance plasmonique de surface, une interaction entre la TSP-1 et le domaine CBD123 de la MMP-2. Cette interaction est inhibée par compétition en présence des séquences GGWSHWSPWSS et GGWSHW (motifs présents dans les domaines TSRs de la TSP-1), ce qui se traduit par une augmentation de la quantité et de l' activation de la MMP-2 dans les milieux conditionnés. Ceci a pour conséquence une augmentation de l'invasivité des cellules HT1080. Il a été également montré une régulation de l'expression et de l'activation de la MT1-MMP et de la MMP-2 par les peptides d'élastine dans le processus angiogénique. La présence de peptides d'élastine ou du peptide VGVAPG a pour effet d'engendrer une accélération du processus angiogénique faisant intervenir la MT1-MMP et la MMP-2. L'expression et l'activation de ces deux métalloprotéinases sont augmentées en présence de kappa élastine ou du peptide VGVAPG. Cet effet observé en présence des peptides d'élastine implique le récepteur S-Gal (EBP), en effet en présence de lactose, nous observons une inhibition totale du phénomène. Le contrôle de ces différents types de régulation apparaît comme une cible thérapeutique importante dans le traitement de diverses pathologies. Ces travaux montrent un rôle essentiel des Matrikines dans la régulation d'enzymes protéolytiques et plus particulièrement dans celle de la gélatinase A dans les modèles étudiésNeoangiogenesis, the formation of new blood capillaries from preexisting vessels, plays an important role in a number of physiological and pathological processes, particularly in tumor growth and metastasis. Extracellular proteolysis by matrix metalloproteinases or other neutral proteinases is an absolute requirement for initiating tumor invasion and angiogenesis. Cryptic segments or preexisting domains within larger proteins, most of them belonging to the extracellular matrix, can be exposed by conformational changes and/or generated by partial enzymatic hydrolysis. They can positively or negatively regulate important functions of endothelial cells including adhesion, migration, proliferation, cell survival and cell-to-cell interactions. Such regulations by cryptic segments and proteolytic fragments led to the concept of matricryptins and matrikines, respectively. Matrix metalloproteinases and matrikines in conjunction with other pro -or anti- angiogenic factors might act in concert at any step of the angiogenesis process. A number of matrikines have been identified as potent anti-angiogenic factors, which could provide a new alternative to anti-proteolytic strategies for the development of anti-angiogenic therapeutic molecules aimed at inhibiting tumor growth and metastasis. Some of them are currently being investigated in clinical trials
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Prevot, Nicolas. "Le rôle de la voie de costimulation ICOS/ICOSL dans le développement du diabète de type 1 chez la souris NOD." Paris 5, 2010. http://www.theses.fr/2010PA05T005.
Full textAbstract:
Les voies de costimulation, en modulant la réponse immune, jouent un rôle essentiel dans le développement des maladies auto-immunes telles que le diabète de type 1. Nous avons démontré via l'étude de souris NOD invalidées pour les gènes Icos ou Icosl que la voie de costimulation ICOS/ICOSL est indispensable à l'initiation de la rupture de tolérance vis-à-vis des cellules β. En outre, l'étude de souris NOD ICOS KO BDC2. 5 a démontré que la voie de costimulation est aussi impliquée dans le contrôle de la réponse auto-immune. Sa modulation reste cependant un exercice dangereux pour l'organisme puisque les souris NOD ICOS KO ou ICOSL CO, bien que protégées du diabète de type 1, développent à la place une neuropathie périphérique spontanée. Avant de tester le potentiel thérapeutique de la voie ICOS/ICOSL chez l'homme, il est donc nécessaire d'identifier les mécanismes responsables de cette déviationCostimulatory pathways, by modulating the immune response, play a key role in the development of autoimmune diseases such as type 1 diabetes. We studied NOD mice in which Icos and Icosl genes were deleted. We demonstrated that the ICOS/ICOSL costimulation pathway is essential to tolerance rupture directed against β-cells Moreover, study of BDC2. 5 ICOS KO NOD mice demonstrated that the costimulatory pathway is also involved in the control of the autoimmune response. Nevertheless, its modulation remains a dangerous exercise. ICOS KO or ICOSL KO NOD mice, while remained protected from type 1 diabetes, developed instead of a spontaneous peripheral neuropathy. Study and understand the mechanisms leading to these protection and deviation is critical| before testing the therapeutic potential of the ICOS/ICOSL costimulation pathway in human]
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Fajardy, Isabelle. "Marqueurs genetiques (hla-dq) et immunologiques (ica) de susceptibilite au diabete insulino-dependant." Paris 5, 1993. http://www.theses.fr/1993PA05S015.
Full textAbstract:
Le diabete insulino-dependant (did) est une maladie auto-immune qui se developpe sur un terrain genetique particulier. Des alleles de susceptibilite ont ete decrits dans la region dq du systeme hla. Le premier objectif de notre etude est de confirmer la valeur de ces marqueurs genetiques a risque et d'etudier la part respective des differents alleles hla-dqb1 et dqa1 identifies par cartographie differentielle de l'exon 2 apres amplification genomique. L'analyse comparee de 213 enfants did et de 93 enfants temoins montre un risque tres eleve confere par le genotype hla-dqb1 #*0201/#*0302 (or=66). Le genotype complet dqb1 #*0201/#*0302-dqa1 #*0301/#*0501 apparait plus informatif (or=116,9) que chaque genotype dqb1 ou dqa1 etudie isolement. Ceci est attendu du fait du desequilibre de liaison entre les loci dqa1 et dqb1. Le deuxieme objectif, integre dans une politique de depistage des sujets a risque de did, est de definir la prevalence du marqueur genetique de susceptibilite hla-dqb1 #*0201/#*0302 dans une population pediatrique saine. Le screening par pcr-dot-blot des alleles #*0201 et #*0302 chez 2201 enfants sains identifie 88 sujets porteurs du genotype a risque soit une prevalence de 3,5%. Le troisieme objectif est de rechercher une correlation entre les marqueurs genetiques (hla-dq) et les marqueurs immunologiques (ica, islet cell antibodies) dans la population generale. Nous avons realise un typage hla-dqb1 chez 80 enfants sains porteurs d'ica. La distribution des alleles de susceptibilite ne differe pas significativement entre les 80 enfants ica#+ et 93 enfants ica#- quelque soit le taux d'ica.