Auswahl der wissenschaftlichen Literatur zum Thema „Phlébotomes – Parasites“

Notre travail est une contribution à l'étude des leishmanioses en Iran. Il s'est focalisé sur trois volets. Le principal concerne les Phlébotomes. Les deux autres sont constitués par les Rongeurs réservoirs de L. major et l'Homme.L'étude des phlébotomes s'est réalisée selon deux axes : systématique et épidémiologique. Les approches de systématique nous a conduit à réaliser des inventaires faunistiques dans plusieurs régions d'Iran (nord-ouest, Nord-est, est et centre du pays). Ces inventaires nous ont permis de réactualiser la distribution de certains groupes, notamment les phlébotomes du sous-genre Adlerius et de mentionner deux espèces nouvelles pour la faune du l'Iran : Phlebotomus turanicus et P. salangensis. A côté de ces travaix de faunistique, nous avons réalisé deux travaux de systématique évolutive qui couplent des approches morphologique et morphométrique à des approches moléculaires associant un marqueur ribosomique à un marqueur mitochondrial. Nous avons ainsi étudié P. perfiliewi s.l. et le sous-genre Adlerius sur un échantillonnage débordant largement le cadre de l'Iran. Les travaux d'épidémiologie nous ont permis de vérifier que les foyers que nous avons étudiés fonctionnent sur un mode classique dans lequel P. papatasi, et à un degré probablement moindre les femelles du groupe Caucasicus transmettent Leishmania major alors que P. sergenti assure la transmission de L. tropica. L'identification des parasites est réalisée par voie moléculaire : PCR et RFLP et/ou séquençage de marqueurs ribosomiques. L'étude des Rongeurs réservoirs de L. major nous a permis de constater le rôle essentiel de réservoir de Rhombomys opimus et de Meriones libycus dans le pays avec l'observation de prévalences très élevées, supérieures à 30 % chez ces espèces.Enfin, une étude a été conduite dans la region de Fars où sévissent classiquement des leishmanioses à L. major, L. tropica et à L. infantum. Chez 44 patients présentant des lésions cutanées, nous avons isolé et identifié essentiellement L. major et quelques souches de L. tropica
This work focused on the leishmaniases in Iran. It includes three topics: i) the Phlebotomine sand flies, ii) the rodent reservoirs of Leishmania major and iii) the Humans.The entomological studies concern both systematics and epidemiology.The systematic part of the study of Phlebotomine sand flies includes several inventories carrired out in several provinces of Iran (North-West, North-East, East and Center of the country). Our results update the distribution of the subgenus Adlerius. We also recorded two new species for the fauna of Iran: Phlebotomus turanicus and P. salangensis. We also carried out evolutive and comparative systematics including specimens from Iran, neighbouring and Mediterranean countries. We coupled morphology to morphometrics and molecular systematics. In the latter approach, we coupled a ribosomal DNA marker to a mitochondrial one. We studied P. perfiliewi s.l. and the subgenus Adlerius. Our epidemiological works focusing on the epidemiology in several parts of the country showed that the studied foci are classical: P. papatasi, and also the females of the Caucasicus group transmit Leishmania major whereas P. sergenti is the vector of L. tropica.The identification of the Leishmania has been done using PCR then RFLP and/or sequencing of rDNA Internal Transcribed Spacer 1.We studied the rodent reservoirs of L. major. Rhombomys opimus and Meriones libycus play an important role and the percentage of L. major infection is high (> 30%).Lastly, we carried out a study on patients from the province of Fars. In this area, leishmaniases are due to L. major, L. tropica and L. infantum. We have typed strains isolated from 42 ot 44 patients. The majority of the strains have been identified as L. major and a few L. tropica

La Tunisie est un pays endémique pour la leishmaniose. En 1980, Rioux, Pratlong et Lanotte décrivent en Tunisie une espèce de leishmanie jugée nouvelle et qu'ils nomment alors Leishmania (L.) killicki sur la base d'une trentaine de souches présentant toutes un même nouveau profil isoenzymatique, le zymodème MON-8. Ces souches avaient été isolées à la suite d'une épidémie de leishmaniose cutanée apparue dans les environs de Tataouine. Cependant, le vecteur et le réservoir impliqués dans le cycle de ce parasite demeuraient inconnus.Plus récemment, fin 2010, nous avons pu identifier plusieurs cas de leishmaniose cutanée à L. killicki en dehors du foyer historique de Tataouine, chez des patients originaires de la délégation de Metlaoui, pourtant connue jusqu'alors uniquement comme foyer historique et endémique de leishmaniose cutanée à L. major. Ceci nous encouragea à approfondir nos prospections concernant ce nouveau foyer émergent à L. killicki .C'est dans ce contexte que l'objectif principal de notre thèse fut d'identifier les vecteurs et les réservoirs potentiels de la leishmaniose cutanée à L. killicki et de caractériser le cycle de transmission dans ces foyers par des études parasitologiques, moléculaires et isoenzymatiques.Nos travaux de thèse se sont articulés autour de trois principaux axes de recherche :1) Nous avons mené une étude élargie permettant une caractérisation moléculaire des souches de leishmanies isolées à partir de prélèvements cutanés de patients originaires non seulement de Metlaoui mais également des autres délégations composant le gouvernorat de Gafsa. Dans un premier temps, l'analyse des données nous a ainsi permis d'actualiser la répartition géographique de la leishmaniose cutanée à L. killicki en Tunisie.2) Des études entomologiques recherchant les vecteurs de la leishmaniose cutanée à L killicki nous ont permis :-de réaliser un inventaire faunistique des phlébotomes présents dans les deux foyers principaux, le foyer historique de Tataouine et le foyer émergent de Metlaoui ;-de mettre en évidence le rôle probable de vecteur des phlébotomes de l'espèce Phlebotomus sergenti pour L. killicki ;-d'étudier la variabilité intraspécifique chez les espèces Phlebotomus sergenti et Sergentomyia. minuta en comparant nos spécimens de Tunisie à ceux de nombreux autres pays ;-d'étudier les préférences trophiques des femelles de phlébotomes mettant en évidence leur large spectre d'hôtes lors de la prise de repas sanguin et le caractère non exclusivement herpétophile de Sergentomyia minuta, contrairement à ce qui est souvent rapporté.3) Enfin, nous avons étudié les réservoirs potentiels de la leishmaniose cutanée dans ces foyers en capturant les espèces de rongeurs principalement présentes en milieux urbain et selvatique (Metlaoui et alentours). Une caractérisation moléculaire et isoenzymatique des leishmanies isolées a été réalisée et nous faisons ici état, pour la première fois, de l'identification de L. killicki chez Ctenodactylus gondii et de son rôle probable dans le cycle de transmission de la leishmaniose cutanée à L. killicki en Tunisie
Tunisia is an endemic country for leishmaniasis. In 1980, Rioux, Pratlong & Lanotte described from Tunisia a new species they called Leishmania (L.) killicki based on the typing of 30 strains isolated from an outbreak of cutaneous leishmaniasis occuring in the Tataouine area and exhibiting a zymodeme: MON-8. The vector and the reservoir if exixting were still uncknown. Human cases have been mentioned out of this area. Gafsa is a province were cutaneous leishmanaisis due to L. major is endemic.The recent identification of L. killicki as the causative agent of a cutaneous leishmaniasis occuring patients from Metlaoui incitated us to explore this focus. This is the aim of our Ph. D. thesis: identification of the Phlebotomine sand flies vector(s) and possible role of reservoirs using both parasitological, isoenzymatical and molecular approaches.Three main topics have been developed during this work:i) To characterize the Leishmania strains from cutaneous lesions obtained from patients from Gafsa area using molecular tools. We updated epidemiological, spatial and clinical data related to L. killicki leishmaniasis in Tunisia.ii) To carry out entomological studies:-to do sand flies inventories in two distinct areas,-to study the molecular intraspecific variablility in Phlebotomus sergenti and Sergentomyia. minuta by comparison of Tunisian specimens with other ones coming from several countries,-to show the probable role of P. sergenti in the transmission of L. killicki,-to study blood meal origin of engorged females: many Phlebotomus are opportunistic species and Sergentomyia minuta is not exclusively herpetophilic.iii) Lastly, we carried out a study on the Leishmania infection on wild and urban rodents in Metlaoui and around this city. The isoenzymatic and molecular typing show the role of Ctenodactylus gondii in the cycle of L. killicki in Tunisia

Les investigations portent sur les phlebotomes de la banlieue marseillaise. Elle ont permis de recencer deux especes: sergentomyia minuta, herpetophile et p. Perniciosus, vecteur de leishmaniose. Les differences interstationnelles ont permis de degager une typologie basee sur leur mode de fonctionnement. Elles sont en parties regies par des facteurs physiographiques biologiques dont certains ont ete utilises comme descripteurs lors de l'elaboration de la carte ecologique. La dynamique des populations est conditionnee par les facteurs climatiques. L'influence des facteurs biologiques semble se determiner par une concurrence interspecifique exerce entre s. Minuta et p. Perniciosus au detriment de cette derniere. Elle se traduit par des phenomenes adaptatifs tels que la diminution de la taille de p. Perniciosus et la derive du sex ratio en faveur des males de cette espece. L'etude des facteurs lithologiques en laboratoire et sur le terrain montre le role essentiel de la matiere organique dans la regulation des facteurs hygrothermiques et du relargage des infrarouges thermiques. Associee aux sables, la matiere organique intervient dans le degre de fertilite des gites, et dans le choix d'un gite de ponte par les femelles des deux especes

Leishmania spp est un parasite unicellulaire de la famille des Trypanosomatidae, responsable des leishmanioses. La transmission de Leishmania à son hôte Vertébré est assurée par un phlébotome vecteur de la famille des Psychodidae. Chez le vecteur, les promastigotes procycliques (PP), forme non infectieuse, sont dans l'intestin et migrent jusqu'aux glandes salivaires pour devenir promastigotes métacycliques (PM), forme infectieuse. Les PM, transmis à l'hôte Vertébré lors d'un repas sanguin, se transforment en amastigotes (A), forme pathogène, après phagocytose par les macrophages de l'hôte. Les A sont transmis au vecteur via un nouveau repas sanguin et la différentiation des A en PP a lieu dans l'intestin du Phlébotome. Ces variations environnementales entrainent des modifications métaboliques pour Leishmania. La première partie de ce travail s'est intéressée aux changements du métabolisme central du carbone et à la peroxydation lipidique chez L. infantum pendant son cycle biologique. Les résultats transcriptomiques et métabolomiques ont montré une variation importante dans l'expression des gènes entre les promastigotes (PP et PM) et A, centrée sur le métabolisme des lipides entre PP et PM et du carbone entre PM et A. Chez A, en comparaison à PP et PM, la glutaminolyse est restée stable mais les enzymes du cycle de Krebs et de la glycolyse étaient sous-exprimées bien que les quantités de métabolites soient égales. La peroxydation lipidique était également diminuée chez les A. La β-oxydation était sur-exprimée, et les synthèses des purines et pyrimidines fortement sous exprimées. Ces résultats ont montré une utilisation réduite du métabolisme du carbone sauf pour la β-oxydation chez A, qui pourrait traduire un métabolisme plus lent. La seconde partie du travail est centrée sur le métabolisme lipidique. En effet, une diminution de la quantité des lipides hydroxylés chez A, comparé à PP et PM ayant été démontrée en première partie, cette réduction a été reproduite in vitro par un traitement à l'acide nordihydroguaiarétique (NDGA) (Paloque et al., 2019). Ce traitement induit un changement morphologique chez les PM traités (PM NDGA), réversible et non létal et suggérant une transition PM - A provoquée par le NDGA. Des études transcriptomiques et métabolomiques ont montré que (i) PM NDGA et A formaient un cluster, (ii) les gènes spécifiques du stade amastigote avaient une expression similaire chez PM NDGA et A et (iii) l'expression des voies métaboliques étudiées du PM NDGA était proche de A et différente de PM. Ces résultats démontrent la transition de stade PM - A induite par le NDGA, ouvrant une possibilité de cible potentielle pour lutter contre l'infectiosité du parasite
Leishmania spp. is a unicellular parasite of the Trypanosomatidae family, responsible for leishmaniasis. Leishmania is transmitted to Vertebrate hosts by a sand-fly vector of the Psychodidae family. In the sand-fly, procyclic promastigotes (PP), the non-infectious form of the parasite, localize in the gut. By migrating to the vector's salivary glands, PP become metacyclic promastigotes (PM), the infectious form of the parasite. PM are then transmitted to the vertebrate host through a blood meal, where once in the host's macrophages, they differentiate into amastigote (A), the pathogenic stage of the parasite. The life cycle starts over by further transmission of A to other sand-flies through a new blood meal, where the parasite become PP in the sand fly gut. These environmental variations lead Leishmania to adapt its metabolism to survive. In a first part, this work aimed at studying central carbon metabolism changes and lipid peroxidation, which were characterized using transcriptomic and metabolomic in Leishmania infantum. The transcriptomic and metabolomic results demonstrated significant diversity in gene expression between PP, PM and A, focusing on lipid metabolism between PP and PM, but carbon metabolism between PM and A. In A, compared to PP and PM, glutaminolysis appeared to remain stable but TCA cycle and glycolysis enzymes were down-regulated while metabolites quantities were equal. Lipid peroxidation was decreased in A. β-oxidation was up-regulated however purine and pyrimidine synthesis were strongly down-regulated. These results demonstrate a reduced use of carbon metabolism except for β-oxidation in A compared to PP and PM, meaning that A seems to have a slower metabolism. In a second part of the present work, the investigation on the parasite life cycle focused on lipid metabolism, as part one of this work showed that hydroxylated lipids quantities in A are reduced compared to PP and PM. This decrease was reproduced in vitro in PM using a nordihydroguaiaretic acid (NDGA) treatment (Paloque et al., 2019). NDGA induced a morphologic transition of treated PM (PM NDGA), reversible and non-lethal for the parasite, suggesting a PM - A transition NDGA induced. Transcriptomic and metabolomic studies have demonstrated (i) PM NDGA clustered with A, (ii) PM NDGA exhibited similar amastigotes-specific genes expression as A and (iii) TCA cycle, glycolysis and purine and pyrimidine synthesis expression in PM NDGA were close to A levels but different from PM results. These findings taken together showed a PM - A transition induced by NDGA, creating a potential target for modulating parasite infectivity