Dissertationen zum Thema „Adulteranti“

Nella trattazione che segue viene esposta una panoramica sulla gestione della qualità dello zafferano, focalizzandosi sull’individuazione dei parametri di qualità del prodotto preso in esame, sulle procedure analitiche necessarie alla categorizzazione merceologica e qualitativa e sulle tecniche innovative di disidratazione sviluppate negli ultimi anni. In primo luogo, viene descritta la pianta da cui viene selezionata la materia prima di cui è composto lo zafferano: il Crocus sativus; ne viene quindi analizzata la morfologia, la fenologia e la tecnica colturale, esponendo quelle che sono le fasi salienti del processo di coltivazione, lavorazione e trasformazione di questo prodotto. Viene poi illustrata la distribuzione geografica dei produttori mondiali di zafferano, riportando dati relativi alle produzioni nazionali ed internazionali. Vengono quindi riportate le procedure analitiche standard, contenute nella norma ISO 3632 del 2010 in riferimento alla classificazione merceologica dello zafferano; poi, vengono introdotte le procedure analitiche finalizzate alla rilevazione delle frodi che più soventemente interessano questa preziosa spezia, proponendo tecniche analitiche standard ed alcuni approcci analitici rapidi innovativi. Infine, sono descritte alcune delle tecniche innovative di disidratazione degli stimmi di C. sativus, volte a migliorarne il profilo organolettico, la concentrazione di molecole bioattive e la reologia. Vengono quindi analizzati gli aspetti funzionali e gestionali di queste tecnologie, confrontando i risultati ottenuti nelle sperimentazioni che le descrivono con le performance prodotte dalle tecniche di essiccazione convenzionali.

A adição fraudulenta de ativos farmacêuticos em suplementos nutricionais é um problema mundial. É comum encontrar mensagens sobre perda de peso, aumento da capacidade intelectual e/ou física, e estímulo sexual na embalagem de suplementos adulterados com fármacos sintéticos ocultos em formulações aparentemente inofensivas para os usuários. No Brasil, a disponibilidade de dados sobre a adulteração de suplementos nutricionais é escassa. No presente trabalho, foi desenvolvido e aplicado um método analítico empregando cromatografia gasosa com detector de nitrogênio fósforo (GC-NPD) para a detecção, identificação e quantificação de estimulantes/anorexígenos não declarados nos rótulos de suplementos alimentares, tais como: cafeína, femproporex, anfepramona, fenfluramina, sibutramina, fentermina, efedrina, fenilpropanolamina, pseudoefedrina e 4- metilhexan-2-amina. A técnica de extração/solubilização com metanol foi utilizada, ressaltando a utilização de baixa quantidade de amostra, solvente e padrões de estimulantes. Após o desenvolvimento e validação do método, as análises foram aplicadas em amostras de suplementos nutricionais obtidos em lojas especializadas em suplementos, de diversas partes do estado de São Paulo (n=125). Das 125 amostras de suplemento nutricional analisadas, 38 delas (30%) apresentaram resultado positivo para alguma das substâncias de interesse, dentre elas, sibutramina, cafeína e efedrina mediante a metodologia escolhida. As amostras positivas foram posteriormente analisadas qualitativamente por LC-MS/MS, no propósito de confirmar o resultado positivo obtido. A técnica analítica empregada proporciona seletividade, linearidade, precisão, exatidão, recuperação e limites em conformidade ao objetivo que foram destinadas. Os métodos de preparo de amostra desenvolvidos e validados demonstraram ser simples, práticos, eficientes e diferenciados pelo baixo uso de amostra e solvente.
The fraudulent addition of active pharmaceutical compounds in nutritional supplements is, indeed, a worldwide problem. Often, it can be found several advertisements on various supplement packaging assuring weight loss, increased intellectual and/or physical capacity and sexual stimulation. These products may have been \'spiked\' with synthetic drugs containing formulations which are apparently harmless to users. In Brazil, the availability of data about adulteration of nutritional supplements is scarce. In the present work, an analytical method using gas chromatography coupled with a nitrogen-phosphorus detector (GC-NPD) was developed and applied for the detection, identification and quantification of undeclared stimulants and/or anorectic agents in food supplement labels, such as: caffeine, fenproporex, amfepramone, fenfluramine, sibutramine, phentermine, ephedrine, phenylpropanolamine, pseudoephedrine e 4- metilhexan -2- amine. The extraction/solubilization with methanol presented satisfactory results, emphasizing the use of low amount of sample, solvent and standards of analytes. After the development and validation, the method was applied in samples of nutritional supplements obtained from specialty stores in various parts of the state of São Paulo (n = 125). From the 125 nutritional supplement samples analyzed, 38 of them (30%) presented positive results for some of the substances of interest, among them sibutramine, caffeine and ephedrine according to the chosen methodology. The positive samples were subsequently analyzed qualitatively by LCMS / MS, in order to confirm the positive result obtained. The analytical technique employed provides selectivity, linearity, precision, accuracy, recovery and limits in accordance with the intended purpose. The sample preparation methods developed and validated to be simple, practical, efficient and differentiated by the low sample and solvent usage.

Linha de pesquisa: Tecnologia e vigil?ncia em sa?de.
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O Brasil encontra-se entre os pa?ses de maior consumo de coca?na no mundo. As quest?es relacionadas ao uso da coca?na provocam preocupa??es, uma vez que s?o acompanhadas de consequ?ncias que atingem m?ltiplas dimens?es da sociedade moderna. Os problemas associados ao tr?fico e ao consumo de drogas est?o difundidos por todo o pa?s, alcan?ando, inclusive, munic?pios de pequeno porte. A presen?a de adulterantes pode ocasionar rea??es inesperadas bem como potencializar os danos ? sa?de dos usu?rios. Este trabalho teve como objetivo caracterizar amostras de coca?na apreendidas no munic?pio de Diamantina, Minas Gerais, quanto ao teor de coca?na e presen?a de adulterantes. Em uma primeira etapa do trabalho, foi validada uma metodologia anal?tica para quantifica??o de coca?na em amostras apreendidas com uso da Cromatografia Gasosa acoplada ? Espectrometria de Massas com monitoramento de ?ons selecionados (selected-ion monitoring - SIM) (CG-EM-SIM). Em uma segunda etapa, foram analisadas cento e vinte e nove amostras, sendo destas sessenta e sete apreendidas na forma de p? e sessenta e duas como crack. Foram realizadas an?lises para a identifica??o de adulterantes e para determina??o do teor de coca?na nas amostras, sendo a identifica??o de adulterantes realizada por Cromatografia Gasosa acoplada Espectrometria de Massas (CG-EM), no modo full scan, e a quantifica??o da coca?na por CG-EM?SIM. Foi realizada a compara??o do teor m?dio entre as amostras apreendidas na forma p? e de crack pelo teste U de Mann-Whitney. A fenacetina foi o principal adulterante encontrado. Outros adulterantes como benzoca?na, cafe?na, levamisol, lidoca?na e proca?na tamb?m foram detectados. As amostras apreendidas como crack apresentaram not?rio predom?nio da fenacetina como adulterante. O teor de coca?na das amostras estudadas apresentou varia??o dentro de um amplo intervalo (0-93%). Os teores m?dios de coca?na observados para as formas de p? e de crack foram, respectivamente, 31,7% e 54,3%, sendo tais valores estatisticamente distintos. A vigil?ncia em rela??o ?s caracter?sticas de drogas il?citas deve ser uma atividade cont?nua para fornecer aos ?rg?os de controle e de sa?de p?blica elementos de aux?lio ?s atividades de repress?o e tamb?m para tomadas de decis?o e de diagn?stico por parte dos profissionais de sa?de que lidam com atendimento aos usu?rios de drogas. As informa??es obtidas neste trabalho poder?o contribuir para futuras a??es de educa??o e conscientiza??o em rela??o aos riscos associados ao uso de drogas.
Disserta??o (Mestrado Profissional) ? Programa de P?s-Gradua??o em Sa?de, Sociedade e Ambiente, Universidade Federal dos Vales do Jequitinhonha e Mucuri, 2017.
Brazil is among the countries with the highest cocaine use in the world. The issues related to cocaine use raise concerns, since they are accompanied by consequences that affect the modern society multiple dimensions. The problems associated with illicit trafficking and drug abuse are widespread throughout the country, reaching small towns. The adulterants presence can cause unexpected reactions as well as potentiate the damages to the users? health. This study aimed to characterize the cocaine samples seized in Diamantina, Minas Gerais, Brazil, regarding the cocaine content and the adulterants presence. In the study?s first phase, an analytical methodology was validated for the cocaine quantification in samples seized using Gas Chromatography coupled to a Mass Spectrometry with Selected-Ion Monitoring (GC-MS-SIM). In a second phase, one hundred and twenty-nine samples were analyzed, from which sixty-seven were seized as powder and sixty-two as crack. Analyzes were performed to identify adulterants and to determine the cocaine content in the samples. The identification of adulterants were carried out by a Gas Chromatography coupled to a Mass Spectrometry (GC-MS) in the full scan mode, and quantification of cocaine contend by GC-MS-SIM. The mean content comparison between the samples seized as powder and crack was performed by the Mann-Whitney U test. Phenacetin was the main adulterant found. Other adulterants such as benzocaine, caffeine, levamisole, lidocaine and procaine were also detected. The samples seized as crack showed a predominance of phenacetin as adulterant. The cocaine content of the samples studied varied within a wide range (0-93%). The average cocaine contents observed for the powder and crack forms were, respectively, 31,7% and 54,3%, and these values were statistically different. The surveillance in relation to the illicit drugs characteristics should be a continuous activity to provide control to the public health agencies with support elements for repression activities, as well as decision-making and diagnosis by the health professionals dealing with the drug users? care. The information obtained in this study may contribute to the future education and awareness actions regarding the risks associated with the drug use.

Thesis (Ph.D.)--East Tennessee State University, 2004.
Title from electronic submission form. ETSU ETD database URN: etd-1103104-152459 Includes bibliographical references. Also available via Internet at the UMI web site.

The estimated number of employees in the United Stated screened annually for illicit drugs is approximately 20 million, with marijuana being the most frequently abused drug. Urine adulterants provide an opportunity for illicit drug users to obtain a false negative result on commonly used primary drug screening methods such as the Fluorescence Polarized Immunoassay (FPIA) technique. Typical chemical adulterants such as nitrites are easily detected or render the urine specimen invalid as defined in the proposed federal guidelines for specimen validity testing based on creatinine, specific gravity and pH. Papain is a cysteine protease with intrinsic ester hydrolysis capability. The primary metabolite of the psychoactive chemical in marijuana, 11-norcarboxy-delta-9-tetrahydrocannibinol (THC-COOH), was assayed by FPIA in concentrations ranging from 25 to 500 ng/mL, at pH values ranging from 4.5 to 8, over the course of 3 days with papain concentrations ranging from 0 to 10 mg/mL. FPIA analysis of other frequently abused drugs: amphetamines, barbiturates, benzodiazepines, cocaine, opiates, and phencyclidine, along with gas chromatography/mass spectrometry (GC/MS) of THC-COOH and high pressure liquid chromatography/ultraviolet detection (HPLC/UV) of nordiazepam was performed in order to determine if the mechanism of urine adulteration by papain was analyte specific. Control and adulterated urine specimens (n=30) were assayed for creatinine, specific gravity and pH to determine if papain rendered the specimens invalid based on the proposed federal guidelines. There was a direct pH, temperature, and time dependent correlate between the increase in papain concentration and the decrease in THC-COOH concentration from the untreated control groups (p<0.01). The average 72 hour THC-COOH concentration decrease at pH 6.2 with a papain concentration of 10 mg/mL was 50%. Papain did not significantly decrease the concentration of the other drugs analyzed with the exception of nordiazepam. GC/MS of THC-COOH and HPLC/UV of nordiazepam revealed a 66% and 24% decrease in concentration of the respective analyte with 10 mg/mL papain after 24 hours at room temperature (~23 °C). No adulterated specimens were rendered invalid based on the SAMHSA guidelines. Immediate FPIA analysis is suggested to minimize the interfering effects of papain with regards to primary drug screening.

Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico
The adulteration of natural pharmaceutical formulations using synthetic drugs has increased in the last years.Adulterations have been reported in the literature, which proves the increasing concern regarding this issue, and thus raising the development of analytic methodologies that are able to detect adulterations. This study describes the development of three methodologies for the determination of five synthetic drugs classes (anorexics, antidepressants, anxiolytics, diuretic, and laxatives) in natural formulations.Two methods were developed for screening samples using voltammetry of immobilized microparticles (VIM), and cathodic stripping voltammetry (AdCSV). Another method wasdeveloped for the separation and identification of 16 drugs of 5 different classes - anorexics (amfepramone, sibutramine, and femproporex), antidepressants (bupropion, fluoxetine, paroxetine, and sertraline), anxiolytics (alprazolam, bromazepam, flurazepam, lorazepam, chlordiazepoxide, diazepam, midazolam, and clonazepam), diuretic (furosemide), and laxatives (phenolphthalein and bisacodyl) - using ion-pair chromatography (IPC). The optimized conditions for the separation were as follows, eluent: tetrahydrofuran/acetronitrile/water (5/10/85) with 0.14 mol L-1 of dodecyl sodium sulfate, in pH 4, initial flow of 1.2 mL min-1, using a C18 column. The eluent s concentration and flow varied during the application of the gradient. The IMV method was applied in the screening of 49 pharmaceutical formulation samples, and 15 presented adulterations with anorectic, anxiolytic, and diuretic drugs. The CSV method was used in the screening of 99 samples, and 5 presented adulterations with anxiolytic and laxative drugs. The separation method was applied in 18 samples, and 3 presented adulterations with phenolphthalein (laxative).Both screening methods developed here were efficient in tracking samples, presenting advantages, such as speed and low reagent consumption. The separation method was validated according to linearity, detection limit, quantification limit, selectivity, precision, and analytic accuracy. Therefore, this method can be used to determine the adulterations presented here in natural pharmaceutical formulations.
A adulteração de formulações farmacêuticas naturais com fármacos sintéticos tem aumentado muito nos últimos anos. Os casos de adulteração têm sido relatados na literatura, comprovando que existe uma maior preocupação com relação a este problema, o que implica no desenvolvimento de métodos analíticos capazes de detectá-los. Este trabalho descreve o desenvolvimento de três metodos para a determinação de fármacos sintéticos da classe dos anorexígenos, antidepressivos, ansiolíticos, diuréticos e laxantes em formulações naturais. Foram desenvolvidos dois métodos para os screening de amostras, usando voltametria de micropartículas imobilizadas (VIM) e voltametria de redissolução catódica (AdCSV). E um método de separação para identificação a quantificação de 16 fármacos de cinco classes diferentes, anorexígenos (anfepramona e sibutramina e femproporex), antidepressivos (bupropiona, fluoxetina, paroxetina e sertralina), ansiolíticos (alprazolam, bromazepam, flurazepam, lorazepam, clordiazepóxido, diazepam, midazolam e clonazepam), diurético (furosemida) e laxantes (fenolftaleína e bisacodil), usando cromatografia de par iônico (IPC). As condições otimizadas para a separação, eluente: tetrahidrofurano/acetonitrila/água, (5/10/85), contendo 0,14 mol L-1 de dodecil sulfato de sódio, em pH 4,0, fluxo incial de 1,2 mL/minuto, usando coluna C18. A concentração do eluente e o fluxo variaram durante a aplicação do gradiente. O método VIM foi aplicado no screening de 49 amostras de formulações farmacêuticas e dentre estas, 15 apresentaram adulteração por fármacos da classe dos anorexígenos, ansiolitios e diuréticos. O método AdCSV foi aplicado no screening de 99 amostras e destas, 5 apresentaram adulteração por fármacos da classe dos ansiolíticos e laxantes. O método de separação foi aplicado em 18 amostras e destas, 3 apresentaram adulteração pela fenolftaleína da classe dos laxantes. Os dois métodos de screening desenvolvidos mostram-se eficientes para o rastreio de amostras, apresentando vantagens como, rapidez e baixo consumo de reagentes. O método de separação foi validado nos parâmetros de linearidade, limite de detecção, limite de quantificação, seletividade, precisão e exatidão analítica, podendo ser empregado na determinação destas substâncias como adulterantes em formulações farmacêuticas naturais.

Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico
The adulteration of phytotherapeutic formulations used for weight loss with synthetic pharmaceuticals has been increasing in recent years. The cases of adulteration have been reported in the literature, showing that there is a great concern about this problem, which involves the development of analytical methodologies able to detect them. This paper describes the development of a method for the simultaneous determination of amfepramone, fenproporex, sibutramine and fluoxetine by using capillary zone electrophoresis (CZE) with capacitively coupled contactless conductivity detection (C4D) in a homemade capillary electrophoretic system. The optimized conditions for separation of the pharmaceuticals by CZE-C4D were the following: 50 mmol L-1 phosphate buffer (pH 5.0) containing acetonitrile 50% (v/v) as working electrolyte, separation potential of -15 kV, separation temperature of 25 °C, hydrodynamic injection by gravity (20 cm left side elevation for 60 s). The C4D detection was performed by using a homemade detector, which employs a sinusoidal wave generator operating at 600 kHz frequency and 2 Vpp wave amplitude. The CZE-C4D method was validated for the determination of amfepramone, fenproporex, sibutramine and fluoxetine and it was applied to the analysis of phytotherapeutic formulations used for weight loss, which have been purchased in different commercial pharmacies in the city of Santa Maria. This method was fit in the analysis of four synthetic drugs studied, with a wide linear response range (10 to 500 mg L-1), low detection limits (4 to 5 mg L-1), precision (6 to 9 %) and accuracy (95 to 112 %) . The recovery experiments were carried out in the samples and the recovery values ranged between 80 and 120 % for all the studied samples. The developed method showed high sensitivity, selectivity and analytical precision and it can be used for determining these substances as contaminants in herbal natural formulations. It also an important alternative to the federal control agencies due to its simplicity, rapidity and low cost of analysis considering the small quantities of reagents and samples used.
A adulteração de formulações fitoterápicas emagrecedoras com fármacos sintéticos tem aumentado muito nos últimos anos. Os casos de adulteração têm sido relatados na literatura, comprovando que existe uma maior preocupação com relação a este problema, o que implica no desenvolvimento de metodologias analíticas capazes de detectá-los. Este trabalho descreve o desenvolvimento de um método para a determinação simultânea de anfepramona, femproporex, sibutramina e fluoxetina empregando eletroforese capilar de zona (CZE) com detecção condutométrica sem contato capacitivamente acoplada (C4D), usando um sistema de eletroforese capilar construído em laboratório. As condições otimizadas para a separação dos fármacos por CZE-C4D foram as seguintes: eletrólito de trabalho tampão fosfato (pH 5,0) 50 mmol.L-1 contendo acetonitrila 50% (v/v), potencial de separação -15 kV, temperatura de separação 25 °C, injeção hidrodinâmica por gravidade com altura de injeção de 20 cm durante 60 s. A detecção por C4D foi realizada usando um detector construído em laboratório, que emprega um gerador de onda senoidal operando a uma freqüência de 600 kHz e amplitude de onda de 2 Vpp. O método de CZE-C4D foi validado para a determinação de anfepramona, femproporex, sibutramina e fluoxetina e empregado na análise de formulações fitoterápicas emagrecedoras adquiridas em diferentes farmácias de manipulação na cidade de Santa Maria. Este método mostrou-se adequado na análise dos quatro fármacos sintéticos estudados, apresentando uma ampla faixa linear de trabalho (10 a 500 mg L-1), baixos limites de detecção (4 a 5 mg L-1), precisão (6 a 9%) e exatidão (95 a 112%). Os ensaios de recuperação realizados promoveram recuperações entre 80 e 120% para os fármacos sintéticos estudados. O método desenvolvido apresentou alta sensibilidade, seletividade e precisão analítica, podendo ser empregado na determinação destas substâncias como adulterantes em formulações fitoterápicas, tornando-se uma alternativa para órgãos fiscalizadores devido a sua simplicidade, rapidez e baixo custo de análise devido às quantidades reduzidas de reagentes e amostras utilizadas.

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior
The use of herbal medicines as an alternative treatment has increased by the belief that natural products do not cause damage to health. However cases in which natural products are added of synthetic drugs not declared, presumably to enhance the effectiveness them have been reported in the literature. In the case of weight loss formulations the main adulterants found are appetite suppressants, antidepressants, benzodiazepines, diuretics and laxatives. The identification of these frauds is only possible by applying the analytical methods able to detect the presence of adulterants in the formulations. This paper describes the development of two methods employing separation techniques with electrochemical detection for the determination of diuretics and laxatives as adulterants in herbal products. The method employing capillary zone electrophoresis (CZE) with contactless conductivity detection (C4D) allows the simultaneous determination of amiloride, chlorthalidone, hydrochlorothiazide, furosemide and phenolphthalein in the following optimized conditions: working electrolyte phosphate buffer 20 mmol L-1 (pH 9.2) containing 30% methanol (v/v) separation potential -15 kV, temperature 25 °C, injection hydrodynamic by gravity in 20 cm for 60 seconds. The method employing ion pair chromatography (IPC) with pulsed amperometric detection (PAD) allows the determination of hydrochlorothiazide, chlorthalidone and furosemide on the following conditions: mobile phase phosphate buffer 5 mmol L-1 (pH 4.5) containing SDS 0.3 mmol L-1 and 50% methanol (v/v), sample potential of +0.8 V, the cleaning potential of -0.2 V and +1.0 V, and flow rate of 1.0 mL/min. Both methods were validated in the parameters of linearity, limit of detection limit of quantification, precision, accuracy and selectivity, and were applied in the analysis of 26 samples of natural weight loss products purchased from pharmacies in nine Brazilian states. In three of 26 samples were identified the presence of illegal diuretic hydrochlorothiazide in concentrations ranging from 0.6 to 7.0 mg/capsule. In addition, five other samples called naturals contained declared on the label of the packaging the presence of synthetic diuretics hydrochlorothiazide or furosemide. Both methods were able to identify the adulterants present in samples with high selectivity and sensitivity. Furthermore, they presented very approximate results in the concentration of adulterants found in the formulations. There is still no unified regulation established by the government for control of herbal products. Each country has its laws, but the marketing is global. Maybe this is the reason why the adulteration of natural products has been a recurring practice in various parts of the world. Therefore, effective regulation for the natural products can result in the reduction of these offenses, and punishment of offenders, thus ensuring the rights of consumers to make quality treatment, safe and effective, without prejudice to health. Keywords: Pharmaceutical formulations, adulterants, diuretics, laxatives, methods of separation, electrochemical detection.
O uso de ervas medicinais como tratamento alternativo tem crescido por se acreditar que produtos naturais não causam danos à saúde. No entanto casos de adulteração de produtos naturais com adição não declarada de fármacos sintéticos, presumidamente para aumentar a eficácia dos mesmos, têm sido relatados na literatura. No caso de formulações emagrecedoras os principais adulterantes já encontrados são anorexígenos, antidepressivos, benzodiazepínicos, diuréticos e laxantes. A identificação destas fraudes só é possível com a aplicação de metodologias analíticas capazes de detectar a presença destes adulterantes nas formulações. Este trabalho descreve o desenvolvimento de duas metodologias empregando técnicas de separação com detecção eletroquímica para a determinação de diuréticos e laxantes como adulterantes em produtos naturais. O método empregando eletroforese capilar de zona (CZE) com detecção por condutividade sem contato (C4D) permite a determinação simultânea de amilorida, clortalidona, hidroclorotiazida, furosemida e fenolftaleína nas condições otimizadas: eletrólito de trabalho tampão fosfato 20 mmol L-1 (pH 9,2) contendo metanol 30% (v/v), potencial de separação -15 Kv, temperatura 25 °C; injeção hidrodinâmica por gravidade em 20 cm durante 60 s. O método empregando cromatografia de par iônico (IPC) com detecção por amperometria pulsada (PAD) permite a determinação de hidroclorotiazida, clortalidona e furosemida nas seguintes condições: fase móvel tampão fosfato 5 mmol L-1 (pH 4,5) contendo SDS 0,3 mmol L-1 e metanol 50% (v/v); potencial de amostragem de +0,8 V; potenciais de limpeza de -0,2 V e +1,0 V; e fluxo de 1,0 mL/min. Os dois métodos foram validados nos parâmetros de linearidade, limite de detecção, limite de quantificação, precisão, exatidão e seletividade e, foram aplicados na análise de 26 amostras de produtos naturais emagrecedores adquiridos de farmácias de manipulação de nove estados brasileiros. Em três das 26 amostras foi identificada a presença ilegal do diurético hidroclorotiazida em concentrações que variaram de 0,6 a 7,0 mg/cápsula. Além disso, outras cinco amostras ditas naturais continham declarado no rótulo das embalagens a presença dos diuréticos sintéticos hidroclorotiazida ou furosemida. Os dois métodos foram capazes de identificar os adulterantes presentes nas amostras com alta seletividade e sensibilidade. Além disso, apresentaram resultados bastante aproximados com relação às concentrações encontradas dos adulterantes nas formulações. Ainda não existe uma regulamentação unificada estabelecida pelos órgãos governamentais para o controle de produtos fitoterápicos. Cada país tem a sua legislação, porém a comercialização destes produtos é globalizada. Talvez por isso a adulteração de produtos naturais vem sendo uma prática recorrente em diversas partes do mundo. Logo, uma regulamentação efetiva para os produtos de origem natural, pode resultar na redução destas infrações, ou punição dos infratores, garantindo assim os direitos dos consumidores de realizar um tratamento de qualidade, seguro e eficaz, sem prejuízo à saúde.

Diabetes Mellitus is considered a disease in ascension worldwide. In Brazil, the rate of diabetes increased by 40% in the last six years. The use of medicinal plants in the treatment of diabetes has great relevance, as a chronic treatment, by seem harmless and be easily accessible for the population. The literature highlights the presence of drugs in herbal formulations used in the treatment of diabetes, which can lead to serious consequences such as metabolic acidosis and severe hypoglycemia. In the last decade, the ANVISA has intensified the control and concern with the market for herbal medicines in Brazil. As a consequence, it is demanded the development of methodologies for detection of the hypoglycemic drugs added as contaminants in vegetable-based formulations used in the treatment of diabetes. In this sense the present study developed and validated a method by high performance liquid chromatography with ultraviolet detection for determination of some hypoglycemic adulterants. Mobile phase was composed of 0.1% phosphoric acid (pH 2.0) (90%:0%) and acetonitrile (10%:100%) The following conditions were defined; column C18; 230 nm; and flow rate of 0.5 mL. min-1 to 0.9 ml. min-1, 20 minutes of analysis. Another method based on capillary electrophoresis, MEKC UV, was tested to analyse the same hypoglycemic agents. However, the conditions studied did not present acceptable results. The method based on HPLC UV proved to be suitable for the simultaneous determination of metformin, glipizide, chlorpropamide, gliclazide, glibenclamide and glimepririda and it showed low limits of detection and quantification, besides to be specific, precise, exact and linear (p < 0.01), within the determined range (2.5 - 15mg L-1). After validation, the HPLC UV method was applied in the analysis of twenty samples acquired in the national market. Among the samples analyzed were not detected the presence of adulterants validated in this work.
Diabetes Mellitus (tipo II) é considerada uma doença em ascensão no mundo inteiro. No Brasil, o índice de diabéticos cresceu 40% em seis anos. O uso de plantas medicinais no tratamento desta patologia crônica tem grande relevância, por parecer inofensivo e ser de fácil acesso à população. A literatura destaca que é possível encontrar a presença de fármacos em formulações fitoterápicas utilizadas no tratamento do diabetes, podendo trazer consequências graves, como acidose metabólica e hipoglicemia grave. Na última década a Anvisa tem intensificado a fiscalização e a preocupação com o mercado de fitoterápicos no Brasil. Para tanto, se torna grande a procura por metodologias capazes de detectar fármacos hipoglicemiantes adicionados de forma ilegal em formulações de base vegetal utilizadas no tratamento do Diabetes Mellitus (tipo II). Neste sentido no presente trabalho foi desenvolvido e validado um método por Cromatografia Líquida de Alta Eficiência com detecção ultravioleta (HPLC-UV) para determinação de adulterantes hipoglicemiantes. Foram definidas as seguintes condições: fase móvel ácido fosfórico 0,1% (pH 2,0) (90% a 0%) acetonitrila (10% a 100%); coluna C18; 230 nm; e fluxo de 0,5 mL. min-1 a 0,9 mL. min-1, com menos de 20 minutos de análise. Outro método, através de Cromatografia Capilar de Eletrocinética Micelar (MEKC-UV) foi utilizado para análise destes hipoglicemiantes, porém não se obteve resultados aceitáveis. O método por HPLC-UV mostrou-se adequado para a determinação simultânea dos fármacos metformina, glipizida, clorpropamida, glicazida, glibenclamida e glimepririda, visto que apresentou baixos limites de detecção e quantificação, além de mostrar-se específico, preciso, exato e linear (p< 0,01), dentro do intervalo testado (2,5 15 mg. L-1). Após a validação, o método HPLC-UV foi aplicado na análise de vinte amostras adquiridas no mercado nacional, dentre estas não foram detectados a presença dos adulterantes pesquisados.

Thesis (M.S.)--Boston University
Cocaine is one of the most common drugs of abuse in the United States today, but street-quality cocaine is decreasing in purity each year. This change in purity requires a shift in the focus of cocaine analysis in forensic laboratories. In recent years, many federal agencies have begun testing and profiling for the adulterants and diluents present in cocaine samples submitted as evidence. By analyzing the compounds present in the street-quality samples, forensic chemists may be able to track the cocaine back to its source, based on the unique identities of certain adulterants. Many of the adulterants currently being added to cocaine are dangerous on their own, even though they may enhance the effects of the cocaine. For this reason many doctors and forensic pathologists are interested in the identities of the adulterants present. Often times, a sample of the cocaine ingested may not be available for testing. Thus, there is a need for the development of methods to test for these adulterants and their metabolites in biological samples. The objective of this research is to develop extraction and instrumental analysis methods for several common cocaine adulterant metabolites, in an effort to create a geographical profile of human urine samples that tested positive for benzoylecgonine, a cocaine metabolite, and exploring the possible trends.

O café é uma das bebidas mais consumidas no mundo. Devido à sua grande importância comercial, a detecção de impurezas, sedimentos e matérias estranhas, tem sido preocupação constante na averiguação de fraudes, especialmente pela dificuldade de percepção de adulterações á olho nu, em amostras de café torrado e moído. No Brasil as adições mais freqüentes são materiais torrados como cascas e paus, milho, triguilho, soja e mais recentemente sementes de açaí. Com o objetivo de verificar a mistura em diferentes proporções de triticale e açaí ao café torrado e moído, aplicou-se um planejamento experimental do tipo centróide-simplex. Avaliou-se o desempenho de dois métodos distintos aplicados às mesmas amostras extraídas, empregando o método internacionalmente adotado ISO 11292, inicialmente estabelecido para a determinação de carboidratos em café solúvel, baseado na técnica de HPLC-HPAE-PAD, e posteriormente validado para café torrado e moído, com resultados comparados aos obtidos pelo método não normalizado de detecção pós-coluna por ultravioleta-visível (HPLC-UV/VIS). A HPAE é uma técnica conhecida como cromatografia de alta eficiência que emprega coluna de troca aniônica forte, a qual associada à detecção por amperometria pulsada (PAD) permite a quantificação direta de carboidratos, sem derivatização, com excelente resolução, em uma única corrida, apresentado boa sensibilidade, portanto, possibilitando a detecção em baixos níveis de concentração. A segunda técnica cromatográfica, consiste no uso de coluna de troca iônica catiônica com temperatura elevada, e exige a derivatização com adição de cromóforo pós-coluna, pelo fato dos carboidratos não apresentarem ligaçoes p conjugadas, entretanto, possibilita o emprego de detector UV-VIS, equipamento existente na maioria de laboratórios de controle de qualidade. Embora, a sensibilidade do sistema UV-VIS tenha apresentado menor resolução e sensibilidade, observou-se potencialidade na sua utilização para triagem de adulterantes em rotina no controle de qualidade do café, já que pela avaliação quimiométrica, as matrizes puderam ser correlacionadas, agrupadas e distinguidas por meio de carboidratos característicos. Modelos matemáticos foram elaborados para explicar a influência de cada carboidrato, permitindo predizer quanti e qualitativamente pelas superfícies de resposta traçadas, a proporção de mistura destes adulterantes no café. O monossacarídeo característico para o café puro foi a galactose com concentrações de 5,59% (m/m) empregando o sistema HPLC-HPAE-PAD, e de 3,67% (m/m) para o sistema HPLC-UV/VIS com pós-coluna. Para o triticale puro, o carboidrato característico foi a glicose, detectada em maior quantidade, com 46,34%(m/m) e 26,13%(m/m), para os dois sistemas, respectivamente. Enquanto, o carboidrato característico e predominantemente detectado para o açaí foi manose com teores de 24,54%(m/m) e 10,78%(m/m) respectivamente.
Coffee is one of the most consumed beverages in the world. Due to its commercial importance, the detection of impurities, sediments and foreign matter has been a constant concern in fraud verification, especially by the difficulty in perception of adulterations with naked eye, in samples of roasted and ground coffee. In Brazil, the most common additions are roasted material as husks and sticks, corn, wheat middling, soybean and recently acai seeds. With the objective of verify the mixture in different proportions of triticale and acai in roasted and ground coffee, was applied an experimental design simplex centroid. Was evaluated the performance of two distinct methods applied to the same samples, extracted using the internationally adopted method ISO 11292, first established to the determination of carbohydrates in soluble coffee, based on HPLC-HPAE-PAD technique, and later validated to roasted and ground coffee, with results compared to the ones obtained by the non-normalized method by HPLC-UV-VIS with postcolumn derivatization system. HPAEC is a technique known as High Performance Anion Exchange Chromatography with Pulsed Amperometric Detection (PAD) enables straight quantification of carbohydrates, without derivatization, with excellent resolution, in a single run, showing good sensitivity, therefore, enabling detection in low concentration levels. The second chromatography technique consists in the use of cationic exchange column with high temperature, and requires derivatization with addition of chromophore postcolumn reagent by the fact that carbohydrates don’t present conjugated p bonding, but enables the use of UV-VIS detector, equipment existent in most of quality control laboratories. However UV-VIS system’s has shown less resolution and sensitivity was observed potentiality in its utilization in the selection of adulterants in coffee quality control routines, since by chemometric evaluation, matrixes could be correlated, grouped and distinguished by characteristics carbohydrates. Mathematical models were developed to explain the influence of each carbohydrate, enabling to predict quantitatively and qualitatively by response surface analysis, the mixture proportion of these adulterants in coffee. Characteristic monosaccharide to pure coffee was galactose with concentrations of 5.59% (w/w) using HPLC-HPAE-PAD system, and 3.67%(w/w) to the HPLC-UV/VIS with postcolumn derivatization system. To pure triticale, glucose was the characterized carbohydrate, detected in more quantity, with 46.34%(w/w) and 26.13%(w/w) to both systems, respectively. While characteristic and predominant carbohydrate detected to acai was mannose, with contents of 24.54%( w/w) and 10.78%( w/w) respectively.

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior
The adulteration of phytotherapic formulations has been a common practice in many countries, since there is not an specific legislation for the control of the manufacturing and commercialization of the so called natural medicaments . In this context, the existence of analytical methodologies, which alllow the identification and quantification of possible pharmaceuticals as adulterants in these formulations is very important in the toxicological analysis. Since the possibilitiy of adulteration is very broad in terms of compound classes, the analytical methods have to be very selective and sensitve for the identification os compound classes and/or individual compounds. In this work, a voltammetric method was developed and validated for the selective determination of pharmaceuticals from the class of 1,4-benzodiazepines (ansiolytics) and diethylpropion (anorexics). In order to investigate the possible interference of other electroactive drugs (possible adulterants in phytotherapic formulations) at the mercury electrode, synthetic mixtures containing different concentrations of 1,4-benzodiazepines, diethylpropion and interferents fluoxetine, sibutramine and metformin were analyzed. The parameters of the voltammetric analysis, such as pH, potential and time of deposition, were optimized aiming a voltammetric measurement with high selectivity and sensitivity. The validated method was applied for the determination of the adulterants in phytotherapic formulations used in the treatment of obesity, which have been commercialized as natural medicaments by Brazilian pharmacies. Four different phytotherapic formulations were found to be contaminated by 1,4-benzodiazepines in concentration ranging from 0,056 to 0,270 mg/g. Recovery experiments for 1,4-benzodiazepines and diethylpropion were carried out in the formulations, which gave recovery values higher than 90% for all the analyzed adulterants. The developed and validated method presented high sensitivity, selectivity, analytical precision and short analysis time. Therefore, the method is very usefull as an analytical tool for the control and fiscalization of the adulteration of phytotherapic formulations.
A adulteração de formulações fitoterápicas tem sido uma prática recorrente em todo o mundo, tendo em vista o fato de que ainda não existe uma legislação específica de controle da manipulação e comercialização dos chamados medicamentos naturais . Neste sentido, a existência de metodologias analíticas que possibilitem a identificação e a quantificação de possíveis fármacos como adulterantes nestas formulações é de extrema importância na análise toxicológica. Como a possibilidade de adulteração é relativamente ampla em termos de classes de compostos, os métodos analíticos requerem principalmente boa seletividade e sensibilidade na identificação de classes e/ou compostos individuais. Neste trabalho, um método voltamétrico foi desenvolvido e validado para a determinação seletiva de fármacos da classe dos 1,4-benzodiazepínicos (ansiolíticos) e da dietilpropiona (anorexígeno). Para avaliar uma possível interferência na determinação destes fármacos causada por outros fármacos eletroativos (possíveis adulterantes em formulações fitoterápicas) no eletrodo de mercúrio, misturas sintéticas com diferentes concentrações dos 1,4-benzodiazepínicos, dietilpropiona e os interferentes fluoxetina, femproporex, sibutramina e metformina foram analisadas. Os parâmetros da análise voltamétrica pH, potencial e tempo de deposição foram otimizados, visando uma medida voltamétrica com alto grau de seletividade e sensibilidade. O método validado para a determinação de 1,4-benzodiazepínicos e dietilpropiona foi empregado na análise de formulações fitoterápicas utilizadas no tratamento da obesidade, as quais são comercializadas como medicamentos naturais por farmácias de manipulação brasileiras. Quatro diferentes formulações fitoterápicas analisadas acusaram a presença de 1,4-benzodiazepínicos como adulterantes em concentrações entre 0,056 e 0,270 mg/g. Ensaios de recuperação para os 1,4-benzodiazepínicos e dietilpropiona foram realizados nas formulações, obtendo-se recuperações acima de 90% para todas as espécies de adulterantes analisadas. O método desenvolvido e validado apresentou alta sensibilidade, seletividade, precisão analítica, baixo custo e análises rápidas, comprovando a aplicabilidade do mesmo como uma alternativa para o controle e fiscalização da adulteração em formulações fitoterápicas.

Made available in DSpace on 2016-08-29T15:35:36Z (GMT). No. of bitstreams: 1 tese_8107_LUCAS DE ALMEIDA GAMA20141202-143805.pdf: 4996710 bytes, checksum: ee8465315ab132ba2e49f39bf08cad52 (MD5) Previous issue date: 2014-08-27
As análises de drogas de abuso são realizadas principalmente por técnicas analíticas como a cromatografia gasosa, podendo estar acoplada com a espectrometria de massas (CG/MS), e também técnicas de infravermelho (IV). Outras técnicas que antes eram inviáveis, tanto pelo alto custo dos equipamentos quanto pela baixa sensibilidade, agora estão se tornando técnicas viáveis para análises destas drogas. Um exemplo disso é a Ressonância Magnética Nuclear (RMN), que devido a necessidade de uma quantidade maior de amostra e ao alto custo de solventes deuterados, empregados na dissolução da amostra, tornavam a RMN uma técnica com alto custo agregado. Neste trabalho, foram realizados estudos de RMN sem a utilização de solvente deuterado na diluição das amostras de cocaína apreendidas pela Polícia Civil do Estado do Espírito Santo, denominada No-D NMR. A aplicação desta técnica diminui o custo das análises uma vez que não são utilizados compostos deuterados como solvente. Como se tratava de uma nova metodologia de análise, otimizou-se parâmetros de aquisição e de processamento característicos da RMN. A qualidade espectral obtida permitiu a distinção dos sinais característicos da cocaína e seus principais adulterantes: cafeína, fenacetina e lidocaína. Uma segunda etapa deste trabalho foi a aplicação de figuras de mérito para validar a No-D NMR como uma nova metodologia de quantificar a cocaína e seus principais adulterantes. Foram realizados estudos de especificidade/seletividade, linearidade, limite de detecção (LD), limite de quantificação (LQ) e exatidão/precisão que mostraram que a metodologia proposta é adequada para quantificar as substâncias em apreensões de cocaína. Após a obtenção das figuras de mérito, quantificou-se 29 apreensões que possuíam uma baixa quantidade de cocaína (cerca de 24% em massa) o que demonstrou que ocorre muita adulteração das amostras comercializadas no Espírito Santo.

The regulations of many food products in the United States have been made and followed very well but unfortunately some products are not put under such rigorous standards as others. This leads to products being sold, that are thought to be healthy, but in reality contain unknown ingredients that may be hazardous to the consumers. With the use of several instrumentations and techniques the detection, characterization and identification of these unknown contaminates can be determined. Both the AZ-100 and the TE2000 inverted microscope were used for visual characterizations, image collection and to help guide the extraction. Direct analyte-probed nanoextraction (DAPNe) technique and nanospray ionization mass spectrometry (NSI-MS) was the technique used for examination and identification of all adulterants. A Raman imaging technique was than introduced and has proven to be a rapid, non-destructive and distinctive way to localize a specific adulterant. By compiling these techniques then applying them to the FDA supplied test samples three major adulterants were detected and identified.

A detecção de impurezas em amostras de café torrado e moído é uma preocupação constante, principalmente para verificar a ocorrência de fraudes. A análise dos carboidratos é importante neste quesito, já que a variação nos constituintes originais das diferentes matrizes pode ser capaz de revelar a composição final do produto, ou seja, se o mesmo está puro ou foi adulterado, e em que proporção esta adulteração ocorreu, em função da proporção de cada um dos mono, oligo ou polissacarídeos. Deste modo, realizou-se, neste trabalho, um estudo para avaliar a qualidade através da concentração dos carboidratos totais de um café arábica torrado e moído. Métodos quimiométricos foram empregados para verificar um padrão de adulteração por soja, trigo, milho, café conilon, cascas e paus de café pela mistura de diferentes proporções destes contaminantes ao café, seguindo planejamento estatístico de misturas do tipo centróide simplex empregando: (café arábica*soja*trigo); (café arábica*soja*milho); (café arábica*milho*trigo); (café arábica*cascas de café*café conilon); (café arábica*cascas de café*paus de café) e (café arábica*café conilon*paus de café) utilizando a técnica de HPAEC-PAD. Concluiu-se que o método mostrou-se eficiente na distinção das diferentes matrizes. Para o café, os 2 monosacarídeos característicos da matriz, encontrados com elevados teores em relação aos demais carboidratos foram a galactose em média de 5,55% ± 0,89 (m/m) e a manose com 7,52% ± 0,91 (m/m) para o café arábica, enquanto para o café conilon os valores médios foram semelhantes de 5,85% ± 0,30 (m/m) e 6,37% ± 0,41 (m/m), respectivamente. A casca de café apresentou maiores teores de carboidratos para o manitol de 1,03% ± 0,05 (m/m), para a arabinose de 3,39% ± 0,15 (m/m) e frutose de 2,64% ± 0,22 (m/m). O carboidrato determinado com a maior concentração para o soja foi a frutose com 1,08% ± 0,03 (m/m). Para a amostra de milho, a glicose foi detectada em maior quantidade com 45,72% ± 1,38 (m/m), seguida do trigo com 41,16% ± 1,77 (m/m). Os paus de café apresentaram os maiores teores de xilose (5,75% ± 0,56 (m/m)). Foram obtidos modelos matemáticos que mostraram a influência dos adulterantes incorporados ao café. Das amostras comerciais analisadas verificou-se adulteração em sua grande maioria com cascas de café e paus.
The detection of impurities in roasted and ground coffee samples is a constant concern, especially in order to verify fraud occurrences. Carbohydrate analysis is important in this issue, since variation in original constituents from different raw materials may be able to reveal the final composition of the product, or in other words, if it’s pure or if it has been adulterated, and in which proportion this adulteration happened, as a function of the proportion of each mono-, oligo-, and polysaccharides. Therefore, in this work, a study to evaluate the quality, through total carbohydrate concentration of Arabic roasted and ground coffee is done. Chemometric methods were used to verify an adulteration pattern by soybean, wheat, corn, canephora coffea, husks and sticks of coffee by the mixture of different proportions of these adulterants in coffee, following statistical model in a simplex-centroid mixture design applying: (coffea arabica soybean*wheat); (coffea arabica *soybean*corn); (coffea arabica *corn* wheat); (coffea arabica *coffee husks* canephora coffea); (coffea arabica *coffee husks*coffee sticks) (coffea arabica * canephora coffea *coffee sticks) using HPAEC-PAD technique. In conclusion, this method showed itself efficient in the distinction of different matrixes. To the coffee, 2 characteristic monosaccharides of the matrix found in a higher level in relation to the other carbohydrates were galactose, with an average of 5.55% ± 0.89 (m/m) and mannose with 7.52% ± 0.91 (m/m) to coffea arabica, while to canephora coffea, average were similar with 5.85% ± 0.30 (m/m) and 6.37% ± 0.41 (m/m), respectively. Coffee husks presented higher levels of carbohydrate, being 1.03% ± 0.05 (m/m) to mannitol, 3.39% ± 0.15 (m/m) to arabinose and 2.64% ± 0.22 (m/m) to fructose. To soybean fructose was determined as the carbohydrate with higher concentration with 1.08% ± 0.03 (m/m). To the corn sample, glucose was detected in higher quantity of 45.72% ± 1.38 (m/m), followed by wheat with 41.16% ± 1.77 (m/m). Coffee sticks presented xylose highest levels (5.75% ± 0.56 (m/m)). Mathematical models that showed influence of incorporated adulterants in coffee were obtained. Analyzed commercial samples in its majority were adulterated with coffee husks and sticks.

Conselho Nacional de Pesquisa e Desenvolvimento Científico e Tecnológico - CNPq
Cocaine is a stimulant that features a strong ability to cause dependence. Often adulterants are added to this drug in order to mimic its action or minimize its adverse effects. When there are other pharmacologically active components in the drug composition, severe problems can occur to users’ health, such as intoxication symptoms. Thus, the aim of this study was to develop a method for the determination of the main adulterants of cocaine (caffeine, levamisole, lidocaine, phenacetin, diltiazem, and hydroxyzine) in human urine. The high-performance liquid chromatography with a photodiode array detector and the dispersive liquid-liquid microextraction based on solidification of floating organic drop were used as analysis technique and as sample preparation technique, respectively. The reversed-phase chromatographic separation was obtained with a C18 column (250 x 4.6 mm; 5 μm; 80 Å) in gradient elution mode using acetonitrile-trifluoroacetic acid 0.026% (v/v) at 1 mL min-1 as mobile phase, at 25°C, and detection at 235 nm. The analysis time was 25 min. Under optimum conditions, human urine samples were alkalized with 0.5 mol.L-1 sodium phosphate buffer (pH 10) and added sodium chloride (20% m/v). Acetonitrile (150 μL) and 1-dodecanol (30 μL) were used as dispersive and extraction solvent, respectively. The method presented linear range of 312.5 – 3125 ng.mL−1 for caffeine and levamisole and 187.5 – 1875 ng.mL−1 for lidocaine, phenacetin, diltiazem, and hydroxyzine, with limit of quantification of 187.5 ng.mL-1 to lidocaine, phenacetin, diltiazem, and hydroxyzine and 312.5 ng.mL-1 for caffeine and levamisole. Recovery mean values were between 6.0 and 42.6%. The method showed good precision and accuracy, with within- and between-run relative standard deviation and relative error less than 15%. The samples were stable after freeze-thaw cycle and short-term room temperature stability tests. Additionally, this method was applied in samples of urine of five cocaine users and at least one adulterant was identified in all samples. It is expected that this method will contribute to the precision in the diagnosis of cocaine adulterants’ intoxication and to the proper planning of therapeutic measures.
A cocaína é uma droga estimulante que apresenta capacidade de causar dependência. Frequentemente são adicionados a esta droga adulterantes com o intuito de mimetizar sua ação ou minimizar seus efeitos adversos. Quando há nessa droga outros componentes farmacologicamente ativos, agravos à saúde dos usuários podem ocorrer, como quadros de intoxicação. Assim, o objetivo deste trabalho foi desenvolver um método de determinação dos principais adulterantes da cocaína (cafeína, levamisol, lidocaína, fenacetina, diltiazem e hidroxizina) em urina humana. A cromatografia líquida de alta eficiência com detector de arranjo de fotodiodos foi utilizada como técnica de análise e a microextração líquido-líquido dispersiva com solidificação da gota orgânica flutuante, como técnica de preparo das amostras. A separação cromatográfica dos analitos em fase reversa foi obtida em uma coluna C18 (250 x 4,6 mm; 5 μm; 80 Å) em modo gradiente e usando acetonitrila-ácido trifluoroacético 0,026% (v/v) a 1 mL.min-1 como fase móvel (25°C e detecção a 235 nm). O tempo de análise foi de 25 min. Para o preparo da amostra, a urina foi alcalinizada com tampão fosfato de sódio 0,5 mol.L-1 (pH 10) e adicionada de cloreto de sódio (20% m/v). Acetonitrila (150 μL) e 1-dodecanol (30 μL) foram utilizados como solvente dispersor e extrator, respectivamente. O método apresentou intervalos lineares de concentração de 312,5 – 3125 ng.mL−1 para cafeína e levamisol e de 187,5 – 1875 ng.mL−1 para lidocaína, fenacetina, diltiazem e hidroxizina, com limite de quantificação de 187,5 ng.mL-1 para lidocaína, fenacetina, diltiazem e hidroxizina e 312,5 ng.mL-1 para cafeína e levamisol. Os valores médios de recuperação variaram de 6,0 a 42,6%. O método mostrou boa precisão e exatidão intra e intercorrida com coeficientes de variação e erros relativos menores que 15%. As amostras apresentaram-se estáveis após ciclos de congelamento-descongelamento e após serem mantidas por 24h em temperatura ambiente. Ainda, o método foi aplicado em cinco amostras de urina de usuários de cocaína e pelo menos um adulterante foi identificado em todas as amostras. Espera-se que este método possa contribuir para a precisão no diagnóstico das intoxicações por adulterantes da cocaína e para o adequado planejamento das medidas terapêuticas.

Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Instituto de Química, Programa de Pós-Graduação em Química, 2017.
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Sendo a cocaína uma das drogas ilícitas mais populares do mundo, a possibilidade de correlacionar amostras da droga apreendidas e obter dados quanto a suas fontes de produção e rotas de tráfico são de extrema importância para a investigação policial. Dessa forma, é importante obter um perfil químico da droga, no qual se identifica e quantifica a cocaína, os adulterantes e os diluentes presentes. Para este fim, a técnica recomendada é a cromatografia gasosa, uma técnica de custo e tempo de análise elevados, preparo de amostra laborioso, além de não permitir análises in situ. Considerando esses aspectos, o presente projeto visa a utilização de smartphones para determinações colorimétricas baseadas em imagens digitais a fim de se identificar e quantificar cocaína e alguns dos principais adulterantes presentes em amostras apreendidas de forma rápida, simples e portátil. Determinações colorimétricas quantitativas para a cocaína e três adulterantes foram avaliadas, sendo eles o levamisol, procaína e cafeína. As curvas analíticas construídas com base nos valores de RGB obtidos proporcionaram coeficientes de determinação adequados (R2 >0,99) para as faixas de concentração de analito avaliadas, sendo estimados os limites de detecção de 29,4, 2,47, 1,51 e 43,10 mg L-1 , para cocaína, procaína, levamisol e cafeína, respectivamente. Amostras sintéticas contendo os adulterantes com teores conhecidos e semelhantes aos encontrados em amostras apreendidas foram preparadas e utilizadas para se avaliar a exatidão dos métodos propostos. Para a determinação dos teores de cocaína, o teste de scott modificado levou à erros relativos entre 0,04 e 19,65 % em relação aos valores de referência indicando uma acurácia adequada do método, principalmente como uma ferramenta de avaliação preliminar para os teores da droga. As determinações de cafeína e levamisol basearam-se nas reações colorimétricas com cloridrato de 3-metil-2-benzotiazolinona hidrazona, MBTH, e alaranjado de metila, respectivamente, levando a resultados insatisfatórios devido à resposta interferente da cocaína nestes métodos, que, mesmo com uso de ferramentas quimiométricas, não foram minimizadas. A determinação de procaína a partir da sua reação com ácido cromotrópico proporcionou erros relativos de 8,35 a 22,43 % em relação aos valores nominais das amostras, indicando a possibilidade de uso do método para sua determinação sem a necessidade de separações analíticas prévias. Adicionalmente, para as determinações de cocaína e procaína, conduziu-se as detecções empregando-se um espectrofotômetro comercial e um fotômetro a base de diodo emissor de luz (LED) como forma de avaliar o desempenho da proposta baseada em imagens digitais frente a uma instrumentação bem estabelecida, além de avaliar a possibilidade de uso de uma alternativa de baixo custo para as medidas. Ao nível de 95% de confiança, não foram observadas diferenças significativas entre os resultados obtidos com o sistema comercial e o baseado em imagens digitais para algumas amostras estudadas indicando a ausência de erros sistemáticos inerentes ao método. Pode-se concluir que a proposta é uma boa alternativa para a determinação preliminar dos teores de cocaína e procaína em amostras de drogas e que a sua utilização para outros adulterantes necessitará de estudos que permitam a eliminação de interferências.
Cocaine as one of the most popular illicit drugs in the world, turns the possibility to correlate drug samples seized and to obtain data regarding their sources of production and trafficking routes into factors of extreme importance for police investigation. Thus, it is important to obtain a chemical profile of the drug, which identifies and quantifies the cocaine, adulterants and diluents present, which are substances added to the drug in order to increase profit or intensify its effects. To this end, the recommended technique is gas chromatography, a technique of high cost and time of analysis, labor sample preparation, and not allow in situ analysis. Considering these aspects, the present project aims at the use of smartphones for colorimetric determinations based on digital images in order to identify and quantify cocaine and some of the main adulterants present in samples seized in a fast, simple and portable way. Quantitative colorimetric determinations for cocaine and three adulterants were evaluated, levamisole, procaine and caffeine. Analytical curves constructed on the basis of the obtained RGB values provided adequate determination coefficients (R² > 0.99) for the analyzed analyte concentration ranges, with detection limits of 29.4, 2.47, 1.51 and 43,10 mg L-1 , for cocaine, procaine, levamisole and caffeine, respectively. Synthetic samples containing the adulterants with known contents and similar to those found in seized samples were prepared and used to evaluate the accuracy of the proposed methods. For the determination of cocaine levels, the modified scott test led to relative errors between 0.04 and 19.65% over the reference values indicating an adequate accuracy of the method, mainly as a preliminary assessment tool for the levels of cocaine. The determinations of caffeine and levamisole were based on the colorimetric reactions with 3-methyl-2-benzothiazolinone hydrochloride hydrazone, MBTH, and metil orange, respectively, leading to unsatisfactory results due to the interfering response of cocaine in these methods, which, even with use of chemometric tools, were not minimized. The determination of procaine based on the reaction with chromotropic acid, gave relative errors of 8.35 to 22.43% in relation to the pre-established values in the samples, indicating the possibility of using the method for its determination without the need for previous analytical separations. Additionally, for the determinations of cocaine and procaine, the detections were conducted using a commercial spectrophotometer and a photometer based on light emitting diode (LED) as a way of evaluating the performance of the proposal based on digital images against an instrumentation Well-established, in addition to evaluating the possibility of using a low cost alternative to the measures. At the 95% confidence level, no significant differences were observed between the results obtained with the commercial system and the one based on digital images some samples studied, indicating a similar performance of the measurements. It can be concluded that the proposal is a good alternative for the preliminary determination of the levels of cocaine and procaine in drug samples and that its use for other adulterants will require studies that allow the elimination of interference.

A adulteração do leite é uma prática comum e que preocupa as agências reguladoras, indústrias e a população. Apesar da crescente necessidade de identificação desse tipo de fraude, os métodos empregados geralmente possuem baixo rendimento analítico e alta dependência de mão-de-obra. Sendo assim, objetivou-se desenvolver calibração e validação para monitoramento de adulteração em leite cru, utilizando equipamento compacto (MilkoScan FT1), que adota a espectroscopia de infravermelho com transformada de Fourier (FTIR). Ademais, objetivou-se comparar a acurácia na detecção de adulterantes do método de FTIR com os testes físico-químicos tradicionais adotados pela indústria no controle de qualidade do leite. Para isso, cerca de 2500 amostras de leite foram utilizadas para construção do espectro de referência e 1625 amostras foram empregadas para validar a identificação de cinco dos principais adulterantes (em três diferentes concentrações cada) encontrados em leite: (1) amido de milho; (2) bicarbonato de sódio; (3) citrato de sódio; (4) formaldeído; (5) sacarose, além da adição de dois níveis de água ou soro de leite. Após esta etapa, 650 amostras foram preparadas para comparação dos métodos, utilizando os mesmos adulterantes nas mesmas concentrações da etapa anterior. Os resultados demonstraram que as calibrações desenvolvidas expressaram boa capacidade geral de detecção de adulteração, apresentando excelente sensibilidade (84%) e especificidade (100%), principalmente quando comparadas com os testes tradicionais, visto que o método de FTIR apresentou capacidade de identificação de adulterantes em leite cru superior aos métodos físico-químicos tradicionais, podendo ser utilizado diretamente nas plataformas de recepção do leite nos laticínios, melhorando os processos industriais de detecção de adulterantes.
Milk adulteration is a common practice that concerns regulatory agencies, industry and the population. Despite the growing need for the identification of this type of fraud, the methods employed generally present low performance and high dependency on hand labor. Therefore, this study aimed to calibrate and validate a compact equipment (MilkoScan FT1) that adopts a Fourier transform infrared spectroscopy to monitor adulteration in raw milk. Furthermore, this study aimed to compare the accuracy in adulterants detection, of the FTIR method with that of conventional physico-chemical tests, adopted by the dairy industry in milk quality control. For this, almost 2500 milk samples were used for reference spectrum construction and 1625 samples were used in the validation process, to identification of the following five main adulterants (at three different concentrations) found in milk: (1) cornstarch, (2) sodium bicarbonate, (3) sodium citrate, (4) formaldehyde, and (5) saccharose, plus the additions of two levels of water or whey. After this step, 650 samples were prepared to compare the methods, using the same adulterants at the same concentrations of the previous step. The results revealed that the developed calibration demonstrated a good adulteration detection ability with excellent sensitivity (84%) and specificity (100%), mainly when compared with traditional tests. The FTIR method showed capacity of adulterants identification higher than that presented by physico-chemical methods, which proves its ability to be used directly in the milk reception platforms in dairy industry, improving industrial processes of adulterants detection.

Submitted by Jorge Silva (jorgelmsilva@ufrrj.br) on 2017-09-28T18:08:52Z No. of bitstreams: 1 2017 - V?ctor de Carvalho Martins.pdf: 5700751 bytes, checksum: 07961d0468442fc22ade82dc8b861206 (MD5)
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CAPES
Coffee is one of the most appreciated beverages in the world, due to its sensorial and functional characteristics. Currently, as the main producer and exporter in the world, it is estimated that in Brazil there will be growth in the domestic market in the coming years, in which roasted and ground coffee predominates. This type of product is impaired mainly by adulteration with other plant materials. The implementation of more sensitive and selective methods is necessary to ensure higher quality products. The objective of this dissertation was to develop a method to detect adulterants (rice, barley, corn and soybeans) in commercial samples of coffee, through the oligosaccharides profile and the techniques of Ultra Performance Liquid Chromatography coupled to Tandem Mass Spectrometry (UPLC-MS-MS). From standard solutions of five possible chemical markers (maltose, raffinose, stachyose, 1-kestose and nystose) in aqueous solution of 0.1% formic acid and acetonitrile (1:1) and in Milli-Q grade water, the operational parameters of the mass spectrometer and the chromatographic conditions were tested. The adopted chromatographic method consisted of chromatography by hydrophilic interaction and gradient elution of acetonitrile and aqueous solution of formic acid 0.1%, with injector temperature 20?C; injection volume 1.0 ?L; flow rate 0.5 mL/min; column temperature 35?C; and run time 10 min. For the spectrometric method, electrospray ionization was used in positive mode, with capillary, sampling and extraction cones voltages of, respectively, 3.0 kV, 50 V, 2.0 V; sample temperature 80?C; cone gas flow 40 L/h; temperature and flow of desolvation gas 300?C and 500 L/h; and collision energies of at least 15.0 V. The results indicated a good repeatability among analysis of standard solution, with selectivity by the real-time monitoring of the sequential mass spectra. Extracts from the previously roasted samples of adulterants were analyzed. It was confirmed the effect of temperature as an interfering factor for the detection of oligosaccharides. Only soybean presented as potential chemical markers raffinose and stachyose. For the grains of rice, barley and corn, another precursor ion of the same mass/charge ratio (m/z) of raffinose and 1-kestose was observed. It has been identified as maltotriose, in which isomeric differentiation can be ensured by different fragmentation profiles. The study of the mass spectra still ratified these results by the observation of a greater susceptibility of the rupture of ?, ? (1?2) bonds and the formation of ions fragments with saturated cyclic chain. However, through the use of the methodology, the chemical markers were not detected in the commercial samples of coffee, even with the samples previously disapproved for the presence of barley. The optimization of the extraction method or the inclusion of sodiated solvents may be necessary and, therefore, new experiments should still be performed, ensuring the applicability of the method by UPLC-MS-MS.
O caf? consiste em uma das bebidas mais apreciadas em todo o mundo, devido a suas caracter?sticas sensoriais e funcionais. Atualmente como principal produtor e exportador no mundo, estima-se que no Brasil haja crescimento no mercado interno para os pr?ximos anos, em que se predomina o caf? torrado e mo?do. Este tipo de produto ? prejudicado principalmente pela pr?tica de adultera??o com outras mat?rias-primas vegetais. A implementa??o de m?todos de maior sensibilidade e seletividade ? necess?ria para a garantia de produtos de maior qualidade. O objetivo desta disserta??o foi desenvolver um m?todo de detec??o de adulterantes (arroz, cevada, milho e soja) em amostras comerciais de caf?, atrav?s do perfil de oligossacar?deos e das t?cnicas de Cromatografia L?quida de Ultra Efici?ncia acoplada a Espectrometria de Massas Sequencial (CLUE-EM-EM). A partir de solu??es padr?o de cinco poss?veis marcadores qu?micos (maltose, rafinose, estaquiose, 1-kestose e nistose) em solvente solu??o aquosa de ?cido f?rmico a 0,1% e acetonitrila (1:1) e em ?gua grau Milli-Q, foram testados os par?metros operacionais do espectr?metro de massas e as condi??es cromatogr?ficas. O m?todo cromatogr?fico adotado consistiu no uso da cromatografia por intera??o hidrof?lica e elui??o em gradiente de acetonitrila e solu??o aquosa de ?cido f?rmico, com as condi??es de temperatura do injetor de 20?C; volume de inje??o de 1,0 ?L; fluxo de 0,5 mL/min; temperatura da coluna de 35?C; e tempo de corrida de 10 min. Para o m?todo espectrom?trico, empregou-se a ioniza??o por eletrospray em modo positivo, com voltagem no capilar, nos cones de amostragem e de extra??o de, respectivamente, 3,0 kV, 50 V, 2,0 V; temperatura da amostra de 80?C; fluxo do g?s do cone de 40 L/h; temperatura e fluxo do g?s de dessolvata??o de 300?C e 500 L/h; e energias de colis?o de, no m?nimo, 15,0 V. Os resultados indicaram uma boa repetitividade entre as an?lises das solu??es padr?o, com a seletividade sendo garantida pelo monitoramento em tempo real dos espectros de massas sequencial. Extratos das amostras previamente torradas dos adulterantes foram analisados, sendo confirmado o efeito da temperatura como um fator interferente para a detec??o dos oligossacar?deos. Apenas a soja apresentou como potenciais marcadores qu?micos rafinose e estaquiose. Para os gr?os de arroz, cevada e milho, foi observado outro ?on precursor de mesma rela??o massa/carga (m/z) da rafinose e da 1-kestose. Este foi identificado como a maltotriose, em que a diferencia??o isom?rica pode ser garantida pelos diferentes perfis de fragmenta??o. O estudo dos espectros de massas ainda ratificou estes resultados pela observa??o de uma maior facilidade da ruptura das liga??es ?,? (1?2) e de forma??o de ?ons fragmentos de cadeia c?clica saturada. Por?m, atrav?s do emprego da metodologia, n?o foram detectados os marcadores qu?micos nas amostras comerciais de caf? analisadas, mesmo com as amostras previamente reprovadas pela presen?a de cevada. A otimiza??o do m?todo de extra??o ou a inclus?o de solventes sodiados podem ser necess?rios e, por tal raz?o, novos experimentos ainda devem ser realizados, garantindo a aplicabilidade do m?todo por CLUE-EM-EM.

Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Instituto de Química, Programa de Pós-Graduação em Tecnologia Química e Biológica, 2016.
Submitted by Fernanda Percia França (fernandafranca@bce.unb.br) on 2016-09-02T17:05:30Z No. of bitstreams: 1 2016_AdrianneFontineledaSilva.pdf: 1922149 bytes, checksum: 6ff434ce7bb00c61614d8f99d05d66b5 (MD5)
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O consumo de cocaína é relatado há mais de 2500 anos, porém ao longo do tempo se tornaram evidentes os danos causados por essa substância à sociedade em geral. Atualmente, a cocaína é classificada como uma droga ilícita e, por isso, estudos que deem suporte aos órgãos responsáveis pela repressão ao tráfico de drogas, como a Polícia Federal (PF), em especial à área de inteligência policial, são de extrema relevância. Frequentemente, a cocaína comercializada não se encontra em sua forma pura, mas adicionada de adulterantes e diluentes. Para a análise de amostras apreendidas, o método de referência utilizado é baseado em cromatografia gasosa, cuja sensibilidade e seletividade são indiscutíveis. Entretanto, sua aplicação envolve destruição parcial ou total da amostra, consumo de solventes tóxicos, longo período de análise e treinamento operacional. Com isso, o interesse pelo uso de espectroscopia vibracional tem aumentado. Desse modo, o objetivo deste trabalho é o desenvolvimento de uma metodologia de análise para amostras de cocaína adulterada e diluída empregando a Espectroscopia de Infravermelho com Reflectância Total Atenuada (ATR-FTIR) associada à Resolução Multivariada de Curvas com Mínimos Quadrados Alternados (MCR-ALS). Foram analisados 11 compostos puros, sendo 6 adulterantes, 3 diluentes e 2 formas de cocaína (base livre e cloridrato), 55 misturas preparadas em laboratório de acordo com um planejamento experimental e 20 amostras reais para a etapa de calibração. Para a validação, foram analisadas 717 amostras reais. Os resultados obtidos foram satisfatórios, demonstrando que o método proposto possui um grande potencial na classificação da forma química de cocaína e na discriminação de adulterantes e cocaína em amostras reais, fornecendo uma estimativa da concentração. ________________________________________________________________________________________________ ABSTRACT
Cocaine use has been reported for more than 2500 years, but along this period of time its damage to society in general became evident. Nowadays, cocaine is classified as an illicit drug and therefore studies which give support to drug repression institutions, such as the Brazilian Federal Police (BFP), particularly in the area of police intelligence are very relevant. Often, trafficked cocaine is not traded in its pure form, but mixed with adulterants and diluents. In the analysis of seized samples, the reference method is based on gas chromatograph whose sensitivity and selectivity are indisputable. However, its application involves partial or total destruction of the sample, use of toxic solvents, long period of analysis and operational training. Thus, the interest in the use of vibrational spectroscopy has increased. This work aims at developing a methodology for both adulterated and diluted cocaine samples employing Atenuated Total Reflectance Fourier Transform Infrared Spectroscopy (ATR-FTIR) associated with Multivariate Curve Resolution with Alternating Least-Squares (MCR-ALS). A total of 6 adulterants, 3 diluents and 2 forms of cocaine (base and hydrochloride), 55 mixtures prepared in the laboratory according to a factorial design and 20 seized samples for calibration step have been studied. For validation purposes 717 seized samples were analyzed. The results proved to be satisfactory, showing that the proposed method has a great potential in the classification of the chemical form of cocaine, discrimination of adulterants and cocaine in seized samples, as well as providing an estimate for their concentration.

The popularity of herbal medicines as adjuncts in the treatment of diabetes mellitus, has increased in recent years. However, recent studies have demonstrated the presence of synthetic drugs, as adulterants, in these formulations, what can cause serious problems to the health of the patient, since interactions and pharmacological effects are unpredictable. This work describes the development of a method for the simultaneous determination of metformin, glibenclamide, gliclazide and chlorpropamide employing capillary zone electrophoresis (CZE) with contactless conductivity detection (C4D). The work was carried out using a capillary electrophoresis system built in the laboratory. The optimized conditions for the determination of adulterants in herbal medicines by CZE-C4D were the following: 20 mmol L-1 sodium acetate at pH 10.0 as working electrolyte, separation potential of -15kV, separation temperature of 25ºC, indirect conductivity detection operating at 400 kHz and amplitude wave of 2 Vpp, hydrodynamic injection by gravity (20 cm left side elevation for 60 s). The method was validated and applied to the determination of hypoglycemics in pharmaceutical formulations commercialized by compounding pharmacies in Brazil. The method allows the identification of adulterants and its quantification from 0.24 mg to metformin, 0.15 mg to glibenclamide, 0.33 mg to gliclazide and 0.24 mg to chlorpropamide.
A popularidade dos fitoterápicos como coadjuvantes no tratamento do diabetes mellitus, tem aumentado nos últimos anos. No entanto, trabalhos recentes têm demonstrado a presença de fármacos sintéticos, como adulterantes, nestas formulações, o que pode causar sérios problemas à saúde do paciente, uma vez que interações e efeitos farmacológicos são imprevisíveis. Este trabalho descreve o desenvolvimento de um método para a determinação simultânea de metformina, glibenclamida, gliclazida e clorpropamida, empregando eletroforese capilar de zona (CZE) com detecção condutométrica sem contato (C4D), usando um sistema de eletroforese capilar construído em laboratório. As condições otimizadas para a determinação de adulterantes em fitoterápicos por CZE-C4D foram: eletrólito de trabalho acetato de sódio 20 mmol L-1 (pH 10,0); potencial de separação - 15 kV; temperatura de 25ºC; detecção indireta operando em 400kHz e amplitude de onda de 2vpp; e injeção por gravidade de 20 cm por 60 s. O método foi validado e aplicado para a avaliação de hipoglicemiantes em formulações herbáreas comercializadas por farmácias no mercado brasileiro. O método permite a identificação dos adulterantes e sua quantificação a partir de 0,24 mg para a metformina, 0,15 mg para a glibenclamida, 0,33 mg para a gliclazida e 0,24 mg para a clorpropamida.

The adulteration of phytotherapic formulations has been increasing considerably in the recent years in several countries, by the fact that there is not an established efficient monitoring for the control of the manipulation and commercialization of the so called natural medicines . As the possibility of adulteration is relatively wide in terms of compound classes, the need of analytical methods with good sensitivity and selectivity, which are able to identify and quantify simultaneously more than one pharmaceutical in the same phytotherapic formulation, is very important. Considering the well known effects of these adulterants and its use and abuse in the formulations for weigh loss, two separations methods were developed in this study to enable the study of benzodiazepines alprazolam, clonazepam, chlordiazepoxide, diazepam, flurazepam, lorazepam, medazepam and midazolam as possible adulterants in phytotherapic formulations. For the electrophoretic method the optimized conditions were: buffer phosphate 100 mM, 15% acetonitrile (pH 2,0) as an electrolyte; fused silica capillary coated with a 60 cm layer of polymida (9,5 cm to the detector window) with 75 Um of internal diameter, operating at 25 °C; 15 kV of applied voltage, UV detection at 200 nm and anodic hydrodynamic injection for 2 seconds with a pressure of 30 mbar. The chromatographic method was optimized as the following conditions: eluent acetonitrile: water 40:60 (v / v) (pH 4,0) at flow 0,5 mL/min, UV detection at 230 nm and injection of 20 μL. The adulteration in these phytotherapic formulations occurs usually with the use of only one pharmaceutical class: a benzodiazepine, a anorexic and a antidepressant. It is not expected to find in the same sample more than one benzodiazepine. Therefore, the eletroforetic and chromatography proposed methods do not have the objective to detect all of benzodiazepines together in a same sample, but rather to promote the individual identification of all in a sample. The RP-HPLC method was validated for the determination of these benzodiazepines and applied for the determination of the adulterants in phytotherapic formulations used in the treatment of obesity, which have been commercialized as natural medicines by Brazilian pharmacies. The recovery experiments promoted recoveries values higher than 84,25 % for all the analyzed adulterants. The developed methods introduced high sensitivity, analytical precision, low cost and rapid analysis, confirming the applicability of the methods as an alternative for the control and monitoring of abuse use of these pharmaceuticals in phytotherapic formulations passible of adulteration.
A adulteração de formulações fitoterápicas tem aumentado consideravelmente nos últimos anos em alguns países, pelo fato de que ainda não há uma fiscalização eficiente estabelecida para o controle da manipulação e comercialização dos chamados medicamentos naturais . Como a possibilidade de adulteração é relativamente ampla em termos de classes de compostos, surge assim, a necessidade de métodos analíticos de boa seletividade e sensibilidade, capazes de identificar e quantificar simultaneamente mais de um fármaco na mesma formulação fitoterápica. Sabendo-se dos efeitos indesejados que esses adulterantes podem causar, além da necessidade de alertar a sociedade sobre os perigos do uso e abuso desses adulterantes nas formulações para emagrecimento, desenvolveu-se neste trabalho dois métodos de separação, para possibilitar o estudo da presença dos benzodiazepínicos alprazolam, clonazepam, clordiazepóxido, diazepam, flurazepam, lorazepam, medazepam e midazolam como possíveis adulterantes em produtos fitoterápicos: eletroforese capilar de zona (CZE) e cromatografia líquida de alta eficiência por fase reversa (RP-HPLC). Para o método eletroforético as condições otimizadas foram: eletrólito de trabalho tampão fosfato 100 mM, 15% acetonitrila (pH 2,0); capilar de sílica fundida revestido de poliimida de 60 cm de comprimento (com 9,5 cm da janela do detector) com diâmetro interno de 75 Um, operando a 25°C; voltagem aplicada de 15 kV; detecção UV em 200 nm e injeção hidrodinâmica anódica durante 2 segundos com pressão de 30 mBar. O método cromatográfico foi otimizado na seguinte condição: eluente acetonitrila:água 40:60 (v/v) (pH 4,0) em fluxo 0,5 mL/min; detecção UV em 230 nm e injeção de 20 μL. As adulterações nestas formulações fitoterápicas ocorrem, geralmente, com o uso de somente uma classe de fármacos: um benzodiazepínico, um anorexígeno e um antidepressivo. Não se espera encontrar em uma mesma amostra mais de um benzodiazepínico, portanto, os métodos eletroforéticos e cromatográficos propostos não têm como objetivo detectar todos os benzodiazepínicos juntos em uma mesma amostra e sim, promover a identificação individual de todos em uma amostra. O método de RP-HPLC foi validado para a determinação desses benzodiazepínicos e empregado na análise de formulações fitoterápicas utilizadas no tratamento da obesidade, as quais são comercializadas como medicamentos naturais por farmácias de manipulação brasileiras. Os ensaios de recuperação realizados promoveram recuperações acima de 84,25 % para todas as espécies de adulterantes analisadas. Os métodos desenvolvidos apresentaram alta sensibilidade, precisão analítica, baixo custo e análises rápidas, comprovando a aplicabilidade dos mesmos como uma alternativa para o controle e fiscalização do uso abusivo destes fármacos presentes em formulações fitoterápicas passíveis de adulteração.

Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Instituto de Química, 2009.
Texto parcialmente liberado pelo autor (resumo e abstract).
Submitted by Larissa Ferreira dos Angelos (ferreirangelos@gmail.com) on 2010-04-06T16:33:31Z No. of bitstreams: 1 2009_LuizFilipePaivaBrandao_resumo_e_abstract.pdf: 30771 bytes, checksum: c68b40cff07221223a94f425ec90065f (MD5)
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Atualmente a legislação brasileira estabelece a adição compulsória do biodiesel a todo óleo diesel comercializado no país em proporção percentual definida, ficando proibida a adição de qualquer produto que não se enquadre na definição do biodiesel. Em alguns casos, óleos e gorduras (in natura) são indevidamente utilizados para tal finalidade, principalmente em razão de seu menor custo em relação ao biodiesel. No Brasil, a situação é ainda mais crítica, já que o país é um dos maiores produtores mundiais de oleaginosas, especialmente a soja, além de possuir uma extensa malha modal rodoviária dependente do diesel. Diante desta realidade, meios de controle da qualidade do óleo diesel têm se tornado cada vez mais necessário. Este estudo propõe uma metodologia de detecção, identificação e quantificação de triacilglicerídeos em óleo diesel (um indicador inequívoco da presença de óleos e gorduras não transesterificados) por cromatografia líquida de alta eficiência em fase reversa com detecção UV em 205 nm associada a métodos multivariados. Para tanto, seis diferentes tipos de óleos e gorduras foram testados (soja, fritura, milho, algodão, dendê e babaçu) e dois métodos foram construídos: o primeiro, baseado na análise de componentes principais (PCA), classificação por vizinho mais próximo (KNN) e regressão univariada, foi empregado para amostras adulteradas com um único tipo de óleo ou gordura; o segundo utilizou a regressão por mínimos quadrados parciais (PLS) para os casos em que os adulterantes são misturas de até três tipos de óleos ou gorduras. No primeiro método, as técnicas de PCA e KNN permitiram classificar corretamente 17 das 18 amostras de validação quanto ao tipo de óleo ou gordura presente. As concentrações estimadas para os adulterantes apresentaram boa concordância com os valores de referência, com erros médios de previsão (RMSEP) variando entre 0,10 e 0,22 % (v/v). O método PLS mostrou-se eficiente na quantificação de misturas de até três tipos de óleo e gorduras, sendo obtidos RMSEP entre 0,08 e 0,27 % v/v, precisão média entre 0,07 e 0,32 % v/v e concentração mínima detectável entre 0,23 e 0,81 % v/v dependendo do tipo de óleo ou gordura determinada na mistura. _______________________________________________________________________________________ ABSTRACT
Currently, Brazilian law establishes the compulsory addition of biodiesel to all diesel fuel sold in the country in a defined percentage and prohibits the addition of any product that does not fit the definition of biodiesel. In some instances, oils and fats (in natura) are being misused for this purpose, mainly due to its lower cost compared to biodiesel. In Brazil, the situation is even more critical seen that the country is one of the largest producers of oleaginous products in the world, especially soybean, and has an extensive road network dependent on diesel. Given this reality, alternatives to control the quality of diesel have become increasingly necessary. This study proposes a methodology for detection, identification and quantification of triacylglycerides on diesel (an unambiguous indicator of the presence of oils and fats non-transesterificated) by high performance liquid chromatography in reverse phase with UV detection at 205 nm associated with multivariate methods. For this purpose, six different types of oils and fats were tested (soybean, frying oil, corn, cotton, palm oil and babassu) and two methods were constructed: first, based on principal component analysis (PCA), nearest neighbor classification (KNN) and univariate regression, being used for samples adulterated with a single type of oil or fat; the second, used the partial least square regression (PLS) for cases where the adulterants are mixtures of up to three types of oils or fats. In the first method, the techniques of PCA and KNN correctly classified 17 out of 18 samples for validation on the type of oil or fat present. The concentrations estimated for adulterants showed good agreement with the reference values, with mean errors of prediction (RMSEP) ranging between 0.10 and 0.22 % (v/v). The PLS method was efficient in the quantification of mixtures of up to three types of oils and fats, with RMSEP being obtained between 0.08 and 0.27 % (v/v), mean precision between 0.07 and 0.32 % (v/v) and minimum detectable concentration between 0.23 and 0.81 % (v/v) depending on the type of oil or fat in the mixture determined.

Fundação de Amparo a Pesquisa do Estado de Minas Gerais
In this work, the technique of infrared spectroscopy coupled with Eastern methods of Multivariate Calibration Partial Least Squares (PLS) and Partial Least Squares Interval (iPLS) was applied in order to develop methodology capable of quantifying adulterations oil and alcohols in biodiesels Soy and residual oil and its blends with diesel , and to quantify adulterations residual oil lubricant automotive (RAL) in commercial samples of S-10 diesel at filling stations distributed in Brazil by Petrobras S.A. Most multivariate calibration models with variable selection generated by iPLS presented information gain, decrease in the number of latent variables and lower error values when compared to global PLS models. All models constructed showed values of acceptable errors with Medium Error below 4.5%, while the maximum accepted value, determined by current standards is 10%. Thus, the proposed methodologies can be applied in quality control of these biodiesels and their blends with diesel as it were analytically validated by calculating Figures of Merit.
Neste trabalho, a técnica de Espectroscopia no Infravermelho Médio aliada aos métodos de Calibração Multivariada por Quadrados Mínimos Parciais (PLS) e Quadrados Mínimos Parciais por Intervalos (iPLS) foi aplicada, visando desenvolver metodologia capaz de quantificar adulterações por óleo e alcoóis em Biodieseis de Soja e óleo residual e suas misturas com diesel, assim como quantificar adulterações por óleo lubrificante automotivo residual (OLAR) em amostras comerciais de diesel S-10 distribuído em postos de abastecimento no Brasil por Petrobrás S.A. A maioria dos modelos de calibração multivariada com seleção de variáveis por iPLS gerados apresentou ganho de informação, diminuição no número de variáveis latentes e menores valores de erros quando comparados aos modelos PLS globais. Todos os modelos construídos apresentaram valores de erros aceitáveis, com Erro Médio inferiores a 4,5%, sendo que o valor aceito máximo, estabelecido por normas vigentes é de 10,0%. Desta forma, as metodologias propostas podem ser aplicadas no controle de qualidade destes biocombustíveis e suas misturas com diesel, uma vez que foram analiticamente validadas através do cálculo de Figuras de Mérito.
Mestre em Química

CAPES/PICDT
Os mecanismos determinantes das propriedades físico-químicas da bebida do café ainda não foram totalmente compreendidos, devido principalmente à complexidade de sua composição. Além disso, é freqüente a presença de adulterantes no pó de café comercial, o que fez com que a ABIC (Associação Brasileira das Indústrias de Torrefação e Moagem de Café) instituísse um selo de qualidade para garantir a pureza do produto. O principal método atualmente utilizado para a detecção de impurezas no café é a microscopia óptica. Esta técnica só pode ser empregada em amostras na forma de pó e tem um limite de resolução acima de 2%. Assim, é de grande importância o desenvolvimento de novos métodos mais precisos e de execução mais rápida para a determinação da presença de tais adulterantes. A espectroscopia de lente térmica (ELT) faz parte de uma família de técnicas fototérmicas que vem cada vez mais mostrando sua potencialidade no estudo das propriedades ópticas e térmicas de materiais transparentes. Esta técnica apresenta alta versatilidade para o estudo de líquidos, é uma metodologia não destrutiva e os experimentos podem ser realizados com rapidez. Neste trabalho, a ELT foi utilizada pela primeira vez como método para determinar as propriedades ópticas e térmicas da bebida do café. Além disso, combinada com a medida do pH e da espectrofotometria esta técnica foi empregada para a detecção de adulterantes na bebida do café. Foram realizadas várias séries de experimentos com a bebida do café puro e com a bebida do café adulterado com 4% em peso de fubá. As concentrações de café puro e café com fubá variaram de 0,04% a 20% em peso. A ELT foi empregada para determinar o valor do parâmetro dn/dT(coeficiente que descreve a variação do índice de refração com a temperatura); a Phmetria foi utilizada para determinar o pH das amostras; enquanto que a espectrofotometria foi empregada para a determinação do espectro de absorbância na região do visível e do coeficiente de absorção óptica das amostras. Os experimentos foram feitos em temperatura ambiente, imediatamente após a obtenção da bebida do café. Os resultados para o comportamento do parâmetro dn/dT obtido a partir da ELT em função da concentração de café puro quanto para a de café com fubá foram descritos através de uma curva com a forma de um pulso invertido, com um mínimo em torno de 0,6 % em peso. Este resultado indica que para as amostras com baixas concentrações, entre 0,04% até 0,6%, ocorre diminuição do valor do coeficiente de temperatura da polarizabilidade eletrônica (ϕ), como consequência da possível quebra dos agregados moleculares da água durante o processo de percolação da mesma através do pó do café. Para concentrações entre 0,6% até 20% os valores de dn/dT apresentaram uma taxa de variação semelhante a uma exponencial crescente, em que a saturação ocorreu para concentrações em torno de 6%, indicando que o valor de ϕ aumentou neste intervalo de concentração. Nas medidas de pH, observou-se também que a forma da curva de pH em função da concentração de café apresentou um comportamento semelhante a um pulso invertido, com o menor valor deste parâmetro em torno de 0,6 % em peso de café. Isto mostra que para a região de baixa concentração de café, a amostra apresenta uma maior quantidade de cargas livres, provavelmente devido à quebra dos agregados moleculares de água ocorrida durante a preparação da bebida, conforme observado para os resultados de dn/dT. Assim, tanto os resultados obtidos para dn/dT como os de pH são concordantes no que se refere ao aumento de cargas livres na bebida para as concentrações no intervalo entre 0,04% até 0,6% e ao contrário, uma diminuição destas cargas livres à medida que a concentração de café foi sendo aumentada a partir de 0,6%. A partir dos resultados de dn/dT em função da concentração de café, observamos que a taxa de variação do valor deste parâmetro em função da concentração apresenta diferenciação para as amostras de café puro e café com fubá. Os resultados obtidos a partir das medidas de pH também mostraram que a taxa de variação do valor de pH em função da concentração de café foi diferente para as amostras puras, quando comparadas às com fubá. Portanto, os resultados obtidos para o pH são concordantes com os valores de dn/dT determinados a partir da ELT tanto no que se refere a diferenciação entre as amostras da bebida de café puro das com fubá, quanto ao comportamento do número de cargas livres da solução. Esta é a primeira vez que a ELT é empregada para o estudo da bebida do café. Os resultados mostraram que a ELT é uma técnica que pode ser empregada para estudos quantitativos das propriedades ópticas e térmicas do café, sendo portanto um novo método de investigação para este material, que é um dos principais produtos de nossa economia. Quanto à identificação de adulterantes e afora este objetivo específico, os resultados indicam ainda que a referida técnica pode ser igualmente aplicada a outros tipos de alimentos processados, tais como, farináceos, óleos comestíveis, dentre outros.
The mechanism responsible for the physical and chemical properties of coffee’s brews has not been completely understood mainly due to its complex composition. Furthermore, it is frequent the presence of adulterants in the Brazilian commercial coffee, which has motivated the introduction of a seal of quality in order to control the purity of the product The optical microscopy is the main current method used to detect these contaminants. This technique can only be applied in powder samples and it has a limit of detection above 2 wt %. Therefore, the development of new sensitive methods to study both the physical and chemical properties and the presence of adulterants in coffee brews is of outmost importance. Thermal lens spectrometry is a powerful technique to study thermo-optical properties of transparent liquids. This technique is non-destructive, is simple to be used and can provide the absolute values of the thermo-optical properties of transparent samples. The aim of this work was to apply, for the first time, thermal lens spectrometry to determine the thermo-optical properties of the coffee brews. Furthermore, combining TLS with pH and spectrophotometric measurements the presence of adulterants in the coffee brews was detected. The experiments were performed in both pure commercial coffee and coffee mixed with 4 wt % of toasted corn meal. The concentration of the investigated samples, pure and adulterated, varied in the range from 0.04 wt % to 20 wt %. TL measurements provided the values of the parameter dn/dT ( temperature coefficient of the refractive index of the samples). Furthermore, combining this technique with pH and optical absorption coefficient measurements the presence of adulterants in the coffee brew was investigated. The experiments were performed at room temperature, immediately after the preparation of the coffee brew. The dn/dT data plotted against coffee concentration showed that this parameter changed in such a way that it can be described by an inverse pulse curve with a minimum at about 0.6 wt %. These results indicate that in the range of low concentration a decrease in the value of the temperature coefficient of the electronic polarizability (ϕ) occurs as a consequence of the possible dissociation of the water aggregates during the coffee percolation process. For concentrations higher than 0.6 wt %, the increase of dn/dT values can be described by an exponential growth curve saturating around 6 wt %. Likewise, pH data as a function of the coffee concentration can be also described by an inverse pulse curve. This suggests that in the low range concentration the amount of free charges in the solution increases, probably due to the dissociation of the solution’s complexes. Therefore, the results of both dn/dT and pH are in agreement with respect to the changes in the amount of free charges in the sample when the concentration is modified. By performing an exponential fitting in the results of dn/dT we have observed that the value of the parameter, t1, which describes the variation of dn/dT as a function of coffee concentration differs when the results for pure and adulterated coffee are compared. This procedure was also followed in the pH measurements data and again we were able to differentiate pure coffee brew from the adulterated one. Therefore, both results for dn/dT and pH measurements have show that combination of these methods can be successfully applied to detect adulterants in coffee by investigation of the brew. This is the first time that the Thermal lens spectrometry is applied to investigate coffee beverage. The results have shown that this technique can be used to determine the thermo-optical properties of coffee, which is one of the most important product of our economy. Regarding the presence of adulterants, our results indicate that this technique may be an useful method to study other industrialized foods like oils.

The sheer number, continuous emergence, heterogeneity and wide chemical and structural diversity of New Psychoactive Substance (NPS) products are factors being exploited by illicit drug designers to obscure detection of these compounds. Despite the advances in analytical techniques currently used by forensic and toxicological scientists in order to enable the identification of NPS, the lack of a priori knowledge of sample content makes it very challenging to detect an 'unknown' substance. The work presented in this thesis serves as a proof-of-concept by combining similarity studies, Raman spectroscopy and chemometrics, underpinned by robust pre-processing methods for the identification of existing or newly emerging NPS. It demonstrates that the use of Raman spectroscopy, in conjunction with a 'representative' NPS Raman database and chemometric techniques, has the potential for rapidly and non-destructively classifying NPS according to their chemical scaffolds. The work also demonstrates the potential of indicating the purity in formulations typical of those purchased by end users of the product i.e. 'street-like' mixtures. Five models were developed, and three of these provided an insight into the identification and classification of NPS depending on their purity. These are: the 'NPS and non-NPS/benchtop' model, the 'NPS reference standards/handheld' model and the 'NPS and non-NPS/handheld' model. In the 'NPS and non-NPS/benchtop' model (laser λex = 785 nm), NPS internet samples were projected onto a PCA model derived from a Raman database comprising 'representative' NPSs and cutting agent/ adulterant reference standards. This proved the most successful in suggesting the likely chemical scaffolds for NPS present in samples bought from the internet. In the 'NPS reference standards/handheld' model (laser λex = 1064 nm), NPS reference standards were projected onto a PCA model derived from a Raman database comprising 'representative' NPSs. This was the most successful of the three models with respect to the accurate identification of pure NPS. This model suggested chemical scaffolds in 89% of samples compared to 76% obtained with the benchtop instrument, which generally had higher fluorescent backgrounds. In the 'NPS and non-NPS/handheld' model (laser λex = 1064 nm), NPS internet samples were projected onto a PCA model derived from a Raman database comprising 'representative' NPSs and cutting agent/ adulterant reference standards. This was the most successful in differentiating between NPS internet samples dependent on their purity. In all models, the main challenges for identification of NPS were spectra displaying high fluorescent backgrounds and low purity profiles. The 'first pass' matching identification of NPS internet samples on a handheld platform was improved to ~50% using a laser source of 1064 nm because of a reduction in fluorescence at this wavelength. We outline limitations in using a handheld platform that may have added to problems with appropriate identification of NPS in complex mixtures. However, the developed models enabled the appropriate selection of Raman signals crucial for identification of NPS via data reduction, and the extraction of important patterns from noisy and/or corrupt data. The models constitute a significant contribution in this field with respect to suggesting the likely chemical scaffold of an 'unknown' molecule. This insight may accelerate the screening of newly emerging NPS in complex matrices by assigning them to: a structurally similar known molecule (supercluster/ cluster); or a substance from the same EMCDDA/EDND class of known compounds. Critical challenges in instrumentation, chemometrics, and the complexity of samples have been identified and described. As a result, future work should focus on: optimising the pre-processing of Raman data collected with a handheld platform and a 1064 nm laser λex; and optimising the 'representative' database by including other properties and descriptors of existing NPS.

In this work, electrospray ionization mass spectrometry (ESI-MS), with chemometric approaches, were used to typify olive oils (extra virgin and pure) and other vegetable oils (soybean, corn, canola, sunflower). Furthermore, the detection and determination of the adulterant content in counterfeit samples of extra virgin olive oil, adulterated by the addition of such vegetable oils (including pure olive oil), were also performed. Hence, exploratory analysis techniques (such as principal component analysis, PCA, and hierarchical clustering analysis, HCA), applied to set of the ESI(-)-MS and ESI(+)-MS (mass spectra in the negative and positive ion modes, respectively) data allowed an unequivocal distinction between such vegetable and olive oils. Furthermore, the differentiation between extra virgin and pure olive oils was also successfully achieved after treatment of the ESI(+)-MS data by PCA and HCA approaches. Extra virgin olive oils were adulterated by addition of each vegetable oils (soybean, corn, canola, sunflower) or pure olive oil, in proportions varying from 1 to 20% w/w with increments of 1% w/w (hence, a total of 20 samples were prepared for each adulterant oil). The ESI(-)-MS and ESI(+)-MS of the counterfeit and authentic extra virgin olive oil samples were treated by the PCA and HCA methodologies and an unambiguous fraud detection (even at levels as low as 1% w/w) was achieved. Finally, one sample of a commercial extra virgin olive oil was adulterated with increasing proportions of a given soybean oil (from 0.5% m/m to 20% m/m with increments of 0.5% m/m, a total of 40 samples). The application of multivariate calibration (via the partial least square regression, PLS) to the ESI(-)-MS e ESI(+)-MS data allowed the construction of models that presented excellent performance, with RMSEC (root mean square error of calibration) and RMSEP (root mean square error of prediction) values lower than the ones described in similar works reported in literature.
Neste trabalho, a espectrometria de massas com ionização electrospray (ESIMS), em conjunto com técnicas quimiométricas, foram usadas para caracterizar azeites de oliva (extra virgem e puro) e óleos vegetais (soja, milho, girassol, canola), bem como detectar e quantificar adulterações de azeite de oliva extra virgem pela adição dos outros óleos vegetais (incluindo o azeite de oliva puro). Deste modo, técnicas de análise exploratória (análise de componentes principais, PCA, e análise de agrupamentos hierárquicos, HCA), aplicadas aos dados dos ESI(-)-MS e ESI(+)-MS (espectros de massas nos modos negativo e positivo, respectivamente) das amostras permitiram a distinção inequívoca de cada um dos óleos vegetais e azeites de oliva. Além disso, a diferenciação entre os azeites de oliva extra virgem e puro também foi realizada com sucesso, a partir do tratamento dos dados dos ESI(+)-MS por PCA e HCA. Amostras de azeite de oliva extra virgem foram adulteradas pela adição de um dos óleos vegetais (soja, milho, girassol, canola) ou azeite de oliva puro, em proporções variando entre 1 e 20% m/m, com intervalos de 1% m/m (num total de 20 amostras para cada adulterante). Os dados dos ESI(-)-MS e ESI(+)-MS das amostras adulteradas e dos azeites de oliva extra virgem autênticos, quando tratados por PCA e HCA, permitiram uma inequívoca detecção da fraude (mesmo em níveis tão baixos quanto 1,0% m/m) Finalmente, um azeite de oliva comercial foi adulterado com crescentes proporções de um óleo de soja (de 0,5% m/m a 20% m/m, com intervalos de 0,5% m/m, resultando um total de 40 amostras). A aplicação de calibração multivariada (através da regressão por mínimos quadrados parciais, PLS) aos dados dos ESI(-)-MS e ESI(+)-MS permitiu a construção de modelos que apresentaram excelente concordância entre os valores reais e previstos para o teor de óleo de soja, com erros quadráticos médios de calibração (RMSEC) e previsão (RMSEP) inferiores à metodologias similares descritas na literatura.

A common practice amongst street drug manufacturers and dealers is to combine the illicit drug of abuse they intend to distribute with additional substances. Substances added in an attempt to mimic or enhance the desired effect of the drug of abuse are known as adulterants as opposed to diluents, which are added simply to increase the weight of the product. By definition, an adulterant has a physiological effect on the body and as physiologically active compounds these adulterants may have side effects apart from the drug it is added to. They can be minimal, treatable, or otherwise manageable while others can be worse than those incurred from the drug of abuse itself. Due to varying trends in street drug purity, an effort must be made to understand the effects adulterants and diluents, as well as mixtures thereof, may have on forensic drug analysis. Colorimetric spot test analysis is typically performed using a representative sample of the raw, suspected drug material. These tests are often employed in the lab prior to any attempt to isolate a specific compound or at the scene before an arrest is made. This being the case, the reagents will be exposed to and have the potential to react with anything present in the sample with the drug of abuse. While much work has been done regarding the specificity and cross reactivity of colorimetric spot tests, limited information is available about how mixtures of adulterants may affect the results. This research consists of two parts which approach the common theme of adulterants differently. The first part is a literature based investigation into the pathological side effects of several common drug adulterants. The specific compounds discussed are: levamisole, phenacetin, atropine, and several topical anesthetics (benzocaine, lidocaine, prilocaine, and procaine). A review of articles from the scientific literature was conducted in order to convey what is known in the medical field regarding the effects these compounds can have on the body. The second part of this research was a laboratory based investigation which analyzed the effects of twenty-three common adulterants on two colorimetric spot tests: the Marquis reagent for the presumptive identification of heroin, morphine, amphetamine, methamphetamine, and 3,4-methylenedioxy-N-methamphetamine (MDMA) and the modified Scott test for the presumptive identification of cocaine. This was performed in order to observe the reactivity of these compounds so that a better understanding of the effect their presence can have on the analysis of seized drug samples using these tests could be obtained. The literature review portion of this research revealed that the adulterants levamisole, atropine, phenacetin, and the topical anesthetic adulterants lidocaine, prilocaine, benzocaine, and procaine, can be toxic and have severe, deleterious effects on the body in both chronic and acute exposures. Levamisole stimulates the immune system resulting in the production of self-reactive antibodies that attack neutrophils. This causes an autoimmune disorder that weakens the immune system and causes leukocyte agglutination leading to necrotizing vasculitis. Atropine functions to decrease the parasympathetic tone and increase the sympathetic tone in the body. An overdose can cause anticholinergic toxicity, a syndrome very similar to sympathomimetic toxidrome caused by cocaine overdose. Both are characterized by hypertension, hyperthermia, tachycardia, ataxia, disorientation, and mydriasis. However, they can be distinguished as anticholinergic toxicity causes dry and flush skin and mydriasis which is unreactive to light while sympathomimetic toxidrome causes profuse sweating and mydriasis which is reactive to light. Phenacetin is metabolized to O-ethyl-N-acetyl-p-benzoquinone imine (O-Et-NAPQI), a highly reactive and unstable electrophile. It is capable of covalently binding with proteins and other cellular components, including deoxyribonucleic acid (DNA). This leads to mutagenesis and subsequent tumor generation as well as apoptosis and necrosis of various tissues in the bladder and kidneys. The topical anesthetics have each been associated with the development of methemoglobinemia. This is a condition caused by an increase in the concentration of methemoglobin in the blood. Methemoglobin binds more strongly to oxygen so that it cannot be released to the tissues resulting in oxygen starvation. This was found to be caused by the metabolism of prilocaine and lidocaine to the oxidative compounds O-toluidine and 2,6-xylidine respectively. The cause has not been previously reported for benzocaine or procaine. The laboratory portion of this research revealed the impact several adulterants and their mixtures can have on colorimetric spot tests. Testing with approximately 1 mg of sample material revealed that eight out of the twenty-three adulterants reacted with the Marquis reagent to cause a color change within 15 minutes. Of the ten 3-component mixtures tested, eight resulted in a color change. Of the six five-component mixtures, four resulted in a color change; of the six eight-component mixtures, three resulted in a color change; and of the six ten-component mixtures, five resulted in a color change. Of the color changes observed, none were consistent with the "expected" color change for a presumptively positive result of the Marquis test. Testing with the adulterant diphenhydramine revealed that this compound had a unique and intense reaction with the Marquis reagent. This compound initially reacted by turning the liquid a vibrant yellow-green upon contact with the sample. Prior to 2 minutes, solid red-brown aggregates formed in the liquid and proceeded to increase in size while the reagent solution darkened to a red-black color over the 15 minutes of observation. Mixtures containing diphenhydramine each reacted differently. Solid material did not form in the mixture tests and the color changes observed ranged from light orange to a dark red-orange. In addition, one 3-component mixture containing adulterants which did not cause a color change when tested individually (diltiazem, acetaminophen, and quinine) was observed to cause a light brown color to develop, which darkened over the 15 minutes of observation. The results for the modified Scott test showed that the complexity of this test has made it highly specific for cocaine. None of the individual components or mixtures tested reacted in a manner consistent with a presumptively positive identification for cocaine hydrochloride (HCl) or cocaine base for all three steps. Of the twenty-three adulterants tested, eight of the twenty-three gave a similar result to cocaine base in step 1, however, of these eight, only one (quinine) gave a similar result to cocaine base in step 2, and this adulterant did not react consistently to cocaine base in step 3. The research using the adulterant mixtures revealed that the compounds present in these samples tended to react individually with the modified Scott test reagents. In other words, the results for each mixture appeared as a combination of the individual results for each component. While the results observed for the adulterants and mixtures tested were not consistent with the expected presumptively positive results for the drugs these tests are used to detect, it was concluded that the presence of adulterants in a sample has the potential to affect the results of a colorimetric spot test in a variety of ways. Given that these tests are typically employed on samples of raw suspected drug material, it is important that analysts understand the impact adulterants can have on the interpretation of presumptive drug tests.

Fruit juice concentrates- hard pear, soft pear, fig, prune, raisin, white grape, and pineapple, and sweeteners-invert beet, invert cane, and high fructose corn syrup (HFCS) were characterized by sugar profiles, nonvolatile acid profiles, UV spectral profiles, and mineral content. These fruit juices and sweeteners were also used to adulterate commercial apple juice at levels of 40%, 20%, and 10%. Sugar and nonvolatile acid analyses were performed by HPLC and isotopic carbon analyses were applied to selected samples. Data analysis included the application of Pattern Recognition methods and Chi-square test. Analysis by Pattern Recognition was restricted to sugar profiles because of the availability of an extensive data base on sugar composition of authentic apple juice, the compositional data base for the other components being limited. The "potential adulterants" were clearly distinguished from the cluster of authentic apple juice. Apple juice samples adulterated at 40% were at the perimeter and also distinguishable from the cluster, while the samples adulterated at 20% and 10% were intermingled within the cluster. Pattern Recognition methods were also used for classification of the authentic apple juice data base obtained from Mattick and Moyer (1983). Apple samples were classified by variety and geographical origin. Sucrose, glucose/fructose ratio, and sorbitol were important variables in the separability of the samples. Pattern Recognition methods are effective in classification of authentic juices and show potential as a powerful technique in discriminating between adulterated and authentic apple juice.
Graduation date: 1987

碩士
國立臺灣海洋大學
食品科學系
93
This study focused on the analysis method for adulterant tonic component of tadalafil [the major component of Cialis (commercial name)] in Chinese herbal medicine and food. A simple, reliable, and reproducible high performance liquid chromatography (HPLC) method was used for determination of tadalafil in Chinese herbal medicine and food. The sample was extracted with 95% ethanol. A Supersil ODS column (5 mm, 4.6 × 250 mm) was used as the analytical column. The mobile phase was methanol: water (80:20, v/v). The injection volumn was 10 mL. The flow rate was set at 1.0 mL/min. The detection wavelength was 283 nm. The correlation coefficients of linear calibration curves at both high (100-1000 ppm) and low concentration (10-100 ppm) of tadalafil were greater than 0.999. The recoveries were assessed by spiking 500 mg/g of tadalafil into a commercial matrix. The mean recovery was 109.9% (n = 3), and the standard deviation(SD) is 3.67﹪. The detection limit of the HPLC method is 1.5 ppm for tadalafil. Five solvent systems were used in thin layer chromatography (TLC) for qualitative analyses. There were n-butanol: water: acetic acid = 7:2:1 (v/v); ethyl acetate: ether = 4:1 (v/v); chloroform: ethanol = 9:1 (v/v), chloroform: ethyl acetate = 1:1 (v/v) and ethyl acetate: methanol: ammonia water = 8: 1: 1(v/v). The TLC spot of tadalafil was observed when the plate was exposed at 254 nm. After spraying with H2SO4: ethanol = 1:1 solution and heating, the color of the spot became purple. The maximum absorbance occurred at 283, 221, and 206 nm. A HP-5MS capillary column (crosslinked 5% PH ME siloxane, 0.25 mm i.d. × 30 m length × 0.25 mm df ) was used in a gas chromatography/mass spectrometry system to give the retention time of 38.64 min. and the m/z ratios of 389, 262, and 204 . The mass transition of tadalafil fragment was from the m/z ratio of 390.20 to 268.00 by analyzing with liquid chromatography-tandem mass spectrometry。 The qualitative and quantitative methods established in the study provide easy ways for determination of adulteration of tadalafil in traditional Chinese medicine and food.

Relatório de Estágio de Mestrado em Engenharia Alimentar
Este estágio curricular decorreu na empresa Lactimercados S.A., onde foram acompanhadas várias operações rotineiras, nomeadamente a receção do leite, a pasteurização, adição de culturas lácteas, a moldagem e desmoldagem, os processos de salga e maturação, o acabamento e rotulagem e, finalmente, a expedição dos queijos Bica, Puro de Cabra, Serrano e Minhota. Esta experiência permitiu consolidar alguns dos conceitos teóricos apreendidos, com uma visão mais prática da realidade de uma queijaria, o que contribui para a minha valorização profissional. O queijo é o grupo mais diverso dentro dos lacticínios e é consumido por todo o mundo. Para obter um queijo de qualidade, para além de um processo tecnológico bem definido, é primeiramente definido pela matéria prima utilizada, principalmente o leite. Neste sentido, foi feito um estudo da qualidade do leite, para perceber quais as variações do leite de vaca e cabra, no que diz respeito à composição química (proteína, gordura, relação proteína/gordura, lactose e ESD (extrato seco desengordurado)), aos parâmetros microbiológicos e células somáticas (contagem de células somáticas, contagem de microrganismos totais a 30 °C, contagem de bactérias psicrotróficas e contagem de bactérias do ácido butírico (BAB)), à deteção de adulterantes e indicadores de adulteração (ponto crioscópico, pesquisa de ureia, pesquisa de peróxido de hidrogénio, hipoclorito de sódio, pesquisa de cloreto de sódio e pesquisa de inibidores) e aos indicadores de frescura (temperatura, pH e prova do álcool), bem como avaliar a influência do produtor e região nas características do leite fornecido à empresa Lactimercados S.A., para melhor perceber as potenciais implicações que estas podem ter durante o processo de fabrico de queijo. Das amostras utilizadas para este estudo, verificou-se que em termos de composição química, os valores encontravam-se dentro do recomendado pela legislação, no que respeita aos parâmetros microbiológicos e células somáticas, o valor médio encontra-se dentro do recomendado. No entanto, a contagem de bactérias psicrotróficas e BAB apresentaram valores que podem ser prejudiciais no fabrico de queijo. Em termos de adulterantes, não se evidenciou a presença de nenhum dos testados, com exceção da ureia, que faz parte da composição do leite. Por fim, os valores dos indicadores de frescura, em termos de temperatura e pH, encontravam-se dentro dos parâmetros. Já a prova do álcool apresentou resultados positivos para as duas espécies em algumas amostras. Foram, ainda, observados alguns efeitos significativos da época do ano e produtor nos parâmetros estudados.
This internship was held at Lactimercados S.A., where several routine operations were carried out, such as milk reception, pasteurization, addition of milk cultures, molding and demolding, salting and maturation processes, finishing and labeling and finally the Bica, Puro de Cabra, Serrano and Minhota cheeses expedition. This experience allowed to consolidate some of the theoretical concepts learned, with a more practical point of view of the reality of a cheese factory, which contributes to my professional valorization. Cheese is the most diverse group within dairy products and is consumed all over the world. In order to obtain a quality cheese, in addition to a well-defined technological process, it is first defined by the raw material used, mainly milk. In this sense, a study was carried out on the quality of milk in order to understand cow and goat milk variations in relation to the chemical composition (protein, fat, protein / fat, lactose and SNF (solids-non-fat), microbiological parameters and somatic cells ( somatic cells counting, total microorganisms at 30 ° C count, psychrotrophs count, butyric acid bacteria (BAB) count), detection of milk adulterants and adulterants indicators (freezing point, urea detection, hydrogen peroxide detection and sodium hypochlorite detection), and freshness indicators (temperature, pH and alcohol test), as well as to evaluate the influence of the producer and region on milk characteristics supplied to the company Lactimercados S.A., in order to better understand the potential implications which they might have during the cheesemaking process. From the samples used for this study, it was verified that in terms of chemical composition, the values were within the recommended, regarding the microbiological parameters and somatic cells, the value was within what is allowed by law, however the count of psychrotrophic bacteria and butyric ácid bacteria count, presented values that can be harmful in the manufacture of cheese. In terms of milk adulterants, there was no evidence of any of the tested, except for urea, which is part of milk composition. Finally, the indicators of freshness, in terms of temperature and pH, values were within the parameter, and the alcohol test showed positive results for both specie. It was also observed some significant effects of the time of the year and producer in the parameters studied.

博士
中國醫藥大學
中國藥學暨中藥資源學系博士班
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Studies on the Gamma Radiation Antiseptic Dose of Polygoni Multiflori Radix Gamma radiation is a physical process commonly used for the eradication of microorganisms distributed in food ingredients, medicinal plants and other bioresearches. The aim of this study was to investigate the effect of radiation dosage on the microbial load, chemical compounds and antioxidative characteristics of Polygoni Multiflori Radix (POMU). Ten commercial POMUs were purchased from different herbal markets and treated with 2 kGy, 4 kGy, 6 kGy, 8 kGy and 10 kGy gamma radiation doses to evaluate the microbial burdens of irradiated and unirradiated POMUs. Our results confirmed that 2 kGy was sufficient for the inactivation of enterobacteria; at 4 kGy, mold and yeast counts were obviously reduced; and at 6 kGy, neither yeasts nor fungi were observed any longer. The antioxidative effects and major antioxidant components of 0 kGy, 5 kGy, 10 kGy and 15 kGy irradiated POMU samples were also examined. Our results confirmed that 5 kGy irradiated POMU had both the highest antioxidative activity and lowest value in IC50 of DPPH radical-scavenging activity. The content of total phenols had no statistically significant changes. Therefore gamma irradiation at 8 kGy could be a potential method for decontaminate the microbial load of POMU to prolong shelf life and to improve hygienic quality. Studies on Molecular Identification of Taraxacum formosanum and Distinguishing from Its Adulterants Original identification of medicinal plants is important for quality control. In this study, the internal transcribed spacer 2 (ITS2) nuclear ribosomal DNA served as a DNA barcode and was amplified by allele-specific sequence-primed PCR; this approach was exploited to differentiate Taraxacum formosanum from five related adulterants. Using a set of designed PCR primers, a highly specific 250 bp PCR product of Taraxacum formosanum was successfully amplified by PCR. However, no product was amplified from any of the adulterants. This indicates that our allele specific primers have high specificity and can accurately discriminate Taraxacum formosanum from other 5 adulterant plants. We also established a rapid, sensitive and specific loop-mediated isothermal amplification (LAMP) assay for authenticating Taraxacum formosanum. A set of four specific LAMP primers was designed ba sed on the nucleotide sequence of the internal transcribed spacer 2 (ITS2) nuclear ribosomal DNA (nrDNA) of TF. LAMP amplicons were successfully amplified and detected when genomic of TF was added in the LAMP reaction under isothermal condition (65℃) within 45 min. This specific LAMP primers have high specificity and can accurately discriminate Taraxacum formosanum from other adulterant plants; 1 pg of genomic DNA was determined to be the minimum concentration limit of the LAMP assay.