Dissertations / Theses on the topic 'Biosynthèse in vitro'
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Mansouri, Lhouceine. "Extraction et purification de certaines saponines triterpéniques pentacycliques d'espèces végétales du groupe de la gypsophile : plantes entières et cultures in vitro ; contribution à l'étude de leur biosynthèse." Toulouse, INPT, 1995. http://www.theses.fr/1995INPT016A.
Abstract:
Notre travail a consiste en l'etude de la structure chimique de trois groupes de saponines dans les plantes ou ils sont principalement presents pour tenter d'elucider leur presence et leur role physiologique dans la plante. Dans la premiere partie chimique, nous avons ameliore l'extraction et la determination quantitative de l'acide oleanolique-saponines et de l'hederagenine-saponines dans les differents organes de lierre (tiges, feuilles et fruit) au cours de differentes periodes physiologiques de la plante. Cette etude a montre que l'ac. Oleanolique-saponines etaient principalement presentes en periode vegetative et inversement la premiere etape d'oxydation de l'hederagenine-saponines se realisait surtout au cours de la periode de floraison de la plante. La deuxieme partie chimique de ce travail traite l'extraction et la purification du gypsogenine-saponines de differentes matieres premiere vegetales: saponine blanche pure merck, les racines et cultures cellulaires de gypsophila paniculata et saponaria officinalis. Dans la 3eme partie physiologique, nous avons poursuivi une selection de souches productrices de saponines de quatre especes de gypsophila sp confirmant ainsi les resultats du maintien de la production de saponines (avec 0,7% pour les cellules en suspension de g. Pa. 6r). Les parties aeriennes multiples de g. Pa. 7h cultivees in vitro se sont reveles etre productrices de saponines, alors que cette production est reservee aux racines dans la plante entiere. Dans la 4eme partie biochimique, nous avons etudie la premiere etape de la chaine de biosynthese de ces saponines triterpeniques. Nous avons montre l'effet inhibiteur et stimulateur du gypsogenine-3,0-glucuronide et de la decaline respectivement sur la biosynthese des saponines
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Khater, Fida. "Identification et validation fonctionnelle de nouveaux gènes impliqués dans la voie de biosynthèse des composés phénoliques." Thesis, Montpellier, SupAgro, 2011. http://www.theses.fr/2011NSAM0018/document.
Abstract:
Les proanthocyanidines (PA) du raisin jouent un rôle majeur dans les propriétés organoleptiques du vin notamment dans l'astringence et la stabilité de la couleur. Elles sont accumulées principalement dans la pellicule et les pépins pendant les premiers stades du développement de la baie. La biosynthèse des PA commence à être bien décrite, cependant certaines étapes restent à élucider.Une étude transcriptomic avait permis d'indentifier de nouveaux gènes potentiellemnt impliqués dans la biosynthèse des PA (Terrier et al., 2009). Parmi ces gènes figuraient 3 glucosyltransférases et 2 glucose- acyltransférases.Les trois glucosyltransférases VvgGT1, VvgGT2 et VvgGT3 présentent de fortes homologies entres elles et avec d'autres glucosyltransférases capables de catalyser la formation de glucose ester. Les transcrits sont exprimés durant les premiers stades de développement de la baie principalement dans les pépins et la pellicule mais aussi dans la pulpe pour VvgGT2. Les propriétés de ces 3 enzymes (Km, Vm, spécificité de substrat, effet du pH) ont été étudiées in vitro après production de protéines recombinantes. Les 3 VvgGTs sont capables de catalyser la synthèse d'esters de glucose en présence de dérivés d'acide hydroxybenzoique ou d'acide hydroxycinnamique.Deux acyltransférases VvGAT1 et VvGAT2 ont été isolées. Elle présente de fortes similarités avec des acyltransférases glucose-ester dépendantes de type serine carboxypeptidase like. Les transcrits sont exprimés surtout avant la véraison, dans les pépins et la pellicule pour VvGAT1 et dans la pulpe et les pépins pour la VvGAT2. L'expression hétérologue dans différents hôtes n'a pas permis de détecter d'activité enzymatique. Les analyses en microscopie confocale suggèrent que VvGAT1 fusionnée à une GFP est localisée dans des vésicules cytoplasmiques.L'implication successive des VvgGTs et des VvGATs dans la galloylation des PA et dans la synthèse d'esters d'acides hydroxcinnamiques est discutéeGrape proanthocyanidins (PA) play a major role in organoleptic properties of wine, being involved in astringency and color stability. They are accumulated mainly in skin and seeds during early stages of berry development. Numerous structural genes involved in PA biosynthesis have already been identified even in grape, but some steps are still not documented.A previous transcriptomic study led to identify new genes putatively involved in the PA pathway (Terrier et al., 2009). Among them, 3 glucosyltransferases and 2 glucose acyl transferases were identified. The objective of this work is to clarify the function of these genes in the phenylpropanoid pathway.The three glucosyltransferases called VvgGT1, VvgGT2, VvgGT3 displayed high sequence similarities between them and with other plant glucosyltransferases able to catalyze the formation of glucose esters. The transcripts are expressed in the early stages of grape berry development, mainly in skins and seeds and also in the pulp for VvgGT2. The properties of these 3 enzymes (Km, Vm, substrate specificity, pH sensitivity) were studied in vitro after production of recombinant proteins. The three of them are able to catalyse the synthesis of glucose ester with derivates of hydroxybenzoic acids and hydroxycinnamic acids as substrates and with similar kinetic properties.Two glucose-acyltransferases called VvGAT1 and VvGAT2 were isolated. They displayed high sequence similarity with other Serine carboxypeptidase like acyltransferases-glucose dependent. The transcripts are expressed in early stages of grape berry development mainly in skins and seeds for VvGAT1 and in pulp and seeds for VvGAT2. Heterologous expression of the proteins in different hosts were unsuccessful. The confocal microscopy data suggest that VvGAT1 fused to GFP are localized in cytosolic vesicles.The successive involvement of those VvgGT and VvGAT in the galloylation of PAs and in the synthesis of hydroxycinnamic esters is discussed
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Mairesse, Gilles. "Contribution à l'optimisation de la production d'alcaloïdes tropaniques par culture in vitro de cellules végétales issues de Solanacées : influence de divers précurseurs : relation avec la production de certains polyphénols." Compiègne, 1990. http://www.theses.fr/1990COMPD332.
Abstract:
Les cellules végétales de Duboisia myoporoïdes cultivées in vitro produisent très peu d'alcaloïdes tropaniques par rapport à la plante-mère. Cependant, puisqu'elles ont gardées leurs potentialités métaboliques, cette carence en matière de production peut avoir plusieurs origines. Les techniques de dosage des alcaloïdes tropaniques utilisées (ELISA et CLHP) sont très sensibles et permettent de déceler de faibles augmentations de production. L'optimisation de procédés analytiques n'a pas eu d'effet sur les teneurs en alcaloïdes des extraits provenant de cellules cultivées in vitro : les alcaloïdes tropaniques ne sont donc pas stockés sous des formes inhabituelles rendant leur extraction difficile. L'hyoscyamine et la scopolamine exogènes ne sont pas dégradées rapidement dans les conditions de culture, ces molécules ne sont donc pas catabolisées au fur et à mesure de leur production. Il apparaît donc que c'est la biosynthèse des alcaloïdes tropaniques qui est inhibée, un déficit de précurseurs pourrait être en cause. L'ajout de précurseurs de l'hyoscyamine et de la scopolamine (le tropanol, le scopanol et l'acide tropique) aux cellules de Duboisia myoporoïdes n'a pas permis d'augmenter les teneurs en alcaloïdes tropaniques des cellules. Cependant, ces précurseurs semblent être utilisés par les cellules. Par contre, la mise en culture in vitro des cellules végétales de Solanacées provoque une modification de leur métabolisme secondaire au profit de la synthèse de composés polyphénoliques, en particulier de coumarines, qui sont stockés dans les cellules sous forme glycosylée.
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Briot, Pascal. "Etudes in vivo et in vitro de la biosynthèse des œstrogènes chez la hase (Lepus europaeus)." Paris 6, 1986. http://www.theses.fr/1986PA066159.
Abstract:
Etude sur le sang des veines périphériques, ovariennes, utérines au cave de femelles gestantes ou non gestantes, stimulées par PMSG ou non stimulées. In vitro étude sur tissus incubés (follicules, corps jaune, surrénale, endomètre ou placenta).
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Le, Flem Guillaume. "Synthèse d'analogues séquentiels de l'insuline : étude de leur relation strucuture-fonction et de leur activité biologique in vitro." Amiens, 2002. http://www.theses.fr/2002AMIED002.
6
Ronot, Xavier. "Le Chondrocyte articulaire du lapin : évolution in vitro de la prolifération, de la biosynthèse du collagène, du cytosquelette et de l'activité mitochondriale." Paris 7, 1987. http://www.theses.fr/1987PA077236.
Abstract:
Le chondrocyte, cellule constitutive de la matrice cartilagineuse, a "in vivo" une identite phenotypique caracterisee par un rythme de croissance faible, une synthese specifique de collagene type ii et de proteoglycanes, une energetique cellulaire basee sur un metabolisme de type fermentaire entrainant un faible niveau d'activite mitochondriale. L'examen de l'evolution au chondrocyte en culture et des effets d'agents pharmacologiques permet de conclure sur l'interieur de ce systeme modele, les ameliorations envisageables concernant l'environnement de culture et les perspectives d'application en pathologie et en pharmacologie
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Wang, Xiao Qiang. "Function and regulation of 17B-hydroxysteroid dehydrogenase type7 (17B-HSD7) in sex hormone biosynthesis and breast cancer : in vitro, in vivo, proteomic and three dimensional co-culture studies." Doctoral thesis, Université Laval, 2015. http://hdl.handle.net/20.500.11794/27483.
Abstract:
La 17β-hydroxystéroïde déshydrogénase humaine de type 7 (17β-HSD7) a une double fonction dans la cholestérologénèse et la stéroïdogénèse, et qui est impliquée à la fois dans la formation d’estradiol (E2) à partir de l’estrone (E1), et dans la dégradation de la dihydrotestostérone (DHT) en un œstrogène faible (3β-diol). Cependant, sa fonction dans le cancer du sein dépendant des œstrogènes (positif aux récepteurs oestrogéniques (RE+) n’a pas toujours été claire. L’E2 stimule la croissance des cellules cancéreuses du sein (CCS; cellules MCF-7) via les RE tandis que la DHT a un effet antiprolifératif via le récepteur des androgènes. Mes études in vitro, in vivo et de protéomique, ont apporté les résultats suivants : (1) L’inhibition de la 17β-HSD7 par un inhibiteur spécifique (INH7) dans les CCS a entrainé une baisse de l’E2, une augmentation de la DHT, une interruption du cycle cellulaire et une régulation négative de cette enzyme. De plus, l’INH7 a permis de réduire des tumeurs xénogreffes qui a été accompagnées d’une diminution de l’E2 et une augmentation de la DHT sériques. (2) L’INH7 a modulé des protéines impliquant différents processus biologiques. L’INH7 a supprimé l’expression de la protéine 78 régulée par le glucose (Grp78) et de fait a augmenté l’apoptose des CCS envers le Letrozole, un inhibiteur de l’aromatase. (3) Les interactions entre les CCS et les fibroblastes tumoraux montrent que la 17β-HSD7 était l’enzyme la plus régulée dans les CCS tandis que l’aromatase était l’enzyme les plus régulées dans les fibroblastes. De telles régulations ont mené à une augmentation de la conversion de l’E2 à partir de ses précurseurs, et a ainsi encouragé la prolifération cellulaire des CCS. Si l’augmentation de la prolifération cellulaire est bloquée par le Letrozole des résultats plus significatifs ont été observés par l’INH7 qui bloque la dégradation de la DHT. (4) L’analyse des données intégratives basée sur The Cancer Genome Atlas (TCGA) confirme l’amplification significative du gène HSD17B7 dans les divers cancers du sein comparé à des tissus mammaires sains. Ainsi, nous pensons que la 17β-HSD7 devrait être une nouvelle cible thérapeutique des cancers RE+ du sein.Human 17β-hydroxysteroid dehydrogenase type 7 (17β-HSD7) displays a dual function in cholesterogenesis and steroidogenesis. In steroidogenesis, it is both involved in the formation of the estradiol (E2) from estrone (E1) and in the degradation of dihydroterstosterone (DHT) into weak estrogen 5α-androstane-3β, 17β-diol (3β-diol). However, its function in estrogen dependent breast cancer (estrogen receptor positive, ER+) has been unclear for many years. E2 stimulates breast cancer cells (BCCs, MCF-7 cells) growth via estrogen receptor (ER) whereas DHT displays anti-proliferative effects via androgen receptor (AR). In the present thesis, the function of 17β-HSD7 in ER+ breast cancer was studied with in vitro, in vivo, proteomics and three dimensional (3D) co-culture model and results were described: (1) Inhibition of 17β-HSD7 by its selective inhibitor (INH7) in BCCs induced significant lower E2, higher DHT, cell cycle arresting and negative regulating of the same enzyme. Such inhibition induced significant shrinkage of xenograft tumors accompanied by decreased E2 and elevated DHT in plasma. (2) Inhibition of 17β-HSD7modulated 104 proteins involved in different biological processes. INH7 especially suppresses the expression of glucose regulated protein 78 (GRP78) and consequently enhanced apoptosis of MCF-7 towards aromatase inhibitor. (3) The interactions between BCCs and tumor fibroblast modulate steroidogenic enzymes. 17β-HSD7 was the most modulated enzyme in MCF-7 cells whereas aromatase was the most regulated enzyme in fibroblast (Hs578Bst). Such regulations led to an increasing of E2 conversion from precursors and promoted MCF-7 cells’ proliferation. The increased cell proliferation was blocked by aromatase inhibitor in 3D co-culture system, but more significant results were observed with INH7 which blocked DHT degradation. (4) Integrative data analysis with The Cancer Genome Atlas (TCGA) confirmed the significant amplification of 17β-HSD7 in various breast cancers compared to normal breast tissue. Thus, in the present thesis, 17β-HSD7 was characterized as a novel therapeutic target for estrogen dependent breast cancer in postmenopausal women.
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Stiévenard, Catherine. "Reproduction sexuée d'Uncinula necator (schw. ) Burr. , agent de l'oïd͏ium de la vigne : maîtrise in vitro et rôle dans la résistance aux fongicides inhibiteurs de la biosynthèse des stérols." Bordeaux 2, 1998. http://www.theses.fr/1998BOR20569.
Abstract:
Notre étude vise à déterminer le rôle de la reproduction sexuée d’Uncinula Necator dans l’évolution de la résistance de ce parasite aux fongicides inhibiteurs de la biosynthèse des stérols. Le cycle sexué de ce champignon biotrophe a éte réalisé en conditions contrôlées. Les conditions favorables à cette réalisation nécessitent d’assurer un juste équilibre entre le développement du champignon et la survie prolongée de l’hôte. Pour cela, un support végétal de réceptivité moyenne et des conditions environnementales adaptées sont nécessaires. Des ascospores infectieuses ont été obtenues moins de trois mois après le croisement de deux souches d’oïdium connues. La filiation a été vérifiée par la technique de RAPD et deux marqueurs du type sexuel ont été mis en évidence. L’hétérothallisme bipolaire du champignon a été confirmé. D’autres facteurs que le type sexuel semblent néanmoins influencer la production de cléistothèces matures. Un croisement a été réalisé entre une souche sensible à quatre DMIs et une souche résistante à trois d’entre eux. L’étude de la sensibilité de la descendance permet : - d’affirmer que la résistance d’U. Necator à ces fongicides est de nature polygénique, probablement additive ; - de corroborer que la résistance croisée entre DMIs n’est pas systématique ; - de confirmer que la présence de la mutation ponctuelle Mut-1 sur le gène de la C14-déméthylase confère une résistance au triadiménol ; - d’observer l’apparition ou l’expression d’une nouvelle résistance. L’étude de l’effet d’un DMI, sur la biosynthèse des stérols parentale et filiale a par ailleurs confirmé la présence d’un mécanisme de résistance induisant une surproduction des stérols. Ces résultats et l’observation de l’augmentation de résistance d’une population d'oïdium après deux cycles sexués successifs en laboratoire permettent d’affirmer que la reproduction sexuée joue un rôle important dans l’évolution et la persistance de la résistance au vignoble. L’absence de liaison entre le type sexuel et la résistance aux fongicides étudiés suggère la création à l’infini de nouveaux phénotypes de résistance
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Rochd, Mohamed. "Etude de la biosynthèse des saponines et des stérols produits par la plante et par des tissus cultivés in vitro de Gypsophila paniculata L." Toulouse 3, 1990. http://www.theses.fr/1990TOU30096.
Abstract:
Des tissus de g. Paniculata cultives in vitro produisent des saponines et cette production est parallele a la croissance des cellules en milieu non renouvele. L'incorporation de la radio-activite fournie sous forme d'acetate de na 2-#1#4c, dans les saponines et les sterols est rapide et reste constante pendant au moins 72 heures. La repartition de la radioactivite entre les sterols et les saponines est sensiblement equivalente. L'addition de gypsogenine 3,0-glucuronide exogene a une concentration de 16 mg/l a des cultures in vitro de g. Paniculata, ne perturbe pas leur croissance et a pour effet de reduire la synthese des saponines endogenes, sans perturber celle des sterols. Le squalene s'accumule momentanement sous l'action du gypsogenine 3,0-glucuronide. L'etude de la localisation de la biosynthese des saponines dans la plante montre que les racines sont le lieu de synthese et d'accumulation de ces molecules, alors que les sterols sont synthetises dans les differentes parties de la plante. Les tiges et les feuilles ne contiennent pas de saponines. Seules les fleurs, dans la partie aerienne de la plante, en contiennent une faible quantite. La teneur en saponines dans les racines est la plus elevee au printemps avant la floraison et la plus faible en ete en pleine floraison. La teneur dans les racines augmente avec l'age de la plante, au cours des cycles annuels successifs
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Dauchel, Hélène. "Le système du complément et la cellule endothéliale : biosynthèse in vitro des protéines de la voie alterne et activation pathologique au cours des vascularités leucocytoclasiques." Rouen, 1993. http://www.theses.fr/1993ROUES032.
Abstract:
Ce travail est consacré à l'analyse des relations existant entre la cellule endothéliale et le complément au cours de l'inflammation. Une première approche a consisté en une étude in vitro de la synthèse constitutive et de sa régulation, sous l'influence de cytokines pro-inflammatoires et d'un agent pharmacologique anti-inflammatoire, par les cellules endothéliales, de protéines essentielles de la voie alterne: les protéines activatrices C3 et facteur B et les protéines inhibitrices facteur H et facteur I. Les résultats suggèrent que, in vivo, les cellules endothéliales seraient orientées, dans des conditions physiologiques normales, vers une fonction inhibitrice de l'activation spontanée du complément par la voie alterne, c'est-a-dire vers une fonction anti-inflammatoire. Cytokines et corticoïdes influenceraient les synthèses dans un sens, qui respectivement, favoriserait l'activation locale du complément ou au contraire renforcerait son inactivation constitutive. L'existence de ces synthèses locales hautement régulées des protéines de la voie alterne du complément constituerait de nouveaux éléments dans les processus d'activation de l'endothélium au cours de l'inflammation et d'inactivation de l'endothélium au cours de glucocorticothérapie. La deuxième approche est une étude clinique de l'implication du complément au cours de pathologies inflammatoires de l'endothélium à complexes immuns: les vascularités leucocytoclasiques cutanées. Elle a permis de démontrer: i) l'intérêt, dans l'exploration clinique du complément au cours de ces maladies, de nouveaux dosages plasmatiques des marqueurs d'activation initiale et finale, le fragment C3d,g et le complexe d'attaque membranaire (CAM); ii) l'implication de l'intégralité de la cascade, jusqu'à formation du CAM à la surface de l'endothélium, dans la genèse des lésions vasculaires; iii) la responsabilité potentielle prépondérante des immunoglobulines A dans l'activation pathologique du complément; iv) l'intervention d'un processus de contrôle de l'activation par les protéines régulatrices du complément. A la fois source et cible du complément, l'endothélium pourrait potentialiser le processus inflammatoire local, mais aussi subir les dommages consécutifs à son activation pathologique
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Bourahla-Fodil, Ilham. "Biosynthèse des macromolécules de la matrice extracellulaire par des fibroblastes cutanés en fonction du vieillissement in vitro. Modulation par le récepteur de l' élastine laminine." Paris 6, 1998. http://www.theses.fr/1998PA066041.
Abstract:
La matrice extracellulaire (mec) comporte un grand nombre de macromolécules. Leur biosynthèse suit un programme qui varie selon les tissus conjonctifs, évolue avec l'âge et avec les pathologies comme l'athéro-artériosclérose ou l'arthrose. Ce programme définit le phénotype des cellules différenciées. Cette régulation est en partie génétiquement déterminée et dépend aussi de l'interaction entre les cellules et la mec. Ces interactions sont médiées par des récepteurs, intégrines et autres. La question posée au début de ce travail a été de savoir si le récepteur d'élastine-laminine intervient dans la régulation de la biosynthèse de certaines macromolécules et dans la modulation au cours du vieillissement. Nous avons pour cela utilise le modèle de vieillissement en culture de Hayflick, des fibroblastes de peau humaine en culture monocouche aux 5ème, 10 ème et 15ème passages. Les fibroblastes ont été incubes en présence d'agoniste (-élastine), d'antagoniste (mélibiose) du récepteur ou de l'association des deux et leurs effets sur la biosynthèse de la fibronectine, des collagènes et des protéoglycannes ont été comparés au témoin cultivé sans effecteurs. Nous avons constaté une augmentation de la biosynthèse des protéines totales, de la fibronectine et des glycosaminoglycannes au cours des passages. Nous avons également noté une diminution de la teneur en hyaluronane avec le nombre de passages. Le melibiose a permis d'inhiber cette baisse attribuée a une dégradation post-synthétique de l'hyaluronane au cours du vieillissement cellulaire in vitro. Le melibiose a également permis de compenser l'augmentation age dépendante de la biosynthèse de la fibronectine. Ces effecteurs n'ont provoque aucune modification mesurable de la biosynthèse des collagènes majeurs des fibroblastes. Par contre, en présence de melibiose, nous avons enregistré une augmentation de la néosynthèse des glycoconjugues. Contrairement aux hypothèses en cours quant au fonctionnement de ce récepteur, l'association de l'agoniste et de l'antagoniste a provoque des modifications des biosynthèses, opposées à celles obtenues en présence de l'un ou de l'autre des effecteurs utilise seul. Ceci est en contradiction avec l'hypothèse selon laquelle la -élastine et le disaccharide réagissent de façon compétitive vis-à-vis du récepteur. D'autre part nous avons montré que le lactose, un -galactoside et le melibiose, un -galactoside reconnaissent tous les deux la sous-unité 67 kda du récepteur, ce qui ne correspond pas à sa classification en galectine.
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Myint, Aung. "Criblage de souches d'actinomycètes productrices d'antifongiques nonpolyéniques : production, extraction, purification et caractérisation des composés antimicrobiens biosynthétisés." Vandoeuvre-les-Nancy, INPL, 1997. http://www.theses.fr/1997INPL049N.
Abstract:
L’objectif de ce travail est la recherche de nouveaux antifongiques nonpolyéniques produits par des actinomycètes, en vue d'applications dans les domaines agricoles, agro-alimentaires et médicaux. Un criblage de souches d'actinomycètes isolés du sol, produisant des activités inhibant la croissance de levures et de moisissures a été effectué. Les souches productrices d'antifongiques polyéniques ont été écartées. Deux souches, A217 et A221, ont été retenues, et identifiées. Elles appartiennent au genre Streptomyces. Des milieux de culture liquides ont été mis au point pour permettre une production satisfaisante des activités antilevuriennes et antifongiques. Ils n'ont pas été autrement optimisés. Des méthodes d'extraction par solvants, de séparation et de purification des composés actifs par chromatographie sur gel de silice, chromatographie sur colonne d'acide silicique et chromatographie liquide à haute performance ont été mises au point. Les spectres d'activités antimicrobiennes des composés obtenus ont été établis : activités contre des bactéries Gram (-) et Gram (+), contre des levures, contre des moisissures. Les composés purifiés obtenus ont été caractérisés par leurs propriétés de solubilité dans différents solvants, leurs spectres d'absorption dans l'ultraviolet et le visible, et par diverses réactions chromogéniques. Les études spectroscopiques en infrarouge, ainsi que l'analyse par spectrométrie de masse et de RMN (1H et 13C), de deux des composés obtenus, A217-B et A221-A, ont été réalisées. Ces spectres, ainsi que la composition élémentaire de ces composés ont permis de déterminer leurs structures. Le composé A217-B appartient à la classe des antibiotiques ionophores et au groupe des macrotétrolides. Le composé A221-A s'est révélé être l'acide phénylacétique.
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Vibes, Jean. "Effets de Crataegus oxyacantha L. Sur la biosynthèse in vitro et ex vivo de la thromboxane A2 et de la prostacycline. Relations avec les activités anti-agrégante plaquettaire et coronarodilatatrice de la plante." Toulouse 3, 1994. http://www.theses.fr/1994TOU30136.
Abstract:
Une premiere etude experimentale montre comment un extrait hydro-ethanolique (14) titre a 10% de sommites fleuries dessechees de crataegus oxyacantha l. , a la fois inhibe la biosynthese de txa#2, vasoconstrictrice et pro-agregante plaquettaire, et stimule celle de pgi#2, vasodiladatrice et anti-agregante. Une deuxieme etude experimentale portant sur deux fractions de l'extrait, de titre methanolique different (95 et 50), fait apparaitre que l'inhibition de la biosynthese de txa#2 serait a mettre plutot sur le compte des principes solubles dans l'eau (polyflavannes), tandis que la stimulation de la biosynthese de pgi#2 serait a mettre plutot sur le compte des principes solubles dans l'alcool (flavonoides). Une derniere experimentation revele que l'activite anti-thromboxane la plus puissante s'observe avec les molecules de catechine et d'epicatechine. La mise en lumiere d'un mecanisme pharmacologique fondamental grace auquel crataegus influe sur l'homeostasie vasculo-plaquettaire contribue a justifier l'usage de la plante dans certaines formes cliniques d'ischemie et thrombose vasculaires
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Legoedec, Jocelyne. "Le muscle squelettique humain : une source locale de complément. Analyse in vitro de la biosynthèse et de l'activation des protéines du complément par les myoblastes humains." Rouen, 1997. http://www.theses.fr/1997ROUES025.
Abstract:
Ce mémoire de thèse présente l'étude de l'expression des protéines d'activation et de régulation du système du C par les myoblastes humains normaux et tumoraux en culture. Différentes approches expérimentales ont été utilisées pour l'analyse protéique dans les surnageants de culture (western-blot, marquage biosynthétique et immunoprécipitation, immunofluorescence, dosages ELISA) et pour l'analyse de l'expression des ARNm (RT-PCR). La régulation de cette synthèse par différentes cytokines est envisagée afin d'analyser les variations dans un contexte inflammatoire. Nous montrons que les myoblastes humains normaux sont capables in vitro d'exprimer l'ensemble des protéines des voies d'activation classique et alterne du C. De plus, ils peuvent activer directement le C autologue via la voie classique mais sont protégés de la lyse par l'expression abondante de protéines de régulation solubles et membranaires du système du C. D'une manière générale, les synthèses sont constitutives et stimulées par les cytokines de l'inflammation. Seul le CR1 n'est pas exprimé par les myoblastes et les myotubes, mais l'utilisation de CR1 soluble (CR1s) diminue l'activation du C par les myoblastes in vitro. Nous émettons l'hypothèse qu'une production endogène de C par le muscle squelettique in vivo pourrait avoir un rôle différent selon le niveau d'activation du système : une activation sublytique aurait un effet physiologique dans la régénération tissulaire tandis qu'une activation incontrôlée serait impliquée dans les processus pathologiques par amplification de l'inflammation et destruction cellulaire locale. Il sera important dans l'avenir de déterminer le rôle précis de l'expression locale de C dans le muscle squelettique. Actuellement, cette étude apporte des précisions qui peuvent être utiles pour améliorer l'utilisation de la cellule musculaire dans le cadre de la thérapie génique. L'utilisation in vitro et in vivo de CR1s dans de nombreuses pathologies expérimentales limite les dommages cellulaires inhérents au C. Le CR1s utilisé par voie systémique pourrait améliorer la thérapie génique en augmentant la survie des myoblastes injectés et donc l'efficacité de la production du facteur codé par le gène d'intérêt.
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Couillaud, Julie. "The terpene mini-path : nouvel accès aux terpènes et exploration de l'espace chimique par une cascade enzymatique originale." Electronic Thesis or Diss., Aix-Marseille, 2021. http://www.theses.fr/2021AIXM0188.
Abstract:
À ce jour, les terpénoïdes constituent la classe de produits naturels la plus abondante et diversifiée avec plus de 80000 composés décrits et dont les propriétés structurales, biologiques (antibiotique, anticancéreux, antipaludique…) et physico-chimiques (arôme, parfum, colorant…) retiennent l’attention de la communauté scientifique. Cependant, leur accès est limité par une faible disponibilité par extraction à partir de sources naturelles ; une synthèse chimique souvent coûteuse et laborieuse; et des voies de biosynthèses longues. En combinant des approches bioinformatiques, statistiques, biochimiques et de biologie moléculaire, nous avons développé la « mini-voie des terpènes », à seulement deux étapes enzymatiques, comme alternative synthétique et biosourçable pour l’accès aux DMAPP et IPP, précurseurs universels des terpènes. Cette nouvelle voie artificielle a permis la synthèse de différents terpénoïdes naturels et également non-naturels tels que des dérivés cyclobutyliques, en l’absence d’ingénierie métabolique et enzymatique. Ainsi, la mini-voie offre un accès facilité à l’ensemble des terpénoïdes et constitue un nouvel outil biosynthétique attractif pour l’exploration de la diversité de l’espace chimique des terpènesTo date, terpenoids form the most abundant and diversified class of natural products with more than 80,000 compounds whose structural, biological (antibiotic, anticancer, antimalarial, etc.) and physicochemical (flavor, fragrance, dye, etc.) properties hold the attention of the scientific community. However, their access is limited because of the low available quantity by extraction from natural sources; an often expensive and laborious chemical synthesis; and long biosynthetic pathways. By combining bioinformatic, statistical, biochemical and molecular biology approaches, we have developed the « Terpene mini-path », with only two enzymatic steps, as a synthetic and potentially bio-sourced alternative to access DMAPP and IPP, universal precursors of terpenes. This new artificial pathway allowed the synthesis of various natural and unnatural terpenoids, such as cyclobutylic derivatives, in the absence of any metabolic and enzymatic engineering. The mini-path provides thus an easy access to all terpenoids and represents an attractive new biosynthetic tool to explore the diversity of the terpene chemical space
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Badolo, Lassina. "Contribution à la compréhension du rôle de la biosynthèse des polyamines dans la prolifération cellulaire in vitro :cas particuliers de dérivés N, N'-bisbenzyl-a, w-diaminoalkanes." Doctoral thesis, Universite Libre de Bruxelles, 1999. http://hdl.handle.net/2013/ULB-DIPOT:oai:dipot.ulb.ac.be:2013/211971.
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Gasque, Philippe. "Expression du complément par des cellules du système nerveux central : analyse in vitro de la biosynthèse des protéines du complément par un modèle de lignées d'astrocytes humains." Rouen, 1993. http://www.theses.fr/1993ROUES038.
Abstract:
En 1987, Levi-Strauss et Mallat décrivirent, pour la première fois, la synthèse in vitro de deux composants du complément (C), le C3 et la facteur B (FB), par des astrocytes de rongeurs. Nous avons voulu poursuivre cette observation en réalisant une étude sur l'expression in vitro de 20 composants du C, de la voie alterne (C3, FB, FD, FP, FH, FI), de la voie classique (C1q, C1r, C1s, C1-Inh, C4, C4bp, C2, C3), et de la voie effectrice du complexe d'attaque membranaire (CAM) (C5, C6, C7, C8, C9, S-protein), par un modèle de lignées d'astrocytes humains. Ce mémoire de thèse décrit: 1) les différentes approches expérimentales qui ont été utilisées (Western blot, ELISA, immunoprécipitation, tests fonctionnels, Northern blot et RTPCR pour détecter les ARNm; 2) la régulation de ces biosynthèses par des cytokines (interféron-gamma, interleukine-1β, TNF-α). D'une manière générale, les cinq lignées d'astrocytes humains sont capables de synthétiser tous les composants nécessaires à l'activation des deux voies du C, mais également à la formation du CAM, responsable d'activité cytotoxique. Ces synthèses sont pour la plupart constitutives, avec cependant un rôle très important des cytokines (principalement l'interferon-gamma). Selon ces observations, nous pouvons considérer: 1) que, via l'astrocyte, le système nerveux central semble disposer d'une source locale en C; 2) qu'un tel potentiel pourrait être impliqué dans des activités neurodégénératives (maladie d'Alzheimer) et démyélinisantes (sclérose en plaques)
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Couderc, Élisabeth. "Étude comparée chez rat normal et diabétique : catabolisme "in vivo" du récepteur des asialoglycoprotéines biosynthèse "in vitro" de trois protéines : albumine a1-glycoprotéine acide, récepteur hépatique des asialoglycoprotéines." Paris 11, 1990. http://www.theses.fr/1990PA11A004.
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Saliba, Sahar. "Nouvelles approches biotechnologiques pour l’obtention d’alcaloïdes : culture in vitro de Leucojum aestivum L. et isolement d’endophytes bactériens d’Amaryllidaceae." Thesis, Université de Lorraine, 2015. http://www.theses.fr/2015LORR0107/document.
Abstract:
Plus de 300 alcaloïdes d’Amaryllidaceae doués d’activités biologiques ont été isolés à partir des plantes appartenant à cette famille. De nos jours, seule la galanthamine, utilisée pour le traitement palliatif de la maladie d’Alzheimer, est commercialisée. L’accumulation de ces alcaloïdes dans les plantes est limitée. La culture in vitro est une méthode alternative intéressante pour l’obtention plus aisée de ces alcaloïdes à haute valeur ajoutée. Le premier objectif de ce travail vise à développer une méthode de purification efficace, simple et rapide des extraits de plantes préalablement à leur analyse en LCMS et GCMS. Le second objectif est d’étudier l’effet de plusieurs facteurs exogènes, ajoutés au milieu de culture de bulbilles de Leucojum aestivum et de sa variété Gravety Giant en bioréacteurs RITA®, sur les voies de biosynthèse de la galanthamine et de la lycorine. La variation des paramètres exogènes a permis une accumulation accrue en galanthamine et en lycorine (0,814 mg/g et 1,54 mg/g de matière sèche respectivement) dans les bulbilles. Le troisième objectif porte sur l’isolement et l’identification d’endophytes à partir de bulbes in vivo et in vitro de trois espèces d’Amaryllidaceae (L. aestivum, Narcissus pseudonarcissus et Galanthus elwesii). Des bactéries endophytes du genre Bacillus ont été identifiées. Un nouvel alcaloïde a été isolé à partir des cultures bactériennesOver 300 Amaryllidaceae alkaloids possessing a wide range of biological activities have been isolated from plants belonging to this family. Galanthamine, used for the palliative treatment of Alzheimer’s disease, is the only one commercialized. The biodisponiblity of these alkaloids is low. In vitro culture offers an alternative yet interesting approach for the biotechnological production of these valuable alkaloids. The aim of this work was, first, to develop a fast, efficient and easy purification method of plant extracts prior to their phytochemical analysis both in LCMS and GCMS. Second, the combined effects of bioreactor RITA® culture and feeding with different exogenous factors on the biosynthetic pathway of both galanthamine and lycorine were studied. The experiments were conducted both with Leucojum aestivum and L. aestivum ‘Gravety Giant’ bulblets. The variation of several exogenous parameters resulted in a better accumulation of galanthamine and lycorine (0.814 mg/g and 1.54 mg/g dry weight respectively) in the bulblets. The third aim was to isolate and identify alkaloid producing endophytes from in vivo and in vitro bulbs of three Amaryllidaceae species (L. aestivum, Narcissus pseudonarcissus and Galanthus elwesii). Bacterial endophtes belonging to the Bacillus genus were identified. A new alkaloid was isolated from bacterial liquid cultures
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Bernoud-Hubac, Nathalie. "Etude, sur un modèle in vitro de la barrière hémato-encéphalique, de la biosynthèse des acides gras polyinsaturés essentiels et du passage de l'acide docoahéxaénoïque estérifié ou non dans une lysophosphatidylcholine." Lyon, INSA, 1998. http://www.theses.fr/1998ISAL0099.
Abstract:
Le cerveau contient des proportions élevées d'acides gras polyinsaturés (AGPI) tels que les acides arachidonique (20:4n-6) et docosahexaénoïque (22:6n-3). Les mécanismes responsables de cette accumulation sélective sont encore inconnus. Le premier objectif de ce travail a été d'étudier, en utilisant un modèle in vitro de la barrière hémato-encéphalique (BHE), les rôles respectifs des cellules endothéliales de capillaires cérébraux et des astrocytes dans la biosynthèse des 20:4n-6 et 22:6n-3 à partir de leurs précurseurs respectifs, les acide linoléique (18 :2n-6) et linolénique (18: 3n-3). Les cellules endothéliales sont cultivées sur un filtre, lequel est placé sur le milieu d'une boîte de Petri contenant ou non une culture stabilisée d’astrocytes. Les cellules endothéliales cultivées sans astrocytes convertissent faiblement les 18:2rt-6 et 18:3n-3 en 20:4n-6 et 22:6n-3. En présence d’astrocytes, leur contenu en AGPI augmente de manière drastique. Nous montrons que le 18:2n-6 et le 18 :3n-3 traversant la monocouche endothéliale sont captés et convertis en AGPI par les astrocytes, ces AGPI sont ensuite sécrétés sous forme non estérifiée et estérifiée dans des phosphatidylcholines et des lysophosphatidylcholines (lysoPC), puis captés par les cellules endothéliales. Ces résultats suggèrent donc un rôle essentiel des astrocytes dans l'apport des AGPI à la barrière elle-même et au cerveau. Par ailleurs, le cerveau pouvant aussi capter les AGPI à partir de la circulation, le second objectif a consisté à analyser le passage du 22:6n-3 marqué non estérifié ou estérifié dans une lysoPC, liés à l'albumine, à travers le modèle in vitro de la BHE. Nous montrons un passage préférentiel à travers la monocouche endothéliale et une captation préférentielle par les astrocytes de la 22:6-lysoPC comparativement au 22:6n-3 non estérifié. Une telle préférence n'est pas observée avec l'endothé1ium aortique. Nos résultats montrent enfin que ce passage préférentiel implique la présence dans le milieu astrocytaire de transporteurs spécifiques, notamment des lipoprotéines à apolipoprotéine E principalement sécrétées par les astrocytesThe brain contains high proportions of polyunsaturated fatty acids such as arachidonic acid (20:4n-6) and docosahexaenoic (22:6n-3) acids. The mechanisms responsible for this selective accumulation are still unknown. The first objective of this work was to determine the respective roles of endothelial cells from brain capillaries and astrocytes in the conversion of circulating linoleic (18:2n-6) and linolenic (18:3n-3) acids into 20:4n-6 and 22:6n-3, respectively, by using an in vitro model of the blood-brain barrier (BBB). Endothelial cells cultured on an insert were set above the medium of a Petri dish containing or not a stabilized culture of astrocytes. Endothelial cells cultured alone weakly converted the precursor fatty acids into 20:4n-6 and 22:6n-3. When endothelial cells were co cultured with astrocytes, their content of polyunsaturated fatty acids increased dramatically. This effect was associated with the uptake of polyunsaturated fatty acids from the lower medium (astrocyte medium). These fatty acids were released by astrocytes after they were synthesized from the precursor fatty acids that passed through the endothelial cell monolayer into the lower medium. Polyunsaturated fatty acids were released by astrocytes as unesterified fatty acids and as phosphatidylcholine and lysophosphatidylcholine (lysaPC). These results suggest that astrocytes could play a role in the delivery of essential polyunsaturated fatty acids to the barrier itself and to the brain. The brain can also take up AGPI from the circulation. The second objective was to study the passage of either labeled unesterified 22:6n-3 or 22:6n-3 esterified in a lysoPC, bound to albumin, through the in vitro BBB. We show that "22:6-lysoPC is preferentially transferred through the endothelial cell monolayer and taken up by astrocytes over the unesrerified 22:6n-3. This preferential passage was not observed in aortic endothelium. Finally, our results show that this preferential passage involve the presence of specific carriers in the astrocyte medium, particularly lipoprotein containing apolipoprotein E and principally secreted by astrocytes
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Campagnac, Estelle. "Etude in vitro de l'impact de deux fongicides inhibiteurs de la biosynthèse des stérols (IBS) sur le métabolisme stérolique des deux partenaires de la symbiose mycorhizienne arbusculaire : évaluation du stress oxydant induit dans la symbiose." Littoral, 2009. http://www.theses.fr/2009DUNK0225.
Abstract:
L’objectif de ce travail était d’une part d’étudier l’impact de deux fongicides IBS (fenpropimorphe, fenhexamid) sur le métabolisme stérolique d’organismes non-cibles, racines transformées / champignon mycorhizien arbusculaire (MA), Glomus intraradices cultivés in vitro et d’autre part d’examiner le stress oxydant induit après application des IBS sur la symbiose. Des effets différentiels entre le fenpropimorphe et le fenhexamid ont été montrés. La phytotoxicité du fenpropimorphe, mise en évidence par la réduction drastique de la croissance racinaire semble être liée (i) au remplacement des ∆5-stérols normaux par des stérols anormaux: 9ß,19cyclopropylstérols, ∆8,14-stérols, ∆8-stérols et ∆7-stérols (ii) à l’induction d’un stress oxydant (peroxydation lipidique, activités d’enzymes antioxydantes). En revanche, le fenhexamid n’à aucun impact sur le profil stérolique et sur le développement racinaire, néanmoins induit un stress oxydant significatif dans les racines. Un effet protecteur de la mycorhization vis-à-vis de la peroxydation des lipides dans les racines a été mis en évidence lors de l’application des deux fongicides. De plus, nos résultats suggèrent qu’une composition en phytostérols normale est indispensable au bon développement de la symbiose. La fongitoxicité du fenpropimorphe sur le développement de G. Intraradices a été observée par un développement fongique réduit, une diminution de la teneur en stérols associée à l’augmentation d’un précurseur, le squalène. Cela suggère une inhibition d’une enzyme cible inhabituelle chez les champignons, la squalène époxydaseThe aim of this work was on one hand to study the impact of two fungicides IBS (fenpropimorph, fenhexamid) on sterol metabolism of non-target organisms, transformed roots / arbuscular mycorrhizal fungi (AMF), Glomus intraradices grown in vitro, and on the other hand to examine oxidative stress induced by applying the two IBS on symbiosis. Differential effects between fenpropimorph and fenhaxamid were shown. The phytotoxicity of fenpropimorph was underscored by the significant reduction in root growth and appeared to be due to (i) the replacement of the normal ∆5-stérols by usual sterols : 9ß,19cyclopropylstérols, ∆8,14-stérols, ∆8-stérols et ∆7-stérols (ii) and the induction of an oxidative stress (lipid peroxidation, antioxidant enzyme activities). However no impact on the sterol profile and root development was detected with fenhexamid, while a significant oxidative stress was highlighted in roots. A propective effect of mycorhization was noticed on the lipid peroxidation of roots after application of the two fungicides. Moreover, our results suggest that a normal composition of phytosterols is essential to the development of symbiosis. The fongitoxicity of fenpropimorph on the development of G. Intraradices was shown by a reduced fungal development, a decrease of sterol content and the increase of a precursor, the squalene. This suggests the inhibition of an unknown target enzyme in fungi, the squalene epoxydase
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Mesnard, François. "Etude par rmn du carbone 13 et de l'azote 15 du metabolisme de suspensions cellulaires de solanacees en relation avec la biosynthese des alcaloides (doctorat : genie enzymatique bioconversion et microbiologie)." Amiens, 1999. http://www.theses.fr/1999AMIEP066.
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Friedrich, Steffen Christoph [Verfasser]. "Untersuchungen zur Biosynthese von Polyketiden : Studien zur in-vitro-Aktivität der Tailoring-Enzyme aus der Jerangolid-Biosynthese / Steffen Christoph Friedrich." Hannover : Technische Informationsbibliothek (TIB), 2016. http://d-nb.info/1107037034/34.
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Héron, Antoine. "Préparation et développement de nouveaux antisérums pour l'étude de la synthèse et de la maturation de l'inter-alpha-trypsine inhibiteur humain." Rouen, 1995. http://www.theses.fr/1995ROUES034.
Abstract:
Les protéines humaines de la famille de l'inter-alpha-trypsine inhibiteur (ITI) sont structurées à partir de trois chaînes lourdes H1, H2 et H3 et d'une chaîne légère, la bikunine. Ces chaînes maturent (H→HC) et s'associent par l'intermédiaire d'une chaîne de chondroïtine sulfate pour donner naissance aux formes protéiques pluricaténaires actuellement décrites: l'ITI (HC1+HC2+bikunine), le pré-alpha-trypsine inhibiteur (HC3+bikunine) et le complexe HC2/bikunine. Il apparaît désormais qu'en plus d'une activité antiprotéasique portée par la bikunine, les chaînes lourdes et l'inhabituelle structure protéoglycannique participent aux fonctions physiologiques des protéines de la famille de l'ITI, en particulier dans le cadre de la stabilité de la matrice extracellulaire. Afin d'apporter des résultats précis concernant la localisation de synthèse et les modalités de la maturation de ces protéines dans la cellule, nous avons développé de nouveaux antisérums spécifiques de chacune des chaînes lourdes H1, H2 et H3. Pour cela, nous avons eu recours au développement d'un système d'expression bactérien permettant à partir de l'ADN, l'obtention de peptides immunogènes sous la forme de protéines hybrides, une alternative de choix pour la production d'anticorps spécifiques évitant de recourir à la purification des protéines natives. L'emploi de ces antisérums dans le cadre d'une étude de la maturation de l'ITI dans des modèles cellulaires d'hépatomes humains a apporté des résultats nouveaux. En particulier, les cellules HepG2 synthétisent une protéine dont les caractéristiques électrophorétiques sont semblables à celles de l'ITI plasmatique humain, mais dont les propriétés antigéniques démontrent que cette molécule ne comprend qu'un seul type de chaîne lourde associée à la bikunine (HC2#2+bikunine#2). L'assemblage de cette glycoprotéine ITI est spécifiquement localisé dans le réseau trans de l'appareil de Golgi après l'élongation et la sulfatation des structures O-glycanniques. La N-glycosylation n'intervient pas dans l'assemblage, la maturation et la sécrétion de cette protéine. Par ailleurs, nos antisérums permettent d'analyser spécifiquement les membres de la famille de l'ITI dans un mélange aussi complexe que le sérum. Cette analyse permet de penser qu'existent à côté des formes classiques d'ITI et de HC/bikunine, des espèces homologues comportant les autres chaînes lourdes. Ainsi, chaque chaîne H1, H2 et H3 semble pouvoir participer à l'assemblage de l'ITI comme de HC/bikunine ; les différences observées quant aux taux sériques respectifs de ces formes pourraient résulter de variations de stabilité de chaque structure
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Kandziora, Nadine [Verfasser]. "In vitro-Untersuchungen von Schlüsselschritten der Borrelidin- und Ambruticin-Biosynthesen / Nadine Kandziora." Hannover : Technische Informationsbibliothek (TIB), 2016. http://d-nb.info/1116960893/34.
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Briot, Pascal. "Etudes in vivo et in vitro de la biosynthèse des oestrogènes chez la Hase (Lepus europaeus)." Grenoble 2 : ANRT, 1986. http://catalogue.bnf.fr/ark:/12148/cb375964416.
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Wunsch-Palasis, Julia [Verfasser], and Andreas [Akademischer Betreuer] Bechthold. "In silico und in vitro Untersuchungen zum Sekundärstoffwechsel in Aktinomyceten unter besonderer Berücksichtigung der Biosynthese der Rishirilide aus Streptomyces bottropensis." Freiburg : Universität, 2013. http://d-nb.info/1123477523/34.
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Vincent, Florence. "Biosynthese de certains composes du complement par les monocytes humains in vitro : relation avec la maturation/differenciation des monocytes normaux et pathologiques." Université Louis Pasteur (Strasbourg) (1971-2008), 1992. http://www.theses.fr/1992STR13203.
Abstract:
La premiere partie du travail a ete consacree a l'etude de la differenciation des monocytes sanguins humains. Nous decrivons des conditions de culture n'utilisant pas de serum. Les cellules ont ete caracterisees tout au long de leur differenciation en milieu sans serum par differents tests (morphologie, cytochimie, analyse des antigenes membranaires, cytotoxicite. . . ). Cette methode de culture en milieu sans serum est simple et reproductible, elle permet la differenciation et la survie a long terme d'une grande quantite de monocytes humains en macrophages completement differencies et activables. Dans la deuxieme partie, l'etude de la biosynthese des composes c2, c4 et c9 du complement a ete entreprise chez les monocytes sanguins humains au cours de leur differenciation, chez des cellules pathologiques de leucemies monoblastiques, et chez des cellules de la lignee u937 (detection de la secretion des proteines c2 et c4 par des tests hemolytiques et detection de l'expression des genes par pcr. Par ces memes methodes, ni la proteine c9, ni son expression n'ont ete detectees. Les cellules de la lignee mono-macrophagique sont donc capables de produire certains composes du complement. Elles representent des composes cellulaires importants dans l'immunoregulation des phenomenes inflammatoires
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Domenach, Icard Vinca. "Association des glycoprotéines du Virus de l'Hépatite C et des apoB lipoprotéines : Vers un modèle de biosynthèse des lipo-viro-particules." Lyon, École normale supérieure (sciences), 2009. http://www.theses.fr/2009ENSL0539.
Abstract:
La densité des particules du virus de lhépatite C circulant dans le sang des patients infectés est très hétérogène. La densité très légère de certaines particules est liée à l'association du virus aux apoB lipoprotéines riches en triglycérides (TRL), formant une lipoprotéine hybride appelée lipo-viro-particule (LVP), contenant les glycoprotéines d'enveloppes virales E1 et E2, la capside et l'ARN viral. L'infectivité spécifique de ces particules légères est supérieure à celle des particules de plus forte densité. Le rôle des apolipoprotéines dans la synthèse et l'assemblage des particules virales est inconnu. Les cellules Caco-2 se différentient in vitro en enterocytes sécrétant de l'apoB dans des conditions particulières de culture. Après différentiation, les cellules exprimant E1 et E2 de manière stable sécrètent ces dernières de façon concomitante à la sécrétion des TRL. Elles sont détectées uniquement dans les fractions de densité contenant l'apoB et celle-ci peut être co-immunoprécipitée avec des anticorps anti-E2. Cette association avec l'apoB est aussi visualisée en microscopie électronique. La sécrétion de E1 et E2 est réduite lorsqu'on inhibe la production des TRL. E1 et E2 sont sécrétées en association avec les TRL aussi dans la lignée HepG2, mais pas dans les lignées d'hépatome Huh-7 et Huh-7. 5 qui s'avèrent déficientes dans l'assemblage des lipoprotéines. E1 et E2 ont donc la capacité intrinsèque d'utiliser la machinerie d'assemblage des lipoprotéines. Un modèle d'assemblage des LVP est proposé. Les particules produites par les Caco-2 sont capables de fusionner avec des liposomes de manière dose et pH dépendante, mais pas celles produites par les Huh-7. 5The density of circulating hepatitis C virus particles in the blood of chronically infected patients is very heterogeneous. The very low density of some particles is linked to an association of the virus with apolipoprotein B (apoB) positive and triglyceride rich lipoproteins (TRL), resulting in hybrid lipoproteins known as lipo-viro-particles (LVP) containing the viral envelope glycoproteins E1 and E2, capsid and viral RNA. The specific infectivity of these particles has been shown to be higher than the infectivity of particles of higher density. The role of apolipoproteins in the synthesis and assembly of the viral particles is unknown? The intestinal Caco-2 cell line diferentiates in vitro into enterocyte in special conditions o culture. After one week of differentiation, Caco-2 cells stably expressing E1 and E2 secreted E1 and E2 concomitantly with TRL secretion. Secreted E1 and E2 were only detected in apoB containing density fractions. ApoB could be co-immunoprecipitated with E2-specific antibodies. ApoB and E2 association on TRL surface is also confirmed by immuno-gold labeling by using electron microscopy. E1 and E2 secretion was reduced by inhibiting the secretion of TRL. E1 and E2 were similary secreted in association with TRL from the human liver cell line HepG2 but not by Huh-7 and Huh-7. 5 hepatoma cells that proved deficient for lipoprotein assembly. E1 and E2 have thus the intrinsic capacity to utilize apoB synthesis and lipoprotein assembly machinery. A model for LVP assembly is proposed. The particles secreted by Caco-2 cells are able to fuse with liposomes in a dose and pH dependent way, whereas the particles secreted by Huh-7. 5 cells are not
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MAILLOT, VERNIER PASCALE. "Selection in vitro et caracterisation de mutants resistants a des inhibiteurs de la biosynthese des phytosterols, a partir de protoplastes de nicotiana tabacum dihaploide." Université Louis Pasteur (Strasbourg) (1971-2008), 1990. http://www.theses.fr/1990STR13058.
Abstract:
Une strategie du mutagenese aux ultraviolets et de selection a l'aide d'un triazole-pesticide, appliquee a des cultures de protoplastes de tabac, a permis l'obtention de cals resistants. Ces cals, qui sont de trois types, presentent ou non des modifications de leur profil sterolique par rapport a un cal sauvage, sensible au triazole, indiquant que l'inhibition de la biosynthese des sterols est impliquee, peut-etre seulement en partie, dans la phytotoxicite du pesticide. La regeneration de plantes normales fertiles a pu etre realisee a partir de deux des trois types de cals selectionnes et l'heredite de ces deux types a ete demontree. Le premier est caracterise par une relative insensibilite de sa biosynthese des sterols a l'inhibiteur, montrant qu'il pourrait s'agir d'un mutant de detoxication ou d'un mutant presentant une cible modifiee. Le second genotype surproduit les sterols de fin de chaine et accumule de nombreux intermediaires biosynthetiques. Ce phenotype biochimique, qui se transmet comme un caractere mendelien monogenique codominant, pourrait etre code par une amplification genique. La resistance des cals de ces deux genotypes au triazole serait due a leur capacite a conserver une quantite suffisante de sterols habituels dans leurs membranes pour y assurer une fonction architecturale et peut-etre metabolique
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Ronot, Xavier. "Le Chondrocyte articulaire de lapin évolution in vitro de la prolifération, de la biosynthèse du collagène, du cytosquelette et de l'activité mitochondriale /." Grenoble 2 : ANRT, 1987. http://catalogue.bnf.fr/ark:/12148/cb37609461v.
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Soboh, Basem [Verfasser], Dietrich [Akademischer Betreuer] Nies, Rudolf [Akademischer Betreuer] Thauer, and Thomas [Akademischer Betreuer] Happe. "In vitro Biosynthese von komplexen Fe-S-Cluster-Cofaktoren der Fe-Mo-Nitrogenase und der [NiFe]-Hydrogenase / Basem Soboh ; Dietrich Nies, Rudolf Thauer, Thomas Happe." Halle, 2016. http://d-nb.info/1116950502/34.
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Schaller, Hubert. "Selection in vitro et caracterisation de mutants de nicotiana tabacum l. Resistant a des pesticides (de type n-alkyl-morpholine ou triazole) inhibiteurs de la biosynthese des sterols." Université Louis Pasteur (Strasbourg) (1971-2008), 1992. http://www.theses.fr/1992STR13121.
Abstract:
Une strategie de mutagenese-selection de cultures de protoplastes de tabac a permis d'obtenir des cals resistant a des pesticides de type n-alkyl-morpholine ou triazole, inhibiteurs de la biosynthese des sterols. Les differentes classes de cals resistants, discrimines en fonction de leur composition sterolique, suggerent l'existence de plusieurs mecanismes de resistance a ces pesticides, mettant en jeu soit une modification de la voie des sterols, soit des modifications dans d'autres voies metaboliques. En particulier, un mutant surproducteur de sterols a ete caracterise. L'analyse genetique montre que cette surproduction segrege avec la resistance, ce qui suggere la coincidence des deux phenotypes. Le mutant parvient ainsi a contrer l'effet des inhibiteurs phytotoxiques en surproduisant les sterols puis en esterifiant avec des acides gras les intermediaires biosynthetiques accumules. Ce mecanisme de regulation permet de maintenir une fraction de sterols libres, destines a etre incorpores dans les membranes, approchant en quantite et en qualite celle du genotype sauvage cultive en l'absence d'inhibiteur
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Mehtali, Abdel-Majid. "Les genes de maintenance : etude du gene hmgcoa reductase in vitro et dans les souris transgeniques." Université Louis Pasteur (Strasbourg) (1971-2008), 1988. http://www.theses.fr/1988STR13162.
Abstract:
Les genes de maintenance sont exprimes de maniere ubiquitaire par un mecanisme encore incompris. Pour aborder ce probleme, les auteurs ont choisi comme modele d'etude un gene de maintenance typique, le gene de l'hydroxymethylglutaryl coa reductase (hmgcr), enzyme cle de la biosynthese du cholesterol. Le gene hmgcr de souris a ete isole et sa region promotrice caracterisee; l'expression et le profil de methylation de plusieurs genes chimeriques, dans lesquels le gene marqueur cat est sous le controle de sequences promotrices hmgcr de taille decroissante, ont ete etudies in vitro (par transformation de cellules en culture) et in vivo (dans les souris transgeniques)
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Milesi, Sandrine. "Étude de la production de furocoumarines par la Rue officinale (Ruta graveolens L. ) : cultures de plantes au champ et cultures in vitro." Vandoeuvre-les-Nancy, INPL, 2001. http://docnum.univ-lorraine.fr/public/INPL_T_2001_MILESI_S.pdf.
Abstract:
Les furocoumarines, métabolites secondaires de plantes, présentent un intérêt économique pour leur utilisation en dermatologie. La synthèse chimique des furocoumarines étant trop onéreuse, leur approvisionnement doit être assuré par des végétaux. Nos études ont été conduites afin d'évaluer la possibilité de produire les furocoumarines à partir de Ruta. Deux types de cultures ont été étudiés : des plantes entières et des suspensions cellulaires. La production et le profil de 4 furocoumarines (psoralène, xanthotoxine, isopimpinelline et bergaptène) ont été déterminés dans diverses conditions de cultures. Nous avons étudié la teneur en furocoumarines chez 4 espèces du genre Ruta. Agronomiquement, Ruta graveolens est la plus intéressante : elle produit beaucoup de matière sèche, a une bonne résistance au froid et une forte teneur en furocoumarines (de 4 a 17 mg. G 1 ms dans les feuilles). Les fruits et les feuilles contiennent de 60 à 70% des furocoumarines de la plante. L’effet de plusieurs facteurs (stade de développement, coupes annuelles, densité, fertilisation azotée) ont été testés sur la productivité en furocoumarines. Les plantes produisent un maximum de furocoumarines au stade fructification. Les coupes annuelles améliorent la productivité. La fertilisation azotée et la densité n'ont pas eu d'effet significatif dans nos conditions. Ces essais au champ ont été conduits sur plusieurs sites et ont mis en évidence un fort effet terroir. Enfin, des suspensions cellulaires de Ruta graveolens ont été cultivées en erlen et en bioréacteur. Leur teneur en furocoumarines est comprise entre 0,3 et 19 mg. G 1 ms. L'élicitation par verticillium dahliae a augmenté la production de furocoumarines. L’immobilisation des cellules a favorisé le relargage des métabolites dans le milieu. Le profil des furocoumarines est fortement modifié par ces facteurs. Les suspensions ont une meilleure productivité que les plantes entières, mais elles ne sont pas économiquement rentables.
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De, Tapia Marc. "Proteines pr de haricot (var. Saxa) induites par traitement chimique ou infection virale : purification et proprietes." Université Louis Pasteur (Strasbourg) (1971-2008), 1987. http://www.theses.fr/1987STR13169.
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Abdel, Aziz El Zoeiby Ahmed. "Biosynthèse de la paroi bactérienne in vitro : identification de nouvelles cibles et développement de nouveaux inhibiteurs /." 2002. http://proquest.umi.com/pqdweb?did=766046261&sid=25&Fmt=2&clientId=9268&RQT=309&VName=PQD.
Abstract:
Thèse (Ph.D.)--Université Laval, 2002.Thèse présentée sous forme d'un recueil d'articles scientifiques rédigés en anglais avec résumés en français, soumis ou publiés dans différents titres de périodiques. Bibliogr.: f. 132-144. Publié aussi en version électronique.