Academic literature on the topic 'Biological tags'

Laboratory and field trials were employed to examine the feasibility of using biological tags as moult indicators. Twenty-four animals were tagged with epidermal implants and held in aquaria for 2 years and 8 months before the tags were removed. Five tags failed to form useful cysts and one tag was damaged during processing. The remaining 18 lobsters moulted between three and six times, with this moulting record being accurately verified by 15 of the biological tags and incorrectly interpreted (by one moult) in one case. Two tags produced inconclusive results. Biological tags were tested in the field in the Fremantle area, with 132 animals being recaptured out of 1336 tagged. Eleven tags proved impossible to read, eight failed to form cysts, and the balance recorded up to six moults during the release period. Animals in the size range 60–80 mm carapace length (CL) recorded two moults per year, one in February–April and a second before the mid-November start to the fishing season. Females grew significantly less per moult than did males in the same size category (60–85 mm CL), and both sexes showed significantly smaller increments for animals ≥85 mm CL at release.

This paper reviews the work published over the past decade on the use of parasites as biological tags in population studies of marine fish, mammals and invertebrates. Fish hosts are considered in taxonomic and ecological groups as follows: demersal, anadromous, small pelagic, large pelagic and elasmobranch. Most studies were carried out on demersal fish, particularly on members of the genera Merluccius (hake), Sebastes (rockfish) and on Atlantic cod Gadus morhua L., but Pacific salmonids and small pelagic fish of the genus Trachurus are also well-represented. A current multidisciplinary study of the population biology of horse mackerel Trachurus trachurus in European waters, which includes the use of parasites as tags, is described. Two studies recognize the potential for using parasites as tags for cetaceans but, in spite of the considerable potential for this approach in population studies of elasmobranchs, no original study has been carried out on this group for over ten years. Studies of parasites as tags for marine invertebrates have concentrated on squid. Recent trends in the use of parasites as biological tags for marine hosts are discussed.

When studying two different histidine tags attached to the N-termini of the trimeric cytokine tumor necrosis factor alpha (TNF), the biological activity — measured as cytotoxicity on the L-929 cell line — of both tagged proteins was drastically reduced. The longer His10 tag reduced cytotoxicity to approximately 16% and the shorter His7 tag to 6% of the activity of their nontagged counterparts. After removal of the tags, biological activities reverted to the expected normal values, which clearly shows the key role of the attached histidine tags in diminishing biological activity. Studies on the mechanism of these effects revealed no specific interactions and showed that even the natural flexible N-terminus of TNF presents a steric hindrance for receptor binding, while any extension of the N-terminus increases this hindrance and consequently reduces biological activity. Also, in other proteins, the ligand or substrate binding sites may be hindered by histidine tags, leading to wrong conclusions about biological activity or other properties of the proteins. Thus caution is advised when using His-tagged proteins directly in screening procedures or in research.

Genetically encoded fluorescent tags are protein sequences that can be fused to a protein of interest to render it fluorescent. These tags have revolutionized cell biology by allowing nearly any protein to be imaged by light microscopy at submicrometer spatial resolution and subsecond time resolution in a live cell or organism. They can also be used to measure protein abundance in thousands to millions of cells using flow cytometry. Here I provide an introduction to the different genetic tags available, including both intrinsically fluorescent proteins and proteins that derive their fluorescence from binding of either endogenous or exogenous fluorophores. I discuss their optical and biological properties and guidelines for choosing appropriate tags for an experiment. Tools for tagging nucleic acid sequences and reporter molecules that detect the presence of different biomolecules are also briefly discussed.

The long lifetime of nuclear singlet states holds promise for the development of molecular tracers to study motional processes in proteins with increased precision or to act as imaging contrast agents.

A design of a novel biological assay platform is presented in this thesis for the application of high throughput DNA sequencing and multiplexing biological assays. Digital magnetic carriers are responsible for the labelling and carrying of biological molecules or DNA strands through the microfluidic cells for various chemical reaction and analysis. This carrier design contains a bit addressable “magnetic barcode” made of patterned magnetic thin film (e.g. Permalloy or Cobalt), sandwiched in between two rigid SU8 polymer protective layers. I utilized magnetic elements with strong shape anisotropy and different coercive fields as the data storage elements, so each one of the magnetic barcodes elements can be addressed individually by a single globally applied variable magnetic field. The main idea being that all the carriers can be made using only a single photolithography template, which is particularly suitable for low cost mass production. The “label” or “signatures” can be coded or re-coded to the carriers in real time as and when needed. This approach is ideal for labelling the oligonucleotides during the split-and-mix synthesis or for the combinatorial library-based high-throughput multiplexed bioassays. I describe how the design of the magnetic barcode is optimized by engineering the coercivity of each barcodes element, allowing the number of available signatures to be increased. I also show that by using a globally applied magnetic field and the magneto-optical Kerr microscope, the magnetic elements in the multi-bit magnetic carriers can be addressed individually and encoded/decoded remotely. The power of this approach is the read/write technique, which allows modest globally applied magnetic fields to write almost unlimited numbers of codes to a large population of carriers rather than individuals.

Four hundred papers published in refereed papers during the years 1935-1985 were researched for information on the biology of trypanorhynchs, and a publishable host-parasite list was compiled for this period as a complement to the only previous monograph (published forty-five years ago) on all known members of the order Trypanorhyncha (Platyhelminthes: Cestoda). The theoretical information gained from this initial exercise was then used in carrying out original research on trypanorhynchs found in over 1,000 elasmobranch and teleost fish. This led to a choice of three research topics for more detailed investigations: (i) taxonomic studies on four little-known species and the application of this information to fisheries biology, (ii) life-cycle studies on Grillotia erinaceus (van Beneden, 1858) and (iii) the use of Grillotia smaris-gore (Wagener, 1854) Dollfus, 1946 as a biological tag for commercially important teleosts. A pre-requisite of this last problem was the need to review critically all information on the use of parasites as population indicators. Thus a further 100 papers published in primary journals were researched. The work concludes with a discussion of the above and also brief comments on the need for further research on tapeworms of the order Trypanorhyncha as an aid to our understanding of other basic contemporary problems in parasitology, relating to host-specificity, ecology and phylogeny.

Recently, questions have been raised as to the appropriateness of stock boundaries in the Atlantic horse mackerel (Trachurus trachurus) and the herring (Clupea harengus) in European waters. To this end, 1919 horse mackerel were examined for parasitic infections from samples taken at nineteen sites around Europe. Forty-five species of parasites were recorded, eleven of which are new host records, and one may be a new species. A number of these are suitable for use as biological tags. Results showed a significant degree of separation between fish from the North Sea and Western stocks, based on the relative abundance of the nematodes Aniaskis spp. and Hysterothylacium sp. The endoparasitic fauna of 4033 herring at various life stages from sites to the west of the British Isles, the North Sea, Baltic Sea and northern Norway were examined to obtain information on stock identity, mixing and recruitment patterns in these areas. Results revealed that substantial stock mixing takes place to the west of the British Isles, with fish from a wide area being found together in non-spawning aggregations off the Hebrides. This area is also home at different times of year to two different spawning populations of fish which recruit from nursery grounds in the eastern North Sea and from the west of Scotland. Investigations were made of the usefulness of the ribosomal small sub-unit cytochrome oxidase (I) gene of the parasitic nematode worm, Anisakis simplex s.s., as a tag of host population biology. Results revealed the COI gene to be highly variable, with around 50% of worms sequenced having unique haplotypes. There were no population structures evident from analysis of genetic distances.

Parasites are a ubiquitous but often unseen, unacknowledged and understudied component of biological communities. However, their roles in structuring ecosystems, their influence on the evolutionary history of host species and their potential applications are slowly being uncovered. The snoek, Thyrsites atun, is a nomadic predator native to the cold coastal waters of the southern Hemisphere. Being a major target of the South African inshore line-fishery, the snoek is a socioeconomically important species whose ecological significance in the southern Benguela should not be underestimated. This study aimed to survey the metazoan parasite community of snoek off South Africa, assess host-parasite relationships and evaluate the potential of parasites as biological tags for stock structure studies. Examination of 210 snoek (FL 411 - 1040 mm) revealed them to be host to 16 parasite taxa. These included 9 new host records (Tentacularia coryphaenae, Caligus coryphaenae, Caligus dakari, Corynosoma australe, Nothobomolochus fradei, Hatschekia conifera, Bolbosoma vasculosum, Rhadinorhynchus cadenati, Digenea sp.) and 4 new locality records (Molicola uncinatus, Pseudoterranova sp., C. dakari, B. vasculosum). A further three cosmopolitan taxa (Anisakis sp., Kudoa thyrsites, Hepatoxylon trichiuri) as well as Caligus zei were also recorded.

Glucosyltransferases catalyze glucosylation by transferring glucose from UDP-activated sugar donor to the acceptor substrates. This research is focused on the study of the effect of a single point mutation on enzyme activity, characterization of a flavonol specific 3-Oglucosyltransferase (Cp-3-O-GT) mutant- P145T, and further modification of the clone to cleave off tags from recombinant wild type and P145T mutant proteins in order to crystallize the proteins. Multiple sequence alignment and homology modeling was done to identify candidate residues for mutation. Cp-3-O-GT was modeled with a flavonoid 3-O-GT from Vitis vinifera (VvGT) that can glucosylate both flavonols and anthocyanidins. We identified a proline residue at position 145 of Cp-3-O-GT that corresponded to a threonine residue in VvGT and designed a Cp-3-O-GT- P145T mutant to test the hypothesis that that mutation of proline by threonine in Cp-3-O-GT could alter substrate or regiospecificity of Cp-3-O-GT. While the mutant P145T enzyme did not glucosylate anthocyanidins, it did glucosylate flavanones and flavones in addition to flavonols. This is significant because flavanones and flavones do not contain a 3-OH group. HPLC was performed to identify the reaction products. Early results indicated that the mutant protein glucosylates naringenin at the 7-OH position forming prunin. Results are being used to revisit and refine the structure model. In other related work, a thrombin cleavage site was inserted into wild type and recombinant P145Tenzyme and we are currently working on transformation into yeast for recombinant protein expression. Cleaving off tags is a pre-requisite to future efforts to crystallize the proteins. Solving the crustal structures will make a significant contribution to the structural and functional study of plant flavonoid GTs in general and Cp-3-O-GT in particular.

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Large hydroelectric dams along the Paraná River have caused severe impacts on fish communities as they represent obstacles to long-range migratory species that need to migrate to complete their life cycle. Dams can bring numerous problems through the interception of migratory routes and reduction of spawning areas. The most common measures used to mitigate the effect of these physical obstacles is the implementation of fish ladders. It is not only important to implement these structures, but also to monitor them. This study was performed at the Engenheiro Sergio Motta Hydroelectric Power plant in the Upper Paraná River during December/2012 and March/2016. The aim of it was to evaluate the effectiveness of this structure in relation to the attractiveness rate and passage efficiency of to two Neotropical fish species in the fish ladder. In total, 563 fish of genus Leporinus (447 Leporinus obtusidens and 116 Leoporinus piavussu) were tagged and released with the implementation of 32-mm programmable transponders (PIT-tags). Radio Frequency Identification (RFID) was used to monitor the system. The attractiveness of the ladder was 8.7%. The minimum time to find it was 1.49 days for the fish released upstream and the maximum time was 449.86 days for the individuals released downstream. The release site had a significant influence on the entry rate of fish released on the other side of the river. No detection was observed for fish released downstream and upstream on the right bank of the river. Only the fish released on the same site where the fish ladder is located were detected, suggesting low attractiveness of the ladder in relation to the studied species. In the course of this study it was verified that for the two species studied it would be extremely important to increase the attractiveness at the entrance of the ladder, as well as to build a second ladder for fish on the right side of the river.
As grandes hidrelétricas ao longo do Rio Paraná têm causado impactos severos nas comunidades de peixes, pois representam obstáculos para as espécies migradoras de longa distância, que precisam migrar para completar seu ciclo de vida. As barragens podem trazer inúmeros problemas por meio da intercepção das rotas migratórias e redução das áreas de desova. As medidas mais comuns utilizadas para mitigar o efeito desses obstáculos físicos é a implementação de escadas para peixes. Não é somente importante a implementação dessas estruturas, como também o monitoramento. Esse estudo realizado na escada para peixes da Usina Hidrelétrica Engenheiro Sérgio Motta no alto Rio Paraná no período de dezembro/2012 a março/2016 teve como objetivo avaliar a efetividade dessa estrutura em relação a taxa de atratividade e eficiência de passagem para duas espécies de peixes migradores neotropicais. No total, foram marcados e liberados 563 peixes do gênero Leporinus (447 Leporinus obtusidens e 116 Leoporinus piavussu) com a implantação de transponders com códigos programáveis (PIT-tags) de 32 mm. Foi utilizado o sistema de rádio frequência (RFID Radio Frequency Identification) para o monitoramento do sistema. A atratividade da escada foi de 8,7%. O tempo mínimo para encontrar a escada correspondeu a 1,49 dias para os peixes liberados a montante e o tempo máximo foi de 449,86 dias para os indivíduos liberados a jusante. O local de liberação influenciou significativamente a taxa de entrada dos peixes liberados na margem oposta do rio, sendo que nenhuma detecção foi observada para peixes liberados na margem direita, tanto a jusante como a montante. Foram detectados apenas os peixes liberados na mesma margem onde a escada para peixes está localizada, sugerindo baixa atratividade da escada para as espécies analisadas. No decorrer deste estudo verificou-se que para as duas espécies estudadas seria extremamente importante aumentar a atratividade na entrada da escada, como também a construção de uma segunda escada para peixes no lado direito do rio.

Malaria is a disease that is caused by parasite called Plasmodium spp. and trasmitted by female Anopheles mosquitoes to the host. The disease has great impact around the world and there are half a million deaths and several hundred million infections every year. Studies revealed that there are two actin isoforms in the parasite, actin I and actin II. Absence of actin II has severe effect on the development of the parasite in the mosquito but the molecular function is still unknown. Identification of interacting proteins is of great importance to understand further the function of the protein. To achieve this goal actin II has to be enriched and this required a tagged version of the protein. In this project purification of the protein was to be achieved through biotinylation. In this method the protein of interest is biotinylated by BirA ligase in the cell and is then purified by , streptavidin. The project involved transfection of vector for Plasmodium berghei, containing the BirA gene and a stage-specific promoter (cdpk4). The construct was integrated in the chromosomal locus Sil6 and introduced to wild-type and actin II knock out parasites. Genotyping by PCR revealed integration of the insert in wild type parasites and phenotypic anaylsis showed no difference between BirA wild type and wild type control parasites. The expression of the BirA ligase in the parasite was investigated with Western blot but no signal was detected.

Triacylglycerol (TAG) is a main storage lipid in seeds and is utilized for seed germination. Humans commonly consume TAG in the form of vegetable oil. Currently, TAG contributes to 25% of the total calories consumed in the developed countries and dependency for biofuel production from plants lipid is also increasing day by day. By 2030 the expected consumption level of vegetable oil will be double and to fulfill this demand it is necessary to increase the oil production in plants. To accomplish this goal, it is pertinent to understand the regulation of TAG accumulation in plants. Avocado (Persea americana), a basal angiosperm, stores up to 70% oil in the form of TAG in nonseed tissue (mesocarp). Here, we use it avocado as a model system to understand TAG biosynthesis in tissues other than seed. In plants, TAG biosynthesis may involve acyl-CoA–dependent or –independent pathway catalyzed by diacylglycerol acyltransferases (DGAT) and phospholipid: diacylglycerol acyltransferases (PDAT), respectively. RNA-Seq and Q-PCR analysis of developing mesocarp of avocado revealed higher expression for DGAT1 and PDAT1, coinciding with the period of TAG accumulation. Therefore, we hypothesize that DGAT1 and PDAT1 are responsible for catalyzing the terminal step in TAG biosynthesis in Avocado mesocarp. Using the transcriptome data, we identified full-length coding sequences for DGAT1 and PDAT1. These acyltransferases are being cloned and will be characterized for their enzyme activity and substrate specificity, subsequent to their expression in yeast. Complementation of Arabidopsis dgat1 and pdat1 mutants and phenotypic characterization will also be carried out using Gateway-cloning techniques and transgenic lines will be assayed for TAG content in seeds. This study is expected to provide basic understanding of TAG accumulation in avocado mesocarp tissue.

Esse estudo possibilita, por exemplo, a elaboração de planos de preservação e a criação de medidas que diminuam o impacto da nossa existência para as próximas gerações. Como todos os campos de estudo da Biologia, a Ecologia não é uma área isolada e sempre necessita de outras áreas de conhecimento, tais como Botânica, Zoologia, Física, Química, Geografia e Matemática, tendo em vista que devemos ter conhecimento das características dos organismos, além, é claro, de conhecer como funcionam os fatores abióticos, tais como a luz, água e solo.

O texto se constitui de propostas de atividades, tais como jogos, experimentação, tecnologias e o léxico em Libras da linguagem científica, que resultam num mecanismo de interface mediadora entre linguagem científica e língua de sinais, de forma que o processo de aquisição dos conceitos que se pretende transmitir seja significativamente adquirido pelos estudantes surdos da Educação Básica e/ou Ensino Superior.[...] O livro está composto de capítulos embasados nas propostas de recursos didáticos e metodologias de ensino em que se fazem indissociáveis o uso da Língua Brasileira de Sinais aos recursos visuais, imagéticos e bilíngues, sendo convidativo para que o professor reflita sobre os seus próprios métodos de ensino e ressignifique sua prática pedagógica, oportunizando ao estudante surdo a compreensão dos conteúdos e garantindo o aprendizado da Química, Física e Biologia.

Você tem em mãos o e-book com os Anais do ENEBIOnLine, a edição totalmente à distância (ou remota, ou virtual, ou on-line, como queira! rs) do VIII Encontro Nacional de Ensino de Biologia (VIII ENEBIO), do VIII Encontro de Ensino de Biologia da Regional Nordeste (VIII EREBIO-NE) e do II Simpósio Cearense de Ensino de Biologia (II SCEB). Uma edição histórica, em vários sentidos: 1. A primeira edição completamente não presencial dos nossos encontros de Ensino de Biologia; 2. A primeira edição organizada e realizada durante uma pandemia de grandes proporções que causa (ainda, infelizmente) uma crise sanitária sem precedentes na história mundial; e 3. Uma edição que tem “história pra contar”, exatamente em virtude desses contextos. Em 2018, no VII Encontro Nacional de Ensino de Biologia (VII ENEBIO) e I Encontro Regional de Ensino de Biologia (I EREBIO-NORTE), estávamos muito animados em trazer de volta para o Nordeste esse evento que bianualmente congrega nossa comunidade sbenbiana e tem o papel fundamental de dar continuidade e ampliar as ações da SBEnBio, promovendo interações de profissionais que atuam em diversos níveis e ambientes educativos no ensino de Ciências e de Biologia. Além disso, pensávamos em consolidar o EREBIO-NE como um importante espaço acadêmico-científico de troca e aprendizados entre professores e pesquisadores da região. Esses encontros congregam pesquisadores dos campos do Ensino de Ciências e Biologia, professores do ensino superior e da educação básica, além de estudantes das Licenciaturas em Ciências Biológicas e afins, alcançando quatro importantes segmentos de investimento na educação científica de qualidade. Empolgados com a expressiva participação numérica alcançada nos encontros nacionais anteriores e com a possibilidade de mitigar a carência de eventos dessa natureza e magnitude na região nordeste, em 2019 submetemos três propostas de tema gerador a uma enquete pública nas redes sociais. O tema gerador escolhido para o VIII ENEBIO, VIII EREBIO-NE e II SCEB, foi Itinerários de Resistência: Pluralidade e Laicidade no Ensino de Ciências e Biologia. Um tema que nos possibilitaria propor debates sobre questões pertinentes ao contexto social, político e educacional que o país atravessava e que acreditávamos que impactariam a formação inicial e continuada tanto quanto o trabalho de professores de Ciências e Biologia, tais como: as novas Diretrizes Curriculares Nacionais para a Formação Inicial de Professores, as recém aprovadas Base Nacional Comum Curricular para o Ensino Fundamental e para o Ensino Médio, além de questões sócio ambientais e culturais, educação para as relações étnico-raciais, educação no campo, educação indígena, relação entre conhecimento científico e conhecimentos de outras naturezas (religiosos, senso comum etc.), dentre tantas outras importantes questões. Nem imaginávamos que um vírus, que ironia, nos imporia mudanças... ainda no final de 2019 vimos nos noticiários o surto do SARS-CoV-2 na China... graças à nossa formação específica (em Ciências Biológicas) e à lembrança de situações anteriores, como a do surto da Síndrome Aguda Respiratória Grave (SARS) em 2002-2003, sabíamos que poderíamos estar diante não apenas de uma mera “gripezinha”, mas mantivemos os planos do evento que estava agendado para acontecer no período de 29 de Abril a 02 de Maio de 2020. Tínhamos um enorme interesse em promover o debate acerca das experiências dos professores e pesquisadores que atuam em diferentes espaços e níveis de escolaridade e refletir sobre como as características da pluralidade e laicidade necessárias a uma educação básica democrática e inclusiva, especialmente a educação científica, estavam, e ainda estão hoje, vulneráveis no contexto dos atuais projetos e políticas educacionais. Nesse contexto, debater conflitos, propor ações e compartilhar experiências eram os desafios que nos moviam a pensar itinerários de resistência que caminhassem na direção do fortalecimento da profissão docente e do ensino de Ciências e de Biologia. Com o aumento do número de casos de infecções na China e com sua disseminação pela Europa, nos acendeu o alerta para um eventual adiamento. Em março, o primeiro caso no Brasil é noticiado, mais tensão e mais apreensão. Tivemos uma primeira onda, da qual, para alguns especialistas, nunca saímos, decidimos, portanto, após as primeiras medidas de isolamento social, adiar a realização do Encontro para acontecer, ainda presencialmente, de 02 a 04 de setembro de 2020. Em 31 de maio, já somávamos mais de 29 mil vidas ceifadas no país pela COVID-19, em meio a negacionismos de todas as ordens que indicavam que o quadro provavelmente pioraria. Em junho de 2020, a Coordenação Organizadora Local, em concordância com a Diretoria Executiva Nacional (DEN) da SBEnBio e seu Conselho Deliberativo Nacional (CDN), comunicava o adiamento do evento por tempo indeterminado. Nesse momento, tínhamos indicativos de que poderíamos contar em breve com uma vacina, mas não havia prazo para que isso acontecesse. O Ceará e outros estados nordestinos estavam em lockdown, o país estava atônito frente à disseminação do vírus e ao negacionismo dos que deveriam estar lutando para combatê-lo. Final do ano de 2020, apesar de uma pequena queda do número de mortes no país e do anúncio de vacinas por laboratórios e institutos como o Butantan e a Fiocruz, as exitosas experiências de nossa parceira, Realize Eventos Científicos, na organização de eventos nacionais on-line, nos estimulou a retomar a organização do evento e considerar a possibilidade de sua realização nesse modelo. Seria uma aventura! Mas será que a vacinação não possibilitaria nos encontrarmos presencialmente, já em 2021? As estimativas não eram nada animadoras. Tudo indicava que o foco do governo federal seria o “tratamento precoce”, sabidamente ineficiente. Enfim, nos apegamos a experiência de nossa parceira e, em novembro de 2020, anunciamos o novo formato do evento, nascia o ENEBIOnLine! E foi contando com expressiva compreensão e apoio da comunidade sbenbiana que, mesmo que registrado descontentamentos, prevaleceu a decisão consciente ante a crise sanitária que ainda enfrentávamos no final de 2020 e início de 2021; e de 25 a 29 de janeiro aconteceu o VIII ENEBIO, VIII EREBIO-NE e o II SCEB, no formato totalmente on-line. Mantivemos praticamente a mesma programação, apesar do contexto da pandemia de COVID-19 e de suas implicações para a nossa área, como o impacto do ensino remoto na educação científica e formação docente, terem permeado inevitavelmente os debates nas palestras, mesas redondas e sessões de apresentação de trabalho. Podemos dizer que foi um “sucesso de público e de crítica”, com 909 credenciados participando das seis mesas redondas, palestras de abertura e encerramento, reunião ampliada da SBEnBio, painel temático reunindo as ex-presidentas e os ex-presidentes da associação... e tudo no conforto e na segurança de nossos lares. Uma decisão que já durante o evento se mostrava acertada, tendo em vista o recrudescimento da crise sanitária, com aumento alarmante do número de mortos (hoje, já somamos mais de 265.500 vidas perdidas para a COVID-19, segundo o último balanço do consórcio de veículos de imprensa), colapso da rede de atendimento hospitalar e que, possivelmente, será agravada em função da morosidade da vacinação no país associada ao “jeitinho brasileiro” de desobedecer as normas básicas de (auto)proteção contra a infecção. Apesar dos tempos terríveis que aparentemente ainda haveremos de enfrentar, esperamos que o reconhecimento pelo STF da perseguição jurídica sofrida pelo nosso ex-presidente da República... ops (desculpem-nos o ato falho! rs)... esperamos que a publicação desse e-book com os Anais do ENEBIOnLine, contendo a íntegra dos 632 trabalhos apresentados durante o evento, chegue como um sopro de esperança de que dias melhores virão! De que depois da peste e da tempestade, virá a bonança... de que, no segundo semestre de 2022, todes vocês poderão estar conosco em Fortaleza, Ceará, para o IX ENEBIO, IX EREBIO-NE e III SCEB... para sentir o calor da ‘Terra da Luz’ e do abraço que não pôde ser dado, para debater sobre o Ensino de Biologia, cada dia mais necessário no enfrentamento do negacionismo científico e das fake news que adoecem de morte o Brasil.

Esta obra se debruça sobre diálogos entre políticas públicas e direito, trazendo artigos científicos de diversos autores brasileiros acerca da participação e da sua efetividade na sociedade contemporânea. O livro apresenta um olhar interdisciplinar, sendo composto por capítulos escritos por pesquisadores não só da área jurídica, como também de Psicologia, Biologia, Odontologia e Pedagogia. A divisão dos capítulos parte de temas mais relacionados à participação política por diferentes vias, passando pelas demandas por efetivação dos direitos humanos, sem retrocesso social. Em seguida, transita por violações específicas no âmbito dos direitos a educação, igualdade racial e de gênero, moradia, dignidade física, psíquica e sexual, segurança pública e saúde. O primeiro capítulo discute em que medida foi eficaz a participação popular na tramitação da reforma política na Câmara dos Deputados do Brasil. Descreve as vias de participação popular nesse âmbito e discute seus efeitos na tramitação da referida reforma, a partir dos procedimentos metodológicos de revisão bibliográfica, análise de documentos, estudo de caso e process tracing com elite interviewing, em abordagem qualitativa. Os resultados indicam que, embora tenha havido aumento da participação popular institucional no período sob enfoque, o parlamento aplicou não decisões em relação à reforma política intencionada pelas entidades da sociedade civil que organizaram as provocações ao Poder Legislativo. Em seguida, o segundo capítulo tem como principal objetivo a análise acerca do Portal e-Democracia e o seu papel para uma maior democracia participativa de, principalmente, inclusão das minorias sociais. Estuda a relação entre a democracia brasileira e a participação popular, investiga o porquê do Portal e-Democracia ser tão necessário para a defesa dos direitos das minorias sociais, bem como explica a importância da participação popular legislativa das minorias sociais. Esta pesquisa parte de fontes bibliográficas primárias e secundárias, com revisão bibliográfica e análise do próprio portal em estudo. O estudo conclui que é essencial a criação de políticas públicas para a participação política das minorias sociais, sendo uma delas o mencionado portal eletrônico, porém esta medida isolada não resolve a presente questão, sendo necessárias políticas públicas de fácil acesso a todos e todas. O terceiro capítulo aborda as relações que conectam o princípio da vedação ao retrocesso social com as manifestações que apoiam o movimento de retorno da ditadura militar no Brasil no século XXI. Para tanto, no primeiro momento, os autores elucidam os conceitos de vedação ao retrocesso social, bem como o significado do chamado efeito cliquet, o qual corrobora com os ditames fixados do respectivo princípio, haja vista que, no alpinismo, significa que quando atingida uma determinada altura, não se pode mais voltar. Contextualizam, ademais, as heranças e as consequências da ditadura militar no Brasil, além de analisarem as manifestações que têm ocorrido na atualidade em prol de um retrocesso ao período ditatorial. O trabalho comprova que a volta da ditadura militar seria uma afronta ao princípio da vedação ao retrocesso social, uma vez que extinguiria e revogaria direitos fundamentais já consolidados no ordenamento jurídico brasileiro e regressaria a um período autoritário, que não se coaduna com o Estado Democrático de Direito. Conectando-se à discussão acerca de retrocessos e inefetividade de direitos, o quarto capítulo mergulha no debate democrático acerca da expansão da educação superior brasileira e das políticas de acesso que promoveram um significativo acréscimo de ingressantes nos cursos de graduação no Brasil. O trabalho atende a pesquisa bibliográfica e fundamenta-se na revisão de literatura com o suporte teórico de autores e legislações da área afim, refletindo sobre o processo de evolução e inclusão mediante a implementação de programas e ações afirmativas para a educação superior que corroboraram para dirimir o caráter elitista impregnado no perfil deste nível de ensino. Embora distante de reparar as injustiças sociais no Brasil, tais políticas geraram um número maior de ingressantes das camadas menos favorecidas da sociedade e, com isso, a representatividade dos grupos denominados de minorias aumentou, ainda que de modo tímido, mas refletindo na redução do déficit de acesso ao ensino superior. Ainda sobre desigualdades na educação no país, no quinto capítulo as autoras investigam como a discussão sobre o mito da democracia racial no Brasil impulsionou práticas racistas ao longo do tempo e como, a partir de um viés multiculturalista, se assentam as políticas afirmativas, com destaque para a política de cotas para ingresso de negros e pardos nas Universidades, implementadas a partir de 2012. Apontam, para tanto, que a construção deste mito não se coaduna com questões mais modernas e de relevo econômico e social que pautaram a promoção de políticas afirmativas no Brasil. Nesta senda, as políticas sociais afirmativas de cotas são medidas tomadas pelo Estado, de cunho temporário ou especial, com o objetivo de assegurar igualdade de oportunidades e que foram negadas historicamente para a população afro. Para embasar este artigo, foi utilizada a metodologia de revisão bibliográfica e a análise documental das políticas afirmativas de cotas. O capítulo seguinte aventa que as relações sociais são produtos da vida em sociedade e caracterizam-se, essencialmente, pela interação que há entre seus componentes considerando territórios, culturas, identidade e ideias. Contudo, é da natureza dessa dinâmica social que alguns grupos sociais se sobressaiam sobre os demais e imponham seus interesses pessoais acima dos interesses públicos, prejudicando, assim, a concretização de interesses gerais. Dessa maneira, com o intuito de explicar como essas relações de poder e de domínio influenciam na concretização de políticas públicas, o trabalho se propôs a analisar qual o protagonismo que os agentes sociais têm nessa fase. Como exemplo prático dessa discussão acadêmica, analisa-se como a elite governante brasileira busca conciliar seus interesses com a efetivação de políticas públicas habitacionais. Em outro aspecto de violação de direitos através de deficiências de políticas públicas, o sétimo capítulo analisa a evolução da taxa de homicídios no Brasil, verificando grande heterogeneidade entre os estados. Isso constitui uma deficiência estrutural grave, que compromete as bases do desenvolvimento no país. Assim, o propõe-se o entendimento da correlação das taxas de homicídios no Brasil em um período de 10 anos, verificando que os estados do Rio Grande do Norte, Goiás, Maranhão e Piauí se correlacionaram positivamente, apresentando um aumento na taxa de homicídios, enquanto Espírito Santo e Paraíba obtiveram redução. Diante dos resultados, destaca-se a atenção às políticas de segurança pública e conclui-se que é possível identificar padrões estruturais das distintas dinâmicas de homicídios contribuindo para e informações relevantes que possam subsidiar a implantação e efetividade das políticas públicas no país. Na seara das violências, o oitavo capítulo destaca aquelas cometidas contra mulheres no ambiente doméstico no bairro de Narandiba, em Salvador-BA. O artigo tem como objetivo geral analisar a possibilidade ou não de ampliação no atendimento às mulheres que sofrem violência doméstica através da unidade do Centro Judiciário de Solução Consensual de Conflitos (CEJUSC), órgão vinculado ao Tribunal de Justiça da Bahia, localizado no bairro de Narandiba, em Salvador. Como primeiro objetivo específico, examina se o acolhimento dessas vítimas estaria em conformidade com o regulamento e a missão que fundamenta o trabalho do CEJUSC. Como segundo objetivo específico, reflete sobre a demanda de mulheres, vítimas de agressão doméstica, que passam pela unidade de Narandiba em busca de um apoio ou uma orientação jurídica. Em termos metodológicos, o artigo é qualitativo e analisa o tema proposto utilizando a revisão bibliográfica, a análise de documentos e a observação da autora durante o período de janeiro a outubro de 2019. As violências domésticas atingem, não raro, a dignidade sexual de crianças e adolescentes. Assim, a conexão para o nono capítulo apresenta as etapas da perícia psicológica nos casos de suspeita de abuso sexual, tendo como enfoque os instrumentos e testes psicológicos mais utilizados nestas avaliações. Os objetivos específicos englobam conceituar avaliação psicológica e abuso sexual, bem como trazer técnicas da Psicologia que melhor respaldem o psicólogo nesse processo de avaliação. O método deste estudo foi realizado por meio de pesquisa bibliográfica. A avaliação psicológica pericial difere de outros tipos de avaliação psicológica em função de sua meta final onde atua subsidiando decisões legais quando estas dependem de um entendimento de funcionamento psicológico do(s) envolvidos(s) nos casos de suspeita de abuso sexual de crianças e adolescentes. Abuso sexual é qualquer contato ou interação entre uma criança ou adolescente e alguém em estágio psicossexual mais avançado do desenvolvimento, na qual a criança ou adolescente estiver sendo usado para estimulação sexual do perpetrador. As avaliações psicológicas têm sido requisitadas em todas as fases de encaminhamento dos casos, da notificação ao processo judicial. Desde a fase inicial ou investigativa, a criança pode passar por inúmeras intervenções (entrevistas, aplicação de testes psicológicos, etc), inclusive de psicólogos que não atuam diretamente com a justiça, mas que acabam colaborando no processo quanto à veracidade da situação de abuso. Não obstante possam ser vítimas de diversas violações de direitos, por vezes crianças e adolescentes entram em conflito com a lei. Nesse contexto, o décimo capítulo investiga a contribuição da aplicabilidade da entrevista terapêutica no processo de avaliação psicológica de adolescentes em conflito com a lei, descrevendo as características de adolescentes, explicando a função da Psicologia e elucidando entrevista terapêutica como ferramenta diferencial na avaliação psicológica desses adolescentes. Como metodologia foi realizada uma revisão bibliográfica, com base em livros e artigos científicos, com tratamento particular de publicações da área de Psicologia e da legislação específica sobre os direitos do adolescente. Como resultados, os adolescentes em conflitos com a lei apresentam características que se fundamentam em aspectos históricos, sociais e culturais e a entrevista terapêutica mostrou-se como importante na contribuição da avaliação psicológica desses adolescentes, uma vez que se dispõe como uma técnica de analise aberta, capaz de se ajustar a diferentes situações clínicas, com possibilidades de descobrir as subjetividades, conhecer comportamentos, indicar encaminhamentos ou fazer intervenções. Diante de uma realidade vivencial complexa e aprisionadora, a avalição psicológica é uma prática relacional, que visa com alteridade contribuir para incluir socialmente os adolescentes. É certo que a mudança comportamental dos adolescentes infratores requer apoio familiar e um trabalho multidisciplinar, que não comporta apenas o papel do Psicólogo, mas, o envolvimento do Estado e da sociedade como um todo em ações conjuntas, para efetivamente produzir transformações. Conclui-se que o estudo produziu uma discussão importante, por dispor conhecimentos para área da Psicologia, profissionais que atuam e para a sociedade, que podem melhor conhecer os espaços de intervenção, meios de atuação e a importância da psicologia neste contexto. Nessa linha de discussão que abarca questões relacionadas à saúde, o capítulo seguinte analisa a judicialização do direito à saúde. Esse direito, conforme o artigo 196 da Constituição Federal, pertence a todos e é dever do Estado fornecê-lo por meio de políticas públicas. Entretanto, a possibilidade de exercício por todos do referido direito fica limitada aos recursos disponíveis e por ações judiciais no âmbito do Sistema Único de Saúde (SUS). O objetivo geral, portanto, é analisar se a judicialização da saúde é a solução mais adequada para se obter uma vaga de leito de UTI no SUS. Assim, o trabalho descreve como o SUS regula a distribuição de leitos e reflete sobre o fenômeno da judicialização e o seu potencial ou não de efetivar esse direito com isonomia. Para a sustentação metodológica, o estudo utilizou de uma pesquisa qualitativa, com método fundamentado em análise de documentos e revisão bibliográfica a respeito do tema. Os resultados mostram que, embora o SUS estabeleça a quantidade de leitos de UTIs, alguns hospitais carecem de mais ofertas de leitos. Desta forma, é relevante ter um políticas públicas que efetivem o direito à saúde, em cumprimento às previsões legais. Nesse contexto de inefetividade do direito à saúde, o capítulo seguinte descreve o perfil das demandas judiciais referentes a medicamentos no município de Cuiabá – Mato Grosso, realizado na Defensoria Pública, em 2013, utilizando indicadores de Pepe. Foram analisadas 135 ações judiciais relativas às solicitações de medicamentos e 166 medicamentos requeridos nas mesmas. Em quatro dimensões (sócio demográficas do autor da ação judicial; processuais das ações judiciais; médico sanitárias das ações judiciais; político-administrativas das ações judiciais). As informações obtidas e delineadas no capítulo expõem o cenário da saúde frente a judicialização de medicamentos e as características dos indivíduos que abriram demandas contra o Estado ou o Município. Em preocupação com a saúde e a segurança alimentar dos brasileiros, o décimo terceiro capítulo discute o cabimento de arguição de descumprimento de preceito fundamental (ADPF) contra a nova política brasileira de agrotóxicos. A evolução clássica da política brasileira de agrotóxicos foi marcada pela ótica da proteção. Todavia, novos desafios, hoje, contrariam a política até então vigente e faz surgir um movimento, cada vez mais forte, pela flexibilização de normas. Nesse cenário, percebe-se o surgimento de uma nova política sobre tema, mas desta vez, tendo o agronegócio como protagonista. Desse modo, os efeitos desta nova política já são tangíveis, o que nos leva a discutir a constitucionalidade de tais ações. Posto isso, este trabalho tem como objetivo promover um debate acerca da existência de uma nova política brasileira sobre agrotóxicos em suas principais questões. Para realizar este trabalho, foram utilizados os tipos de pesquisa bibliográfica e documental, através da abordagem qualitativa. Conclui-se que a nova política de agrotóxicos é inconstitucional e, por consequência, atacável por meio da ADPF. Avançando na busca de efetivação de direitos humanos através de políticas públicas, o último capítulo investiga a necessidade de ressignificação das bases da teoria da execução para efetivar ações civis públicas em que se discutem tais políticas. Para tanto, utiliza-se de procedimento monográfico e bibliográfico. O estudo expõe as razões que levaram à judicialização da política, bem como traça diretrizes gerais sobre o atual panorama da execução. Aborda, ainda, a crise de efetividade da execução, que insiste em se valer de multas pelo descumprimento – que vêm sendo inefetivas para o cumprimento. Após essa discussão, o trabalho traz instrumentos jurídicos hábeis a colaborar com a concretização dos direitos. Espera-se que esta seleção de artigos científicos contribua, como obra coletiva, para avanços no conhecimento sobre políticas públicas como efetivadoras de direitos humanos, bem como sobre as múltiplas formas de participação popular na luta por tais direitos na sociedade contemporânea.

Com muita satisfação publicamos a obra intitulada “Gênero, raça, classe e o Direito: uma análise inclusiva”. Trata-se de uma obra que visa reunir pesquisas sobre estudos de gênero oriundas dos mais diversos pesquisadores de nosso país. Portanto, a presente obra traz temas muito interessantes e polêmicos, possuindo uma análise interseccional entre Gênero, Raça, Classe e Direitos Humanos. O primeiro capítulo intitulado “Diferenças de gênero na ciência e tecnologia: as questões de interseccionalidade a partir de experiências femininas” teve como objetivo principal estudar as mulheres na ciência, visto que a Ciência e Tecnologia (C&T) é um espaço de pesquisa e extensão de larga exploração desde o advento do capitalismo e por ter vinculação direta com as ciências da natureza, o ambiente ficou tradicionalmente conhecido como um espaço masculino devido a construção de um imaginário patriarcal. A estrutura das organizações não possibilita o êxito profissional do gênero feminino, o que nos possibilita afirmar que isso se deve mais pelas estruturas institucionais inapropriadas do que a falta de aptidão para as mulheres nas áreas da C&T. Nesse aspecto, ser uma mulher inserida na C&T é transgredir a cultura, afinal há uma diferença de gênero na área que resulta em silenciamentos, perseguições, preconceitos e dificuldades. O segundo capítulo intitulado “Violência de gênero: tecendo reflexões acerca da questão racial” visa aprofundar a temática da violência de gênero a partir do viés da interseccionalidade de gênero, raça e classe, os três eixos estruturantes que constituem a nossa sociedade. Não obstante, fruto de uma sociedade patriarcal, capitalista e racista em que a violência contra as mulheres atinge todas as classes sociais, raças e etnias, este trabalho se propõe analisar essas violações com ênfase nos dados estatísticos que mostram que as mulheres negras são as mais violadas no que se refere a violência doméstica. Para Heleieth Saffioti, os três eixos se fundem de maneira profunda e formam um “nó”. O patriarcado é o eixo mais antigo, logo, o racismo e o capitalismo encontram nele um terreno fértil para sua instalação e reprodução. Para além disso, busco trazer a reflexão dos avanços e limites legais na prevenção e enfrentamento à violência contra às mulheres, bem como busco atentar aos desafios profissionais presentes nos serviços de atendimento e os efeitos da pandemia de Covid-19. Para tal, foi realizada uma revisão e análise bibliográfica de livros, artigos, dossiês e leis. Além dessas fontes, foi utilizado vivências e experiências de estágio no Centro de Referência para Mulheres Suely Souza de Almeida (CRM-SSA). O terceiro capítulo intitulado “A representatividade da pessoa com deficiência física nas histórias em quadrinhos (HQs)” trata da importância da representatividade de pessoas com deficiência física no conteúdo das histórias em quadrinhos (HQS), contribuindo para a desconstrução de estereótipos existentes. Onde essas personagens através dos textos e das figuras oriundas do trabalho dos cartunistas grandes contribuintes auxiliam para informar, reduzir diferenças em qualquer faixa etária, ferramenta didática, auxilia na representatividade, visibilidade e inclusão. Apresentamos aqui através dessa pesquisa qualitativa, descritiva e bibliográfica apoiada na escrita um breve panorama das HQS e da deficiência, os tipos de deficiências e apresentamos as respectivas personagens com as mesmas características. O quarto capítulo intitulado “Assédio moral no serviço público estadual” tem como objetivo analisar um caso de assédio moral no trabalho ocorrido no âmbito da administração pública em Santa Catarina. As dificuldades e os desafios vivenciados pela vítima auxiliam a repensar acerca das possibilidades de prevenção, repressão e punição do assédio moral na esfera pública administrativa estadual, bem como a reparação de danos na justiça. Diante da análise do caso, observou-se que o assédio moral no trabalho é um fenômeno complexo, multidimensional, e que causa danos físicos e psicossociais, podendo acarretar incapacidade para o trabalho (aposentadoria precoce). Nesse contexto, pondera-se que os trabalhadores da administração pública, de regime estatutário, podem denunciar o assédio moral em duas esferas distintas, administrativa e justiça comum. O quinto capítulo intitulado “Biologia celular e molecular: a relevância do homossexualismo e seus componentes genéticos e biológicos” teve por objetivo realizar um levantamento bibliográfico sobre esta temática, tão atual na sociedade humana, abordando assim as contribuições genéticas e enfatizando os preconceitos da sociedade de forma ativa para os LGLBT (Lésbica, gays, bissexuais e transgêneros) A sexualidade é uma necessidade vital para vida do ser humano, desde a sua infância onde vem conhecer a sua higienização, a percepção do sexo masculino e feminino, características dos seus órgãos genitais e da necessidade que evidenciam cada um deles, até a vida adulta, onde tem sua vida sexual ativa. Porém, a sociedade de forma incoerente, de forma crítica e irrelevante, faz o julgamento da opção e determinação sexual, não considerando os fatores que afloram diante dos caracteres genéticos, fatores esses que agregam nos cromossomos, que vem do início de sua formação. O sexto capítulo intitulado “Morro da Gamela: a sacralidade ao longo do tempo” os autores dissertam que muitos crentes que peregrinam até o morro da gamela na atualidade pensando que a sacralidade do lugar seja algo iniciado pelos seguidores do cristianismo. Entretanto, de acordo com algumas publicações do periódico Diário da Manhã, tais cerimônias, bem como também a localidade, eram vistos por um segmento da sociedade capixaba da época como algo afrontoso. Na edição do dia 13 de maio de 1917 o Diário da Manhã publicou uma matéria que tinha como título: “Um antro de reuniões suspeitas” (figura 1), narrando uma ação policial realizada no Morro da Gamela. O sétimo capítulo intitulado “Contextualizando as atitudes dos profissionais da saúde em relação ao aborto legal” destaca que na maioria dos países desenvolvidos, o aborto é permitido para salvar a vida da gestante, resguardar a sua saúde física ou mental, quando a gravidez resultou de estupro ou incesto, em casos de anomalia fetal, por razões socioeconômicas e por requisição da mulher. Contudo, no Brasil, o aborto é ainda um tema polêmico que suscita discussões nas diversas áreas do conhecimento, notadamente entre os profissionais da área de saúde que realizam o procedimento. O objetivo geral do estudo é realizar uma análise da produção científica sobre as atitudes dos profissionais de saúde em relação ao aborto legal. O oitavo capítulo intitulado “Sistema prisional brasileiro: o processo de ressocialização de ex-detentas ao convívio social” tem como objetivo refletir sobre a realidade vivida pelas detentas nas prisões brasileiras e entender como o Sistema Prisional pode influenciar no processo de ressocialização de “ex-detentas”. Este capítulo objetiva analisar a situação vivida pela mulher no cárcere, constatar se as detentas estão sendo condenadas à luz dos mesmos princípios aplicados aos homens, bem como analisar se há medidas eficazes para a ressocialização das mulheres encarceradas. O nono capítulo intitulado “A questão brasileira quanto à relação cárcere e maternidade em tempos de pandemia” tem por objetivo tratar das questões ligadas à criminalidade feminina, focada na condição de mulher e mãe apenada no sistema prisional brasileiro, apresentando as imbricações das vulnerabilidades no que diz respeito ao seu acesso à saúde, bem como de seus (as) filhos (as); o enfrentamento no contexto prisional e a luta pelo exercício da cidadania, enquanto dignidade da pessoa humana, diante das contumazes violações dos direitos humanos, mormente agora, diante da pandemia do coronavírus. Por fim, se lança um alerta no sentido do silêncio dos órgãos públicos quanto às situações de internações hospitalares, em caso de contágio, produzindo uma espécie de invisibilidade acerca desse público já notoriamente agredido em sua condição humana. O décimo capítulo intitulado “O Direito à Educação, a legislação de cotas e a implantação de comissões de heteroidentificação” e tem como objetivo tratar da importância do direito à educação como meio de inserção do ser humano em uma sociedade mais justa e igualitária, correlacionado a relevância da aplicação das ações afirmativas por parte do governo federal nas instituições de ensino superior, tendo como campo de estudo a implantação da Comissão de Heteroidentificação para combate às fraudes no ingresso por cotas nas universidades públicas. Para tanto, o sistema de cotas, historicamente e hodiernamente, percorrendo a legislação nacional é explorado. Além disso discorre-se sobre especificidades da diferenciação de cota social e cota racial e sua forma de aplicação na instituição, citando os critérios usados para ingresso como também os grupos beneficiados. O décimo primeiro capítulo intitulado “Implantação da comissão de heteroidentificação em uma universidade do Estado de Minas Gerais” trata da implantação da Comissão de Heteroidentificação para combate às fraudes no ingresso por cotas na Universidade Federal do Triângulo Mineiro. Para tanto, o sistema de cotas, historicamente e hodiernamente, percorrendo a legislação nacional é explorado. Para tanto, são apresentadas todas as medidas que foram tomadas para a concretização e implantação da comissão na instituição, prelecionando os atos iniciais das audiências públicas de discussão sobre o seu cabimento na Instituição, bem como os critérios utilizados nas entrevistas para o ingresso dos discentes. O décimo segundo capítulo intitulado “Perspectivas da vivência e permanência de jovens sobre continuidade no campo após conclusão do Ensino Médio” tem como objetivo analisar as principais perspectivas para a vivência e permanência de jovens sobre continuidade no campo após conclusão do ensino médio, tendo como base o jovem que estudam em salas anexas no município de Vila Rica-MT. A pesquisa foi realizada com os alunos da Escola Vila Rica, que estudam em salas anexas no campo em Vila Rica-MT. Foi realizada uma pesquisa “survey”, por meio da aplicação de um questionário estruturado, os dados coletados foram transferidos, tabulados e analisados por meio de programas próprios para armazenamento de dados, utilizando técnicas descritivas, tabulação cruzada e análise em percentual. Ao analisar as principais perspectivas da vivência e permanência de jovens sobre continuidade no campo após conclusão do ensino médio, a maioria dos estudantes falaram que recebem incentivo dos familiares para permanecer no campo após o término do ensino médio. Os jovens em sua maioria entendem a importância de se fazer o controle dos custos, produção e venda, o que pode dificultar ao produtor saber o real custo da sua produção, fazer planejamento e tomadas de decisões assertivas. O décimo terceiro capítulo intitulado “Desigualdade de gênero na política brasileira: dificuldades e desafios” tem como enfoque a discriminação da mulher no cenário político brasileiro tendo como base o Direito Comparado. Verifica-se a ausência de igualdade de fato, no que tange à paridade de oportunidades e a acesso a cargos públicos. O tema possui relevância jurídica visto que mulheres e homens acessam posições de poder político de diferentes maneiras, mas as mulheres ainda continuam sub representadas na esfera política brasileira. Isso viola o disposto no artigo 5°, inc. I da Constituição Federal Brasileira, que prevê a igualdade entre homens e mulheres em direitos e obrigações. É necessária uma mudança da mentalidade para que realmente haja a quebra dos estereótipos de identidade de gênero ainda existentes. O décimo quarto capítulo intitulado “O que os professores devem saber sobre as dificuldades de aprendizagem para facilitar o processo de ensino e aprendizagem?” se propõe realizar pesquisa sobre as dificuldades de aprendizagem. Objetiva-se identificar as suas principais causas, consequências, as formas de diagnóstico, tratamentos ou intervenções. Tanto a escola quanto a família são agentes relevantes na formação do educando, pois o mesmo se desenvolve a partir do contexto ao qual ele está inserido. A escola e a família devem procurar meios para estabelecer uma parceria e garantir educação de qualidade ao aluno. Porém, na maioria dos casos ocorre um distanciamento entre essas instituições, o que acaba desestimulando a criança a querer aprender. O décimo quinto capítulo intitulado “A participação feminina nos cursos de graduação da Escola Naval: uma história de conquistas” tem por objetivo apresentar a participação histórica da jovem mulher militar oriunda da EN. A abordagem é qualitativa, com pesquisa documental e bibliográfica como técnicas iniciais exploratórias e com dados de pesquisa longitudinais, de 2014 a 2021. A participação das mulheres em diversas ocupações profissionais até pouco tempo masculinas está em crescimento. A história de conquistas femininas é, sem dúvidas, marcante na construção de uma oficialidade que representa uma parcela da sociedade brasileira. As futuras oficiais estão a aprender os comportamentos desejáveis que seguirão na profissão militar, de dedicação à Marinha, à Nação, sem se esquecerem de que são mulheres e cidadãs, integrantes ativas de uma sociedade que busca um país desenvolvido, forte, livre, igualitário, justo e soberano. O décimo sexto capítulo intitulado “Discutir gênero - Identidade de gênero e sexualidade interseccionando as experiências de mulheres e homens transexuais” aborda perspectivas referentes à identidade de gênero e sexual tomando-se como referência a experiência transexual. Mostra-se imprescindível refletir sobre a sexualidade e sobre os questionamentos e colocações equivocadas em relação aos corpos e identidades de mulheres e homens trans. Busca-se o entendimento de que identidade de gênero e orientação sexual são demandas pessoais – íntimas em relação a gênero e corpo sendo este, inclusive, um lugar de enunciado político. O décimo sétimo capítulo intitulado “Reconhecimento das diferenças e superação dos preconceitos frente à diversidade sexual no âmbito educacional” tem como objetivo apresentar a diversidade sexual dentro do âmbito escolar, promovendo assim, o reconhecimento das diferenças e superação dos preconceitos que tem raízes culturais em tabus estigmatizados pela sociedade que vê a diferença como algo fora da ordem social. A pesquisa tem uma abordagem qualitativa, de natureza básica, com objetivo explicativo através do procedimento bibliográfico, onde foram feitas pesquisas em livros, artigos e monografias disponíveis via online. O décimo oitavo capítulo intitulado “Cultura do Estupro no Brasil: um mal a ser combatido” trata dos estarrecedores índices de violência contra a mulher no Brasil, especialmente no caso de estupros, que maculam não somente o corpo, mas o psicológico das mulheres agredidas. No caso, será apresentado um panorama da legislação de combate à violência contra a mulher no Brasil, que mesmo sendo de excelência no que concerne ao arcabouço jurídico, ainda não é realidade de forma prática no Brasil. Por fim, será apresentada a cultura do estupro no Brasil, mal esse que necessita ser combatido, sendo necessária uma mudança urgente desse modo negativo de agir e pensar do brasileiro em relação à mulher. O décimo nono capítulo intitulado “Posicionamentos sobre a mulher indígena na produção científica em saúde” buscou problematizar as construções discursivas sobre saúde e cuidado presentes na literatura acadêmica brasileira acerca de mulheres indígenas. Para tal, foi produzida uma revisão da literatura nas plataformas de indexação do SciELO, BVS-Psi, BDTD e Catálogo de Teses e Dissertações da CAPES, localizando um total 90 trabalhos, sendo, 8 artigos e 2 dissertações do campo da saúde analisados neste trabalho. Buscou-se então identificar, nessa literatura, os conceitos de saúde e cuidado; analisar como as mulheres indígenas são discursivamente posicionadas com relação às práticas de cuidado com a saúde. O vigésimo capítulo intitulado “A atuação do CREAS na violência doméstica contra mulheres: reflexões sobre o contexto de necropolítica na pandemia” tem como objetivo analisar a violência doméstica contra mulheres nesse contexto de necropolítica na pandemia, devido ao seu crescimento, inclusive em relação às demais minorias sociais, conforme será discutido por meio de dados quantitativos e qualitativos. Serão, também, apresentados desafios para as políticas públicas de enfrentamento à violência doméstica contra mulheres, com ênfase no Centro de Referência Especializado de Assistência Social, criado a partir dos princípios do Sistema Único de Assistência Social. Pretende-se, assim, dar visibilidade e desnaturalizar perspectivas essencialistas sobre a desigualdade de gênero e sobre o descaso do Estado frente a esse contexto, ressaltando a relevância de uma análise crítica e psicossocial de enfrentamento à violência doméstica contra mulheres. O vigésimo primeiro capítulo intitulado “Não morrer nem sempre é viver: análise do auxílio emergencial para proteção das mulheres negras na pandemia de Covid-19” pretende o escrutínio e a reflexão sobre a novel norma de Auxílio Emergencial, a Lei nº 14.171/21, analisando-a no âmbito do Direito de Família, dos Direitos da Criança e do Adolescente, e especialmente no tocante aos direitos das mulheres, encontrando-se socialmente inserido dentre as críticas ao modelo patriarcal e racial de sujeição feminina. Propõe-se, então, a utilizar as abordagens antropológica e jurídica para investigar os contextos de opressão de gênero, raça e classe diante do cenário da Pandemia de Covid-19, como reflexo do aprofundamento de vulnerabilidades históricas. O vigésimo segundo capítulo intitulado “Cotas como estratégia política do movimento negro: um debate necessário” pretende analisar a lei nº 12.711/2012, visando subsidiar a garantia de direito. Assim como, compreender a importância do movimento negro e do Serviço Social para a concretização das cotas. Trata-se de uma pesquisa bibliográfica, a partir da utilização de publicações de autores sobre os assuntos que compõem o tema. Constata-se que o sistema de cotas étnico-raciais é de extrema importância, sem ela, o ingresso da população negra no ensino superior público, seria quase inexistente, afinal, mesmo com as garantias constitucionais e as legislações pertinentes a esta temática como a Lei Federal 12.288/2010 (que dispõe sobre o Estatuto de Igualdade Racial), assim como o Projeto de Lei 73/1999 e 213/2003 e a referida Lei, continua desqualificando os não brancos, por não conseguirem ter acesso a esse direito por intermédio da competição, do esforço individual, afinal, dentro dos moldes do capitalismo, é isso que vale e importa. O vigésimo terceiro capítulo intitulado “Questões de gênero em noticiários: educação, trabalho e lutas sociais” tem como objetivo apresentar concepções de gênero em noticiários nacionais. Especificamente, caracterizar noticiários nacionais associados ao gênero; realizar uma releitura de noticiários, associando-os ao conhecimento cultural. Desse modo, optou-se por um estudo descritivo com abordagem qualitativa. Para a realização do estudo foram selecionados 10 noticiários publicados no ano de 2017. Após a seleção das fontes de dados, estes foram identificados, classificados e analisados A análise do material de estudo ocorreu de forma interpretativa nas categorias educação, trabalho e lutas sociais contra o sexismo. Com as análises constatou-se que ainda são altos os índices de analfabetismo entre mulheres; que a desigualdade salarial ainda é evidente entre homens e mulheres, embora essas tenham papel participativo na sociedade; que as lutas contra o sexismo não podem parar pois a violência doméstica ainda faz parte da vida de muitas mulheres, embora a Lei Maria da Penha tenha lhes assegurado alguns direitos. Por fim, que prevalece uma cultura hegemônica e machista no nosso país e que se faz necessário maior conscientização da população para a tratativa da temática gênero. O vigésimo quarto capítulo intitulado “Os voos rasantes num mundo em ruínas: um ensaio sobre o racismo em tempos de Covid-19” traz como proposição criar um terreno reflexivo, compondo zonas de encontro entre o saber e o transmitir. A proposição do texto se encontra numa encruzilhada de pensamentos e reflexões que constituem a base da discussão em torno da vida. O ensaio proposto tem como objetivo criar rachaduras para outros conhecimentos, desta forma criando um espaço para que as palavras possam respirar e tomar forma. Os caminhos percorridos vão de encontro a necropolítica instaurada e perpetuada através dos anos e formas de resistência e realidade dos/as jovens negros/as brasileiros. O vigésimo quinto capítulo intitulado “A mulher idosa e a invisibilidade da violência psicológica” tem como objetivo analisar a violência praticada contra pessoas idosas como sendo multifatorial. As mulheres sofrem mais violência em todas as faixas etárias, fato que se agrava com o envelhecimento, adoecimento e ao gênero. A violência contra a mulher idosa pode ser caracterizada como agressão física, verbal, moral, psicológica, sexual, negligência ou abandono, tanto social quanto institucional, caracterizando-se como um grave abuso aos direitos humanos. A Violência Psicológica resulta em sequelas tão graves como as causadas por agressões físicas e, em muitos casos, são desenvolvidos quadros de estresse pós-traumático, depressão, ansiedade, ideações suicidas, entre outros. A Violência Psicológica contra a mulher foi tipificada como crime por meio da Lei nº 14.188/2021. Em diversos contextos, as idosas vítimas de violências, negam-se a adotar medidas legais contra os agressores, que geralmente são membros da família ou a discutir sobre esse assunto com terceiros. Portanto, entende-se que os abusos sejam ainda mais prevalentes e, portanto, subnotificados. Espera-se que esse estudo possa facilitar uma discussão sobre o tema da violência psicológica contra a mulher idosa, um tema ainda tão pouco explorado. O vigésimo sexto capítulo intitulado “Vulnerabilidade da população trans profissional do sexo à manifestações bucais de infecções sexualmente transmissíveis” tem como objetivo identificar as vulnerabilidades em relação às manifestações bucais de IST no grupo alvo. A metodologia seguiu os princípios de uma Revisão de Literatura Narrativa, tendo sido realizada coleta de referencial teórico em sites de bases de dados, tais como Pubmed, SciELO e LILACS. As etapas da pesquisa consistiram em identificar, selecionar e fazer o fichamento de 38 artigos diretamente relacionados ao tema. De acordo com o referencial teórico utilizado, compreende-se que a constante dialética entre as demandas da população trans e o imperativo heterossexual cisgênero, envolve processos de adoecimento, discriminação, preconceitos e privação de direitos fundamentais. Estes, associados à presença de comportamentos de riscos quanto à contaminação por IST; à prostituição enquanto principal destino para obtenção de renda; às baixas taxas de qualidade e expectativa de vida, e às altas taxas de mortes violentas, evidenciam a necessidade urgente de ações que assegurem os direitos fundamentais dessa minoria. Nesse contexto, os autores concluem que há a necessidade de criar e efetivar políticas públicas de alcance nacional, que busquem mudanças de ordem estrutural e social, estabelecendo redes de apoio, fortalecimento dos vínculos com os serviços de saúde e incentivo sobre prevenção. O vigésimo sétimo capítulo intitulado “Observatório dos Direitos das Mulheres dos Vales do Jequitinhonha e Mucuri-UFVJM: dilemas e desafios nas suas ações em tempos de Covid-19” busca destacar os principais dilemas e desafios para dar continuidade ao desenvolvimento das ações realizadas pelo Observatório dos Direitos das Mulheres dos Vales do Jequitinhonha e Mucuri – ODMVJM da UFVJM, durante a pandemia do novo coronavírus (COVID-19), com destaque para as possibilidades das ações efetivadas, no contexto de trabalho remoto da extensão universitária na UFVJM. Este projeto de extensão foi iniciado em agosto de 2016, por meio da articulação com o ensino e pesquisa. Desde sua criação, o projeto vem promovendo importantes contribuições na defesa dos direitos da mulher e principalmente no enfrentamento a violência contra a mulher nos Vales do Jequitinhonha e Mucuri. O vigésimo oitavo capítulo intitulado “Mulheres que curam: matriarcas responsáveis pela transmissão de ser rezadeira” ressalta que as rezadeiras são mulheres de núcleos periféricos de suas cidades, atuando como curandeiras onde os sistemas de saúde possuem dificuldades de ingresso. São mulheres velhas, que por muita das vezes, são as chefes de família, detentoras da maior parte da economia da casa. Elas retêm sua subsistência e de sua família a partir de planos de governo, como aposentadoria e bolsa família. O ofício da reza é transmitido para as mulheres dentro de um núcleo familiar. Por fim, o vigésimo nono capítulo intitulado “Gênero e Lei Maria da Penha: atravessamentos na concessão de medidas protetivas” procede-se a um breve resgate histórico da construção e de distintas compreensões teóricas sobre o gênero, através de considerações introdutórias da formulação proposta por Scott (1990), seguindo-se da crítica ao seu emprego a partir de estudos apoiados em Butler e em marxistas, especialmente materialistas. Conclui-se que o debate em torno do gênero não é uníssono e encontra-se em constante movimento no âmbito das ciências humanas e sociais, nos debates feministas e no campo do direito, com rebatimentos nas discussões e formulações jurídicas, logo, repercutindo na operacionalização da lei Maria da Penha e exigindo postura atenta das equipes multidisciplinares. Por isso, a obra que ora se apresenta é de leitura obrigatória para estudantes e profissionais de todas as áreas que queiram compreender e formar opinião acerca dos estudos de gênero e suas interseccionalidades, que transcendem diversas áreas do conhecimento. Além disso, diante de tais debates importantes trazidos na presente obra podem surgir soluções e respostas para a resolução de diversas questões polêmicas em pauta em nosso país e no mundo. Da organizadora, tendo como base os trabalhos apresentados pelos autores. Tenham uma ótima leitura!

AbstractDNA is the molecular basis of life and would total about three meters if linearly untangled. To fit in the cell nucleus at the micrometer scale, DNA has, therefore, to fold itself into several layers of hierarchical structures, which are thought to be associated with functional compartmentalization of genomic features like genes and their regulatory elements. For this reason, understanding the mechanisms of genome folding is a major biological research problem. Studying chromatin conformation requires high computational resources and complex data analyses pipelines. In this chapter, we first present the PyGMQL software for interactive and scalable data exploration for genomic data. PyGMQL allows the user to inspect genomic datasets and design complex analysis pipelines. The software presents itself as a easy-to-use Python library and interacts seamlessly with other data analysis packages. We then use the software for the study of chromatin conformation data. We focus on the epigenetic determinants of Topologically Associating Domains (TADs), which are region of high self chromatin interaction. The results of this study highlight the existence of a “grammar of genome folding” which dictates the formation of TADs and boundaries, which is based on the CTCF insulator protein. Finally we focus on the relationship between chromatin conformation and gene expression, designing a graph representation learning model for the prediction of gene co-expression from gene topological features obtained from chromatin conformation data. We demonstrate a correlation between chromatin topology and co-expression, shedding a new light on this debated topic and providing a novel computational framework for the study of co-expression networks.

AbstractThe study of protein production and degradation in a quantitative and time-dependent manner is a major challenge to better understand cellular physiological response. Among available technologies bioorthogonal noncanonical amino acid tagging (BONCAT) is an efficient approach allowing for time-dependent labeling of proteins through the incorporation of chemically reactive noncanonical amino acids like l-azidohomoalanine (L-AHA). The azide-containing amino-acid derivative enables a highly efficient and specific reaction termed click chemistry, whereby the azide group of the L-AHA reacts with a reactive alkyne derivate, like dibenzocyclooctyne (DBCO) derivatives, using strain-promoted alkyne–azide cycloaddition (SPAAC). Moreover, available DBCO containing reagents are versatile and can be coupled to fluorophore (e.g., Cy7) or affinity tag (e.g., biotin) derivatives, for easy visualization and affinity purification, respectively.Here, we describe a step-by-step BONCAT protocol optimized for the model archaeon Haloferax volcanii, but which is also suitable to harness other biological systems. Finally, we also describe examples of downstream visualization, affinity purification of L-AHA-labeled proteins and differential expression analysis.In conclusion, the following BONCAT protocol expands the available toolkit to explore proteostasis using time-resolved semiquantitative proteomic analysis in archaea.

Identifying relevant analogies from biology is a significant challenge in biomimetic design. Our natural-language approach addresses this challenge by developing techniques to search biological information in natural-language format, such as books or papers. This paper presents the application of natural-language processing techniques, such as part-of-speech tags, typed-dependency parsing, and syntactic patterns, to automatically extract and categorize causally related functions from text with biological information. Causally related functions, which specify how one action is enabled by another action, are considered important for both knowledge representation used to model biological information and analogical transfer of biological information performed by designers. An extraction algorithm was developed and scored F-measures of 0.78–0.85 in an initial development test. Because this research approach uses inexpensive and domain-independent techniques, the extraction algorithm has the potential to automatically identify patterns of causally related functions from a large amount of text that contains either biological or design information.

Bead and cell suspension based flow-through assays are popular for high throughput biological analysis. Several technologies incorporate a tagging scheme with beads to enable multiplexing. Modern flow-through systems such as flow cytometers and cell sorters are large, bulky and expensive; consequently, much research has been performed using microfluidics to miniaturize these systems. However, several problems remain with these systems, notably it remains difficult to perform manipulations on the beads (or cells), and in the case of multiplexed systems, it remains difficult to read the tags quickly. In this paper, we present a micromachined micro-carrier, referred to as a ‘micropallet’, designed to move through a microfluidic device, which helps to solve several of these problems. Micropallets are small carrier structures, micromachined out of plastic or other materials, that are used to carry attached biological or chemical samples through a microfluidic system (e.g., DNA, RNA, proteins, antibodies, adherent cells, organisms). Similar to conventional factory pallets that carry a product through an automated manufacturing line, micropallets are engineered to carry their cargo through a micro-scale system. Thus micropallets may contain shapes, structures and materials designed to interact with and work in a microfluidic system, such as for docking, sorting, manipulation and readout. Additionally, micropallets may include bar codes or other markings, and be engineered to optimally suit the cargo they carry (for example, a micropallet might contain 3-D structures and treated sections for cells, molecules or organisms to attach). Results are presented for the use of micropallets in cell assays, DNA assays and antibody assays. Micropallets may be designed to carry a sample through a microfluidic system or for use in a static assay system, enabling versatile customisation of the micropallets and flow system for design of a programmable system that interacts with the micropallets for detection, control and manipulation.

It is a mandatory requirement to maintain offshore oil and gas (O&G) production and process platforms during the engineering down period (i.e. the period from the end of the design/operational life to decommissioning). Decommissioning of the offshore production and process (OP&PPs) involves cessation of operations, withdrawal of the facility from service, transformation into an out-of-service state, deactivation and removal. There are several energy sources (i.e. pressure, chemical substances, electrical and mechanical instrumentation, telecom equipment, navigation radar system, gravity, heat/cold, biological substances, etc.), which need to be maintained and/or deactivated until the platform is decommissioned. This manuscript first maps the current state of the art in relation to the maintenance of OP&PSs before decommissioning. Then, the ‘Maintenance Regime Minimum’ (MRM) approach is proposed to perform comparative analysis in order to identify and select the optimal maintenance hours within the decommissioning strategy, based on cost (e.g. man hours required), safety, and environmental challenges. The manuscript also illustrates how the MRM approach focuses on potential decommissioning alternatives in relation to the optimization of maintenance hours and challenges involved in different tags throughout the functional hierarchy. The results of a case study on two topside systems (i.e. in relation to two alternatives) are also presented.

Introdução: As reações de oxi-redução estão presentes em diversas situações do cotidiano, tais como na ingestão de alimentos. A vitamina C presente nos alimentos apresenta características químicas de um agente redutor forte e desempenha funções antioxidantes no organismo. Objetivo: Este trabalho teve por objetivo a elaboração de atividade experimental simples e de baixo custo para a identificação da presença de vitamina C em sucos de frutas industrializados. Material e Método: O experimento baseou-se na utilização de mistura amilácea (amido de milho + água) e tintura de iodo 2%, em diferentes amostras de sucos de caixinha (caju, manga, laranja e abacaxi) e de comprimido efervescente de 1 g de vitamina C. O teor de vitamina C (ácido ascórbico) ocorreu através da quantificação de gotas adicionadas da solução de iodo nas referidas amostras analisadas. Resultados: Foram utilizados apenas materiais plásticos descartáveis para retirar as alíquotas e armazenar as amostras, tais como seringas de 10 mL e copos descartáveis de 150 mL. Os resultados demonstraram que a solução do comprimido efervescente teve maior consumo de Iodo (20 gotas), como era esperado, pois quanto maior o consumo de Iodo mais rica será a amostra em ácido ascórbico. Dentre os sucos industrializados, o suco de Caju foi o que apresentou maior teor de vitamina C (8 gotas), seguido dos sucos de Manga (6 gotas), Abacaxi (4 gotas) e Laranja (3 gotas). Conclusão: Desse modo, consideramos que este experimento pode ser utilizado nas escolas como forma de contextualizar a abordagem das reações redox e despertar o interesse dos alunos para uma alimentação mais saudável.

Introdução: O uso de plantas medicinais têm sido usadas por praticamente todos os povos desde os primórdios, objetivando solucionar algum mal-estar ou curar alguma doença. Dentre os mais variados tipos, destaca-se a peumus boldus Molina também conhecido popularmente como boldo-do-chile, a qual pode ser usada para tratar distúrbios hepáticos e principalmente gastrointestinais, uma vez pode ser um poderoso auxílio no tratamento de gastrite, pois age no bom funcionamento do intestino, sendo uma solução relaxante e reguladora para o melhor funcionamento deste. Objetivos: Dado o exposto, objetivou-se através do referido estudo, analisar as evidências científicas acerca dos benefícios do uso da Peumus boldus Molina no tratamento de sintomas gastrointestinais por meio de uma revisão sistemática. Material e métodos: Desse modo, a revisão sistemática realizada seguiu os seguintes passos: Definição da pergunta de pesquisa como “O uso do boldo apresenta êxito no tratamento de doenças gastrointestinais?”Identificação da base de dados, dessa forma sendo utilizadas as bases de dados presentes no Capes Periódicos, Scielo e Google Acadêmico), Definição de critérios para seleção dos trabalhos sendo excluídos aqueles não responder a pergunta de pesquisa; não está relacionado à boldo ou doenças gastrointestinais, restrito, não estar publicado no período estipulado, não ser escrito em português, perda de foco do tema e Revisão e análise dos cinco artigos selecionados. Resultados: Diante disso, foi observado que o boldo apresenta efeitos benéficos ao nosso corpo, tais como efeito espasmolítico, contra os distúrbios digestivos e empregado em casos de desconforto digestivo e do fígado, eficácia na digestão de gorduras, além de apresentar uma ampla gama de propriedades farmacológicas, tais como: ação antioxidante, anti-inflamatória, antimicrobiana, ação diurética, dentre outras. Conclusão: Dessa forma, conclui-se que sua utilização é benéfica para tratar sintomas gastrointestinais graças a sua série de efeitos no organismo.

Introdução: A mandioca (Manihot esculenta Crantz) é cultivada em inúmeros países apresentando grande importância socioeconômica, no entanto, a sua produção pode sofrer prejuízos econômicos quando a planta está exposta a patógenos. Nesse contexto, os vegetais em resposta ao estresse biótico recorrem a genes envolvidos a tais sinais, como o gene da peroxidase (POD) que constitui uma classe de enzimas oxidoredutases que possui a função de catalisar a oxidação do substrato utilizando o poder oxidante do peroxido de hidrogênio. Objetivo: Portanto, este estudo tem como objetivo identificar e caracterizar in silico, famílias de genes da glutationa peroxidase de mandioca (MePOD). Material e métodos: Para a metodologia este estudo utilizou as sequências de aminoácidos obtidas no programa Phytosome. Estas foram observadas quanto a presença dos domínios conservadores através do servidor InterPro, quanto a similaridade com proteínas de estruturas já descritas, utilizando a ferramenta de busca do NCBI – Blast e quanto a presença do peptídeo sinal, foi utilizado os programas SignalP e o Phorbius prediction. Resultados: Após as análises foram identificados quinze sequências de aminoácidos que possuem domínios conservadores característicos de proteínas da família da peroxidase. As sequências foram nomeadas de MePOD1 a MePOD15. Embora algumas sequências proteicas apresentem a mesma quantidade de aminoácidos como os genes MePOD5, MePOD6, MePOD7, MePOD8, MePOD10, MePOD11, MePOD12, MePOD15. Estas quando alinhadas no programa Clustaw apresentam diferenças na composição de aminoácidos apresentando com isso, diferentes isoformas. Ao observar as sequências proteicas dos quinze genes nos programas SignalP e Phorbius prediction só foi possível identificar a presença do peptídeo sinal em seis sequências de aminoácidos, os genes identificados quando analisados no programa Blast, apresentaram similaridade superior a 80% com genes que codificam proteínas de peroxidase de outros vegetais que se expressam durante os processos metabólicos. Conclusão: Conclui-se, portanto, que a família de genes da Glutationa peroxidase na mandioca possuem 15 isoformas e estas compartilham um alto grau de homologia. Porém, muitas etapas deste tipo de defesa ainda não foram totalmente estudadas por isso este trabalho visa contribuir para o preenchimento de tais lacunas nesses tipos de pesquisas.

The antibotulinal baceriocins, propionicin PLG-1 and jenseniin G., were the first to be identified, purified and characterized for the dairy propionibaceria and are produced by Propionibacterium thoenii P127 and P. thoenii/jensenii P126, respectively. Objectives of this project were to (a) produce polyclonal antibodies for detection, comparison and monitoring of propionicin PLG-1; (b) identify, clone and characterize the propionicin PLG-1 (plg-1) and jenseniin G (jnG) genes; and (3) develop gene transfer systems for dairy propionibacteria using them as models. Polyclonal antibodies for detection, comparison and monitoring of propionicin PLG-1 were produced in rabbits. Anti-PLG-1 antiserum had high titers (256,000 to 512,000), neutralized PLG-1 activity, and detected purified PLG-1 at 0.10 mg/ml (indirect ELISA) and 0.033 mg/ml (competitive indirect ELISA). Thirty-nine of 158 strains (most P. thoenii or P. jensenii) yielded cross-reacting material; four strains of P. thoenii, including two previously unidentified bacteriocin producers, showed biological activity. Eight propionicin-negative P127 mutants produced neither ELISA response nor biological activity. Western blot analyses of supernates detected a PLG-1 band at 9.1 kDa and two additional protein bands with apparent molecular weights of 16.2 and 27.5 kDa. PLG-1 polyclonal antibodies were used for detection of jenseniin G. PLG-1 antibodies neutralized jenseniin G activity and detected a jenseniin G-sized, 3.5 kDa peptide. Preliminary immunoprecipitation of crude preparations with PLG-1 antibodies yielded three proteins including an active 3-4 kDa band. Propionicin PLG-1 antibodies were used to screen a P. jensenii/thoenii P126 genomic expression library. Complete sequencing of a cloned insert identified by PLG-1 antibodies revealed a putative response regulator, transport protein, transmembrane protein and an open reading frame (ORF) potentially encoding jenseniin G. PCR cloning of the putative plg-1 gene yielded a 1,100 bp fragment with a 355 bp ORF encoding 118 amino acids; the deduced N-terminus was similar to the known PLG-1 N-terminus. The 118 amino acid sequence deduced from the putative plg-1 gene was larger than PLG-1 possibly due to post-translational processing. The product of the putative plg-1 gene had a calculated molecular weight of 12.8 kDa, a pI of 11.7, 14 negatively charged residues (Asp+Glu) and 24 positively charged residues (Arg+Lys). The putative plg-1 gene was expressed as an inducible fusion protein with a six-histidine residue tag. Metal affinity chromatography of the fused protein yielded a homogeneous product. The fused purified protein sequence matched the deduced putative plg-1 gene sequence. The data preliminarily suggest that both the plg-1 and jnG genes have been identified and cloned. Demonstrating that antibodies can be produced for propionicin PLG-1 and that those antibodies can be used to detect, monitor and compare activity throughout growth and purification was an important step towards monitoring PLG-1 concentrations in food systems. The unexpected but fortunate cross-reactivity of PLG-1 antibodies with jenseniin G led to selective recovery of jenseniin G by immunoprecipitation. Further refinement of this separation technique could lead to powerful affinity methods for rapid, specific separation of the two bacteriocins and thus facilitate their availability for industrial or pharmaceutical uses. Preliminary identification of genes encoding the two dairy propionibacteria bacteriocins must be confirmed; further analysis will provide means for understanding how they work, for increasing their production and for manipulating the peptides to increase their target species. Further development of these systems would contribute to basic knowledge about dairy propionibacteria and has potential for improving other industrially significant characteristics.

Maximizing food production with minimal negative effects on the environment remains a long-term challenge for sustainable food production. Microbial pathogens cause devastating diseases, minimizing crop losses by controlling plant diseases can contribute significantly to this goal. All plants possess an innate immune system that is activated after recognition of microbial-derived molecules. The fungal protein Eix induces defense responses in tomato and tobacco. Plants recognize Eix through a leucine-rich-repeat receptor- like-protein (LRR-RLP) termed LeEix. Despite the knowledge obtained from studies on tomato, relatively little is known about signaling initiated by RLP-type immune receptors. The focus of this grant proposal is to generate a foundational understanding of how the tomato xylanase receptor LeEix2 signals to confer defense responses. LeEix2 recognition results in pattern triggered immunity (PTI). The grant has two main aims: (1) Isolate the LeEix2 protein complex in an active and resting state; (2) Examine the biological function of the identified proteins in relation to LeEix2 signaling upon perception of the xylanase elicitor Eix. We used two separate approaches to isolate receptor interacting proteins. Transgenic tomato plants expressing LeEix2 fused to the GFP tag were used to identify complex components at a resting and activated state. LeEix2 complexes were purified by mass spectrometry and associated proteins identified by mass spectrometry. We identified novel proteins that interact with LeEix receptor by proteomics analysis. We identified two dynamin related proteins (DRPs), a coiled coil – nucleotide binding site leucine rich repeat (SlNRC4a) protein. In the second approach we used the split ubiquitin yeast two hybrid (Y2H) screen system to identified receptor-like protein kinase At5g24010-like (SlRLK-like) (Solyc01g094920.2.1) as an interactor of LeEIX2. We examined the role of SlNRC4a in plant immunity. Co-immunoprecipitation demonstrates that SlNRC4a is able to associate with different PRRs. Physiological assays with specific elicitors revealed that SlNRC4a generally alters PRR-mediated responses. SlNRC4a overexpression enhances defense responses while silencing SlNRC4 reduces plant immunity. We propose that SlNRC4a acts as a non-canonical positive regulator of immunity mediated by diverse PRRs. Thus, SlNRC4a could link both intracellular and extracellular immune perception. SlDRP2A localizes at the plasma membrane. Overexpression of SlDRP2A increases the sub-population of LeEIX2 inVHAa1 endosomes, and enhances LeEIX2- and FLS2-mediated defense. The effect of SlDRP2A on induction of plant immunity highlights the importance of endomembrane components and endocytosis in signal propagation during plant immune . The interaction of LeEIX2 with SlRLK-like was verified using co- immunoprecipitation and a bimolecular fluorescence complementation assay. The defence responses induced by EIX were markedly reduced when SlRLK-like was over-expressed, and mutation of slrlk-likeusing CRISPR/Cas9 increased EIX- induced ethylene production and SlACSgene expression in tomato. Co-expression of SlRLK-like with different RLPs and RLKs led to their degradation, apparently through an endoplasmic reticulum-associated degradation process. We provided new knowledge and expertise relevant to expression of specific be exploited to enhance immunity in crops enabling the development of novel environmentally friendly disease control strategies.