Dissertations / Theses: 'Canine leishmaniasia'

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Huaynates, Orellana Gazelle Marina. "Leishmaniasis canina." Bachelor's thesis, Universidad Nacional Mayor de San Marcos, 2009. https://hdl.handle.net/20.500.12672/688.

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Abstract:

La leishmaniasis es una infección parasitaria que afecta a humanos, animales domésticos y silvestres. Es causada por los miembros del género Leishmania que realizan parte de su ciclo biológico en un hospedador vertebrado, en forma aflagelar o amastigote. Y completan su desarrollo en el tubo digestivo del hospedador invertebrado, en su forma flagelar o promastigote, estos son flebótomos del género Phlebotomus en el Viejo Mundo y Lutzomyia en el Nuevo Mundo (Miró, 2007b; Baneth, 2006, 2007). En varios países de América el principal vector de leishmaniasis visceral es Lutzomyia longipalpis, su distribución abarca desde el sur de México hasta el norte de Argentina y es capturada dentro y fuera de las viviendas humanas (Milleron et al., 2004; Lainson y Rangel, 2005; González et al., 2006; Ramírez et al., 2006; Dantas, 2008; Diniz et al., 2008). La leishmaniasis está distribuida en el sur de Europa, África, Asia, América del sur, centro y recientemente en Estados Unidos y Canadá (Baneth, 2007). En el mundo hay 14 millones de personas infectadas y cada año se registran 2 millones de casos nuevos. De ellos 500,000 viscerales, que provoca más de 50,000 defunciones; y 1´500,000 casos cutáneos. La población en riesgo se eleva a 350 millones de personas y sólo en 33 de los 88 países endémicos la leishmaniasis es una enfermedad de notificación obligatoria (OMS, 2007). Los cambios ecológicos, demográficos y medioambientales relacionados con nuevos proyectos de desarrollo, urbanización y grandes movimientos de población están conduciendo a un aumento a escala mundial de consecuencias sanitarias adversas donde el desarrollo del flebótomo vector se ve favorecido, de tal manera que la aparición de casos parece estar relacionada con la continua deforestación y la expansión urbana, que se ha intensificado en los últimos años. Posicionándose como un problema de salud pública cada vez más acusado en muchas regiones de Latinoamérica, especialmente en Brasil, Colombia y Venezuela, donde anteriormente no se encontraba (Desjeux, 2002; Rondón, 2006; ENY-740S, 2007; Sousa y Pearson, 2009). El rol del perro (Canis familiaris), como reservorio en la transmisión doméstica y peri doméstica de la leishmaniasis humana ha sido reconocida desde que Charles Nicoles, el ganador al premio Nobel, descubrió la enfermedad en perros en Tunisia en 1908. El número de perros infectados en Sud América es estimado en millones con una alta tasa de infección en algunas áreas de Brasil y Venezuela (Killick-Kendrick, 1999; Baneth, 2006, 2007; Sousa y Pearson, 2009). La leishmaniasis canina es una enfermedad zoonótica que existe en cerca de 50 de los 88 países donde la leishmaniasis humana está presente y resulta frecuentemente mortal en humanos y perros no tratados (Baneth, 2006; Coura et al., 2006). En la población canina afectada los signos clínicos son muy variables, podemos observar desde animales aparentemente sanos, hasta otros que manifiestan varios signos clínicos. Esto se debe a la complejidad de los mecanismos patogénicos dependientes del parásito y a la marcada individualidad de la respuesta inmunitaria del hospedador (Miró, 2007b). Los términos que utilizaremos como abreviación para leishmaniasis canina será Lcan, en esta especie la piel se ve afectada en el transcurso de la diseminación de la enfermedad a los órganos internos, manifestándose ambas formas de la enfermedad a la vez (Killick-Kendrick, 1999; Baneth, 2006; Miró, 2007b; OIE, 2008). Para designar la enfermedad según sus manifestaciones clínicas en humanos, usaremos las siguientes abreviaciones: leishmaniasis cutánea (LC), leishmaniasis mucocutánea (LMC) y leishmaniasis visceral (LV) (Killick-Kendrick, 1999; Baneth, 2006). La presente monografía pretende ser un documento actualizado donde se revisa la enfermedad en todos sus aspectos, para aumentar los conocimientos existentes sobre esta zoonosis parasitaria de creciente interés en los últimos veinte años.
Tesis

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Carson, Connor. "Vaccine trials against canine leishmaniasis." Thesis, University of Warwick, 2010. http://wrap.warwick.ac.uk/3637/.

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Abstract:

Zoonotic visceral leishmaniasis (ZVL) is a fatal disease caused by the sandfly-borne intracellular protozoan parasite Leishmania infantum, and vaccine development in the reservoir host (the domestic dog) is a current research priority. The aims of this study were (1) to conduct safety and immunogenicity trials of two candidate vaccines in dogs, and (2) to compare and demonstrate the utility of immunological and molecular tools for measurement of vaccine efficacy in naturally exposed dogs. DNA/ modified vaccinia virus Ankara (MVA) prime/boost canine vaccines expressing the Leishmania proteins TRYP and LACK were safe, and elicited a type-1 cytokine response, in vivo delayed-type hypersensitivity and IgG2 class responses, consistent with superior protective immunogenicity of TRYP over LACK. However, inconsistent associations were found between progressive disease in infected dogs and IgG class levels, prompting caution in use of the latter as a proxy for protective immunogenicity. Specific serological responses in vaccinated dogs did not cross-react with an unrelated diagnostic antigen rK39, and responses to crude parasite antigen (CLA) were minimal, enabling serological detection of infection incidence in vaccinated dogs. Particularly in early stage infection, CLA ELISA was more sensitive than rK39 ELISA and an rK39-based rapid diagnostic test, though rK39 serology was sensitive for diagnosis of symptomatic clinical cases. A commercially available PCR kit incorporating a rapid oligochromatographic detection step was tested for the first time in dogs, and proved highly sensitive for detection of ZVL infection in bone marrow, comparable to existing nested PCR methods. Molecular methods were investigated as proxy measures to replace labour-intensive xenodiagnosis for detection of the infectiousness of dogs to biting sand flies. Conventional and real-time PCR of tissues from naturally infected dogs were sensitive tests to identify infectiousness, but showed low to moderate specificity. Recommendations are made to improve the application of molecular methods as proxy measures of infectiousness and hence vaccine efficacy.

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Martori, Muntsant Clara. "Vitamin D and canine leishmaniasis." Doctoral thesis, Universitat Autònoma de Barcelona, 2021. http://hdl.handle.net/10803/673957.

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Abstract:

Les leishmaniosis són un grup de malalties causades per protozous del gènere Leishmania que es transmeten per vectors. La leishmaniosi visceral (LV) humana pot ser mortal si no es tracta, resultant en 26 000-65 000 morts a l’any. Els cànids són el principal reservori i hostes de Leishmania infantum, l’agent causant de la LV zoonòtica a la conca mediterrània. Es desconeixen els mecanismes que regulen el resultat final de la infecció, però és sabut que el sistema immunitari juga un paper clau en el control de la malaltia. Diversos estudis han demostrat que la vitamina D té un rol important en la resposta immune, activant el sistema immunitari innat i modulant la resposta adaptativa. A més, s’ha descrit la relació entre la deficiència de vitamina D i el risc de patir diverses malalties. L’objectiu de la tesis va ser estudiar si la vitamina D té una contribució rellevant en la leishmaniosi canina (LCan). Per això, es va mesurar la concentració de vitamina D en mostres de sèrum d’una població de gossos sans i malalts residents en zona altament endèmica i se’n va estudiar la relació amb paràmetres parasitològics i immunològics. Els gossos malalts presentaven nivells de vitamina D significativament més baixos que els no infectats i que els infectats asimptomàtics. A més, la deficiència de vitamina D es correlacionava amb paràmetres relacionats amb la progressió de la LCan. També vam investigar si variacions genètiques en el locus del gen del receptor de la vitamina D s’associa amb la progressió de la LCan, però les freqüències al·lèliques dels polimorfismes (SNPs) trobats no van resultar ser estadísticament diferents entre grups. Llavors, vam analitzar la concentració de vitamina D en mostres de sèrum preses en diferents períodes de l’any en una cohort de gossos sans. Els resultats van mostrar que no hi ha variació estacional dels nivells de vitamina D en gossos. També es va analitzar retrospectivament la concentració de vitamina D en gossos amb leishmaniosi clínica i gossos no-infectats a l’inici de l’estudi, quan tots els animals eren negatius a Leishmania, i un any després. Mentre que els gossos sans no van mostrar canvis en els nivells de vitamina D durant l’estudi, els que van desenvolupar leishmaniosi van mostrar una reducció significativa al final de l’estudi. Per tant, la concentració de vitamina D no és un factor de risc per desenvolupar LCan, sinó que disminueix amb el curs de la malaltia. Un model in vitro va demostrar que afegir vitamina D activa (1,25(OH)2D3) comporta una reducció significativa de la càrrega de L. infantum en macròfags canins. Analitzant l’expressió de gens relacionats amb la via de la vitamina D en monòcits canins primaris vam demostrar que l’expressió de la β-defensina CBD103 augmenta significativament amb l’addició de 1,25(OH)2D3. Els resultats van corroborar que la vitamina D juga un paper en el control del paràsit. Per últim, es va estudiar la viabilitat de la vitamina D com a adjuvant per potenciar l’efecte d’una vacuna enfront la leishmaniosi. Es va administrar vitamina D conjuntament amb una vacuna d’ADN encapsulada en liposomes a ratolins BALB/c. Dues setmanes després de la vacunació els animals van ser infectats amb L. infantum. Es va mesurar la càrrega parasitària en òrgans diana i es va avaluar la resposta immune abans de la infecció i sis setmanes després. La vacuna no va reduir significativament la càrrega parasitària, però amb la co-administració de vitamina D es va apreciar una tendència a disminuir-la. L’estudi de la resposta immunològica va suggerir que l’augment de limfòcits T CD4+ i CD8+ podrien haver contribuït en la protecció parcial aconseguida per la vacuna amb la vitamina D com a potenciador.
Las leishmaniosis son un grupo de enfermedades causadas por protozoos del género Leishmania que se transmiten por vectores. La leishmaniosi visceral (LV) humana puede ser mortal si no se trata, resultando en 26 000-65 000 muertes por año. Los cánidos son el principal reservorio y huéspedes de Leishmania infantum, el agente causante de la LV zoonótica en la cuenca mediterránea. Se desconoce el mecanismo que regula el resultado final de la infección, pero se sabe que el sistema inmunitario juega un papel clave en el control de la enfermedad. Varios estudios han demostrado que la vitamina D tiene un rol importante en la respuesta inmune, activando el sistema inmunitario innato y modulando la respuesta adaptativa. Además, se ha descrito la relación entre la deficiencia de vitamina D y el riesgo de sufrir algunas enfermedades. El objetivo de la tesis fue estudiar si la vitamina D tiene una contribución relevante en la leishmaniosis canina (LCan). Para ello se determinó la concentración de vitamina D en muestras de suero de una población de perros sanos y enfermos de leishmaniosis residentes en una zona altamente endémica y se estudió la relación de ésta con parámetros parasitológicos e inmunológicos. Los perros enfermos mostraron niveles de vitamina D significativamente más bajos que los no infectados y que los infectados asintomáticos. Además, la deficiencia de vitamina D se correlacionó con parámetros relacionados con la progresión de la enfermedad. También investigamos si las variaciones genéticas en el locus del gen del receptor de la vitamina D se asocia con la progresión de LCan, pero las frecuencias alélicas de los polimorfismos (SNPs) encontrados no resultaron ser estadísticamente diferentes entre grupos. Posteriormente se analizó la concentración de vitamina D en muestras de suero tomadas en diferentes periodos del año en una cohorte de perros sanos. Los resultados mostraron que no hay una variación estacional de los niveles de vitamina D en perros. También se analizó retrospectivamente la concentración de vitamina D en perros con leishmaniosis clínica y perros no infectados al inicio del estudio, cuando todos los animales eran negativos a Leishmania, y un año después. Mientras que los perros sanos no mostraron cambios en los niveles de vitamina D durante el estudio, los que desarrollaron leishmaniosis mostraron una reducción significativa al final del estudio. Por lo tanto, la concentración de vitamina D no es un factor de riesgo para desarrollar LCan, sino que disminuye con el curso de la enfermedad. Un modelo in vitro demostró que añadir vitamina D activa (1,25(OH)2D3) conlleva una reducción significativa de la carga de L. infantum en macrófagos caninos. Analizando la expresión de genes relacionados con la vía de la vitamina D en monocitos caninos primarios demostramos que la expresión de la β-defensina CBD103 aumenta significativamente con la adición de 1,25(OH)2D3. Los resultados corroboraron que la vitamina D juega un papel en el control del parásito. Por últimos, se estudió la viabilidad de la vitamina D como adyuvante para potenciar el efecto de una vacuna frente la leishmaniosis. Se administró vitamina D junto a una vacuna de ADN encapsulada en liposomas a ratones BALB/c. Dos semanas después de la vacunación los animales se infectaron con L. infantum. Se determinó la carga parasitaria en órganos diana y se evaluó la respuesta inmune antes de la infección y seis semanas después. La vacuna no redujo significativamente la carga parasitaria, pero con la coadministración de vitamina D se apreció una tendencia a reducirla. El estudio de la respuesta inmunológica sugirió que el aumento de linfocitos T CD4+ y CD8+ podrían haber contribuido a la protección parcial conseguida cuando se administró vitamina D como potenciador junto a la vacuna.
Leishmaniasis are a group of neglected vector-borne diseases caused by obligate intracellular protozoan parasites of the genus Leishmania. Human visceral leishmaniasis (VL) can be fatal if left untreated, resulting in 26 000-65 000 deaths per year. Canids are the main reservoir and hosts of L. infantum, the causative agent of zoonotic VL in the Mediterranean Basin. The mechanisms that regulate the outcome of the infection are undisclosed, although it is well known that immune system plays a key role in leishmaniasis disease control. Several studies have shown that vitamin D plays an important immunomodulatory role by activating innate immune system and modulating the adaptive immune response. Furthermore, the relationship between vitamin D deficiency and the risk of suffering from a plethora of health disorders has been described. The aim of the thesis was to study if vitamin D have a relevant contribution in canine leishmaniasis (CanL). Because of that, we measured vitamin D concentration in serum samples from a cohort of healthy and ill dogs from a highly endemic area and we have also studied the relationship of vitamin D concentration with parasitological and immunological parameters. The sick dogs presented significantly lower vitamin D levels than their non-infected and the asymptomatic counterparts. In addition, vitamin D deficiency correlated with several parameters linked to leishmaniasis progression. We also aimed to investigate whether genetic variation within the vitamin D receptor gene locus is associated with the progression of CanL, but the allelic frequencies of the four single nucleotide polymorphisms (SNPs) found were not statistically different between groups. Afterwards, we analysed retrospectively vitamin D concentration in serum samples from a cohort of healthy dogs collected in different periods of the year. The results showed that there is not a seasonal variation of vitamin D concentration in dogs. We also analysed retrospectively vitamin D concentration in serum samples from dogs with clinical leishmaniasis and non-infected healthy dogs, in which we measured vitamin D levels at the beginning of the study, when all dogs were negative for Leishmania, and 1 year later. Whereas non-infected dogs showed no changes in vitamin D levels along the study, those developing clinical leishmaniasis showed a significant vitamin D reduction at the end of the study. Therefore, vitamin D concentration is not a risk factor for developing canine leishmaniasis, but it diminishes with the onset of clinical disease. An in vitro model using a canine macrophage cell line proved that adding active vitamin D (1,25(OH)2D3) leads to a significant reduction in L. infantum load. Analyzing expression of genes related to vitamin D pathway on primary canine monocytes, we showed that defensin CBD103 expression was significantly enhanced after active vitamin D addition. The in vitro results corroborated that vitamin D plays a role in parasitic control. Finally, we studied the suitability of vitamin D as an adjuvant to enhance the effect of a DNA vaccine against VL. BALB/c mice were treated with vitamin D concomitantly with a DNA vaccine encapsulated in liposomes. Two weeks after vaccination, the animals were infected with L. infantum parasites. Parasite load was measured in target tissues and immune response was evaluated before challenge and six weeks post-infection. Our DNA vaccine did not significantly reduce parasite load in liver nor spleen, but vitamin D coadministration showed a tendency to diminish parasite load in target organs. The study of cell response in splenocytes suggested that higher levels of CD4+ and CD8+ T cells may be responsible for the partial protection mediated by the DNA vaccine with vitamin D as enhancer.
Universitat Autònoma de Barcelona. Programa de Doctorat en Farmacologia

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Von, Zuben Andrea Paula Bruno 1974. "Leishmaniose visceral em Campinas : descrição do primeiro foco, impacto de medidas, dificuldades e controvérsias das ações de prevenção e controle." [s.n.], 2014. http://repositorio.unicamp.br/jspui/handle/REPOSIP/312896.

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Abstract:

Orientador: Maria Rita Donalisio Cordeiro
Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas
Made available in DSpace on 2018-08-26T19:12:10Z (GMT). No. of bitstreams: 1 VonZuben_AndreaPaulaBruno_D.pdf: 2257124 bytes, checksum: c8df8e57198bfa7318ad86e3de4af6f3 (MD5) Previous issue date: 2014
Resumo: A Leishmaniose Visceral Americana (LVA) é uma zoonose causada pelo protozoário Leishmania (L.) infantum e transmitida predominantemente pelo flebotomíneo Lutzomyia longipalpis. No meio urbano, o cão doméstico atua como reservatório e fonte de infecção para o homem. A LVA é uma zoonose de caráter reemergente e um grave problema de saúde pública. As estratégias de controle de LVA estão contidas no Programa Brasileiro de Vigilância e Controle (PCLV) e estão centradas no controle do reservatório e vetores e na educação em saúde. Em Campinas, no final do ano de 2009, foi confirmado o primeiro caso de LVA canino autóctone em área de proteção ambiental na região leste da cidade. Após as investigações de foco foram diagnosticados casos adicionais de LVA em cães e identificada a presença do vetor. Com esta ocorrência, passou a ser considerado município com transmissão canina. O objetivo deste trabalho foi descrever a organização espacial do primeiro foco de LVA de Campinas sob as perspectivas ecológica, geográfica e social a fim de obter uma melhor compreensão das interações entre meio ambiente, sociedade, os riscos em saúde pública e as dificuldades na execução do preconizado pelo PCLV. Para avaliar tais dificuldades foi realizado também estudo qualitativo através de entrevistas semi-estruturadas com coordenadores de municípios de grande porte com transmissão canina e/ou humana (Bauru, Belo Horizonte, Campo Grande, Goiânia e Fortaleza) de LVA. Por fim, foi avaliado uso de coleiras impregnadas com deltametrina a 4% como medida para diminuição da prevalência canina e consequentemente evitar casos humanos em Campinas. Os achados neste trabalho mostram que no Brasil as intervenções de saúde pública não têm apresentado resultados positivos na prática uma vez que há descontinuidade das atividades de controle devido a recursos insuficientes para sustentabilidade das ações e há resistência dos sujeitos implicados pela doença, particularmente associados ao reservatório canino e ao controle químico. Avaliou-se também que, embora sejam consideradas estratégicas, as ações de comunicação relacionadas a esse agravo não têm conseguido alcançar os objetivos de estimular a adesão ao programa e evitar desconfortos nas comunidades atingidas. Por fim, o uso de coleiras inseticidas foi considerado positivo como medida auxiliar na diminuição da prevalência canina com boa aceitação da comunidade. E em conclusão, ficou clara a necessidade de reavaliação da política brasileira de controle de LVA para garantia de maior efetividade na prevenção e controle da doença
Abstract: American Visceral Leishmaniasis (AVL) is a zoonosis caused by Leishmania (L.) infantum protozoa and transmitted by the Lutzomyia longipalpis phlebotomus as the main vector. In urban environment, dogs act as a reservoir and source of infection for vectors. American visceral leishmaniasis is a reemerging zoonosis and a serious public health problem. The guidelines of the Brazilian Program of Surveillance and Disease Control (PCLV) have their bases in control of the reservoir, vector and in health education. Campinas was added to the list of municipalities with established canine transmission kept by the state's AVL Surveillance and Control Program in 2009, with the confirmation of the first autochthonous case of canine AVL. Disease notification occurred in a residential lot with good infrastructure and resident population with high socioeconomic status, situated in an environmental protection area of the east part of the city. The present study aims at describing the process of investigation of reservoirs, vectors and environment associated with the outbreak of canine AVL in a grand scale municipality and the difficulties in implementing the measures proposed by PCLV. In order to evaluate these difficulties a qualitative study was also performed through semi-structured interviews with coordinators of large municipalities with canine and / or human transmission (Bauru (SP), Goiania (GO), Campo Grande (MT), Fortaleza (EC) and Belo Horizonte (MG)). Finally was evaluated the use of deltamethrin impregnated collars as a measure to decrease the prevalence of canine AVL and thus avoid human cases in Campinas. The findings in this study show that in Brazil the interventions have not produced positive results in the municipal level. The main problems referred were: discontinuity of the activities and strength of subjects involved by the disease, particularly associated with canine reservoir and housing fumigation. It was evaluated also that, although considered strategic, communication actions have not been able to achieve the goals of encouraging adherence to the program and to avoid discomfort in the affected communities. In conclusion, there is a clear need for reassessment of Brazilian policy for the control and prevention of LV to ensure effectiveness of actions
Doutorado
Epidemiologia
Doutora em Saúde Coletiva

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MEAZZI, SARA. "THE INTERPLAY BETWEEN HOST DEFENSES AND SYSTEMIC PATHOGENS IN PROMOTING DISEASES OF COMPANION ANIMALS." Doctoral thesis, Università degli Studi di Milano, 2020. http://hdl.handle.net/2434/709076.

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Abstract:

Il microbiota intestinale (insieme dei microrganismi che si trovano all’interno dell’apparato gastroenterico) svolge diverse funzioni e, tra queste, di particolare interesse è il suo rapporto con il sistema immunitario. Infatti, diversi studi hanno evidenziato la presenza di disbiosi non solo in corso di patologie gastroenteriche, ma anche autoimmuni ed infettive. Gli studi in medicina veterinaria sull’argomento sono ancora pochi e proprio per questo motivo, all’interno di questo progetto, è stato scelto di indagare la possibile relazione tra il microbiota intestinale e due particolari patologie infettive (la peritonite infettiva felina -FIP- e la leishmaniosi canina) la cui patogenesi è fortemente influenzata dal tipo di risposta immunitaria sviluppata dall’ospite. Gli scopi di questo progetto sono quindi stati: la valutazione del microbiota intestinale in gatti affetti o meno da FIP (studio I). Dal momento che diagnosi in vivo di FIP risulta spesso difficoltosa, è stato valutato il potenziale, come biomarker di FIP, della paraoxonasi-1, una proteina di fase acuta negativa fortemente influenzata da importanti stati ossidativi (studi II e III). Per lo stesso motivo è stata valutata la correlazione tra le performance diagnostiche di istopatologia, immunoistochimica e RT-PCR su differenti organi (studio IV). Infine, è stata indagata la composizione del microbiota intestinale in cani infetti o meno da Leishmania spp., correlando i risultati ottenuti con le differenti popolazioni leucocitarie valutate mediante citofluorimetria (studi V e VI). I risultati ottenuti da questo progetto hanno fornito delle indicazioni preliminari sulla composizione del microbiota intestinale in gatti affetti da FIP o positivi per Coronavirus, che necessitano però un approfondimento su un gruppo di studio più ampio (studio I). È stato possibile determinare gli intervalli di riferimento della paraoxonasi-1 nel gatto ed evidenziare le sue buone performance come marker diagnostico in corso di FIP (studi II e III). Nonostante l’immunoistochimica rimanga il gold standard per la diagnosi di FIP, l’associazione con RT-PCR potrebbe ridurre gli errori diagnostici, vista la buona correlazione tra le due metodiche (studio IV). Infine, la valutazione della composizione del microbiota e delle popolazioni leucocitarie in cani affetti da leishmaniosi ha messo in luce delle differenze significative sia rispetto ai cani sani, che agli esposti asintomatici. Questi risultati sono incoraggianti e possono fungere da punto di partenza per ulteriori indagini (studi V e VI).
The gut microbiota (consortium of all the microorganisms that inhabit the gastrointestinal tract) plays different roles in the host. Among these, its relationship with the immune system has been of great interest in the last few years. Indeed, several studies highlight the presence of dysbiosis not only in gastrointestinal diseases, but also during autoimmune or infectious diseases. Literature about this topic is scarce in veterinary medicine. Thus, in this project, the possible relationship between gut microbiota and two specific diseases (feline infectious peritonis -FIP- and canine leishmaniasis) was investigated. These diseases were chosen due to the pivotal role of the immune response in their pathogenesis. The aims of this projects were: the evaluation of gut microbiota of cats with and without FIP (study I). Since in vivo diagnosis of FIP is quite challenging, the potential role of paroxonase-1 (a negative acute phase protein strongly influenced by oxidation) as a biomarker of FIP was investigated (studies II-III). For the same reason, the diagnostic agreement among histopathology, immunohistochemistry and RT-PCR on different organs was evaluated (study IV). Finally, the gut microbiota composition in dogs infected or not by Leishmania spp. was investigated. The results were correlated with the leukocyte populations studied by flow cytometry (studies V-VI). Results obtained in this project provided preliminary data about gut microbiota composition in cats affected by FIP or only Coronavirus positive. This achievement needs to be further investigated on a bigger sample size (study I). Paraoxonase-1 reference interval and its good performance as a diagnostic biomarker of FIP were determined (studies II-III). Despite the immunohistochemistry is still the gold standard for FIP diagnosis, the good diagnostic agreement obtained in the study suggested that a possible association with RT-PCR could minimize diagnostic errors (study IV). Finally, the gut microbiota composition and leukocyte populations of leishmaniotic dogs highlighted some significant differences compared with both healthy and exposed asymptomatic dogs. These promising results could be a starting point for further researches (studies V-VI).

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Cutolo, André Antonio 1976. "Alguns aspectos epidemiológicos de leishmanioses caninas nos estados de São Paulo e Mato Grsso do Sul." [s.n.], 2011. http://repositorio.unicamp.br/jspui/handle/REPOSIP/317465.

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Abstract:

Orientador: Ingrid Menz
Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia
Made available in DSpace on 2018-08-20T20:49:31Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Cutolo_AndreAntonio_D.pdf: 3489196 bytes, checksum: ba6ee219dca9c92ee1ef9d6f194ee0b4 (MD5) Previous issue date: 2011
Resumo: A incidência das leishmanioses tegumentar (LTA) e visceral americanas (LVA) em hospedeiros caninos e humanos encontra-se em crescente expansão no Brasil. Para a vigilância epidemiológica dessas endemias, é fundamental o conhecimento da distribuição das diferentes espécies vetoras de flebotomíneos e, para a LVA, o conhecimento de parâmetros epidemiológicos como a prevalência, incidência, período de incubação e potencial de transmissibilidade de Leishmania infantum chagasi no cão, seu principal reservatório. Objetivou-se assim esclarecer alguns aspectos epidemiológicos das infecções caninas, incluindo-se levantamento entomológico no município de Monte Mor, situado na região centro-leste do estado de São Paulo, além da obtenção de parâmetros epidemiológicos da LVA por estudo longitudinal de 105 cães em área endêmica para a doença em Campo Grande, Mato Grosso do Sul, por dois anos. Em Monte Mor, 319 amostras de soro canino foram avaliadas por ELISA e RIFI, sendo todas negativas para anticorpos anti-Leishmania, identificou-se sete espécies de flebotomíneos, com predomínio de Nyssomyia neivai (48,84%) considerada a principal transmissora do agente causador da LTA no interior paulista, além do diagnóstico de dois casos caninos de LTA, com sorologia reagente para ELISA FML e infecção por L. (Viannia) braziliensis. No estudo longitudinal dos 105 cães acompanhados por meio de avaliações clínicas, exames sorológicos (ELISA L. major-like, FML e S7) e parasitológicos diretos (esfregaços e PCR de aspirados de medula óssea e linfonodo e imunoistoquímica de pele) obteve-se prevalência sorológica inicial de 30,40% (145/477) no ELISA L. major-like e 26,28% (97/369) no ELISA FML. A prevalência da doença clínica (sintomáticos) foi de 7,13% (62/870), sendo que 24,53% (117/477) foram soropositivos no ELISA L. major-like, mas sem sintomas de leishmaniose visceral canina (LVC), demonstrando quantidade elevada de cães infectados assintomáticos na área. Ao final de 24 meses não se observou associação estatística significativa nas variáveis ambientais avaliadas no início do estudo e a ocorrência de casos de LVC, como a ocorrência prévia de LVA e/ou LVC no entorno ou na casa do proprietário, a existência de outras espécies animais na casa, o hábito intra ou peridomiciliar, o temperamento, a idade e o sexo do cão. A incidência de novas infecções variou de 11,76% (8/68), 11,76% (8/68) e 18,18% (12/66) respectivamente entre o Dia -30 e Zero, Dia Zero e Mês 12 por sorologia e Dia Zero e Mês 12 para os métodos diretos. A mortalidade natural e induzida via eutanásia de animais doentes e/ou infectados foi de 28,57% (30/105). O período de incubação médio foi de 6,46 meses. Alguns animais infectados com resultados positivos em prova diagnóstica de PCR e/ou prova de sorologia no início do estudo não apresentaram novos resultados positivos após 12 meses, indicando possível cura ou não estabelecimento da infecção. Observaram-se alguns animais com provas diretas positivas mostrando infecção assintomática por período de 24 meses. Obteve-se baixa prevalência de amastigotas em pele saudável, presente apenas em animais sintomáticos, enquanto que a ausência de amastigotas observada em cães portadores assintomáticos indica que os mesmos podem não ter papel importante na transmissão de parasitas ao flebotomíneo vetor
Abstract: Cutaneous (ACL) and visceral american leishmaniasis (AVL) incidences in human and canine hosts are increasing and expanding in Brazil. In order to perform an adequate vigilance of these diseases, the knowledge regarding distribution of different sandfly vector species is mandatory, besides of precising epidemiological parameters like prevalence, incidence, incubation period and potential of transmissibility in the dog, the main reservoir for the AVL etiologic agent. This way, the objectives of this study were to clarify some epidemiological aspects of canine leishmaniases, including entomological surveillance in the county of Monte Mor, central east region of São Paulo state and performance of a longitudinal study in an AVL endemic area located in Campo Grande, Mato Grosso do Sul state, including 105 dogs in order to evaluate epidemiological data during two years. In Monte Mor county, 319 sera samples were analysed through in house developed ELISA and IFA methods. No seropositive result was found, seven different sandfly species were identified, prevailing Nyssomyia neivai (48.84%) considered the main vector for the ACL etiologic agent in São Paulo state countryside, and two dogs were diagnosed with ACL symptoms, presenting seropositivity through ELISA FML and positive identification of L. (Viannia) braziliensis infection using PCR. The longitudinal study was performed using clinical examination, serology (ELISA L. major-like, FML and S7) and direct diagnostic techniques (bone marrow and lymph node smears and PCR and immunohistochemistry in skin tissues) on dogs. A seroprevalence of 30.40% (145/477) at ELISA L. major-like and 26.28% (97/369) at ELISA FML was obtained at the pre-initial phase. Clinical disease prevalence was 7.13% (62/870), and 24.53% (117/477) dogs were seropositive at ELISA L. major-like, but asymptomatic, showing the high amount of infected healthy carriers. At the end of the 24 months period no significant association was found between visceral leishmaniasis (VL) canine cases with environmental variables evaluated at Day Zero like previous registration of human or canine VL on the study house or neighborhood, other domestic animal species at the backyard, intra or peridomiciliar, aggressive behavior, age or sex of the study dog. Incidence of infections varied from 11.76% (8/68), 11.76% (8/68) e 18.18% (12/66) respectively between Day -30 and Zero, Day Zero and Month 12 using serology and Day Zero and Month 12 for direct diagnostic methods. Natural and induced mortality through euthanasia of sick/infected dogs was 28.57% (30/105). The mean disease incubation period was 6.46 months. Some of the infected animals with positive diagnosis at the beggining of the study had no other positive results after 12 months, indicating a possible cure or an absence of infection establishment, while others had positive diagnosis at the beginning and at month 12 with asymptomatic condition for more than 24 months. A low Leishmania amastigotes prevalence at healthy skin was obtained and positive results were observed only in symptomatic animals. Absence of parasites in skin of asymptomatic carriers may indicate they have no important role on the transmission of Leishmania to competent vectors
Doutorado
Parasitologia
Doutor em Parasitologia

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Reithinger, Richard. "Epidemiology and control of canine leishmaniasis in Peru and Brazil." Thesis, London School of Hygiene and Tropical Medicine (University of London), 2004. http://researchonline.lshtm.ac.uk/682312/.

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Abstract:

The aims of the work presented in this thesis were two-fold: [i) to investigate whether domestic dogs are important reservoir hosts of ACL in a L. [Viannia]-endemic area where domestic transmission to humans has been reported [Part 1]; and [ii] to identify the shortcomings of currently practiced leishmaniasis dog control programmes and to evaluate whether topical insecticides could be used to control canine leishmaniasis [Part 2]. There is a growing belief that dogs [Canis familiaris] are peridomestic reservoirs of American cutaneous leishmaniasis [ACL] , as numerous studies have reported high ACL infection rates in dogs. The work described here is the first longitudinal study of ACL in dogs, and was carried out in 18 Leishmania [Viannia] -endemic villages of the Department of Huanuco, Peru. Over three years [1997-1999] a total 1104 dogs were surveyed, 104 of which prospectively. A polymerase chain reaction [PCR)] protocol to identify L. [Viannia] parasites in dogs was developed [Chapter 2], and, together with serology [ELISA. and IFAT], used to calculate prevalence and incidence of disease [Chapter 4]. The data was used to estimate the basic reproduction number [Ro] [Chapter 4] of canine ACL and to demonstrate a correlation between canine and human ACL incidences in the study villages [Chapter 5]. Several findings presented in Chapters 2-5 suggest that dogs are reservoir hosts of [peri-]domestic L. [Viannia] transmission in Huanuco, Peru. First, whereas the prevalence (3.8%) and incidence of clinical disease [4.2%] are low, the prevalence [25.6%] and incidence [29.0% per year] of L. [Viannia] infection in dogs is comparatively high. Second, the average duration of infection [2.2. years] can be as long as the mean life expectancy of an infected dog [2.5 years]. Third, L. [Viannia] parasites in dogs do not remain localised at the site of inoculation but are able to disseminate to both viscera and mucosa. Fourth, the detection of L. [Viannia] parasites by PCR in the blood of a high proportion of both symptomatic [32%] and asymptomatic [7.5%] dogs suggests that infected dogs are potentially infectious to sandfly vectors. Fifth, after controlling for inter-village differences in transmission rates, household dog ownership was shown to be a significant risk factor for human ACL. The results presented here show that if dogs were the main ACL reservoir host and if L. [Viannia] transmission were homogeneous, a dog control strategy (e.g. culling, insecticide-treated dog collars) in the study villages in Huanuco would be very feasible and effective, because the control effort [i.e. coverage] to reduce Ro<1 would be comparatively small [as low as 47%]. Domestic dogs are established reservoir hosts of ZVL caused by L. infantum. Hence, one of the approaches to reduce the incidence of human ZVL is to target infected dogs. The findings of a comparative study testing topical insecticides and applications to protect dogs from sandfly bites are presented in Chapter 7. It was shown that whilst permethrin and fenthion pour-on lotions had a more immediate effect on sandfly biting rates and mortality, deltamehtrin-impregnated collars [DMC] had a more prolonged protective effect, with the survival rate of bloodfed sandflies reduced by up to 86% after two months of deltamethrin collar application. In the work described in Chapter 8 the effectiveness of DMC to control canine ZVL was tested in a matched cluster intervention trial. Possible constraints associated with a community-wide implementation of a dog collar ZVL control strategy were also investigated using mathematical modelling. Although ZVL incidence was 32% lower in collared as compared to uncollared dogs after five months collar application, the difference was not significant. However, DMC did significantly reduce the odds (by 50%) of dogs increasing their anti-Leishmania antibody titre. Whether topical insecticides such as DMC will be effective as leishmaniasis control tools will depend on several factors. Firstly, the strategy will be most effective in those endemic areas where domestic dogs are the main ZVL reservoir and the epidemiological significance of wild reservoirs or stray dogs contributing to ZVL transmission is negligible. Secondly, in order to achieve a significant epidemiological impact on ZVL transmission, high dog collar coverage rates are essential. This will not only require the rapid replacement of lost collars, but also the collaring of new dogs recruited into the population; where population turnover rates are high, maintaining high coverage rates will be a greater logistic challenge, which invariably applies to dog populations in tropical, ZVL-endemic countries. Ultimately, the decision to replace the dog culling strategy with community-wide application of DMC will depend on [i] the relative cost of the interventions; and [ii] the practical applicability of DMC in the field [e.g. the willingness of the community to apply DMC and the efficiency with which they replace collars which have detached]. Clearly, the implementation of DMC on dogs is more likely to have the consent of the population at risk than the highly unpopular dog culling policy that continues to be practised in some ZVL-endemic countries.

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Belotta, Alexandra Frey. "Perfil ultrassonográfico e elastossonográfico em cães acometidos por linfadenopatias." Botucatu, 2018. http://hdl.handle.net/11449/154537.

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Abstract:

Orientador: Maria Jaqueline Mamprim
Resumo: A literatura veterinária possui escasso conteúdo a respeito do uso da ultrassonografia e elastossonografia para caracterização de lesões em linfonodos de cães. O objetivo do primeiro estudo foi comparar as características ultrassonográficas e elastossonográficas entre 50 linfonodos neoplásicos (LN) e 69 linfonodos não neoplásicos (LNN), em cães, com base no diagnóstico microscópico. A hipótese desse estudo é que seja possível distinguir lesões neoplásicas e não neoplásicas com tais técnicas de imagem. Variáveis quantitativas foram comparadas entre os grupos com teste t de student não pareado e, as variáveis categóricas, com teste U de Mann-Whitney. Linfonodos neoplásicos apresentaram dimensões significativamente maiores, relação entre eixo curto e eixo longo (RECEL) superior, maior frequência na perda da arquitetura interna, distribuição vascular predominante mista, índices de resistividade (IR) e de pulsatilidade (IP) superiores e maior rigidez à distribuição do escore elastográfico, em comparação com LNN. O objetivo do segundo estudo foi descrever as características ultrassonográficas e elastossonográficas de 25 linfonodos caninos parasitados por Leishmania spp. A hipótese desse estudo é que seja possível padronizar linfonodos contendo formas amastigotas de Leishmania spp por meio da ultrassonografia e elastografia. Houve aumento nas dimensões dos linfonodos, com RECEL próximo da normalidade. Observou-se alta prevalência de contornos irregulares, bordas nítidas e ausência d... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo)
Abstract: Applicability of ultrasonography and sonoelastography for characterization of lymph node lesions has not been established. The aim of the first study was to compare sonographic and sonoelastographic features between 50 neoplastic and 69 non-neoplastic lymph nodes of dogs, categorized according to microscopy. We hypothesize that sonography and sonoelastography allow the differentiation between neoplastic and non-neoplastic lymph node lesions. Quantitative variables were compared using Student’s unpaired t test and categoric variables were assessed using non-parametric Mann-Whitney U test. Neoplastic nodes had larger size, and short-to-long axis, predominantly mixed vascular flow distribution (hilar and peripheral) on Color Doppler and on Power Doppler, higher resistivity and pulsatility indices, and higher stiffness (score predominantly 4) on elastographic chromatic scale in comparison with non-neoplastic lymph nodes. The aim of the second study was to describe sonographic and elastosonographic features of 25 canine lymph nodes parasitized with Leishmania spp. We hypothesize that sonography and sonoelastography allow standardization of lymph nodes with Leishmania spp. There was enlargement of the lymph nodes associated with maintenance of the shape. Most of the nodes had irregular contour, well-defined borders and absent hilar tissue definition. A minority of the nodes had heterogeneous uniformity due to focal hypoechoic areas or peripheric hypoechoic areas. Vascular flow dist... (Complete abstract click electronic access below)
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Santana, Andressa Almeida. "FATORES EPIDEMIOLÓGICOS ASSOCIADOS E NOVAS ABORDAGENS DIAGNÓSTICAS PARA LEISHMANIOSE E BABESIOSE CANINA NO MUNICÍPIO DE SÃO LUÍS-MA, BRASIL." Universidade Federal do Maranhão, 2011. http://tedebc.ufma.br:8080/jspui/handle/tede/66.

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Abstract:

Made available in DSpace on 2016-08-16T18:18:41Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Tese Andressa Almeida Santana.pdf: 1466363 bytes, checksum: ae0eefc75fb09cd9f96594f4e5656ed5 (MD5) Previous issue date: 2011-07-29
FUNDAÇÃO DE AMPARO À PESQUISA E AO DESENVOLVIMENTO CIENTIFICO E TECNOLÓGICO DO MARANHÃO
Canine babesiosis and canine visceral leishmaniasis (CVL) are vector borne diseases, where dogs exert a play as reservoir or source for arthropods responsible by the transmission of these protozoosis. Babesia canis vogeli, is transmited by tick Rhipicephalus sanguineus while Leishmania infantum (sin. Leishmania chagasi) is transmited by sand fly (Lutzomyia longipalpis). The results showed that CVL remains endemic in São Luís Municipality. Despite that the coinfection between Leishmania and Babesia was low considering that both diseases are endemic in this tropical area. Beside that was observed that Yorkshire terrier presented higher predisposition to acquire the infection by B. canis vogeli. A remarkable result was the occurrence of ocular lesions associated to L. infantum infection.
A babesiose canina e a leishmaniose visceral canina são doenças transmitidas por vetores, sendo os cães competentes reservatórios e fonte alimentar dos artrópodes envolvidos. Babesia canis vogeli, é um parasita intraeritrocitário transmitido pelo carrapato Rhipicephalus sanguineus. Leishmania infantum (sin. Leishmania chagasi) transmitidos a mamíferos pela picada dos flebotomíneos (Lutzomyia longipalpis), infectando macrófagos do Sistema Fagocítico Mononuclear do hospedeiro. O presente trabalho é divido em capítulos e os resultados encontrados mostraram que a leishmaniose visceral canina ainda é endêmica no município de São Luís, e que apesar disso a taxa de coinfecção com Babesia foi baixa. Também foi observado que a raça Yorkshire terrier, dentre as raças estudadas, apresentou maior predisposição para contrair a infecção por B. canis vogeli. Outro resultado significativo foi a ocorrência de lesões oculares associadas à infecção por L. infantum.

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Silvestrini, Paolo. "New clinico-pathological findings and prognostic factors of canine leishmaniasis in endemic and nonendemic areas." Doctoral thesis, Universitat Autònoma de Barcelona, 2016. http://hdl.handle.net/10803/385106.

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Abstract:

Canine Leishmaniasis (CanL) is due to Leishmania infantum (syn. Leishmania chagasi) and is endemic in Mediterranean countries, Portugal, Latin America and Southern Asia. In the last few decades, imported and even autochthonous cases have been recorded in traditionally non-endemic areas such as Central and Northen Europe and Northen America. This is possibly due to a wider spread of the vector and especially to a larger numbers of travelling dogs. Many studies about CanL have been published in the last years and have contributed in understanding different aspects of this disease, including the alternative ways of transmission and the pathologic mechanisms underlying the clinical findings. However, CanL still remains a very challenging disease to diagnose, treat and prevent. Moreover, it is still very difficult to predict the outcome given the low numbers of controlled studies evaluating markers of prognosis. So, the main aims of the present thesis were to investigate new clinico-pathological aspects of CanL and to possibly identify useful prognostic factors. The first study demonstrated that a significant proportion of dogs with leishmaniasis have increased serum cTnI concentration, suggesting that CanL can cause cardiac disease, mainly myoand endocarditis. In the second study, the iron status and its relationship with C-reactive protein (CRP) was for the first time investigated in CanL. The results indicated that dogs with leishmaniasis have decreased serum iron, total iron-binding capacity (TIBC), unsaturated iron-binding capacity (UBIC) and percentage of transferrin saturation and increased concentrations of ferritin. Increased CRP and decreased TIBC are also risk factors for moratility. Finally, since the disease is progressively changing its geographical distribution, the last investigation was conducted in the United Kingdom (UK), currently considered a non-endemic country. The majority of dogs that were diagnosed of leishmaniasis have been adopted from an endemic area (especially from the Mediterranean countries) respect a minority that have travelled to those regions. No autochthonous cases were recognised. Purebreed dogs and those that were classified in stage D according to the Canine Leishmaniasis Working Group guidelines were at higher risk of death. Differently to what has been reported in endemic countries, serology titre at diagnosis and IRIS staging for chronic kidney disease did not influence the outcome.

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Courtenay, David Anthony Orin. "The epidemiology and control of canine visceral leishmaniasis in Amazon Brazil." Thesis, London School of Hygiene and Tropical Medicine (University of London), 1998. http://ethos.bl.uk/OrderDetails.do?uin=uk.bl.ethos.299485.

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Castro, Giovana Nogueira de. "Leishmaniose visceral humana e canina no município de Imperatriz, Maranhão, Brasil." Master's thesis, Universidade Técnica de Lisboa. Faculdade de Medicina Veterinária, 2008. http://hdl.handle.net/10400.5/462.

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Abstract:

Dissertção de Mestrado em Saúde Pública Veterinária
A leishmaniose visceral foi notificada pela primeira vez em Imperatriz em 1991. A partir de então, casos humanos e caninos da doença têm sido sistematicamente notificados, sendo a espécie Lutzomyia longipalpis o vetor apontado como transmissor da enfermidade. De Janeiro de 2000 a Dezembro de 2005, foram registrados 752 casos humanos autóctones, predominando o sexo masculino, que representou 57% do total de ocorrências. As crianças na faixa etária de 0 a 9 anos representaram 61% dos casos no período. A incidência de casos humanos aumentou a partir de 1998, atingindo um pico de 226 casos em 2002 e vem decrescendo desde então, provavelmente como resultado da intensificação das ações de controle. A letalidade no período foi de 4,8%. Mais de 99% dos enfermos procediam da zona urbana. No mesmo período, 1214 cães foram eutanasiados por serem positivos ao RIFI (1:40) para leishmaniose visceral. As condições socioeconômicas e ambientais encontradas no município assemelham-se às anteriormente descritas por vários autores para a ocorrência e manutenção da doença, podendo destacar-se a intensa migração da população, a degradação ambiental resultante da invasão do homem ao ecótopo do vetor, a abundância do agente transmissor e a grande exposição das populações a este, acompanhadas de insuficientes condições sanitárias em zona urbana e a da manutenção do reservatório canino positivo na área do município.
ABSTRACT: Visceral leishmaniasis was notified for the first time in Imperatriz in 1991. Since then, human and canine cases of the disease have been systematically reported and the vector, Lutzomyia longipalpis, was identified. From January 2000 to December 2005, 752 human indigenous cases were reported, of which 57% were males. Children up to nine years of age accounted for 61% of cases. The incidence of human cases increased since 1998, reaching a peak of 226 cases in 2002 and has been falling thereafter, probably reflecting the intensification of the control measures. The case-fatality rate in the period was 4,8%. More than 99% of the diseased people were urban dwellers. During the same period, 1214 dogs were subjected to lethal injection because they yielded positive results to serological tests for visceral leishmaniasis. The socio-economic and environmental conditions found in the municipality are similar to those described by other authors, with regard to the disease occurrence and maintenance. The main factors to be considered are the intense population migration, the environmental degradation that follows the human invasion of the vector ecosystem, the widespread exposure of susceptible individuals to the vector, coupled with inappropriate sanitary conditions and the maintenance of the canine reservoir.

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Ibba, F. "MARKERS OF INFLAMMATION, IMMUNITY AND RENAL DAMAGE IN DOGS WITH CANINE LEISHMANIASIS." Doctoral thesis, Università degli Studi di Milano, 2014. http://hdl.handle.net/2434/247237.

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Abstract:

Canine Leishmaniasis is a zoonotic disease that is spreading over mediterranean basin. Despite the pathogenesis of canine leishmaniasis has been investigated through several studies, some aspect of the host-parasite interaction that lead to overt diseases and typical inflammatory lesions have not yet been understood. Among these, the oxidant-anti-oxidant mechanisms that occur in dogs with the clinical disease are particularly interesting since on one hand they can provide to us useful information on the pathogenesis of the disease, which can also be a model for investigating immune-mediated chronic inflammatory conditions occurring also in other species on the other hand the identification of changes in molecules involved in oxidative stress may serve as a potential target for ancillary treatments or as markers of disease severity and progression. Similarly, most of the researches done until now have been focused on renal damage but only a few studies were focused on markers of tubular damage, despite the development of tubulo-interstitial nephritis is associated with more advanced stages of the disease. As regards inflammatory/oxidative responses, our studies confirmed the presence of oxidative phenomena associated with the inflammatory profiles of infected dogs and suggested that reactive oxygen species released by inflammatory cells are not the only oxidative mediators involved in this disease. The serial analysis of markers of inflammation or oxidation defined the possible role of these markers as prognostic factors, especially after treatment. More specifically, antioxidant molecules such as PON1 and HDL may play a role as early markers of remission after treatment since they quickly normalize in dogs that respond to treatments. As regards renal markers, we evidenced the possible role of GGT as a simple and inexpensive marker of tubular damage in dogs with leishmaniasis.

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Fernandes, Murilo Antonio. "Aspectos clínicos e moleculares no diagnóstico da leishmaniose visceral canina." Universidade de São Paulo, 2016. http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/10/10134/tde-09082017-084543/.

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Abstract:

As leishmanioses são um conjunto de doenças infecto parasitárias, de caráter zoonótico, que acometem os seres humanos, animais domésticos e silvestres, causadas por protozoários do gênero Leishmania. O presente trabalho objetivou comparar o desempenho de testes moleculares empregados no diagnóstico da leishmaniose visceral canina, em cães classificados em diferentes estágios clínicos da doença. Foram coletadas amostras biológicas, sangue e suabe conjuntival, em 215 cães, das cidades de Pirassununga, Santa Cruz das Palmeiras, Andradina e Ilha Solteira, todas localizadas no Estado de São Paulo, e foram separados e classificados em quatro estágios clínicos: assintomáticos, doença leve, moderada e severa, conforme os sinais clínicos, além da sorologia, hemograma e perfil bioquímico. Além disso, os animais foram submetidos a testes moleculares de PCR convencional com os primers 13A/13B, MC1/MC2, Nested-PCR ITS1, com os primers LITSR e L58S, PCR em tempo real com os primers LEISH-1 e LEISH-2 e sonda TaqMan-MGB. Nos resultados foi observado que os primers 13A e 13B, direcionados a amplificar fragmentos de kDNA de Leishmania spp., possuem uma maior capacidade em detectar animais positivos no sangue em estágio inicial de sintomatologia clínica, quando comparados aos outros (p<0,05). Utilizando amostras de suabe conjuntival não houve diferença significativa na detecção de animais positivos entre as diferentes fases clínicas e diferentes testes moleculares avaliados (p>0,05), exceto com relação aos primers MC1 e MC2, que foram significativamente menos capazes de detectar cães positivos na fase inicial da doença que os outros (p<0,05). As amostras positivas ao ITS1 sequenciadas apresentaram 99 a 100% de similaridade com Leishmania infantum. Podemos concluir que a PCR com os primers MC1 e MC2 não é indicada na detecção de cães com leishmaniose e que a PCR de sangue com os primers 13A e 13B é mais eficiente na detecção de animais no início da doença. Os resultados reforçam a necessidade de se aprimorar as ferramentas de diagnóstico e de se associar mais de uma técnica e/ou tipo de amostra para a detecção eficiente da leishmaniose canina.
Leishmaniasis is a group of parasitic infectious diseases with zoonotic potential that affect humans, domestic, and wild animals caused by protozoa of the genus Leishmania. The present study aimed to compare the performance of molecular tests used in the diagnosis of canine visceral leishmaniasis in dogs classified in different clinical stages of the disease. Biological samples, blood and conjunctival swab, were collected from 215 dogs from cities of Pirassununga, Santa Cruz das Palmeiras, Andradina, and Ilha Solteira, all of them located in the State of São Paulo. The animals were separated into four clinical stages: asymptomatic, mild disease, moderate disease, and severe disease according to the clinical signs, serology, hemograma, and biochemical profile. In addition, the animals were submitted to conventional PCR molecular tests with primers 13A / 13B, MC1 / MC2, Nested-PCR ITS1, with primers LITSR and L58S, real-time PCR with LEISH-1 and LEISH-2 primers, and TaqMan-MGB probe. In the results, it was observed that primers 13A and 13B directed to amplify fragments of Leishmania spp. kDNA have greater capacity to detect positive animals in blood and initial stage of clinical symptomatology, when compared to others (p<0.05). There was no significant difference in the detection of positive animals between the different clinical phases and different molecular tests evaluated using conjunctival swab samples (p>0.05), except for primers MC1 and MC2, which were significantly less able to detect positive dogs in the initial phase of the disease than the others (p<0.05). Sequenced positive samples by ITS1 showed 99 to 100% similarity to Leishmania infantum. We can conclude that PCR with the primers MC1 and MC2 is not indicated in the detection of dogs with leishmaniasis, and the PCR of blood with the primers 13A and 13B is more efficient in the detection of animals at the beginning of the disease than others. The results reinforce the necessity to improve diagnostic tools and to associate more than one technique and/or type of sample for efficient detection of canine leishmaniasis.

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Simão, Joana Sofia Correia. "Tratamento e prevenção da leishmaniose em cães domésticos (Canis familiaris) : avaliação de diferentes cenários." Master's thesis, Universidade de Lisboa, Faculdade de Medicina Veterinária, 2018. http://hdl.handle.net/10400.5/15940.

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Abstract:

Dissertação de Mestrado Integrado em Medicina Veterinária
A Leishmaniose canina (LCan) é uma doença zoonótica que se encontra distribuída mundialmente. A principal via de transmissão do protozoário Leishmania é através dos insetos flebótomineos. Esta doença apresenta uma grande variedade de sinais clínicos que podem sofrer alteração relativamente à sua intensidade durante a vida do animal. Na ausência de tratamento, a doença pode-se tornar fatal. Os cães domésticos apresentam um papel relevante nesta infeção, pois são considerados reservatórios naturais do agente para o Homem. A LCan é endémica no nosso pais, apresentando uma elevada frequência em determinadas regiões do mesmo. No entanto, diversas práticas podem ser realizadas para evitar o aparecimento da doença, como, por exemplo, o uso de repelentes, desparasitantes externos e, mais recentemente, a administração de vacinas. Quer a prevenção, quer o tratamento inerentes à LCan envolvem custos económicos para os tutores. O objetivo deste trabalho foi estudar a LCan, descrevendo e comparando a prevenção e o tratamento da doença de acordo com três cenários distintos. Assim, no primeiro cenário foi considerado que um animal realiza prevenção durante 10 anos e esta é 100% eficaz, não ocorrendo desenvolvimento da doença. No cenário 2 o animal é sujeito a prevenção durante os dois primeiros anos de vida, contrai a doença neste segundo ano, iniciando então o tratamento e falecendo aos sete anos de idade. No cenário 3 o animal demonstra sinais de doença clínica aos dois anos de idade sem nunca ter realizado qualquer tipo de prevenção, falecendo aos sete anos de idade. A análise económica teve em conta 2 tipos de prevenção: duas vacinas (A e B) e coleiras desparasitantes e dois tratamentos (antimoniato de meglumina com alopurinol ou miltefosina com alopurinol), considerando 3 tipos diferentes de tamanho corporal de um canídeo (10, 20 e 30 kg). Uma análise benefício-custo foi realizada para o cenário 1. O cálculo do RBC e do VLA demonstra a viabilidade económica desta prevenção (no pressuposto de uma eficácia de 100%). Relativamente aos custos com o tratamento nos cenários 2 e 3, conclui-se que o protocolo com antimoniato de meglumina e alopurinol apresenta custos mais baixos para animais com 10 kg de peso vivo, enquanto que com o protocolo miltefosina com alopurinol tem valores mais baixos quando administrados a animais com 20 e 30 kg. Com este trabalho pretendeu-se realçar a importância da análise económica previa à tomada de decisão do MV nas situações onde qualquer dos protocolos terapêuticos e ou de prevenção mencionados fossem aplicáveis.
ABSTRACT - Treatment and prevention of Leishmaniasis in domestic dogs (Canis familiaris): evaluation of different scenarios - Canine Leishmaniasis (LCan) is a zoonotic disease that is distributed worldwide, with the protozoan Leishmania transmitted mainly by sandflies. This disease presents a wide variety of clinical signs that may change in intensity during animal life. In the absence of treatment, the disease can become fatal. Domestic dogs play a relevant role in this disease, since they are considered natural reservoirs of the agent for man. LCan is endemic in our country, presenting a high frequency in certain regions of the same. However, several practices can be undertaken to prevent the onset of the illness, such as the use of repellents, dewormers and, more recently, the administration of vaccines. Both the prevention and the treatment in LCan involve economical costs for the tutors. The aim of this work was to study LCan, describing and comparing the prevention and the treatment of the disease according to three different scenarios. Thus, in the first scenario, it was considered that an animal carries out prevention for ten years and it is 100% effective, without occurrence of disease. In scenario 2 the animal is subjected to prevention during the first two years of life, gets the disease in this second year, starting treatment and dying at the age of seven. In scenario 3 the animal shows signs of clinical disease at two years of age without ever having performed any type of prevention, dying at the age of seven. The economic analysis considered two types of prevention: two vaccines (A and B) and deworming collars and two treatments (meglumine antimoniate with allopurinol or miltefosine with allopurinol), considering 3 different types of a canine body size (10, 20 and 30 kg). A cost-benefit analysis was made for scenario 1. The RBC and VLA calculations demonstrate the economic viability of this prevention (assuming 100% efficacy). Concerning the treatment costs in scenarios 2 and 3, it is concluded that the protocol with meglumine antimoniate and allopurinol has lower costs for animals weighing 10 kg, whereas with the protocol miltefosine and allopurinol have lower values when administered to animals weighing 20 and 30 kg. This work aimed to highlight the importance of economic analysis prior to the decision making of the Veterinarian in situations where any of the therapeutic protocols and/or prevention mentioned were applicable.
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Lima, Isadora dos Santos. "Desorganização da polpa branca esplênica está associada com a apresentação clínica mais grave da leishmaniose visceral em cães naturalmente infectados." Centro de Pesquisas Gonçalo Moniz, 2013. https://www.arca.fiocruz.br/handle/icict/7227.

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Abstract:

Submitted by Ana Maria Fiscina Sampaio (fiscina@bahia.fiocruz.br) on 2013-11-07T16:47:38Z No. of bitstreams: 1 Isadora dos Santos Lima Desorganização da Polpa Branca Esplênica está associada...pdf: 823516 bytes, checksum: 6c64973b1a470182971fdecded62d3c4 (MD5)
Made available in DSpace on 2013-11-07T16:47:38Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Isadora dos Santos Lima Desorganização da Polpa Branca Esplênica está associada...pdf: 823516 bytes, checksum: 6c64973b1a470182971fdecded62d3c4 (MD5) Previous issue date: 2013
Universidade Federal da Bahia. Faculdade de Medicina da Bahia. Salvador, BA, Brasil / Fundação Oswaldo Cruz. Centro de Pesquisas Gonçalo Moniz. Salvador, BA, Brasil
O baço é o maior órgão linfoide secundário em seres humanos e em cães. Em ambos, a ausência do baço está associada com um risco aumentado de ocorrência de infecções localizadas e disseminadas, incluindo sepse generalizada. A leishmaniose visceral e outras infecções podem alterar a estrutura histológica do baço, o que leva a uma destruição dos microambientes da polpa branca. Trabalhos anteriores mostraram que a ruptura da estrutura de polpa branca é mais frequente em cães com marcadores laboratoriais de suscetibilidade à leishmaniose visceral, como a cultura esplênica positiva e LST negativo, do que nos animais em que estes marcadores de susceptibilidade estavam ausentes. Neste estudo, o nosso objetivo é examinar a relação entre a desorganização histológica da polpa branca esplênica e a gravidade da leishmaniose visceral. As amostras e os dados utilizados neste estudo foram coletados de 206 cães de rua provenientes de uma área endêmica para leishmaniose visceral, a cidade de Jequié (Bahia, Brasil). Os animais foram examinados clinicamente e foram realizados os testes ELISA e LST. Aspirados de baço foram coletados para a cultura, e fragmentos de baço foram coletadas para estudos de biologia molecular e de estudos morfológicos. Os animais foram classificados de acordo com o grau de organização estrutural da polpa branca esplênica em grupos com baço (a), bem organizado, (b) ligeiramente desorganizado, (c) a moderadamente a extensivamente desorganizado. Em relação à positividade no ELISA juntamente com a desorganização do baço, conjuntivite ( P= 0,0116), hiperproteinemia (p= 0,021) foram mais frequentes no grupo de animais com ELISA positivo e baço desorganizado, quando comparado com os outros grupos. Os animais polissintomáticos são mais frequentes no grupo com ELISA positivo e baço do tipo 3 (p= 0,004). Os scores clínicos atribuídos à intensidade da conjuntivite (P <0,05), dermatite (P <0,05) e linfadenopatia (P <0,01), alopecia (P <0,01), onicogrifose (P <0,05) foram mais elevados nos animais com ELISA positivo e baço desorganizado do que outros grupos, bem como o número de sinais clínicos atribuíveis à leishmaniose visceral canina (p= 0,0014).Em relação à análise da positividade na cultura esplênica juntamente com a desorganização do baço, a frequência de cães polissintomáticos foi maior em animais com baço ligeiramente desorganizado (P <0,05) e baço desorganizado (P <0,005), do que em animais com baço organizado. Alopecia (P <0,01), conjuntivite (P <0,05), desidratação (P <0,001), dermatite (P <0,05), onicogrifose (p <0,01), anemia (P <0,05), úlcera (P <0,001 ) e alto escore clínico (P <0,001) foram mais frequentes em animais com cultura esplênica positiva e baço desorganizado, do que nos animais com cultura negativa e baço organizado. Em conclusão, os cães com desorganização do baço associada com leishmaniose visceral têm mais sinais clínicos e pior estado clínico do que os animais com leishmaniose visceral, mas sem desorganização do baço.
The spleen is the largest secondary lymphoid organ in human beings and in dogs. In both in human beings and in dogs, the absence of the spleen is associated with increased risk of localized and disseminated infection including overwhelm sepsis. Visceral leishmaniasis and other infections alter the histological structure of the spleen, leading to a disruption of the white pulp microenvironments. Previous works have shown that the disruption of the white pulp structure is more frequent in dogs with laboratorial markers of susceptibility to visceral leishmaniasis such as positive spleen culture and negative leishmanin skin test than in animals in which these susceptibility markers were absent. In this study, our goal is to examine the relationship between the histological disorganization of splenic white pulp and severity of visceral leishmaniasis.The samples and data used in this study were collected from 206 stray dogs from an endemic area for visceral leishmaniasis, the city of Jequie (Bahia, Brazil). The animals were examined clinically and ELISA and LST were performed. Splenic aspirates were collected for culture, and fragments of spleen were collected for molecular and morphological studies. The animals were ranked according to the degree of structural organization of splenic white pulp of the spleen in groups (a), well-organized, (b) slightly disordered, (c) moderately extensively disorganized. In relation to the positive in the ELISA with the disorganization of the spleen, conjunctivitis (P = 0.0116) hyperproteinemia (p = 0.021) were more frequent in the group of animals with positive ELISA and disorganized spleen when compared to the other groups. Polisymptomatic animals are more frequent in the group with positive ELISA and spleen type 3 (p = 0.004). Clinical scores attributed to the intensity of conjunctivitis (P <0.05), dermatitis (P <0.05) and lymphadenopathy (P <0.01), alopecia (P <0.01), onychogryphosis (P <0.05 ) were higher in animals with positive ELISA and disorganized spleen than other groups, as well as the number of clinical signs attributable to canine visceral leishmaniasis (p = 0.0014). Regarding the analysis of positive spleen culture together with splenic disorganization, the frequency of polisymptomatic dogs was higher in animals with slightly disordered spleen (P <0.05) and disorganized spleen (P <0.005) than in animals with organized spleen. Alopecia (P <0.01), conjunctivitis (P <0.05), dehydration (P <0.001), dermatitis (P <0.05), onychogryphosis (p <0.01), anemia (P <0.05 ), ulcers (P <0.001) and high clinical score (P <0.001 were more frequent in animals with positive spleen culture and disorganized spleen than in animals with negative culture and organized spleen . In conclusion, dogs with disorganization of the spleen associated with visceral leishmaniasis have more clinical signs and worse clinical status than animals with visceral leishmaniasis, but without disruption of the spleen.

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Santos, Juliana Coelho. "Isotipos de anticorpos anti-Leishmania no soro e expressão de citocinas no baço de cães naturalmente infectados com Leishmania infantum." reponame:Repositório Institucional da FIOCRUZ, 2014. https://www.arca.fiocruz.br/handle/icict/10290.

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Abstract:

Submitted by Ana Maria Fiscina Sampaio (fiscina@bahia.fiocruz.br) on 2015-05-12T13:35:17Z No. of bitstreams: 1 Juliana Coelho Santos Isotipo...2014.pdf: 500362 bytes, checksum: 4c5dbf54877a6ef41cbbca30b73e6cde (MD5)
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Fundação Oswaldo Cruz. Centro de Pesquisas Gonçalo Moniz. Salvador, BA, Brasil.
Neste estudo foi analisada a distribuição de isotipos de imunoglobulinas IgG1, IgG2 e IgE envolvidas na resposta a Leishmania no soro e a expressão de mRNA para IFN-g e IL-4 in situ no baço de cães naturalmente infectados com L.infantum com diferentes perfis de susceptibilidade ou resistência à doença. A atividade sérica de anticorpos do isotipo IgG1 contra Leishmania tendeu a ser maior nos animais com teste cutêneo da Leishmanina negativo e com parasitismo esplênico (grupo infectado potencialmente susceptível, 0,424±0,401) que nos outros grupos: com teste cutêneo da Leishmanina positivo e ausência de parasitismo esplênico (grupo infectado potencialmente resistente, 0,226±0,114), ou com ambos teste cutêneo da Leishmanina e cultura esplênica positivos (grupo em fase indeterminada da doença, 0,234±0,125) ou com ambos os parâmetros negativos (grupo potencialmente não infectado, 0,159±0,044). Essa diferença não foi, contudo estatisticamente significante (ANOVA, P=0,1450). IgG2 específica anti-Leishmania foi maior (ANOVA P=0,0001) no grupo infectado potencialmente susceptível (1,324±0,322) que nos demais grupos: em fase indeterminada da doença (0,930±0,383, P=0,05), infectado potencialmente resistente (0,916±0,401, P=0,05) e potencialmente não infectado (média 0,299±0,151, P=0,001). Foi também maior nos grupos infectado potencialmente resistente e com infecção em fase indeterminada que no grupo de animais potencialmente não infectado. Não houve diferenças entre os grupos (ANOVA p=0,4) nos resultados séricos de IgE anti-Leishmania; o grupo potencialmente susceptível (0,749±0,485) tendeu a apresentar valores médios mais elevados que os grupos potencialmente resistente (0,518±0,161), ou com doença em fase indeterminada (média 0,591±0,331) ou potencialmente não infectados (0,530±0,121), essas diferenças foram intensificadas pela alta atividade de anticorpos do isotipo IgE anti-Leishmania em um dentre os 11 animais examinados, não sendo estatisticamente significante (ANOVA, P=0,4668). Não foram observadas diferenças na expressão de mRNA para IFN-g e IL-4 no baço de animais não infectados ou naturalmente infectados com L. nfantumi com (a) teste cutêneo da Leishmanina positivo e cultura esplênica negativa ou com (b) teste cutêneo da Leishmanina negativo e parasitismo esplênico. Observou-se uma preponderância de anticorpos da subclasse IgG2 em animais com parasitismo esplênico independente da resposta ao teste cutêneo da Leishmanina. Tais resultados sugerem que a polarização da resposta imune a Leishmania pode variar em diferentes compartimentos como sangue e baço.
We analyzed the distribution immunoglobulin isotypes IgG1, IgG2 and IgE involved in the response to Leishmania and the mRNA expression for IFN-g and IL-4 in situ in the spleen of dogs naturally infected with IgG1 antibody anti-Leishmania serum activity was higher in animals with negative Leishmanin skin test and splenic parasitism (infected and potencially susceptible to VL group, 0,424±0,401) than in other groups: positive Leishmanin skin test and negative splenic parasitism (infected and potentially resistant to VL group, 0,226±0,114), or both positive Leishmanin skin test and slpenic parasitism (infected with undefined susceptibility status group, 0234±0,125) or both negative parameters (non-infected group, 0159±0,044). This difference however was not statistically significant (ANOVA, P=0145). Specific IgG2 anti-Leishmania was higer (ANOVA P=0,0001) in infected and potencially susceptible to VL group (1,324±0,322) than in the other groups: infected with undefined susceptibility status (0,930±0,383, P=0,05), infected and potencially resistant to VL (0,916±0,401, P=0,05) and non infected group (0,299±0,151, P=0,001). Was also higher in infected and potencially resistant to VL and infected with undefined susceptibility status groups than in group of non-infected animals. There was no significant differences (ANOVA p=0,4) between different groups in seric IgE anti-Leishmania, infected and potencially susceptible to VL group (0,749±0,485) showed media higher than in infected and potencially resistant to VL group (0,518±0,161), or in infected with undefined susceptibility status group (0,591±0,331) or non-infected group (0,530±0,121), these differences were intensified for the higher IgE antibody activity in one between 11 examined animals, although this was not statistically significant (ANOVA, P=0,4668). There was no difference in IL-4 or IFN-g mRNA expression in the spleen among groups of animals non-infected or naturally infected with L. infantum, with (a) strong LST and negative spleen culture for the parasite or with (b) negative LST and parasite in the spleen We could observe an interesting preponderance of antibodies from the IgG2 class in animals with splenic parasitism independently of the LST response. Our results suggest that the polarity of immune response to Leishmania may vary in different compartments such as blood and spleen.

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Munford, Nanci Derevtsoff. "Alterações histopatológicas em cães com leishmaniose visceral naturalmente infectados do município de Jequié-Ba (Brasil)." reponame:Repositório Institucional da FIOCRUZ, 2016. http://www.arca.fiocruz.br/handle/icict/16104.

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Abstract:

Submitted by Ana Maria Fiscina Sampaio (fiscina@bahia.fiocruz.br) on 2016-10-05T18:21:34Z No. of bitstreams: 1 Nanci Derevtsoff Munford Alterações... 2016.pdf: 3140719 bytes, checksum: 5a6dfaa344823e60c8a3fa04f9a40b45 (MD5)
Approved for entry into archive by Ana Maria Fiscina Sampaio (fiscina@bahia.fiocruz.br) on 2016-10-05T18:28:26Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Nanci Derevtsoff Munford Alterações... 2016.pdf: 3140719 bytes, checksum: 5a6dfaa344823e60c8a3fa04f9a40b45 (MD5)
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Fundação Oswaldo Cruz. Centro de Pesquisas Gonçalo Moniz. Salvador, BA, Brasil
INTRODUÇÃO: Leishmaniose visceral é uma zoonose grave que acomete uma gama de animais. O cão é considerado o principal reservatório urbano da Leishmania infantum e pode ser clinicamente assintomático ou sintomático na infecção. Poucos estudos abordam os aspectos clínicos e histopatológicos na leishmaniose visceral, sobretudo estudos sistemáticos, que fazem descrição detalhada dos achados de histopatologia e façam a correlação desses aspectos na doença. A hipótese da pesquisa é que cães naturalmente infectados com L. infantum apresentam alterações histopatológicas distintas que se relacionam com as manifestações clínicas, tendo significados diagnóstico e prognóstico. OBJETIVO: O objetivo do trabalho foi a descrição sistemática das alterações histopatológicas encontradas nos diversos órgãos de cães com leishmaniose visceral naturalmente infectados, correlacionando com diferentes manifestações clínicas. MÉTODOS: Para este estudo foram coletados amostras e dados provenientes de 58 cães do município de Jequié-Ba, área endêmica para leishmaniose. Os cães foram submetidos a exame clínico, eutanásia e coleta de material para PCR, ELISA e cultura, além de fragmentos de fígado, baço, linfonodo, pele, intestino, rins e pulmões. Os animais foram classificados em assintomáticos, quando apresentaram até dois sinais, e sintomáticos, quando exibiram mais de dois sinais. Cães com positividade simultânea nos testes de cultura esplênica, ELISA e PCR tiveram cortes dos tecidos submetidos a procedimento imunoistoquímico para avaliação da carga parasitária em linfonodo, baço e fígado. Lâminas dos fragmentos obtidos foram avaliadas sob microscopia óptica para análise das alterações. RESULTADOS: Ao todo, nove animais foram classificados como assintomáticos e 49 sintomáticos. Os 58 cães da pesquisa foram positivos em pelo menos um dos testes realizados para diagnóstico da infecção: PCR (n=91,38%), ELISA (n= 84,48%) ou cultura esplênica (n= 34,48%). No fígado, a linfocitose intrassinusoidal moderada se mostrou mais frequente no grupo dos sintomáticos (p=0,008). Nos demais parâmetros hepáticos, os grupos não obtiveram diferenças estatisticamente significantes. No baço, linfonodo, intestino, pele, rins e pulmões, as alterações se comportaram de forma semelhante entre as manifestações clínicas. A maior carga parasitária foi encontrada no baço. CONCLUSÃO: As alterações histopatológicas não mostraram diferenças entre as manifestações clínicas.
INTRODUCTION: Visceral leishmaniasis is a serious zoonosis that affects a range of animals. The dog is considered the main urban reservoir of Leishmania infantum and may be clinically asymptomatic or symptomatic in infection. Few studies address the clinical and histopathological aspects in visceral leishmaniasis, especially systematic studies, which are detailed description of histopathology findings and making the correlation of these aspects of the disease. The hypothesis of the research is that dogs naturally infected with L. infantum have distinct histopathologic changes that relate to the clinical manifestations, diagnosis and prognosis. OBJECTIVE: The objective was the systematic description of histopathology found in the various organs of dogs with visceral leishmaniasis naturally infected, correlated with different clinical manifestations. METHODS: For this study were collected samples and data from 58 dogs in the city of Jequié-Ba, endemic area for leishmaniasis. The dogs underwent clinical examination, euthanasia and collection of material for PCR, ELISA and culture, as well as fragments of liver, spleen, lymph nodes, skin, intestine, kidneys and lungs. The animals were classified as asymptomatic when presented two signs, and symptomatic when exhibited more than two signals. Dogs with positive symptomatology for splenic culture, ELISA and PCR were subjected to cuts tissue immunohistochemical procedure for evaluating the parasite load in the lymph node, spleen and liver. Blades fragments obtained were evaluated by optical microscopy for analysis of changes. RESULTS: In all, nine animals were classified as asymptomatic and 49 symptomatic. The 58 dogs of the survey were positive in one of the tests for the diagnosis of infection: PCR (n = 91.38%), ELISA (n = 84.48%) or splenic culture (n = 34.48%). In the liver, moderate sinusoidal intra lymphocytosis was more frequent in the symptomatic group (p = 0.008). In other hepatic parameters, the groups no revealed statistically significant differences. In spleen, lymph nodes, intestines, skin, kidneys and lungs, the changes are similarly between the clinical manifestations. The largest parasitic load was found in the spleen. CONCLUSION: The histopathological changes showed no differences between the clinical manifestations

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RODRIGUES, Maria Armanda Viana. "Canine leishmaniasis: the role of hepatocytes and Kupffer cells during Leishmania infantum infection." Doctoral thesis, Instituto de Higiene e Medicina Tropical, 2017. http://hdl.handle.net/10362/20432.

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Abstract:

A leishmaniose canina (LCan) é uma doença zoonótica causada por Leishmania infantum, um parasita protozoário transmitido por flébotomos. O fígado constitui um órgão vital e de grande importância metabólica, sendo também um alvo preferencial para L. infantum. Apesar do complexo metabolismo, o fígado apresenta mecanismos efetores que podem contribuir para a direta eliminação do parasita de forma ainda não completamente compreendida. Assim, este estudo tem por objetivo analisar o papel dos hepatócitos e das células de Kupffer (CK) na infeção por L. infantum. A resposta imune orquestrada pelo cão contra L. infantum é constituída por um largo espetro de respostas de imunidade inata e adquirida. Estudos em cães infetados demonstraram que a imunidade ao parasita é órgão-específica. Para analisar a interação entre L. infantum e os hepatócitos, no presente estudo, hepatócitos e CK foram isolados de cães saudáveis e cultivadas em dois sistemas de cultura diferentes. O sistema 2D consiste na clássica cultura em placa e o sistema 3D tira partido da tendência dos hepatócitos para agregar e permite às células recriar a organização natural existente no órgão. L. infantum apresentou um claro tropismo para os hepatócitos, aderindo fortemente à membrana celular. No entanto, não é claro se o parasita entrou nos hepatócitos. Estas interações levaram a uma ativação da imunidade inata, aumentando a expressão génica dos receptores NOD1 e NOD2, bem como TLR2, em sinergia com a diferenciação de um perfil misto de citocinas anti- e pro-inflamatórias, que conduziu à diminuição de atividade das CYPs450. Três novos compostos com reconhecida atividade anti-leishmanial (ácido ursólico, chalcona-8 e quercetina) foram testados e comparados com o fármaco classicamente utilizado no tratamento da leishmaniose. Os compostos experimentais apresentaram boa atividade leishmanicida e não afetaram a viabilidade dos hepatócitos, diminuíram a inflamação celular e restauraram a atividade das CTPs450, havendo ainda a hipótese de serem metabolizados em parte pelas referidas enzimas. As CK mostraram-se permissivas a amastigotas e promastigotas e elevaram a expressão de NOD1 e TLR2 na presença do parasita. No entanto, L. infantum é capaz de regular a resposta imunitária nas CK, evitando a ação de citocinas anti e pró-inflamatórias e do stress oxidativo, aumentando, por outro, lado a síntese de ureia. A adição de antimoniato de meglumina permitiu às CK recuperar a ativação e expressão de recetores de imunidade inata e produção de citocinas. A co-cultura de CK infetadas com hepatócitos revelou que as células em conjunto foram capazes de ativar a imunidade inata. Os hepatócitos evidenciaram, assim, um papel interessante na orquestração de uma resposta imune sinergética com as CK contra L. infantum. Foram ainda observadas diferenças entre a resposta imune exibida por macrófagos do sangue (MØ) e CK infetados por L. infantum. A análise da memória linfocitária hepática, realizada em modelo murino de leishmaniose visceral, demonstrou que o tratamento com antimoniato de meglumina elevou os níveis de memória e o número de células efetoras, melhorando a resposta imunitária do fígado, salientando o seu papel como órgão imunitário. As proteínas recombinantes de L. infantum, LirCyp1 e LirSOD foram reconhecidas pelas células de memória de animais infetados e tratados, indiciando que estas proteínas podem vir a ser incorporadas numa vacina terapêutica ou profilática.
Canine leishmaniasis (CanL) is a zoonotic disease caused by Leishmania infantum, a protozoan parasite transmitted by sand flies. The liver is a vital and major metabolic organ which also constitutes a L. infantum preferential target. Despite the complex metabolism, liver possesses effector mechanisms that can contribute to direct elimination of Leishmania in a not yet defined way. Thus, this study aimed to assess the role of hepatocytes and Kupffer cells (KC) in the canine liver infected by L. infantum. A wide spectrum of innate and acquired immune responses is orchestrated by the canine host when facing L. infantum infection. CanL infection studies have indicated that parasite immunity is organ-specific. In the present study, canine hepatocytes and KCs were isolated from healthy stray dogs and two different culture systems were used to analyze the interaction of L. infantum with hepatocytes. The 2D-culture system consists in the classical plate culture and the 3D-culture system takes advantage of the natural aggregation properties of hepatocytes and allows cells to recreate some of the natural tissue architecture. L. infantum exhibited evident tropism to hepatocytes and strongly attached to the cells in both cultures system. However, it was not clear if parasites entered the hepatocytes. These interactions lead to activation of innate immunity by increasing the gene expression of NOD1 and NOD2 receptors in synergy with the increase in TLR2 expression. TNF-α cytokine expression was increased creating a proinflammatory cellular microenvironment and, as consequence, decreasing the CYP450 activity. This downregulation of CYPs may increase toxicity of clinical drugs in some cases. Three new potential leishmanicidal drugs were tested, ursolic acid, chalcone-8 and quercetin in comparison to the standard meglumine antimoniate. Experimental drugs revealed good leishmanicidal activity and did not reduce hepatocyte viability. The addition of leishmanicidal drugs decreased the inflammation and restored the CYP450 activity, which were also probable involved in the metabolization of the tested compounds. Regarding KCs, these cells were permissive to L. infantum amastigotes and promastigotes. KCs increased expression of NOD1 and TLR2 innate immune receptors. Even so, the parasite regulates KC immune response, avoiding the generation of proand anti-inflammatory cytokines and the oxidative burst, increasing the synthesis of urea. The addition of meglumine antimoniate allowed KC to activate, increasing the expression of innate immune receptors and of pro-inflammatory cytokines, breaking the silencing imposed by the parasite. The addition of L. infantum infected KCs to canine hepatocytes in a co-culture, was able to activate cells innate immunity. Hepatocyte seemed to have an interesting role in orchestrating a synergistic immune response against L. infantum parasites. Major differences were also found between the immune response exhibited by blood derivate macrophages (MØ) and liver KC, when facing infection by L. infantum. The assessment of the liver lymphocyte memory performed in the murine model of visceral leishmaniasis demonstrated that the treatment with antimoniate meglumine increases the levels of memory and effector T cells, enhancing liver immune response. The liver has higher levels of immune memory T cells, evidencing its role as an immunological organ. The recombinant proteins LirCyp1 and LirSOD, are strongly recognized by memory cells from infected and treated mice, indicating these proteins might be used in a prophylactic or therapeutic vaccine formulation.

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Villegas, Tatiana Jimenez. "Fatores de risco de Leishmaniose Visceral em cães no município de Panorama, Estado de São Paulo, SP, Brasil." Universidade de São Paulo, 2015. http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/10/10134/tde-14092015-112244/.

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A Leishmaniose Visceral Canina é uma doença na qual o ciclo de transmissão envolve a interação de vetores, parasitas, reservatórios e hospedeiros além de componentes ambientais, sociais, e biológicos, que tornam complexa a compreensão da dinâmica desta doença nas regiões endêmicas. Este estudo epidemiológico transversal de tipo caso controle objetivou a identificação de fatores sociodemográficos, socioeconômicos, ambientais, da dinâmica populacional canina e do estilo de vida dos cães, associados à ocorrência de Leishmaniose Visceral Canina no município de Panorama, estado de São Paulo, Brasil. Para a identificação destes fatores foi realizada um inquérito epidemiológico nos domicílios com cães positivos e negativos a Leishmaniose Visceral diagnosticados por sorologia no anos 2012 e 2013. Mediante um modelo de regressão logística foram considerados como fatores de risco para a ocorrência de Leishmaniose Visceral Canina: cães não castrados, cães que dormem fora de casa, famílias com renda inferior a três salários mínimos, presença de vegetação próximo do domicilio, não ter vidro na janela, ter vasos com plantas, ter arvores no quintal e aquisição de um cão no último ano. O desenvolvimento deste trabalho auxilia no programa de prevenção e controle da Leishmaniose Visceral Canina do Município de Panorama, mediante a identificação dos principais fatores de risco determinantes para a manutenção da doença. Este estudo demonstrou a presença de fatores de risco sujeitos a modificações por parte da população e das autoridades sanitárias que poderiam contribuir para a redução do risco de transmissão da doença em Panorama, sendo elas: a ordenação do ambiente no peri-domicílio pela redução de matéria orgânica e entulho que poderiam servir como local para reprodução e abrigo da população vetora, a modificação da relação com os cães de modo a aumentar a supervisão e a promoção do uso de medidas de proteção individual (coleira, repelentes, vacina) para a proteção da população canina nesta localidade.
Canine Visceral Leishmaniasis is a disease in which the transmission cycle involves the interaction of vectors, parasites, as well as reservoir hosts and environmental, social, and biological factors, making it very complex to understand the dynamic of this disease in endemic regions. This cross-sectional case-control epidemiological study aimed to identify risk factors for the occurrence of Canine Visceral Leishmaniasis in the city of Panorama, São Paulo, Brazil. An epidemiological survey was done to identify sociodemographic, socioeconomics, environmental, canine population dynamics and dogs life style factors, in households with positive and negative dogs diagnosed by serology in the years 2012 and 2013 in the city of Panorama. A logistic regression model was developed to take into account risk factors for the occurrence of Canine Visceral Leishmaniasis: intact dogs, dogs sleeping away from home, families with lower income, vegetation near the households, windows with no glass panels, potted plants, the presence of trees in the yard and the acquisition of a dog in the last year. The development of this work helps in the prevention and control program of Canine Visceral Leishmaniasis in the city of Panorama by the management of the determinant risk factors that maintain the disease. This study demonstrated the presence of some risk factors that are subject to modifications by the population and the health authorities and that could produce a reduction in the risk of disease transmission in Panorama: environmental ordination in areas around the houses with reduction of organic matter and rubbish that could serve as a place for the reproduction and shelter of the vector population, and the modification of the relationship with dogs promoting the use of individual protective measures (collar, repellents, vaccine etc.) to contribute to the protection of the dog population in this locality.

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Silva, Alessandra Ferreira da. "Vigilância da leishmaniose visceral americana no município de São Paulo." Universidade de São Paulo, 2015. http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/6/6132/tde-21082015-130205/.

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Abstract:

Introdução: As leishmanioses são doenças que se apresentam como um sério obstáculo ao desenvolvimento socioeconômico. A leishmaniose visceral americana (LVA) tem como agente etiológico a Leishmania (Leishmania) infantum chagasi, como reservatório doméstico principal o cão e os vetores são flebotomíneos (Diptera:Psychodidae). Objetivo: investigar a vulnerabilidade do município de São Paulo para a ocorrência de LVA, utilizando os parâmetros de casos humanos notificados, presença do vetor e infecção em reservatórios domésticos. Método: A área de estudo compreende a região dos distritos administrativos do Anhanguera, Jaraguá e Perus (município de São Paulo) que incluem o Parque do Anhanguera e o Parque estadual do Jaraguá. A justificativa para o estudo nessa área é o eixo viário oeste-leste de expansão da LVA no estado de São Paulo. Foram levantados notificações humanas de LVA entre os anos de 2007 a 2014, para análise espacial pelos programas SaTScan e Terra View, num total de 140 e nenhuma dessas é considerada autóctone. Realizamos levantamento entomológico nos parques Anhanguera e Jaraguá. A análise estatística foi realizada pelos cálculos da Média geométrica de Williams, pelo índice de diversidade de Shannon-Weaver (H) e a dominância pelo índice de Pielou (J) também foi calculado o índice de Abundância de espécies padronizado (IAEP). Realizamos inquérito canino amostral e obtivemos 126 amostras de sangue canino que foram submetidas aos testes EIE. Foram colhidas amostras de Swab bucal do cão sororreagente e contactantes, as quais foram analisadas por PCR (RFLP), juntamente ás amostras de coágulos sanguíneos dos cães dos parques Anhanguera e Jaraguá num total de 31 amostras. Resultado: A análise espacial mostrou Clusters nos distritos do Brás e Guaianases (p<0,05) e, a espaço temporal em Raposo Tavares e Parelheiros (p<0,05). Os distritos do Carrão, Cachoeirinha e José Bonifácio formaram clusters secundários (p>0,05). Foram capturados 3660 espécimes de flebotomíneos identificadas 16 espécies de flebotomíneos e as mais frequentes na amostra foram: Pintomyia fischeri (82,46 por cento ), Psathyromyia pascalei (5,57 por cento ), Migonemyia migonei (5.25 por cento ) e Expapillata firmatoi (3.22 por cento ). Dentre as espécies capturadas, está uma fêmea de espécie similar à Lutzomyia longipalpis. O inquérito canino sorológico apontou um sororreagente no distrito de Perus. Do total de 31 amostras analisadas por PCR, 10 foram positivas para Leishmania sp. Foi possível chegar á espécie em seis delas, três positivas para a espécie L. (V.) shawi ou L (V.) lainsoni e três para L. (L.) infantum chagasi. Conclusões: A análise espacial das notificações de LVA humana dá direcionamento para investigações de uma possível transmissão autóctone no município. Há elos epidemiológicos que sugerem que as leishmanioses tegumentar e visceral caninas se tratam de doenças emergentes no município. Possivelmente, os casos caninos encontrados na região de estudo sejam parte da disseminação do eixo oeste-leste da leishmaniose visceral no Estado de São Paulo, pelo eixo viário. Palavras-chave: Leishmaniose visceral canina; Leishmaniose tegumentar.
Introduction: The leishmaniases are diseases which are a serious obstacle to social economic development. American visceral leishmaniasis (AVL) has Leishmania (Leishmania) infantum chagasi as its etiological agent, the domestic dog is its main reservoir and sand flies (Diptera, Psychodidae) its vectors. Objective: to investigate the vulnerability of São Paulo municipality to the occurrence of AVL, using the parameters of notified human cases, the presence of the vector and infection in domestic reservoirs. Method: The study area covers the region of the distinct administrative districts of Anhanguera, Jaraguá and Perus (São Paulo municipality) which include the Parque do Anhanguera and the Parque Estadual do Jaraguá. The reason for undertaking the study in this area is the existence of the roads linking the west and east of São Paulo state along which AVL has expanded eastwards. A survey was made of the 140 human cases (none of which was considered autochthonous) of AVL notified from 2007 to 2014, for the spatial analysis of the SaTScan and Terra View programs. An entomological survey was conducted in the two parks mentioned. The statistical analyses of the insects were undertaken using Williams geometrical means, Shannon-Weavers diversity index (H), Pielous evenness index (J) and the standardized species abundance index (SSAI). A canine sampling inquiry was conducted and 126 blood samples were submitted to the Enzyme-Linked Immunosorbent Assay (ELISA) test. A total of five samples of mouth swabs of the serum positive dog and four of its contacts and also blood clot samples of a total of 26 dogs from the two parks were analyzed by PCR (RFLP). Results: The spatial analysis showed clusters in the Brás and Guaianases (p<0.05) districts and the temporal/spatial analysis in Raposo Tavares and Parelheiros (p<0.05) districts. The Carrão, Cachoeirinha and José Bonifácio districts formed secondary clusters (p>0.05). A total of 3,660 specimens of sand flies were collected, representing 16 species, Pintomyia fischeri (82.46 per cent ), Psathyromyia pascalei (5.57 per cent ), Migonemyia migonei (5.25 per cent ) and Expapillata firmatoi (3.22 per cent ) being the most frequent. One female of a species similar to Lutzomyia longipalpis was captured. The canine serological enquiry showed one reagent in the Perus district. Of the total of 31 samples analyzed by PCR, 10 were positive for Leishmania sp., among which six were identified, three as species L. (V.) shawi/L (V.) lainsoni and three as L. (L.) infantum chagasi. Conclusions: The spatial analysis of the AVL human cases notified suggests the direction to be followed for future investigation of a possible autochthonous transmission in the municipality. There are epidemiological links which suggest that the canine cutaneous and visceral leishmaniases are emergent diseases in the municipality. Possibly the canine cases of visceral leishmaniasis found in this study region are part of its dissemination along the west-east axis of the diseases expansion in the state of São Paulo along the highways.

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Rossi, Claudio Nazaretian. "Avaliação da imunidade celular na pele de cães naturalmente infectados com Leishmania (Leishmania) infantum chagasi e sua correlação com transmissibilidade ao vetor." Universidade de São Paulo, 2013. http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/10/10136/tde-13112013-152403/.

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Abstract:

Foram selecionados aleatoriamente 38 cães naturalmente infectados por Leishmania (Leishmania) infantum chagasi oriundos de Araçatuba, São Paulo, área endêmica para leishmaniose visceral, e os quais foram distribuídos em dois grupos: o primeiro com 24 cães sintomáticos e, o outro, composto por 14 animais assintomáticos. Correlacionou-se a caracterização clínica (assintomáticos ou sintomáticos) com os: potencial em infectar o inseto vetor, padrão inflamatório da pele, perfil de imunidade celular e parasitismo tegumentar desses cães. Quanto ao número de formas amastigotas/mm2 no tegumento, não houve diferença estatisticamente significativa entre os grupos (p = 0,1584), sendo que a densidade de parasitos na pele mostrou uma correlação positiva moderada com os títulos de anticorpos anti-Leishmania (p = 0,042). Quanto à infectividade ao vetor, evidenciada pelo xenodiagnóstico, 16 (66,7%) cães sintomáticos e 13 (93%) assintomáticos foram capazes em transmitir Leishmania aos flebotomíneos, dentre estes, respectivamente, seis (37,5%) e oito (61,5%) animais não apresentavam parasitismo cutâneo, embora todos, de ambos os grupos, tenham sido positivos quando da pesquisa de parasitos no linfonodo poplíteo. Observou-se um maior percentual de transmissibilidade para o vetor a partir de cães assintomáticos (p = 0,0494). As alterações histológicas cutâneas foram similares em ambos os grupos e se caracterizaram, de modo geral, por um infiltrado inflamatório, ora focal ora difuso, na derme, constituído, principalmente, por células mononucleares (macrófagos, linfócitos e plasmócitos), variando de discreto a intenso. Quanto à caracterização da resposta imune celular no tegumento dos animais, somente a densidade (células/mm2) de células iNOS+ foi significantemente maior na derme dos cães sintomáticos quando comparado aos assintomáticos (p = 0,0368). Observou-se correlação positiva moderada entre a densidade de parasitos na pele e a densidade de macrófagos (p = 0,031), de células T CD4+ (p = 0,015) e CD8+ (p = 0,023), e, também, naquela de células iNOS+ relativamente a de células T CD3+ (p = 0,005), CD4+ (p = 0,001) e CD8+ (p = 0,0001). Verificou-se, ainda, correlação negativa moderada com o número de manifestações clínicas e/ou gravidade da enfermidade (p = 0,028), confirmando, assim, maior transmissibilidade de parasitos ao vetor, a partir de animais assintomáticos, demonstrando-se, dessa forma, que tais cães são fontes de infecção em potencial para insetos vetores em áreas endêmicas para leishmaniose visceral canina.
Thirty-eight dogs naturally infected by Leishmania (Leishmania) infantum chagasi were randomly selected from Araçatuba of São Paulo state (Brazil), an endemic area for visceral leishmaniasis. The subjects were distributed into two groups: the first comprising 24 symptomatic dogs and the second consisting of 14 asymptomatic dogs. Possible correlations of clinical characterization (in both symptomatic and asymptomatic subjects) with potential to infect the insect vector, skin inflammatory pattern, cutaneous cellular immunity profile and cutaneous parasitism were investigated. Regarding to the number of cutaneous leishmania amastigotes/mm2, there was not a significant difference between the groups (p = 0.1584); density of skin parasites showed a moderate positive correlation with anti-Leishmania antibody titers (p = 0.042). Concerning to the infectivity to the insect vector, as evidenced by xenodiagnosis, 16 (66.7%) symptomatic and 13 (93%) asymptomatic dogs were able to transmit Leishmania to phlebotomines. Among these, six (37.5%) and eight (61.5%) dogs, respectivelly, did not show cutaneous parasitism, although all participant dogs were found positive when searching for parasites in the popliteal lymph nodes. Asymptomatic dogs showed higher transmissibility to the vector than symptomatic ones (p = 0.0494). Histological features in the skin were similar in both groups and were generally characterized by an inflammatory infiltrate, either diffuse or focal, in the dermis, mainly consisted of mononuclear cells (macrophages, lymphocytes and plasma cells), varying from mild to intense. Concerning characterization of the cutaneous cellular immune response, only iNOS+ cells density (cells/mm2) was significantly higher in the dermis of the symptomatic dogs compared to the asymptomatic ones (p = 0.0368). Moderate positive correlation between the cutaneous parasites density and the macrophages density (p = 0.031), the CD4+ T cells (p = 0.015) and CD8+ T cells (p = 0.023) were observed. Furthermore, density of iNOS+ cells in relation to CD3+ T cells (p = 0.005), CD4+ T cells (p = 0.001) and CD8+ T cells (p = 0.0001) were found positively correlated at a moderate level. It was also found a moderate negative correlation between cutaneous parasites density and the number of clinical signs and/or disease severity (p = 0.028), confirming grater parasites transmission to the vector from asymptomatic animals. It was therefore demonstrated that these dogs are potential sources of infection to insect vectors in endemic areas for canine visceral leishmaniasis.

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BATISTA, Zulmira da Silva. "Avaliação da resposta imunológica de cães portadores de Leishmaniose tratados com extrato seco de noni (Morinda citrifolia)." Universidade Federal do Maranhão, 2014. http://tedebc.ufma.br:8080/jspui/handle/tede/1853.

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Abstract:

Submitted by Rosivalda Pereira (mrs.pereira@ufma.br) on 2017-08-22T17:51:47Z No. of bitstreams: 1 ZulmiraBatista.pdf: 174359 bytes, checksum: ad9eb8a6efe853246b6a9973287c6342 (MD5)
Made available in DSpace on 2017-08-22T17:51:47Z (GMT). No. of bitstreams: 1 ZulmiraBatista.pdf: 174359 bytes, checksum: ad9eb8a6efe853246b6a9973287c6342 (MD5) Previous issue date: 2014-06-30
Fundação de Amparo à Pesquisa e ao Desenvolvimento Científico e Tecnológico do Maranhão (FAPEMA)
Visceral leishmaniasis (VL) is a anthropozoonosis worldwide distribution that affects humans, canines and marsupials. The disease is caused by different species of protozoa of the genus Leishmania and is transmitted by the bite of sand flies insects. The dog has been appointed as the main host and reservoir of LV, being probably the most important natural reservoir related to human cases. Moreover, it has a key role in the expansion of the disease in endemic areas. This study aimed to evaluate the cytokine profile, hematological and biochemical dogs with Leishmania infantum and treated with dry extract of Morinda citrifolia. For this study, nine dogs of both sexes and various breeds were used. Screening of animals was given through the ELISA / S7® testing and detection of parasites in blood smears. Animals used in the studies were all symptoms. To conduct the survey EDTA blood for complete blood count and blood without EDTA to carry out the biochemical and cytokines were collected. Tissue was also harvested in ear for conducting histopathological and immunohistochemical examinations. The following clinical variables was evaluated: hypertrophy of popliteal lymph nodes, skin changes, onychogryphosis, cachexia and eye injuries. Regarding clinical signs was observed that 78% had lymphadenopathy, 67% had skin lesions; 55% had hepatosplenomegaly, 44% had been slimming 33% presence of ocular lesions. While determining the hematologic values was statistically significant (p ≤ 0.05) in the values of MCV and platelet count. For the evaluation of the biochemical significance was (p = 0.05) for serum ALT, AST, urea and creatinine. Regarding cytokine assay no significant statistical result. The histopathological examination demonstrated decreased inflammation. And the examination of immunohistochemical not demosntrated presence of the parasite. Thus, it appears that studies of the differences in the cytokine profile in dogs presenting the most diverse forms of symptoms of CVL are inconclusive, since the results are contradictory.
A leishmaniose visceral (LV) é uma antropozoonose de distribuição mundial, que acomete o homem, canídeos e marsupiais. A doença é causada por diferentes espécies de protozoários do gênero Leishmania e é transmitida pela picada de insetos flebotomíneos. O cão vem sendo apontado como principal hospedeiro e reservatório da LV, sendo provavelmente o mais importante reservatório natural relacionado aos casos humanos. Além disso, tem um papel fundamental na expansão da doença em áreas endêmicas. O presente trabalho teve como objetivo avaliar o perfil de citocinas, hematológico e bioquímico de cães portadores de Leishmania infantum e tratados com extrato seco de Morinda citrifolia. Para este estudo foram utilizados nove cães, de ambos os sexos e raças variadas. A triagem dos animais deu-se através do teste de ELISA/S7® e pesquisa do parasito em esfregaços sanguíneos. Os animais utilizados na pesquisas eram todos sintomáticos. Para realização da pesquisa foram colhidos sangue com EDTA para realização do hemograma e sangue sem EDTA para realização das dosagens bioquímicas e de citocinas. Foi colhido fragmento da pele da orelha para realização de exames histopatológicos e imunohistoquímicos. Foram avaliadas as seguintes variáveis clínicas: hipertrofia de linfonodos poplíteos, alterações cutâneas, onicogrifose, caquexia e lesões oculares. Quanto aos sinais clínicos observou-se que 78% apresentavam linfoadenopatia, 67% apresentavam alterações cutâneas; 55% apresentavam hepatoesplenomegalia, 44 % apresentavam estado de emagrecimento 33% presença de lesões oculares. Ao se verificar os valores hematológicos houve significado estatístico (p≤0,05) nos valores do VGM e contagem de plaquetas. Para a avaliação das provas bioquímicas houve significado estatístico (p≤0,05) para a dosagem de ALT, AST, ureia e creatinina. Em relação a dosagem de citocinas não houve resultado estatístico significante. O exame histopatológico demostrou diminuição do processo inflamatório. E o exame de imunohistoquímica não demonstrou presença do parasito. Dessa maneira, verificou-se que os estudos das diferenças no perfil de citocinas em cães que apresentavam as mais diversas formas de sintomas da LVC são inconclusivos, visto que os resultados encontrados são contraditórios.

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Fonseca, Brigite Neto da. "Comparação entre as vacinas Letifend® e CaniLeish® relativamente aos seus efeitos secundários em cães domésticos : um estudo retrospetivo." Master's thesis, Universidade de Lisboa, Faculdade de Medicina Veterinária, 2020. http://hdl.handle.net/10400.5/20103.

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Abstract:

Dissertação de Mestrado Integrado em Medicina Veterinária
A leishmaniose canina é provocada pelo parasita Leishmania infantum, sendo que, a doença tem efeitos generalizados no organismo, uma vez que afeta células do sistema fagocitário mononuclear, como os macrófagos. Atualmente, um dos métodos de controlo e prevenção desta doença envolve o uso de vacinas nos cães. O objetivo principal deste estudo retrospetivo foi avaliar a incidência e o tipo de efeitos secundários desenvolvidos pelos cães após o uso de duas vacinas, a CaniLeish® e a Letifend® e posteriormente comparar as duas vacinas em termos da sua segurança. Foram colhidos dados de 157 cães (73 inoculados com CaniLeish® e 84 com Letifend®). Dos animais vacinados com CaniLeish®, 15 desenvolveram efeitos adversos, sendo que, a incidência destes efeitos não aparentou estar relacionado com a idade ou com o sexo do animal. Contudo, parece ter havido uma relação com o peso dos cães, uma vez que, 12 dos animais afetados tinham um peso inferior a 15 Kg. Consequentemente, as raças de cães que apresentavam estes efeitos eram na maioria de pequeno porte, como o Yorkshire Terrier. Pelo contrário os animais vacinados com Letifend® não desenvolveram qualquer efeito adverso, pelo que, com base na amostra estudada, concluiu-se que esta é uma vacina mais segura comparativamente com a CaniLeish® no que respeita ao aparecimento de reações secundárias.
ABSTRACT - COMPARISON BETWEEN THE VACCINES CANILEISH® AND LETIFEND® IN RELATION TO THEIR SECONDARY EFFECTS IN DOMESTIC DOGS: A RETROSPECTIVE STUDY - Canine leishmaniasis is caused by the parasite Leishmania infantum, and the disease has widespread effects on the body, as it affects cells of the mononuclear phagocytic system, such as macrophages. Currently, one of the methods of control and prevention of this disease involves the use of vaccines in dogs. The main objective of this retrospective study was to assess the incidence and type of secondary effects developed in dogs after the use of two vaccines, CaniLeish® and Letifend®, and then compare the two vaccines in terms of their safety. Data was collected from 157 dogs (73 inoculated with CaniLeish® and 84 with Letifend®). Of the animals vaccinated with CaniLeish®, 15 developed adverse effects but the incidence of these effects did not appear to be related to the age or sex of the animal. However, there seems to have been a relationship with the weight of the dogs since 12 of the affected animals weighed less than 15 kg. Consequently, the breeds of dogs that had these effects were mostly small, such as the Yorkshire Terrier. On the contrary, the animals vaccinated with Letifend® did not develop any adverse effects, based on the studied sample, so it was concluded that this is a safer vaccine compared to CaniLeish® in what concerns secondary reactions.
N/A

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Coutinho, Jos? Fl?vio Vidal. "Estudo cl?nico-laboratorial e histopatol?gico de c?es naturalmente infectados por Leishmania chagasi com diferentes graus de manifesta??o f?sica." Universidade Federal do Rio Grande do Norte, 2005. http://repositorio.ufrn.br:8080/jspui/handle/123456789/12615.

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Abstract:

Made available in DSpace on 2014-12-17T14:03:42Z (GMT). No. of bitstreams: 1 JoseFlavioVC.pdf: 1066045 bytes, checksum: 95695454c994be62f483dac7ee237cd8 (MD5) Previous issue date: 2005-02-28
Coordena??o de Aperfei?oamento de Pessoal de N?vel Superior
Canine Visceral Leishmania (CVL) is an important zoonotic disease that has a world wide distribution and has a large impact on public health on the American Continent, especially in Brazil, where the nature of endemic diseases in humans affects a large part of the nation. The influence of the prevalence of CVL in the increased rate of human cases in endemic areas and in the unleashing of epidemic outbreaks shows the need for a more profound understanding, that would generate significant advances in the current measures used to control the reservoirs of sickness that are practiced by the Programa Nacional de Vigil?ncia e Controle da Leishmaniose Visceral. The present work describes and compares the clinical-laboratorial and histopathological findings of twenty-three dogs that were naturally infected by Leishmania chagasi, from endemic areas in metropolitan Natal, Rio Grande do Norte, Brazil. These animals, that were selected and given physical and serological exams (IFI and ELISA rK-39), were classified according to the degree of clinical severity and had blood samples drawn (whole blood and serum) for a complete hemogram and a coagulogram to be done as well as biochemical tests for kidney and liver function. The confirmation of infection by L. chagasi was done after the euthanasia of the animals, through the direct demonstration of the parasite in the impression of the spleen and liver crowned with GIEMSA and through a cultivation by means of NNN/Schneider. According to the clinical evaluation, the animals were classified as asymptomatic (7), oligosymptomatic (7) and polysymptomatic (9). Among the animals that were chosen to be autopsied, there were 2 asymptomatic, 3 oligosymptomatic and 3 polysymptomatic, for the purpose of studying their histopathology, having collected fragments of the spleen, liver, kidneys and skin and were fixed in 10% tamponed formol. The comparison between the average parameters of the clinical-laboratory tested animals in the groups was done through the Student t test (a<0.05). The main clinical signals observed were lymphadenomegaly, alopecy, dermatitis, exfoliation, cutaneous ulcers, onicogriphosis and emaciation. The main clinical-laboratorial alterations established, mainly in the polysymptomatic group, were anemia, hyperproteinemia, hyperglobulinemia, alterations in the albumin/globulin ratio and increased ALT activity. Renal alterations were not verified (urea and creatinine levels were normal). Thrombocytopenia was observed in three clinical groups. However, the other indicators of coagulation function (TAP and TTPA) did not have abnormal variations. There were inflammatory infiltrations and leishmania amastigotes in the skin of polysymptomatic dogs, however, they were not found in the skin of asymptomatic animals. Hypertrophy and hyperplasia of the phagocyte mononuclear system, leishmania amastigote parasites were found in the macrophages, extramedullary hematopoiesis and degenerative alterations were detected in the spleen and liver of 8 of the animals submitted to histopathological exams. In accord with these results, it was demonstrated that the expected alterations in the hematological and biochemical parameters in function of their viscerotropic nature of CVL are mainly observed in the more advanced stages of the disease. The absence of inflammatory infiltration and parasite load in the skin suggest that infected animals without symptoms may have an importance irrelevant to the infectiousness of the vector
A leishmaniose visceral canina (LVC) ? uma importante zoonose de distribui??o mundial com grande impacto em sa?de p?blica no Continente Americano, especialmente no Brasil, onde a natureza end?mica da doen?a humana afeta boa parte do territ?rio nacional. A influ?ncia da preval?ncia da LVC na amplia??o da taxa de casos humanos em ?reas end?micas e no desencadeamento de surtos epid?micos ainda carece de um entendimento mais profundo, o que geraria avan?os significativos nas atuais medidas destinadas ao controle de reservat?rios da doen?a preconizadas pelo Programa Nacional de Vigil?ncia e Controle da Leishmaniose Visceral. O presente trabalho descreveu e comparou os achados cl?nico-laboratoriais e histopatol?gicos de vinte e tr?s c?es infectados naturalmente pela Leishmania chagasi, provenientes de localidades end?micas da ?rea metropolitana de Natal-RN. Estes animais, escolhidos a partir de exame f?sico e sorologia (IFI e ELISA rK-39), foram classificados de acordo com o grau de comprometimento cl?nico e submetidos a coleta de sangue (sangue total e soro) para realiza??o de hemograma completo, provas bioqu?micas de fun??o renal e hep?tica, e coagulograma. A confirma??o da infec??o por L. chagasi foi realizada ap?s a eutan?sia dos animais, pela demonstra??o direta do parasita em impress?o de ba?o e f?gado corado com GIEMSA e atrav?s de cultivo em meio NNN/Schneider. De acordo com a avalia??o cl?nica, os animais foram classificados em assintom?ticos (7), oligossintom?ticos (7) e polissintom?ticos (9). Dentre os animais necropsiados, foram selecionados 2 c?es assintom?ticos, 3 oligossintom?ticos e 3 polissintom?ticos para o estudo histopatol?gico, sendo colhidos fragmentos de ba?o, f?gado rins e pele e fixados em formol a 10% tamponado. A compara??o entre as m?dias dos par?metros cl?nico-laboratoriais testados nos grupos foi realizada atrav?s do teste t de Student (α<0,05). Os principais sinais cl?nicos observados foram linfadenomegalia, alopecia, dermatite esfoliativa, ?lceras cut?neas, onicogrifose e emacia??o. As principais altera??es cl?nico-laboratoriais estabelecidas, principalmente no grupo polissintom?tico, foram anemia, hiperproteinemia, hipoalbuminemia, hiperglobulinemia, altera??es no ?ndice albumina/globulina e aumento da atividade da ALT. Altera??es renais n?o foram verificadas (ur?ia e creatinina normais). Trombocitopenia foi observada no tr?s grupos cl?nicos, contudo, os outros indicadores da fun??o de coagula??o (TAP e TTPA) n?o apresentaram varia??es anormais. Foi observado Infiltrado inflamat?rio e amastigotas de leishmania na pele de c?es polissintom?ticos, por?m n?o na pele de animais assintom?ticos. Hipertrofia e hiperplasia do sistema fagocit?rio mononuclear, macr?fagos parasitados por amastigotas de leishmania, hematopoiese extramedular e altera??es degenerativas foram detectadas no ba?o e f?gado dos 8 animais submetidos a exame histopatol?gicos. De acordo com esses resultados, foi demonstrada que as altera??es esperadas nos par?metros hematol?gicos e bioqu?micos em fun??o da natureza viscerotr?pica da LVC s?o observadas principalmente em est?gios mais avan?ados da doen?a. A aus?ncia de infiltrado inflamat?rio e carga parasit?ria na pele sugerem que animais infectados sem sintomatologia talvez tenham import?ncia irrelevante na infectividade para o vetor

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Sales, Sofia Sousa. "MODULAÇÃO DA RESPOSTA IMUNOLÓGICA DE CÃES UTILIZANDO BCG EM ASSOCIAÇÃO COM FRAÇÃO FLAGELAR DE LEISHMANIA AMAZONENSIS." Universidade Federal do Maranhão, 2012. http://tedebc.ufma.br:8080/jspui/handle/tede/62.

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Made available in DSpace on 2016-08-16T18:18:39Z (GMT). No. of bitstreams: 1 TESE SOFIA SOUSA SALES.pdf: 1314406 bytes, checksum: cf0a23c2cfdc8d768fd9d2a3edfd3773 (MD5) Previous issue date: 2012-08-11
FUNDAÇÃO DE AMPARO À PESQUISA E AO DESENVOLVIMENTO CIENTIFICO E TECNOLÓGICO DO MARANHÃO
The aim of this study was to evaluate the protective effect of the flagellar fraction of Leishmania (L) amazonensis and BCG in dogs from endemic area for canine visceral leishmaniasis (CVL). Initially a study was conducted on an epidemiological survey in order to determine the frequency of antibodies against Leishmania in dogs of both sexes, with aged above six months and their correlation with clinical variables such as : hypertrophy of popliteal lymph nodes, skin lesions , onychogryphosis, cachexia and ocular lesions. A total of 341 dogs were used in this study. The serum of these animals was submitted to ELISA/S7 ® test. The serological results shwoed that 173 (50.73%) were positive and 135 (39.59%) were negative for anti-Leishmania antibodies. Among Seropositive animals was observed that 79 (45.66%) presented lymph node hypertrophy, 25 (14.45%) skin lesions, 23 (13.29%) onychogryphosis, 22 (12.72%) cachexia and 11 (6.36%) with the presence of ocular lesions. To evaluate the protective effect of flagellar fraction and BCG were evaluated 90 seronegative animals divided in three groups of 30animals: Group I - animals immunized with flagellar fraction doses of BCG and Group II - animals immunized with BCG and Group III - control animals inoculated with PBS. After immunization the animals remained in the endemic area and they were followed up during 14 months. For immunohistochemical analysis just 06 dogs of each group were selected randomly. However, all dogs were negative for the presence of anti-Leishmania, the immunohistochemical analysis showed amastigotes of Leishmania in the skin of 2 animals, one belonging to the Group II (5 parasites / field) and another belonging to the Group III (18 parasites / field ). The animals of group I (immunized with BCG and flagellar fraction) did not present parasites in the skin. In conclusion this study reinforce the same results obtained in murine model that immunization with flagellar fraction of L. amazonensis in combination with BCG is able to protect dogs analyzed, and the immunohistochemistry was more efficient in the diagnosis of CVL in this study.
O propósito do presente estudo foi avaliar a capacidade protetora da fração flagelar de Leishmania (L) amazonensis sob imunomodulação do BCG em cães provenientes de área endêmica para leishmaniose visceral canina (LVC) por meio da avaliação sorológica, histológica e imunohistoquímica. A priori foi realizado um estudo do tipo inquérito, sobre a ocorrência de anticorpos anti-Leishmania em cães macho e fêmea, com idade igual ou superior a seis meses e sua correlação com as variáveis clínicas: hipertrofia de linfonodos poplíteos, alterações cutâneas, onicogrifose, caquexia e lesões oculares. Os cães foram analisados sorologicamente, através do teste de ELISA/S7®, utilizando-se amostras de sangue periférico num total de 341 amostras analisadas. Desse total, 173 (50,73%) foram soropositivos e 135 (39,59%) foram soronegativos para anticorpos anti-Leishmania. Dos animais com sorologia positiva observou-se 79 (45,66%) com hipertrofia de linfonodos, 25 (14,45%) com alterações cutâneas, 23 (13,29%) com onicogrifose, 22 (12,72%) com caquexia e 11 (6,36%) com presença de lesões oculares. Para avaliar a capacidade protetora da fração flagelar imunomodulada pelo BCG, foram avaliados 90 animais com sorologia negativa para LVC, divididos em três grupos de 30 animais: Grupo I animais imunizados com doses de fração flagelar e BCG; Grupo II animais imunizados apenas com BCG e o Grupo III animais controles inoculados com PBS. Após a imunização os animais foram deixados em área endêmica e acompanhados por 14 meses. Na etapa seguinte, 06 cães de cada grupo, escolhidos aleatoriamente, tiveram sangue e fragmentos de pele da ponta da orelha coletados para posterior realização de sorologia anti-Leishmania, imunohistoquímica, imprinting e histologia. A avaliação dos resultados mostrou que todas as amostras coletadas foram negativas para a presença de anticorpos anti-Leishmania. Já a análise imunohistoquímica evidenciou formas amastigotas de Leishmania sp na pele de 2 animais, um pertencente ao Grupo II (5 parasitos/campo) e outro pertencente ao Grupo III (18 parasitos/campo). Os animais do grupo I (imunizados com fração flagelar e BCG) não apresentaram positividade em nenhuma das análises. A partir dos resultados obtidos pode-se concluir que a imunização com fração flagelar de L. amazonensis em associação com BCG foi capaz de proteger os cães analisados e que a técnica de imunohistoquímica mostrou-se mais eficiente no diagnóstico da LVC no presente estudo.

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Beck, Cristiane [UNESP]. "Efeito da luz visível associada à ftalocianina de cloro-alumínio na inativação da Leishmania infantum chagasi em sangue de cão." Universidade Estadual Paulista (UNESP), 2016. http://hdl.handle.net/11449/140153.

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Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)
A Leishmaniose Visceral é uma doença infecciosa, de caráter zoonótico, emergente e de notificação obrigatória. No Brasil tem como agente o protozoário Leishmania infantum chagasi, e o principal reservatório é o cão (Canis familiaris). A transfusão sanguínea é muito utilizada na rotina da clínica, entretanto está associada a transmissão de doenças infecciosas. O objetivo deste estudo foi avaliar os efeitos do tratamento com a luz visível associada a ftalocianina de cloro-alumínio na inativação da Leishmania infantum chagasi em sangue canino, quando inoculados em hamsters (Mesocricetus auratus). Foram preparados 3 grupos experimentais compostos por 6 hamsters cada. O grupo controle recebeu sangue negativo para Leishmania, o grupo doença foi inoculado com sangue parasitado com Leishmania infantum chagasi e o grupo tratamento recebeu sangue parasitado tratado com luz visível associada a ftalocianina de cloro-alumínio. Os animais foram monitorados por 180 dias e então submetidos a avaliação clínica. Em seguida os animais foram anestesiados para a coleta de sangue por meio de punção intracardíaca e procedendo-se assim a eutanásia. O sangue foi colocado em microtubos e o soro separado por centrifugação e acondicionado a -30ºC, até a realização do teste de aglutinação direta. Após procedeu-se a coleta do fígado e baço para a realização da histopatologia. Outra parte destes órgãos e a medula óssea foram acondicionados em tubos livres de DNAse e RNAse, congelados a -30ºC até a realização da PCR e qPCR. Impressões do fígado e baço foram feitas em lâminas para a microscopia para verificar a presença das formas amastigotas do parasita. Após 180 dias os animais não apresentaram sinais clínicos e os exames sorológicos e parasitológicos foram negativos. Quanto ao exame macroscópico, alguns animais apresentaram hepato e esplenomegalia, já na análise histopatológica nenhum tecido analisado demonstrou formas amastigotas do parasita. Na avaliação da PCR o baço e a medula óssea de todos os hamsters, dos grupos doença e tratado, apresentaram amplificação da Leishmania infantum chagasi. Na qPCR ocorreu uma significativa diminuição (P<0,01) na parasitemia quando comparado ao grupo tratado com a luz visível associada a ftalocianina de cloro-alumínio, com o grupo que recebeu sangue parasitado sem tratamento. Com esses resultados é possível concluir que a luz visível associada a ftalocianina de cloro-alumínio reduz a parasitemia da Leishmania infantum chagasi em sangue canino.
Visceral Leishmaniasis is an emerging zoonotic infectious disease that requires mandatory reporting. In Brazil, it is caused by the protozoan Leishmania infantum chagasi, with dogs as main reservoir (Canis familiaris). Blood transfusion is frequently used in clinical routine, however it is associated with the transmission of infectious diseases. The aim of this study was to evaluate the effects of treatment with visible light associated with chloro-aluminium phthalocyanine on the inactivation of Leishmania infantum chagasi in canine blood, when inoculated in hamsters (Mesocricetus auratus). Three experimental groups consisted of six hamsters each. The control group received blood negative for L. infantum chagasi, the diseased group was inoculated with blood infected with L. infantum chagasi, and the treatment group received infected blood previously subjected to therapy with visible light associated with chloroaluminium phthalocyanine. The animals were observed for 180 days and then subjected to clinical evaluation. Then the animals were anesthetized for blood collection through intracardiac puncture and were euthanized. The blood was placed into microtubes and the serum was separated by centrifugation and stored at -30 ° C until the direct agglutination test was performed. After, liver and spleen collection was performed to histopathological examination. Another part of these organs and bone marrow were placed in tubes DNase and RNase free, and frozen at -30°C until the PCR and qPCR were performed. Imprints of liver and spleen were performed on slides for microscopy to verify the presence of amastigotes of the parasites. After 180 days the animals showed no clinical signs and serologic and parasitological tests were negative. During pathological examination, some animals showed hepatomegaly and splenomegaly; under microscopic analysis, any tissue showed amastigote forms of the parasite. In the PCR evaluation of spleen and bone marrow, all hamsters from diseased and treated groups showed amplification of Leishmania infantum chagasi. Results from q-PCR revealed a significant decrease (P <0.01) in the number of parasites in the group inoculated with blood subjected to chloro-aluminium photodynamic therapy, compared to the group inoculated with parasitized blood that had not been subjected to photodynamic therapy. With these results it is possible to conclude that visible light associated with chlorine-aluminum phthalocyanine reduces parasitaemia of Leishmania infantum chagasi in canine blood.
FAPESP: 2014/03353-4

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Lima, Iraci Duarte de. "Aspectos ambientais e sociais envolvidos na transmiss?o da L. chagasi no munic?pio de Parnamirim/RN." Universidade Federal do Rio Grande do Norte, 2009. http://repositorio.ufrn.br:8080/jspui/handle/123456789/13274.

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Abstract:

Made available in DSpace on 2014-12-17T14:13:44Z (GMT). No. of bitstreams: 1 IraciDL_Dissert.pdf: 1259983 bytes, checksum: 9fb9c026a74636e1c8e0d88ea967084d (MD5) Previous issue date: 2009-08-07
Visceral leishmaniasis h?s adapted in the past 20 years to periurban and urban areas, and in Natal, Rio Grande do Norte, it became endemic. Thid study aimed to evaluate the environmental and social aspectsof Leishmania chagasi infection and its epidemiologic transmission chain in an urban, periurban and rural area of Parnamirim-RN. A study with three sections was conducted: Section 1: Sectional study of the human and canine infection by L. chagasi and its environmental and social determinants. Section 2: Observational longitudinal cohort to evaluate the dynamics of the canine infection. Section 3: Longitudinal study to evaluate the behavior of Lu. Longipalpis vector and the seasonal factors related to its dynamics. To include in the study the hauses were randomly selected and georreferenciated. Montenegro skin test was done in the human population and blood samples were collected for anti-Leishmania antibody detection. The canine population was examinated for L. chagasi infection by RIFI, ELISA and ELISA for rK39. An entomologic surveillance was monthly done with CDC light trapsin 10 houses of each locality. Quantitative and qualitative analyses was done using STATISC 6.0. Probality and prediction maps were done using ArcGis 9.0 model. In the human population L. chagasi infection was associated with the area of the hause, age, sex, population densyti, vegetation, kind of the floor of thr hause, water and resides destiny. In the canine population L. chagasi infection was associated with the breed, size, time of living in the hause, presence of dogs in the neighborhood, presence of horses and donkeys in the neighborhood, vegetation, kind of the floor and walls of the hause. The human infection was associated with canine infction only when analyzed taking into account the locality. In the prospective study, serum conversion and antibody lost observed in 30,8% and 22% of the animals examined, respectively. The human infection rate by L. chagasi was 24,6%, by the presence of anti-Leishmania antibody and 38,6% by the Montenegro skin test. The canine infection rate 32,5% by the presence of anti-Leishmania antibody. The vector Lu longipalpis showed an atypical behavior. These results indicate that environmental and social factors are important variables associated with L. chagasi infection in humans and canines, with punctual association of thr last two. Control measures of the infection on the studied points are necessary, in the aim to reduce the endemic focus of the disease in the study area. This research was carried out in a multidisciplinary involving the categories of: doctor, biologist, veterinarian, statistical, pharmaceutical and biochemical
A leishmaniose visceral ? uma doen?a que nos ?ltimos 20 anos adaptou-se ?s ?reas periurbanas e urbanas, tornando-se end?mica na regi?o metropolitana de Natal, Rio Grande do Norte. Este estudo teve como objetivo avaliar os aspectos ambientais, sociais e a cadeia epidemiol?gica de transmiss?o por Leishmania chagasi em ?rea urbana, periurbana e rural do Munic?pio de Parnamirim-RN. Realizou-se um estudo com tr?s subestudos: Subestudo 1: Estudo Transversal da infec??o humana e seus determinantes socioambientais no ano de 2005. Subestudo 2: Estudo observacional longitudinal com coorte fixa para avaliar a din?mica da infec??o canina por L. chagasi no per?odo de 2005/2006. Subestudo 3: Estudo longitudinal para avaliar a fauna de flebotom?neos e a densidade de L. longipalpis associando aos fatores clim?ticos. Para inclus?o no estudo, os im?veis foram selecionados aleatoriamente e georreferenciados. Na popula??o humana desses im?veis, foi realizado teste de Montenegro e coleta de sangue para detec??o de anticorpos antileishmania. A popula??o canina foi examinada quanto ? infec??o por L. chagasi pelo m?todo de RIFI, ELISA EB e ELISA para rK39. Foi realizado monitoramento entomol?gico mensal com armadilhas CDC em 10 im?veis de cada localidade. Foi realizado an?lise quantitativa e qualitativa atrav?s do STATISC 6.0 e constru??o de mapas de predi??o e probabilidade atrav?s do modelo do ArcGis 9.0. Foi encontrada associa??o da infec??o humana por L. chagasi com a ?rea de resid?ncia, idade, sexo, densidade populacional, vegeta??o, tipo de piso do im?vel e destino de ?gua e dejetos. Na popula??o canina, foi observada associa??o da infec??o por L. chagasi quanto ? ra?a, ao porte, sintomas, tempo de moradia no im?vel, presen?a de c?es na vizinhan?a, presen?a de cavalos e jumentos na vizinhan?a, tipo de vegeta??o da ?rea. A infec??o humana estava relacionada com a infec??o canina apenas quando analisada considerando-se a localidade. No estudo prospectivo, foi observada soroconvers?o e perda de anticorpos em 30,8% e 22% dos animais examinados, respectivamente. A taxa de infec??o humana por Leishmania chagasi foi de 24,6%, quando avaliada pela presen?a de anticorpos antileishmania e de 38,6% quando avaliada pelo teste de Montenegro. A taxa de infec??o canina foi 32,5% quando avaliada pela presen?a de anticorpos antileishmania. O vetor Lu. longipalpis apresentou um comportamento at?pico. Os resultados indicam que fatores ambientais e sociais s?o importantes vari?veis associadas ? infec??o por L. chagasi em humanos e caninos, sendo as ?ltimas pontualmente associadas. Desta forma, s?o necess?rias medidas de controle da infec??o que enfoquem os pontos estudados, visando a n?o manuten??o da endemicidade na ?rea estudada. Esta pesquisa foi realizada de forma multidisciplinar envolvendo as categorias de: m?dico, bi?logo, veterin?rio, estat?stico, nutricionista e farmac?utico bioqu?mico

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Santos, Liliane Almeida Carneiro. "Estudo prospectivo sobre a dinâmica da evolução clínica e imunológica da infecção canina por Leishmania (Leishmania) infantum chagasi em área endêmica de leishmaniose visceral no estado do Pará." Universidade de São Paulo, 2016. http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/10/10133/tde-27102016-142051/.

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Abstract:

Leishmaniose visceral canina (LVC) é um dos problemas de saúde pública mais importantes da América Latina, pois geralmente precede a doença humana, a leishmaniose visceral americana (LVA), causada pela Leishmania (L.) infantum chagasi. No presente estudo prospectivo analisou-se durante período de dois anos a prevalência, incidência e dinâmica da evolução clínico-imunológica da infecção canina pela L. (L.) i. chagasi em uma coorte de 316 cães mestiços que vivem em área endêmica de LVA no município de Barcarena, Pará, Amazônia Brasil, pelo uso combinado do teste de imunofluorescência indireta (RIFI-IgG) e de hipersensibilidade tardia (RIM), bem como a pesquisa do parasita pela aspiração do linfonodo poplíteo para o diagnóstico da infecção. A reatividade para RIFI e RIM reconheceu três diferentes perfis de resposta imunológica: (I) RIFI (+) / RIM (-) (81 cães), (II) RIFI (-) / RIM (+) (17 cães), e (III) RIFI (+) / RIM (+) (13 cães), proporcionando uma prevalência global da infecção de 35,1% (111/316). Desta forma, a prevalência específica do perfil I (25,6%) foi superior as dos perfis II e III, 5,4% e 4,1%, respectivamente. Além disso, a frequência destes perfis entre 111 cães infectados mostrou que a taxa de 73% do perfil I também foi maior do que os dos perfis II (15,3%) e III (11,7%). A prevalência da infecção de acordo com as faixas etárias revelou que a taxa de 27,5% do grupo ≥1ano <7 anos foi maior do que as de <1 ano (5,3%) e ≥7anos (2,2%), respectivamente. Por outro lado, a incidência global da infecção foi de 5,7% cães / mês (5,4% perfil I, 0,3% perfil II e 0,0% perfil III). No entanto, observou-se uma progressiva diminuição nas taxas de incidência nos seguintes pontos de tempo: seis (3,6% cães / mês), doze (1,7% cães / mês) e vinte e quatro (0,4% cães / mês) meses do estudo. Além disso, a incidência da infecção de acordo com os grupos etários demonstraram que a taxa de 6,6% cães / mês no grupo <1 ano foi maior em comparação com as de 5,3% e 3,3% cães / mês nos grupos ≥1ano e <7 anos, e <1 ano, respectivamente. O diagnóstico parasitológico da infecção foi confirmado em 19% (21/111) no estudo da prevalência, sendo a maioria dos cães (85,7%) do perfil I, onde 61,1% eram sintomáticos e 38,9% assintomáticos. Entre o restante (14,3%), o diagnóstico foi associado ao perfil III, sendo 66,6% assintomáticos e 33,3% sintomáticos. No levantamento da incidência, o diagnóstico foi confirmado em 11% dos cães, todos pertencentes ao perfil I, sendo 60% assintomáticos e 40% sintomáticos. Com relação ao estado clínico de todos os 179 cães diagnosticados infectados durante o período de dois anos, observou-se que entre 145 (81%) cães do perfil I, 82% eram assintomáticos e 18% sintomáticos; entre os 21 (11,7%) cães do perfil II, todos (100%) eram assintomáticos; e entre 13 (7,3%) cães do perfil III, 84,6% eram assintomáticos e 15,4% sintomáticos. Além disso, observou-se que a conversão do estado clínico assintomático ao sintomática foi registado principalmente em cães do perfil I (40,2%) do que aqueles dos perfis II (5,8%) e III (9%). Por outro lado, apenas 3,2% dos cães do perfil I [RIFI (+) / RIM (-)] converteu resposta RIM (+), enquanto 80% de cães do perfil II [RIFI (-) / RIM (+)] converteu resposta RIFI (+). Por fim, demonstrou-se que 100% dos óbitos por LVC ocorreu entre os cães do perfil I, sendo 85,7% na prevalência e 14,3% na incidência. Considerando todos esses resultados, parece razoável que a interação entre parasita e resposta imune canina é suportada principalmente pelo perfil imunológico claramente vulnerável, o perfil I [RIFI (+) / RIM (-)], o qual não oferece qualquer resistência ao parasita, tornando o cão altamente susceptível à infecção
Canine visceral leishmaniasis (CVL) is one of the most important public health problems in Latin America because it usually precedes human disease, American visceral leishmaniais (AVL), being caused by Leishmania (L.) infantum chagasi. In the present prospective study it was analyzed during two years period the prevalence, incidence and dynamics of the clinical-immunological evolution of canine L. (L.) i. chagasi-infection in a cohort of 316 mongrel dogs living in endemic area of AVL in Barcarena municipality, Pará State, Amazonian Brazil, by the combined use of the indirect fluorescence antibody test (IFAT-IgG) and delayed-type hypersensitivity (DTH), as well as the parasite research by the popliteal lymph node aspiration for the diagnosis of infection. The IFAT and DTH reactivity recognized three different immune response profiles: (I) IFAT(+)/DTH(-) (81 dogs), (II) IFAT(-)/DTH(+) (17 dogs), and (III) IFAT(+)/DTH(+) (13 dogs), providing an overall infection prevalence of 35,1% (111/316). In this way, the specific prevalence of profile I 25,6% was higher than those of profiles II 5,4% and III 4,1%. Moreover, the frequency of these profiles among 111 infected dogs showed that the rate 73% of profile I was also higher than those of profiles II 15,3% and III 11,7%. The infection prevalence according to the age groups revealed that the rate 27,5% of ≥1year <7years was higher than those of <1year 5,3% and ≥7years 2,2%, respectively. On the other hand, the overall incidence of infection was 5,7% dogs/month (5,4% profile I, 0,3% profile II and 0,0% profile III). However, it was noted a progressive decreasing in the incidence rates at the following time-points: six (3,6% dogs/month), twelve (1,7% dogs/month) and twenty four (0,4% dogs/month) months of the study. In addition, the infection incidence according to the age groups demonstrated that the rate 6,6% dogs/month of <1year was higher compared to those of 5,3% and 3,3% dogs/month of ≥1year and <7years, and <1year, respectively. The parasitological diagnosis of infection was confirmed in 19% (21/111) at the prevalence survey, being most dogs (85,7%) of the profile I, 61,1% symptomatic and 38,9% asymptomatic ones. Among the remainder 14,3%, the diagnosis was associated to the profile III, 66,6% in asymptomatic and 33,3% in symptomatic dogs. At the incidence survey, the diagnosis was confirmed in 11% of dogs, all from the profile I, 60% asymptomatic and 40% symptomatic ones. With regards to clinical status of all 179 infected dogs diagnosed during two years period, it was observed that among 145 (81%) dogs from the profile I, 82% were asymptomatic and 18% symptomatic ones; among 21 (11,7%) from the profile II, all (100%) were asymptomatic; and among 13 (7,3%) from the profile III, 84,6% were asymptomatic and 15,4 % symptomatic ones. Besides this, it was noted that the clinical conversion from asymptomatic to symptomatic status was principally recorded in dogs from the profile I (40,2%) than those from the profiles II (5,8%) and III (9%). By the other side, only 3,2% dogs from the profile I [IFAT(+)/DTH(-)] converted DTH(+) response, while 80% dogs from the profile II [IFAT(-)/DTH(+)] converted IFAT(+) response. At last, it was demonstrated that 100% of death by CVL occurred amongst dogs from the profile I, being 85,7% from the prevalence and 14,3% from the incidence. Taking together all these results, it seems reasonable that interaction between parasite and canine immune response is principally supported by immunologic profile clearly vulnerable, the profile I [IFAT(+)/DTH(-)], which does not offer any resistance to parasite, became the dog highly susceptible to infection

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Almeida, Breno Fernando Martins de [UNESP]. "Estresse oxidativo na leishmaniose visceral canina." Universidade Estadual Paulista (UNESP), 2013. http://hdl.handle.net/11449/121938.

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Made available in DSpace on 2015-04-09T12:28:12Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2013-02-08Bitstream added on 2015-04-09T12:48:01Z : No. of bitstreams: 1 000814570.pdf: 325846 bytes, checksum: 38c71d9ed63b85ebabb85fe53a185b6e (MD5)
Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)
Oxidative stress occurs due to an imbalance between oxidants and antioxidant defenses. Considering that dogs with leishmaniasis may develop uremia, which affects the oxidative metabolism and apoptosis of neutrophils, we proposed to investigate the hypothesis that oxidative stress, alteration of oxidative metabolism and apoptosis of neutrophils in dogs varies according to stage of leishmaniasis and that uremia, commonly occurs in late stages of disease, would contribute to such variations. To this, we evaluated plasma markers of oxidative stress (total antioxidant capacity, lipid peroxidation, glutathione, uric acid, bilirubin and albumin), superoxide production (method of nitroblue tetrazolium reduction and flow cytometry with the probe hydroethidine), and viability and apoptosis rate (morphological method and flow cytometry using annexin V-PE system) on neutrophils from dogs with leishmaniasis classified according to the LeishVet Consensus in moderate stage of the disease, very severe stage when uremia is installed and dogs with uremia negative for leishmaniasis, comparing them to healthy dogs. Leishmaniasis regardless of stage and uremia cause oxidative stress with reduced total antioxidant capacity, which may be related to greater induced production of superoxide and stimulated apoptosis observed in these groups. While spontaneously, neutrophils of dogs in very severe stage and with uremia had lower viability, increased apoptosis and higher lipid peroxidation, suggesting that uremia is the cause of such changes. Can be concluded that the intensity of oxidative stress does not vary with the stage of leishmaniasis, however uremic condition contributes to reduce the viability of neutrophils in late-stage dogs. Changes of neutrophil oxidative metabolism occur concomitant with oxidative stress and increased neutrophil apoptosis in both leishmaniasis and in uremia alone
FAPESP: 2011/14083-0

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Almeida, Breno Fernando Martins de. "Estresse oxidativo na leishmaniose visceral canina /." Araçatuba, 2013. http://hdl.handle.net/11449/121938.

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Abstract:

Resumo:O estresse oxidativo ocorre quando há desequilíbrio entre as defesas antioxidantes e os agentes oxidantes no organismo. Considerando que cães com leishmaniose visceral podem desenvolver uremia, o que afeta o metabolismo oxidativo e a apoptose dos neutrófilos, propusemos investigar a hipótese de que o estresse oxidativo, a alteração do metabolismo oxidativo e da apoptose dos neutrófilos de cães variam com o estágio da doença e que a instalação do quadro de uremia contribui para esta variação. Para tal, foram avaliados marcadores plasmáticos de estresse oxidativo (capacidade antioxidante total, peroxidação lipídica, glutationa, ácido úrico, bilirrubina e albumina), a produção de superóxido (método de redução do tetrazólio nitroazul e citometria de fluxo com a sonda hidroetidina), viabilidade e taxa de apoptose (método morfológico e citometria de fluxo utilizando o sistema anexina V-PE) de neutrófilos de cães com leishmaniose classificados de acordo com o LeishVet Consensus em estágio moderado da doença, estágio muito severo quando a uremia está instalada e de cães com uremia sem leishmaniose, comparando-os a cães saudáveis. A leishmaniose, independentemente do estágio, e a uremia causam estresse oxidativo levando à redução da capacidade antioxidante total, que pode estar relacionado à maior produção de superóxido e maior apoptose induzida observada nesses grupos. Espontaneamente, neutrófilos de cães com leishmaniose muito severa e com uremia possuem menor viabilidade, maior apoptose e maior peroxidação lipídica, sugerindo que a uremia seja a causa de tais alterações. Conclui-se que ocorre estresse oxidativo independente do estágio da leishmaniose, entretanto a condição urêmica contribui para diminuição da viabilidade dos neutrófilos em cães no estágio final da doença. As alterações do metabolismo oxidativo dos neutrófilos ocorrem concomitante ao
Abstract:Oxidative stress occurs due to an imbalance between oxidants and antioxidant defenses. Considering that dogs with leishmaniasis may develop uremia, which affects the oxidative metabolism and apoptosis of neutrophils, we proposed to investigate the hypothesis that oxidative stress, alteration of oxidative metabolism and apoptosis of neutrophils in dogs varies according to stage of leishmaniasis and that uremia, commonly occurs in late stages of disease, would contribute to such variations. To this, we evaluated plasma markers of oxidative stress (total antioxidant capacity, lipid peroxidation, glutathione, uric acid, bilirubin and albumin), superoxide production (method of nitroblue tetrazolium reduction and flow cytometry with the probe hydroethidine), and viability and apoptosis rate (morphological method and flow cytometry using annexin V-PE system) on neutrophils from dogs with leishmaniasis classified according to the LeishVet Consensus in moderate stage of the disease, very severe stage when uremia is installed and dogs with uremia negative for leishmaniasis, comparing them to healthy dogs. Leishmaniasis regardless of stage and uremia cause oxidative stress with reduced total antioxidant capacity, which may be related to greater induced production of superoxide and stimulated apoptosis observed in these groups. While spontaneously, neutrophils of dogs in very severe stage and with uremia had lower viability, increased apoptosis and higher lipid peroxidation, suggesting that uremia is the cause of such changes. Can be concluded that the intensity of oxidative stress does not vary with the stage of leishmaniasis, however uremic condition contributes to reduce the viability of neutrophils in late-stage dogs. Changes of neutrophil oxidative metabolism occur concomitant with oxidative stress and increased neutrophil apoptosis in both leishmaniasis and in uremia alone
Orientador: Paulo César Ciarlini
Banca: Mirela Tinucci Costa
Banca: Mary Marcondes
Mestre

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MARTIN, ELENA. "SYMBIOSIS BETWEEN ARTHROPODS AND FUNGI: THE CASE OF PHLEBOTOMUS PERNICIOSUS, THE VECTOR OF VISCERAL AND CANINE LEISHMANIASIS." Doctoral thesis, Università degli Studi di Milano, 2018. http://hdl.handle.net/2434/577035.

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Abstract:

Introduction Vector borne diseases (VBDs) are one of the greatest public health problems worldwide and their control represents a key global public health challenge. In particular, leishmaniases are parasitic VBDs endemic in 98 countries from five continents distributed in tropical, subtropical and temperate zones. During the last twenty years, their distribution have undergone an expansion, also due to climate and environmental changes, the reason why they are considered re-emerging diseases. Italy is traditionally endemic for cutaneous and visceral leishmaniasis caused by the protozoan parasite Leishmania infantum, whose reservoir is the dog. In the Old World, the natural vectors of the protozoa Leishmania spp. are several species of sand flies belonging to the genus Phlebotomus. To control VBDs, the World Health Organization promotes the rational use of insecticides and integrated strategies for vector control through chemical and biological strategies. The "symbiotic control" is one of the biological control strategies that exploits microorganisms that live in symbiosis with the vector, in order to reduce or interfere with the pathogen transmission. The aim of my thesis project was to increase the knowledge on killer yeasts, in general, and in the arthropod Phlebotomus, in particular, in order to open the way toward their development as tools for the biological/integrated control of vector-borne diseases. Article 1 My first work, here presented, reports the investigation of the fungal community of the sand fly Phlebotomus perniciosus, the main vector of leishmaniasis in the western Mediterranean area and the most widespread sand fly in Italy, with a focus on the dominant yeast species Meyerozyma guilliermondii. The yeast displayed higher prevalence in the reared population than in the analyzed wild individuals, letting us hypothesize a contribution of this yeast to the diet of reared sand flies with nutrients that are on the other side easily available in nature. The localization of the yeast, found in the midgut of adults of both sexes and larvae and in Malpighian tubules of female sand flies, in addition to the genome analysis, let us speculate that the yeast may confer the additional advantage of contributing to the removal of the excess of nitrogenous wastes after the blood meal of the insect host. Article 2 Whole-genome sequencing, de novo assemby and phylogenomic analysis of one strain of M. guilliermondii isolated from P. perniciosus and of other yeast strains of the M. guilliermondii complex isolated from arthropods were the goals of another research paper here presented. This work led to publish the first four genomes of isolates of Meyerozyma caribbica and to better understand evolutionary relationships within the clade. Articles 3-5 The other works presented in this document were focused on the yeast Wickerhamomyces anomalus, here studied as a yeast candidate for symbiotic VBDs control. In one of these papers (Article 3) the isolation and phylogenetic characterization of a killer strain of W. anomalus from the sand fly P. perniciosus is reported. The association between the yeast and sand flies seems to be facultative. The killer toxin produced by the isolated W. anomalus strain was purified, characterized and tested against fungal pathogens in another work (Article 4). This toxin is a β-1,3-glucanase that possesses in vitro activity against Candida glabrata isolates, independently from their drug-resistance phenotypes. The obtained results suggest a potential application of this toxin against fungal infections at skin and mucosal membrane levels provoked by C. glabrata and may be useful for the design of new therapeutic molecules and the study of yeast resistance mechanisms. Finally, W. anomalus is widely distuributed in nature and is considered by EFSA as a non-pathogenic agent, completely safe for healthy individuals (level of bio-security 1/QPS). Nevertheless, in the last paper I investigated the circulation of W. anomalus by qPCR screening examining a large panel of immunocompromised and / or intensive care patients, as well as healthy donors as controls (Article 5). The screening revealed only one qPCR-positive subject, out of over 500 analyzed samples. Considering the few published cases of clinical infection by this yeast, in immunocompromised patients, we can conclude that this microorganism is a rather uncommon opportunistic pathogen. In conclusion, the study of the mycobiota associated with sand flies could contribute to the understanding of the biology these insects, and offers the potential of discovering novel microrganisms for future application in the symbiotic control of leishmaniasis.

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Sales, Celina Fernandes. "Estudo comparativo entre métodos de diagnóstico da Leishmaniose Visceral em cães procedentes de Araguaína Tocantins." Pontifícia Universidade Católica de Goiás, 2010. http://localhost:8080/tede/handle/tede/2104.

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Made available in DSpace on 2016-08-10T10:29:28Z (GMT). No. of bitstreams: 1 CELINA FERNANDES SALES.pdf: 6987681 bytes, checksum: ced3c6b58a0241aea5fe839ddd438bc5 (MD5) Previous issue date: 2010-10-29
A leishmaniose visceral é uma zoonose típica de áreas tropicais, dependente da tríade: hospedeiro (homem), vetor (flebotomíneo) e reservatório (cão e animais silvestres). Nos países do novo mundo o protozoário responsável pela infecção é Leishmania chagasi. No Brasil, até o presente momento, os surtos da doença estão associados à presença de cães soropositivos e em várias regiões geográficas a epidemia canina precedeu a humana. Lutzomya longipalpis é o principal vetor, possui ampla distribuição geográfica no novo mundo, sendo apontado como o principal responsável pela persistência da doença em várias áreas tropicais e neotropicais do planeta. O Brasil é responsável por 90% dos casos ocorridos na América Latina e a região Nordeste do país registra os maiores índices da infecção seguida pela região Sudeste, Norte, Centro-Oeste e Sul, respectivamente. Era considerada uma enfermidade de caráter eminentemente rural e, mais recentemente, vem se expandindo para as áreas urbanas de médio e grande porte. O estado do Tocantins destaca-se como um dos maiores responsáveis pelo aumento das estatísticas envolvendo a leishmaniose visceral humana na região Norte do Brasil. Araguaína é responsável por aproximadamente 50% dos casos de leishmaniose visceral humana notificados anualmente no Tocantins, e ainda detém o maior número de notificações de leishmaniose visceral canina do Estado. Para o efetivo controle do reservatório canino é preciso haver acurácia no diagnóstico. O diagnóstico laboratorial desta enfermidade continua sendo um desafio. Observa-se um amplo espectro clínico da doença, tanto em humanos, como em animais e segundo alguns autores este fato é responsabilizado, em parte, por dificuldades no diagnóstico laboratorial. Por esta razão, propôs-se avaliar o emprego dos métodos: Reação de Imunofluorescência Indireta (RIFI), Reação em Cadeia da Polimerase (PCR), Teste Rápido (DPP®), Imunohistoquímica (IH), Imunoensaio Enzimático (ELISA) e Coloração pela Hematoxilina Eosina (HE) em 20 amostras de soro e de linfonodos de cães, considerados positivos para leishmaniose visceral canina, que seguiram para eutanásia no Centro de Controle de Zoonoses de Araguaína em 2009. Foram encontrados 100% de positividade através da RIFI, 95% tanto por DPP®, como por PCR, 90% por ELISA, e 25%, em cada um dos testes IH e HE. Com o objetivo de realizar um estudo comparativo entre os testes, empregou-se o método Kappa de Cohen. Melhores resultados de concordância foram observados quando se comparou ELISA com DPP® obtendo índice Kappa (0,643) considerado bom, conforme parâmetros sugeridos por Landis & Koch (1977). Os resultados obtidos através do presente trabalho, permitem propor o emprego do teste rápido DPP® em inquérito soroepidemiológico canino tendo em vista sua praticidade e facilidade de execução quando se compara com o ELISA.

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Barichello, Fabiana Farinello Grecco. "Avaliação da resposta imunológica de cães vacinados com a vacina FML (Leishmune®) e cães naturalmente infectados com leishmaniose visceral canina por meio de dois métodos sorológicos = ELISA e RIFI." [s.n.], 2010. http://repositorio.unicamp.br/jspui/handle/REPOSIP/315935.

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Abstract:

Orientador: Silmara Marques Allegretti
Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia
Made available in DSpace on 2018-08-17T21:52:47Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Barichello_FabianaFarinelloGrecco_M.pdf: 2472984 bytes, checksum: 2d89f144c96b66ee33bfdbb3f77ce1ee (MD5) Previous issue date: 2010
Resumo: A Leishmaniose Visceral Canina, doença grave e fatal, tem o cão como o principal reservatório do seu agente etiológico no meio urbano. Devido ao alto parasitismo cutâneo nestes animais, da quantidade de cães infectados, e do próximo convívio com o homem, as ações desenvolvidas pelo Programa Brasileiro de Controle da Leishmaniose Visceral são centradas no reservatório canino, através da identificação e eutanásia dos animais soropositivos. Sendo assim, a adoção de ações profiláticas, com a utilização de vacinas nos cães, constituiria uma importante ferramenta para a diminuição da doença nestes animais, e consequentemente, da infecção do vetor e da transmissão do agente. Além disso, a adoção de medidas profiláticas, como o uso de coleiras impregnadas com deltametrina, repelentes de uso tópico e vacinas, são as únicas alternativas disponíveis atualmente para os cães, pois no Brasil, o tratamento de cães está proibido desde a publicação da Portaria Interministerial nº 1.426, de 11 de julho de 2008. Apesar de disponível desde 2004, a vacina Leishmune® ainda não é amplamente utilizada no Brasil, principalmente devido à possibilidade dos cães vacinados apresentarem sorologia positiva em inquéritos epidemiológicos, não sendo possível diferenciá-los dos infectados. Este trabalho foi realizado com o objetivo de avaliar o perfil sorológico de cães vacinados e saudáveis que residem em áreas endêmicas, e de cães naturalmente infectados por Leishmania infantum/ chagasi, e avaliar a possibilidade de diferenciação sorológica a partir dos métodos utilizados atualmente nos inquéritos epidemiológicos oficiais e nos laboratórios de diagnóstico particulares: ELISA e RIFI com antígenos L. major-like, produzidos pelo Laboratório Bio-Manguinhos e ELISA S7, produzido pelo Laboratório Biogene. Todos os soros de cães foram testados nos três métodos, e os resultados demonstraram que nenhum cão vacinado apresentou resultado positivo em mais de um teste. Apenas um cão vacinado (1/39) apresentou resultado de 1:40 na RIFI, e quatro cães (4/39) apresentaram resultado positivo no ELISA L. major-like. Nenhum soro de cão vacinado apresentou resultado positivo no ELISA S7. O único resultado positivo na RIFI foi negativo nos outros dois métodos, e os quatro soros positivos no ELISA L. major-like foram negativos tanto na RIFI quanto no ELISA S7. Estes resultados sugerem reações falso-positivas, e demonstram que, de acordo com o Manual de Vigilância Epidemiológica, se os soros de cães vacinados forem testados em dois métodos (ELISA e RIFI), a possibilidade de um cão vacinado apresentar resultado positivo será remota. Desta maneira, a vacinação da população canina não dificultaria as ações atualmente empregadas para o controle da Leishmaniose Visceral, mas poderia, no futuro, ser somada as medidas já adotadas, evitando assim a eutanásia de cães
Abstract: Canine Visceral Leishmaniasis, serious and fatal disease, has the dog as main reservoir of the agent Leishmania infantum in urban environment. The control actions developed by the Brazilian Program of Visceral Leishmaniasis Control are focused on the canine reservoir through identification and euthanasia of seropositive animals, due to high cutaneous parasitism in these animals, the amount of infected dogs and the closeness to the human being. Therefore, the adoption of prophylactic measures like dog vaccination would be an important tool to reduce the number of infected dogs and consequently the vector infection and the disease transmission. Besides that, the adoption of prophylactic measures in these animals, like the usage of deltametrin embedded collars, topic usage repellent and vaccines are the only available alternatives for these animals, since dogs treatment has been forbidden by law in Brazil since 2008. Although it has been available since 2004, the Leishmune® vaccine is not widely used in Brazil yet, especially due to the possibility of vaccinated dogs showing positive serology, being impossible to differentiate them from infected dogs. The objective of this work was to evaluate the serologic profile of healthy and vaccinated dogs who live in endemic areas and of naturally infected dogs with Leishmania Infantum/ chagasi, and also evaluate the possibility of serologic differentiation using the same methods nowadays adopted by official epidemiological surveys and in private diagnosis laboratories: ELISA and IFA with L. major-like antigens, produced by Bio-Manguinhos Laboratory and ELISA S7, produced by Biogene Laboratory. All the dogs sera were tested in the three methods, and the results showed that no vaccinated dog presented a positive result in more than one test. Only a vaccinated dog (1/39), presented 1:40 in IFA, and 4 dogs (4/39) presented a ELISA L. major-like positive result. No vaccinated dog sera presented positive result in ELISA S7. The only IFA positive result was negative in the other two methods and the four positive sera in ELISA L. major-like were negative either in IFA, as in ELISA S7. These results suggest false positive reactions and demonstrate that according to the Epidemiological Surveillance Manual, if the vaccinated dogs sera are tested in two methods (ELISA and IFA), the possibility of a vaccinated dog to present a positive result is remote. Thus, the vaccination of a big quantity of dogs would not disturb the presently adopted actions for Visceral Leishmaniasis control, but could in the future be added to the already adopted measures, therefore avoiding the dog's euthanasia
Mestrado
Parasitologia
Mestre em Parasitologia

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Vieira, Renato José Ferreira. "Clínica e cirurgia de animais de companhia: Leishmaniose canina." Master's thesis, Universidade de Évora, 2014. http://hdl.handle.net/10174/14003.

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O estágio curricular, apresentado ao longo deste relatório, foi realizado no Hospital Veterinário do Restelo (HVR), decorrido entre 16 de Setembro de 2013 a 28 de Março de 2014, sob orientação científica da Doutora Margarida Fragoso Costa e coorientação do Doutor Diogo Magno, subdiretor clínico do HVR. O presente relatório de estágio é constituído por três partes, a casuística, monografia e casos clínicos. A casuística refere-se á observação de casos clínicos. A área clinica com maior representatividade foi a clínica médica (68,36%), onde a gastroenterologia e glândulas anexas foi mais frequente (15,73%). A maioria dos procedimentos foram realizados em canídeos (68.37%). A monografia, sobre o tema Leishmaniose canina, é uma zoonose causada pelo protozoário Leishmania infantum e transmitida por um flebótomo (Phlebotomus perniciosus e P.ariasi) distribuído no meio ambiente, sendo os canídeos os principais hospedeiros reservatório. É fundamental a sua prevenção, através da sensibilização dos proprietários, realizada pelos Médicos Veterinários; Abstract: Small animal medicine and surgery The traineeship presented in this report was conducted at the Veterinary Hospital of Restelo (HVR) elapsed between 16 September 2013 to 28 March 2014, under the scientific guidance of Dra Margarida Fragoso Costa and coorientation the Dr. Diogo Magno, assistant director of clinical HVR. This internship report consists of three parts, the casuistry, monography and case report. The casuistry will refers to the observed clinical cases. The clinical area with the largest representation was medical clinic (68.36 %), where gastroenterology and accessory glands was more frequent (15.73%). Most of the procedures have been performed in dogs (68.37%). A monography on the theme of canine leishmaniasis is a zoonosis caused by the protozoan Leishmania infantum and transmitted by a sandfly (Phlebotomus perniciosus and P.ariasi) distributed in the environment, being dogs the main reservoir hosts. It is crucial to its prevention by raising awareness of owners held by veterinarians.

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Almeida, João Freitas de. "SOROPREVALÊNCIA DE LEISHMANIOSE VISCERAL CANINA E RELAÇÃO ENTRE SUBCLASSES DE IgG E SINTOMATOLOGIA CLÍNICA." Universidade Federal do Maranhão, 2006. http://tedebc.ufma.br:8080/jspui/handle/tede/1042.

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Abstract:

Made available in DSpace on 2016-08-19T17:47:06Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Joao Freitas de Almeida.pdf: 224070 bytes, checksum: e823447b5af3454f3861d310f6e1d693 (MD5) Previous issue date: 2006-05-19
FUNDAÇÃO DE AMPARO À PESQUISA E AO DESENVOLVIMENTO CIENTIFICO E TECNOLÓGICO DO MARANHÃO
The Vila Nova town located in the municipality of Raposa, Maranhão, has been reported as endemic area for visceral leishmaniasis. Knowing the importance of dogs as reservoir household, this study aimed to identify the dogs for leishmaniasis infected through test immunoassay (ELISA). Collections of blood of all dogs resident in the locality were held in the period of February to April 2005, giving a sample of 233 dogs. The results of the ELISA showed that 69 dogs showed positive results, corresponding to a seroprevalence of approximately 29.6% of the dogs of the town.
A localidade Vila Nova situada no município de Raposa, Maranhão, tem sido relatada como área endêmica para a leishmaniose visceral. Sabendo da importância dos cães como reservatório doméstico, este trabalho teve como objetivo identificar os cães infectados para leishmaniose por meio de teste imunoenzimático (ELISA). Coletas de sangue de todos os cães domiciliados na localidade foram realizadas no período de fevereiro a abril de 2005, perfazendo uma amostra de 233 cães. Os resultados do ELISA demonstraram que 69 cães apresentaram resultados positivos, correspondendo a uma soroprevalência de aproximadamente 29,6% dos cães da localidade.

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Gouveia, Cheryl. "Características ambientais e a ocorrência de leishmaniose visceral em Teresina, Piauí: uma aplicação utilizando sensoriamento remoto." Universidade do Estado do Rio de Janeiro, 2013. http://www.bdtd.uerj.br/tde_busca/arquivo.php?codArquivo=6205.

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Abstract:

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior
Nas Américas, a leishmaniose visceral (LV) experimenta um processo de urbanização e o cão doméstico é considerado o principal reservatório da doença neste cenário, embora seu papel no ciclo de transmissão não esteja totalmente explicado. Este estudo teve como objetivo investigar, por meio da análise de dados espaciais e imagens de sensoriamento remoto, a relação de fatores ambientais com a ocorrência de infecção canina por Leishmania chagasi e sua correlação espacial com a doença humana na cidade de Teresina (Piauí - Brasil), onde foi relatada a primeira epidemia urbana de LV no Brasil. Os resultados são apresentados na forma de dois manuscritos, nos quais são utilizados dados georreferenciados obtidos por meio de um inquérito sorológico canino realizado durante o ano de 2011, em diferentes bairros com transmissão moderada ou intensa. No primeiro, a regressão logística multinível foi utilizada para correlacionar a prevalência da infecção canina com variáveis ambientais de quadrículas de 900m2 (30mx30m) onde os domicílios estavam localizados, ajustando para as características individuais dos cães (sexo, idade e raça) e da residência. Participaram desta análise 717 cães distribuídos em 494 domicílios e 396 quadrículas. Um percentual >16,5% da área da quadrícula coberta por pavimentação clara (ruas de terra ou asfalto antigo) foi a única variável ambiental associada com a infecção canina por L. chagasi (Odds ratio [OR] = 2,00, intervalo de 95% de confiança [IC95%]: 1,22 - 3,26). Estas áreas provavelmente correspondem àquelas mais pobres e com pior infraestrutura urbana, sugerindo a ocorrência de um padrão de transmissão intra-urbano similar aos padrões rurais e peri-urbanos da LV. No segundo manuscrito, a partir da análise hierárquica do vizinho mais próximo foi verificada a presença de sete clusters de maior concentração de cães soropositivos em relação aos soro negativos em áreas menos urbanizadas e com vegetação pouco densa. Participaram desta análise 322 cães distribuídos em cinco bairros. A relação espacial entre os caninos soropositivos e os casos humanos foi investigada através do método da distância média entre os pontos e analisada por meio do teste t. Foi encontrada uma maior proximidade de casos humanos em relação a cães soropositivos quando comparada à distância em relação aos soro negativos, sugerindo a existência de uma relação espacial entre a LV humana e a soropositividade canina. Os resultados contribuem para uma maior compreensão sobre a dinâmica da doença em meio urbano além de fornecer informações úteis para a prevenção e controle da LV em seres humanos.
In the Americas, visceral leishmaniasis (VL) undergoes an active process of urbanization and the domestic dog is considered to be the main reservoir of the disease in this scenario, although its role in the transmission cycle is not fully explained. This study aimed to investigate, by spatial data analysis and remote sensing images, the association between environmental factors with the occurrence of canine infection by Leishmania chagasi and their spatial correlation with the human disease in the city of Teresina (Piauí-Brazil), where first urban epidemic of LV in Brazil was reported. The results are presented in the form of two manuscripts, which used georeferenced data obtained through a serological canine survey carried out during 2011 canine, in localities with moderate or severe transmission. In the first manuscript, the multilevel logistic regression approach was used to correlate the prevalence of canine infection with the environmental variables of grids with 900m2 (30mx30m) where the residence was located, adjusting to the dogs' individual characteristics (gender, age and race) and characteristics of the residences. The environmental analysis was performed with 717 dogs distributed in 494 households and 396 grids. The percentage of the area of grid covered by clear pavement (bare soil or old asphalted streets) >16.5% was the only environmental variable associated with canine infection by L. chagasi (Odds ratio [OR] = 2.00, 95% confidence interval [95% CI]: 1.22 - 3.26). These probably correspond to impoverished areas with inadequate infrastructure suggesting the occurrence of an urban cycle similar to those observed in rural and periurban areas. In the second manuscript, by the hierarchical analysis of nearest neighbor, were checked seven clusters of highest concentration of seropositve dogs in relation to seronegative in less urbanized areas with sparse vegetation. This analysis was performed with 322 dogs distributed in five boroughs. The spatial relationship between seropositive dogs and human cases was investigated by the method of average distance between points and was analyzed by t-test. The human cases were closer to the seropositive dogs when compared to the distance from the seronegative ones, suggesting the existence of a spatial relationship between the human LV and canine infection. The results contribute to a greater understanding of the dynamics of urban disease and also provide useful information for the prevention and control of visceral leishmaniasis in humans.

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Carmona, Renata Rafaela Louro da Graça. "Leishmaniose canina: comparação de resultados ELISA em diferentes grupos terapêuticos." Master's thesis, Universidade de Évora, 2018. http://hdl.handle.net/10174/22915.

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Abstract:

A Leishmaniose é uma zoonose com distribuição mundial causada por protozoários do género Leishmania spp.. Esta é transmitida principalmente por vetores flebótomos, que se alimentam de um hospedeiro reservatório e o transmitem a outros animais e ao Homem. Este estudo foi realizado durante o estágio curricular no laboratório veterinário INNO. Neste recolheram-se dados relativos a 251 cães, que realizaram testes de ELISA para deteção de anticorpos anti-Leishmania. Após selecionar os positivos (170), enviou-se um inquérito aos médicos veterinários dos CAMV’s para obter dados clínicos (sinais clínicos, métodos de diagnóstico e terapêutica efetuada). Após o cruzamento de dados (do laboratório e dos inquéritos), associaram-se os animais em 15 grupos consoante os protocolos terapêuticos utilizados e compararam-se os resultados serológicos em dois momentos distintos (ao diagnóstico e após o início da terapêutica). Observou-se que o grupo que apresentou melhorias mais significativas foi “Outros”, e que alguns grupos tiveram agravamento dos resultados; Abstract: Leishmaniasis is a zoonosis with a global distribution caused by protozoa of the genus Leishmania spp. This is transmitted mainly by sandfly vectors, which feed on a reservoir host and transmit it to other animals and humans. This study was carried out during the internship at the INNO veterinary laboratory. Data were collected from 251 dogs, which performed ELISA tests for the detection of anti-Leishmania antibodies. After selecting the positives (170), an survey was carried out with several practices/ veterinary hospitals to obtain clinical data (clinical signs, diagnostic methods and therapeutics performed). After the data were crossed (from the laboratory and from the surveys), the animals were associated in 15 groups according to the therapeutic protocols used and the serological results were compared at two different moments (at diagnosis and after initiation of therapy). It was observed that the group that presented the most significant improvements was "Others", and that some groups had worse results.

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Castro, Júnior José Geraldo de. "Estudo clínico e soroepidemiológico da Leishmaniose visceral canina em Juiz de Fora, MG." Universidade Federal de Juiz de Fora (UFJF), 2013. https://repositorio.ufjf.br/jspui/handle/ufjf/4569.

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Abstract:

Submitted by isabela.moljf@hotmail.com (isabela.moljf@hotmail.com) on 2017-05-18T13:19:42Z No. of bitstreams: 1 josegeraldodecastrojunior.pdf: 7182456 bytes, checksum: 31d33bc1bedcad933b465924da4098e3 (MD5)
Approved for entry into archive by Adriana Oliveira (adriana.oliveira@ufjf.edu.br) on 2017-05-18T13:40:17Z (GMT) No. of bitstreams: 1 josegeraldodecastrojunior.pdf: 7182456 bytes, checksum: 31d33bc1bedcad933b465924da4098e3 (MD5)
Made available in DSpace on 2017-05-18T13:40:17Z (GMT). No. of bitstreams: 1 josegeraldodecastrojunior.pdf: 7182456 bytes, checksum: 31d33bc1bedcad933b465924da4098e3 (MD5) Previous issue date: 2013-12-04
FAPEMIG - Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de Minas Gerais
No Brasil, a leishmaniose visceral (LV), também conhecida como calazar, é uma zoonose, de transmissão vetorial, causada pelo protozoário Leishmania chagasi. Esta doença, anteriormente descrita como rural vem passando por um processo de urbanização. Em 2008, foram diagnosticados no município de Juiz de Fora, os primeiros casos considerados autóctones de leishmaniose visceral canina (LVC) e estudos sobre epidemias urbanas da LV têm indicado que a LVC vem precedendo a infecção humana, visto que os cães são os principais reservatórios domésticos. Assim, o presente estudo teve como objetivo pesquisar a infecção de LVC no município de Juiz de Fora, bem como avaliar os fatores de risco associados à doença. O trabalho foi realizado com animais do canil municipal e ONGs e a partir do soro destes foram realizadas três técnicas sorológicas: o imunocromatográfico “TR DPP® e ELISA (“EIE-Leishmaniose visceral canina®), ambos fornecidos pela FIOCRUZ/Bio-Manguinhos e ELISA in house. A amostra totalizou 781 animais e a prevalência da LVC variou de acordo com a técnica empregada: o teste DPP apresentou soropositividade de 4,87% (IC 95% de 3,5-6,7%); o ELISA Bio-Manguinhos de 2,18% (IC 95% de 1,3-3,5%) e ELISA in house de 13,73% (IC 10,8-17,3%). Em relação à variabilidade observada entre as técnicas, vale a pena destacar que as mesmas apresentam antígenos diferentes e isto pode refletir nos resultados. A amostra foi composta, em sua maioria por fêmeas adultas, sem raça definida, porte médio e pelo curto. Na análise univariada, utilizando-se o ELISA Bio-Manguinhos como confirmatório para a LVC, foi observada associação estatística (p< 0,05; IC 95%) com sintomatologia clínica segundo Quinnell et al. 2003, origem dos animais (canil municipal) e grupo racial; além disto, houve sugestão de associação com sexo masculino e porte médio/grande dos animais. Na análise multivariada, o fato de ser procedente do canil e sintomatologia clínica mantiveram associadas ao desfecho, sendo também sugestiva o sexo masculino. Este foi o primeiro inquérito da LVC no município de Juiz de Fora e a presença da doença relatada neste trabalho, reforça a idéia de que a leishmaniose está em processo de expansão e urbanização no Brasil, apontando a necessidade de vigilância epidemiológica ativa.
In Brazil, the visceral leishmaniasis (LV), also known as calazar, is a zoonotic disease, with vector transmission caused by the Leishmania chagasi protozoan. This disease, before described as rural is going through a process of urbanization. In 2008, were diagnosed in Juiz de Fora municipality, the first cases considered autochthones of canine visceral leishmaniasis (CVL) and research about urban epidemic of LV has showed that the CVL is preceding the human infection, since that the dogs are the main domestic reservoirs. Then, the present study aimed to investigate the CVL infection in Juiz de Fora, as well as to value the risk factors associated to the disease. This work was done with the animals of the public kennel and ONGs and with the serum were realized three serological techniques: the immunochomatographic “TR DPP® and ELISA (EIE-leishmaniose visceral canine®), both given by FIOCRUZ/BIO-MANGUINHOS and ELISA in house. The samples totalized 781 animals and the prevalence of CVL varied according with the technique used: the test DPP showed soropositivity of 4.87% (IC 95% of 3.5-6.7%); the ELISA Bio-Manguinhos of 2.18% (IC 95% of 1.3-3.5%) and ELISA in house of 13.73% (IC 10.8-17.3%). In relation to variability observed among the techniques, as worth pointing out that same showed different antigens and this can reflect in the results. The sampIes were compound in majority by adult females, without definite race, medium-sized and short hair. In the univarious analysis using the ELISA Bio-Manguinhos as confirmatory for the CVL, was observed statistic association (p<0.05; IC 95%) with clinic sintomatology according by Quinnell et al. (2003), origin of animals (public kennel) and racial group; and also, there was suggestion of the association with masculine sex and medium/big port animals. In the multivarious analysis, the fact of being precedent from the kennell and clinic sintomatology kept associated to the result, being suggestive the masculine sex. This was the first enquiry of CVL in Juiz de Fora municipality and presence of the disease showed in this research, reinforce the idea that the leishmaniasis is in the process of expansion and urbanization in Brazil, pointing out necessity of an active epidemiologic vigilance.

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Silva, Lucilene Amorim. "Aspectos da leishmaniose visceral canine: epidemiologia, sorologia e novas perspectivas de tratamento." Centro de Pesquisas Gonçalo Moniz, 2011. https://www.arca.fiocruz.br/handle/icict/7211.

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Abstract:

Submitted by Ana Maria Fiscina Sampaio (fiscina@bahia.fiocruz.br) on 2013-10-25T19:33:12Z No. of bitstreams: 1 Lucilene Amorim. Aspectos da leish...pdf: 1746710 bytes, checksum: 7f38cc7f5b1d001e9d6d0f813fc05bcd (MD5)
Made available in DSpace on 2013-10-25T19:33:12Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Lucilene Amorim. Aspectos da leish...pdf: 1746710 bytes, checksum: 7f38cc7f5b1d001e9d6d0f813fc05bcd (MD5) Previous issue date: 2011
Universidade Federal da Bahia. Faculdade de Medicina da Bahia. Salvador, BA, Brasil / Fundação Oswaldo Cruz. Centro de Pesquisas Gonçalo Moniz. Salvador, BA, Brasil
A leishmaniose visceral canina (LVC) é uma doença sistêmica grave, causada pelo protozoário Leishmania chagasi. Os mecanismos envolvidos na susceptibilidade e resistência dos cães a esta infecção são controversos. Neste trabalho, os aspectos epidemiológico, imunológico e terapêutico da LVC foram estudados. Inicialmente foi realizado um estudo epidemiológico na Raposa, município de alta endemicidade para LVC, localizado na ilha de São Luís, Maranhão. A triagem dos animais soropositivos para Leishmania foi feita por ELISA e os cães soropositivos foram clinicamente avaliados. Os animais foram classificados em assintomáticos e sintomáticos de acordo com os sinais clínicos, sendo avaliado seu perfil epidemiológico, incluindo sexo, convivência com outros animais, tipo de alimentação e idade. A sorologia para IgG1 e IgG2 anti-Leishmania foi feita por ELISA e foi testada a presença de correlação entre as subclasses e os sinais clínicos. Em seguida, foi investigada a produção de óxido nítrico (NO), interferon-g (IFN-g) e fator de necrose tumoral (TNF-a) no soro e sobrenadante de cultura do linfonodo e baço. Na segunda fase da pesquisa, foram utilizados cães da raça Beagle. Após confirmação da infecção por Leishmania chagasi por PCR, os cães foram divididos em dois grupos (n=10/grupo) e foram tratados durante 90 dias, por via oral, diariamente, com Aluporinol (droga de referência) ou com um composto químico promissor, Haloacetamido (droga teste). A cada 30 dias, foi realiza avaliação clínica e bioquímica sérica. Foram quantificadas também as concentrações séricas de IL-10, IFN-g e Superóxido dismutase (SOD). A carga parasitária foi monitorada nos linfonodos por PCR em tempo real e na pele por imunohistoquimica. O acompanhamento dos animais foi continuado até 90 dias após o final do tratamento. Os resultados obtidos demonstraram que a soroprevalência foi de 29,6%. Do total de cães infectados, a maioria eram machos, jovens, conviviam com outros animais e se alimentavam de comida caseira. Em relação aos sinais clínicos, 37% eram assintomáticos e 63% eram sintomáticos. Os cães sintomáticos apresentaram aumento de anticorpos IgG anti-Leishmania, de NO e de IFN-g, entretanto, apresentaram uma diminuição na produção de TNF-a. Houve correlação positiva entre os níveis de IgG2 e o número de sinais clínicos. O tratamento com Haloacetamido reduziu significativamente a carga parasitária, tanto nos linfondos quanto na pele, e aumentou a produção de SOD no ultimo mês de tratamento, mas induziu uma piora no quadro clínico, sem alterações séricas hepáticas e renais, quando comparado ao tratamento com Alopurinol. Entretanto, noventa dias após a suspensão dos fármacos, não houve diferenças entre os grupos nos parâmetros avaliados, com exceção das citocinas que forma aumentadas nos animais tratados com Haloacetamido. Dessa forma, demonstramos que: o NO, associado ao aumento de IFNg, pode induzir diminuição nas concentrações de TNF-a e concomitante imunossupressão nos cães;, que a produção aumentada de IgG2 parece estar relacionada ao quadro mais grave da infecção; e que embora sejam necessários estudos complementares para comprovar a sua eficácia a longo prazo, o tratamento com o Haloacetamido, pode reduzir a carga parasitária de animais infectados, aumentando a produção de SOD e regulando a secreção de citocinas.
chagasi protozoan. The mechanisms involved in susceptibility or resistance of dogs to this infectious disease are controversy. In this work, the epidemiologic, immunological and therapeutic aspects of CVL were evaluated. Initially it was done an epidemiologic study in Raposa municipality situated at Sao Luis island, Maranhão state, and highly endemic to CVL. The trial of serum positive dogs to Leishmania was done by ELISA and the serum positive dogs were clinically evaluated. The dogs were classified in asymptomatic and symptomatic according to the clinical status, and their epidemiologic aspects, including sex, presence of other animals, kind of food, and age were observed. The correlation among anti-Leishmania IgG1 and IgG2 isotypes and the clinical signs was evaluated. Then, the production of nitric oxide (NO), interferon-g (IFN-g) and tumor necrosis factor (TNF-a) in the serum and supernatant of lymph node and spleen cultures was evaluated. In the second phase, dogs from the Beagle strain was used. After confirmation of Leishmania chagasi infection by PCR, the dogs were shared in two groups (n=10/group) and were daily treated by oral route, with aluporinol (reference drug) or a new and promissory chemical compound, haloacetamid (test drug). The treatment was maintained by 90 days. Each 30 days, the dogs were clinically and biochemically evaluated. The serum levels of IL-10, IFN-g and Superoxide dismutase (SOD) were evaluated. The parasite burden was followed at lymph nodes and skin by real time PCR and imunohistochemistry, respectively. The dogs were followed until 90 days after the end of treatment. The results showed a prevalence of 29.6% to Leishmania infection. The majority of infected dogs was male, young, lived with other animals and was fed with house food. The clinical evaluation shown that 37% of the dogs were asymptomatic and 63% were symptomatic. The symptomatic dogs shown increase of anti-Leishmania IgG antibody, NO and IFN-g. However, they shown decrease of TNF-a production. There was a positive correlation only between the IgG2 levels and the clinical signs number. The treatment with haloacetamid reduced the parasite burden in the lymph nodes and in the skin and increased the SOD production however the dogs became worst at the third month of treatment, even so they did not show alterations in the liver and kidney biochemical profile when compared to the Alopurinol group. Nevertheless, ninety days after the suspension of the treatments, there was no difference between the groups at all the evaluated parameters, with exception of cytokine which was increased in the Haloacetamid group. Hence, we shown here that: the NO associated to the IFNg increase can induce a decrease of TNF-a and an immunesuppressive status in the dogs; the increased production of IgG2 seems to be related to the infection progression; and finally, however more studies are necessary to verify the long term efficacy of the haloacetamid, the treatment by three months with this product can reduce the parasite burden from infected dogs by increasing the SOD production and regulating the cytokines secretion.

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Vexenat, Julio Alejandro. "The epidemiology of visceral leishmaniasis in Teresina, Piaui State, Brazil, with special emphasis on diagnosis and transmissibility of canine infection." Thesis, London School of Hygiene and Tropical Medicine (University of London), 1998. http://researchonline.lshtm.ac.uk/768480/.

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Abstract:

Visceral leishmaniasis (VL) is endemic in the semi-arid region of north-eastern Brazil. The causative agent is Leishmania chagasi (infantum). The domestic, peri-domestic and anthropophilic sandfly vector is Lutzomyia longipalpis. The domestic dog may be the principal reservoir of infection in endemic urban regions. The primary aim of this project was to study comparative diagnosis and transmissibility of natural and experimental canine VL in the city of T eresina, Piaui state, Brazil. Most (67 %) of human cases of VL in Teresina occurred in children under 5 years of age, adult VL predominated in males, and there was a seasonal increase in incidence of cases. No phenotypic diversity was found between L. chagasi isolates from dogs and humans, although limited comparisons were performed. Clinical diagnosis, parasitological diagnosis and serology were compared in a cohort of 209 dogs, comprised of both symptomatic and asymptomatic animals. Presence of clinical symptoms was not sufficiently sensitive to diagnose canine VL: only 42 % of dogs positive by reference standard criteria (RS positive) were symptomatic. Parasitology was less sensitive than serology for the diagnosis of canine VL and no parasitological test sho~ed more than 60 % sensitivity in comparison with RS criteria. The indirect fluorescent antibody test (IF A T) and DOT -enzyme linked imrnunosorbent assay (DOT -ELISA) were the most sensitive of the serological assays tested. The direct agglutination test (OAT) was highly specific but lacked sensitivity. Serum samples were more sensitive than filter paper blood spot samples. The Lmet2 DNA probe was generally less sensitive than traditional parasitological and serological methods for diagnosis of canine VL, although the probe was useful for screening sandflies for L. chagasi infections (below). The chance of demonstrating parasites in canine VL increased with the serological titre. Nevertheless, parasitoIogicalIy positive dogs could be found among those that were serologically negative. Large numbers of Lu. longipalpis were found in pigsties and chicken houses in the city of Teresina. The Lmet2 probe was shown to be effective for determining prevalence rates of L. chagasi infection in wild caught sandflies. Prevalence of natural infection in sandflies was particularly high when flies were caught in kennels where there were dogs with disseminated cutaneous infections. Experimental studies demonstrated that Lu. longipaJpis could be very readily infected with L. chagasi by feeding on dogs with canine VL and that transmissibility was associated with amastigote infection of the skin. Altered skin of symptomatic dogs was more infective than normal skin of symptomatic animals. Although symptomatic animals were more infective than asymptomatic animals, asymptomatic dogs with normal skin were still infective to large numbers of sandflies and asymptomatic dogs cannot, therefore, be excluded as a significant reservoir of infection. Transmission of experimental canine VL was demonstrated by a single infective sandfly bite. In a cohort of 25 experimental animals many dogs developed discrete, self-curing, cutaneous lesions, typical of cutaneous leishmaniasis. Seroconversion was the most sensitive test for canine VL, but seronegativity was not a reliable indicator of the absence of infection. Bone marrow positivity was only seen in dogs that were serologically positive. Apparent recovery from L. chagasi infection was seen, with serological reversIOn. Aminosidine, dependent on dose, duration of treatment and clinical status of the infected animal, was shown to be capable of producing clinical recovery and clinical cure in a small proportion of infected dogs, but could not be recommended as a systematic method of control. Single applications of ultra-low volume pyrethroid insecticide to individual animal pens was not effective for controlling Lu. iongipaipis. Nevertheless, pyrethroid insecticides had a high residual activity against Lu. iongipalpis when sprayed on to the walls of animal enclosures. Lambda cyhalothrine (ICON) was the most effective of three pyrethroid insecticides tested in the laboratory against Lu. iongipalpis. Overall, this project has produced unique observations on canine VL, supports the fundamental role of the dog as a reservoir host, and explains why culling of seropositive dogs is likely to have limited impact as a disease control strategy.

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Rosypal, Alexa C. "Characterization of Canine Leishmaniasis in the United States: Pathogenesis, Immunological Responses, and Transmission of an American Isolate of Leishmania infantum." Diss., Virginia Tech, 2005. http://hdl.handle.net/10919/26873.

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Abstract:

Leishmania infantum, an etiologic agent of zoonotic visceral leishmaniasis, has recently emerged in the foxhound population in the United States and parts of Canada. Leishmania infections are usually spread to mammals by infected sand flies, however epidemiological data do not support a role for sand fly transmission in North America. The purpose of this work was to isolate and characterize L. infantum from a naturally infected foxhound from Virginia (LIVT-1 isolate). A mouse model of North American leishmaniasis was developed using immunocompetent and genetically immunodeficient mouse strains infected with LIVT-1 promastigotes by different inoculation routes. The intravenous route of infection was superior to the subcutaneous route for inducing consistent experimental infections and mice lacking interferon gamma, inducible nitric oxide synthase, or B-cells were resistant to clinical disease. Experimental infections in dogs were performed to examine the infectivity, immune responses, and pathogenicity of LIVT-1. Experimentally infected dogs developed parasitologically proven infections and a range of clinical manifestations that were similar to those observed in naturally occurring disease. Diagnostic tests including culture and cytologic evaluation of bone marrow and lymph node aspirates, polymerase chain reaction, and serology by indirect fluorescent antibody test, and recombinant K39 (rK39) immunoassay were evaluated. Kappa statistics revealed that PCR had the highest level of agreement with culture and cytology results although the rK39 dipstick assay consistently identified more experimentally infected dogs. Flow cytometry revealed no significant differences (p>0.05) in CD4+ or CD8+ expression on peripheral blood lymphocytes. Alternate transmission mechanisms in experimentally inoculated mice and dogs were investigated. PCR revealed a low level of vertical and direct transmission of LIVT-1 in inoculated BALB/c mice. Leishmania DNA was detectable by PCR in tissues from puppies from a LIVT-1 infected beagle. Although the strain of L. infantum infecting foxhounds in North America appears to predominantly use a non-vector transmission mode, the disease it produces is similar to canine leishmaniasis in other parts of the world. Non-sand fly transmission may be responsible for maintaining infections in the foxhound population. Results from this work will lead to improvement in diagnosis, clinical management, and control of canine leishmaniasis in North America.
Ph. D.

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Andrade, Andréa Maria [UNESP]. "Dinâmica populacional canina na área urbana do município de Araçatuba, SP, no período de 1994 a 2004." Universidade Estadual Paulista (UNESP), 2006. http://hdl.handle.net/11449/94707.

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Abstract:

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:27:18Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2006-03-20Bitstream added on 2014-06-13T20:56:06Z : No. of bitstreams: 1 andrade_am_me_araca.pdf: 352951 bytes, checksum: 61eec2aa360510bd88c1aabc42242e74 (MD5)
Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)
A população canina de Araçatuba foi acometida em um período dez anos (1994-2004) de duas importantes zoonoses: a Raiva e a Leishmaniose Visceral (LV). Este trabalho objetivou analisar as mudanças ocorridas nesta população durante este período. Para este fim foram utilizados os resultados dos censos caninos realizados nos anos de 1994, 1999 e 2004. Verificou-se que a relação cão/10 habitantes que era 1,69 em 1994 aumentou para 2,03 em 1999 e decresceu a 1,79 em 2004. A quantidade de animais com menos de um ano de idade aumentou de 20% em 1994 para 32% em 2004. No censo canino de 2004 foi observado que o número de cães e sua estrutura etária variaram nos diversos setores do município. Baseado nestes dados sugere-se que os programas de controle populacional canino e de zoonoses sejam direcionados aos setores mais problemáticos da cidade.
The dog population of Araçatuba presented in a period of ten years (1994-2004) two important canine zoonosis: rabies and visceral leishmaniasis (VL). This work aimed at checking the changes that happened in this population during this time. For this purpose, we used the census results of the years 1994, 1999 and 2004. We found that the ratio dog/10 habitants that was 1.69 in 1994, increased to 2.03 in 1999 and decreased to 1.79 in 2004. The number of puppies less than 1 year of age increased from 20% in 1994 to 32% in 2004. The 2004 census showed that the number of dogs and the percentage of puppies found in the different areas of the city are variable. Based on these results we suggest that, zoonosis and population control programs could be aimed to the more problematic areas in the city.

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Inácio, Graziella Borges Alves. "Epidemiologia da Leishmaniose Visceral Canina e Distribuição do Vetor no Município de Araçatuba, São Paulo, Brasil. /." Araçatuba, 2019. http://hdl.handle.net/11449/183429.

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Abstract:

Orientador: Katia Denise Saraiva Bresciani
Resumo: A Leishmaniose Visceral (LV) apresenta uma ampla distribuição geográfica em todos os continentes, representando um sério problema de Saúde Pública. Os flebotomíneos (Diptera, Psychodidae, Phlebotominae) são importantes insetos vetores de microrganismos patogênicos como Leishmania spp., Bartonella spp. e arbovírus (Vesiculovirus, Phlebovirus, Orbivirus), porém, estes insetos apresentam grande importância para a transmissão das leishmanioses em várias regiões do mundo, incluindo as Américas do Sul e Central. No Brasil, há duas espécies, até o momento, relacionadas com a transmissão da Leishmania infantum: a Lutzomyia longipalpis e a Lutzomyia cruzi. Infecções por Leishmania spp. são potencialmente zoonóticas e acometem homens e diversas espécies de animais silvestres e domésticos. Os cães são importantes hospedeiros, fontes de infecções e potenciais reservatórios, não só pelo estreito relacionamento ou convívio com os seres humanos, mas também por sua incapacidade imunológica em responder à doença com sucesso. O Ministério da Saúde no Brasil, preconiza para o diagnóstico da Leishmaniose Visceral Canina (LVC), o teste imunocromatográfico, como exame de triagem e o ensaio imunoenzimático, como confirmatório. Também recomenda o diagnóstico precoce e tratamento adequado dos casos humanos, o controle dos vetores, a eutanásia dos cães e atividades de educação em saúde nas áreas endêmicas para esta doença. Por tanto, foram instituídas ações de prevenção e controle da LV canina, na áre... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo)
Abstract: Visceral leishmaniasis (VL) has a wide geographical distribution on all continents, representing a serious Public Health problem. Sand flies (Diptera, Psychodidae, Phlebotominae) are important insect vectors of pathogenic microorganisms such as Leishmania spp., Bartonella spp. and arboviruses (Vesiculovirus, Phlebovirus, Orbivirus), however, these insects are of great importance for leishmaniasis transmission in various regions of the world, including South and Central America. In Brazil, there are two species related to the transmission of Leishmania infantum: Lutzomyia longipalpis and Lutzomyia cruzi. Leishmania spp. infections are potentially zoonotic and affect men and various species of wild and domestic animals. Dogs are important hosts, sources of infections and potential reservoirs, not only for their close relationship or contact with humans, but also for their immunological inability to successfully respond to the disease. The Health Ministry of Brazil recommends for the diagnosis of canine visceral leishmaniasis (CVL), the immunochromatographic test as a screening test and the enzyme immunoassay as confirmatory. It also recommends early diagnosis and appropriate treatment of human cases, vector control, dog euthanasia and health education activities in endemic areas for this disease. Therefore, prevention and control actions of canine VL were instituted in the urban area of municipality of Araçatuba, São Paulo, Brazil.
Doutor

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Sanches, Françoise Pereira. "Leishmaniose visceral canina: caracterização das alterações histológicas de pele, linfonodo e baço e, a correlação do parasitismo tecidual com a expressão do iNOS." Universidade de São Paulo, 2014. http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/5/5160/tde-27082014-090649/.

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Abstract:

O presente estudo teve como objetivo caracterizar as alterações histológicas de pele, linfonodo e baço, determinar a densidade de parasitas e de células iNOS+, assim como correlacionar o parasitismo com a expressão de iNOS em pele, baço e linfonodo de cães naturalmente acometidos por leishmaniose visceral. Foram selecionados aleatoriamente, 28 cães infectados com Leishmania (Leishmania) infantum chagasi, oriundos do Centro de Controle de Zoonoses do município de Araçatuba, os quais foram distribuídos em dois grupos, de acordo com sinais clínicos e exames laboratoriais, em sintomáticos (n=18) e assintomáticos (n=10). Um grupo de 6 animais oriundos de área não endêmica para leishmaniose visceral foram empregados como controle negativo. As alterações histológicas de pele foram similares em ambos os grupos clínicos, sintomáticos e assintomáticos, e se caracterizaram por um infiltrado inflamatório na derme, formado por células mononucleares (macrófagos, linfócitos e plasmócitos), que variou de discreto a intenso. No linfonodo, as alterações histológicas foram também semelhantes entre os grupos clínicos, e se caracterizaram por hiperplasia e hipertrofia da área cortical e para-cortical, que variou de discreta a intensa; e por hiperplasia e hipertrofia de macrófagos na região medular, caracterizando em muitos casos uma linfadenite granulomatosa. No baço, alterações histológicas da polpa branca e polpa vermelha foram similares entre os grupos sintomáticos e assintomáticos, com hipoplasia e atrofia de polpa branca e, hipertorfia e hiperplasia de macrófagos na polpa vermelha, variando de moderado a intenso. Quanto ao número de formas amastigotas/mm2 tanto na pele, como no linfonodo e baço, não houve diferença estatisticamente significativa entre os grupos clínicos (p=0,2104), (p=0,2401) e (p=0,8869), respectivamente. Em relação à densidade de células iNOS+(células/mm2), observamos que a infecção por Leishmania levou ao aumento do número destas células na pele, no baço e no linfonodo em relação ao controle (p < 0,05). Porém, quando analisamos a densidade de células iNOS+ entre os grupos clínicos, sintomáticos e assintomáticos, não observamos diferença significativa tanto na pele (p=0,3026), como em linfonodo (p=0,3257) e baço (p=0,5940). Observou-se correlação fraca e não significativa entre a densidade de parasitas e a densidade de células expressando iNOS+ no tegumento; porém no linfonodo, verificou-se correlação negativa moderada e significante (p=0,0034) entre o parasitismo e a expressão de células iNOS+, assim como no baço (p=0,0329), sugerindo que o óxido nítrico deve exercer um papel importante no controle do parasitismo em vísceras
The present study aimed the characterization the histological features in skin, lymph nodes and spleen; determination of the parasitism density and the cells expressing iNOS; and correlation between the parasitism and the expression of iNOS in the skin, lymph nodes and spleen of dogs naturally committed by visceral leishmaniasis. Twenty-eight naturally infected dogs by Leishmania (Leishmania) infantum chagasi were selected randomly from the Zoonosis Control Center of Araçatuba municipality and distributed in two groups according to the clinical signs and laboratory exams, symptomatic (n=18) and asymptomatic (n=10) animals. A group of six animals from non-endemic region for visceral leishmaniais was used as negative control. Histological changes in skin were similar in both clinical groups, symptomatic and asymptomatic, and were characterized by a focal and diffuse inflammatory infiltrate in the dermis of mononuclear cells (macrophages, lymphocytes, plasmocytes), that varied from discrete to intense. In lymph nodes, the histological changes were also similar in both clinical groups, and were characterized by hyperplasia and hypertrophy of the cortical and para-cortical area, that varied from discrete to intense; and hyperplasia and hypertrophy of macrophages in the medullar region characterizing in many cases a granulomatous lymphadenitis. In spleen, the histological alterations in the white pulp and red pulp were similar in both clinical groups, with hypoplasia and hypotrophy of the white pulp and hypertrophy and hyperplasia of macrophages in red pulp varying from moderate to intense. Regarding the results of parasitism density (amastigotes/mm2), we did not observe any significant difference between the clinical groups in skin (p=0.2104), lymph nodes (p=0.2401) and spleen (p=0.8869). Concerning to the density of iNOS+ cells, we observed that the infection by Leishmania caused an increase in the number of these cells in the skin, in spleen and lymph nodes in relation to the control group (p < 0.05). However, when we analyzed the density (cells /mm2) of iNOS+ expressing cells in clinical groups, symptomatic and asymptomatic, we did not observe any significant difference in the skin (p=0.3026), in lymph nodes (p=0.3257) and spleen (p=0.5940). A weak and non-significant correlation was observed between the parasite density and the density of iNOS+ cells in the skin. However, in the lymph node a significant and moderate correlation (p=0.0034) was observed between the parasitism and iNOS+ cells, as well as in the spleen (p=0.0329), suggesting that nitric oxide plays an important role in the control of the parasitism in the viscera

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Souza, Cristiane Marques de. "Isolamento, purificação e caracterização de duas proteínas recombinantes de leishmania chagasi,visando à padronização de um ensaio imunodiagnóstico para leishmaniose canina." Instituto de Tecnologia em Imunobiológicos, 2009. https://www.arca.fiocruz.br/handle/icict/5850.

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Abstract:

Submitted by Priscila Nascimento (pnascimento@icict.fiocruz.br) on 2012-11-22T11:44:35Z No. of bitstreams: 1 cristiane-marques-de-souza.pdf: 1147113 bytes, checksum: 60995fd9938a018115dd7df1eec2d052 (MD5)
Made available in DSpace on 2012-11-22T11:44:35Z (GMT). No. of bitstreams: 1 cristiane-marques-de-souza.pdf: 1147113 bytes, checksum: 60995fd9938a018115dd7df1eec2d052 (MD5) Previous issue date: 2009
Fundação Oswaldo Cruz. Instituto de Tecnologia em Imunobiológicos. Rio de Janeiro, RJ, Brasil / Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Oswaldo Cruz. Rio de Janeiro, RJ, Brasil.
A leishmaniose visceral (LV) causada pelo parasito Leishmania chagasié uma doença severa que ocorre em seres humanos sendo prevalenteem vários países, inclusive no Brasil. Trata-se da forma com maior potencial de letalidade. Os cães são importantes reservatórios do parasito, portanto o diagnóstico canino é essencialpara os programas de vigilância da LV. Neste trabalho é relatado a expressão, o isolamento e a purificação de dois antígenos recombinantes protéicos de Leishmania chagasi, Lc9 e Lc13, produzidos em Escherichia coli visando um imuno-ensaio para o diagnóstico desta enfermidade. Inicialmente, os plasmídeos de E.coli contendo os gens inseridos e relacionados a ambas as proteínas foram analisados por eletroforese de agarose. A proteína Lc9, por conter um marcador de seis histidinas, foi purificada por cromatografia de metal imobilizado (Ni) seguido porcromatografia de exclusão e peneiração molecular em Superdex 200. A Lc13 foi purificada, somente, por cromatografia de perfusão de troca aniônica em Poros HQ. As preparações protéicas purificadas tiveram suas homogeneidades verificadas por eletroforese desnaturante (SDS-PAGE), focalização isoelétrica e western blot. Um pI estimado de 6,43 e de 6,42 foi observado paraLc9 e Lc13, respectivamente. A determinação de peso molecular (PM) feita por SDS-PAGE-10% indicou valores de 44000 (Lc9) e 88000 (Lc13), enquanto por cromatografia de exclusão e filtração molecular em Superdex 200, os valores estimados foram de 550.000 (Lc9) e 282.000 (Lc13). Estes valores estimados de PM sugerem que ambas macromoléculas apresentam-se em seu estado nativo na forma multimérica, sendo ambas constituídas por cadeias polipeptídicasidênticas. As diferentes detecções protéicas depois do SDS-PAGE de Lc9 e Lc13 purificadas mostraram que a principal banda imuno-revelada corresponde a principal banda revelada como coomassie brilliant blueR-350 por igual metodologia. Concluindo-se então que ambas correspondem ao principal antígeno presente em cada uma das duas preparações protéicas (Lc9 e Lc13) purificadas. Para o desenvolvimento de um ELISA indireto, relacionado ao diagnóstico da leismaniose visceral canina, os antígenos, Lc9 e Lc13 e o conjugado IgG – peroxidase tiveram as faixas de concentrações selecionadas para uso no referido ensaio sorológico. Segundo a mesma metodologia, o antígeno Lc9 apresentou melhores resultados que o antígeno Lc13 (Lc9: sensibilidade 100%; especificidade 95% e Lc13: sensibilidade 96%; especificidade 92%). Os resultados obtidos propõem o uso das proteínas recombinantes Lc9 e Lc13, principalmente a primeira, num imuno-ensaio baseado em ELISA para o aperfeiçoamento do diagnóstico da leishmaniose.
The visceral leishmaniasis (VL) caused by Leishmania chagasiis a relevant human disease prevalent in many countries, including Brazil. This form has the greatest potential for lethality. Dogs are important reservoir of the parasite, thus diagnosis of canine infections is essential for VL surveillance programs. This work is related to the expression, isolation and purification of two recombinant protein antigens of Leishmania chagasi, Lc9 and Lc13, produced in Escherichia coliaiming a diagnostic illness immune assay. Initially, the E. coliplasmids containing the inserted genes related to both proteins were analyzed in agarose gel electrophoresis. The protein Lc9 containing a hexapeptide histidine tag was purified by immobilized metal (Ni) affinity chromatography followed by sieving exclusion chromatography in Superdex 200. The Lc13 was only purified by anion exchange perfusion column chromatography onto Poros HQ. The purified protein preparations had their homogeneities ascertained by denaturing gel electrophoresis (SDS-PAGE), isoelectric focusing and western blot. Estimated pI of 6.43 and 6.42 were observed for Lc9and Lc13, respectively. Molecular weights (MW) determined by SDS-PAGE-10% showed values of 44000 (Lc9) and 88000 (Lc13), while values of 550000 (Lc9) and 282000 (Lc13), were obtained by Superdex- 200 gel filtration. These estimated MW values suggested that both macromolecules in native state are multimeric proteins being formed by identical polypeptide chains. Different protein detections after SDS-PAGE of purified Lc9 and Lc13 showed that the majorimmune-revealed band correspond to the major coomassie brilliant blue R-350 revealed bands. So it concluded that both correspond to the main antigen present in each purified protein preparation (Lc9 and Lc13). For the development of an indirect ELISA for canine visceral leismaniosis diagnosis the antigens Lc9 and Lc13 as well IgG-peroxidase conjugate suitable concentrations were selected for the use in the related serologic assay. According to mentioned serologicalassay the antigen Lc9 gave better results than the antigen Lc13 (Lc9: sensitivity 100%; specificity 95% and Lc13: sensitivity 96%; specificity 92%). These results suggest the use of Lc9 and Lc13 antigens, preferably the former, in immune assays based on ELISA for the improvementof the leismaniasis diagnostic.

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Fattori, Karina Reinaldo [UNESP]. "Apoptose em linfócitosT esplênicos e do sangue periférico em cães naturalmente infectados por Leishmania (L.) chagasi." Universidade Estadual Paulista (UNESP), 2010. http://hdl.handle.net/11449/94952.

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Abstract:

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:27:23Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2010-11-13Bitstream added on 2014-06-13T20:35:49Z : No. of bitstreams: 1 fattori_kr_me_jabo.pdf: 1180528 bytes, checksum: c9f4f1fa166892babcb54db127d3ed53 (MD5)
Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)
O objetivo desde estudo foi avaliar a apoptose de linfócitos T do baço e do sangue periférico de cães naturalmente infectados com leishmaniose visceral (LV) apresentado sintomas clínicos da doença e comparar ao observado em cães saudáveis. Treze cães provenientes do CCZA de Araçatuba (SP) área endêmica para leishmaniose visceral canina foram diagnosticados como positivos para a doença utilizando dos três métodos: o ELISA indireto utilizando antígeno total, a imunocromatografia com antígeno rK39 e a PCR. No grupo controle foram utilizados seis cães oriundos de área não endêmica que apresentaram resultados negativos nos testes para Leishmania spp e apresentaram hemograma normal. Após a eutanásia dos cães infectados, o sangue periférico e fragmentos de baço foram coletados para análise da apoptose. As amostras de baço do grupo controle foram retiradas por excisão cirúrgica após sedação, o sangue foi obtido por punção venosa, e coletado em tubos contendo EDTA. As amostras dos dois grupos foram processadas imediatamente após a coleta para determinação de apoptose utilizando dois marcadores diferentes e simultânea marcação para CD3 com anticorpo monoclonal. Nos cães infectados os linfócitos T do sangue periférico e do tecido esplênico mostram um aumento significativo dos níveis de apoptose comparado com o observado em cães controles. Esses resultados sugerem que em cães infectados a imunossupressão da resposta celular associada à infecção crônica pode ser conseqüência da aceleração das taxas de apoptose de células T, esses dados contribuem para o entendimento da resposta imune em cães infectados com L. (L.) chagasi, que pode levar ao desenvolvimento de medidas profiláticas ou preventivas para estes animais
The aim of this study was to evaluate the apoptosis of T lymphocytes in the spleen and peripheral blood of dogs naturally infected with visceral leishmaniasis demonstrating symptoms of the disease and comparing to those observed in healthy dogs. Thirteen dogs from CCZA of Araçatuba, SP endemic area for canine visceral leishmaniasis were diagnosed as positive for the disease using three methods: ELISA using total antigen, the antigen rK39 immunochromatography and PCR. Six dogs from non-endemic area were tested negative in tests for Leishmania spp and had normal blood account. After euthanasia of infected dogs, the peripheral blood and fragments of spleen were collected for analysis of apoptosis. Samples of spleen in the control group were removed by surgical excision after sedation; blood was obtained by venipuncture and collected into tubes containing EDTA. Samples of both groups were processed immediately after collection to determinate of apoptosis using two different markers and simultaneous marking with CD3 monoclonal antibody. In dogs infected T lymphocytes from peripheral blood and spleen tissue showed a significant increasing in levels of apoptosis compared to those seen in control dogs. These results were supposed to be about those dogs in the immunosuppression of the cellular response associated with chronic infection being a consequence of accelerated rates of apoptosis of T cells, these data contributed to understanding the immune response in dogs infected with L. (L.) chagasi, which may lead to the development of prophylactic or preventive procedures for these animals

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Galvão, Amanda Carla Acipreste. "Diagnóstico de situação epidemiológica da leishmaniose visceral canina em Rio Verde-GO /." Jaboticabal, 2016. http://hdl.handle.net/11449/136275.

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Abstract:

Orientador: Aureo Evangelista Santana
Coorientador: Karina Paes Bürguer
Banca: Annelise Carla Camplesi dos Santos
Banca: Ana Maria Centola Vidal
Banca: José Ribamar Privado Filho
Banca: Maria Angélica Dias
Resumo: A Leishmaniose Visceral Canina (LVC) preocupa as autoridades sanitárias devido ao aumento de sua incidência nos últimos anos, aliado ao fato da situação epidemiológica da enfermidade ser desconhecida na maioria das regiões. Desta forma, o presente estudo objetou realizar o diagnóstico de situação epidemiológica da leishmaniose visceral canina (LVC) no Município de Rio Verde/GO. Para tanto, a pesquisa foi desenvolvida em bairros pré-definidos da região norte do município com a avaliação das condições das três esferas da saúde (animal, humana e ambiental) relacionadas à LVC, por meio de questionários semiestruturados com a participação dos tutores dos animais; a avaliação clínica dos cães e classificação segundo a sintomatologia; a realização do diagnóstico sorológico (ELISA, RIFI e TR DPP) e o geoprocessamento da localidade dos cães reagentes. Na avaliação das condições da saúde animal, os resultados evidenciaram superpopulação canina, especialmente aqueles animais considerados sem controle de mobilidade e sem supervisão, com trânsito livre, sem assistência médicoveterinária. Com relação à saúde humana, destacou-se o convívio íntimo entre o ser humano e o seu animal de estimação, além do agravante do desconhecimento da enfermidade pela população, de seus mecanismos de transmissão, de controle e de prevenção. Sob o olhar ambiental, observou-se problemas de infraestrutura, sendo a falta de saneamento básico a principal delas, além da presença de árvores frutíferas e animais de produção favorecendo o acúmulo de matéria orgânica, facilitando e promovendo o desenvolvimento do vetor. A classificação segundo a avaliação clínica dos cães reagentes (ELISA e RIFI) foi de 65% (13/20) assintomáticos e 35% (7/20) oligossintomáticos. Na avaliação sorológica, 10,38% (55/530) foram reagentes no ELISA, desses 36,37% (20/55) foram...
Abstract: Canine Visceral Leishmaniasis (CVL) is a concern to sanitary authorities due increase on incidence observed recently and lack of knowledge about the disease epidemiological situation in most regions. So, this study focused on to perform epidemiological diagnosis of canine visceral leishmaniasis situation in Rio Verde Municipality, state of Goiás, Brazil. For this purpose, the research was performed in pre-selected neighborhoods in the north region of the municipality embracing all three areas in health (animals, human beings and environment) related to CVL using semi-structured questionnaires to animals' owners, clinical evaluation of animals and classification according to clinical signs, serological diagnosis (ELISA, RIFI and TR DPP) and geospatial analyses of positive dogs. ). A canine overpopulation, especially on those animals that lives free in streets, without supervision of owners and veterinaries were highlighted. In relation to human health, the close contact among humans and animals and the ignorance about this disease epidemiology, prevention and control by the population were shown. About the environmental situation, infrastructural problems, as the needs of basic sanitation, were observed. Also, fruit trees and production animals' presence were observed, which favors organic matter accumulation and allows the vector's development. The clinical classification of the reagents animals (ELISA and RIFI) was 65% (13/20) asymptomatic and 35% (7/20) oligosymptomatic during evaluation on CI. On serological evaluation, 10.38% (55/530) were positive on ELISA and from these animals, 36.37% (20/55) were also positive on RIFI. None of the samples were considered as positive on TR DPP®. The animals considered as positives in ELISA and RIFI were located in nearby houses agreeing with the results of serological tests. The human beings and canine populations in the studied areas have ...
Doutor

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Andrade, Andréa Maria. "Dinâmica populacional canina na área urbana do município de Araçatuba, SP, no período de 1994 a 2004 /." Araçatuba : [s.n.], 2006. http://hdl.handle.net/11449/94707.

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Abstract:

Orientador: Luzia Helena Queiroz da Silva
Banca: Silvia Helena Venturoli Perri
Banca: Fernando Ferreira
Banca: Luzia Helena Queiroz da Silva
Resumo: A população canina de Araçatuba foi acometida em um período dez anos (1994-2004) de duas importantes zoonoses: a Raiva e a Leishmaniose Visceral (LV). Este trabalho objetivou analisar as mudanças ocorridas nesta população durante este período. Para este fim foram utilizados os resultados dos censos caninos realizados nos anos de 1994, 1999 e 2004. Verificou-se que a relação cão/10 habitantes que era 1,69 em 1994 aumentou para 2,03 em 1999 e decresceu a 1,79 em 2004. A quantidade de animais com menos de um ano de idade aumentou de 20% em 1994 para 32% em 2004. No censo canino de 2004 foi observado que o número de cães e sua estrutura etária variaram nos diversos setores do município. Baseado nestes dados sugere-se que os programas de controle populacional canino e de zoonoses sejam direcionados aos setores mais problemáticos da cidade.
Abstract: The dog population of Araçatuba presented in a period of ten years (1994-2004) two important canine zoonosis: rabies and visceral leishmaniasis (VL). This work aimed at checking the changes that happened in this population during this time. For this purpose, we used the census results of the years 1994, 1999 and 2004. We found that the ratio dog/10 habitants that was 1.69 in 1994, increased to 2.03 in 1999 and decreased to 1.79 in 2004. The number of puppies less than 1 year of age increased from 20% in 1994 to 32% in 2004. The 2004 census showed that the number of dogs and the percentage of puppies found in the different areas of the city are variable. Based on these results we suggest that, zoonosis and population control programs could be aimed to the more problematic areas in the city.
Mestre

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Batista, Luís Fábio da Silva. "Identificação de marcadores genéticos associados às imunidades celular, humoral e aos status clínico e de infecção natural pela Leishmania (Leishmania) infantum em cães." Universidade de São Paulo, 2016. http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/10/10133/tde-10062016-150220/.

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Abstract:

A infecção de cães pela Leishmania (Leishmania) infantum resulta em um espectro de manifestações imunopatológicas que dependem da interação parasito hospedeiro e são definidas por fatores ambientais e pela genética do hospedeiro. Apesar disso, a imunogenética da leishmaniose visceral canina (LVC) permanece inexplorada. Nós realizamos diagnóstico laboratorial, clínico, ensaio de linfoproliferação (LPA), quantificação de citocinas, teste de hipersensibilidade tardia à leishmanina (LST), quantificação de IgA, IgE, IgG, IgM anti L. (L. ) infantum, IgG anti saliva de flebotomíneo e genotipagem ampla afim de identificar polimorfismos de nucleotídeo único (SNPs) associados aos diferentes perfis de imunidades celular, humoral, resposta clínica e status de infecção em cães de área endêmica, utilizando modelo de componente de variância (EMMAX). O efeito de estrutura da amostra foi controlado em todas as análises. A presença ou ausência de infecção pela L. (L. ) infantum foi associado a regiões contendo os genes PRGR_CANFA, RAB38, NOX4, PRKCI e SMAD7, IL1RA, IL12A_CANFA relacionados à ativação de fagócitos, mecanismos microbicidas, sobrevivência intracelular de patógenos e resposta pró inflamatória; a resposta clínica foi associada a regiões contendo os genes CATA_CANFA, LIAS, IL17A e IL17F relacionados à proteção contra danos do estresse oxidativo e indução de resposta pró inflamatória; o resultado LST+ foi associado à resposta Th1, controle da infecção mas não preveniu a manifestação de sinais clínicos, enquanto o LST- foi associado à resposta Treg e aumento do parasitismo. O resultado do LST foi associado a regiões contendo os genes MEP1B, PTPRM, TLN1, TGFBR1, ITGA9, EPCAM e CALM1 envolvidos com maturação de fagócitos, migração e adesão de leucócitos, estabilidade da sinapse imunológica, diferenciação e proliferação de linfócitos. A linfoproliferação foi dependente da carga parasitária e associada a regiões contendo os genes FOCAD, PIAS2, SMAD2 e IL6R envolvidos com supressão tumoral e diferenciação de linfócitos Th17 ou Treg; o aumento dos níveis de IgA, IgE e IgG anti L. (L. ) infantum foi associado à LVC sintomática enquanto o de IgG anti saliva de Lutzomyia longipalpis foi associado à exposição e infecção assintomática. Quanto à resposta de IgM, foram identificados SNPs nos genes NXN e SH3BP5 relacionados com inibição do crescimento, diferenciação e ativação de linfócitos B e vias de sinalização de TLR4 e TLR9; para IgG anti - L. (L. ) infantum foram identificadas regiões contendo os genes IL17RB, SH2B3 e replicação do loci de susceptibilidade NOX4, RAB38, CTSC envolvidos com linfopoiese, citocinese, resposta pró inflamatória, mecanismos microbicidas, sobrevivência intracelular de Leishmania; os níveis de IgA foram associados a regiões contendo os genes LIN28A e MAFB implicados na predisposição à nefropatia glomerular, já os níveis de IgG anti saliva de Lu. longipalpis foram associados a regiões contendo os genes ERBB2IP, CD180, RAB7A_CANFA, FOXP1, RUNX1, SOD1, Q3HTU8_CANFA, IFNAR1, IFNAR2 e IFNGR2 envolvidos com supressão celular, produção de imunoglobulina via TLR4 e sobrevivência intracelular de Leishmania. Esses resultados apontam regiões cromossômicas úteis para a elucidação da resposta à infecção por L. (L. ) infantum em cães e alvos potenciais para estudos funcionais, estratégias profiláticas e terapêuticas
Leishmania (Leishmania) infantum infection in dogs leads to a range of immunopathological responses, which depend on a parasite - host interaction and are defined by environmental factors and genetic of host. Neverthless, immunogenetic of the canine leishmaniasis (CanL) remains unexplored. We performed diagnosis and clinical evaluation, lymphoproliferation assay (LPA), leishmanin skin test (LST), quantification of cytokine, anti-L. (L. ) infantum IgA, IgE, IgG, IgM, anti- sandfly saliva IgG levels and genome wide association scan of 110.165 SNPs (GWAS) in order to indentify loci associated to clinical, antibody, cell-mediated responses and status of infection in 189 dogs, employng a expedited efficient mix model of association (EMMAX). Control of stratification effects due to sample structure was evideced by the low inflation factors. Status of infection was associated to SNPs in linkage desequilibrium (LD) with PRGR_CANFA, RAB38, NOX4, PRKCI and in the neighborhood of SMAD7, IL1RA, IL12A_CANFA genes related to phagocyte maturation, killing of pathogens and proinflamatory response; clinical outcome was associated to CATA_CANFA, LIAS, IL17A, IL17F loci involved in prevention of oxidative burst mediated injury and proinflamatory response; LST+ was associated to Th1 response although it has not prevented symptoms, whereas LST- was associated to Treg response and enhanced parasite load. Overall, LST response was associated to MEP1B, PTPRM, TLN1, TGFBR1, ITGA9, EPCAM e CALM1 loci committed to phagocyte maturation, leukocyte adhesion and migration, stability in immunological synapse, lymphocyte diferenciation and proliferation. Lymphocyte proliferation was rely on parasit burden and associated to FOCAD, PIAS2 loci in the neighborhood of SMAD2 e IL6R genes, wich are implicated in tumor supression and Treg/Th17 decision; Increased levels of anti-L. (L. ) infantum IgA, IgE, IgG were observed in severity of CanL. In contrast, anti- sandfly saliva IgG was enhenced in asymptomatic dogs. IgM response was associated to NXN e SH3BP5 loci related to fate, growing and activation of B cells; anti-L. (L. ) infantum IgG levels was associated to region containing IL17RB, SH2B3 and replication of NOX4, RAB38, CTSC suscptibility loci involved in proinflamatory response, microbicidal activity, lymphopoiesis and cytokinesis; IgA levels were associated to SNPs on LIN28A and MAFB, wich are implicated glomerular nephropathy, whereas anti-sandfly saliva IgG levels were associated to ERBB2IP, CD180, RAB7A_CANFA, FOXP1, RUNX1, SOD1, Q3HTU8_CANFA, IFNAR1, IFNAR2 e IFNGR2 loci, wich are related to supression of inflamation, antibody response through the TLR4 pathway and survival of intracellular pathogens. These findins provide insights for responses to L. (L. ) infantum infection and point to potential targets for functional investigations, therapeutic and prophylactic strategies

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Dissertations / Theses on the topic 'Canine leishmaniasia'

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