Academic literature on the topic 'Alfa 1,3 glucano'

A germinação de sementes envolve o uso de diferentes enzimas no metabolismo. O objetivo deste estudo foi avaliar o efeito de diferentes enzimas comerciais na germinação de sementes de alface. As sementes de alface foram imersas em uma solução de 300 mL de água destilada e 5,0 mL de solução enzimática durante uma hora. Os tratamentos consistiram nas soluções comerciais de enzimas: (1) Alcalase® e Celluclean® (catalisam a hidrólise de ligações peptídicas e ligações de beta 1,3 e 1,4 glucana presentes na celulose, respectivamente), (2) Pectinex® ( dilui a pectina de propósito, liberando açúcares), (3) Alcalase® (objetivo de catalisar ligações peptídicas), (4) Pectinex® e Alcalase® (objetivo de catalisar ligações peptídicas e liberar açúcares), (5) Alcalase® e Ban® ( objetivo de catalisar ligações peptídicas e hidrólise de ligações alfa 1,4 - dextrina formadora glucosídica, de preferência como produto), (6) Spirizyme® (enzima glucoamilase: glucana 1,4 alfa-glucosidase) e (7) controle (água destilada livre de enzimas ) Após o tratamento com as soluções enzimáticas, as sementes foram semeadas em placas de Petri contendo papel de filtro ou solo como substrato, ambos saturados com água destilada. As sementes de todos os tratamentos germinaram em quatro dias após a semeadura. A porcentagem de germinação das sementes em papel de filtro não mostrou diferenças significativas entre os tratamentos, mas a porcentagem de germinação mostrou diferenças estatísticas quando germinadas no solo. As maiores porcentagens de germinação no solo foram no tratamento controle (96,6%) e no tratamento com Pectinex® e Alcalase® (81,6%). A aplicação de enzimas industriais em sementes de alface não aumenta a velocidade e a porcentagem de germinação das sementes.

Se realizó un experimento para evaluar un prebiótico de producción nacional, derivado de paredes celulares de levadura Saccharomyces cerevisiae (PCL-Glucano) en el comportamiento productivo de pollos de engorde (Cobb 500). Se utilizaron 210 pollitos mixtos Cobb 500 de un día de edad, que fueron distribuidos en un diseño completamente al azar en tres tratamientos, con siete repeticiones y 10 aves por repetición. Los tratamientos evaluados fueron: T1: concentrado comercial (CC), T2: CC + 0.05% PCL-Glucano (0.5 kg ton-1 de alimento) y T3: CC + 0.10% PCL-Glucano. Las variables evaluadas fueron peso vivo, consumo de alimento y conversión alimenticia, realizando mediciones a los 21, 35 y 42 días. Los resultado muestran que el consumo de alimento (3 812 g), peso vivo (2 017 g) e índice de conversión alimenticia (1.89) que se obtienen en los pollos alimentados con la dieta CC + 0.10% PCL-Glucano, a los 42 días de edad, fueron significativamente (P<0.05%) mejores a los de T1 (3 751 g, 1 617 g y 2.32) y T2 (3 642 g, 1 648 g y 2.21), los cuales no difieren estadísticamente entre sí. En conclusión la utilización de PCL-Glucano a razón de 0.10% en el concentrado iniciador y finalizador para pollos de engorde es una alternativa viable biológicamente ya que manifestó su actividad prebiótica mediante una mejora progresiva y significativa de los indicadores productivos. DOI: http://dx.doi.org/10.5377/calera.v13i21.1650

Avaliou-se o efeito da suplementação de mananoligossacarídeo, ß-glucano e antibiótico em dietas de leitões machos castrados, durante a fase de creche (21 aos 54 dias de idade), sobre o desempenho, características morfo-histológicas da mucosa intestinal e ocorrência de diarreia. Foram utilizados 368 leitões de mesma linhagem, distribuídos em delineamento inteiramente ao acaso, com quatro tratamentos (1: 330g de mananoligossacarídeo t/ração (oriundos do núcleo), 2: 1.830g de mananoligossacarídeo t/ração (330g oriundos do núcleo + 1.550g da suplementação), 3: 330g de mananoligossacarídeo (oriundos do núcleo) + 500g de ß-glucano t/ração e 4: 330g de mananoligossacarídeo (oriundos do núcleo) + 250g de Colistina t/ração) e quatro repetições com 23 animais por unidade experimental. O desempenho foi avaliado pelo ganho de peso, consumo de ração e conversão alimentar. As características morfo-histológicas da mucosa intestinal estudadas foram altura de vilosidade, profundidade das criptas intestinais, perímetro de vilosidade e a relação altura de vilosidade:profundidade de cripta do duodeno, jejuno e íleo. A ocorrência de diarreia foi observada diariamente pela avaliação de escore fecal. A suplementação de mananoligossacarídeo, β-glucano e antibiótico na dieta de leitões machos castrados, na fase de creche, não influenciaram o desempenho e a ocorrência de diarreia. Maior altura de vilosidade e maior profundidade de criptas no duodeno e íleo foram verificadas nos animais suplementados com ß-glucano. No jejuno foi observado maior perímetro de vilosidade nos animais suplementados com ß-glucano e nos animais que não receberam suplemento adicional na dieta.

(1) Background: Mechanisms of cellular and molecular adaptation of fungi to salinity have been commonly drawn from halotolerant strains and few studies in basidiomycete fungi. These studies have been conducted in settings where cells are subjected to stress, either hypo- or hyperosmotic, which can be a confounding factor in describing physiological mechanisms related to salinity. (2) Methods: We have studied transcriptomic changes in Aspergillus sydowii, a halophilic species, when growing in three different salinity conditions (No NaCl, 0.5 M, and 2.0 M NaCl). (3) Results: In this fungus, major physiological modifications occur under high salinity (2.0 M NaCl) and not when cultured under optimal conditions (0.5 M NaCl), suggesting that most of the mechanisms described for halophilic growth are a consequence of saline stress response and not an adaptation to saline conditions. Cell wall modifications occur exclusively at extreme salinity, with an increase in cell wall thickness and lamellar structure, which seem to involve a decrease in chitin content and an augmented content of alfa and beta-glucans. Additionally, three hydrophobin genes were differentially expressed under hypo- or hyperosmotic stress but not when the fungus grows optimally. Regarding compatible solutes, glycerol is the main compound accumulated in salt stress conditions, whereas trehalose is accumulated in the absence of salt. (4) Conclusions: Physiological responses to salinity vary greatly between optimal and high salt concentrations and are not a simple graded effect as the salt concentration increases. Our results highlight the influence of stress in reshaping the response of extremophiles to environmental challenges.

OBJETIVO: Avaliar o efeito das neuregulinas 1-alfa e 1-beta na regeneração de nervos ciáticos de camundongos C57BL/6J, adultos, machos, através da técnica de tubulização. MÉTODOS: Utilizaram-se 18 animais, divididos em 3 grupos, implantando-se prótese de polietileno em falhas de 4,0 mm no nervo ciático esquerdo: grupo 1 contendo apenas colágeno purificado (Vitrogen®); grupo 2, colágeno associado a neuregulina 1-alfa; grupo 3 com colágeno e neuregulina 1-beta. O grupo controle foi formado por 6 segmentos de nervos ciáticos direitos. Após 4 semanas, os animais foram sacrificados; extraiu-se segmento do ponto médio do nervo regenerado no interior das próteses, padronizaram-se cortes histológicos e confecção das lâminas para análise histomorfométrica. Confrontaram-se os resultados estatisticamente. RESULTADOS: Os animais tratados com neuregulinas tiveram maior número de axônios mielinizados, com diferença estatisticamente significante quando comparados ao grupo colágeno. Não houve diferença estatística entre os grupos de neuregulinas 1-alfa e 1-beta. CONCLUSÃO: a adição de neuregulinas proporcionou aumento significativo do número de fibras mielinizadas.

BackgroundCluster of differentiation (CD)73-adenosine and transforming growth factor (TGF)-β pathways are involved in abrogated antitumor immune responses and can lead to protumor conditions. This Phase 1 study (NCT03954704) evaluated the safety, pharmacokinetics, pharmacodynamics, and efficacy of dalutrafusp alfa (also known as GS-1423 and AGEN1423), a bifunctional, humanized, aglycosylated immunoglobulin G1 kappa antibody that selectively inhibits CD73-adenosine production and neutralizes active TGF-β signaling in patients with advanced solid tumors.MethodsDose escalation started with an accelerated titration followed by a 3+3 design. Patients received dalutrafusp alfa (0.3, 1, 3, 10, 20, 30, or 45 mg/kg) intravenously every 2 weeks (Q2W) up to 1 year or until progressive disease (PD) or unacceptable toxicity.ResultsIn total, 21/22 patients received at least one dose of dalutrafusp alfa. The median number of dalutrafusp alfa doses administered was 3 (range 1–14). All patients had at least one adverse event (AE), most commonly fatigue (47.6%), nausea (33.3%), diarrhea (28.6%), and vomiting (28.6%). Nine (42.9%) patients had a Grade 3 or 4 AE; two had Grade 5 AEs of pulmonary embolism and PD, both unrelated to dalutrafusp alfa. Target-mediated drug disposition appears to be saturated at dalutrafusp alfa doses above 20 mg/kg. Complete CD73 target occupancy on B cells and CD8+ T cells was observed, and TGF-β 1/2/3 levels were undetectable at dalutrafusp alfa doses of 20 mg/kg and higher. Free soluble (s)CD73 levels and sCD73 activity increased with dalutrafusp alfa treatment. Seventeen patients reached the first response assessment, with complete response, partial response, stable disease, and PD in 0, 1 (4.8%), 7 (33.3%), and 9 (42.9%) patients, respectively.ConclusionsDalutrafusp alfa doses up to 45 mg/kg Q2W were well tolerated in patients with advanced solid tumors. Additional evaluation of dalutrafusp alfa could further elucidate the clinical utility of targeting CD73-adenosine and TGF-β pathways in oncology.

Abstract An open-label, crossover randomized study was performed to compare the pharmacokinetics (PK) of damoctocog alfa pegol and rurioctocog alfa pegol, two recombinant factor VIII (FVIII) products indicated in patients with hemophilia A, both conjugated to polyethylene glycol to reduce clearance and extend time in circulation. Adult patients (N = 18) with severe hemophilia A (FVIII < 1 IU/dL), previously treated with any FVIII product for ≥ 150 exposure days, were randomized to receive a single 50 IU/kg infusion of damoctocog alfa pegol followed by rurioctocog alfa pegol, or vice versa, with ≥ 7-day washout between doses. FVIII activity was measured using the one-stage clotting assay. PK parameters, including area under the curve from time 0 to the last data point (AUC0–tlast, primary parameter), dose-normalized AUC (AUCnorm), and time to threshold, were calculated based on 11 time points between 0.25 and 120 h post-dose and evaluated using a noncompartmental model. Due to differences in batch-specific vial content used for the study, actual administered median doses were 54.3 IU/kg for damoctocog alfa pegol and 61.4 IU/kg for rurioctocog alfa pegol. Based on actual dosing, a significantly higher geometric mean (coefficient of variation [%CV]) AUCnorm was observed for damoctocog alfa pegol (43.8 h kg/dL [44.0]) versus rurioctocog alfa pegol (36.0 h kg/dL [40.1, P < 0.001]). Based on population PK modeling, median time to reach 1 IU/dL was 16 h longer for damoctocog alfa pegol compared with rurioctocog alfa pegol. No adverse events or any immunogenicity signals were observed. Overall, damoctocog alfa pegol had a superior PK profile versus rurioctocog alfa pegol. Trial registration number: NCT04015492 (ClinicalTrials.gov identifier). Date of registration: July 9, 2019

Abstract Efanesoctocog alfa (rFVIIIFc-VWF-XTEN; BIVV001) is a new class of factor VIII (FVIII) replacement that breaks the von Willebrand factor–imposed FVIII half-life ceiling. In a phase 1/2a study, single-dose efanesoctocog alfa was well tolerated, and no safety concerns were identified. We evaluated the safety, tolerability, and pharmacokinetics of repeat-dose efanesoctocog alfa in a phase 1 study in previously treated adults (≥150 exposure days) with severe hemophilia A. Participants received 4 once weekly doses of efanesoctocog alfa (cohort 1, 50 IU/kg; cohort 2, 65 IU/kg). All enrolled participants (cohort 1, n = 10; cohort 2, n = 14) completed the study. Inhibitor development to FVIII was not detected. After the last dose of efanesoctocog alfa, geometric mean (range) FVIII activity half-life, area under the activity-time curve, and steady-state maximum concentration for cohort 1 and cohort 2 were 41.3 (34.2-50.1) and 37.3 (28.9-43.8) hours, 8290 (5810-10 300) and 11 200 (7040-15 800) hours × IU/dL, and 131 (96-191) and 171 (118-211) IU/dL, respectively. There was minimal accumulation after 4 doses. Mean FVIII activity for cohort 1 and cohort 2, respectively, was 46% and 69% on day 3 postdose and 10% and 12% on day 7 postdose. Overall, 4 once-weekly doses of efanesoctocog alfa were well tolerated, no safety concerns were identified, and no bleeds were reported during the treatment period. Once-weekly efanesoctocog alfa provided high sustained FVIII activity within the normal to near-normal range for 3 to 4 days postdose and may improve protection against bleeds in patients with hemophilia A. The trial is study 2018-001535-51 in the EU Clinical Trials Register.

OBJECTIVE To describe the concurrent use of interferon (IFN) alfa and beta in a patient with multiple sclerosis (MS) and chronic myeloid leukemia (CML). CASE SUMMARY A 60-year-old white man developed CML while receiving IFN beta-1a treatment for MS. The patient was started on IFN alfa-2b 1 million units 3 times weekly with IFN beta-1a 30 μg weekly. The dosage of IFN alfa was increased to 3 million units/d 1 month later. He achieved complete hematologic remission in 3 months. The observed adverse effects were mild and included fatigue, somnolence, weight loss, and difficulty with memory. At 19 months after treatment, the patient remained in hematologic remission and his expanded disability status scale score remained unchanged. DISCUSSION Concomitant treatment with interferon alfa and beta by a gradual increase in the dosage of IFN alfa was well tolerated. Although imatinib mesylate may be a preferred treatment for patients with CML and MS at this time, our experience with safe concurrent use of IFN alfa and beta may benefit other patients who require this combined treatment. CONCLUSIONS Concurrent administration of interferon alfa-2b and beta-1a was well tolerated by our patient with CML and MS.

A pneumonia por Pneumocystis jirovecii (PPc) é uma das principais causas de morte em doentes imunocomprometidos, revestindo-se assim de elevado interesse o diagnóstico precoce desta infecção, por forma a instaurar a terapêutica adequada. Actualmente, os meios laboratoriais de diagnóstico baseiam-se fundamentalmente na detecção directa deste microrganismo nas secreções pulmonares dos doentes, o que implica a realização de procedimentos invasivos. É nessa perspectiva que surge o doseamento do β-glucano no soro de doentes com presumível infecção, uma vez que, este composto é um dos principais componentes da parede dos quistos de P. jirovecii. Neste estudo procedeu-se ao doseamento do β-glucano em amostras de soro de 66 indivíduos e verificou-se que, nos 47 indivíduos que confirmaram o diagnóstico de PPc, a mediana de β-glucano obtida foi de 314,5 pg/mL, enquanto nos restantes 19 foi de 63,7 pg/mL. Estatisticamente obteve-se uma forte correlação entre níveis elevados de β-glucano no soro de doentes e a presença de infecção por P. jirovecii. Em relação ao diagnóstico clínico, os resultados obtidos demonstraram correlação entre um diagnóstico clinico sugestivo de PPc e níveis elevados de β-glucano no soro. Constatou-se ainda que, para a infecção por P. jirovecii o cut-off que apresentou melhores resultados para o teste Fungitell® situa-se nos 100 pg/mL, obtiveram-se resultados de sensibilidade de 89% e especificidade de 74%. Estudos preliminares apontaram para o facto de níveis elevados de β-glucano no soro corresponderem a níveis elevados de parasitémia e uma evolução clínica negativa da doença.
Pneumocystis jirovecii pneumonia (PcP) is a leading cause of death in immunocompromised patients, covering thus of great interest for early diagnosis of this infection, in order to provide appropriate therapy. Currently, diagnostic laboratory are mainly based on direct detection of this microorganism in the pulmonary secretions of patients, which involves invasive procedures. In this perspective, there is the determination of β-glucan in the serum of patients with suspected infection, since this compound is a major component of the cyst wall of P. jirovecii. In this study proceeded to the determination of β-glucan in serum samples from 66 individuals and found that in 47 individuals who confirmed the diagnosis of PCP, the median β-glucan obtained was 314.5 pg / mL, while the remaining 19 was 63.7 pg / mL. Statistically it was found a strong correlation between high levels of β-glucan in the serum and the presence of infection by P. jirovecii. In relation to clinical diagnosis, the results showed a correlation between clinical diagnosis suggestive of PcP and high levels of β-glucan in the serum. It was further observed that for infection with P. jirovecii the cut-off showed better results for the test Fungitell ® is located at 100 pg / mL with the results of sensitivity of 89% and specificity of 74%. Preliminary studies pointed to the fact that high levels of β-glucan in serum correspond to high levels of parasitemia and a negative clinical course of disease.

As células dendríticas (DCs) são fundamentais no desencadeamento da resposta imune antitumoral. Mas, no microambiente tumoral há condições que impedem esta função imunoestimuladora das DCs. Este comprometimento funcional parece ser fruto da hiperativação de STAT-3. O presente estudo visou avaliar a capacidade de Ta1 de interferir na ativação de STAT-3. Então, monócitos e mo-DCs foram tratados ou não com Ta1 e comparados com o controle, o inibidor de STAT-3, JSI-124. Avaliou-se a expressão de moléculas de superfície e a capacidade de mo-DCs de estimular linfócitos T alogeneicos. Ta1 não interferiu na ativação de STAT-3. Além disso, Ta1 não reproduziu os efeitos encontrados em mo-DCs de pacientes com câncer. Já, o tratamento com JSI-124 levou a alterações nas mo-DCs fazendo com que exibissem perfil infamatório, com aumento de HLA-DR, CD86 e concomitante queda de PD-L1. Além disso, mostramos que STAT-3 está envolvido na expressão de leucointergrinas, uma vez que sua inibição proporcionou queda da expressão em nível proteico e gênico destas moléculas.
Dendritic cells ( DCs ) are critical in triggering antitumor immune response . But there are conditions in the tumor microenvironment that prevent this immunostimulatory function of DCs. This functional impairment appears to be the result of hyperactivation of STAT-3. The present study aimed to evaluate the ability of Ta1 to interfere in the activation of STAT-3. Then, monocytes and mo-DCs were treated or not with Ta1 and compared with the control, the STAT-3 inhibitor, JSI -124. We assessed the expression of surface molecules and the mo-DCs ability in stimulating allogeneic T lymphocytes. Ta1 did not affect the activation of STAT-3. In addition, Ta1 did not reproduce the effects found in mo-DCs from cancer patients. However, JSI -124 treatment led to changes in mo-DCs, that exhibited an inflammatory profile, with an increase of HLA-DR , CD86 and concomitant drop in PD- L1. Furthermore, we have shown that STAT-3 is involved in the expression of leukointergrins, since its inhibition resulted in down-regulation of expression level of this gene and protein molecules.

A cerveja é uma bebida alcoólica fermentada derivada do amido e aromatizada com lúpulo (Humulus lupulus L.). Os α-ácidos são extraídos do cone do lúpulo e durante o processo de cozimento do mosto são isomerizados em iso-α-ácidos (IAAs), na configuração cis- e trans-, conferindo qualidade de espuma e sabor amargo característico da cerveja. Neste trabalho, é reportado que IAAs sofrem degradação fotossensibilizada por flavinas (Φ = 4,8x10-3 mol einstein-1), mesmo na presença de compostos fenólicos (ácido ferúlico, Φ = 2,0x10-3 mol einstein-1) em excesso molar de 10 vezes, sugerindo que radicais formados pela desativação do estado tripleto excitado da riboflavina por compostos fenólicos possam também estar envolvidos na degradação dos IAAs. Foram identificados dímeros e trímeros derivados do ácido ferúlico e p-coumárico através de LC-ESI-IT-MS como principais fotoprodutos de degradação dos compostos fenólicos. Reportamos a reatividade dos diferentes diastereoisômeros de iso-α-ácidos frente ao radical 2,2-difenil-1-picrilhidrazila (DPPH•), como modelo de radical peroxila, k2 = 0,41 e 1,3 L mol-1 s-1 para a reação com cis-IAA e trans-IAA em meio de etanol acidificado com 1 % ácido fórmico a temperatura de 25 °C, respectivamente. Estas constantes de velocidade específica sugerem que a degradação dos ácidos amargos via reação térmica em processo radicalar é importante no armazenamento do produto já que as constantes de velocidade de reação dos IAAs com o radical DPPH• são competitivas com as observadas para as reações de antioxidantes naturalmente presentes na cerveja com o radical DPPH• ([ácido ferúlico] = 0,2mg/Lcerveja; k2 = 1,18.102 M-1s-1). A análise dos dados termodinâmicos (Mistura de IAAs, ΔH‡ = 25 kJ mol-1 e ΔS‡ = -155 J mol-1 K-1) sugere um mecanismo de oxidação dos IAAs pelo radical DPPH• via HAT/PCET. A diferença de reatividade observada para os diastereoisômeros (cis/trans) está aparentemente relacionada ao arranjo estereoquímico dos grupos laterais isohexonoil e prenil conectados aos carbonos C(4) e C(5), respectivamente. Desta forma, sugere-se que a proximidade espacial dos sítios de insaturação na espécie trans- ocasiona um aumento na densidade eletrônica ou um fator apenas estatístico já que os H-alílicos estão próximos espacialmente, favorecendo desta forma a oxidação via radicalóide.
Beer is a fermented alcoholic beverage based on starch and flavored by hops (Humulus lupulus L.). The α-acids are extracted from hop cones and isomerize into iso-α-acids (IAAs) during the wort boiling, in cis- and trans- configuration, providing foam quality and the characteristic bitter taste of beer. In this work, is reported that these compounds undergo degradation photosensitized by flavins (Φ = 4,8x10-3 mol einstein-1), even in the presence of phenolic compounds (ferulic acid, Φ = 2,0x10-3 mol einstein-1) in 10-fold molar excess, suggesting that radicals formed during the deactivation of triplet excited state of riboflavin by phenolic compounds may be involved in the degradation of IAAs. Dimers and trimers derived from ferulic and p-coumaric acids were identified by LC-ESI-IT-MS as the main photoproducts of the phenolic compounds. We report the reactivity of the different diastereoisomers of IAAs towards the 2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl (DPPH•) radical, as a model for peroxyl radical, k2 = 0,41 e 1,3 L mol-1 s-1 for the reaction with cis-IAA and trans-IAA in ethanol acidified with 1% of formic acid, at the temperature of 25 °C, respectively. These specifics rate constants suggest that the degradation of the bitter acids via thermal reactions in an radicaloid process is important during the storage of the product since the reaction rate constant for IAAs and the DPPH• radical are competitive with the reaction rate constants for naturally occurring antioxidants in beer with the DPPH• radical ([ferulic acid] = 0,2mg/Lbeer; k2 = 1,18.102 M-1s-1). The analysis of the thermodynamical data (IAAs mixture, ΔH‡ = 25 kJ mol-1 e ΔS‡ = -155 J mol-1 K-1) suggest a HAT/PCET oxidation mechanism of IAAs by DPPH• radical. The difference of reactivity observed for the diastereoisomers (cis-/trans-) is possibly related to the stereochemical arrangement of the isohexonoyl and prenyl side chains connected to C(4) and C(5) carbons, respectively. In this way, is suggested that the spatial proximity of the insaturation sites in the trans- species lead to a increase in electronic density or due to a statistical factor since the allylic-H are close spatially, which favors the oxidation via radicaloid.

Orientador: Ronaldo Aloise Pilli
Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Química
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Resumo: Este trabalho trata de estudos visando à síntese estereosseletiva do alcalóide 275A (18, Figura 1). Esse alcalóide foi isolado por Daly e colaboradores da pele de pequenas rãs venenosas neotropicais da família Dendrobatidae em 1986. Sua estrutura possui um núcleo 1-azabiciclo[5.3.0]decano de grande importância sintética. Para construção desse núcleo utilizamos, principalmente, as reações de a-amidoalquilação e de metátese de olefinas de fechamento de anel (RCM), tendo como reagente inicial a (S) prolina (57) Esquema1
Abstract: This work consists in studies toward the stereoselective synthesis of alkaloid 275A (18, Figure 1). This alkaloid was isolated by Daly and co-workers from the skin of neotropical poison little frogs of Dendrobatidae family in 1986. His structure has an 1-azabicyclo[5.3.0]decane nucleus of great synthetic importance. To construct this nucleus we used, mainly, a-amidoalkylation reactions and ring close metathesis (RCM), starting with (S) proline (57, Scheme 1)
Mestrado
Quimica Organica
Mestre em Química

L introduzione nella pratica clinica delle incretine ha rappresentato una significativa innovazione nel trattamento del Diabete Mellito di Tipo 2. Il loro più esteso impiego ha messo in evidenza nuovi quesiti che meritano indagini più approfondite. La nostra ricerca si è focalizzata sull analisi dell azione del GLP-1 a livello dell isola pancreatica, con particolare attenzione all alfa cellula e sulla valutazione dell ipotesi per cui fattori ambientali, quali per esempio la glucotossicità, possano essere la causa della disfunzione a carico del sistema incretinico osservata in corso di diabete. Il DMT2 è una malattia a eziopatogenesi eterogenea, caratterizzata da una diminuita sensibilità all azione insulinica dei tessuti periferici, difetti della secrezione insulinica da parte della beta cellula pancreatica, alterazioni funzionali dell alfa cellula e degli ormoni incretinici. Queste alterazioni forniscono il razionale per un intervento terapeutico basato sul ripristino di equilibrate concentrazioni di insulina e glucagone mediante l impiego di agonisti del recettore del GLP-1 o inibitori del DPP-IV. L infusione di GLP-1 è in grado di normalizzare la glicemia potenziando la secrezione insulinica ed inibendo quella di glucagone. Noi abbiamo studiato gli effetti di un trattatamento cronico con GLP-1 in dettaglio sull alfa celllula pancreatica e sulla secrezione di glucagone. I nostri dati, inoltre, forniscono evidenza che tali effetti si verificano mediante meccanismi diretti attraverso specifici recettori per il GLP-1 posti sulla membrana plasmatica delle alfa cellule. Ma l aspetto più originale dei nostri risultati riguarda la dimostrazione che l esposizione cronica al GLP-1 sia capace di amplificare la produzione insulare di GLP-1. Non è stato totalmente chiarito se un difetto di secrezione e/o azione delle incretine abbia un ruolo primario nella fisiopatolgia del DMT2 o se invece sia secondario alle alterazioni metaboliche presenti nella patologia. Molteplici studi hanno evidenziato che le alterazioni ormonali a carico dell asse incretinico possono essere secondarie ai difetti dell omeostasi glucidica ed i dati ottenuti nei nostri studi sulla linea murina di L cellule GLUTag confermano l ipotesi per cui alterazioni metaboliche, secondarie all instaurarsi del diabete, siano responsabili del compromesso effetto incretinico tipico della patologia. Nel nostro modello, lo stato di iperglicemia cronica, simulata mediante trattamento prolungato con alti livelli di glucosio, è causa di una sensibile riduzione della risposta secretoria agli stimoli acuti dei nutrienti. Tale effetto si associa ad una disfunzione del metabolismo mitocondriale. Come già osservato in modelli di alfa e beta cellule pancreatiche, le alterazioni a carico del macchinario metabolico, dovute peraltro ad una condizione di tossicità cronica da metaboliti, conducono ad un alterazione funzionale anche nelle L cellule intestinali. Tale disfunzionalità si esplica in una ridotta secrezione di GLP-1. Tale difetto potrebbe essere uno degli elementi all origine dell alterazione dell effetto incretinico in pazienti affetti da DMT2. Le terapie sinora sviluppate mirano unicamente a prolungare il mantenimento del GLP-1 in circolo; alla luce dei dati da noi acquisiti una diretta evoluzione in tal senso potrebbe consistere nel valutare l eventuale modulazione della produzione/secrezione di GLP-1 in situ direttamente da parte delle stesse L cellule. Le informazioni riguardanti le alterazioni metaboliche a monte della disfunzione delle L cellule diventano di fondamentale importanza perché forniscono utili spunti per sviluppare strategie terapeutiche che si approccino alla patofisiologia del diabete in maniera innovativa, mirando cioè ad ottenere una maggiore quantità di GLP-1 circolante mediante la modulazione fisiologica della sua produzione in situ.

SABRY NETO, Hassan. Desempenho e resistência imunológica do camarão Litopenaueus vannamei alimentado com uma dieta rica em B-1, 3/1,6-glucano e ácido L-ascórbico-2-monofosfato frente ao vírus da mionecrose infecciosa (IMNV). 2007. 66 f. Dissertação (Mestrado em Ciências Marinhas Tropicias) - Instituto de Ciências do Mar - LABOMAR, Universidade Federal do Ceará, Fortaleza, 2007.
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Since 2002, a new pathogen agent named Infectious Myonecrosis Virus (IMNV) has been causing significant economical losses in shrimp farms in NE Brazil. Contrary to vertebrates, shrimp do not possess an immunological system with an adaptative memory. However, they are equipped with an innate immune system with less complex defense responses. The present study aimed at determining the efficacy of high dosages of L-ascorbyl 2-monophosphate acid (VitC) in combination with a ß-1,3/1,6-glucan (BetG) on the survival, growth and immune responses of the shrimp Litopenaeus vannamei challenged with IMNV. The study was conducted in 30 tanks of 500 l, operated with clear water conditions and constant water renewal and aeration. Shrimp of 2.58 ± 0.39 g were stocked at 100 animals/m2 and reared for 10 weeks. The experimental design consisted of three treatments and three controls. Five tanks were designated for each treatment and control, as follows: Ref, IMNV- (IMNV negative) fed a commercial feed; Neg and Pos, IMNV- and IMNV+ (IMNV positive), fed an experimental feed with normal levels of L-ascorbyl 2-monophosphate (VitC, 250 mg/kg) deprived of BetG; VitC, IMNV+, fed an experimental feed with 1,160 mg/kg of VitC; VitCBetG, IMNV+, fed an experimental feed with 1,160 mg/kg of VitC and 600 mg/kg of BetG; and, BetG, IMNV+, fed an experimental feed with 1,000 mg/kg of BetG and normal levels of VitC. Experimental feeds were manufactured with laboratory equipment, while shrimp viral challenge occurred through oral administration of IMNV+ inoculum (1.82 x 103 copies of IMNV/μl RNA) during three consecutive days, twice a day. Per os challenge began on the 27th day of exposure to the experimental feeds when animals had reached between 4.93 g and 6.92 g in body weight. The total haemocyte count (THC), the total protein concentration and the relative activity of the phenoloxidase enzyme (PO) were evaluated in L. vannamei two days prior to the oral challenge (27th day of rearing), 17 days after the challenge (48th day of rearing) and at harvest (70th day of rearing). Reared shrimp were effectively contaminated with IMNV. Although 100% mortalities were not observed, animals were highly susceptible to the virus 29 days after the first day of infection. At harvest, shrimp reached a body weight between 9.07 ± 1.48 g (BetG) and 11.11 ± 1.86 g (Pos). Survival varied from a minimum of 22.8 ± 4.9% (VitC) to a maximum of 69.5 ± 5.7%. Shrimp body weight gains were continuous with weekly growth ranging from 0.56 g on the 14th day of culture to 0.77 g in the last week of culture. Shrimp weekly growth did not vary statistically between treatments. Survival reduced throughout the culture period, regardless of the treatment adopted. The THC showed a significant increase in all treatments after the per os challenge with IMNV (i.e., 48th day of culture). On this sampling day, the highest number of cells/mm3 were observed in treatments that were voluntarily challenged with IMNV, which were the ones that achieved the lowest final shrimp survival (Pos and VitC). Similarly, the non-challenged treatment (Ref) also displayed a significant increase in THC during the post-infection viral period. In general, the protein concentration and the relative activity of the phenoloxidase activity in shrimp serum did not change significantly throughout the culture period or between treatments. By this study it can be concluded that an inclusion of 600 mg/kg of ß- 1,3/1,6-glucan in a diet for the shrimp L. vannamei provided a significant increase in the species survival when exposed to IMNV. Conversely, the inclusion of 1,160 mg/kg of L-ascorbyl 2-monophosphate acid in diets for this species infected with IMNV did not result in a better growth or survival. In the present study, no signs of immunological fatigue or a detriment in growth could be detected when the species was continually exposed to a diet containing 600 mg/kg of ß-1,3/1,6-glucan.
Desde 2002 que um novo agente patogênico denominado de Vírus da Mionecrose Infecciosa (IMNV) vem causando significativas perdas econômicas em fazendas de camarão na Região Nordeste do Brasil. Ao contrário dos vertebrados, os camarões não possuem um sistema imunológico com memória adaptativa, no entanto possuem um sistema imune inato, apresentando respostas de defesa menos complexas. O presente estudo teve como objetivo determinar a eficácia de uma dieta com dosagens elevadas de ácido L-ascórbico-2-monofosfato (VitC) em combinação com um ß-1,3/1,6-glucano (BetG) sobre a sobrevivência, o crescimento e as respostas imunológicas do camarão Litopenaeus vannamei desafiado com o IMNV. O estudo foi realizado em 30 tanques de 500 l, operados com água clara e submetidos a aeração e renovação de água constante. Camarões com 2,58 ± 0,39 g foram povoados com 100 animais/m2 e cultivados por um período de 10 semanas. O desenho experimental foi composto por três tratamentos e três controles. Para cada tratamento foram designados cinco tanques, assim denominados: Ref, IMNV negativo e ração comercial; Neg e Pos, IMNV negativo e positivo respectivamente, alimentados com uma ração experimental contendo níveis normais de ácido L-ascórbico-2-monofosfato (VitC, 250 mg/kg) e sem ß-1,3/1,6-glucano; VitC, (IMNV positivos, alimentados com uma ração experimental contendo 1.160 mg/kg de ácido L-ascórbico-2-monofosfato), VitCBetG, (IMNV positivos, alimentados com uma ração experimental contendo 1.160 mg/kg de VitC e 600 mg/kg de BetG); e, BetG, (IMNV positivos, alimentados com uma ração experimental contendo 600 mg/kg de ß- 1,3/1,6-glucano e níveis normais de VitC). As rações experimentais foram fabricadas em laboratório e a infecção dos camarões se deu através da administração per os de tecido infectado por IMNV (1,82 x 103 copias de IMNV/μl RNA) durante três dias consecutivos, duas vezes ao dia. O desafio per os teve início no 27º dia de exposição dos camarões às rações, quando os animais alcançaram entre 4,93 g e 6,92 g. A contagem total de hemócitos (CTH), a concentração de proteínas totais do soro e a atividade específica da enzima fenoloxidase (PO) foram avaliadas no L. vannamei dois dias antes do desafio oral (27º dia de cultivo), 17 dias após o desafio per os (48º dia de cultivo) e na despesca (70º dia de cultivo). Os camarões cultivados foram efetivamente contaminados com o IMNV. Embora mortalidades de 100% não tenham sido observadas, os animais mostraram-se altamente susceptíveis ao vírus 29 dias após o primeiro dia do desafio. Na despesca, os camarões alcançaram um peso entre 9,07 ± 1,48 g (BetG) e 11,11 ± 1,86 g (Pos). A sobrevivência variou de um mínimo de 22,8 ± 4,9% (VitC) a um máximo de 69,5 ± 5,7% (Ref). O ganho de peso dos camarões foi progressivo e o crescimento semanal variou de 0,56 g no 14º dia de cultivo para 0,77 g na última semana, não havendo diferença estatística significativa entre tratamentos. A sobrevivência decresceu ao longo do cultivo, independente do tratamento adotado. A CTH apresentou um aumento em todos os tratamentos após o desafio per os com IMNV (i.e., 17 dias após), entretanto nem todos foram significativos. Neste dia de amostragem, um maior número de células/mm3 foi observado nos tratamentos voluntariamente infectados, os quais alcançaram uma menor sobrevivência final de camarões (Pos e VitC). Igualmente, o tratamento não infectado, Ref, também exibiu um aumento significativo na CTH no período de pós-infecção viral. De um modo geral, a concentração protéica do soro dos camarões e a atividade relativa da enzima fenoloxidase não se alteraram ao longo do cultivo ou entre os tratamentos avaliados. Através do presente estudo pode-se concluir que a inclusão de 600 mg/kg de ß-1,3/1,6- glucano em uma dieta para o camarão L. vannamei proporcionou um aumento significativo na sobrevivência da espécie quando exposto ao IMNV. Ao contrário, a inclusão de 1.160 mg/kg de ácido L-ascórbico-2-monofosfato em dietas para espécie infectada com IMNV não resultou em um maior crescimento ou sobrevivência da espécie. No presente estudo, não foram detectados indícios de fadiga imunológica ou diminuição no crescimento da espécie quando exposta de forma contínua a uma dieta contendo 600 mg/kg de ß-1,3/1,6-glucano.

Presentada a la Universidad de Chile para optar al Grado de Doctora en Farmacología
Helicobacter pylori (H. pylori) es una patógeno gástrico humano asociado al desarrollo de cáncer gástrico. En células epiteliales gástricas, la infección con H. pylori promueve la activación de diversas vías de señalización asociadas tanto a la progresión como al arresto del ciclo celular. Por otro lado, H. pylori ha demostrado inducir los niveles del Factor Inducible por Hipoxia-1α (HIF-1α), un factor transcripcional relacionado con la expresión de genes necesarios para la progresión tumoral. Fuera de sus funciones canónicas, se ha descrito que, en el contexto de la hipoxia, HIF-1α es capaz de promover arresto del ciclo celular en la fase G1 como parte de una acción no transcripcional. No obstante esto, HIF- 1α puede ser inducido por la activación de la vía PI3K/Akt/mTOR, vía de señalización relacionada con progresión del ciclo celular que ha sido asociada también a la acción de H. pylori. Aunque se ha descrito que la infección con H. pylori promueve la inducción de HIF-1α, actualmente no hay antecedentes precisos acerca de la vía de señalización precedente a este fenómeno, así como tampoco de su efecto sobre el destino de las células epiteliales gástricas. En este trabajo se buscó determinar si HIF-1α representa una transición desde señales que promueven un progreso del ciclo celular hacia un arresto del ciclo celular en la infección con H. pylori. En consecuencia, se propuso estudiar si H. pylori, al activar la vía PI3K/Akt/mTOR, podría llevar a un aumento de los niveles de HIF-1α y éste, a su vez, llevar a una respuesta de arresto del ciclo celular. Para estudiar esto, se utilizó un modelo in vitro basado en células humanas derivadas de cáncer gástrico MKN45 y AGS y la cepa de H. pylori 26695. Los resultados indican que H. pylori induce un aumento transitorio de HIF-1α con localización principalmente nuclear. Al inhibir farmacológicamente la vía PI3K/Akt/mTOR, se obtuvo que la inhibición de PI3K con LY294002 y de mTOR con Rapamicina fueron capaces de prevenir la inducción de HIF-1α por H. pylori. Al silenciar HIF-1α se obtuvo una reducción del arresto del ciclo celular en G0/G1 promovido por la bacteria. Consecuente con esto, los niveles de la proteína ciclina D1, importante para lograr la transición G1/S del ciclo celular, fueron diminuidos por la infección con H. pylori, sin embargo, esta diminución fue menos severa en las células que se silenció HIF-1α. En cuanto a su actividad transcripcional, se observó que al silenciar HIF-1α se previno el aumento del mRNA de GLUT-1 promovido por H. pylori sólo a tiempos tempranos de infección, pero éstos no fueron afectados a tiempos mayores. Por lo demás, el análisis bioinformático mostró que la infección con H. pylori no incrementó significativamente la expresión de genes blancos clásicos de HIF-1α en la mucosa antral. Finalmente, al analizar la acción de los componentes solubles o de la pared de H. pylori sobre la inducción de HIF-1α, se obtuvo que ninguno de ellos fue capaz de promover este efecto, sólo el contacto directo entre el patógeno vivo y el hospedero fue necesario para promover un aumento de los niveles de la proteína. En resumen, los resultados sugieren que H. pylori promueve un aumento de HIF-1α a través de la activación de PI3K y mTOR, y que esta inducción permite el arresto de células gástricas en la fase G0/G1 del ciclo celular. Además, HIF-1α tendría una participación menor en la expresión de su gen blanco GLUT-1. Finalmente, los datos sugieren que el factor de virulencia posiblemente implicado en este fenómeno requiere de la interacción directa entre H. pylori y la célula gástrica para ejercer su función
Helicobacter pylori (H. pylori) is a human gastric pathogen whose presence is linked to gastric carcinogenesis. In gastric epithelial cells, H. pylori infection promotes activation of several signaling pathways associated with both cell cycle progression and cell cycle arrest. On another hand, H. pylori has been linked to the induction of Hipoxia Inducible Factor -1α (HIF-1α), a transcription factor involved in the expression of several genes required for tumor progression. In addition to its canonical functions, in the context of hypoxia, HIF- 1α has been shown to promote cell cycle arrest in G1 phase as a nontranscriptional mode of action. HIF-1α induction in normoxia by activation of the PI3K/Akt/mTOR pathway has been described, and signaling via this pathway related to cell cycle progression also has been linked to H. pylori infection. However, although H. pylori reportedly promotes HIF-1α induction, currently little data is available concerning the signaling pathway(s) by which H. pylori promotes HIF-1α induction, as well as the consequences of such induction for cell fate. In this study, we sought to determine whether HIF-1α mediates the transition from cell cycle progression to cell cycle arrest observed following H. pylori infection. Thus, we evaluated whether activation of the PI3K/Akt/mTOR pathway increases HIF-1α levels and whether this leads to cell cycle arrest. To do so, these studies employed as in vitro models the human gastric cancer cell lines MKN45 and AGS as well as the H. pylori 26695 strain. The results indicate that H. pylori induces transient HIF-1α increases and enhances nuclear localization of the transcription factor. Pharmacological inhibiton of the PI3K/Akt/mTOR pathway revealed that the PI3K inhibitor LY294002 and the mTOR inhibitor Rapamycin precluded H. pylori-enhanced HIF-1α induction. HIF-1α silencing prevented H. pylori-induced cell cycle arrest in G0/G1 phase. Consequently, cyclin D1, an important protein for G1-S phase transition, decreased following H. pylori infection, and this decrease was less dramatic in HIF-1α knockdown gastric cells. With respect to HIF-1α transcriptional activity, we observed that HIF-1α silencing precluded increases in GLUT-1 mRNA promoted by H. pylori at early stages of infection only. Furthermore, bioinformatic analysis revealed that H. pylori infection was not associated with an increase in the expression of classical HIF-1α target genes in antral mucosa. Finally, analysis of the contribution of soluble components or components from the bacterial wall to HIF-1α induction, revealed that none of them individually were sufficient to promote the effect. Rather, the direct interaction between live bacteria and gastric cells was neccessary for H. pylori to increase HIF-1α protein levels. In summary, the results obtained in this thesis suggest that H. pylori increases of HIF-1α protein levels in normoxia through PI3K and mTOR activation, and that this induction promotes cell cycle arrest in the G0/G1 phase. Furthermore, HIF-1α appears to participate to some extent in modulating the expression of the target gene GLUT-1. Finally, the putative virulence factor involved in these events requires the direct interaction between bacteria and the host cell to exert its effect
Conicyt; Fondecyt; Fondap

Os fatores genéticos e o meio ambiente são pontos relevantes no que tange a capacidade física do ser humano. O objetivo deste estudo foi avaliar o genótipo dos genes, ACTN3 e da ACE I/D, em lutadores de alto rendimento na modalidade de percussão. Neste estudo fizeram parte do conjunto amostral 15 atletas de alto rendimento da esportes de combate e arte marcial, sendo sendo 6 lutadores de Karatê, 4 lutadores de Taekwondo, 4 lutadores de Muay Thai e 1 lutador de Boxe, todos do sexo masculino com idade média de 25,06 anos, com experiência nacional e internacional em suas respectivas modalidades e categorias de peso. A genotipagem dos polimorfismos do ACTN3 e ACE I/D foi realizada por reação em cadeia da polimerase (PCR) a partir do DNA genômico. As frequências genotípicas e alélicas foram comparadas com populações controle e de atletas pelos testes do Qui-Quadrado, e exato de Fisher, para todas as análises foi adotado p˂0,05. Os resultados obtidos para as frequências genotípicas e alélicas do ACTN3 (RR=35,71%,RX=57,14% e XX=7,14%; R=64,28% e X=33,71%) e do ACE I/D (DD=30,76%, ID=50,84% e II=15,36%; D=65,2% e I=34,8%) não diferiram significativamente da população controle e com estudos relacionados a força. Em conclusão os dados da presente pesquisa seguem os padrões esperados para população no que tange a frequência genotípicas e em sua distribuição alélica nos genes da ACTN3 e da ACE I/D com lutadores de percussão.
Genetic factors and the environment are relevant points regarding the physical capacity of the human being. The objective of this study was to evaluate the genotype of genes, ACTN3 and ACE I / D with fighters in high yield in the form of percussion. In this study were part of the sample set of 15 high-level athletes in combat sports and martial arts, 6 fighters from Karate, 4 fighters Taekwondo, 4 fighters Muay Thai and 1 boxing. All fighters being present, all males with average age of 25.06 years with national and international experience in their respective weight classes and methods. Genotyping of polymorphisms of ACTN3 and ACE I / D was performed by polymerase chain reaction (PCR) chain from the genomic DNA. The genotypic and allelic frequencies were compared with control populations and athletes by Qui-Quadrado and Fisher exact tests for all analyzes was adopted P=0.05. The results obtained for genotypic and allelic frequencies of ACTN3 (RR = 35.71%, 57.14% and RX = XX = 7.14%; R = X = 64.28% and 33.71%) and ACE I / D (DD = 30.76%, 50.84% and ID = II = 15.36%; D = I = 65.2% and 34.8%) did not differ significantly from the control population e power sports In conclusion the data of this study follow the expected population in relation to genotypic and allelic frequency distribution in the ACTN3 gene and ACE I / D fighters of percussion.

Doctor en Bioquímica
Autor no autoriza el acceso a texto completo de su documento hasta diciembre de 2016
Previamente describimos que la interacción entre Thy- 1 neuronal y la integrina αvβ3 presente en astrocitos aumenta la fosforilación inhibitoria de Src, provoca retracción de neuritas e inhibe el crecimiento de éstas. Sin embargo, Thy- 1 es una proteína anclada a la membrana vía un glicoplípido (GPI) y carece de dominios transmembrana e intracelular, y por lo tanto no puede transducir señales al interior de la célula. Aquí, evaluamos si la proteína que une a Csk (CBP), una proteína de andamiaje para las quinasas de la familia de Src, actúa como un transductor de Thy-1 y estudiamos los acontecimientos de señalización río abajo que causan la retracción de las neuritas desencadenada por la interacción de Thy-1 con Integrina αvβ3 . Para estudiar estas vías de señalización, se utilizaron dos modelos celulares diferentes. El primero de ellos fue células CAD; estas células se pueden diferenciar a un fenotipo neuronal por privación de suero. Luego estimulamos las células con la proteína fusión de Integrina αvβ3-Fc para estudiar su efecto. El segundo fue neuronas corticales de rata de 14 días en cultivo. Después de este período, también estimulamos añadiendo Integrina αvβ3. En ambos modelos se analizó el efecto de Integrina en la composición del complejo de membrana conformado por Thy-1, CBP y Src. Realizamos ensayos de inmunoprecipitación, microscopía STED, análisis de inmunofluorescencia entre otros. La participación de CBP, Src y RhoA también se evaluaron con herramientas de biología molecular y además se analizó el estado de fosforilación de sus efectores. Encontramos que Thy 1, CBP y Src forman un complejo funcional en los procesos neuronales que induce la inactivación de Src. Además, la adición de Integrina αvβ3 aumentó la activación de RhoA y su efector ROCK, eventos que causan la retracción de las neuritas a través de la disrupción del citoesqueleto de actina. Por otro lado, la utilización de una construcción de Src constitutivamente activa o el silenciamiento de CBP bloqueó la retracción neuronal causado por la interacción con Integrina αvβ3. Aquí, se propone un mecanismo molecular novedoso gatillado por la unión de Integrina αvβ3 astrocitaria a Thy-1 que involucra el agrupamiento de Thy-1 y la formación de un complejo de membrana el que a través de la activación de RhoA/ROCK lleva a la retracción de las neuritas. Una mejor comprensión de las vías de señalización implicadas en la comunicación celular entre las neuronas y astrocitos, que generan un ambiente no permisivo para la regeneración neuronal, debería ser útil en el desarrollo de nuevas terapias farmacológicas para ayudar a re-establecer redes neuronales dañadas
We have previously described that the interaction between neuronal Thy-1 and αvβ3-Integrin in astrocytes increases the inactivating phosphorylation of Src, causes neurite retraction and inhibits neurite outgrowth. Thy-1 is a GPI-anchored membrane protein, which lacks membrane-spanning and cytosolic domains and therefore cannot directly transduce signals to the cell interior. Thus, we evaluated whether Csk-Binding-Protein (CBP), a scaffolding protein for Src-family kinases, acts as a Thy-1 transducer and studied the downstream signaling events that cause neurite retraction triggered by Thy-1 interaction with αvβ3 Integrin. To study these signaling pathways, we used two different cellular models. The first one was CAD cells which can be differentiated to a neuronal phenotype by serum deprivation. Afterwars we added a fusion protein αvβ3 Integrin-Fc. The second one was rat cortical neurons of 14 days in culture. Following this period, these cells were also stimulated the cells by adding the αvβ3 Integrin. In both models we analyzed the effects of the Integrin the composition of the Thy-1, CBP and Src membrane complex. We performed immunoprecipitation assays, STED microscopy and immunofluorescence analysis among other assays. CBP, Src and RhoA participation was also evaluated using molecular biology approaches and by analyzing the phosphorylation state of downstream effectors. We found that Thy-1, CBP and Src form a functional complex in neuronal processes that induces Src inactivation. Furthermore, treatment with αvβ3-Integrin increased the activation of RhoA and its effector ROCK, both of which induce neurite retraction through the Actin cytoskeleton disruption. On the other hand, constitutively active Src or CBP abrogation prevented neuronal retraction caused by αvβ3 Integrin engagement. Here, we propose a novel molecular mechanism triggered by the binding of astrocytic αvβ3 Integrin to Thy-1 that involves Thy-1 clustering and the formation of a membrane complex with that through RhoA/ROCK activation leads to neurite retraction. A better understanding of the signaling pathways involved in cellular communication between neurons and astrocytes that generate a non-permissive environment for neuronal regeneration should be helpful to develop new therapies to help re-establishing damaged neuronal networks
Fondecyt Fondap Iniciativa Científica Milenio ACT1111

Submitted by Fabio Sobreira Campos da Costa (fabio.sobreira@ufpe.br) on 2017-04-07T12:49:00Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) Tese Mayara final [08-09-2016].pdf: 6000027 bytes, checksum: 8aba9ff907d1176a530d19ec2bb6fad1 (MD5)
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CAPES
Doença inflamatória intestinal descreve um grupo heterogêneo de doenças inflamatórias crônicas do trato gastrointestinal. Os dois principais tipos de DII são retocolite ulcerativa idiopática e doença de Crohn. A patogênese dessas doenças é caracterizada pela inflamação persistente no intestino, envolvendo uma interação entre fatores genéticos, ambientais e imunológicos. Foram investigados aspectos clínico-epidemiológicos e analisados os polimorfismos dos genes da reposta imune em pacientes brasileiros com doença inflamatória intestinal em diferentes formas anátomo-clínicas. Um total de 101 pacientes foram analisados (43 - retocolite ulcerativa idiopática e 58 - doença de Crohn) para os polimorfismos dos genes do fator de necrose tumoral alfa (TNF-α -308 G/A; rs1800629), interleucina-10 (IL-10 -1082 G/A; rs1800896), domínio do recrutamento e ativação da caspase 15/receptor tipo NOD2 (CARD15/NOD2; rs2066844 e rs2066845), receptor tipo NOD contendo domínio pirina – NLRP1 (rs12150220), NLRP3 (rs35829419) e interleucina -1beta (IL-1β -511T/C; rs16944). A forma anatómica-clínica de DC predominante foi a fistulizante (29,31%), seguida por inflamatória (27,58%) e estenosante (27,58%). O grupo controle foi composto por 91 indivíduos saudáveis. Os genes do receptor tipo NOD contendo domínio pirina 1 e 3 e do domínio do recrutamento e ativação da caspase 15/receptor tipo NOD2 variantes R702W e G908R não foram associados à susceptibilidade a doença inflamatória intestinal. Em relação ao polimorfismo da interleucina 10, nenhuma diferença estatística foi encontrada entre os genótipos e alelos para a doença inflamatória intestinal comparado aos controles. Fator de necrose tumoral alfa mostrou uma associação estatisticamente significativa entre pacientes e controles de retocolite ulcerativa idiopática que sugere que a presença do alelo A predispõe o aparecimento de retocolite ulcerativa idiopática, mas não doença de Crohn. Verificou-se ainda que o genótipo AG da interleucina 1 foi associado com o desenvolvimento de retocolite ulcerativa idiopática. Os resultados sugerem que os polimorfismos de única base do fator de necrose tumoral alfa e da interleucina 1 estão envolvidos com a retocolite ulcerativa idiopática e podem contribuir para a patogênese na população brasileira estudada.
Inflammatory bowel disease describes a heterogeneous group of chronic inflammatory diseases of the gastrointestinal tract. The two main types of inflammatory bowel disease are ulcerative colitis and Crohn disease. The pathogenesis of the disease is characterized by unpredictable attacks of inflammation of the intestine, besides involving an interaction between genetic, environmental and immunological factors. Clinical and epidemiological aspects were investigated and the polymorphisms of genes of the immune response in Brazilian patients with inflammatory bowel disease in different anatomic-clinical forms were analyzed. A total of 101 patients were analyzed (43 - ulcerative colitis and 58 - Crohn disease) for the tumour necrosis factor alpha (TNF-α -308 G/A; rs1800629), interleukin-10 (IL-10 -1082 G/A; rs1800896), caspase activation and recruitment domains 15/ NOD like receptor 2 (CARD15/NOD2; rs2066844 and rs2066845), NOD like receptor pyrin domain containing – NLRP1 (rs12150220), NLRP3 (rs35829419) and interleukin-1beta (IL-1β 511T/C; rs16944) genes polymorphisms. The anatomic-clinical form of Crohn disease predominant was the fistulizing (29.31%), followed by inflammatory (27.58%) and stricturing (27.58%). A control group was composed by 91 healthy subjects group. NOD like receptor pyrin domain containing 1 and 3 and caspase activation and recruitment domains 15/ NOD like receptor 2 genes R702W and G908R variants were not associated to inflammatory bowel disease susceptibility. With respect to the polymorphism of interleukin-10, no statistical difference was found between the genotypes and alleles for inflammatory bowel disease compared to controls. Tumour necrosis factor alpha showed a statistically significant association between ulcerative colitis patients and controls which suggests that the presence of A allele predisposes the onset of ulcerative colitis but not Crohn disease. It was found yet that AG genotype of interleukin-1beta was associated with the development of ulcerative colitis. The results suggest that the tumour necrosis factor alpha and interleukin-1beta single nucleotide polymorphisms are involved with ulcerative colitis and may be contributing to pathogenesis in Brazilian population.

La tecnología es una herramienta importante en la vida cotidiana, pues a diario nos vemos involucrados con aparatos como tabletas, computadoras y específicamente Smartphones que nos facilitan la comunicación y el trabajo desde aspectos sociales y educativos. Sin embargo, ¿qué uso le dan los universitarios a este tipo de herramientas? y, ¿son éstas un instrumento que ayudará a los docentes en el proceso de enseñanza-aprendizaje? Por tal motivo, el objetivo de esta investigación es analizar el uso educativo, social y ubicuo que estudiantes universitarios de la Universidad Veracruzana con enfoque en carreras Económico-Administrativas hacen del Smartphone o teléfonos inteligentes. Lo anterior a través de la aplicación de una encuesta con escala Likert donde 1= Nada, 2= casi nada, 3= de vez en cuando, 4= a menudo y 5= siempre, elaborado por el equipo de investigadores Esteban Vázquez-Cano y Ma. Luisa Sevillano García; con una confiabilidad de 0.814 del Alfa de Cronbach.

Introdução: A neurotoxina botulínica do sorotipo A (BoNT/A) é a mais utilizada atualmente em produtos para uso estético e terapêutico. A ação da BoNT/A decorre da sua ligação de seu domínio de ligação com o receptor (DLR) com proteínas como a proteína associada ao sinaptossoma de 25 kDa (SNAP-25). Desta forma, a paralisia promovida pela BoNT/A ocorre a partir da ligação com a SNAP-25, a qual é essencial para a fusão de vesículas sinápticas. Objetivo: Desenvolver scripts para o software RasMol para produção de imagens que demonstrem a ligação entre a SNAP-25 e o DLR da BoNT/A. Metodologia: O levantamento de arquivos PDB que apresentam a SNAP-25 e o DLR da BoNT/A foi realizado no site Protein Data Bank. A partir do arquivo selecionado foram desenvolvidos scripts para o programa computacional RasMol. Resultados: A partir dos scripts desenvolvidos para o arquivo 1XTG.pdb, foi observado que a extremidade amino-terminal da proteína SNAP-25 interage com o exosítio alfa do DLR. O exosítio alfa é formado por quatro alfa-hélices, formadas pelos resíduos 102-113 (alfa-hélice 1), 310-321 (alfa-hélice 2), 335-348 (alfa-hélice 3) e 351-358 (alfa-hélice 4). A extremidade carboxi-terminal da proteína SNAP-25 apresenta uma fita beta formada pelas 201-203. Esta extremidade se liga ao exosítio beta do DLR, formada por duas fitas betas constituída pelos resíduos 255-259 e 242-246. Assim, a extremidade carboxi-terminal e o exosítio beta formam uma folha beta compostas por três fitas beta. Conclusão: Os scripts produzidos demonstraram que a ligação entre a SNAP-25 e o DLR da BoNT/A decorrem principalmente a partir das extremidades da proteína SNAP-25 com os exosítios alfa e beta do DLR.

From April to December of 1986 fifteen Jarvik-7 artifi cial heart were temporally implanted until definitive-heart transplantation in 12 men and 3 women of 18 to 55 years old.Jarvik's stay ranged between 48 hours to 20 days, The coagulation control applied was:PT,APTT, reptilase,fibrinogen,platelet aggregation by turbidi-metry to ADP,epinephrine,collagen and arachidonic acid thromboelastography in whole blood,plasma and serum antithrombin III and activated factor X by specific substrates,haematocrit, platelet count,platelet factor 4 and B-thromboglobulin by enzymeimmunoassays,fibrin/ fibrinogen degradation products,alfa-2-antiplasmin, fibrinopeptide A and Raby’s transference test.Number of controls for each patient were 1 to 3 daily.Measure ments were done in preoperative,immediate postoperative and maxim bleeding period.The most significant data were compiled in tables as number of cases, x ± S.E. and S.D.x.Statistical methods were correlation coeffic ient, Pares “t”and Newman-Keuls for p <0.05. It is concluded that the most critical period was the immediate postoperative and because of the treatments applied in the maxim bleeding period, it was possible to reach the patient’s healtn recuperation whenever either a se vere organic failure or sepsis did not appear.Treatments mainly applied were heparin,dipyridamol,aproti-nin and antithrombin III concentrates, dose being adag ted to the results obtained in controls.Jarvik’s status observations when explanted will be presented in a paper aside.No patient suffered any cerebral,vascular or thromboembolic event.

El estudio tiene como objetivo analizar la influencia de la madurez macroergonómica en organizaciones de alta confiabilidad. A partir del mencionado modelo se construye una malla teórica relacional de conceptos teóricos, derivados y empíricos, para el establecimiento de las reglas de correspondencia y validación de constructos. Como bases teóricas para estudio se siguió los postulados de Bagozzi y Philips (1982), Cantero, J., y Seijo, G (2012), Rodríguez y Pérez (2016), entre otros. El estudio sigue el paradigma epistemológico positivista, realista, e instrumentista. La metodología seguida para esta investigación se encuentra dividida en distintas etapas las cuales son: 1) Revisión de literatura; 2) Elaboración y aplicación del instrumento de evaluación; 3) Captura y depuración de la información;4) Validación estadística; 5) Construcción y evaluación del modelo. El cuestionario fue diseñado para responder de manera sencilla compuesto por 58 ítems de acuerdo correspondiendo a los conceptos derivados, las variables observables, para su ponderación se utiliza una escala ordinal con valores de 1 a 5 de acuerdo con el baremo de (1= Nunca) y el (5=Siempre). Su aplicación fue a través de Google Form, enviado a 20 especialistas. El valor cociente obtenido de la prueba TRC del cuestionario que midió los rasgos teóricos fue de K= 0,811. Así mismo se obtuvo el valor insesgado de Alfa de Conbrach para el instrumento con un valor de 0,949. Los resultados permiten reportar que el modelo propuesto es suficientemente estable y se presentan suficientes evidencias estadísticas para afirmar que la Complejidad tiene un efecto directo y positivo sobre la Integración, asimismo la Complejidad sobre la integración y la Vulnerabilidad sirve de variable moderadora entre la complejidad y Vulnerabilidad.

OBJETIVOS -Conocer la frecuencia de uso previo de medicina alternativa -Identificar los tipos de medicina alternativa más utilizados -Describir la mejoría percibida con el uso de medicina alternativa MATERIAL Y MÉTODOS Estudio transversal, observacional, prolectivo, con un muestreo por conveniencia, 80 personas atendidas por patología dual en la consulta externa del Instituto Temazcalli Prevención y Rehabilitación de la ciudad de San Luis Potosí en México. Contestaron un cuestionario diseñado por el equipo de investigación con 10 preguntas de respuesta cerrada y escala tipo Likert para identificar el uso previo de medicina alternativa, el tipo utilizado y la mejoría percibida (alfa de Cronbach 0.8). Se realizó el análisis estadístico con el paquete SPSS versión 27. Aprobación por el Comité de Ética local. RESULTADO Y CONCLUSIONES 85% de hombres y 15% de mujeres de la muestra contestaron el cuestionario. El 84% de la población utilizó al menos 1 remedio alternativo, 56% 2 o más, y 36% 3 o más. El principal tipo fue el grupo de la herbolaria con 21% de frecuencia de uso, seguido de la meditación/yoga y los rituales con el 15 y 14% respectivamente. Las hierbas (té o infusiones) más usadas fueron la tila, la valeriana y la pasiflora con los porcentajes correspondientes de 20%, 13% y 11%. Sólo el 13% de los encuestados refirió mejoría percibida. Conociendo la alta frecuencia del uso de medicina alternativa y la escasa mejoría subjetiva reportada, se recomienda preguntar obligatoriamente este antecedente en la entrevista inicial de evaluación de los pacientes. Lo anterior para buscar oportunamente complicaciones de la enfermedad psiquiátrica por el retraso en la búsqueda de atención profesional y/o el abandono de psicofármacos y las interacciones medicamentosas. Es importante psicoeducar a la población respecto a los mitos y riesgos de la utilización de medicina alternativa en patología dual.

OBJETIVOS -Conocer la frecuencia de uso previo de medicina alternativa -Identificar los tipos de medicina alternativa más utilizados -Describir la mejoría percibida con el uso de medicina alternativa MATERIAL Y MÉTODOS Estudio transversal, observacional, prolectivo, con un muestreo por conveniencia, 80 personas atendidas por patología dual en la consulta externa del Instituto Temazcalli Prevención y Rehabilitación de la ciudad de San Luis Potosí en México. Contestaron un cuestionario diseñado por el equipo de investigación con 10 preguntas de respuesta cerrada y escala tipo Likert para identificar el uso previo de medicina alternativa, el tipo utilizado y la mejoría percibida (alfa de Cronbach 0.8). Se realizó el análisis estadístico con el paquete SPSS versión 27. Aprobación por el Comité de Ética local. RESULTADO Y CONCLUSIONES 85% de hombres y 15% de mujeres de la muestra contestaron el cuestionario. El 84% de la población utilizó al menos 1 remedio alternativo, 56% 2 o más, y 36% 3 o más. El principal tipo fue el grupo de la herbolaria con 21% de frecuencia de uso, seguido de la meditación/yoga y los rituales con el 15 y 14% respectivamente. Las hierbas (té o infusiones) más usadas fueron la tila, la valeriana y la pasiflora con los porcentajes correspondientes de 20%, 13% y 11%. Sólo el 13% de los encuestados refirió mejoría percibida. Conociendo la alta frecuencia del uso de medicina alternativa y la escasa mejoría subjetiva reportada, se recomienda preguntar obligatoriamente este antecedente en la entrevista inicial de evaluación de los pacientes. Lo anterior para buscar oportunamente complicaciones de la enfermedad psiquiátrica por el retraso en la búsqueda de atención profesional y/o el abandono de psicofármacos y las interacciones medicamentosas. Es importante psicoeducar a la población respecto a los mitos y riesgos de la utilización de medicina alternativa en patología dual.

Introdução: O SARS-CoV-2 infecta o tecido pulmonar através dos receptores da angiotensina 2, através da proteína viral SPIKE, invadindo a célula por endocitose e chegando aos pneumócitos II, iniciando uma resposta inflamatória. Dessa forma, a tempestade de citocinas (Il-1, IL6, TNF-alfa) causam aumento da permeabilidade dos capilares pulmonares, formando edema pulmonar e ativando fatores pró-coagulantes. Objetivo: Revisar a relação e o impacto da Covid-19 nos fatores de coagulação. Material e métodos: Foi realizada uma revisão bibliográfica na base de dados BVS (Biblioteca Virtual em Saúde) e PUBMED com os descritores "Blood Coagulation Factors" e " SARS-CoV-2”, com o operador AND. Os critérios de inclusão foram (1) textos completos condizentes com o tema e objetivos do trabalho; (2) em inglês, espanhol e português; (3) publicados nos últimos 2 anos. Foram encontrados 7 artigos, estes foram mantidos e analisados por atenderem aos critérios estabelecidos. Resultados: De acordo com os artigos, os fatores de coagulação quando ativados formam microtrombos que podem ser disseminados para outros órgãos, como fígado e rim, indicando alterações de coagulação resultantes de resposta inflamatória profunda, pela ativação plaquetária, resposta inflamatória sistêmica ou citocinas elevadas. Como indicativo desse quadro de coagulação intravascular disseminada, há uma elevação de D dímero, resultante da degradação de fibrina proveniente da formação dos trombos ou do fibrinogênio elevado resultante dos danos vasculares causados pela resposta inflamatória. Além disso, foi observado que pacientes com COVID - 19 apresentam um desequilíbrio entre os fatores V/VIII e a proteína C/S, assim como uma redução dos anticoagulantes naturais. Esse desequilíbrio aumenta os riscos de complicações tromboembólicas venosas ou arteriais, como embolia pulmonar. Conclusão: As evidências encontradas, apontam para uma relação entre as disfunções coagulativas e a COVID-19, assim a infecção poderia ser um fator agravante que contribui para a formação de trombos, logo, influenciando de forma negativa o prognóstico, relacionando-se à morte dos pacientes. Isso desperta a necessidade de monitorar ativamente os marcadores de coagulação para prevenir possíveis coagulopatias, especialmente em pacientes graves. No entanto, os artigos destacam que é necessário a realização de mais ensaios clínicos randomizados, buscando a correlação entre a coagulação e a COVID-19.

Considering the lack of studies assessing biomechanical exposure during manual material handling (MMH) in real work environment, the aims of this study are: (1) describing postures and movements of the upper back and upper arms during MMH performed in a regular workday in a real setting; (2) comparing postures and movements according to height level of the MMH; and (3) investigating the relationship between postures/movements and the workers’ experience. Fourteen workers (28.14 ± 6.73 years) from the distribution sector of an automotive factory were evaluated during four hours of their regular work. Three workers who presented more than five years performing MMH tasks were considered as expert (6.33 ± 0.57 years of experience in MMH tasks). Eleven workers were classified as novices (1.24 ± 0.78 years). Postures and movements of upper back and upper arms were measured using inclinometers. APDF percentiles (10th, 50th, and 90th) were obtained for angles and angular velocities. All data were descriptively analyzed and a one-way ANOVA was performed in order to compare biomechanical exposure during MMH tasks performed in three different, and most adopted, heights (floor, chest and shoulder levels). Pearson correlation test was applied to investigate the association between experience and biomechanical exposure variables. Alfa level was set at 0.05. In general, the descriptive analyses showed no expressive difference between expert and novice workers. Significant statistical differences in upper back and upper arms posture and movement among the three most frequent handling heights were found. Moreover, there was a positive and significant correlation between workers’ experience and humeral elevation. Despite the limited number of workers, we could evaluate what in fact happen in real settings. We believe that the evaluation of larger samples would demonstrate differences between expert and novice workers also in real settings, as we could observe a tendency of safer strategies among experienced workers. The challenge is finding larger groups of workers doing MMH tasks considering the lean production systems.

Introdução: Staphylococcus aureus (S. aureus) é uma bactéria associada a diversas infecções, tanto na comunidade quanto em ambiente hospitalar, ocasionando desde infecção cutânea até septicemia(1). Um importante fator de virulência é a exotoxina alfa-hemolisina (α-HL), que oligomeriza e forma canais iônicos transmembranares nas células-alvo, permitindo o fluxo livre de várias espécies químicas, resultando na morte celular(2). Diversas cepas de S. aureus exibem multirresistência aos antibióticos, limitando as opções de tratamento. Os derivados tiazolidínicos podem ser uma boa alternativa para bloquear a α-HL, pois possuem amplas propriedades bioativas, como por exemplo a antimicrobiana para cepas multirresistentes, sendo eficazes contra o S. aureus e inibindo o seu crescimento(3). Objetivos: Dada a importância da busca de compostos com ação antibacteriana, via bloqueio da α-HL, este trabalho visa analisar, via docagem molecular, a interação de derivados tiazolidínicos 5-benzilideno com o canal iônico formado pela toxina. Métodos: A estrutura cristalográfica da α-HL de S. aureus foi obtida pelo Protein Data Bank (PDB) e utilizou-se o MolView para modelagem dos compostos denominados GQ294 e GQ443, posteriormente submetidos ao Avogadro 1.1.1 para minimização de energia molecular. A docagem foi realizada pelo DockThor e os resultados foram analisados utilizando o Discovery Studio Visualizer. Resultados: A partir dos resultados de docagem pelo DockThor, foi obtida uma classificação dos compostos de acordo com suas energias totais e scores de afinidade com a toxina. Os valores de energia total do GQ443 e GQ294 foram iguais a -15,152 KJ/ mol e -19,009 KJ/ mol, respectivamente. Enquanto o score de afinidade de GQ443 e GQ294 foi de -6,820 Kcal/ mol e -5,902 Kcal/ mol respectivamente. As análises obtidas a partir do Discovery Studio Visualizer demonstraram que os dois compostos interagem com a região de constrição do canal iônico, principalmente com os resíduos GLU 111 e LYS 147, sendo estas interações mediadas principalmente por ligações de hidrogênio, além de interações do tipo cátionpi, pi-alquila, pi-enxofre. Esses dados corroboram com outros trabalhos já encontrados na literatura(4). Conclusões: Os resultados indicam, preditivamente, que os compostos GQ443 e GQ294 interagem com o canal da α-HL na região de constrição, sugerindo um bloqueio de sua atividade. São necessários dados experimentais para elucidar os dados teóricos já obtidos.